CN101743244A

CN101743244A - 取代的*唑烷酮类及其用途

Info

Publication number: CN101743244A
Application number: CN200880020785A
Authority: CN
Inventors: S·阿勒黑利根; M·鲍泽; H·希罗克; U·雷斯特; S·黑特迈耶; C·格德斯; G·冯德根费尔德; E·迪特里克-温根罗思; U·萨特曼; J·斯特拉斯伯格; K·芒特; M·J·格诺思; D·兰
Original assignee: Bayer Schering Pharma AG
Current assignee: Bayer Intellectual Property GmbH
Priority date: 2007-06-20
Filing date: 2008-06-07
Publication date: 2010-06-16
Anticipated expiration: 2028-06-07
Also published as: RU2481344C2; ATE527256T1; AU2008266526A1; AU2008266526B2; EP2173744A1; HK1144574A1; EP2173744B1; IL202206A0; WO2008155033A1; MX2009013709A; TWI407958B; KR20100022988A; CA2692169C; US20100261759A1; ZA200908583B; JP5537422B2; CL2008001690A1; TW200911246A; US8487111B2; PE20090314A1

Abstract

本发明涉及新的取代噁唑烷酮类(Oxazolidinone)，涉及它们的制备方法，涉及它们用于治疗和/或预防疾病的用途和它们用于制备用来治疗和/或预防疾病(特别是血栓栓塞病症)的药物的用途。

Description

取代的唑烷酮类及其用途

血液凝固是生物体的保护性机制，藉此能快速并可靠地“密封”血管壁中的缺陷。因此，失血能够被避免或最小化。血管损伤之后的止血法主要由凝固体系实施，在该凝固体系中血浆蛋白的复杂反应的酶级联被触发。该过程涉及众多的凝血因子，其中每种因子一旦被激活分别将最接近的非活性前体转变为其活性形式。在级联末期，发生可溶性纤维蛋白原向不溶性纤维蛋白的转变，导致血凝块形成。在血液凝固中，传统上区分出内在的和外来的体系，其以最终共同的反应途径结束。在此，因子Xa和IIa(凝血酶)扮演关键角色。

因子Xa捆绑两个凝固途径的信号，因为经由因子VIIa/组织因子(外来的途径)和经由因子X酶(Tenase)复合物(内在的途径)通过转化因子X两者形成。活化的丝氨酸蛋白酶Xa将凝血酶原分裂为凝血酶。

经由一系列反应，凝血酶将信号从所述级联传递至血液的凝固状态。凝血酶将纤维蛋白原直接分裂成纤维蛋白。其将因子XIII(该因子XIII是稳定纤维蛋白凝块所需的)活化成因子XIIIa。另外，凝血酶是血小板凝聚的潜在触发器(经由PAR-1活化)，其还显著有助于止血。通过将TAFI(凝血酶可活化的纤维蛋白溶解抑制剂)活化成TAFIa，具有血栓调节素的复合物中的凝血酶抑制所述凝块的融化。因子V和VIII的活化增强凝血酶的产生并因此进而放大凝固反应；在具有血栓调节素的复合物中产生的活化的蛋白质C对抗该提高的凝血酶产生，因而防止过度的止血(血栓形成)。

除了血液中游离存在的因子X和凝血酶之外，结合形式也是公知的。在纤维蛋白凝块的形成期间，凝血酶和凝血酶原酶(处于复合物(Komplex)形式中的因子Xa)结合至纤维蛋白骨架。这些酶分子仍然是活性的且不能由内源性抗凝血酶III抑制。因此，以此方式，凝块仍然具有一般性的凝固效力。

在由于全身因素引起的许多心血管循环疾病和代谢紊乱疾病中，例如高脂血症、糖尿病或吸烟，由于血液流动因血停滞而改变造成的，例如心房纤维性颤动，或由于血管壁的病态改变造成的，例如内皮功能障碍或动脉粥样硬化，存在提高的凝固和血小板活化趋向。该不期望的过度的止血可能通过形成富含纤维蛋白和血小板的血栓引起血栓栓塞病症和伴随着有生命危险的状态的血栓形成并发症。

止血受复杂调节机制支配。凝固体系不受控制的活化或活化过程的抑制缺陷可能导致形成局部血栓形成或脉管(动脉、静脉、淋巴管)或心室中的栓塞。这可能导致严重的血栓形成的或血栓栓塞的病症。此外，全身性的高凝固性可能导致散布的血管内凝固范围内的消耗性凝血病。血栓栓塞并发症进一步在微血管病的溶血性贫血、体外循环系统如血液透析、以及心脏瓣膜修复术和支架中遇到。

血栓栓塞病症是大多数工业化国家中最常见的发病和死亡的起因[Heart Disease：A Textbook of Cardiovascular Medicine，Eugene Braunwald，第5版，1997，W.B.Saunders Company，Philadelphia]。

来自现有技术的公知抗凝血剂如用于抑制或防止血液凝固的物质具有各种且常常重大的缺点。因此，在实践中，血栓形成/血栓栓塞病症的有效治疗方法或预防措施经证实是很困难和不令人满意的。

在血栓栓塞病症的治疗和预防中，首先利用了肝素，其非经肠或皮下给药。由于更有利的药物动力学性能，目前日益优选低分子量肝素；但是，肝素治疗中遇到的下文描述的公知缺点不能以此方式避免。例如，肝素是口服无效的并仅仅具有相对短的半衰期。此外，存在出血的高风险，其中特别可能有脑出血和胃肠道出血，并可能导致血小板减少、药物性脱发或骨质疏松症[Pschyrembel，Klinisches

[临床辞典]，第257版，1994，Walter de Gruyter Verlag，第610页，关键词“Heparin”；

Lexikon Chemie，1.5版，1998，Georg Thieme Verlag Stuttgart，关键词“Heparin”]。低分子量肝素确实具有较低的导致肝素引起的血小板减少发展的可能性，但是，它们同样仅仅可皮下给药。这也适用于磺达肝素，其为半衰期长的合成制备的选择性因子Xa抑制剂。

第二类抗凝血剂是维生素K拮抗剂。这些包括例如，2，3-二氢-1，3-茚二酮且特别是化合物如华法林、苯丙香豆素、双羟香豆素和其它香豆素衍生物，其非选择性地抑制肝脏中某些维生素K依赖性凝血因子的各种产物的合成。由于作用机理，作用起效非常缓慢(作用起效的等待时间36至48小时)。所述化合物尽管可口服给药；但是，由于出血的高风险以及窄的治疗指数，需要复杂的个体调整和患者监控[J.Hirsch，J.Dalen，D.R.Anderson等，“Oral anticoagulants：Mechanism of action，clinicaleffectiveness，and optimal therapeutic range”Chest 2001，119，8S-21S；J.Ansell，J.Hirsch，J.Dalen等，“Managing oral anticoagulant therapy”Chest2001，119，22S-38S；P.S.Wells，A.M.Holbtook，N.R.Crowther等，“Interactions of warfarin with drugs and food”Ann.Intern.Med.1994，121，676-683]。此外，已经描述了其它副作用如胃肠紊乱、掉发和皮肤坏死。

另外，在较低程度采用凝血抑制剂。水蛭素是非常有效地抑制凝血酶的蛋白质。其以重组体形式作为储备抗凝血剂静脉内给药。比伐卢定是水蛭素的20个氨基酸片段，其具有非常短的半衰期且同样不可口服利用。这对直接的非肽的低分子量凝血抑制剂阿加曲班来说也是成立的[J.H.Sohn，等Appl.Microbiol.Biotechnol.2001，57，606-613；T.GaldwellClin.Ther.2002，24，38-58；G.Escolar，Drugs of Today 2006，42，223]。

其它治疗方案需要单独抑制因子Xa。[J.Hauptmann，J.Stürzebecher，Thrombosis Research 1999，93，203；S.A.V.Raghavan，M.Dikshit，“Recentadvances in the status and targets of antithrombotic agents”Drugs Fut.2002，27，669-683；H.A.Wieland，V.Laux，D.Kozian，M.Lorenz，“Approaches inanticoagulation：Rationales for target positioning”Curr.Opin.Investig.Drugs 2003，4，264-271；U.J.Ries，W.Wienen，“Serine proteases as targetsfor antithrombotic therapy”Drugs Fut.2003，28，355-370；L.-A.Linkins，J.I.Weitz，“New anticoagulant therapy”Annu.Rev.Med.2005，56，63-77；A.Casimiro-Garcia等人，“Progress in the discovery of Factor Xa inhibitors”Expert Opin.Ther.Patents 2006，15，119-145]。

在此，已经展示了在动物模型中有效作为因子Xa抑制剂的各种化合物，既有肽的化合物也有非肽的化合物。迄今为止，已知许多直接因子Xa抑制剂[J.M.Walenga，W.P.Jeske，D.Hoppensteadt，J.Fareed，“Factor Xa Inhibitors：Today and beyond”Curr.Opin.Investig.Drugs 2003，4，272-281；J.Ruef，H.A.Katus，“New antithrombotic drugs on the horizon”Expert Opin.Investig.Drugs 2003，12，781-797；M.L.Quan，J.M.Smallheer，“The race to an orally active Factor Xa inhibitor：Recent advances”Curr.Opin.Drug Discovery & Development 2004，7，460-469]。在WO 01/47919中描述了噁唑烷酮类作为非肽的低分子量因子Xa抑制剂。

最近，已经描述了其中低分子量凝血酶和因子Xa抑制剂以不同混合比在体外和体内测试的方案。在此，发现了强烈的协同效应。Tanogitran被描述为低分子量物质，其抑制凝血酶和因子Xa两者，但是其强烈优选用于凝血酶抑制。该物质处于开发中，不是经口可生物利用的。

对于抗血栓形成的药物，治疗广度具有中心重要性：用于凝血抑制的治疗活性剂量与其中可能出血的剂量之间的间距应该尽可能地大，以使得在最低的风险预测实现最大治疗活性。

如通过由低分子量凝血酶与因子Xa抑制剂的混合物进行的实验所示，抑制凝血酶和因子Xa两者的化合物借助于它们的双重特性而具有特别强烈的协同作用，因此在控制血栓形成中特别有效。以此方式，所述化合物抑制凝固级联的两种关键酶，而无需完全阻滞各个酶。保持其余的因子Xa和凝血酶导致完好的止血并因此导致特别有利的治疗广度。在兔子中的动静脉分流模型中，可以表明，选择性因子Xa抑制剂PD0313052和选择性凝血酶抑制剂阿加曲班的仅仅弱抗血栓形成活性剂量的辅助给药导致强烈的超加性的抗血栓形成效果。另外，当具有最大协同效应的各个剂量合并时，没有观察到增加的出血。这些观察结果能够得出以下结论：凝血酶和因子Xa的同时抑制提高了就抗血栓形成作用和出血风险之间的间距来说的治疗广度(Journal of Thrombosis andHaemostasis，4：834-841)。

该协同作用在作为物质浓度的函数的前凝血酶时间通过与纯因子Xa和凝血酶抑制剂直接比较而进行研究时特别显著。对所述凝固级联的两种关键酶的强烈影响被认为在存在血栓形成的高风险时，或者在血栓形成可能导致致死病症时特别有利。这二者例如涉及在急性冠状动脉综合征类型的动脉粥样硬化性病症或急性心肌梗塞之后的状态的情况下。

此外，与肝素、水蛭素和维生素K拮抗剂不同，抑制凝血酶和因子Xa二者的化合物还将对与纤维蛋白凝块结合的凝血因子是活性的。已经存在的凝块的血栓形成效力的限制是预防动脉阻塞的关键点。这特别有效地通过抑制存在的凝血酶活性和凝块中新凝血酶的形成二者而实现。尽管纯的凝血抑制剂不能通过凝块结合的含因子Xa的凝血酶原酶复合物防止雪崩样凝血酶产生且所述抑制效果因此可能在高度激发的凝固中通过产生的大量凝血酶过度补偿，但纯的因子Xa抑制剂不能够抑制已经存在的凝血酶活性。由于抑制同样不可能通过生理机制进行，该凝块结合的凝血酶造成特别大的风险。相反，双重化合物，即抑制凝血酶和因子Xa二者的化合物，既能够抑制凝血酶产生又能够抑制凝块上的凝血酶活性，因此还防止可能的凝块生长。

因此，本发明的目的是提供双重化合物，即抑制凝血酶和因子Xa二者的化合物，且其通过抑制凝血酶产生和凝块上的凝血酶活性防止它们可能的生长，其具有宽的治疗窗口，用于在人和动物中控制疾病，特别是血栓栓塞病症。

本发明提供下式的化合物

其中

n表示数字0、1、2或3，

R¹表示氯、三氟甲氧基、甲基、乙基、正丙基、甲氧基、甲氧基甲基或乙氧基甲基，

R²表示氢或甲基，

和它们的盐、它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。

如果式(I)所包括的下文提及的化合物并未已经是盐、溶剂合物和其盐的溶剂合物，则本发明化合物是式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和其盐的溶剂合物，式(I)所包括并具有下文提及的通式的化合物和它们的盐、溶剂合物和其盐的溶剂合物，以及式(I)所包括并在下文中作为示例性实施方案提及的化合物和它们的盐、溶剂合物和其盐的溶剂合物。

根据它们的结构，本发明化合物可以以立体异构形式(对映体、非对映体)存在。因此，本发明包括对映体或非对映体以及它们各自的混合物。从对映体和/或非对映体的此类混合物，可以以公知方式分离出立体异构一致的组分。

如果本发明化合物能够以互变异构形式存在，则本发明包括所有的互变异构形式。

在本发明的上下文中，优选的盐是本发明化合物的生理学可接受的盐。本发明还包括就其本身来说并不适合于药学应用，但其可以例如用于分离或纯化本发明化合物的盐。

本发明化合物的生理学可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸的盐。

本发明化合物的生理学可接受的盐还包括常规碱的盐，例如且优选，碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)和铵盐，衍生自氨或具有1-16个碳原子的有机胺，例如且优选，乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙基胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己胺、二甲氨基乙醇、普鲁卡因、二苄基胺、N-甲基吗啉、精氨酸、赖氨酸、乙二胺和N-甲基哌啶。

在本发明上下文中，溶剂合物是处于固体或液态的本发明化合物通过与溶剂分子配位形成络合物的那些形式。水合物是特定形式的溶剂合物，其中与水进行配位。在本发明的上下文中，优选的溶剂合物是水合物。

此外，本发明还包括本发明化合物的前药。术语“前药”包括就其本身来说可以是生物学活性的或非活性的，但在其于体内停留时间期间转变为本发明化合物(例如代谢地或水解地)的化合物。

优选式(I)化合物，其中

n表示数字0、1或2，

R¹表示氯，三氟甲氧基，甲基，正丙基，甲氧基或甲氧基甲基，

R²表示氢或甲基，

和它们的盐、它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。

还优选这样的式(I)化合物，其中

n表示数字0、1或2，

R¹表示甲基，甲氧基或甲氧基甲基，

R²表示氢，

和它们的盐、它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。

还优选这样的式(I)化合物，其中

n表示数字0、1或2，

R¹表示甲基，

R²表示氢，

和它们的盐、它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。

还优选这样的式(I)化合物，其中

n表示数字1或2，

R¹表示甲基，

R²表示氢，

和它们的盐、它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。

还优选其中n表示数字1或2的式(I)的化合物。

还优选其中n表示数字1的式(I)的化合物。

还优选其中R¹表示甲基的式(I)的化合物。

还优选其中R²表示氢的式(I)的化合物。

还优选其中R¹表示甲基和R²表示氢的式(I)的化合物。

.还特别优选以下通式的化合物5-氯-N-[((5S)-3-{4-[3-(羟甲基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲基苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]噻吩-2-甲酰胺

和其盐、其溶剂合物和其盐的溶剂合物。所述化合物描述于实施例2中。

还特别优选以下通式的化合物5-氯-N-[((5S)-3-{4-[3-(2-羟乙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲基苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]噻吩-2-甲酰胺

和其盐、其溶剂合物和其盐的溶剂合物。所述化合物描述于实施例6中。

还特别优选以下通式的化合物5-氯-N-{[(5S)-3-{4-[3-(3-羟丙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲基苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基}噻吩-2-甲酰胺

和其盐、其溶剂合物和其盐的溶剂合物。所述化合物描述于实施例10中。

基团的各个组合或优选组合中的在每一情况下给出的基团定义还独立于基团的各个给定组合而被其它组合的任何基团定义所代替。

非常特别优选两个或更多个的以上提及的优选范围的组合。

本发明此外提供了用于制备式(I)的化合物或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物的方法，其中

[A]下式的化合物

在第一步骤中与下式的化合物反应

其中n、R¹和R²具有如上给出的含义，

以产生下式的化合物，

其中n、R¹和R²具有如上给出的含义，

以及在第二步骤中，在光气或光气等同物如羰二咪唑(CDI)的存在下环化以产生式(I)的化合物

或者

[B]下式的化合物

其中n，R¹和R²如以上所定义

与下式的化合物反应

其中

X表示卤素，优选溴或者氯，或者羟基。

如果羟基在所述方法过程中受到保护，例如通过甲硅烷基保护基保护，则这些保护基在所述方法[A]或[B]结束后使用本领域技术人员公知的方法除去，例如通过与溶剂如四氢呋喃中的四丁基氟化铵反应，或通过与甲醇中的氯化氢反应除去。

通过使用乙腈/水梯度并添加有碱的反相柱上的色谱，特别是通过使用RP18Phenomenex Luna C18(2)柱和二乙胺作为碱，或者通过在有机溶剂中溶解所述盐并用碱式盐如碳酸氢钠的水溶液提取(ausschütteln)，能够获得所述盐的游离碱。

本发明还提供了用于制备式(I)的化合物或其溶剂合物的方法，其中所述化合物的盐或所述化合物的盐的溶剂合物通过色谱法在向所述化合物添加碱的条件下转化。

方法[A]的第一步骤的反应通常在惰性溶剂中，在路易斯酸的存在下，优选在室温-溶剂回流的温度范围，在大气压下实施。

惰性溶剂是例如极性非质子溶剂，例如乙腈、丁腈、二氯甲烷或氯仿；优选乙腈。

路易斯酸是例如高氯酸镁、三氟甲磺酸镱(III)、溴化锂、三氟甲基磺酸镁或三氯化铝；优选高氯酸镁。

方法[A]的第二步骤的反应通常在惰性溶剂中，在碱的存在下，优选在室温-溶剂回流的温度范围，在大气压下实施。

惰性溶剂是例如极性非质子溶剂，例如乙腈或丁腈。

碱是例如强叔胺碱，例如4-N，N-二甲基氨基吡啶。

优选与N，N-羰二咪唑作为碳酸等同物通过添加4-N，N-二甲基氨基吡啶作为碱反应。

如果在方法[B]中X是卤素，则反应通常在惰性溶剂中，任选地在碱的存在下，优选在-30℃至50℃的温度范围，在大气压下实施。

惰性溶剂是例如四氢呋喃，二氯甲烷，吡啶，二氧杂环己烷或二甲基甲酰胺，优选四氢呋喃或二氯甲烷。

碱是例如三乙胺，二异丙基乙胺或N-甲基吗啉；优选二异丙基乙胺。

如果在方法[B]中X是羟基，则反应通常在惰性溶剂中，在脱水剂的存在下，任选地在碱的存在下，优选在-30℃至50℃的温度范围，在大气压下实施。

惰性溶剂是例如卤代烃，如二氯甲烷或三氯甲烷，烃，如苯，硝基甲烷，二氧杂环己烷，二甲基甲酰胺或乙腈。还可以使用所述溶剂的混合物。特别优选二氯甲烷或二甲基甲酰胺。

在此，合适的脱水剂是例如，碳二亚胺，例如，N，N’-二乙基-，N，N，’-二丙基-，N，N’-二异丙基-，N，N’-二环己基碳二亚胺，N-(3-二甲基氨基异丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)，N-环己基碳二亚胺-N’-丙氧基甲基-聚苯乙烯(PS-碳二亚胺)或羰基化合物，如羰二咪唑，或1，2-噁唑鎓化合物(Oxazoliumverbindung)，如2-乙基-5-苯基-1，2-噁唑鎓(oxazolium)3-硫酸盐或2-叔丁基-5-甲基异噁唑鎓高氯酸盐，或酰氨基化合物，如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氢喹啉，或丙烷膦酸酐，或氯甲酸异丁酯，或双(2-氧代-3-噁唑烷基)磷酰氯或苯并三唑基氧基-三(二甲基氨基)六氟磷酸鏻，或O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HBTU)，2-(2-氧代-1-(2H)-吡啶基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TPTU)或O-(7-氛杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)，或1-羟基苯并三唑(HOBt)，或苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)六氟磷酸鏻(BOP)，或N-羟基琥珀酰亚胺，或它们与碱的混合物。

碱是例如碱金属碳酸盐，例如，碳酸钠或碳酸钾，或碳酸氢钠或碳酸氢钾，或有机碱，例如三烷基胺如三乙胺，N-甲基吗啉，N-甲基哌啶，4-二甲基氨基吡啶或二异丙基乙胺。

与HATU或与EDC的缩合优选在HOBt存在下实施。

通式(II)和(VI)的化合物是已知的或者能够由已知的方法从相应起始化合物合成。

式(III)的化合物是已知的或者能够通过还原下式化合物中的硝基制备

其中n、R¹和R²具有如上给出的含义。

该反应通常使用还原剂在惰性溶剂中，优选在室温-溶剂回流的温度范围，在大气压至3巴实施。

还原剂是例如披钯活性碳(Palladium auf Aktivkohl)和氢气、二氯化锡、三氯化钛或甲酸铵以及在乙醇和乙酸乙酯混合物中的披钯活性碳；优选披钯活性碳和氢气或二氯化锡。

惰性溶剂是例如醚，如乙醚，甲基叔丁基醚，1，2-二甲氧基乙烷，二氧杂环己烷，四氢呋喃，乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚，醇，如甲醇，乙醇，正丙醇，异丙醇，正丁醇或叔丁醇，烃，如苯，二甲苯，甲苯，己烷，环己烷或石油级分，或其它溶剂，如二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺，乙腈或吡啶；优选溶剂是甲醇，乙醇，异丙醇或在二氯化锡的情况下，二甲基甲酰胺。

式(VII)的化合物是已知的，能够通过公知方法从相应的起始化合物合成或者能够类似于实施例部分描述的方法制备。

式(V)的化合物是已知的或者能够通过从下式化合物中除去邻苯二甲酰亚胺保护基而制备

其中n、R¹和R²具有如上给出的含义。

该反应通常使用甲胺水溶液或水合肼的乙醇溶液，优选使用甲胺水性溶液在溶剂回流下在大气压下实施。

式(VIII)的化合物是已知的，能够如方法[A]所述制备或者能够通过公知方法从适当的起始化合物合成。

在式(III)、(IV)、(V)、(VII)和(VIII)的化合物中，羟基可任选带有甲硅烷基保护基，例如叔丁基(二苯基)甲硅烷基。

本发明化合物的制备可以通过以下合成方案例示说明：

方案1：

本发明化合物具有预料不到的有用药理学活性范围。

因此它们适用于作为用来治疗和/或预防人和动物疾病的药物。

本发明化合物是凝血因子Xa和凝血酶(因子IIa)的双重抑制剂，特别地作为抗凝血剂起作用。所述化合物抑制凝血酶和因子Xa二者，通过抑制凝血酶产生和凝块上的凝血酶活性防止它们可能的生长并具有宽的治疗窗口。

本发明还提供了本发明化合物用来治疗和/或预防病症，优选血栓栓塞病症和/或血栓栓塞并发症的用途。

“血栓栓塞病症”在本发明意义上特别地是病症如伴随着ST段抬高(STEMI)和没有ST段抬高(非STEMI)的心肌梗死、稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、冠状动脉介入如血管成形术或主冠状动脉分流术后的再闭合(Reokklusion)和再狭窄、周边动脉阻塞疾病、肺栓塞、重度静脉血栓形成和肾静脉血栓形成、暂时的缺血性发病以及血栓形成的和血栓栓塞的中风。

因此，本发明化合物还适合于在具有急性、间歇性或持续性心律不齐(例如心房纤维性颤动)的患者和经历心脏复律的患者以及具有心脏瓣膜病症或具有人造心脏瓣膜的患者中预防和治疗心原性的血栓栓塞，例如脑缺血、中风和全身性血栓栓塞和缺血。

血栓栓塞并发症还在微血管病的溶血性贫血、体外血液循环系统如血液透析和心脏瓣膜修复术中遇到。

此外，本发明化合物还适合于预防和/或治疗动脉粥样硬化的血管病症和炎性病症，例如运动机构的风湿性病症，并另外还用于预防和/或治疗阿尔茨海默氏病。此外，本发明化合物可以用于抑制肿瘤生长和转移的形成，用于微血管病、年龄相关的斑点退化、糖尿病性视网膜病、糖尿病性肾病和其它微血管病症，以及用于预防和治疗血栓栓塞并发症，例如静脉血栓栓塞，用于肿瘤患者，特别是经历大外科手术或者化学或放射疗法的那些。

此外，本发明化合物还适合于预防和/或治疗肺动脉高血压。

术语“肺动脉高血压”包括肺动脉高血压的特定形式，如通过例如世界卫生组织(WHO)所测定的(Clinical Classification of PulmonaryHypertension，威尼斯2003)。可以提及的实例是肺动脉高血压、与左心病症有关的肺动脉高血压、与肺病症和/或缺氧有关的肺动脉高血压以及由于慢性血栓栓塞造成的肺动脉高血压(CTEPH)。

“肺动脉高血压”包括自发的肺动脉高血压(IPAH，过去还称为原发性肺动脉高血压)，家族性肺动脉高血压(FPAH)以及相关性肺动脉高血压(APAH)，其与胶原酶(Kollagenoses)有关，先天性的系统性肺Shuntvitien，门静脉高压症，HIV感染，特定药品和药剂的摄取，伴随着其它病症(甲状腺病症、糖原储存病症、戈谢病(Morbus Gaucher)、遗传性毛细血管扩张症(Teleangietasy)、血红蛋白病()、脊髓增生病、脾切除术)，伴随着具有显著静脉毛细管作用的病症，例如肺静脉闭塞病症和肺毛细管血红蛋白病，以及新生婴儿的持续性肺动脉高血压。

与左心病症有关的肺动脉高血压包括患病的左心房或心室以及二尖瓣的或主动脉的瓣膜缺陷。

与肺病症和/或缺氧有关的肺动脉高血压包括慢性梗阻性肺病症、间质肺病症、睡眠呼吸暂停综合征、肺泡换气过低、慢性高山病和内在缺陷。

由于慢性血栓栓塞造成的肺动脉高血压(CTEPH)包括肺动脉近端的血栓栓塞闭塞、肺动脉远端的血栓栓塞闭塞和非血栓形成的肺栓塞(肿瘤、寄生虫、外来体)。

本发明还提供了本发明化合物用于制备用来治疗和/或预防与结节病、组织细胞增多病X和淋巴管瘤病(Lymphangiomatosis)有关的肺动脉高血压。

此外，根据本发明的物质还可以适合于治疗肺和肝纤维组织形成。

此外，本发明化合物还可以适用于治疗和/或预防脓毒症(或败血病)、全身性炎性综合征(SIRS)、脓毒性器官功能障碍、脓毒性器官衰竭和多器官衰竭、急性呼吸困难综合征(ARDS)、急性肺损伤(ALI)、脓毒性休克、DIC(弥漫性血管内凝血或消耗性凝血病)和/或脓毒性器官衰竭。

“脓毒症”定义为存在感染和全身性炎性响应综合征(以下称为“SIRS”)。SIRS发生与感染、以及其它状态如损伤、烧伤、休克、手术、缺血、胰腺炎、复苏(Reanimation)或肿瘤有关。ACCP/SCCMConsensus Conference Committee 1992的定义(Crit Care Med 1992；20：864-874)描述了用于诊断“SIRS”所需的诊断症状和测量参数(尤其是体温变化、提高的心率、呼吸困难和变化的血像)。后来的(2001)SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS International Sepsis Definitions Conference基本上保留了所述标准，但进行了细节的微调(Levy等人，Crit Care Med2003；31：1250-1256)。

在脓毒症的过程中，可能有伴随着在不同器官中形成微血栓和继发性出血性并发症的凝固体系的普遍活化(弥漫性血管内凝血或消耗性凝血病，以下称为“DIC”)。此外，可能有伴随着脉管增加的渗透性以及液体和蛋白渗出进入血管外腔的内皮损伤。随着脓毒症进一步发展，可能有器官衰竭(例如肾衰竭、肝衰竭、呼吸衰竭、中枢神经缺陷和/或心血管衰竭)或多器官衰竭。“脓毒性休克”表示需要治疗的低血压发作，该低血压推动其它器官损伤并且与预后恶化有关。

病原体可以是细菌(Bakterien)(革兰氏阴性和革兰氏阳性)、真菌、病毒和/或真核生物。引入点或原发性感染可以是例如肺炎、尿路感染或腹膜炎。感染可能但并不一定地与菌血症有关。

DIC和/或SIRS可能在脓毒症过程中，以及由于手术、肿瘤疾病、烧伤或其它损伤而出现，在DIC中，在受损内皮细胞表面、外来体表面或受损的血管外组织的表面上存在凝血体系的大量活化。结果，在多个器官的小脉管中存在凝固，伴随着相关的缺氧和后续的器官功能障碍。其次，存在凝血因子(例如因子X、凝血酶原和纤维蛋白原)和血小板消耗，这降低了血液凝固的能力并可能导致严重的出血。

脓毒症的治疗首先由随后的消除感染性起因组成，例如通过手术的病灶改造和抗生作用。其次，其在于受影响器官系统的临时性密集医疗援助。该疾病的多个阶段的治疗已经例如描述于以下出版物中(Dellinger等人，Crit Care Med 2004；32：858-873)。对于DIC，没有经证实的奏效治疗。

本发明还提供了包括至少一种本发明化合物和一种或多种其它活性成分，特别是用于治疗和/或预防上述病症的其它活性成分的药物。示例性和优选的活性成分组合是：

·抗生素治疗

多种抗生素或抗真菌药剂组合是合适的，作为计划的治疗(在存在微生物诊断之前)或作为特异性治疗。

·液体治疗

例如晶质或胶态液体。

·血管加压药

例如正肾上腺素(Norepinephrin)、多巴胺或加压素

·变力治疗

例如多巴酚丁胺

·皮质类固醇

例如氢化可的松或氟氢可的松

·重组的人活化蛋白质C

·Xigris

·血液产品

例如红血球浓缩物、血小板浓缩物、促红细胞生成因子或新鲜冰冻血浆

·在脓毒症引起的急性肺损伤(ALI)

或急性呼吸困难综合征(ARDS)的情况下人工换气

例如允许性高碳酸血症、降低的潮气量

·镇静、止痛和神经肌肉阻断

镇静：例如地西泮、劳拉西泮、咪达唑仑或丙泊酚。类阿片：例如芬太尼、氢吗啡酮、吗啡、哌替啶或瑞芬太尼。NSAID：例如酮咯酸、布洛芬或对乙酰氨基酚。神经肌肉阻断：例如泮库溴铵(Pancuronium)

·葡萄糖控制

例如胰岛素、葡萄糖

·肾脏替代方法

例如连续的静脉-静脉血液过滤(

)或间歇性的血液透析。用于肾保护的低剂量多巴胺。

·抗凝血剂

例如用于血栓形成预防或肾脏替代方法，例如未分级的肝素、低分子量肝素、类肝素、水蛭素、比伐卢定或阿加曲班。

·碳酸氢盐治疗

·应激性溃疡预防

例如H2-受体抑制剂、抗酸剂

此外，本发明化合物还可以用于防止体外凝固，例如用于保存血液和血浆产品，用于清洁/预处理导液管和其它医疗辅助品和仪器，用于涂布体内或体外使用的医疗辅助品和仪器的合成表面或用于包括因子Xa和/或因子IIa的生物样品。

本发明还提供了本发明化合物用来治疗和/或预防病症，特别是以上提及的病症的用途。

本发明还提供了本发明化合物用于制备用来治疗和/或预防病症(特别是以上提及的病症)的药物的用途。

本发明还提供了使用抗凝固有效量的本发明化合物用于制备用来治疗和/或预防病症(特别是以上提及的病症)的药物的用途。

本发明还提供了用于防止血液体外凝固的方法，特别是在库存血或包含因子Xa和/或因子IIa的生物样品中，该方法的特征在于加入抗凝固有效量的的本发明化合物。

本发明还提供了包括本发明化合物和一种或多种其它活性成分，特别是用于治疗和/或预防上述病症的其它活性成分的药物。例如且优选，提及下列活性成分或组合：

·脂质降低物质，特别是HMG-CoA-(3-羟基-3-甲基戊二酰-辅酶A)还原酶抑制剂，例如，洛伐他汀(Mevacor；US 4,231,938)，辛伐他汀(Zocor；US 4,444,784)，普伐他汀(Pravachol；US 4,346,227)，氟伐他汀(Lescol；US 5,354,772)和阿托伐他汀(Lipitor；US 5,273,995)；

·冠状动脉的治疗剂/血管舒张药(Vasodilatator)，特别是ACE(血管紧张肽转化酶)抑制剂，例如卡托普利(Captopril)、赖诺普利(Lisinopril)、依那普利(Enalapril)、雷米普利(Ramipril)、西拉普利(Cilazapril)、贝那普利(Benazepril)、福辛普利(Fosinopril)、喹那普利(Quinapril)和培哚普利(Perindopril)，或者AII(血管紧张素II)受体拮抗体，例如恩布沙坦(Embusartan)(US 5863930)、氯沙坦、缬沙坦、厄贝沙坦、坎地沙坦(Candesartan)、依普罗沙坦和替米沙坦(Temisartan)，或β-肾上腺素能受体拮抗剂，例如卡维地洛(Carvedilol)、阿普洛尔(Alprenolol)、比索洛尔(Bisoprolol)、醋丁洛尔(Acebutolol)、阿替洛尔(Atenolol)、倍他洛尔(Betaxolol)、卡替洛尔(Carteolol)、美托洛尔(Metoprolol)、纳多洛尔(Nadolol)、喷布洛尔(Penbutolol)、吲哚洛尔(Pindolol)、萘异丙促胺(Propanolol)和噻吗洛尔(Timolol)，或α-1-肾上腺素能受体拮抗剂，例如哌唑嗪(Prazosin)、布那唑嗪(Bunazosin)、多沙唑嗪(Doxazosin)和特拉唑嗪(Terazosin)或利尿剂，例如氢氯噻嗪(Hydrochlorothiazid)、呋喃苯胺酸(Furosemid)、布美他尼(Bumetanid)、吡咯他尼(Piretanid)、托拉塞米(Torasemid)、阿米洛利(Amilorid)和双肼屈嗪(Dihydralazin)或钙通道阻滞剂，例如维拉帕米(Verapamil)和地尔硫卓(Diltiazem)，或二氢吡啶衍生物，例如硝苯地平(Nifedipin)(Adalat)和尼群地平(Nitrendipine)(Bayotensin)，或硝基制剂，例如5-一硝酸异山梨醇酯、二硝酸异山梨醇酯和三硝酸甘油酯，或引起环磷酸鸟苷(cGMP)增加的物质，例如可溶性鸟苷酸环化酶的激活剂(WO 98/16223，WO 98/16507，WO98/23619，WO 00/06567，WO 00/06568，WO 00/06569，WO 00/21954，WO00/66582，WO 01/17998，WO 01/19776，WO 01/19355，WO 01/19780，WO01/19778，WO 07/045366，WO 07/045367，WO 07/045369，WO 07/045370，WO 07/045433)；

·溶纤酶原活化剂(溶栓剂/溶血纤剂)和推动血栓溶解/纤维蛋白溶解的化合物，例如血纤蛋白溶酶原激活物抑制剂的抑制剂(PAI抑制剂)或凝血酶活化的纤维蛋白溶解抑制剂的抑制剂(TAFI抑制剂)，例如组织纤溶酶原活化剂(t-PA)、链激酶、瑞替普酶和尿激酶；

·抗凝固活性物质(抗凝血剂)，例如肝素(UFH)、低分子量肝素(NMH)，例如亭扎肝素(Tinzaparin)、舍托肝素(Certoparin)、帕肝素(Parnaparin)、那屈肝素(Nadroparin)、阿地肝素(Ardeparin)、依诺肝素(Enoxaparin)、瑞肝素(Reviparin)、达肝素(Dalteparin)、达那肝素(Danaparoid)，

AVE 5026(Sanofi-Aventis，Company Presentation 2008年2月12日)，

M118(Momenta Pharmaceuticals Inc，Press Release 2008年2月14日)，

ORG42675(Organon International Inc，Company World Wide Website2007年4月)，

以及直接的凝血酶抑制剂(DTI)，例如，

Exanta(希美加群(Ximelagatran))

Rendix(达比加群(Dabigatran))

AZD-0837[AstraZeneca Annual Report 2006，2007年3月19日]

SSR-182289A[J.Lorrain等人，Journal of Pharmacology andExperimental Therapeutics 2003，304，567-574；J-M Altenburger等人Bioorg.Med.Chem.2004，12，1713-1730]

TGN-167[S.Combe等人，Blood 2005，106，摘要1863(ASH 2005)]，

N-[(苄氧基)羰基]-L-苯丙氨酰基-N-[(1S)-1-(二羟基硼烷基)-4-甲氧基丁基]-D-脯氨酰胺[WO 2005/084685]

索非加群(Sofigatran)[WHO Drug Information 2007，21，77]

MCC-977[Mitsubishi Pharma网页途径2006，2006年7月25日]，

MPC-0920[Press Release：“Myriad Genetics Begins Phase 1 Trial ofAnti-Thrombin Drug MPC-0920”，Myriad Genetics Inc，2006年5月2日]和

TGN-255(flovagatran)

以及直接的因子Xa抑制剂，例如

利伐沙班(Rivaroxaban)(BAY59-7939)：5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[4-(3-氧代吗啉-4-基)苯基]-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)噻吩-2-甲酰胺[WO2001/47919]

AX-1826[S.Takehana等人，Japanese Journal of Pharmacology 2000，82(Suppl.1)，213页；T.Kayahara等人，Japanese Journal ofPharmacology 2000，82(Suppl.1)，213页]，

Tanogitran(BIBT-986，前药：BIBT-1011)：N-[(1R)-1-{2-[({4-[氨基(亚氨基)甲基]-苯基}氨基)甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基}-1-甲基-2-氧代-2-吡咯烷-1-基乙基]甘氨酸[American Chemical Society-226thNational Meeting，New York City，NY，USA，2003]

WO 2004/056784中公开的化合物

YM-150[Y.Iwatsuki等人，Blood 2006，108，摘要911(ASH 2006)]，

N-{4-溴-2-[(5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基]-6-羟苯基}-1-异丙基哌啶-4-羧酰胺[JP 2005/179272]

WO 2000/242270中公开的化合物，

AZ12300547：6-[4-({(2S)-4-[(3-氯-1H-吲哚-6-基)磺酰基]-2-甲基-6-氧代哌嗪-1-基}甲基)苯基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮[K.L Granberg等人，American Chemical Society-232th National Meeting，San Francisco，USA，2006，MEDI 391]

WO 2007/008142中公开的化合物，

雷扎沙班(DPC-906)：1-(3-氨基-1，2-苯并异噁唑-5-基)-N-(4-{2-[(二甲基氨基)-甲基]-1H-咪唑-1-基}-2-氟苯基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺[J.Med.Chem.2005，48，1729-1744]

阿哌沙班(Apixaban)(BMS-562247)：1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-[4-(2-氧代哌啶-1-基)苯基]-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[3，4-C]吡啶-3-甲酰胺[WO 2003/026652，WO 2003/049681]

BMS-691648：3-氯-N-[(3S，4R)-1-(甲基磺酰基)-4-{[4-(2-氧代吡啶-1(2H)-基)苯甲酰基]氨基}哌啶-3-基]-1H-吲哚-6-甲酰胺[T.

等人Drugs Fut.2006，31(Suppl A)：摘要P118；WO 2004/082687]

DX-9065a：(2S)-3-{7-[氨基(亚氨基)甲基]-2-萘基}-2-(4-{[(3S)-1-乙烷亚氨基(ethanimidoyl)-吡咯烷-3-基]氧基}苯基)丙酸[T.Nagahara等人，J.Med.Chem.1994，37，1200-1207]

DU-176b[Y.Morishima等人，Blood 2004，104，摘要1862(ASH2004)；T.Fukuda等人，Blood 2004，104，摘要1852(ASH 2004)；T.Furugohri等人，Blood 2004，104，摘要1851(ASH 2004)]，

N-(5-氯吡啶-2-基)-N’-[(1S，2R，4S)-4-(二甲基氨基甲酰基)-2-{[(5-甲基-4，5，6，7-四氢[1，3]噻唑并[5，4-c]吡啶-2-基)羰基]氨基}环己基]乙烷二酰胺[US 2005/0020645，WO 2005/47296]

US 2005/0020645中公开的化合物，

LY517717：N-{(1R)-2-[4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-基]-2-氧代-1-苯乙基}-1H-吲哚-6-羧酰胺[WO 2000/76971，WO 2002/100847]

813893[Proteinase Inhibitor Design-Fourth SCI-RSC Symposium，Proteinase 2004：Strategies for New Medicines(Part I)，London]，

6-氯-N-{(3S)-1-[(1S)-1-甲基-2-吗啉-4-基-2-氧代乙基]-2-氧代吡咯烷-3-基}萘-2-磺酰胺[N.S.Watson等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.2006，16，3784；WO 2002/100830；WO 2002/100886]

KFA-1982(KFA-1829的前药)[T.Koizumi等人，Journal ofThrombosis and Hemostasis 2003，1 Suppl 1，P2022]，

EMD-503982[Merck KGaA Annual Report 2006，48-49]，

EMD-495235：5-氯-N-[(1R)-1-(甲氧基甲基)-2-{[3-甲基-4-(3-氧代吗啉-4-基)-苯基]氨基}-2-氧代乙基]噻吩-2-甲酰胺[Bioorg.Med.Chem.Lett.2004，14，5817-5822]

M-55113：4-[(6-氯-2-萘基)磺酰基]-1-[(1-吡啶-4-基哌啶-4-基)甲基]哌嗪-2-酮[H.Nishida等人，Chem.Pharm.Bull.2001，49，1237-1244]

M-55551/M-55555：(2R)-4-[(6-氯-2-萘基)磺酰基]-6-氧代-1-[(1-吡啶-4-基哌啶-4-基)甲基]哌嗪-2-甲酸[H.Nishida等人，Chem.Pharm.Bull.2002，50，1187-1194]

M-55190：(2R)-4-[(6-氯-2-萘基)磺酰基]-6-氧代-1-[(1-吡啶-4-基哌啶-4-基)甲基]哌嗪-2-甲酸乙酯[H.Nishida等人，16th Int Symp Med Chem，Bologna，18-222000年9月，Abst PA-125]

M-55532：7-[(6-氯-2-萘基)磺酰基]-8a-(甲氧基甲基)-1’-吡啶-4-基四氢-5H-螺[1，3-噁唑并[3，2-a]吡嗪-2，4’-哌啶]-5-酮[H.Nishida等人，228thACS National Meeting，Philadelphia，August 22-26，2004，MEDI-251；H.Nishida等人，Chem.Pharm.Bull.2004，52，406-412；dito 459-462]

N-({7-[(5-氯-1H-吲哚-2-基)磺酰基]-5-氧代-1’-丙酰四氢-8aH-螺[1，3-噁唑并-[3，2-a]吡嗪-2，4’-哌啶]-8a-基}甲基)-N-甲基甘氨酸[WO2006/106804]

PRT54021[U.Sinha等人，Blood 2006，108，摘要907(ASH 2006)；K.Abe等人，Blood 2006，108，摘要901(ASH 2006)]，

WO 2006/002099中公开的化合物，

奥米沙班(Otamixaban)(fxv-673，rpr-130673)：(2R，3R)-2-{3-[氨基(亚氨基)甲基]苄基}-3-{[4-(1-氧吡啶(oxidopyridin)-4-基)苯甲酰基]氨基}丁酸甲酯[V.Chu等人，Thrombosis Research 2001，103，309-324；K.R.Guertin等人，Bioorg Med.Chem.Lett.2002，12，1671-1674]

AVE3247[Sanofi Aventis Company Presentation，Paris 2007年2月13日]，

SAR377142(SSR-7142)[Sanofi Aventis Company Presentation，Paris2007年2月13日]，

HMR-2906[XVIIth Congress of the International Society forThrombosis and Haemostasis，Washington D.C.，USA，1999年8月14-21日；Generating greater value from our products and pipeline.Aventis SACompany Presentation，2004年2月5日]，

艾卓肝素[Harry R.Büller等人，Blood，2006，108，摘要571(ASH2006)]和

磺达肝素；

·抑制血小板聚集的物质(血小板聚集抑制剂、凝血细胞聚集抑制剂)，例如乙酰水杨酸(例如阿司匹林)，噻氯匹定(Ticlid)，氯吡格雷(Plavix)和普拉格雷(Prasugrel)；

·纤维蛋白原受体拮抗体(糖蛋白-IIb/IIIa拮抗剂)，例如阿昔单抗(Abciximab)、依非巴特(Eptifibatide)、替罗非班(Tirofiban)、拉米非班(Lamifiban)、来达非班(Lefradafiban)和夫雷非班(Fradafiban)；

·以及抗心律失常药。

本发明进一步涉及药物，其包含至少一种本发明化合物、通常连同一种或多种惰性的、无毒的、药学上适合的助剂(Hilfsstoff)，本发明还涉及该药物用于上述目的的用途。

本发明化合物可以全身地和/或局部地作用。为此目的，它们可以以合适的方式给药，例如，通过口服的、非经肠的、经肺的、经鼻的、舌下的、经舌的、经面颊的、直肠的、真皮的、透皮的、结膜的、耳部的路径或者作为植入物或移植片固定模。

本发明化合物可以以适用于这些给药途径的给药形式给药。

适合于口服给药的是按照现有技术起作用并迅速地和/或以改良的方式递送本发明化合物的给药形式，其含有处于晶体和/或非晶态和/或溶解形式的本发明化合物，例如，片剂(未包衣或包衣片剂，例如具有肠溶包衣或者不能溶解或延迟溶解并控制本发明化合物释放的包衣)、在口中迅速崩解的片剂、或薄膜/糯米纸囊剂(Oblate)、薄膜/冻干剂(lyophilisates)、胶囊(例如且优选硬的或软的明胶胶囊)、糖衣片剂、粒剂、丸剂、粉剂、乳剂、悬浮液、气雾剂或溶液。

可以进行非经肠给药而绕开吸收步骤(例如静脉内的、动脉内的、心内的、脊柱内的或者腰髓内的)或者包括吸收步骤(例如肌内的、皮下的、皮内的、透皮的或者腹内的)。适合于非经肠给药的给药形式尤其是为溶液、悬浮液、乳剂、冻干剂或无菌粉剂形式的用于注射和输注的制剂。

例如，适合于其它给药途径的是：用于吸入的药物形式(尤其是粉剂吸入器、喷雾器)、滴鼻剂、溶液或喷雾剂；经舌、舌下或经面颊给药的片剂、薄膜/糯米纸囊剂或胶囊、栓剂、用于耳朵或眼睛的制剂、阴道胶囊、水性悬浮液(洗液、振荡合剂(Schüttelmixture))、亲脂性悬浮液、软膏、霜剂、经皮治疗体系(例如贴剂)、乳液、糊剂、泡沫、扑粉、植入物或移植片固定模。

优选口服或非经肠给药，尤其是口服给药。

本发明化合物可以转变为所述给药形式。这可以以其本身已知的方式，通过与惰性的、无毒的、药学上适合的助剂混合而进行。这些助剂尤其包括：载体(例如微晶纤维素、乳糖、甘露糖醇)、溶剂(例如液体聚乙二醇)、乳化剂和分散剂或润湿剂(例如十二烷基硫酸钠、聚氧山梨聚糖油酸酯)、粘合剂(例如聚乙烯吡咯烷酮)、合成的和天然的多聚物(例如白蛋白)、稳定剂(例如抗氧化剂，例如抗坏血酸)、色料(Farbstoff)(例如无机颜料，例如氧化铁)和味道和/或气味遮蔽剂。

通常证明有利的非经肠给药的给药量是大约0.001-5mg/kg，优选大约0.01-1mg/kg体重，以实现有效的结果。口服给药剂量为大约0.01-100mg/kg，优选大约0.01-20mg/kg，且非常特别优选0.1-10mg/kg体重。

然而视需要，背离所述量可能是必要的，特别是随体重、给药途径、个体对于活性成分的响应、制剂的性质和进行给药的时间或间隔而变化。因此，在有些情况中小于上述最低量可能就是足够的，而在其它情况下必须超过所述上限。倘若给药较大的量，可能可取的是将其在一天中分为多个单独剂量。

以下示例性实施方案举例说明本发明。本发明并不局限于所述实施例。

除非另外指出，否则在以下测试和实施例中的百分比数据是重量百分比；份数是重量份数。用于液体/液体溶液的溶剂比率、稀释比率和浓度数据在每一情况下基于体积。

A.实施例

缩写

CDI 羰二咪唑

d 天，双峰(在NMR中)

DC 薄层色谱

DCI 直接化学离子化(在MS中)

dd 双二重峰(在NMR中)

DMAP 4-二甲基氨基吡啶

DMF N，N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

d.Th. 理论值(在产率中)

eq. 当量

ESI 电喷射离子化(在MS中)

h 小时

HPLC 高压、高效液相色谱法

LC-MS 偶联的液相色谱-质谱法

m 多重峰(在NMR中)

min 分钟

MS 质谱法

NMR 核磁共振谱

RP 反相(在HPLC中)

RT 室温

R_t 保留时间(在HPLC中)

s 单重峰(Singulet)(在NMR中)

THF 四氢呋喃

LC-MS和HPLC方法

方法1(HPLC)：仪器：HP 1100，含DAD检测；柱：Kromasil 100RP-18，60毫米×2.1毫米，3.5微米；流动相A：5毫升高氯酸(70％)/升的水，流动相B：乙腈；梯度：0分钟2％B，0.5分钟2％B，4.5分钟90％B，6.5分钟90％B，6.7分钟2％B，7.5分钟2％B；流速：0.75ml/min；柱温：30℃；检测：UV210纳米。

方法2(HPLC)：仪器：HP1100，含DAD检测；柱：Kromasil 100RP-18，60毫米×2.1毫米，3.5微米；流动相A：5毫升高氯酸(70％强度)/升的水，流动相B：乙腈；梯度：0分钟2％B，0.5分钟2％B，4.5分钟90％B，9分钟90％B，9.2分钟2％B，10分钟2％B；流速：0.75ml/min；柱温：30℃；检测：UV210纳米。

方法3(LC-MS)：MS仪器类型：Micromass ZQ；HPLC仪器类型：Waters Alliance 2795；柱：Phenomenex Synergi 2μHydro-RP Mercury 20毫米×4毫米；流动相A：1升的水+0.5毫升50％的甲酸，流动相B：1升的乙腈+0.5毫升50％的甲酸；梯度：0.0分钟90％A→2.5分钟30％A→3.0分钟5％A→4.5分钟5％A；流速：0.0分钟1ml/min，2.5分钟/3.0分钟/4.5分钟2ml/min；烘箱：50℃；UV检测：210纳米。

方法4(LC-MS)：MS仪器类型：Micromass ZQ；HPLC仪器类型：HP 1100系列；UV DAD；柱：Phenomenex Synergi 2μHydro-RP Mercury20毫米×4毫米；流动相A：1升的水+0.5毫升50％的甲酸，流动相B：1升的乙腈+0.5毫升50％的甲酸；梯度：0.0分钟90％A→2.5分钟30％A→3.0分钟5％A→4.5分钟5％A；流速：0.0分钟1ml/min，2.5分钟/3.0分钟/4.5分钟2ml/min；烘箱：50℃；UV检测：210纳米。

方法5(LC-MS)：仪器：Micromass Quattro LCZ与HPLC Agilent系列1100；柱：Phenomenex Synergi 2μHydro-RP Mercury 20毫米×4毫米；流动相A：1升的水+0.5毫升50％的甲酸，流动相B：1升的乙腈+0.5毫升50％的甲酸；梯度：0.0分钟90％A→2.5分钟30％A→3.0分钟5％A→4.5分钟5％A；流速：0.0分钟1ml/min，2.5分钟/3.0分钟/4.5分钟2ml/min；烘箱：50℃；UV检测：208-400纳米。

方法6(LC-MS)：MS仪器类型：Micromass ZQ；HPLC仪器类型：HP 1100系列；UV DAD；柱：Phenomenex Gemini 3μ30毫米×3.00毫米；流动相A：1升的水+0.5毫升50％的甲酸，流动相B：1升的乙腈+0.5毫升50％的甲酸；梯度：0.0分钟90％A→2.5分钟30％A→3.0分钟5％A→4.5分钟5％A；流速：0.0分钟1ml/min，2.5分钟/3.0分钟/4.5分钟。2ml/min；烘箱：50℃；UV检测：210纳米。

方法7(LC-MS)：仪器：Micromass Platform LCZ与HPLC Agilent系列1100；柱：Thermo Hypersil GOLD 3μ20毫米×4毫米；流动相A：1升的水+0.5毫升50％的甲酸，流动相B：1升的乙腈+0.5毫升50％的甲酸；梯度：0.0分钟100％A→0.2分钟100％A→2.9分钟30％A→3.1分钟10％A→5.5分钟10％A；烘箱：50℃；流速：0.8ml/min；UV检测：210纳米。

方法8(LC-MS)：MS仪器类型：Waters ZQ；HPLC仪器类型：WatersAlliance 2795；柱：Phenomenex Onyx Monolithic C18，100毫米X3毫米；流动相A：1升的水+0.5毫升50％的甲酸，流动相B：1升的乙腈+0.5毫升50％的甲酸；梯度：0.0分钟90％A→2分钟65％A→4.5分钟5％A→6分钟5％A；流速：2ml/min；烘箱：40℃；UV检测：210纳米。

方法9(GC-MS)：仪器：Micromass GCT，GC6890；柱：RestekRTX-35MS，30m×250微米×0.25微米；恒定氦流动：0.88ml/min；烘箱：60℃；入口：250℃；梯度：60℃(保持0.30分钟)，50℃/分钟→120℃，16℃/分钟→250℃，30℃/分钟→300℃(保持1.7分钟)。

方法10(GC-MS)：仪器：Micromass GCT，GC6890；柱：RestekRTX-35，15m×200微米×0.33微米；恒定氦流动：0.88ml/min；烘箱：70℃；入口：250℃；梯度：70℃，30℃/分钟→310℃(保持3分钟)。

原材料

实施例1A

5-氯-N-[(2S)-环氧乙烷-2-基甲基]噻吩-2-甲酰胺

实施例1A如WO04/101557(实施例6A)中所述制备。

实施例2A

3-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮

在室温，将23.2克(144毫摩尔)六甲基二硅烷和0.781克(7.19毫摩尔)三甲基氯硅烷加入至10.0克(71.9毫摩尔)2-羟基烟酸在100毫升甲苯中的悬浮液中，且混合物用KPG搅拌器在110℃搅拌30分钟。然后将混合物冷却至-40℃，并将22.5克(158毫摩尔)的二异丁基氢化铝在二氯甲烷中的1M溶液滴加至所述溶液中。将所述混合物温热至室温，在室温搅拌18小时并最后处于-10℃，用稀盐酸调节到pH＝4，并如此加入500毫升甲醇以使温度不超过-10℃。滤出形成的沉淀，将100毫升水加入至滤液，在50℃搅拌混合物1小时并滤出沉淀。浓缩滤液产生8.55克(理论值的95％)所需化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：11.53(br.s，1H)，7.40(d，1H)，7.25(d，1H)，6.19(dd，1H)，5.00(t，1H)，4.28(d，2H)。

HPLC(方法1)：R_t＝0.27min。

MS(ESIpos，m/z)：148(M+Na)⁺。

实施例3A

3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)吡啶-2(1H)-酮

在室温，将0.65克(9.59毫摩尔)咪唑、2.42克(8.79毫摩尔)叔丁基二苯基氯硅烷和0.10克(0.80毫摩尔)DMAP加入至1.00克(7.99毫摩尔)在19毫升DMF中的来自实施例2A的化合物中，且混合物搅拌18小时。然后加入180毫升水，且混合物在0℃保持3小时。过滤后，残余物通过色谱法在硅胶上提纯(乙酸乙酯/乙基二甲基胺1000∶1)。这产生801毫克(理论值的27％)所需化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：11.61(br.s，1H)，7.69-7.52(m，5H)，7.51-7.38(m，6H)，730(d，1H)，6.29(dd，1H)，4.51(s，2H)，1.05(s，9H)。

HPLC(方法2)：R_t＝5.27min。

MS(DCI，m/z)：364(M+H)⁺。

实施例4A

3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-1-(2-氯-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

在0℃，将0.500克(4.46毫摩尔)叔丁醇钾加入至1.08克(2.97毫摩尔)在21毫升DMF中的来自实施例3A的化合物中，且混合物在室温下搅拌30分钟。加入0.571克(3.27毫摩尔)2-氯-1-氟-4-硝基苯，且混合物在室温搅拌。4.5小时后，加入200毫升水，且混合物随后用乙酸乙酯提取三次。合并的有机相由水洗涤并随后以硫酸钠干燥。过滤之后，将溶剂在减压下除去。残余物通过色谱法在硅胶上提纯(环己烷/乙酸乙酯9∶1)。这产生872毫克(理论值的56％)所需化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.52(d，1H)，8.32(dd，1H)，7.85(d，1H)，7.76(dd，1H)，7.68-7.63(m，4H)，7.59-7.55(m，1H)，7.54-7.41(m，6H)，6.54(dd，1H)，4.56(br.s，2H)，1.07(s，9H)。

HPLC(方法2)：R_t＝6.05min。

MS(DCI，m/z)：519(M+H)⁺。

实施例5A

1-(4-氨基-2-氯苯基)-3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)吡啶-2(1H)-酮

将800毫克(1.54毫摩尔)来自实施例4A的化合物溶于48毫升THF中。然后加入50毫克(0.05毫摩尔)披钯碳，且混合物在氢气氛中在大气压下在室温氢化。然后过滤反应混合物，滤饼由THF洗涤并从滤液除去溶剂。反应产物(纯度：95％)进一步反应而无需另外提纯。

HPLC(方法1)：R_t＝5.55min。

MS(ESIpos，m/z)：489(M+H)⁺。

实施例6A

N-{[(5S)-3-{4-[3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-氯-苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基}-5-氯噻吩-2-甲酰胺

将386毫克(1.77毫摩尔)来自实施例1A的化合物加入至789毫克(1.61毫摩尔)的来自实施例5A的化合物的24毫升乙腈溶液中。将540毫克(2.42毫摩尔)高氯酸镁加入至悬浮液中。在室温19小时后，加入193毫克(0.952毫摩尔)来自实施例1A的化合物，并在室温继续搅拌另外30小时。然后加入523毫克(2.46毫摩尔)1，1’-羰二咪唑和19毫克(0.09毫摩尔)DMAP，且混合物在60℃加热。21小时后，混合物由水、饱和氯化钠水溶液和乙酸乙酯稀释。该含水相用乙酸乙酯提取两次，并且合并的有机相以硫酸钠干燥。过滤后，除去溶剂且残余物通过色谱法在硅胶上提纯(环己烷/乙酸乙酯1∶1)。这产生533毫克(理论值的45％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.97(t，1H)，7.85(dd，1H)，7.73(dd，1H)，7.70-7.63(m，5H)，7.58(dd，1H)，7.53-7.38(m，8H)，7.19(d，1H)，6.47(dd，1H)，4.91-4.82(m，1H)，4.55(br.s，2H)，4.24(dd，1H)，3.89(dd，1H)，3.65-3.58(m，2H)，1.07(s，9H)。

HPLC(方法2)：R_t＝6.07min。

MS(ESIpos，m/z)：732(M+H)⁺。

实施例7A

3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-1-(2-甲基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

类似于实施例4A，使1.50克(4.13毫摩尔)来自实施例3A的化合物与704毫克(4.54毫摩尔)2-氟-5-硝基甲苯反应。这产生570毫克(理论值的28％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.29(d，1H)，8.17(dd，1H)，7.76(dd，1H)，7.67-7.63(m，4H)，7.57(d，1H)，7.53(dd，1H)，7.51-7.41(m，6H)，6.52(t，1H)，4.63-4.51(m，2H)，2.12(s，3H)，1.07(s，9H)。

HPLC(方法4)：R_t＝3.39min。

MS(ESIpos，m/z)：499(M+H)⁺。

实施例8A

1-(4-氨基-2-甲基苯基)-3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)吡啶-2(1H)-酮

将555毫克(1.11毫摩尔)来自实施例7A的化合物溶于15毫升THF中，加入150毫克披钯活性碳且混合物在氢气氛中在大气压下氢化直至得到理论值的氢气。滤出催化剂，这在减压(im Vakuum)下浓缩后产生520毫克(理论值的99％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：7.70-7.63(m，5H)，7.51-7.41(m，6H)，7.40-7.36(m，1H)，6.78(d，1H)，6.47-6.41(m，2H)，6.38(t，1H)，5.22(s，宽，2H)，4.59-4.48(m，2H)，1.81(s，3H)，1.06(s，9H)。

HPLC(方法5)：R_t＝3.20min。

MS(ESIpos，m/z)：469(M+H)⁺。

实施例9A

N-[((5S)-3-{4-[3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲基-苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]-5-氯噻吩-2-甲酰胺

将522毫克(1.11毫摩尔)来自实施例8A的化合物溶于10毫升乙腈中，并在0℃加入266毫克(1.22毫摩尔)来自实施例1A的化合物。加入373毫克(1.67毫摩尔)高氯酸镁，且混合物在室温搅拌20小时。然后加入271毫克(1.67毫摩尔)1，1’-羰二咪唑和14毫克(0.11毫摩尔)DMAP，且反应混合物在60℃加热20小时。混合物然后在减压下浓缩物，并加入水和叔丁基甲醚。混合物用乙酸乙酯提取两次。合并的有机相以硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过制备HPLC提纯。这产生562毫克(理论值的71％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.97(t，1H)，7.74-7.63(m，6H)，7.58-7.41(m，9H)，7.23(d，1H)，7.19(d，1H)，6.45(t，1H)，4.89-4.80(m，1H)，4.58-4.49(m，2H)，4.21(t，1H)，3.90-3.83(m，1H)，3.63-3.58(m，2H)，1.98(s，3H)，1.07(s，9H)。

HPLC(方法4)：R_t＝3.39min。

MS(ESIpos，m/z)：712/714(³⁵Cl/³⁷Cl)(M+H)⁺。

实施例10A

3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-1-(2-甲氧基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

类似于实施例4A，使5.00克(13.8毫摩尔)来自实施例3A的化合物与2.59克(15.1毫摩尔)1-氟-2-甲氧基-4-硝基苯反应。产物通过色谱法在硅胶上提纯(流动相戊烷/乙酸乙酯＝5∶1)，产生2.70克(理论值的38％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：7.97(d，1H)，7.92(dd，1H)，7.74-7.70(m，1H)，7.68-7.64(m，4H)，7.61(d，1H)，7.52-7.43(m，7H)，6.46(t，1H)，4.54(s，2H)，3.88(s，3H)，1.07(s，9H)。

HPLC(方法5)：R_t＝3.32min。

MS(ESIpos，m/z)：515(M+H)⁺。

实施例11A

1-(4-氨基-2-甲氧基苯基)-3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)吡啶-2(1H)-酮

类似于实施例8A氢化2.60克(5.05毫摩尔)来自实施例10A的化合物。这产生2.40克(理论值的95％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：7.70-7.61(m，5H)，7.51-7.42(m，6H)，7.34-7.31(m，1H)，6.79(d，1H)，6.35-6.29(m，2H)，6.15(dd，1H)，5.35(s，宽，2H)，4.50(s，2H)，3.60(s，3H)，1.06(s，9H)。

HPLC(方法5)：R_t＝3.13min。

MS(ESIpos，m/z)：485(M+H)⁺。

实旋例12A

N-[((5S)-3-{4-[3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲氧基苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]-5-氯噻吩-2-甲酰胺

类似于实施例6A，使2.30克(4.75毫摩尔)来自实施例11A的化合物与来自实施例1A的化合物反应。产物通过色谱法在硅胶上提纯(流动相：二氯甲烷/甲醇＝25∶1)。这产生3.10克(理论值的88％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.98(t，1H)，7.71-7.63(m，6H)，7.52-7.38(m，8H)，7.25(d，1H)，7.20(d，1H)，7.10(dd，1H)，6.40(t，1H)，4.90-4.82(m，1H)，4.52(s，2H)，4.24(t，1H)，3.89(dd，1H)，3.71(s，3H)，3.64-3.59(m，2H)，1.07(s，9H)。

HPLC(方法3)：R_t＝3.17min。

MS(ESIpos，m/z)：728/730(³⁵Cl/³⁷Cl)(M+H)⁺。

实施例13A

3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-1-[4-硝基-2-(三氟甲基)苯基]吡啶-2(1H)-酮

类似于实施例4A，使1.50克(4.13毫摩尔)来自实施例3A的化合物与949毫克(4.54毫摩尔)1-氟-4-硝基-2-(三氟甲基)苯反应。产物通过色谱法在硅胶上提纯(流动相戊烷/乙酸乙酯＝5∶1)，产生1.00克(理论值的44％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.65(dd，1H)，8.61(d，1H)，7.92(d，1H)，7.78-7.74(m，1H)，7.67-7.63(m，4H)，7.61-7.58(m，1H)，7.62-7.41(m，6H)，6.52(t，1H)，4.58-4.50(m，2H)，1.06(s，9H)。

HPLC(方法4)：R_t＝3.40min。

MS(ESIpos，m/z)：553(M+H)⁺。

实施例14A

1-[4-氨基-2-(三氟甲基)苯基]-3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)吡啶-2(1H)-酮

类似于实施例8A氢化1.00克(1.81毫摩尔)来自实施例13A的化合物。这产生930毫克(理论值的98％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：7.70-7.62(m，5H)，7.51-7.37(m，7H)，7.04(d，1H)，6.95(d，1H)，6.82(dd，1H)，6.37(t，1H)，5.85(s，2H)，4.51(s，2H)，1.06(s，9H)。

HPLC(方法3)：R_t＝3.13min。

MS(ESIpos，m/z)：523(M+H)⁺。

实施例15A

N-[((5S)-3-{4-[3-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-(三氟甲基)苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]-5-氯噻吩-2-甲酰胺

类似于实施例6A，使930毫克(1.78毫摩尔)来自实施例14A的化合物与来自实施例1A的化合物反应。产物通过制备HPLC提纯。这产生405毫克(理论值的28％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.97(t，1H)，8.11(dd，1H)，7.82(dd，1H)，7.75-7.71(m，1H)，7.68(d，1H)，7.67-7.63(m，4H)，7.55(d，1H)，7.53-7.41(m，7H)，7.19(d，1H)，6.45(t，1H)，4.93-4.85(m，1H)，4.57-4.48(m，2H)，4.29(dt，1H)，3.98-3.92(m，1H)，3.66-3.60(m，2H)，1.06(s，9H)。

HPLC(方法3)：R_t＝3.25min。

MS(ESIpos，m/z)：766/768(³⁵Cl/³⁷Cl)(M+H)⁺。

实施例16A

3-溴-1-(2-氯-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

将2.00克(11.5毫摩尔)的3-溴吡啶-2(1H)-酮(O.S.Tee，M.Pavent，J.Am.Chem.Soc.1982，104，4142-4146)溶于40毫升DMF。将混合物冷却至0℃，并加入2.04克(17.2毫摩尔，95％)叔丁醇钾。在大约15分钟以后，除去冰浴，并在另外30分钟以后，加入2.22克(12.6毫摩尔)2-氯-1-氟-4-硝基苯。混合物在室温下搅拌4小时。然后将混合物加入至水中并用乙酸乙酯提取三次。合并的有机相用饱和氯化钠溶液摇动并以硫酸钠干燥。在减压下除去溶剂，并将残余物悬浮在戊烷中并用抽吸滤出。获得的固体用环己烷/乙酸乙酯10∶1沸腾。由抽吸滤出产物并用环己烷/乙酸乙酯10∶1洗涤。这产生2.54克(理论值的67％)所需化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.57(d，1H)，8.37(dd，1H)，8.11(dd，1H)，7.94(d，1H)，7.73(dd，1H)，6.39(t，1H)。

HPLC(方法3)：R_t＝1.76min。

MS(ESIpos，m/z)：329/331(³⁵Cl/³⁷Cl)(M+H)⁺。

实施例17A

1-(4-氨基-2-氯苯基)-3-溴吡啶-2(1H)-酮

将2.00克(6.07毫摩尔)来自实施例的化合物16A溶于80毫升甲醇。加入6.83克(30.3毫摩尔)氯化锡二水合物，且混合物在回流下加热2小时。然后浓缩溶液。在硅胶上柱过滤(流动相二氯甲烷∶甲醇＝25∶1)之后，将残余物溶于乙酸乙酯并用饱和碳酸氢钠溶液摇动。有机相以硫酸钠干燥并浓缩。这产生1.60毫克(理论值的87％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.00(dd，1H)，7.56(dd，1H)，7.08(d，1H)，6.73(d，1H)，6.58(dd，1H)，6.22(t，1H)，5.71(s，2H)。

HPLC(方法5)：R_t＝1.69min。

MS(ESIpos，m/z)：299/301(³⁵Cl/³⁷Cl)(M+H)⁺。

实施例18A

N-({(5S)-3-[4-(3-溴-2-氧代吡啶-1(2H)-基)-3-氯苯基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-5-氯噻吩-2-甲酰胺

起初在0℃将1.60克(5.34毫摩尔)来自实施例17A的化合物加入25毫升乙腈中，并加入1.28克(5.88毫摩尔)来自实施例1A的化合物。加入1.79克(8.01毫摩尔)高氯酸镁，且混合物在室温搅拌20小时。然后加入另外0.38克(1.76毫摩尔)来自实施例1A的化合物和0.54克(2.4毫摩尔)高氯酸镁，且混合物再搅拌20小时。然后加入1.30克(8.01毫摩尔)CDI和65毫克(0.53毫摩尔)DMAP。混合物在60℃加热20小时并随后在减压下浓缩，加入水和乙酸乙酯。除去有机相，以硫酸钠干燥并浓缩。将产物从甲醇重结晶。这产生1.32克(理论值的45％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.97(t，1H)，8.06(dd，1H)，7.88(dd，1H)，7.69(d，1H)，7.66-7.56(m，3H)，7.20(d，1H)，6.31(t，1H)，4.92-4.85(m，1H)，4.25(t，1H)，3.91(dd，1H)，3.65-3.60(m，2H)。

HPLC(方法4)：R_t＝2.37min。

实施例19A

3-烯丙基-1-(2-氯-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

起初将1.00克(3.03毫摩尔)来自实施例16A的化合物、922毫克(6.07毫摩尔)铯氟化物和124毫克(152毫摩尔)[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯化物加入20毫升脱气THF中。滴加765毫克(4.55毫摩尔)2-烯丙基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环(dioxaborolan)，且混合物在回流下加热过夜。加入饱和碳酸氢钠溶液，且混合物用乙酸乙酯提取三次。合并的有机相以硫酸钠干燥并浓缩。产物通过制备HPLC提纯，产生616毫克(理论值的70％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.54(d，1H)，8.34(dd，1H)，7.86(d，1H)，7.50(dd，1H)，7.42-7.39(m，1H)，6.37(t，1H)，6.01-5.90(m，1H)，5.15-5.06(m，2H)，3.20(d，2H)。

HPLC(方法5)：R_t＝2.22min。

MS(ESIpos，m/z)：291/293(³⁵Cl/³⁷Cl)(M+H)⁺。

实施例20A

3-烯丙基-1-(4-氨基-2-氯苯基)吡啶-2(1H)-酮

类似于实施例17A，用氯化锡还原815毫克(2.80毫摩尔)来自实施例19A的化合物。这产生737毫克(理论值的99％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：7.34-7.27(m，2H)，7.02(d，1H)，6.72(d，1H)，6.57(dd，1H)，6.21(t，1H)，6.00-5.89(m，1H)，5.64(s，宽，2H)，5.13-5.04(m，2H)，3.16(d，2H)。

HPLC(方法3)：R_t＝1.70min。

MS(ESIpos，m/z)：261/263(³⁵Cl/³⁷Cl)(M+H)⁺。

实施例21A

N-({(5S)-3-[4-(3-烯丙基-2-氧代吡啶-1(2H)-基)-3-氯苯基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-5-氯噻吩-2-甲酰胺

类似于实施例18A，使735毫克(2.82毫摩尔)来自实施例20A的化合物与来自实施例1A的产物反应。将产物通过从甲醇重结晶而提纯。这产生826毫克(理论值的58％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.98(t，1H)，7.86(d，1H)，7.69(d，1H)，7.62-7.57(m，1H)，7.51(d，1H)，7.43-7.39(m，1H)，7.37-7.34(m，1H)，7.20(d，1H)，6.30(t，1H)，6.01-5.90(m，1H)，5.14-5.07(m，2H)，4.92-4.85(m，1H)，4.25(t，1H)，3.90(dd，1H)，3.65-3.60(m，2H)，3.19(d，2H)。

HPLC(方法3)：R_t＝2.22min。

MS(ESIpos，m/z)：504/506/508(³⁵Cl₂/³⁵Cl³⁷Cl/³⁷Cl₂)(M+H)⁺。

实施例22A

3-溴-1-(2-甲基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

将44.5克(280毫摩尔)的3-溴吡啶-2(1H)-酮溶于750毫升无水二甲基亚砜中，并在室温下逐份(portionsweise)加入33.4克(298毫摩尔)叔丁醇钾。悬浮液在该温度搅拌1小时，然后加入38.5克(280毫摩尔)1-氟-2-甲基-4-硝基苯并将该反应溶液在80℃加热20小时。使溶液冷却并小心地由水稀释。滤出所得晶状沉淀，用少许水洗涤并在减压下干燥。这产生62克(理论值的80％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.34(d，1H)，8.21(dd，1H)，8.10(dd，1H)，7.71-7.63(m，2H)，6.36(t，1H)，2.17(s，3H)。

LC-MS(方法3)：R_t＝1.72min

MS(ESIpos)：m/z＝309(M+H)⁺

实施例23A

1-(2-甲基-4-硝基苯基)-3-乙烯基吡啶-2(1H)-酮

将50克(162毫摩尔)来自实施例22A的化合物溶于700毫升无水二氧杂环己烷中，加入62克(194毫摩尔)三丁基乙烯基锡和4.7克(4毫摩尔)四(三苯基膦)钯且混合物在回流下加热15小时。使混合物冷却并通过硅藻土过滤。滤饼由乙酸乙酯洗涤且合并的滤液在减压下蒸发至干。将残余物施加于硅胶并在800克硅胶上使用环己烷和乙酸乙酯的梯度色谱处理。这产生27克(理论值的62％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.35(d，1H)，8.2(dd，1H)，7.75(dd，1H)，7.60(d，1H)，7.55(dd，1H)，6.75(dd，1H)，6.45(t，1H)，6.15(dd，1H)，5.3(dd，1H)，2.17(s，3H)。

LC-MS(方法4)：R_t＝1.86min

MS(ESIpos)：m/z＝257(M+H)⁺

实施例24A

3-(2-羟乙基)-1-(2-甲基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

在冰冷却下，将40克(326毫摩尔)9-硼杂双环[3.3.1]壬烷在650毫升四氢呋喃中的溶液以45分钟加入到38克(148毫摩尔)来自实施例23A的化合物中。将混合物在该温度再搅拌1小时，然后以15分钟加入30克(747毫摩尔)氢氧化钠在740毫升水中的溶液。如此加入151毫升30％的过氧化氢溶液，使得温度不超过30℃。在添加结束后，除去冷却并继续搅拌另外30分钟。混合物由乙酸乙酯反复提取，合并的有机相用780克(1.63摩尔)亚硫酸氢钠溶液洗涤，分离有机相并由乙酸乙酯再次提取含水相。合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，以硫酸镁干燥并在减压下蒸发至干。将残余物施加于硅胶并使用环己烷和乙酸乙酯的梯度色谱处理。合并包含产物的级分并在减压下浓缩至干。这产生38克(理论值的93％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.33(d，1H)，8.18(d，1H)，7.57(d，1H)，7.48-7.40(m，2H)，6.33(t，1H)，4.58(t，1H)，3.62-3.50(m，2H)，2.62(t，2H)，2.15(s，3H)。

LC-MS(方法6)：R_t＝1.57min

MS(ESIpos)：m/z＝275(M+H)⁺

实施例25A

3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)-1-(2-甲基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

将38克(138毫摩尔)来自实施例24A的化合物溶于200毫升无水N，N-二甲基甲酰胺中，并在0℃加入12.2克(198毫摩尔)的咪唑并逐份地加入46克(135毫摩尔)叔丁基(氯)二苯基硅烷。将混合物搅拌过夜并随后由水稀释，并用乙酸乙酯提取三次。合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤两次，以硫酸镁干燥，过滤并在减压下蒸发。将残余物施加于硅胶并使用环己烷和乙酸乙酯的梯度色谱处理。合并包含产物的级分并在减压下蒸发至干。这产生62克(理论值的88％)所需产物。

LC-MS(方法5)：R_t＝3.18min

MS(ESIpos)：m/z＝483(M+H)⁺

实施例27A

1-(4-氨基-2-甲基苯基)-3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)吡啶-2(1H)-酮

将62克(121毫摩尔)来自实施例25A的化合物溶于2升的乙醇和乙酸乙酯1∶1的混合物中，并加入46克(726毫摩尔)甲酸铵和0.6克披钯碳。在80℃加热混合物。在45分钟后，使混合物冷却并通过硅胶过滤。滤饼由乙酸乙酯洗涤且滤波在减压下蒸发至干。这产生36克(理论值的61％)所需产物。

LC-MS(方法7)：R_t＝1.84min

MS(ESIpos)：m/z＝221(M+H)⁺

实施例27A

N-[((5S)-3-{4-[3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲基-苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]-5-氯噻吩-2-甲酰胺

将35.6克(74.1毫摩尔)来自实施例26A的化合物溶于800毫升无水乙睛中，并在0℃加入19克(89毫摩尔)来自实施例1A的化合物。加入25克(110毫摩尔)高氯酸镁，除去冷却且混合物在室温搅拌15小时。加入24毫克(148毫摩尔)1，1-羰二咪唑和180毫克(1.4毫摩尔)N，N-二甲基氨基吡啶，且混合物在回流下加热2小时。使混合物冷却并在减压下馏出溶剂。然后将残余物导出至乙酸乙酯中，由水洗涤并用饱和氯化钠溶液洗涤三次。以硫酸镁干燥后，将混合物过滤并在减压下蒸发至干。将残余物施加于硅胶并使用环己烷和乙酸乙酯的梯度色谱处理。合并包含产物的级分并在减压下蒸发至干。这产生46.4克(理论值的84％)所需产物。

LC-MS(方法5)：R_t＝3.31min

MS(ESIpos)：m/z＝700(M+H)⁺

实施例28A

3-溴-1-(2-甲氧基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

将70克(403毫摩尔)3-溴吡啶-2(1H)-酮溶于1升无水二甲基亚砜中，并在室温下加入54克(484毫摩尔)叔丁醇钾。在该温度搅拌悬浮液1小时。加入69克(403毫摩尔)1-氟-2-甲氧基-4-硝基苯，并在80℃加热反应溶液20小时。将该混合物小心地由5升水稀释。滤出沉淀的固体，由水洗涤并在减压下干燥。这产生103克(理论值的72％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.05(dd，1H)，8.1(d，1H)，7.95(dd，1H)，7.7(d，1H)，7.6(dd，1H)，6.3(t，1H)，3.9(s，3H)。

MS(ESIpos)：m/z＝342(M+NH₄)⁺

实施例29A

1-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-乙烯基吡啶-2(1H)-酮

将100克(308毫摩尔)来自实施例28A的化合物溶于1.4升无水二氧杂环己烷中，加入8.9克(7.7毫摩尔)四(三苯基膦)钯和117克(370毫摩尔)三丁基乙烯基锡。将混合物在回流下加热16小时。然后使反应溶液冷却并通过硅藻土过滤。将该滤液在减压下浓缩至干。将残余物在硅胶上使用环己烷和乙酸乙酯的梯度色谱处理。合并包含产物的级分并在减压下浓缩至干。加入石油醚直至开始结晶。滤出晶体并在减压下干燥。这产生37克(理论值的41％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.0(m，2H)，7.7(m，2H)，7.5(dd，1H)，6.7(q，1H)，6.4(t，1H)，6.1(dd，1H)，5.3(dd，1H)，3.9(s，3H)。

MS(ESIpos)：m/z＝273(M+H)⁺

实施例30A

3-(2-羟乙基)-1-(2-甲氧基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

在0℃，将36克(299毫摩尔)9-硼杂双环[3.3.1]壬烷在600毫升四氢呋喃中的溶液在45分钟内加入到37克(136毫摩尔)来自实施例29A的化合物中。在该温度下另外1小时之后，以15分钟过程加入27克(680毫摩尔)氢氧化钠(在水中1N)的溶液。将混合物再搅拌5分钟，并随后加入125毫升30％的过氧化氢溶液以使温度不超过30℃。除去冷却，且混合物再搅拌30分钟。混合物由乙酸乙酯反复提取，合并的有机相用730克(1.50摩尔)亚硫酸氢钠溶液洗涤，分离有机相并由乙酸乙酯再提取含水相。合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，以硫酸镁干燥并在减压下蒸发至干。将残余物吸收在硅胶上并使用环己烷和乙酸乙酯的梯度色谱处理。合并产物级分并在减压下蒸发至干。为了进行结晶，加入叔丁基甲醚。滤出晶体并在减压下干燥。这产生24克(理论值的60％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.0(d，1H)，7.95(dd，1H)，7.6(d，1H)，7.4(d，1H)，6.35(t，1H)，4.6(t，1H)，3.9(s，3H)，3.55(m，2H)，2.6(m，2H)。

MS(ESIpos)：m/z＝291(M+H)⁺

实施例31A

3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)-1-(2-甲氧基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

将24克(81毫摩尔)来自实施例30A的化合物溶于200毫升无水N，N-二甲基甲酰胺中，并加入7.2克(106毫摩尔)咪唑和27克(98毫摩尔)叔丁基(氯)二苯基硅烷。在16小时后，将混合物由1.2升水稀释并用乙酸乙酯提取三次。合并的有机相用水洗涤两次，以硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩。为了进行结晶，加入叔丁基甲醚，滤出所得晶体并在减压下干燥。这产生30克(理论值的67％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.0(d，1H)，7.95(dd，1H)，7.6-7.5(m，5H)，7.5-7.4(m，8H)，6.35(t，1H)，3.8(m，5H)，2.7(m，2H)，1.0(s，9H)。

实施例32A

1-(4-氨基-2-甲氧基苯基)-3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)吡啶-2(1H)-酮

将25克(48毫摩尔)来自实施例31A的化合物溶于800毫升的乙醇和乙酸乙酯1∶1的混合物中，并加入18克(286毫摩尔)甲酸铵和800毫克披钯碳。在80℃加热混合物。在60分钟后，使混合物冷却并通过硅胶过滤。滤饼由乙酸乙酯洗涤，且滤液在减压下浓缩至干。这产生27克(理论值的98％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝7.6(m，4H)，7.4(m，6H)，7.3(dd，1H)，7.25(dd，1H)，6.75(d，1H)，6.3(d，1H)，6.2(dd，1H)，6.1(t，1H)，5.3(b，2H)，3.8(m，2H)，3.6(s，3H)，2.7(m，2H)，1.0(s，9H)。

MS(ESIpos)：m/z＝499(M+H)⁺

实施例33A

N-{[(5S)-3-{4-[3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲氧基-苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基}-5-氯噻吩-2-甲酰胺

将29克(58毫摩尔)来自实施例32A的化合物溶于600毫升无水乙睛中，并在0℃加入15克(69毫摩尔)来自实施例1A的化合物。加入19克(87毫摩尔)高氯酸镁，除去冷却且混合物在室温搅拌15小时。然后加入19.0克(116毫摩尔)1，1-羰二咪唑和141毫克(1.21毫摩尔)N，N-二甲基氨基吡啶，且混合物在回流下加热。在2小时后，使混合物冷却并在减压下馏出溶剂。然后将残余物导出至乙酸乙酯中，由水洗涤并用饱和氯化钠溶液洗涤三次。以硫酸镁干燥后，将混合物过滤并在减压下蒸发至干。将残余物在硅胶上使用环己烷和乙酸乙酯的梯度色谱处理。合并包含产物的级分并在减压下浓缩至干。这产生37克(理论值的85％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝9.0(t，1H)，7.7(d，1H)，7.6(m，4H)，7.5-7.3(m，9H)，7.2(m，2H)，7.1(m，1H)，6.2(t，1H)，4.8(m，1H)，4.4(t，1H)，3.9(m，1H)，3.8(b，2H)，3.7(s，3H)，3.65(m，2H)，2.7(m，2H)，1.0(s，9H)。

LC-MS(方法8)：Rt＝4.53min

MS(ESIpos)：m/z＝742(M+H)⁺

实施例34A

2-(溴甲基)-1-氟-4-硝基苯

将186克(1.20摩尔)2-氟-5-硝基甲苯溶于1.2升四氯化碳中，并加入214克(1.20摩尔)N-溴琥珀酰亚胺。加入19.7克(120毫摩尔)偶氮二异丁腈，且混合物在回流下加热。在16小时以后，使该混合物冷却，过滤并在减压下蒸发至干。将残余物溶于300毫升二氯甲烷中，并加入300克海沙。然后将混合物再一次在减压下浓缩至干，并将残余物施加于1千克硅胶柱上。将产物使用环己烷和乙酸乙酯的20∶1混合物色谱处理，并在减压下将产物级分蒸发至干。残余物用环己烷结晶并在减压下干燥。这产生92克(理论值的32％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.57-8.52(m，1H)，8.33-8.27(m，1H)，7.56(t，1H)，4.62(s，2H)。

GC-MS(方法9)：R_t＝7.79min

MS(ESIpos)：m/z＝154(M-Br)⁺

实施例35A

1-氟-2-(甲氧基甲基)-4-硝基苯

将30克(128毫摩尔)来自实施例34A的化合物溶于1.3升无水甲苯中，并加入45克(192毫摩尔)氧化银(I)和24.6克(769毫摩尔)无水甲醇。将混合物在60℃下加热16小时。然后使混合物冷却并通过硅胶过滤。将产物使用环己烷和环己烷/乙酸乙酯25∶1的梯度分级洗脱。将产物级分在减压下蒸发至干并在减压下干燥。这产生17克(理论值的72％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.41-8.36(m，1H)，8.22-8.16(m，1H)，7.26(t，1H)，4.58(s，2H)，3.49(s，3H)。

GC-MS(方法9)：R_t＝6.52min

MS(ESIpos)：m/z＝154(M-OCH₃)⁺

实施例36A

3-溴-1-[2-(甲氧基甲基)-4-硝基苯基]吡啶-2(1H)-酮

将38克(391毫摩尔)3-溴-2-羟基吡啶溶于1250毫升无水二甲基亚砜中，并逐份地加入53克(469毫摩尔)叔丁醇钾。将混合物再搅拌1小时，然后加入72.4克(391毫摩尔)来自实施例35A的化合物。在添加已经结束后，将混合物在80℃加热3小时。然后使混合物冷却，并在室温下继续搅拌另外16小时。然后将反应溶液冷却至15℃，并在该温度用1N盐酸将pH小心地调节至pH＝3。加入4升水，且混合物用2升乙酸乙酯提取三次。合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤并以硫酸镁干燥。溶液然后在减压下蒸发至干，并加入叔丁基甲醚以便结晶。滤出晶体并在减压下干燥。这产生94克(理论值的71％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.37(d，1H)，8.33(dd，1H)，8.10(dd，1H)，7.73-7.67(m，2H)，6.35(t，1H)，4.3(q，2H)，3.3(s，3H)。

LC-MS(方法6)：R_t＝1.88min

MS(ESIpos)：m/z＝339(M+H⁺)⁺

实施例37A

1-[2-(甲氧基甲基)-4-硝基苯基]-3-乙烯基吡啶-2(1H)-酮

将94克(277毫摩尔)来自实施例36A的化合物溶于1.2升无水二氧杂环己烷中，并加入8克(6.9毫摩尔)四(三苯基膦)钯(0)。在室温下，缓慢加入105克(333毫摩尔)三丁基乙烯基锡，并在添加已经结束之后，将该混合物在回流下加热21小时。使反应溶液冷却并通过硅藻土过滤。滤饼由乙酸乙酯洗涤且合并的有机滤液在减压下浓缩至干。将保留的残余物溶于二氯甲烷中并施加于硅藻土上。将产物在1.2千克硅胶上使用环己烷和乙酸乙酯的梯度色谱处理。合并包含产物的级分并在减压下浓缩至干。这产生23克(理论值的29％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.36(d，1H)，8.31(dd，1H)，7.77(dd，1H)，7.67(d，1H)，7.56(dd，1H)，6.80-6.71(m，1H)，6.45(t，1H)，6.14(dd，1H)，5.33(dd，1H)，4.37-4.22(m，2H)，3.26(s，3H)。

LC-MS(方法6)：R_t＝2.07min

MS(ESIpos)：m/z＝387(M+H⁺)⁺

实施例38A

3-(2-羟乙基)-1-[2-(甲氧基甲基)-4-硝基苯基]吡啶-2(1H)-酮

将23克(80毫摩尔)来自实施例37A的化合物溶于80毫升无水四氢呋喃中并冷却到5℃。在15分钟期间内，加入21克(176毫摩尔)9-硼杂双环[3.3.1]壬烷(在四氢呋喃中的0.5M溶液)。除去冷却，且混合物在室温下再搅拌2小时。然后将混合物再次冷却至5℃，并加入400毫升的1N氢氧化钠水溶液。在添加已经结束之后，在该温度逐份地加入81毫升30％的过氧化氢溶液。在用500毫升乙酸乙酯稀释后，将混合物用32毫升40％的亚硫酸氢钠溶液洗涤以消除过氧化物。分离有机相，且含水相用乙酸乙酯提取四次。合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，以硫酸镁干燥，并且在过滤后在减压下浓缩至干。将残余物在硅胶上使用环己烷和乙酸乙酯的梯度色谱处理。合并包含产物的级分并在减压下浓缩至干。这产生20克(理论值的77％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.36(d，1H)，8.30(dd，1H)，7.62(d，1H)，7.45(d，1H)，6.33(t，1H)，4.60(t，1H)，4.35-4.20(m，2H)，3.62-3.55(m，2H)，3.32(s，3H)，2.62(t，2H)。

LC-MS(方法8)：R_t＝1.60min

MS(ESIpos)：m/z＝305(M+H⁺)⁺

实施例39A

3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)-1-[2-(甲氧基甲基)-4-硝基苯基]吡啶-2(1H)-酮

将20克(65毫摩尔)来自实施例38A的化合物溶于75毫升无水N，N-二甲基甲酰胺中，并且，在冰冷却下，首先加入5.3克(78毫摩尔)咪唑并随后，在3分钟期间内，逐份地加入19克(72毫摩尔)叔丁基二苯基氯硅烷。除去冷却，且混合物在室温下再搅拌19小时。将反应溶液由乙酸乙酯稀释，由水洗涤三次并用饱和氯化钠溶液洗涤两次。混合物然后以硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩至干。将叔丁基甲醚加入至残余物中，滤出所得晶体并在减压下干燥。这产生39克(理论值的90％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.35(d，1H)，8.31(dd，1H)，7.65-7.35(m，13H)，6.35(t，1H)，4.32-4.14(m，2H)，3.92-3.80(m，2H)，3.32(s，3H)，2.78-2.71(m，2H)，0.97(s，9H)。

LC-MS(方法8)：R_t＝4.59min

MS(ESIpos)：m/z＝543(M+H⁺)⁺

实施例40A

1-[4-氨基-2-(甲氧基甲基)苯基]-3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)吡啶-2(1H)-酮

将25克(48毫摩尔)来自实施例39A的化合物溶于500毫升乙酸乙酯和500毫升乙醇中。加入18克(286毫摩尔)甲酸铵和1克披钯碳，且混合物在回流下加热45分钟。然后使反应溶液冷却并通过硅胶过滤。将该滤液在减压下浓缩至干。这产生25克(理论值的100％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝7.65-7.20(m，12H)，6.79(d，1H)，6.68(d，1H)，6.54(dd，1H)，6.20(t，1H)，5.46-5.25(m，2H)，4.04-3.91(m，2H)，3.87-3.77(m，2H)，3.07(s，3H)，2.75-2.68(m，2H)，0.95(s，9H)。

LC-MS(方法6)：R_t＝3.22min

MS(ESIpos)：m/z＝513(M+H⁺)⁺

实施例41A

N-{[(5S)-3-{4-[3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-(甲氧基-甲基)苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基}-5-氯噻吩-2-甲酰胺

将25克(47毫摩尔)来自实施例40A的化合物溶于500毫升无水乙睛中，并加入15克(61毫摩尔)来自实施例1A的化合物和16克(71毫摩尔)高氯酸镁。将混合物在室温下搅拌5小时，然后再加入1克(4.1毫摩尔)来自实施例1A的化合物。在21小时以后，加入15.3克(95毫摩尔)羰二咪唑和116毫克(0.65毫摩尔)4-二甲基氨基吡啶，且混合物在回流下加热3.5小时。然后在减压下除去溶剂，并将残余物导出在800毫升乙酸乙酯中。溶液由水洗涤并用饱和氯化钠溶液洗涤两次，以硫酸镁干燥并随后在减压下浓缩。将残余物在硅胶上使用环己烷和乙酸乙酯的梯度分离。合并包含产物的级分并在减压下浓缩至干。这产生26.5克(理论值的72％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝9.00(t，1H)，7.73-7.35(m，15H)，7.23(d，1H)，7.19(d，1H)，6.28(t，1H)，4.90-4.81(m，1H)，4.28-3.80(m，6H)，3.62(t，2H)，3.11(s，3H)，2.79-2.71(m，2H)，0.97(s，9H)。

LC-MS(方法6)：R_t＝3.39min

MS(ESIpos)：m/z＝756(M+H⁺)⁺

实施例42A

(2-氟-5-硝基苄基)(三苯基)溴化鏻

将20克(85.5毫摩尔)来自实施例34A的化合物溶于250毫升无水甲苯中，并加入22.4克(85.5毫摩尔)三苯基膦。将溶液在回流下加热16小时，导致沉淀形成。使混合物冷却，并滤出沉淀。在用乙醚洗涤后，在减压下干燥沉淀。这产生39克(理论值的92％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.30-8.23(m，1H)，7.98-7.88(m，4H)，7.81-7.70(m，12H)，7.45(t，1H)，5.32(d，2H)。

实施例43A

1-氟-4-硝基-2-[(1E)丙-1-烯-1-基]苯

在10℃，将5.99克(32.7毫摩尔)双(三甲基甲硅烷基)酰胺钠滴加到13.5克(27.3毫摩尔)来自实施例42A的化合物在145毫升二氧杂环己烷的溶液中。在该温度搅拌混合物1小时。然后加入2.40克(54.5毫摩尔)乙醛在5毫升二氧杂环己烷中的溶液，并在室温搅拌反应1小时。然后加入400毫升水，混合物用二氯甲烷提取三次且合并的有机相用饱和氯化钠水溶液洗涤两次。以硫酸钠干燥及后续的过滤后，在减压下除去溶剂。产物通过色谱法在硅胶上提纯(流动相：环己烷/乙酸乙酯＝40∶1)。这产生5.2克(理论值的100％)所需产物，为E/Z异构体混合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.47-8.05(m，2H)，7.58-7.42(m，1H)，6.70-6.05(m，2H)，1.90-1.78(m，3H)。

GC-MS(方法10)：R_t＝2.64and 2.70mm

MS(ESIpos)：m/z＝181(M+H⁺)⁺

实施例44A

3-溴-1-{4-硝基-2-[(1E)-丙-1-烯-1-基]苯基}吡啶-2(1H)-酮

将0.96克(5.52毫摩尔)3-溴吡啶-2(1H)-酮溶于17毫升DMSO。将混合物冷却至0℃，并如此加入1.00克(5.52毫摩尔)叔丁醇钾，以使内部温度不超过30℃。在室温下1小时后，加入1.00克(5.52毫摩尔)来自实施例43A的化合物在5毫升DMSO中的溶液。在80℃3小时后，加入200毫升水和50毫升氯化钠溶液，且混合物用乙酸乙酯提取三次。合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤并以硫酸钠干燥。溶剂在减压下除去且产物通过色谱法在硅胶上提纯(流动相：环己烷/乙酸乙酯＝4∶1)。这产生935毫克(理论值的49％)所需化合物，为E/Z异构体混合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.52-8.27(m，1H)，8.22-8.16(m，1H)，8.13-8.04(m，1H)，7.76-7.61(m，2H)，6.65-5.90(m，3H)，1.83-1.69(m，3H)。

HPLC(方法1)：R_t＝4.20min。

MS(DCI，m/z)：335(M+H)⁺。

实施例45A

1-{4-硝基-2-[(1E)-丙-1-烯-1-基]苯基}-3-乙烯基吡啶-2(1H)-酮

将929毫克(2.77毫摩尔)来自实施例44A的化合物溶于14毫升无水二氧杂环己烷中，并加入64毫克(0.06毫摩尔)四(三苯基膦)钯(0)。在室温下，缓慢加入1.06克(3.33毫摩尔)三丁基乙烯基锡，并在添加已经结束之后，将该混合物在回流下加热21小时。使反应溶液冷却并通过硅藻土过滤。滤饼随后由乙酸乙酯洗涤且合并的有机滤液在减压下浓缩至干。产物通过色谱法在硅胶上提纯(流动相：环己烷/乙酸乙酯＝4∶1)。这产生568毫克(理论值的70％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.52-8.24(m，1H)，8.21-8.14(m，1H)，7.78-7.58(m，2H)，6.79-6.68(m，1H)，6.65-6.52(m，1H)，6.47-6.38(m，1H)，6.20-5.90(m，3H)，5.39-5.28(m，1H)，1.83-1.70(m，3H)。

HPLC(方法1)：R_t＝4.33min

MS(ESIpos)：m/z＝283(M+H⁺)⁺

实施例46A

3-(2-羟乙基)-1-{4-硝基-2-[(1E)-丙-1-烯-1-基]苯基}吡啶-2(1H)-酮

将452克(1.60毫摩尔)来自实施例45A的化合物溶于1.7毫升无水四氢呋喃中并冷却到0℃。缓慢加入488毫克(176毫摩尔)9-硼杂双环[3.3.1]壬烷(在四氢呋喃中的0.5M溶液)，且混合物在室温下搅拌2小时。然后将混合物再次冷却至0℃，并缓慢加入8毫升的1N氢氧化钠水溶液。在添加已经结束之后，在该温度滴加1.6毫升30％的过氧化氢溶液。搅拌混合物在0℃搅拌30分钟并随后用1.3毫升40％的亚硫酸氢钠溶液洗涤以消除过氧化物，并用500毫升乙酸乙酯稀释。除去有机相，且含水相用乙酸乙酯提取两次。合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，以硫酸钠干燥，并且在过滤后在减压下浓缩至干。产物通过色谱法在硅胶上提纯(流动相：环己烷/乙酸乙酯＝2∶1)。这产生514毫克(理论值的100％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.51-8.24(m，1H)，8.22-8.14(m，1H)，7.68-7.55(m，1H)，7.48-7.36(m，2H)，6.61-6.50(m，1H)，6.37-6.26(m，1H)，6.09-6.86(m，1H)，4.63-4.56(m，1H)，3.63-3.54(m，2H)，2.65-2.56(m，2H)，1.83-1.69(m，3H)。

HPLC(方法1)：R_t＝3.71min

MS(ESIpos)：m/z＝301(M+H⁺)⁺

实施例47A

1-(4-氨基-2-丙基苯基)-3-(2-羟乙基)吡啶-2(1H)-酮

将520毫克(1.73毫摩尔)来自实施例46A的化合物溶于10毫升THF中。加入30毫克披钯碳，且混合物在室温在氢气氛中在大气压下氢化。然后通过硅藻土过滤反应混合物，滤饼由THF洗涤三次并从滤液除去溶剂。反应产物进一步反应而无需另外提纯。这产生471毫克(理论值的89％)所需产物。

HPLC(方法1)：R_t＝3.00min

MS(ESIpos)：m/z＝273(M+H⁺)⁺

实施例48A

3-烯丙基-1-(2-甲基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

在已经通过加热干燥的烧瓶中，起初将1.50克(4.85毫摩尔)来自实施例22A的化合物、1.44克(9.46毫摩尔)氟化铯和0.561克(0.48毫摩尔)四(三苯基膦)钯(0)加入30毫升脱气THF中。滴加2.04克(121毫摩尔)2-烯丙基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环(dioxaborolan)在5毫升脱气THF中的溶液，且混合物在回流下加热过夜。混合物随后用二氯甲烷稀释，并加入水。相分离后，含水相用二氯甲烷提取三次。合并的有机相以硫酸钠干燥并浓缩。产物通过色谱法在硅胶上提纯，产生1.18克(理论值的62％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.31(d，1H)，8.18(dd，1H)，7.57(d，1H)，7.46(dd，1H)，7.44-7.38(m，1H)，6.35(t，1H)，5.96(dddd，1H)，5.16-5.06(m，2H)，3.20(d，2H)，2.15(s，3H)。

HPLC(方法2)：R_t＝4.05min。

MS(ESIpos，m/z)：271(M+H)⁺。

实施例49A

3-(3-羟丙基)-1-(2-甲基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

在0℃，将18.5毫升(9.25毫摩尔)9-硼杂双环[3.3.1]壬烷在THF中的0.5M溶液缓慢滴加到处于4毫升THF中的1.00克(3.70毫摩尔)来自实施例48A的化合物中。在室温下一小时后，将混合物再次冷却至0℃，并滴加18.5毫升(18.5毫摩尔)氢氧化钠在水中的1M溶液。将混合物在0℃再搅拌30分钟，并随后如此加入3.24毫升30％的过氧化氢溶液，以使温度不超过30℃。将混合物在冰冷却下搅拌30分钟，然后加入乙酸乙酯和继之以11克(40毫摩尔)亚硫酸氢钠溶液。分离有机相，且含水相用乙酸乙酯提取两次。合并的有机相由饱和氯化钠水溶液洗涤。有机相以硫酸钠干燥并随后在减压下蒸发至干。残余物在硅胶上色谱处理(环己烷/乙酸乙酯1∶4)。这产生1.03克(理论值的83％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.31(d，1H)，8.18(dd，1H)，7.66-7.51(m，1H)，7.47-7.38(m，2H)，6.33(t，1H)，4.46(t，1H)，3.46-3.38(q，2H)，2.52-2.45(m，2H)，2.15(s，3H)，1.73-1.62(m，2H)。

HPLC(方法1)：R_t＝3.51min。

MS(DCI，m/z)＝289(M+H)⁺

实施例50A

1-(4-氨基-2-甲基苯基)-3-(3-羟丙基)吡啶-2(1H)-酮

将475毫克(1.65毫摩尔)来自实施例49A的化合物溶于48毫升THF中。然后加入50毫克(0.05毫摩尔)披钯碳，且混合物在氢气氛中在大气压下在室温氢化。然后过滤混合物，滤饼由THF洗涤三次并从滤液除去溶剂。反应产物进一步反应而无需另外提纯。

HPLC(方法1)：R_t＝2.82min。

MS(DCI，m/z)：259(M+H)⁺。

实施例51A

3-溴-1-(2，6-二甲基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

将2.81克(16.1毫摩尔)的3-溴吡啶-2(1H)-酮(O.S.Tee，M.Pavent，J.Am.Chem.Soc.1982，104，4142-4146.)溶于100毫升DMF中。将混合物冷却至0℃，并加入2.71克(24.2毫摩尔)叔丁醇钾。除去冷却，且混合物在室温下搅拌30分钟。加入3.00克(17.7毫摩尔)1-氟-2，5-二甲基-4-硝基苯，且混合物在80℃搅拌18小时，在100℃搅拌36小时并在120℃搅拌18小时。然后将混合物加入至水中并用乙酸乙酯提取三次。合并的有机相以硫酸钠干燥。残余物通过色谱法在硅胶上提纯(环己烷/乙酸乙酯4∶1)。这产生2.04克(理论值的38％)所需化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.19(s，2H)，8.14(dd，1H)，7.62(dd，1H)，6.43(t，1H)，2.11(s，6H)。

HPLC(方法1)：R_t＝4.13min。

MS(ESIpos，m/z)：323(M+H)⁺。

实施例52A

1-(2，6-二甲基-4-硝基苯基)-3-乙烯基吡啶-2(1H)-酮

将2.00克(6.19毫摩尔)来自实施例51A的化合物溶于31毫升无水二氧杂环己烷中，并加入2.36克(7.42毫摩尔)三丁基乙烯基锡和143毫克(0.124毫摩尔)四(三苯基膦)钯且混合物在100℃下搅拌5小时。使混合物冷却并通过硅藻土过滤。滤饼用乙酸乙酯洗涤三次，且合并的滤液在减压下浓缩至干。残余物通过色谱法在硅胶上提纯(环己烷/乙酸乙酯4∶1)。这产生846毫克(理论值的51％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.17(s，2H)，7.78(dd，1H)，7.48(dd，1H)，6.75(dd，1H)，6.48(dd，1H)，6.14(dd，1H)，5.33(dd，1H)，2.10(s，6H)。

HPLC(方法1)：R_t＝4.25min

MS(ESIpos)：m/z＝271(M+H)⁺

实施例53A

1-(2，6-二甲基-4-硝基苯基)-3-(2-羟乙基)吡啶-2(1H)-酮

在冰冷却下，将902毫克(7.40毫摩尔)9-硼杂双环[3.3.1]壬烷在14.8毫升四氢呋喃中的溶液加入至800毫克(296毫摩尔)来自实施例52A的化合物中。混合物在室温下搅拌3小时并随后冷却至0℃，并以15分钟加入591毫克(14.8毫摩尔)的氢氧化钠水溶液。如此加入2.60毫升30％的过氧化氢溶液，以使得温度不超过30℃。在添加已经结束之后，将混合物在0℃搅拌30分钟。在冰冷却下，将8.73克(32.6摩尔)亚硫酸氢钠在12毫升水中的溶液加入该反应混合物中。混合物由50毫升乙酸乙酯稀释，除去有机相且含水相用乙酸乙酯提取两次。合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，以硫酸钠干燥并在减压下蒸发至干。残余物通过色谱法在硅胶上提纯(环己烷/乙酸乙酯1∶2)。这产生765毫克(理论值的89％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.15(s，2H)，7.46(dd，1H)，7.35(dd，1H)，6.37(dd，1H)，4.62(dd，1H)，4.25(d，1H)，2.62(dd，2H)，2.08(s，6H)。

HPLC(方法1)：R_t＝3.59min

MS(ESIpos)：m/z＝289(M+H)⁺

实施例54A

3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)-1-(2，6-二甲基-4-硝基苯基)吡啶-2(1H)-酮

将760毫克(2.64毫摩尔)来自实施例53A的化合物和0.55毫升(3.9毫摩尔)三乙胺溶于7毫升无水N，N-二甲基甲酰胺中。加入16毫克(0.13毫摩尔)4-二甲基氨基吡啶和1.09克(3.95毫摩尔)叔丁基(氯)二苯基硅烷，且混合物在室温下搅拌2小时。然后将混合物加入至水中，并在相分离后用乙酸乙酯提取三次。合并的有机相用水洗涤两次，以硫酸钠干燥，过滤并在减压下蒸发。残余物通过色谱法在硅胶上提纯(环己烷/乙酸乙酯5∶1)。这产生971毫克(理论值的58％)所需产物。

HPLC(方法2)：R_t＝5.97min

MS(ESIpos)：m/z＝527(M+H)⁺

实施例55A

1-(4-氨基-2，6-二甲基苯基)-3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)吡啶-2(1H)-酮

将970毫克(1.84毫摩尔)来自实施例54A的化合物溶于20毫升THF中。然后加入200毫克披钯碳，且混合物在室温在氢气氛中在大气压下氢化。然后通过硅藻土过滤反应混合物，滤饼由THF洗涤三次并从滤液除去溶剂。反应产物(1.00克)进一步反应而无需另外提纯。

HPLC(方法2)：R_t＝4.99min

MS(ESIpos)：m/z＝497(M+H)⁺

实施例56A

N-[((5S)-3-{4-[3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3，5-二甲基-苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]-5-氯噻吩-2-甲酰胺

将800毫克(1.61毫摩尔)来自实施例55A的化合物溶于15毫升无水乙睛中，并加入385克(1.77毫摩尔)来自实施例1A的化合物和539毫克(2.41毫摩尔)高氯酸镁。该混合物在室温下搅拌5.5小时。然后加入652毫克(4.03毫摩尔)1，1-羰二咪唑和19毫克(0.16毫摩尔)N，N-二甲基氨基吡啶，且混合物在回流下加热18小时。混合物被冷却并被加入至100毫升水和100毫升乙酸乙酯中。在相分离后，含水相用乙酸乙酯提取两次且合并的有机相以硫酸钠干燥。过滤之后，将混合物在减压下蒸发至干。残余物通过色谱法在硅胶上提纯(环己烷/乙酸乙酯1∶2)。这产生664毫克(理论值的55％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.99(t，1H)，7.70(d，1H)，7.63-7.45(m，4H)，7.48-7.31(m，9H)，7.28(dd，1H)，7.20(d，1H)，6.32(t，1H)，4.90-4.81(m，1H)，4.22(dd，1H)，3.89-3.82(m，3H)，3.62(t，2H)，2.76(dd，2H)，1.94(s，6H)，0.95(s，9H)。

HPLC(方法2)：R_t＝5.92min

MS(ESIpos)：m/z＝740(M+H)⁺

工作实施例

实施例1

5-氯-N-{[(5S)-3-{3-氯-4-[3-(羟甲基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基}噻吩-2-甲酰胺

将367毫克(1.41毫摩尔；在THF中1M)四丁基氟化铵加入至515毫克(0.703毫摩尔)来自实施例6A的化合物在8毫升THF中的溶液中。在室温3小时后，混合物由水、饱和氯化钠水溶液和乙酸乙酯稀释。由乙酸乙酯提取含水相，且合并的有机相以硫酸钠干燥。过滤后，从混合物除去溶剂且残余物通过色谱法在硅胶上提纯(二氯甲烷/甲醇20∶1)。这产生278毫克(理论值的78％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.97(t，1H)，7.87(dd，1H)，7.69(d，1H)，7.59(ddd，1H)，7.56-7.48(m，2H)，7.46-7.38(m，1H)，7.20(d，1H)，6.37(dd，1H)，5.15(dd，1H)，4.93-4.82(m，1H)，4.33(br.d，2H)，4.24(dd，1H)，3.90(dd，1H)，3.62(dd，2H)。

HPLC(方法2)：R_t＝3.88min。

MS(DCI，m/z)：494(M+H)⁺。

实施例2

5-氯-N-[((5S)-3-{4-[3-(羟甲基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲基苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]噻吩-2-甲酰胺

将530毫克(0.74毫摩尔)来自实施例9A的化合物溶于9毫升THF中。加入1.5毫升四丁基氟化铵在THF中的1M溶液，且混合物在室温搅拌30分钟。加入少许水，浓缩混合物且产物通过制备HPLC提纯。这产生335毫克(理论值的93％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：9.00(t，1H)，7.70(d，1H)，7.55-7.49(m，3H)，7.39(d，1H)，7.23(d，1H)，7.20(d，1H)，6.36(t，1H)，5.14(s，宽，1H)，4.90-4.82(m，1H)，4.38-4.29(m，2H)，4.22(t，1H)，3.91-3.85(m，1H)，3.62(t，2H)，2.01(s，3H)。

HPLC(方法3)：R_t＝1.66min。

MS(ESIpos，m/z)：474/476(³⁵Cl/³⁷Cl)(M+H)⁺。

实施例3

5-氯-N-[((5S)-3-{4-[3-(羟甲基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲氧基苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]噻吩-2-甲酰胺

类似于实施例2，将491毫克(0.67毫摩尔)来自实施例12A的化合物用THF中的四丁基氟化铵去甲硅烷基化。产物通过制备HPLC提纯。这产生287毫克(理论值的87％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：9.02(t，1H)，7.71(d，1H)，7.50-7.46(m，1H)，7.45(d，1H)，7.34(dd，1H)，7.26(d，1H)，7.20(d，1H)，7.12(dd，1H)，6.29(t，1H)，5.11(s，宽，1H)，4.91-4.83(m，1H)，4.30(s，宽，2H)，4.25(t，1H)，3.91(dd，1H)，3.73(s，3H)，3.65-3.60(m，2H)。

HPLC(方法3)：R_t＝1.63min。

MS(ESIpos，m/z)：490/492(³⁵Cl/³⁷Cl)(M+H)⁺。

实施例4

5-氯-N-({(5S)-3-[4-[3-(羟甲基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-(三氟甲基)苯基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)噻吩-2-甲酰胺

类似于实施例2，将370毫克(0.48毫摩尔)来自实施例15A的化合物用THF中的四丁基氟化铵去甲硅烷基化。产物通过制备HPLC提纯。这产生200毫克(理论值的78％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.99(t，1H)，8.13(d，1H)，7.83(dt，1H)，7.69(d，1H)，7.56(d，1H)，7.53(dd，1H)，7.47-7.42(m，1H)，7.20(d，1H)，6.35(t，1H)，5.17(t，1H)，4.94-4.86(m，1H)，4.33-4.27(m，3H)，3.99-3.93(m，1H)，3.67-3.61(m，2H)。

HPLC(方法3)：R_t＝1.82min。

MS(ESIpos，m/z)：528/530(³⁵Cl/³⁷Cl)(M+H)⁺。

实施例5

5-氯-N-[((5S)-3-{3-氯-4-[3-(2-羟乙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]噻吩-2-甲酰胺

将400毫克(0.79毫摩尔)来自实施例21A的化合物溶于6毫升THF和4毫升水的混合物中。加入161毫克(0.016毫摩尔)四氧化锇在叔丁醇中的2.5M溶液和509毫克(2.38毫摩尔)高碘酸钠，且混合物在室温搅拌20小时。然后将混合物由水稀释并用二氯甲烷提取，干燥和浓缩。将残余物溶于4毫升THF和4毫升水的混合物中，并加入30.0毫克(0.79毫摩尔)硼氢化钠。将混合物在室温搅拌1小时并随后由水稀释和用二氯甲烷提取。将有机相干燥，浓缩并通过制备HPLC提纯。这产生47毫克(理论值的12％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：8.97(t，1H)，7.85(d，1H)，7.69(d，1H)，7.62-7.56(m，1H)，7.51-7.47(m，1H)，7.42-7.36(m，2H)，7.20(d，1H)，6.27(t，1H)，4.92-4.84(m，1H)，4.59(t，1H)，4.24(t，1H)，3.90(dd，1H)，3.65-3.55(m，4H)，3.18-3.15(m，2H)。

HPLC(方法5)：R_t＝1.94min。

MS(ESIpos，m/z)：508/510(³⁵Cl₂/³⁵Cl³⁷Cl)(M+H)⁺。

实施例6

5-氯-N-[((5S)-3-{4-[3-(2-羟乙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲基苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]噻吩-2-甲酰胺

在冰冷却下，将400毫升的甲醇中的1.25N盐酸加入至43.8克(60.3毫摩尔)来自实施例27A的化合物中。在1小时后，混合物由二氯甲烷稀释，并随后除去含水相。有机相用水洗涤两次，以硫酸钠干燥，并且在过滤后在减压下浓缩至于。将残余物施加于硅胶并使用环己烷和乙酸乙酯的梯度色谱处理。合并包含产物的级分并在减压下浓缩至干。这产生19.6克(理论值的66％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.98(t，1H)，7.70(d，1H)，7.55-7.47(m，2H)，7.40(dd，1H)，7.35(dd，1H)，7.25-7.17(m，2H)，6.26(t，1H)，4.90-4.82(m，1H)，4.60(t，1H)，4.22(t，1H)，3.92-3.84(m，1H)，3.66-3.54(m，4H)，2.60(t，2H)，2.01(s，3H)。

LC-MS(方法5)：R_t＝1.87min

MS(ESIpos)：m/z＝488(M+H)⁺

实施例7

5-氯-N-{[(5S)-3-{4-[3-(2-羟乙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲氧基苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基}噻吩-2-甲酰胺

在0℃，将37克(49毫摩尔)来自实施例33A的化合物溶于313毫升的在甲醇中的1.25N盐酸中。在1小时后，将溶液在减压下蒸发并用二氯甲烷稀释。有机相用水洗涤两次，以硫酸镁干燥，并且在过滤后在减压下蒸发至干。将残余物在硅胶上使用二氯甲烷和甲醇的梯度色谱处理。合并产物级分并在减压下蒸发至干。这产生19克(理论值的78％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝9.00(t，1H)，7.70(d，1H)，7.45(d，1H)，7.35(dd，1H)，7.31(dd，1H)，7.25(d，1H)，7.20(d，1H)，7.15-7.08(m，1H)，6.19(t，1H)，4.91-4.83(m，1H)，4.60(t，1H)，4.25(t，1H)，3.94-3.87(m，1H)，3.74(s，3H)，3.66-3.53(m，4H)，2.62-2.55(m，2H)。

MS(ESIpos)：m/z＝504(M+H)⁺

实施例8

N-{[(5S)-3-{4-[3-(2-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}乙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-(甲氧基甲基)苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基}-5-氯噻吩-2-甲酰胺

在冰冷却下，将135毫升的甲醇中的1.25N盐酸加入至27克(34毫摩尔)来自实施例41A的化合物中。在该温度再搅拌混合物45分钟。在冰冷却下，使用1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，并用二氯甲烷反复提取冷溶液。合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤并以硫酸镁干燥。将混合物在减压下蒸发至干，且残余物在硅胶上使用二氯甲烷和甲醇的梯度色谱处理。合并包含产物的级分并在减压下浓缩至干。这产生16.4克(理论值的89％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.98(t，1H)，7.72-7.66(m，2H)，7.62-7.56(m，1H)，7.40(dd，1H)，7.36(dd，1H)，7.27(d，1H)，7.20(d，1H)，6.25(t，1H)，4.90-4.82(m，1H)，4.60(t，1H)，4.27-4.08(m，3H)，3.94-3.87(m，1H)，3.65-3.55(m，4H)，3.18(s，3H)，2.60(t，2H)。

LC-MS(方法6)：R_t＝1.96min

MS(ESIpos)：m/z＝518(M+H⁺)⁺

实施例9

5-氯-N-{[(5S)-3-{4-[3-(2-羟乙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-丙基苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基}噻吩-2-甲酰胺

将450毫克(1.65毫摩尔)来自实施例47A的化合物溶于10毫升无水乙睛中，并加入395毫克(1.82毫摩尔)来自实施例1A的化合物和552毫克(2.47毫摩尔)高氯酸镁。该混合物在室温下搅拌3.5小时。然后加入669毫克(4.13毫摩尔)羰二咪唑和20毫克(0.16毫摩尔)4-二甲基氨基吡啶，且混合物在回流下加热3小时。在室温下18小时后，加入10毫克(0.08毫摩尔)4-二甲基氨基吡啶，且混合物在60℃搅拌6小时。然后将混合物加入至100毫升水中并用50毫升乙酸乙酯稀释。在相分离后，含水相用50毫升乙酸乙酯提取两次。合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，以硫酸钠干燥并随后在减压下浓缩。残余物使用乙腈/水混合物通过制备HPLC提纯。这产生28毫克(理论值的3％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.98(t，1H)，7.70(d，1H)，7.54-7.45(m，2H)，7.40-7.31(m，2H)，7.23-7.17(m，2H)，6.25(t，1H)，4.90-4.81(m，1H)，4.22(dd，1H)，3.92-3.85(m，1H)，3.65-3.50(m，4H)，2.62-2.58(m，2H)，2.28(t，2H)，1.50-1.32(m，2H)，0.77(t，3H)。

HPLC(方法2)：R_t＝4.11min

MS(DCI，m/z)＝516(M+H)⁺

实施例10

5-氯-N-{[(5S)-3-{4-[3-(3-羟丙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3-甲基苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基}噻吩-2-甲酰胺

将580毫克(2.24毫摩尔)来自实施例50A的化合物溶于12.7毫升无水乙睛中，并加入538毫克(2.47毫摩尔)来自实施例1A的化合物和751毫克(3.37毫摩尔)高氯酸镁。该混合物在室温下搅拌3.5小时。然后加入437毫克(2.69毫摩尔)羰二咪唑和27毫克(0.23毫摩尔)4-二甲基氨基吡啶，且混合物在回流下加热18小时。然后将混合物加入至100毫升水中并用50毫升乙酸乙酯提取三次。合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，以硫酸钠干燥并随后在减压下浓缩。残余物通过制备HPLC提纯。这产生175毫克(理论值的16％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.99(t，1H)，7.70(d，1H)，7.57-7.47(m，2H)，7.40-7.31(m，2H)，7.23(d，1H)，7.20(d，1H)，6.26(t，1H)，4.90-4.81(m，1H)，4.46(dd，1H)，4.22(t，1H)，3.91-3.85(m，1H)，3.62(t，2H)，3.42(ddd，2H)，3.31(s，1H)，2.48-2.42(m，1H)，2.01(s，3H)，1.67(ddd，2H)。

HPLC(方法2)：R_t＝3.92min

MS(DCI，m/z)＝502(M+H)⁺

实施例11

5-氯-N-[((5S)-3-{4-[3-(2-羟乙基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基]-3，5-二甲基苯基}-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]噻吩-2-甲酰胺

将660毫克(0.891毫摩尔)来自实施例56A的化合物溶于20毫升THF中，并加入512毫克(1.96毫摩尔)四丁基氟化铵。在1小时后，将混合物在减压下浓缩至干。残余物通过色谱法在硅胶上提纯(流动相：二氯甲烷/甲醇10∶1；1％三乙胺)。这产生396毫克(理论值的85％)所需产物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，δ/ppm)：δ＝8.98(t，1H)，7.69(d，1H)，7.42(dd，1H)，7.38(d，1H)，7.25(dd，1H)，7.19(d，1H)，6.29(t，1H)，4.90-4.81(m，1H)，4.60(t，1H)，4.20(t，1H)，3.86(dd，1H)，3.64-3.52(m，4H)，2.62(t，2H)，1.95(s，6H)。

HPLC(方法1)：R_t＝3.92min

MS(ESIpos)：m/z＝502(M+H)⁺

B.药理学活性的评估

本发明化合物用于治疗血栓栓塞病症的适合性可使用下列测定体系展现：

a)测试描述(体外)

a.1)在缓冲液中因子Xa抑制的测量

为了测定上列物质的因子Xa抑制，构造生物测试体系，其中因子Xa底物的转变被用于测定人因子Xa的酶活性。在此，因子Xa从肽底物分裂氨基甲基香豆素，荧光测量该物质。所述测定在微量滴定板中实施。

在22℃，将待测试物质以不同浓度溶于二甲基亚砜中并用人因子Xa(1.3nmol/l，溶于50毫摩尔/升Tris缓冲液[C，C，C-三(羟甲基)氨基甲烷]、100毫摩尔/升氯化钠、5毫摩尔/升氯化钙、0.1％BSA[牛血清白蛋白]中，pH7.4)培养30分钟。然后加入底物(来自Bachem公司的5微摩尔/升Boc-Ile-Glu-Gly-Arg-AMC)。在培养30分钟后，在360纳米波长激发样品并在460纳米测量发射。将具有测试物质的试验批次测量的发射与没有测试物质的对照批料(仅有二甲基亚砜代替处于二甲基亚砜中的测试物质)相比较并由浓度/活性关系计算IC₅₀值。

a.2)缓冲液中凝血酶抑制的测量

为了测定上列物质的凝血酶抑制，构造生物测试体系，其中凝血酶底物的转变被用于测定人凝血酶的酶活性。在此，凝血酶从肽底物分裂氨基甲基香豆素，荧光测量该物质。所述测定在微量滴定板中实施。

在22℃，将待测试物质以不同浓度溶于二甲基亚砜中并用人凝血酶(0.06nmol/l，溶于50毫摩尔/升Tris缓冲液[C，C，C-三(羟甲基)氨基甲烷]、100毫摩尔/升氯化钠、0.1％BSA[牛血清白蛋白]中，pH7.4)培养15分钟。然后加入底物(来自Bachem公司的5微摩尔/升Boc-Asp(OBzl)-Pro-Arg-AMC)。在培养30分钟后，在360纳米波长激发样品并在460纳米测量发射。将具有测试物质的试验批次测量的发射与没有测试物质的对照批料(仅有二甲基亚砜代替处于二甲基亚砜中的测试物质)相比较并由浓度/活性关系计算IC₅₀值。

a.3)选择性的测定

为了展现所述物质对于凝血酶和因子Xa抑制的选择性，检验测试物质对其它人丝氨酸蛋白酶的抑制，例如对因子XIIa、因子XIa、胰蛋白酶和纤溶酶。为了测定因子XIIa(10nmol/升，来自Kordia)、因子XIa(0.4nmol/升，来自Kordia)、胰蛋白酶(83mU/毫升，来自Sigma)和纤溶酶(0.1微克/毫升，来自Kordia)的酶活性，将这些酶溶解(50毫摩尔/升的Tris缓冲液[C，C，C-三(羟甲基)氨基甲烷]、100毫摩尔/升的氯化钠、0.1％BSA[牛血清白蛋白]、5毫摩尔/升的氯化钙，pH7.4)并用处于二甲基亚砜中的不同浓度的测试物质以及用不含测试物质的二甲基亚砜培养15分钟。然后通过添加适当的底物开始酶促反应(对于因子XIIa，来自Bachem的5μmol/l的H-Pro-Phe-Arg-AMC；对于胰蛋白酶，来自Bachem的5μmol/l的Boc-Ile-Glu-Gly-Arg-AMC；对于因子XIa，来自Bachem的5μmol/l的Boc-Glu(OBzl)-Ala-Arg-AMC；对于纤溶酶，来自Bachem的50μmol/l的MeOSuc-Ala-Phe-Lys-AMC)。在22℃30分钟的培养时间后，测量荧光(激发：360纳米，发射：460纳米)。将具有测试物质的试验批次测量的发射与不含测试物质的对照批料(仅有二甲基亚砜代替处于二甲基亚砜中的测试物质)相比较，并由浓度/活性关系计算IC₅₀值。

a.4)血浆样品中可能的抑制剂的因子Xa抑制活性的测定

为了测定血浆样品中因子Xa的抑制，通过来自响尾蛇毒素的蛋白酶活化血浆中存在的因子X。然后通过添加显色底物测量可能的抑制剂的因子Xa活性或其抑制。

将不同浓度的待测试物质溶于二甲基亚砜中并与来匹卢定(Refludan)水溶液(10微克/毫升)混合。在透明96孔平底板中，将30微升柠檬酸盐血浆(Octapharma)与10微升底物稀释液混合。然后，加入20微升响尾蛇毒素(拉塞尔蝰蛇毒(RVV)；RVV试剂：Pentapharm 121-06，最终浓度0.6mU)在氯化钙水溶液缓冲液(氯化钙的最终浓度0.05M)的溶液或20微升不含RVV试剂的氯化钙水溶液(氯化钙的最终浓度0.05M)(作为未激发样品的参照)。在添加20微升ChromozymX底物(最终浓度1.6毫摩尔/升，Bachem L-1565，在水中稀释)之后，在20分钟期间内使用405纳米的测量滤光片在SpectraFluor Reader中每分钟测量样品。在达到最大信号的约70％(大约12分钟)时测定IC₅₀值。

来自该测试的代表性活性数据列于下表1中：

表1

实施例编号	IC₅₀[nM]
实施例编号	IC₅₀[nM]	2	21
6	70	2	21
6	70	8	167
10	40	8	167

a.5)血浆样品中可能的抑制剂的凝血酶抑制活性的测定

将不同浓度的待测试物质溶于二甲基亚砜中并由水稀释。在白色96孔平底板中，将20微升物质稀释液与20微升的Ca缓冲液(200mMHepes+560mM氯化钠+10mM氯化钙+0.4％PEG)中的Ecarin溶液(Ecarin试剂，来自Sigma E-0504，每批料最终浓度20mU)或与20微升Ca缓冲液(作为未激发对照)混合。进一步地，加入20微升荧光凝血酶底物(来自Bachem公司I-1120，最终浓度50微摩尔/升)和20微升柠檬酸盐血浆(来自Octapharma公司)并彻底均化。在20分钟期间内在SpectraFluorplus Reader中使用360纳米的激发滤光片和465纳米的发射滤光片每分钟测量所述板。在达到最大信号的大约70％(大约12分钟)时测定IC₅₀值。

来自该测试的代表性活性数据列于下表2中：

表2

实施例编号	IC₅₀[nM]
实施例编号	IC₅₀[nM]	2	198
6	186	2	198
6	186	8	16
10	74	8	16

a.6)凝血酶生成测定(凝血酶生成图(Thrombogram))

测试物质对凝血酶生成图(根据Hemker的凝血酶生成测定)的影响在人血浆(来自Octapharma公司的Octaplas

)中体外测定。在根据Hemker 的凝血酶生成测定中，通过测量底物I-1140(Z-Gly-Gly-Arg-AMC，Bachem)的荧光分裂产物测定凝固血浆中凝血酶的活性。使用来自Thrombinoscope公司的试剂(PPP试剂：30pM重组体组织因子，HEPES中的24μM磷脂)来起动凝固反应。所述反应在不同浓度的测试物质或相应溶剂的存在下实施。此外，使用来自Thrombinoscope公司的凝血酶校准器，其酰胺分解活性是计算血浆样品中的凝血酶活性所需要的。

所述测试根据制造商(Thrombinoscope BV)的说明书实施：4微升测试物质或溶剂，76微升血浆和20微升PPP试剂或凝血酶校准器在37℃培养5分钟。在添加20微升的在20mM Hepes中的2.5mM凝血酶底物、60mg/mLBSA、102mM氯化钙之后，在120分钟期间内每20秒测量凝血酶生成。使用来自Thermo Electron公司的配备390/460纳米滤光片对和分配器的荧光计(Fluoroskan Ascent)实施测量。使用Thrombinoscope软件，计算凝血酶生成图并图形地呈现。计算的是下列参数：滞后时间、到达峰值的时间、峰值、ETP(内源性凝血酶有效性)和起动尾部(starttail)。

a.7)抗凝固活性的测定

测试物质的抗凝固活性在人血浆、兔子血浆和大鼠血浆中体外测定。为此，以柠檬酸钠/血液的1/9混合比抽出血液，使用0.11摩尔浓度的柠檬酸钠溶液作为接收体。在血液已经抽出之后，立即将其彻底地混合并在大约4000g离心15分钟。移液管移走上层清液。

在不同浓度的测试物质或相应溶剂存在下，使用商售测试试剂盒(来自Boehringer Mannheim的Neoplastin

或来自Instrumentation Laboratory的HemolianceRecombiPlastin)测定前凝血酶时间(PT，同义词：凝血激酶时间，快速测试)。在37℃用血浆培养测试化合物3分钟。然后通过添加凝血激酶起动凝固，并测定凝固出现时的时间点。测定造成前凝血酶时间加倍的测试物质的浓度。

在不同浓度的测试物质或相应溶剂存在下，使用商售测试试剂盒(来自Roche公司的凝血酶试剂)测定凝血酶时间(TT)。在37℃用血浆培养测试化合物3分钟。然后通过添加凝血酶试剂起动凝固，并测定凝固出现时的时间。测定造成凝血酶时间加倍的测试物质的浓度。

在不同浓度的测试物质或相应溶剂存在下，使用商售测试试剂盒(来自Roche公司的PTT试剂)测定活化部分凝血激酶时间(APTT)。在37℃用血浆和PTT试剂(脑磷脂，高岭土)培养测试化合物3分钟。然后通过添加25mM氯化钙起动凝固，并测定凝固出现时的时间。测定造成APTT加倍的测试物质的浓度。

a.8)凝血弹性描记法(凝血弹性图)

借助于来自Pentapharm公司及其附件、杯子和针的凝血弹性描绘器ROTEM实施凝血弹性描记法。在预先抽出至来自Sarstedt公司的柠檬酸钠Monovettes中的全血中实施测量。将Monovette中的血液使用振荡器保持运动并在37℃预培养30分钟。制备氯化钙在水中的2M原液。将其由0.9％的氯化钠水溶液稀释1∶10。对于所述测量，起初将20微升的该200mM氯化钙溶液加入所述杯子中(氯化钙最终浓度12.5mM)。加入3.2微升物质或溶剂。通过添加300微升全血起始测量。在所述添加后，使用移液管尖端将混合物略略吸入移液管并在不产生气泡的情况下再次释放。所述测量在2.5小时时期内实施或者当纤维蛋白溶解出现时停止。为了进行评估，测定下列参数：CT(凝固时间/[秒])，CFT(凝块形成时间/[秒])，MCF(最大凝块硬度/[毫米])和α角[°]。每3秒测定测量点并图形地表示，y轴为MCF[毫米]而x轴为时间[秒]。

a.9)血栓结合的凝血因子凝血酶和因子Xa的抑制

在由抗凝血剂启动治疗之前、在治疗中断期间或即使在治疗时形成的血液凝块包含大量凝血因子，其可能有利于发展血栓形成。这些凝血因子牢固地结合至所述血栓且不能被冲洗掉。在某些临床情况中，这可能导致患者出现危险。在以下实施的测试中，能检验在人血栓中的生物(促凝血的(prokoagulatorisch))活性的凝血酶和因子Xa二者。

体外形成的血栓

从人血浆体外形成血栓并检验结合的凝血因子凝血酶和因子Xa的活性。为此，将300微升血浆与30微升脂囊泡和30微升氯化钙水溶液在48孔MTP板中混合并培养30分钟。该步骤及其后步骤在37℃实施并具有恒定搅动(300转/分)。将形成的血栓转移至新的48孔MTP板中并在10分钟时期内用0.9％的氯化钠溶液洗涤两次，在洗涤步骤过程中将所述血栓轻轻地抹在滤纸上。将血栓转移至缓冲液B(Owens VeronalBuffer，1％BSA)中并培养15分钟，轻轻地抹在滤纸上并在处于缓冲液B中的不同浓度的测试物质中培养30分钟。然后如上所述洗涤凝块两次。轻抹所述血栓并转移至缓冲液D(240微升Owren’s Veronal Buffer，1％BSA和15.6mM氯化钙)中并在有或者没有0.6μM凝血酶原的情况下培养45分钟。通过添加75微升的1％EDTA溶液停止反应。在缓冲液A(7.5mM Na₂EDTA×2H₂O，175mM氯化钠，1％BSA，pH8.4)中的血栓中或在来自最后步骤的上层清液中分别测量凝血酶活性。为此，以50μM的最终浓度使用底物I-1120，并在荧光板读数器(360/465nm)中测量所得荧光。

该血栓结合的凝血酶的活性不能通过治疗相关浓度的选择性因子Xa抑制剂抑制。相反，其能够用双重因子IIa/因子Xa抑制剂或因子IIa参考抑制剂抑制。

在添加凝血酶原后，如果存在血栓结合的因子Xa(凝血酶原酶复合物)，则形成新的凝血酶，其通过荧光底物检测。该重新开始的凝血酶形成不能通过纯凝血抑制剂阻止；但是，其能够通过双重因子IIa/因子Xa抑制剂或通过选择性因子Xa参考抑制剂抑制。

所述血栓结合的凝血酶活性的生物活性通过添加荧光标记的纤维蛋白原测试，所述荧光标记的纤维蛋白原通过活性凝血酶转变为纤维蛋白并与血栓结合。为此，如上所述形成血栓并在250微升用Alexa488标记的纤维蛋白原溶液(100微克/毫升)和30微升的100mM氯化钙水溶液(有或者没有不同浓度的测试物质)中培养。在荧光板读数器中在合适的波长测量上层清液的荧光。此外，每15分钟洗涤血栓四次并通过荧光显微镜评估。来自上层清液的荧光的降低和血栓荧光的增加能够通过双重因子IIa/因子Xa抑制剂抑制，但不能通过因子Xa参考抑制剂抑制。

体内形成心内血栓(Intrakardiale Thromben)(患者材料)

用在心脏手术期间取自患者左心室的血栓重复实验。为此，将所述血栓解冻并分成多个块(湿重10-100毫克)。根据规程，在反复洗涤后或不洗涤的情况下使用所述血栓，并类似于以上所述的方法使用所述底物I-1120(最终浓度100μM)测量凝血酶活性。

a.10)具体诊断减弱的凝固以及内源性毒血症小鼠和大鼠中的器官功能

凝血酶/抗凝血酶复合物

凝血酶/抗凝血酶复合物(在下文称为“TAT”)是通过凝固活化内源形成的凝血酶的量度。使用ELISA检定(Enzygnost TAT micro，Dade-Behring)测定TAT。通过离心从柠檬酸盐血液获得血浆。将50微升TAT样品缓冲液加入至50微升血浆中，并略略摇动样品以及在室温下培养15分钟。用抽吸滤出样品，并用洗涤缓冲液(300微升/孔)洗涤孔3次。在洗涤期间，通过轻拍所述板除去液体。加入共轭溶液(100微升)，并在室温下培养所述板15分钟。抽吸样品，并用洗涤缓冲液(300微升/孔)洗涤孔3次。然后加入显色底物(100微升/孔)，将所述板在黑暗中在室温下培养30分钟，加入终止溶液(100微升/孔)并在492纳米测量发色(Saphire板读数器)。

器官功能的参数

测定多个参数，其能够对需要得到的关于通过给药LPS实现的不同内脏功能的限制，以及其能够实现测试物质的治疗效果提供结论。将柠檬酸盐血液或任选的锂/肝素血液离心，并从血浆测定所述参数。通常，测定下列参数：肌酸酐(Kreatinin)、尿素、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白质、总白蛋白和纤维蛋白原。所述值给出的指征涉及肾脏、肝脏、心血管系统和血管的功能。

炎症的参数

由内毒素触发的炎症反应的程度能够通过炎症介质的增加而检测，所述炎症介质例如白细胞介素(1、6、8和10)、肿瘤坏死因子α或血浆中的单核细胞趋化蛋白-1。为此，可以使用ELISAs或luminex系统。

b)抗血栓形成活性的测定(体内)

b.1)动静脉分流和出血模型(Kombi-模型大鼠)

使用仲丁硫巴比妥(Inactin)(150-180毫克/千克)麻醉重量300-350克的禁食雄性大鼠(菌株：HSD CPB：WU)。在动静脉分流中根据ChristopherN.Berry等人，Br.J.Pharmacol.(1994)，113，1209-1214描述的方法引发血栓形成。为此，暴露出左侧颈静脉和右侧颈动脉。通过使用长度10cm的聚乙烯软管(PE60)的体外旁路连接两个血管。在中间，将该聚乙烯软管连接至长度3cm的另一聚乙烯软管(PE160)，其包含粗糙化的尼龙丝线排列成环从而形成凝血酶原表面。使体外循环保持15分钟。然后除去旁路并立即称重具有血栓的尼龙丝线。在实验开始之前测定尼龙丝线自身的重量。

为了测定出血时间，在打开所述旁路循环后，立即使用刀片将所述大鼠尾部的尖端剪短3毫米。然后将所述尾部放入保持在37℃温度的生理盐水中，并在15分钟时期内观察从切割处的出血。测定直至出血停止至少30秒时的时间(初始出血时间)、在15分钟时期内的总出血时间(累积出血时间)和经由收集的血红蛋白光度测定失血量。

在体外循环建立且所述尾部尖端被剪短之前，将测试物质给药至清醒状态的动物，要么经由对侧的颈静脉静脉内作为单次推注给药或者作为具有后续的持续输注的推注给药，要么使用咽管经口给药。

c)药物动力学的测定(体内)

为了测定体内药物动力学，将测试物质溶于各种配制剂(例如血浆、乙醇、DMSO、PEG400等等)或这些增溶剂的混合物并静脉内或经口给药于小鼠、大鼠、狗或猴子。静脉内给药作为快速推注或作为输注实施。给药剂量为0.1-5毫克/千克。在至多26小时期间内的不同时间间隔借助于导液管或作为牺牲血浆()采集血液样品。此外，在一些情况中，还采集器官、组织和尿样品。测试样品中物质的定量测定使用在所讨论的基质中调节的校准样品进行。样品中存在的蛋白质通过由乙腈或甲醇沉淀除去。然后将样品通过HPLC使用反相柱在2300HTLC系统(Cohesive Technologies，Franklin，MA，USA)中分级。所述HPLC系统经由涡轮离子喷射界面(Turbo Ion Spray Interface)连接至API 3000三重四极杆(Triple Quadropole)质谱仪(Applied Biosystems，Darmstadt，Germany)。使用经验证的动力学分析程序分析血浆浓度-时间曲线。

通过体外测试在使用Caco-2细胞或在具体转运体中过表达的细胞的通量检定中检验用于转运蛋白的物质的亲合性(Troutman MD，Thakker DR，Pharm.Res.20(8)1210-1224(2003)；Schwab D，Fischer H，Tabatabaei A，Poli S，Huwyler J，J.Med.Chem.46，1716-1725(2003)；Merino G，Jonker JW，Wagenaar E，Pulido MM，Molina AJ，Alvarez AI，Schinkel AH，Drug Metab.Dispos.33(5)614-618(2005))。为此，将细胞在24或96孔滤板上培养4-15天。为了测定渗透，将HEPES缓冲液中的物质顶端地(A)或者底部地(B)加入至细胞中，并将混合物培养2小时。在0小时和2小时后，从顺式-和反式-隔室取出样品并通过LC-MS/MS分析。使用由Schwab等人出版的公式计算Papp值。当Papp(B-A)/Papp(A-B)比率为＞2或＜0.5时，将物质分类为活性转运。

d)内源毒血症活性的测定(体内)

使用大鼠或小鼠实施检查。在小鼠模型(NMRI，雄性)中，腹膜内注射50毫克/千克LPS(大肠杆菌血清型055:B5，Sigma-Aldrich)。在经由尾静脉静脉内注射、皮下注射、腹膜内注射或使用胃管经口给药之前至多一小时，给药所述测试物质。在LPS给药四小时后，麻醉(ketavet/Rompun)动物并通过手术打开腹部。将柠檬酸钠溶液(3.2％w/v)(公式：以克计的体重/13乘以100微升)注入到底腔静脉中，并在30秒后采集血液样品(大约1毫升)。从所述血液测定多个参数，例如细胞血液组分(特别是红细胞、白细胞和血小板)、乳酸浓度、凝固活化(TAT)或者器官功能障碍或器官衰竭和凋亡的参数。

e)在大鼠上用于DIC测试的方法描述

将LPS(大肠杆菌O55B5，由Sigma制造，溶于PBS中)以250微克/千克的剂量静脉内给药于雄性Wistar大鼠的尾静脉中(给药体积2毫升/千克)。将测试物质溶于PEG400/H2O 60％/40％中并在LPS注射之前30分钟经口给药(给药体积5毫升/千克)。在LPS注射后1、5或4小时，通过穿刺心脏对处于终端麻醉(

100毫克/千克i.p.)的动物抽血，并获得用于测定纤维蛋白原、PT、TAT和血小板数目的柠檬酸盐血浆。任选地，获得血清用于测定肝脏酶、肾功能参数和细胞活素(Cytokine)。使用可商购的ELISAs(R&D Systems)测定TNFα和IL-6。

还可测量器官功能的直接参数，例如左和右心室压、动脉压、排尿、肾灌注和血液气体以及酸/碱状态。

C.药物组合物的示例性实施方案

本发明化合物能够以以下方式转变为药物制剂：

片剂：

组成：

100毫克的本发明化合物、50毫克的乳糖(一水合物)、50毫克的玉米淀粉(天然的)，10毫克的聚乙烯吡咯烷酮(PVP25)(来自BASF，Ludwigshafen，德国)以及2毫克的硬脂酸镁。

片剂重212毫克。直径8毫米，曲率半径12毫米。

制备：

将本发明化合物、乳糖和淀粉的混合物由PVP在水中的5％溶液(m/m)造粒。颗粒被干燥并随后与硬脂酸镁混合5分钟。使用常规压片机压制该混合物(参见上文以规格化所述片剂)。作为指南，将15kN的压缩力用于所述压制。

可口服给药的悬浮液：

组成：

1000毫克的本发明化合物、1000毫克的乙醇(96％)、400毫克的

(来自FMC公司的黄原胶，Pennsylvania，USA)和99克的水。

10毫升口服悬浮液相当于单剂量的本发明化合物100毫克。

制备：

将所述Rhodigel悬浮在乙醇中，并将本发明化合物加入至悬浮液中。在搅拌下加入水。将混合物搅拌大约6小时直至所述Rhodigel完全溶涨。

可口服给药的溶液：

组成：

500毫克的本发明化合物、2.5克的聚山梨酸酯和97克的聚乙二醇400。20克口服溶液相当于单剂量的本发明化合物100毫克。

制造：

在搅拌下将本发明化合物悬浮在聚乙二醇和聚山梨酸酯的混合物中。持续搅拌直至本发明化合物完全溶解。

静脉内溶液：

将本发明化合物以低于饱和溶解度的浓度溶解在生理学可接受的溶剂中(例如等渗氯化钠溶液、葡萄糖溶液5％和/或PEG 400溶液30％)。所述溶液通过过滤灭菌并填充至无菌和无热原的注射容器中。

Claims

1.下式的化合物，

其中

n表示数字0、1、2或3，

R¹表示氯，三氟甲氧基，甲基，乙基，正丙基，甲氧基，甲氧基甲基或乙氧基甲基，

R²表示氢或甲基，

或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于

n表示数字0、1或2，

R²表示氢或甲基，

或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。

3.根据权利要求1或2所述的化合物，其特征在于

n表示数字0、1或2，

R¹表示甲基，甲氧基或甲氧基甲基，

R²表示氢，

或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。

4.根据权利要求1至3中任一所述的化合物，其特征在于

n表示数字1或2，

R¹表示甲基，

R²表示氢，

或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。

5.用于制备根据权利要求1所述的式(I)的化合物或者其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种的方法，其特征在于

[A]在第一步骤中，使下式的化合物

与下式的化合物反应

在该式中n、R¹和R²具有权利要求1中给出的含义，

以产生下式的化合物，

在该式中n、R¹和R²具有权利要求1中给出的含义，

且在第二步骤中，在光气或光气等同物存在下环化以产生式(I)的化合物

或者

[B]下式的化合物

在该式中n、R¹并R²具有权利要求1中给出的含义，

与下式的化合物反应

其中

X表示卤素，优选溴或者氯，或者羟基。

6.根据权利要求1-4中任一所述的化合物，用于治疗和/或预防疾病。

7.根据权利要求1-4中任一所述的化合物用于制备用来治疗和/或预防疾病的药物的用途。

8.根据权利要求1-4中任一所述的化合物用于制备用来治疗和/或预防血栓栓塞病症的药物的用途。

9.根据权利要求1-4中任一所述的化合物用于在体外防止血液凝固的用途。

10.药物，其包括根据权利要求1-4中任一所述的化合物结合惰性无毒的药学上合适的助剂。

11.药物，其包括根据权利要求1-4中任一所述的化合物结合其它活性成分。

12.根据权利要求10或11所述的药物，用于治疗和/或预防血栓栓塞病症。

13.用于在人和动物中治疗和/或预防血栓栓塞病症的方法，使用抗凝固有效量的至少一种根据权利要求1-4中任一所述的化合物、根据权利要求10-12中任一所述的药物或根据权利要求7或8获得的药物。

14.用于在体外防止血液凝固的方法，其特征在于加入抗凝固有效量的根据权利要求1-4中任一所述的化合物。

15.根据权利要求1-4中任一所述的化合物用于制备用来治疗和/或预防肺动脉高血压的用途。

16.根据权利要求1-4中任一所述的化合物用于制备用来治疗和/或预防下列病症的药物的用途：脓毒症、全身性炎性综合征(SIRS)、脓毒性器官功能障碍、脓毒性器官衰竭和多器官衰竭、急性呼吸困难综合征(ARDS)、急性肺损伤(ALI)、脓毒性休克、DIC(“弥漫性血管内凝血”)和/或脓毒性器官衰竭。

17.如权利要求1-4中任一所定义的化合物，用于治疗和/或预防血栓栓塞病症的方法中。