CN101780279A - Toll-like receptor-3激动剂在制备促进伤口愈合的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种Toll-like receptor-3(TLR3)激动剂在制备促进伤口愈合的药物中的应用。Toll-like receptor-3(TLR3)激动剂能够促进伤口的愈合，可作为促进伤口愈合的药物的活性成份，特别是polyriboinosinic polyribocytidylic acid，其能显著的缩短皮肤或者粘膜伤口的愈合时间，在临床治疗中，无搔痒、红肿热痛或其他不良反应，愈合后无明显瘢痕及皮肤质地改变，愈合质量高。本发明的polyriboinosinic polyribocytidylic acid有望作为正常个体、伤口难愈的个体或整形美容外科的伤口愈合的常规用药。

Description

Toll-like receptor-3激动剂在制备促进伤口愈合的药物中的应用

技术领域：

本发明属于生物技术领域，具体涉及Toll-like receptor-3激动剂在制备促进伤口愈合的药物中的应用。

背景技术：

自有人类即有创伤，虽然随着科技的进步和社会的发展，一些疾病得到控制以至消灭，但引致创伤的因素却有增无减，创伤成为危害健康甚至危及生命的主要原因之一。而且创伤无论严重与否，均有组织缺损和创伤愈合的问题，同时对创伤的医学处理，除了医治有关的全身性反应和并发症外，只有使创伤的伤口或创面愈合，才得以完成或基本完成。因此，如何加快并且高质量地使伤口愈合也就成为了一个最炙手可热的问题。目前促愈研究众多，特别是生长因子备受关注，其强烈的有丝分裂原活性可促进伤口愈合，然而，生长因子也可使胶原分泌旺盛，造成瘢痕过度增生和愈合质量的下降，甚至可能导致胆脂瘤及细胞恶变，因而限制了其在临床的应用。作为一个复杂的生物学过程，创伤愈合的基本过程大致分为三个相互区别而又联系的阶段：①炎症期，此期表现为炎症反应，溶解清除坏死组织；②肉芽组织形成期，此期表现为周围正常组织中的间充质细胞、成纤维细胞以及血管内皮细胞等向伤处迁移、增殖，最终形成肉芽组织；③新生组织改建期，此期表现为成纤维细胞等增生、成熟，基质沉积以及新生组织改造、改建，最终形成纤维性瘢痕组织。整个全过程是一系列不同类型细胞、结构蛋白、生长因子和蛋白激酶等形成网络式交互作用的结果。而创伤后创面局部的炎症反应是创面愈合或组织修复的基础，它有利于创伤的修复；炎症细胞虽不直接参与填充缺损，但它们能清除坏死组织和异物，防止感染发生，还通过分泌细胞因子调控创伤愈合过程，为修复细胞的活动创造条件，调节指导修复过程，没有创面局部的炎症反应就不可能有创伤愈合过程的启动和完成。

感染性难愈伤口，血管炎和天疱疮患者的皮损的反复发作引起的难愈伤口一直是临床治疗上的棘手问题。临床除了全身用药以控制病情外，还常规局部外用金因肽(重组人表皮生长因子外用溶液)以加速愈合，然而收效有限。目前外源性生长因子尽管在临床应用上已初见成效，然而，生长因子也因可使胶原分泌旺盛，造成瘢痕过度增生和愈合质量的下降，甚至可能导致胆脂瘤及细胞恶变的副作用而限制了其在临床的应用。另外，难愈创面受体表达缺乏、变异，以及蛋白酶浓度升高等原因，也影响了生长因子对创面的促愈作用有效发挥。作为一个复杂而连续的生物反应过程，创伤愈合同样是涉及整形外科的重要课题，如何在加快愈合的同时，又能抑制异常结构如病理性瘢痕的形成是困扰外科界的难题。

Polyriboinosinic polyribocytidylic acid是人工合成的双链RNA聚合物。Davies和Rich于1958年最先合成成功。作为一种高分子多聚核苷酸类(Polynucleotides)物质，polyriboinosinicpolyribocytidylic acid是由Polyinosinic acid(图1A)和Polycytidylic acid(图1B)单链根据碱基配对原则组成的双股多核昔酸链。polyriboinosinic polyribocytidylic acid的基本分子式为：(C₁₉H₂₃O₁₄N₉P₂)n，分子量在3-16s之间。其结构式如图1C所示。1967年Field等试验证明，polyriboinosinic polyribocytidylic acid是一种人工合成的干扰素强诱生剂，1969年，中国科学院与有关单位协作研制出新的polyriboinosinic polyribocytidylic acid络合物制剂，即在polyriboinosinic polyribocytidylic acid基础上加入含多胺基正离子的硫酸卡那霉素及Cacl₂，以保护双链结构不被核酸酶快速水解，保持较好的稳定性，使其能够发挥应有的作用。目前临床上polyriboinosinic polyribocytidylic acid已广泛应用于人类医学以治疗一系列病毒性感染疾病。不同病毒对polyriboinosinic polyribocytidylic acid的敏感性不一，其中公认以流感和疮疹病毒最为敏感。polyriboinosinic polyribocytidylic acid对肝炎病毒、艾滋病病毒、结膜炎病毒、口蹄疫病毒、痘苗病毒、脑脊髓炎病毒、脑心肌炎病毒、阿留申病毒和柯萨奇病毒等都有较好的防治效果。试验证明，polyriboinosinic polyribocytidylic acid预防病毒感染的效果较治疗作用更好。随着研究的深入，目前一般认为Polyl:c除了作为高效干扰素诱导剂间接产生抗病毒作用以外，直接的抗病毒作用，同时增强和调节免疫作用，同样是其发挥抗病毒疗效的主要途径。除此之外，已发现的polyriboinosinic polyribocytidylic acid药理学作用还包括抗肿瘤、抗原虫及抗菌作用等。

作为动物体内3型Toll样受体(Toll-like receptor-3，TLR3)的配体，现有实验已报道polyriboinosinic polyribocytidylic acid激活TLR3后可介导机体一系列的免疫反应，如诱导干扰素、肿瘤坏死因子等细胞因子和IL-8、MCP-1或RANTES等趋化因子分泌，促进单核巨噬细胞、NK细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞及树突状细胞等的增殖与成熟等，促进体内抗体的生成。polyriboinosinic polyribocytidylic acid对机体的特异性免疫和非特异性免疫均有很好的促进作用。

而作为人体最大、也是最主要的器官之一，皮肤是机体的天然屏障，具有重要的保护功能。Mikiko Tohya等发现人带状疱疹受损表皮趋化因子MIP-1α表达上调，进一步实验提示polyriboinosinic polyribocytidylic acid可激活人正常表皮层的TLR3通路促进MIP1α分泌而发挥介导表皮天然免疫应答的作用。同样相似实验发现从牛皮癣患者病损处分离的角质层上皮细胞在polyriboinosinic polyribocytidylic acid刺激下可释放一系列促炎细胞因子和趋化因子。新近动物实验发现polyriboinosinic polyribocytidylic acid可刺激人原代培养角质上皮细胞分泌TNFalpha等促炎因子，进一步了证明TLR3通路的激活是小鼠受损皮肤正常免疫应答所必需。

发明内容：

本发明的一个目的是提供Toll-like receptor-3激动剂在制备促进伤口愈合的药物中的应用。

本发明人通过实验证实Toll-like receptor-3激动剂能够促进伤口愈合，因此可以用于制备促进伤口愈合的药物。

所述的Toll-like receptor-3激动剂最好为polyriboinosinic polyribocytidylic acid，其对皮肤或者粘膜伤口疗效最好。

本发明的伤口可以是皮肤、粘膜的溃疡或糜烂引起的伤口；或者由血管炎、糖尿病、天疱疮、褥疮、艾滋病导致伤口不愈合而引起的伤口；或者由烧伤、烫伤引起的伤口以及手术后创口。

所述药物可以制成注射液、喷雾剂、滴剂、乳剂或者霜剂等剂型。

本发明的另外一个目的是提供一种促进伤口愈合的药物，该药物含有Toll-like receptor-3(TLR3)激动剂作为活性成份。

本发明中的polyriboinosinic polyribocytidylic acid属于现有技术中的产品，可以从市场上购买。

本发明人通过C57BL/6小鼠动物模型发现，在C57BL/6小鼠的手术伤口施用polyriboinosinic polyribocytidylic acid进行治疗的小鼠组，与溶剂对照组相比，polyriboinosinicpolyribocytidylic acid治疗组能够显著促进伤口的愈合，并且愈合后的皮肤未见瘢痕。

本发明人还进行了临床实验：色素斑患者激光祛斑术后，分成两组，一组的创面外用polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液治疗，另外一组的创面局部施以普通生理盐水作为对照，另在其他时段对该组患者创面敷以金霉素软膏以促进愈合；血管炎患者也分成两组，一组的皮损创面施用polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液进行治疗，另外一组的皮损创面外敷金因肽(重组人表皮生长因子外用溶液)进行治疗；疱疮患者的皮损创面也分成两部分，一部分的皮损创面施用polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液进行治疗，另外一部分的皮损创面外敷金因肽(重组人表皮生长因子外用溶液)进行治疗。实验结果表明polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液治疗组与临床常规用药金霉素软膏或金因肽治疗组的相比，显著缩短了创面完全愈合时间，并且愈合后的皮肤未见瘢痕，伤口愈合质量高。

本发明的Toll-like receptor-3(TLR3)激动剂能够显著促进伤口愈合，特别是polyriboinosinic polyribocytidylic acid能够显著的促进皮肤或者粘膜伤口的愈合，不但愈合时间显著缩短，而且在临床治疗过程中，均无搔痒、红肿热痛或其他不良反应，且愈合后无明显瘢痕及皮肤质地的改变，创面愈合质量高，从而克服了临床使用外源生长因子等药物的不足，可作为替代重组生长因子的药剂。并且本发明的polyriboinosinic polyribocytidylic acid来源丰富，制备工艺简单，价格宜人，使用方便。因此本发明的polyriboinosinic polyribocytidylicacid可以作为治疗伤口愈合的药剂，有望用于正常个体、伤口难愈的个体或者整形美容外科的常规用药。

附图说明：

图1为polyriboinosinic polyribocytidylic acid化学结构图；

图2为1mg/ml polyriboinosinic polyribocytidylic acid促进小鼠伤口愈合效果图。

图3为抗MIP-2抗体抑制1mg/ml polyriboinosinic polyribocytidylic acid促进小鼠伤口愈合作用效果图。

图4为特异性TRIF-siRNA延迟小鼠伤口愈合效果图。

图5为TLR3基因缺失延迟小鼠伤口愈合效果图。

图6为1mg/ml polyriboinosinic polyribocytidylic acid局部作用于TLR3基因敲除小鼠伤口效果图。

图7为面部色素斑患者1064nm波长激光除斑术后，连续外用1mg/ml polyriboinosinicpolyribocytidylic acid注射液5天后其疗效与临床常规用药对比结果。

图8为血管炎患者难愈皮损外用1mg/ml polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液5天后其疗效与临床常规用药对比结果。

图9为天疱疮患者其颈部及躯干难愈伤口外用1mg/ml polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液5天后其疗效与临床常规用药对比结果。

具体实施方式：

下面通过实施例对本发明做进一步的说明。这些实施例只是用于说明本发明，而不是限制本发明，在本发明的构思前提下对本发明的简单改进都属于本发明的保护范围内。

一、动物创伤愈合模型试验：

1、手术伤口的形成：

本发明首先选择的动物是健康C57BL/6小鼠，6-8周大，雌雄各半。整个手术过程都严格遵循了AREB 102条款，高度警惕。在CAF的外科手术室进行手术，给小鼠腹腔注射4％水合氯醛，使其麻醉。通过8％硫化钠脱去背部皮肤表面毛发，然后用浓度为70％的酒精和聚维酮碘消毒。接着用已消毒灭菌、一次性使用的皮肤活检钻孔器在被麻醉的小鼠背部钻除皮肤全层，以中线为中轴，左右各对称钻除皮肤四次，制备直径4mm的皮肤缺损四个全层皮，然后消毒，伤口至少间隔1cm完好的皮肤，以后每天用聚维酮碘或碘伏定时消毒伤口一次。

本发明还选用了C57BL/6背景的TLR3基因敲除鼠制备创伤动物愈合模型，所选取的敲基因鼠的周龄性别及伤口制备方法同上述C57BL/6野生型鼠。

2、polyriboinosinic polyribocytidylic acid(购自sigma公司，Product Number：P0913)溶液的配置：

把polyriboinosinic polyribocytidylic acid(sigma)50mg融解在50ml去内毒素去离子水配制的PBS溶液中，然后将溶液分装入EP管，保存于-20℃低温下备用。使用之前将试剂复温至室温约25℃，用于本动物创伤愈合模型试验。

3、数据分析

伤口区域愈合程度通过测量每只小鼠每个伤口的相对闭合伤口和原始伤口(第一天刚制备的伤口，未进行任何处理)的相对百分比表示，平均伤口愈合闭合百分比就是同一个治疗小组的小鼠每天伤口区域相对于初始伤口区域百分比的平均值。这样，每个小组的小鼠每天的平均伤口愈合程度就可绘成图表，并且可以同其他治疗小组进行对比。每天平均结果的标准误差也可以计算出来。

实施例1

将按照上述方法处理的，形成了手术伤口的健康C57BL/6小鼠随机分到不同的治疗小组，每组有6只，整个观察过程中，研究人员也无法分辨。手术后每天用移液管把1mg/mlpolyriboinosinic polyribocytidylic acid溶液20μl局部施用到每只实验鼠的背部皮肤中线左边两个伤口表面，用移液管的边缘使药剂扩散到整个伤口，而右边两个伤口则施以同等体积的对照纯PBS溶液，按照此方法处理，直至伤口完全愈合。手术后当天及之后第1，3，5，7，10，12，14天将伤口微距采集电子照片，然后通过使用Adobe PhotoShop(version 7.0；AdobeSystems)软件把伤口面积量化，每一伤口区域愈合程度以相对于初始伤口的百分比表示。所有的实验都需要重复2-3次，以确保实验结果的稳定性，因为在伤口愈合率方面，不同组的小鼠之间存在差别，每个实验都有其溶剂(PBS)对照组。

组织学研究：

第3，5，7，10，12，14天，将上述伤口愈合模型中的小鼠用二氧化碳麻醉后，切割下的伤口皮肤组织，包括整个受伤区域及其下层的肌肉(直径8mm)，然后放入10％的福尔马林磷酸盐缓冲液固定1个周。组织学观察：酒精和二甲苯的浓度不断升高，组织脱水：用石蜡包埋；切成5mm厚的切片置于玻璃片之上：再用苏木精伊红(H&E)染色。将所有切片放到暗视野显微镜下观察，并将所有显著变化拍照。

结果如图2所示，从图2中可以看出，C57BL/6小鼠的手术伤口每天应用polyriboinosinicpolyribocytidylic acid进行治疗。我们的实验证实了同溶剂对照组(图2，p＜0.05，n＝12)相比每天一次局部施用polyriboinosinic polyribocytidylic acid能够增强伤口愈合。图2同时表明，polyriboinosinicpolyribocytidylic acid治疗组伤口完全愈合需要10天，而溶剂对照组(p＜0.01，n＝12)需要12天，愈合后皮肤均未见瘢痕。同溶剂对照组的小鼠相比，每天一次施用1mg/ml的polyriboinosinic polyribocytidylic acid对伤口闭合从伤后第三天开始起效，疗效非常明显尤以伤后第七天为著，从伤口组织学观察也能证实该发现。

采集伤后不同天数的小鼠伤口皮肤样本，通过免疫染色方法计数聚集到伤口部位的白细胞数量，通过实时定量PCR和ELISA方法检测参与伤口愈合的趋化因子其mRNA水平和蛋白水平的表达情况，结果发现局部施用polyriboinosinic polyribocytidylic acid伤口组织当中巨噬细胞数目明显增多，而在众多趋化因子当中，polyriboinosinic polyribocytidylic acid显著促进伤口局部MIP-2的合成。局部预先施用100μg/ml抗MIP-2抗体显著抑制了polyriboinosinicpolyribocytidylic acid促进伤口愈合的作用，如图3所示。结果表明polyriboinosinicpolyribocytidylic acid通过促进巨噬细胞浸润，诱导趋化因子MIP-2的生成而介导伤口局部组织的炎症反应进而影响整个愈合的进程。

MyD(髓样分化因子)88依赖的信号传导途径是TLR信号传导的共同途径，而TLR3的信号通路却是主要历经另一条MyD88非依赖途径，其中TRIF[TIR(Toll-IL-1receptor)domain-containing adapter inducing IFN-β]是这一TLR3特有信号途径的关键接头蛋白。RNA干扰(RNA interference，RNAi)，是一种能够有效抑制基因表达的靶向性转录后基因沉默机制。目前，裸siRNA[指未加特殊修饰或偶联的siRNA(small interfering RNA)直接溶解于简单溶液中]的局部运送方式因其易于制备和使用的优势已成为siRNA动物体内递送的一大趋势。通过眼内注射、鼻腔或气管局部给药和神经系统靶向注射等途径产生显著的靶向基因沉默已被报道，而肌肉注射、皮下注射、经鼓膜注射和局部粘膜上皮给药等也均是裸siRNA有效的体内递送途径。

所以既然polyriboinosinic polyribocytidylic acid是TLR3的激动剂之一，接下来我们采用特异性干扰阻断TRIF基因表达的TRIF-siRNA局部伤口给药方式，以初步阐明TLR3信号途径的激活是否在伤口愈合这一进程中起重要作用。TRIF特异性靶向siRNA针对小鼠TRIFmRNA序列(NCBI序列号：NM_174989.3)设计，互补的两段寡聚核苷酸片段具体序列为：正义链，5’-GCUAUGUAACA CACCGCUG TT-3’；反义链，5’-CAGCGGUGUGUUACAUAGCTT-3’。阴性对照siRNA序列由广州锐博生物公司设计，序列为：正义链，5’-UUCUCCGAACGUGUCACGU TT-3’；反义链，5’-ACGUGACACGUUCGGAGAA TT-3’。TRIF-siRNA及control-siRNA均由锐博生物公司合成并纯化。我们将退火成双链结构的siRNA溶于不含RNA酶和内毒素的PBS中，每只小鼠背部其一伤口局部给予20μl总量5nmol的TRIF-siRNA，小鼠背部另外其他三个伤口分别给予相同体积的control-siRNA、PBS和1mg/ml的polyriboinosinic polyribocytidylic acid，给药方式和时间同上。结果如图4所示，与单纯PBS给药伤口比较，TRIF特异性siRNA局部给药显著延迟了伤口愈合(p＜0.05，n＝12)，而其阴性对照siRNA和polyriboinosinic polyribocytidylic acid均有促进伤口愈合的效果。(因这两者作为双链RNA，均可成为TLR3的配体而激活TLR3通路)。这一结果初步表明了TLR3信号通路的激活在伤口愈合的基本进程中起着不可替代的作用。

实施例2

将上述方法处理的，形成了手术伤口的健康C57BL/6小鼠和形成了手术伤口的TLR3基因敲除的C57BL/6小鼠，术后每天观察其伤口自然愈合过程。

将按照上述方法处理的，形成了手术伤口的TLR3基因敲除的C57BL/6小鼠随机分到不同的治疗小组，每组有6只，整个观察过程中，研究人员也无法分辨。手术后每天用移液管把1mg/ml polyriboinosinic polyribocytidylic acid溶液20μl局部施用到每只实验鼠的背部皮肤中线左边两个伤口表面，用移液管的边缘使药剂扩散到整个伤口，而右边两个伤口则施以同等体积的对照纯PBS溶液，按照此方法处理，直至伤口完全愈合。

手术后当天及之后第1，3，5，7，10，12，14天将伤口微距采集电子照片，然后通过使用Adobe PhotoShop(version 7.0；Adobe Systems)软件把伤口面积量化，每一伤口区域愈合程度以相对于初始伤口的百分比表示。所有的实验都需要重复2-3次，以确保实验结果的稳定性。

如图5所示，同时间制备背部相同形状大小的皮肤伤口之后，在特定时间采集伤口照片经Adobe PhotoShop软件测量分析发现，相比野生型C57BL/6小鼠作为对照TLR3基因敲除鼠其伤口愈合显著延迟，平均完全愈合时间更是推迟了两天。

如图6所示，TLR3基因敲除鼠其伤口每天一次局部施用1mg/ml的polyriboinosinicpolyribocytidylic acid并无明显疗效。

由上述实验结果表明，polyriboinosinic polyribocytidylic acid是通过激活伤口局部组织细胞TLR3信号通路而发挥促进伤口愈合的作用，TLR3基因敲除鼠的伤口愈合明显延迟，进一步说明了TLR3信号通路的激活在伤口愈合过程中起着重要的作用，也从另外一个角度反证了作为TLR3信号通路激动剂的polyriboinosinic polyribocytidylic acid促进伤口愈合的疗效。综上可知Toll-like receptor-3(TLR3)激动剂能够激活伤口局部组织细胞TLR3信号通路而发挥促进伤口愈合的作用。

二、临床实验：

1、患者临床资料

采取病人自愿原则，所选25例患者，其中有18例为色素斑门诊患者经1064nm波长激光祛斑后所导致的皮肤创口，6例为血管炎住院患者的肢体皮损，另有1例为天疱疮患者颈部及躯干多处糜烂皮损。所选取的这些患者对象其皮损大小和深浅均较为一致，具有可比性，已排除营养不良、贫血、内分泌紊乱、过敏体质，合并有恶性肿瘤、放化疗后、严重肝、肾疾病，以及精神病患者、妊娠或哺乳期妇女均不入选，同时已剔除未满规定观察期而中断治疗，无法判断疗效或资料不全患者。

2、用药设计：

选用的是临床用于抗病毒的polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液(购自广东邦民制药有限公司)，主要成份为双链Polyinosinic-Polycytidylic Acid聚合物，辅料为氯化钠，性状呈无色澄明液体，规格：2ml:2mg(浓度为1mg/ml)。

实施例3：

色素斑门诊患者按其就诊顺序随机分为两组，其中一组患者，激光祛斑术后创面每天一次局部外用1mg/ml polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液，另一组色素斑患者术后创面局部施以普通生理盐水注射液作为对照，另在每天其他时段对该组患者创面再敷以金霉素软膏以促进愈合。

如图7所示，临床实验结果表明，同临床常规用药(金霉素软膏)对照组(p＜0.01，n＝9)相比，局部使用规格为1mg/ml的polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液可以有效的促进伤口愈合。如表1所示，polyriboinosinic polyribocytidylic acid使患者术后创面完全愈合时间显著减少，临床常规用药对照组平均需要7.6天，polyriboinosinic polyribocytidylic acid治疗组平均需要5.3天，且未见明显瘢痕残留。

表1：10例门诊患者激光祛斑术后，创面外用1mg/ml polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液，其疗效与临床常规用药相比结果

实施例4：

血管炎住院病人随机分为两组之后，其中一组患者其肢体皮损创面敷以经1mg/mlpolyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液浸湿的纱布，之后再外敷塑料薄膜封包创面。另一组血管炎患者皮损创面外敷金因肽(重组人表皮生长因子外用溶液)浸湿纱布作为对照，两组患者皮损处均每天定时清洗并换药。

如图8所示，实验结果表明，与临床常规用药(金因肽，重组人表皮生长因子外用溶液)对照组相比(p＜0.01，n＝6)，用polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液治疗血管炎患者肢体皮损，也能够非常有效地促进伤口愈合。如表2所示，用polyriboinosinic polyribocytidylicacid注射液治疗的伤口基本愈合平均需要21.75天，而常规用药对照组则平均需要26.25天。

表2：4例入院诊断为血管炎患者，肢体皮损创面外用1mg/mlpolyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液，其疗效与临床常规用药相比结果

实施例5：

有一例天疱疮患者，患天疱疮病史2年，长期用糖皮质激素治疗，颈部糜烂已三个月未愈。在使用本发明的药物治疗的2个月前，因上消化道出血入院治疗，入院检查发现，其生化检查符合糖尿病诊断，证实其合并糖尿病史，曾停用激素8天，颈部糜烂加重，背部亦出现水疱，糜烂。之后每日地塞米松5mg静脉使用2个月，无新皮疹出现，创口每日清洗，但糜烂不愈，加用金因肽(重组人表皮生长因子外用溶液)外用二周，糜烂好转，但仍未愈。颈部及躯干伤口停用金因肽伤口外用Polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液，低尾处继续用金因肽。5天后比较采集相片如图9所示。polyriboinosinic polyribocytidylic acid注射液治疗部位，皮肤糜烂已基本痊愈，而金因肽治疗部位仍可见皮损存在。

综上可知，本发明人通过在动物模型及临床试验的用药观察，局部施用polyriboinosinicpolyribocytidylic acid能够明显加快模型小鼠普通伤口，以及血管炎或天疱疮等反复发作难愈伤口和激光祛斑术后创面等伤口的愈合且不伴有瘢痕过度增生。因此，polyriboinosinicpolyribocytidylic acid有望可以成为正常个体、伤口难愈的个体或整形美容外科术后个体等的常规用药。

Claims (7)

1.Toll-like receptor-3激动剂在制备促进伤口愈合的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的Toll-like receptor-3激动剂为Polyriboinosinic polyribocytidylic acid。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述的伤口为皮肤或粘膜伤口。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的伤口是由皮肤、粘膜的溃疡或糜烂引起的伤口；或者由血管炎、糖尿病、天疱疮、褥疮、艾滋病导致伤口不愈合而引起的伤口；或者由烧伤、烫伤引起的伤口以及手术后创口。

5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述药物的剂型为注射液、喷雾剂、滴剂、乳剂或者霜剂。

6.一种促进伤口愈合的药物，其特征在于：该药物含有Toll-like receptor-3激动剂作为活性成份。

7.根据权利要求6所述的药物，其特征在于：所述的Toll-like receptor-3激动剂为Polyriboinosinic polyribocytidylic acid。

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