CN101755998B

CN101755998B - 贻贝活性多肽的制备方法

Info

Publication number: CN101755998B
Application number: CN2009101532851A
Authority: CN
Inventors: 李长青; 夏芬; 马桂荣; 夏燕凤; 钱海彬
Original assignee: Shengsi Ocean Star Biotechnology Development Co Ltd
Current assignee: Shengsi Ocean Star Biotechnology Development Co., Ltd.
Priority date: 2009-10-30
Filing date: 2009-10-30
Publication date: 2012-05-30
Anticipated expiration: 2029-10-30
Also published as: CN101755998A

Abstract

本发明提供的贻贝活性多肽的制备方法，包括分解、浓缩、干燥，所说分解是将贻贝肉浆调节pH值为4～6后用真空超声波反应釜先处理30～40min，间隔10～20min后再处理20～30min，处理后用100～200目筛孔滤去残渣得贻贝活性多肽液；随后还经过纯化，所说纯化是高速离心分离后在上清中加入1～2倍重的10～20mg/L二氧化氯溶液稀释，稀释后的液体相继用通过孔径在5～10μm的组合微滤器和截留分子量为50000道尔顿的板式超微膜过滤纯化。与现有技术相比，本发明避免了高温对贻贝多肽、多糖、维生素分子结构的分解，使活性增强；并使贻贝多肽在分子量水平上得到分级，从而使所得贻贝多肽营养效果更纯更好。

Description

贻贝活性多肽的制备方法

技术领域本发明涉及的是一种贻贝活性多肽的制备方法，主要是一种以超声波处理为手段的蛋白分解技术，属生活需要之保健食品加工技术。

背景技术贻贝俗称海红、淡菜，它营养丰富，所含蛋白质中人体必需的八种氨基酸就占了49％，并含有多种维生素、微量元素。特别是贻贝的脂肪中含有对人体有利的不饱和脂肪酸，其中DHA、BPA占12.5％。目前贻贝加工主要是冻制品，这一加工方法首先是要在沸水将贻贝熟化，这造成贻贝资源的浪费和活性物质的流失。也有中国发明专利申请“口服保健品原液及其制备方法和用途(公开号1101837)”公开了一种先将贻贝肉打成浆再用酸水解获得营养保健品的方法。但这一方法也不能保留贻贝中的活性物质。贻贝中的活性物质主要是贻贝活性多肽，贻贝多肽有改善血液循环质量，降低血液粘度，抑制血小板聚集和动脉血栓形成的作用。贻贝活性多肽可直接为肌体所吸收，是细胞进行新陈代谢的能源，并能增进肝脏功能，强化生血补血机能，抑制障碍性贫血，从而提高人体免疫能力。但目前尚无从贻贝中提取贻贝活性多肽的工艺报道。有中国发明专利申请“带鱼多肽的制备方法(公开号CN101200751)”公开了一种带鱼多肽的制备方法，包括如下步骤：“(1)将带鱼洗净称重，加入1～3倍带鱼质量的水，绞碎成均匀的鱼肉浆；(2)将鱼肉浆放入酶解罐中，升温至45～65℃，调pH至5.5～8.5，以带鱼质量计，添加1.0％～3.0％的内切蛋白酶，同时添加鱼肉浆质量0.02％～0.1％的乳酸链球菌素，搅拌水解16～24h；然后加入1.0％～5.0％的外切蛋白酶，调节温度至45～60℃，调pH至5.0～8.0，继续搅拌水解3～6h；(3)搅拌水解结束后，升温至90～95℃，保持15～20分钟灭酶；(4)将上述反应完毕的水解液离心，4000rpm，15～20分钟，取上清液；(5)将上清液减压浓缩至原体积的1/10～1/5，温度50℃，压力0.1MPa，真空干燥24～48h，得到带鱼多肽产品。”但这一方法是用内外切酶对蛋白进行水解并要经过高温灭酶的，这些步骤同时也会使贻贝中的活性物质失活。

发明内容针对上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是如何在有效保持活性的前提下得到贻贝多肽，并提供一种贻贝活性多肽的制备方法。

本发明提供的贻贝活性多肽的制备方法，先将贻贝肉制浆，再对贻贝肉浆进行分解，然后进行浓缩、干燥，所说分解是将贻贝肉浆调节pH值为4～6后用真空超声波反应釜进行处理，分解时超声波功率为650～850W，发射频率为20～25kHz，脉冲周期频率为10～12次/秒，声速为800～1000米/秒，温度为30～40℃，相对真空度为-100～-120Pa；分解过程是先处理30～40min，间隔10～20min后再处理20～30min，处理后用100～200目筛孔滤去残渣得贻贝活性多肽液；在分解后还经过纯化，所说纯化是先在4000～6000r/min转速下进行高速离心分离20～25min，收集上层清液移入稀释罐，按所得上层清液重量计加入1～2倍的浓度在10～20mg/L的二氧化氯溶液搅拌稀释30～50min，同时控制温度在30～40℃，相对真空度在-80～-100Pa；再将稀释后的液体相继用通过孔径在5～10μm的组合微滤器和截留分子量为50000道尔顿的板式超微膜过滤纯化，纯化后得分子量小于等于50000道尔顿的贻贝活性多肽纯化液。

本发明提供的贻贝活性多肽的制备方法，采用超声波空化效应在贻贝体细胞内产生湍流而使贻贝体细胞被击碎，将其中活性多肽成份转移到液态中，有效地保留了贻贝营养成分。采用超微膜纯化，使分子量在50000道尔顿以下的小分子贻贝活性液和溶剂被提取出来，而大分子团、微粒、细菌被截留。与现有技术相比，本发明避免了高温对贻贝多肽、多糖、维生素分子结构的分解，使活性增强；并使贻贝多肽在分子量水平上得到分级，从而使所得贻贝多肽营养效果更纯更好。本发明是采用超声波技术分解贻贝活体而制取活性蛋白多肽的，提高了贻贝活性成分被人体的利用，食用便捷，吸收快、滋补效果好。

所说浓缩是将贻贝活性多肽纯化液在温度为50～60℃、相对真空度为-800～-1000Pa的环境下蒸发120～180min，以除去贻贝活性多肽纯化液中40～50％的水分，得贻贝活性多肽浓缩液。用低温浓缩能进一步避免了高温对贻贝多肽、多糖、维生素分子结构的分解，避免造成对多肽活性的损害。

所说干燥是将贻贝活性多肽浓缩液经离心式喷雾干燥器干燥，从一级和二级旋风分离器中收集贻贝活性多肽粉，干燥时控制离心式喷雾干燥器进风温度在160～180℃，出风温度在90～100℃，转速在2000～3000r/min。贻贝活性多肽具有改善血液循环质量，强化生血补血、抗贫血、提高免疫功能，为方便食用，可将贻贝活性多肽粉制成贻贝活性多肽冲剂或贻贝活性多肽胶囊。

所说贻贝肉制浆是选择新鲜紫贻贝或厚壳贻贝为原料，先清洗外壳后剔取贝肉，再将贝肉漂洗后捞出沥干，然后粉碎成碎末，再按贝肉重量计加入2～3倍水，通过胶体磨或高剪切器制成贻贝肉浆。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进一步详细说明。

实施例1、

取鲜活的紫贻贝500kg，用干净的海水冲洗两次，剔取贝壳，将贝肉放入装有饮用水的容积为100L的不锈钢桶内，再将贝肉捞出沥干得紫贻贝净肉200kg，得肉率为40％。用250型不锈钢电动绞肉机将贝肉绞成碎末200kg，加入400kg蒸馏水、通过120目和260目的胶体磨各研磨两次，得紫贻贝肉浆600kg。将紫贻贝肉浆pH值调节到4，然后用料泵将600kg紫贻贝肉浆输入到外置式1000L容积的真空超声波反应釜内，在超声波功率850W、发射频率25kHz、脉冲周期频率12次/秒、声速1000米/秒、相对真空度-120Pa、温度40℃下先进行第一次处理30min，间隔10min后，再进行第二次处理30min。处理完成后再经100目筛网过滤，得紫贻贝活性多肽液590kg。将590kg紫贻贝多肽液经高速碟式离心机在转速6000r/min下分离25min，收集到上层清液580kg。将上层清液用料泵输入到2000L容积的真空稀释罐内，加入580kg浓度为20mg/L的二氧化氯水溶液，在温度为40℃、相对真空度为-100Pa下搅拌稀释50min。将稀释后的上层清液用循环泵以相对压力0.3MPa送过组合式微滤器和板式超微膜过滤纯化，组合式微滤器的通过孔径为5～10μm，板式超微膜的截留分子量为50000道尔顿，得分子量小于等于50000道尔顿的紫贻贝活性多肽纯化液1100kg，滤过率为94.82％。用料泵将1100kg紫贻贝活性多肽纯化液输入2000L容积的真空热隔膜低温蒸发器的贮存罐内，启动循环泵并控制泵的出口相对压力为0.3MPa，控制蒸发器内相对真空度为-1000Pa、蒸发温度为50℃，控制蒸发时间为180min。通过蒸发除去紫贻贝活性多肽纯化液中50％的水分，得紫贻贝活性多肽浓缩液550kg。启动500型离心式干燥机组，调整其进风温度为160℃、出风温度为90℃、离心器转速为3000r/min、莫诺泵输料功率50W，将紫贻贝活性多肽浓缩液经500型离心式干燥机组在上述所说的状态下进行干燥，在一级和二级旋风口接取紫贻贝活性肽粉30kg，出粉率为紫贻贝原料的15％，紫贻贝活性多肽浓缩液的5.5％。再经自动粉末包装机包装成每袋10g的冲剂3000袋成品。

实施例2、

根据实施例1工艺，与实施例1不同之处在于：

(1)制贻贝肉浆：

选择新鲜的厚壳贻贝500kg，用海水清洗干净。剔出贝肉放入装有食用水的不锈钢桶内漂洗后捞出沥干。经绞肉机绞得碎末150kg，在碎末中加入去离子水450kg、拌匀。通过高剪切器制成贻贝，肉浆600kg。

(2)制贻贝活性多肽液

将600kg贻贝肉浆调节pH值到6后置于真空超声波反应釜中处理，控制超声波功率为650W，发射频率为20kHz，脉冲周期频率为10次/秒，声速为800米/秒，温度为30℃，相对真空度为-100Pa。处理过程：先处理40min，间隔20min后再处理20min。处理完成后用200目筛过滤，得贻贝活性多肽液600kg。

(3)制贻贝活性多肽纯化液

600kg贻贝活性肽液体经高速离心机分离在4000r/min转速下离心分离20min，收集上层汪液580kg移入稀释罐，加入1160kg浓度为10mg/L的二氧化氯溶液搅拌稀释30min，同时控制温度在30℃，相对真空度在-80Pa。用出口相对压力为0.2MPa的循环泵，送稀释后的上层清液用通过孔径为5～10μm的组合微滤器，和截留分子量为50000道尔顿的板式超微膜过滤纯化，得分子量小于等于50000道尔顿的贻贝活性多肽纯化液1700kg，滤过率为97.7％。

(4)制贻贝活性多肽浓缩液

1700kg贻贝活性多肽纯化液用出口相对压力为0.4MPa的循环泵循环经真空热隔膜低温蒸发器蒸发浓缩，蒸发温度控制为60℃、相对真空度控制为-800Pa，蒸发时间为120min，以除去液体中40％的水分，得贻贝活性多肽浓缩液1020kg。

(5)制贻贝活性多肽粉

1020kg在贻贝活性多肽浓缩液进风温度为190℃，出风温度为100℃，离心器转速为2000r/min的离心式喷雾干燥器中干燥，从一级和二级旋风器中收集贻贝活性多肽粉计22.5kg。

为方便食用，所得贻贝活性多肽粉可制成净含量300mg的贻贝活性多肽胶囊75000粒。

Claims

1.一种贻贝活性多肽的制备方法，先将贻贝肉制浆，再对贻贝肉浆进行分解、浓缩、干燥，其特征是所说分解是将贻贝肉浆调节pH值为4～6后用真空超声波反应釜进行处理，分解时超声波功率为650～850W，发射频率为20～25kHz，脉冲周期频率为10～12次/秒，声速为800～1000米/秒，温度为30～40℃，相对真空度为-100～-120Pa；分解过程是先处理30～40min，间隔10～20min后再处理20～30min，处理后用100～200目筛孔滤去残渣得贻贝活性多肽液；在分解后还经过纯化，所说纯化是先在4000～6000r/min转速下进行高速离心分离20～25min，收集上层清液移入稀释罐，按所得上层清液重量计加入1～2倍的浓度在10～20mg/L的二氧化氯溶液搅拌稀释30～50min，同时控制温度在30～40℃，相对真空度在-80～-100Pa；再将稀释后的液体相继用通过孔径在5～10μm的组合微滤器和截留分子量为50000道尔顿的板式超微膜过滤纯化，纯化后得分子量小于等于50000道尔顿的贻贝活性多肽纯化液。

2.如权利要求1所述的贻贝活性多肽的制备方法，其特征是所述浓缩是将贻贝活性多肽纯化液在温度为50～60℃、相对真空度为-800～-1000Pa的环境下蒸发120～180min，以除去贻贝活性多肽纯化液中40～50％的水分，得贻贝活性多肽浓缩液。

3.如权利要求1所述的贻贝活性多肽的制备方法，其特征是所述干燥是将浓缩所得的贻贝活性多肽浓缩液经离心式喷雾干燥器干燥，从一级和二级旋风分离器中收集贻贝活性多肽粉，干燥时控制离心式喷雾干燥器进风温度在160～180℃，出风温度在90～100℃，转速在2000～3000r/min。

4.如权利要求1所述的贻贝活性多肽的制备方法，其特征是所述贻贝肉制浆是选择新鲜紫贻贝或厚壳贻贝为原料，先清洗外壳后剔取贝肉，再将贝肉漂洗后捞出沥干，然后粉碎成碎末，再按贝肉重量计加入2～3倍水，通过胶体磨或高剪切器制成贻贝肉浆。