CN101773532A - 一种天名精总内酯提取物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种天名精总内酯提取物。该提取物是从中药天名精中提取、精制而得的含内酯的提取物,其中总内酯含量在50%以上。经药效学和毒理学试验证明,该天名精总内酯提取物具有较好的抗癌和抗流感病毒作用,毒副作用小。本发明还公开了上述天名精总内酯提取物的制备工艺及其医药用途。
Description
所属技术领域
本发明属于医药制剂技术领域,涉及一种从中药天名精中提取的有效部位,本发明还涉及该提取物的制备方法及其医药用途。
背景技术
当前,恶性肿瘤-------癌症已成为常见且严重威胁人类生命和生活质量的主要疾病之一,从1996年以来全球每年新增确诊的肿瘤病人都在1000万以上,死亡700多万人,到2008年全球肿瘤病人总数已超过1亿,我国的肿瘤发病率同样十分惊人,已成为我国人口死亡的第二大原因。
现有的抗肿瘤化学药物较多,如环磷酰胺、阿糖胞苷、长春碱、顺铂、卡铂等,但这些药物不仅仅杀死局部的癌细胞,而且会杀伤骨髓中的白细胞,引起白细胞减少,导致病人易患感染性疾病,化学药物也会影响骨髓造血细胞和产生血小板的能力,另外,化学药物引起的继发性肿瘤可能在多年后出现,同时,还有许多副作用,如恶心、呕吐、厌食、脱发、肝功能损害、机体抵抗力下降等,因此,化学药物的应用有较大的限制。
现有中药用于肿瘤治疗分为两类,一类为治疗类用药,如一些复方,但存在作用成分不明确、机理不清楚、效价不高等缺点,甚至有的复方中含有剧毒成分,如砒霜、天仙子、斑蝥等,应用不当,容易产生严重的毒副作用;另一类为肿瘤辅助用药,用以减轻放疗、化疗的副作用,但不具备直接治疗肿瘤作用。
因此,临床上急需高效低毒的抗肿瘤药物。
流行性感冒(influenza,流感)由流感病毒(influenza virus)呼吸道感染所致,自1918年在美国流行并席卷全球以来,流行性感冒对人类造成的损失居传染病之首,而已发生的流行性感冒中,80%是甲型H1N1流感。当前,甲型H1N1流感作为一种严重危害公众健康的病毒性传染病,正席卷全球,威胁着人类的生命,据我国卫生部统计,截至2010年1月31日,全国31个省份累计报告甲型H1N1流感确诊病例12.6万例,其中死亡775例。
现有治疗流感的化学药品有一些,如金刚烷胺、金刚乙胺,扎那米韦、Oseltamivir(达菲胶囊)、利巴韦林等,虽有一定的治疗效果,但副作用大,同时,对于变异和变型的流感病毒没有效果。而中药抗病毒的独特疗效已得到了全世界的公认,中药治疗流感是“多成分、多途径、多靶点”起效,不管流感病毒如何变异和变型均有效,因此,从中药中寻找和开发治疗流感的药物具有广阔的前景。
中药天名精为菊科植物天名精Carpesium abrotanoides Linn.的全草,具有清热解毒、破血、止血、杀虫等功效,临床上主用于治疗疔肿疮毒、喉痹、肝炎等。经检索,尚未见天名精总内酯提取物抗肿瘤、抗流感病毒作用的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种高效低毒的的天名精总内酯提取物。
本发明的另一个目的是提供上述天名精总内酯提取物的制备方法。
本发明还有一个目的是提供上述天名精总内酯提取物的的医药用途。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
一种天名精总内酯提取物,它是从中药天名精中提取的含内酯的提取物,其中总内酯含量在50%以上。
本发明天名精总内酯提取物中,总内酯含量优选在70%以上更好。
本发明天名精总内酯提取物中,总内酯含量更优选在90%以上更好,100%最好。
上述天名精总内酯提取物的制备方法包括如下步骤:
(1)制备天名精粗提物:取天名精药材,加30%~95%的乙醇进行提取,滤过,得提取液,将此提取液浓缩成稀浸膏,即得天名精粗提物。
(2)将(1)步制得的天名精粗提物过大孔吸附树脂,先用水或1%~30%的低浓度乙醇洗脱,将该水或低浓度乙醇洗脱液弃去不用,除去极性大的杂质,再用40%~95%的乙醇洗脱,收集洗脱液,回收乙醇,干燥,即得天名精总内酯提取物。
如有必要,经上述(2)步精制得的含内酯的天名精提取物,可用乙酸乙酯进一步纯化处理,以制得总内酯含量高的天名精总内酯提取物。
其中(2)步中所述的大孔吸附树脂为中低极性的大孔吸附树脂,如D101、D201、D301、AB-8、X-5、HP-20等。
其中(2)步中所述的干燥方法可以为烘干、真空干燥、喷雾干燥、冷冻干燥等。
上述天名精总内酯提取物的医药用途为:(1)将上述天名精总内酯提取物用于制备治疗癌症的药物,所述治疗癌症的药物中含有有效剂量的上述天名精总内酯提取物;(2)将上述天名精总内酯提取物用于制备治疗流行性感冒的药物,所述治疗流行性感冒的药物中含有有效剂量的上述天名精总内酯提取物。
所述的药物剂型可以是粉针、滴丸、片剂、缓释片、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂等任何一种现有药物剂型。
含有上述天名精总内酯提取物的治疗癌症药物,它所治疗的癌症主要包括胃癌、肝癌、肠癌、食道癌、乳腺癌、白血病、肺癌、宫颈癌等,它还可作为癌症治疗过程中的辅助用药。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:经药效学及毒理学试验证明,该天名精总内酯提取物具有较好的抗癌和抗流感病毒的作用,且毒副作用小。不仅有效成分(内酯类)明确,而且,总内酯的含量越高,杂质越少,其效果越好,这可减少服用量,在一定程度上也可减少毒副作用,更有利于保证药物的安全性和有效性。同时,该天名精总内酯提取物不同于化学药物单一成分起效,而是“多成分、多途径、多靶点”的作用,不仅毒副作用小,而且不管癌症的种类、流感病毒如何变型,均有效。
本发明以抗癌和抗流感病毒活性为先导,对天名精的有效部位进行了追踪,以不同含量的天名精总内酯提取物为药物进行试验,结果证实了天名精总内酯提取物的抗癌和抗流感病毒作用。
药效学试验:
试验一、对小鼠移植S180的抑制作用
动物:昆明种小鼠,体重18~22g。
药物:天名精总内酯提取物(含总内酯50%的由实施例1制得、含总内酯70%的由实施例2制得、含总内酯90%的由实施例3制得),分别给药200mg/kg;阳性对照药:环磷酰胺(上海华联制药有限责任公司生产,批号:071126)。
瘤株:S180购自中南大学医学院。
试验方法:在无菌条件下,取荷瘤动物处死固定,用碘酊及酒精对操作部位的皮肤进行消毒,然后切开,选择生长良好的瘤块组织,置组织匀浆器中,按1∶2的比例加入无菌生理盐水制成细胞悬液,于试验小鼠腋窝皮下接种0.2ml,每批接种50只,接种后次日随机分组,每组10只,按表1所示剂量灌胃给药,每日1次,连续10日,在末次给药后处死小鼠,称体重,摘瘤称重,计算抑瘤率,试验重复3次。
表1对小鼠移植S180的抑制作用(X±SD)
表1中三批重复试验结果表明:天名精总内酯对小鼠移植S180有明显的抑制作用,是天名精总内酯提取物抗癌的有效成分,且呈量效关系,随着其中总内酯含量的增高,其抗癌效果越好。
试验二、对小鼠移植胃癌的抑制作用
动物:昆明种小鼠,体重18~22g。
药物:天名精总内酯提取物(含总内酯50%的由实施例1制得、含总内酯70%的由实施例2制得、含总内酯90%的由实施例3制得),分别给药200mg/kg;阳性对照药:环磷酰胺(上海华联制药有限责任公司生产,批号:071126)。
瘤株:胃癌株购自中南大学医学院。
试验方法:在无菌条件下,取荷瘤传代鼠,对腹部皮肤进行消毒,然后切开,用无菌空注射器抽吸腹水,按1∶2的比例用无菌生理盐水进行稀释,每批取雌性小鼠50只,每只接种0.2ml,接种后次日随机分组,每组10只,按表2所示剂量灌胃给药,每日1次,连续10日,记录小鼠生存时间,计算生命延长率,试验重复3次。
表2对小鼠移植胃癌的抑制作用(X±SD)
表2中三批重复试验结果表明:天名精总内酯对小鼠移植胃癌有明显的抑制作用,能明显延长小鼠生存时间,是天名精总内酯提取物的有效成分,且呈量效关系,随着其中总内酯含量的增高,其抗癌效果增强。
试验三、抗流感病毒试验
鸡胚:10日龄鸡胚购自湖南亚华种业股份有限公司。
病毒株:甲型H1N1流感病毒株由湖南省疾病预防控制中心提供,经10日龄鸡胚尿囊腔接种培养传代,微量血凝试验滴点病毒,血凝效价1∶640以上,-70℃保存,实验时以无菌生理盐水1∶10稀释后使用。
药物:天名精总内酯提取物(含总内酯50%的由实施例1制得、含总内酯70%的由实施例2制得、含总内酯90%的由实施例3制得);阳性对照药:病毒唑注射剂(批号091012,上海禾丰制药有限公司)。
试验方法:
1、药物对鸡胚毒性的检测:用无菌生理盐水对药物进行连续稀释。天名精总内酯提取物和病毒唑注射剂各自均取4个浓度剂量进行鸡胚尿囊腔接种,每一浓度接种4个胚,每个胚0.2ml,35℃培养,同步设生理盐水对照,每个胚0.2ml。24h内死亡的鸡胚不计入药物毒性作用的死亡数。连续观察4d,记录鸡胚存活情况,确定药物对鸡胚的最大无毒限量(TC0)。
2、药物对流感病毒增殖抑制作用的检测:10日龄鸡胚63个,随机分组:正常组3个;空白组4个(加生理盐水0.4ml);病毒对照4个;阳性对照组4个;药物组48个。分别用无菌生理盐水将天名精总内酯提取物稀释成4个浓度,分别为:200mg/ml、100mg/ml、50mg/ml和25mg/ml。将1∶10稀释的病毒液接种10日龄鸡胚尿囊腔,每胚0.2ml,35℃培养1h后,每胚注射上述各浓度的药液0.2ml,35℃培养72h,4℃冰箱过夜,收集尿囊液,用微量血凝试验滴点病毒血凝效价。同时,阳性对照组每胚注射0.2ml病毒唑,同步进行培养、测定。
结果:1、药物对鸡胚毒性的检测结果:天名精总内酯提取物对鸡胚的无毒限量为200mg/ml;病毒唑注射剂的无毒限量为100mg/ml;无菌生理盐水对鸡胚无毒作用。
2、药物对流感病毒增殖抑制作用的检测结果:见表3。天名精总内酯具有明显的抑制流感病毒增殖的作用,是天名精总内酯提取物的有效成分,且呈量效关系,随着其中总内酯含量的增高,其抗流感病毒效果增强。
表3对流感病毒增殖的抑制作用
急性毒性试验:
为了考察天名精总内酯提取物的安全性,特对其进行了急性毒性的考察研究,试验方法结果如下:
药物:由实施例3制得的天名精总内酯提取物(含总内酯90%)。
动物:ICR小鼠,一级,鼠龄8~9周,体重18~22g。
方法:改良寇法(参照《中药药理研究方法学》第113页,人民卫生出版社,第1版,陈奇主编)。
结果:LD50为12.01g/kg,95%的可信限为11.36~12.68g/kg。
结果表明本发明药物急性毒性小,安全度大。
由上述药效学和毒理学试验的结果可以得出:天名精总内酯提取物提取物具有较好的抗癌和抗病毒作用,且LD50为12.01g/kg,毒性很低。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的详细描述。
但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。
实施例1
取天名精药材100kg,加60%的乙醇回流提取2次,每次1小时,第1次加800kg60%的乙醇,第2次加600kg60%的乙醇,滤过,合并提取液,提取液回收乙醇并浓缩至相对密度1.05的稀浸膏,将此稀浸膏过D101大孔吸附树脂,先用20%的乙醇洗脱至无色,将此20%乙醇洗脱液弃去,再用85%的乙醇洗脱至无色,收集此85%乙醇洗脱液,回收乙醇并浓缩成相对密度1.25的稠膏,真空干燥,即得到含总内酯50%的天名精总内酯提取物。
实施例2
取天名精药材100kg,加80%的乙醇回流提取2次,每次1.5小时,第1次加700kg80%的乙醇,第2次加600kg80%的乙醇,滤过,合并提取液,提取液回收乙醇并浓缩至相对密度1.08的稀浸膏,将此稀浸膏过AB-8大孔吸附树脂,先用30%的乙醇洗脱至无色,将此30%乙醇洗脱液弃去,再用70%的乙醇洗脱至无色,收集此70%乙醇洗脱液,回收乙醇并浓缩成相对密度1.10的清膏,喷雾干燥,即得到含总内酯70%的天名精总内酯提取物。
实施例3
取天名精药材100kg,加90%的乙醇回流提取2次,每次2小时,第1次加800kg90%的乙醇,第2次加600kg90%的乙醇,滤过,合并提取液,提取液回收乙醇并浓缩至相对密度1.10的稀浸膏,将此稀浸膏过D201大孔吸附树脂,先用水洗脱至无色,将此水洗脱液弃去,再用90%的乙醇洗脱至无色,收集此90%乙醇洗脱液,回收乙醇,真空干燥,即得到含总内酯50%的天名精总内酯提取物。将此天名精总内酯提取物加5倍量水使混悬,用乙酸乙酯萃取4次,每次乙酸乙酯的用量与样品体积相等,合并乙酸乙酯层,回收乙酸乙酯后,真空干燥,即得到含总内酯90%的天名精总内酯提取物。
实施例4
取天名精药材100kg,加50%的乙醇回流提取3次,每次1小时,第1次加600kg50%的乙醇,第2、3次分别加400kg50%的乙醇,滤过,合并提取液,提取液回收乙醇并浓缩至相对密度1.03的稀浸膏,将此稀浸膏过D301大孔吸附树脂,先用30%的乙醇洗脱至无色,将此30%乙醇洗脱液弃去,再用80%的乙醇洗脱至无色,收集此80%乙醇洗脱液,回收乙醇并浓缩成相对密度1.25的稠膏,真空干燥,即得到含总内酯60%的天名精总内酯提取物。
实施例5
取天名精药材100kg,加90%的乙醇回流提取2次,每次1小时,第1次加700kg90%的乙醇,第2次加600kg90%的乙醇,滤过,合并提取液,提取液回收乙醇并浓缩至相对密度1.08的稀浸膏,将此稀浸膏过HP-20大孔吸附树脂,先用30%的乙醇洗脱至无色,将此30%乙醇洗脱液弃去,再用70%的乙醇洗脱至无色,收集此70%乙醇洗脱液,回收乙醇,真空干燥,即得到含总内酯70%的天名精总内酯提取物。将此天名精总内酯提取物加5倍量水使混悬,用乙酸乙酯萃取4次,每次乙酸乙酯的用量与样品体积相等,合并乙酸乙酯层,回收乙酸乙酯后,再加5倍量水使混悬,再用乙酸乙酯萃取3次,每次乙酸乙酯的用量与样品体积相等,合并乙酸乙酯层,回收乙酸乙酯,冷冻干燥,即得到含总内酯100%的天名精总内酯提取物。
实施例6
取所述的天名精总内酯提取物300g,糊精700g,混合均匀,采用现有硬胶囊剂制备工艺,即制得含天名精总内酯提取物的硬胶囊剂型的药物。
实施例7
取所述的天名精总内酯提取物3kg,植物油7kg,混合均匀,用明胶作囊壳材料,采用现有软胶囊剂制备工艺,即制得含天名精总内酯提取物的软胶囊剂型的药物。
实施例8
取所述的天名精总内酯提取物300g,聚乙二醇6000700g,混合均匀,采用现有滴丸剂制备工艺,即制得含天名精总内酯提取物的滴丸剂型的药物。
实施例9
取所述的天名精总内酯提取物300g,可溶性淀粉500g,蔗糖200g,混合均匀,制粒,过筛,干燥,即制得含天名精总内酯提取物的颗粒剂型的药物。或将制得的颗粒进一步压片,即制得含天名精总内酯提取物的片剂的药物。
实施例10
取所述的天名精总内酯提取物420g,羟丙甲纤维素60g,羧甲基淀粉钠8g,微晶纤维素10g,混合均匀,再加硬脂酸镁1g作为润滑剂,压片,即制得含天名精总内酯提取物的缓释片剂型的药物。
实施例11
取所述的天名精总内酯提取物300g,溶于10000ml注射用水中(加少许乙醇使溶解),采用粉针剂冷冻干燥制备工艺,即制得含天名精总内酯提取物的粉针剂型的药物。
Claims (8)
1.一种天名精总内酯提取物,它是从中药天名精中提取的含内酯的提取物,其特征在于其中总内酯含量在50%以上;而且,该提取物是通过包括以下步骤的方法制得的:
(1)制备天名精粗提物:取天名精药材,加30%~95%的乙醇进行提取,滤过,得提取液,将此提取液浓缩成稀浸膏,即得天名精粗提物;
(2)将(1)步制得的天名精粗提物过大孔吸附树脂,先用水或1%~30%的低浓度乙醇洗脱,将该水或低浓度乙醇洗脱液弃去不用,除去极性大的杂质,再用40%~95%的乙醇洗脱,收集洗脱液,回收乙醇,干燥,即得天名精总内酯提取物。
2.根据权利要求1所述的天名精总内酯提取物,其特征在于:所述的天名精总内酯提取物中总内酯含量在70%以上。
3.根据权利要求2所述的天名精总内酯提取物,其特征在于:所述的天名精总内酯提取物中总内酯含量在90%以上。
4.根据权利要求1所述的天名精总内酯提取物,其特征在于:制得该提取物的方法中,经(2)步精制得的天名精总内酯提取物,用乙酸乙酯进一步纯化处理。
5.根据权利要求1所述的天名精总内酯提取物,其特征在于:制得该提取物的方法中,(2)步中所述的大孔吸附树脂为中低极性的大孔吸附树脂。
6.权利要求1-3中任一项所述的天名精总内酯提取物的医药用途,其特征在于:将其用于制备具有治疗癌症作用的药物。
7.权利要求1-3中任一项所述的天名精总内酯提取物的医药用途,其特征在于:将其用于制备具有治疗流感作用的药物。
8.根据权利要求6或7所述的天名精总内酯提取物医药用途,其特征在于:所述的药物剂型可以是粉针、滴丸、片剂、缓释片、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂等任何一种现有药物剂型。
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PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
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Addressee: Zhou Xiaojiang Document name: Notification of Termination of Patent Right |
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CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
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Granted publication date: 20110824 Termination date: 20170224 |