CN101716200A - 一种活血通脉、清热解毒的药物组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
一种活血通脉、清热解毒的药物组合物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种活血通脉、清热解毒的药物组合物及其制备方法和应用。本发明的药物组合物由重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料组成，其中的毛冬青提取物是由毛冬青的茎或者茎和根的部位提取得到，并进一步制备成片剂、胶囊、颗粒、口服液或注射剂。本发明的药物组合物不仅能有效治疗血栓闭塞性脉管炎或中心性视网膜炎、静脉曲张、冠状动脉硬化性心脏病及小儿肺炎等疾病，而且扩大了毛冬青的可药用部位，从而大大减缓了因毛冬青资源减少造成的药材来源短缺。
Description
技术领域
本发明涉及一种活血通脉、清热解毒的药物组合物，尤其是涉及一种包含毛冬青提取物为活性物质的药物组合物，以及该药物组合物的制备方法和制药用途。
背景技术
毛冬青(拉丁名为I.lex pubescens Hook)，为常绿灌木或小乔木，高3～4米，常生长于海拔180～500米的山坡灌丛中和荒山草丛中。除湖北、四川外，广泛分布于长江以南地区。在本领域中经常提到的中药材毛冬青，通常是指冬青科冬青属植物毛冬青的干燥根。
毛冬青具有清热解毒、活血通络的功效。文献记载其主治风热感冒、肺热喘咳、咽痛、乳蛾、痢疾、牙龈肿痛、胸痹心痛、中风偏瘫、血栓闭塞性脉管炎、丹毒、烧烫伤、痈疽和中心性视网膜炎，并具有扩张血管、活血通脉、抗菌消炎等功效，适用于血栓闭塞性脉管炎和中心性视网膜炎。目前临床上广泛应用于心绞痛、心肌梗塞、血栓闭塞性脉管炎、中心性视网膜炎、扁桃体炎、咽喉炎和小儿肺炎等疾病的治疗。
由于毛冬青的适应症多，临床用途广，因此本领域对于毛冬青药理活性和新制剂的研究越来越关注。例如，在申请号为00127593的本国专利申请中，公开了将干燥的毛冬青根经提取得到的浸膏制备成常规制剂，用于治疗勃起功能障碍症。在申请号为200410155347的本国专利申请中，公开了由毛冬青(根)经水或乙醇提取得到的提取物制成的滴丸。在申请号为200510024652的本国专利申请中，公开了用毛冬青干膏制成的软胶囊。在申请号为200510087740和200510101842的本国专利申请中，分别公开了由毛冬青(根)提取物制备得到的注射剂和冻干粉针剂。
但是，由于毛冬青中药材属天然野生植物(灌木)，其生长周期长，一般需要6～8年，而原药用部位为根部，这种药用部位的单一性使得毛冬青资源越来越匮乏，已经到了濒临灭绝的地步，从而严重影响了毛冬青相关制剂的生产和销售。
申请人在对毛冬青相关产品进行研究的过程中，意外地发现毛冬青的茎在有效成分提取物的得率、含量方面，以及在药理、药效等方面与根一致。这种意外的发现为毛冬青的入药部位提供了其它的选择，从一定程度上减缓了人类对毛冬青植物的开采速度，达到了植物可再生的利用，从而更好地保护了有限的自然资源和环境。
目前没有任何报道表明可以利用毛冬青的茎，或者毛冬青的茎与根同时入药生产毛冬青片、胶囊、颗粒、口服液或注射剂的产品。
技术内容
本发明的目的是克服背景技术中原料来源单一的缺陷，提供一种用毛冬青药用根外的其他部位提取活性物质，从而得到一种具有活血通脉、清热解毒功效的药物组合物。本发明是通过以下的技术方案来实现的。
一方面，本发明公开了一种活血通脉、清热解毒的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物由重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料组成，其中所述的毛冬青提取物由毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根提取得到。
其中所述的毛冬青提取物可由包含下列步骤的方法获得：
将毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根粉碎成粗粉，加水煎煮2-4次，每次煎煮2-6小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.05-1.15(50℃)的清膏，然后加入乙醇使含醇量达到55％-75％，静置20-30小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.20-1.35(50℃)的稠膏，干燥，粉碎成细粉。
毛冬青提取物优选由包含下列步骤的方法获得：
将毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根粉碎成粗粉，加水煎煮2次，第一次煎煮4小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成50℃下相对密度为1.12的清膏，然后加入乙醇使含醇量达到70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃下相对密度为1.32的稠膏，干燥，粉碎成细粉。
根据本发明的药物组合物，其剂型可以是片剂、胶囊、颗粒、口服液或注射剂。
本发明药物组合物的剂型可以采用本领域常规的药学可接受的辅料，采用常规的制备方法进行制备。
另一方面，本发明涉及根据本发明的药物组合物的制备方法，其中：
(1)、所述片剂的制备方法包括如下步骤：将重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料依次混合，制粒，干燥，整粒，然后压片，包薄膜衣或糖衣，最后包装即得；
(2)、所述胶囊的制备方法包括如下步骤：将重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料依次混合，制粒，干燥，整粒，然后胶囊填充，最后包装即得；
(3)、所述颗粒的制备方法包括如下步骤：将重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料依次混合，制粒，干燥，整粒，然后颗粒分装，最后包装即得；
(4)、所述口服液的制备方法包括如下步骤：将重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料依次混合，配液，过滤，灌装，灭菌，灯检，最后包装即得；
(5)、所述注射剂的制备方法包括如下步骤：将重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料依次混合，配液，过滤，灌封，灭菌，灯检，最后包装即得。
另一方面，本发明还涉及本发明的药物组合物的检测方法。
高效液相条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸(15∶84∶1)溶液为流动相；检测波长为280nm；理论板数按原儿茶醛峰计算应不低于4000；
样品溶液的制备：取毛冬青茎提取物，或者根和茎提取物1.5克，精密称定，研细，取约1g，精密称定，精密加入50％甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补充减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，水浴上蒸干，残渣用水约6ml分次转移至分液漏斗中，用乙酸酸乙酯振摇提取4次(15ml、15ml、10ml、5ml)，合并乙酸乙酯提取液，水浴上蒸干，残渣加50％甲醇溶解，并转移至10ml量瓶中并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备：精密称取原儿茶醛对照品适量，加甲醇制成每1ml含原儿茶醛8μg的溶液，即得；
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，测定；
本品每克含原儿茶醛(C7H6O3)，不得少于200μg。
在进一步的一方面，本发明还涉及根据本发明的药物组合物在制备治疗血栓闭塞性脉管炎或中心性视网膜炎、静脉曲张、冠状动脉硬化性心脏病及小儿肺炎的药物中的应用。
具体实施方式
实施例1：毛冬青提取物的制备。
将毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次4小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至50℃的相对密度为1.12的清膏，然后加入乙醇使含醇量为70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃的相对密度为1.32的稠膏，在70℃干燥，粉碎成细粉。
实施例2：毛冬青根提取物和茎提取物提取收率的比较。
(1)、试验方法：取毛冬青的根和茎各5份，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次4小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至50℃的相对密度为1.12的清膏，然后加入乙醇使含醇量为70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃的相对密度为1.32的稠膏，在70℃干燥，粉碎成细粉。
(2)、结果：
表1：毛冬青茎和根提取收率的比较。
| 根(％) | 茎(％) | P | |
| 1 | 3.78±0.26 | 3.59±0.30 | ＞0.05 |
| 2 | 3.69±0.31 | 3.74±0.25 | ＞0.05 |
| 3 | 3.83±0.28 | 3.91±0.15 | ＞0.05 |
| 4 | 3.80±0.33 | 3.49±0.29 | ＞0.05 |
| 5 | 3.62±0.35 | 3.81±0.32 | ＞0.05 |
表1是采用相同的提取方法时毛冬青茎和根提取收率的比较数据，结果表明，毛冬青根提取物和茎提取物的提取收率无显著差异(P＞0.05)。
实施例3：毛冬青茎提取物的含量测定。
(1)、试验方法：采用高效液相法测定提取物中的原儿茶醛的含量
分别取根据实施例1中提取方法得到的毛冬青根和茎提取物取1.5克，精密称定，研细，取约1g，精密称定，精密加入50％甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补充减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，水浴上蒸干，残渣用水约6ml分次转移至分液漏斗中，用乙酸酸乙酯振摇提取4次(15ml、15ml、10ml、5ml)，合并乙酸乙酯提取液，水浴上蒸干，残渣加50％甲醇溶解，并转移至10ml量瓶中并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
高效液相条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸(15∶84∶1)溶液为流动相；检测波长为280nm。理论板数按原儿茶醛峰计算应不低于4000。
对照品溶液的制备精密称取原儿茶醛对照品适量，加甲醇制成每1ml含原儿茶醛8μg的溶液，即得。
本品每克含原儿茶醛(C7H603)，不得少于200μg。
(2)、结果：
表2：毛冬青根和茎提取物中原儿茶醛含量的比较。
| 根提取物(ug/g) | 茎提取物(ug/g) | |
| 1 | 258.62 | 274.69 |
| 2 | 279.30 | 262.38 |
| 3 | 284.45 | 267.39 |
| 4 | 269.65 | 259.27 |
| 5 | 274.32 | 281.92 |
表2是毛冬青根提取物和茎提取物中原儿茶醛含量的比较试验数据。结果表明，毛冬青根提取物和茎提取物中的原儿茶醛含量无显著性差异。
实施例4：毛冬青茎提取物的药效学研究
以下药理实验所用阳性对照药毛冬青冻干粉针剂和本发明毛冬青提取物的注射剂
1.对小鼠缺氧耐力的影响实验
实验方法：取健康昆明种小鼠30只，体重20～24g。随机分成对照组，毛冬青冻干粉针剂组、以及本发明毛冬青提取物的注射剂。每组10只，雌雄各半，分笼饲养。以人常规治疗剂量折算为小鼠的剂量。折算公式为：待测动物试用剂量＝已知动物给药量×待测动物的体表面积比值/已知动物的体表面积比值。对照组给生理盐水，1次/天，连续7d。于末次给药后1h，将小鼠分别置于体积为150ml磨口瓶中，内放15g钠石灰，密闭观察其存活时间。结果见表3。
表3：对小鼠常压缺氧的影响(X±SD)
| 组别 | 鼠数(只) | 平均存活时间(min) | |
| 1 | 对照组 | 10 | 14.63±4.21 |
| 2 | 毛冬青冻干粉针剂 | 10 | 33.23±4.32 |
| 3 | 本发明毛冬青提取物的注射剂 | 10 | 33.15±4.07 |
注：与对照组比较：*P＜0.01；
本发明毛冬青提取物注射剂剂和毛冬青冻干粉针剂均能提高小鼠常压缺氧耐力，平均存活时间比对照组显著延长(P＜0.01)。
2.对大鼠体内血栓形成的影响
将大鼠随机分成3组，每组10只，分别为生理盐水对照组、毛冬青冻干粉针剂组、以及本发明毛冬青提取物的注射剂。将各组动物给药(生理盐水组给予等体积的生理盐水)，每日1次，连续给药7天，末次给药后1小时，将大鼠用10％水合氯醛，按0.3g/kg体重麻醉后固定，分离左颈总动脉，在血栓仪上以2mA电流刺激血管7min后，记录血栓形成时间。结果见表4
表4对大鼠体内血栓形成的影响(X±SD)
| 组别 | 鼠数(只) | 平均存活时间(min) | |
| 1 | 对照组 | 10 | 625.65±78.21 |
| 2 | 毛冬青冻干粉针剂 | 10 | 833.23±84.32 |
| 3 | 本发明毛冬青提取物的注射剂 | 10 | 846.15±84.07 |
注：与对照组比较：*P＜0.01；
本发明毛冬青提取物注射剂和毛冬青冻干粉针剂都能延长大鼠体内血栓的形成(P＜0.01)。
3.对垂体后叶素所致大鼠缺血性心电图T波的影响
取体重250～300g Wistar大鼠30只，雌雄各半，随机分为3组，每组10只，连续ip.给药7d。各组动物于末次给药30min后，腹腔注射25％乌拉坦0.4ml/100g麻醉，仰卧固定，标准电压1mv＝15mm，走纸速度50mm/s，记录II导联心电图。舌下静脉注射垂体后叶素0.75u/kg于5s内注射完。每30s记录一次心电图。大鼠静脉注射垂体后叶素1min内，大多数表现为心率减慢，T波高耸，ST段抬高等变化。分别观察用药前后30s、1min及50min上T波增殖的变化。结果见表5。
表5对垂体后叶素所致大鼠缺血性心电图T波的影响。
注：与对照组比较：*P＜0.01：
本发明毛冬青冻干粉针剂和毛冬青注射液均能显著降低30s、1min及5min时的T波增殖(P＜0.01)；
药效学试验结果表明：与对照组相比，通过本发明的毛冬青提取物对小鼠常压耐缺氧、抑制大鼠血栓形成等均有显著性差异。
实施例5：毛冬青提取物的片剂。
将毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根粉碎成粗粉，加水煎煮2-4次，每次煎煮2-6小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成50℃下相对密度为1.09-1.14的清膏，然后加入乙醇使含醇量达到65％-75％，静置24-30小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃下相对密度为1.30-1.35的稠膏，干燥，粉碎成细粉，得到毛冬青提取物。
将重量百分比为70％的毛冬青提取物和重量百分比为30％的羧甲基淀粉混合，用70％乙醇制粒，70℃干燥，整粒，压片，包薄膜衣，即得成品。成品按《中国药典》2005年版标准方法检验，结果合格。
实施例6：毛冬青提取物的胶囊。
将毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根粉碎成粗粉，加水煎煮2-4次，每次煎煮2-6小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成50℃下相对密度为1.09-1.14的清膏，然后加入乙醇使含醇量达到65％-75％，静置24-30小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃下相对密度为1.30-1.35的稠膏，干燥，粉碎成细粉，得到毛冬青提取物。
将重量百分比为23％的毛冬青提取物和重量百分比为77％的羧甲基淀粉、淀粉混合，用70％乙醇制粒，70℃干燥，整粒，胶囊填充，即得成品。成品按《中国药典》2005年版标准方法检验，结果合格。
实施例7：毛冬青提取物的颗粒。
将毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根粉碎成粗粉，加水煎煮2-4次，每次煎煮2-6小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成50℃下相对密度为1.09-1.14的清膏，然后加入乙醇使含醇量达到65％-75％，静置24-30小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃下相对密度为1.30-1.35的稠膏，干燥，粉碎成细粉，得到毛冬青提取物。
将重量百分比为10％的毛冬青提取物和重量百分比为90％的糖粉、可溶性淀粉混合，用70％乙醇制粒，70℃干燥，整粒，颗粒分装，即得成品。成品按《中国药典》2005年版标准方法检验，结果合格。
实施例8：毛冬青提取物的口服液。
将毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根粉碎成粗粉，加水煎煮2-4次，每次煎煮2-6小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成50℃下相对密度为1.09-1.14的清膏，然后加入乙醇使含醇量达到65％-75％，静置24-30小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃下相对密度为1.30-1.35的稠膏，干燥，粉碎成细粉，得到毛冬青提取物。
将重量百分比为10％的毛冬青提取物和重量百分比为90％的纯化水混合溶解，过滤，灌装，灭菌，即得成品。成品按《中国药典》2005年版标准方法检验，结果合格。
实施例9：毛冬青提取物的注射剂
将毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根粉碎成粗粉，加水煎煮2-4次，每次煎煮2-6小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成50℃下相对密度为1.09-1.14的清膏，然后加入乙醇使含醇量达到65％-75％，静置24-30小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃下相对密度为1.30-1.35的稠膏，干燥，粉碎成细粉，得到毛冬青提取物。
将重量百分比为10％的毛冬青提取物和重量百分比为90％的注射用水混合溶解，过滤，灌封，灭菌，即得成品。成品按《中国药典》2005年版标准方法检验，结果合格。
Claims (7)
1.一种活血通脉、清热解毒的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物由重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料组成，其中所述的毛冬青提取物由毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根提取得到。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的毛冬青提取物由包含下列步骤的方法获得：
将毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根粉碎成粗粉，加水煎煮2-4次，每次煎煮2-6小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.05-1.15(50℃)的清膏，然后加入乙醇使含醇量达到55％-75％，静置20-30小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.20-1.35(50℃)的稠膏，干燥，粉碎成细粉。
3.如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于所述的毛冬青提取物由包含下列步骤的方法获得：
将毛冬青的茎，或者毛冬青的茎和根粉碎成粗粉，加水煎煮2次，第一次煎煮4小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成50℃下相对密度为1.12的清膏，然后加入乙醇使含醇量达到70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至50℃下相对密度为1.32的稠膏，干燥，粉碎成细粉。
4.如权利要求1-3中任一项所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物的剂型是片剂、胶囊、颗粒、口服液或注射剂。
5.如权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于：
(1)、所述片剂的制备方法包括如下步骤：将重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料依次混合，制粒，干燥，整粒，然后压片，包薄膜衣或糖衣，最后包装即得；
(2)、所述胶囊的制备方法包括如下步骤：将重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料依次混合，制粒，干燥，整粒，然后胶囊填充，最后包装即得；
(3)、所述颗粒的制备方法包括如下步骤：将重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料依次混合，制粒，干燥，整粒，然后颗粒分装，最后包装即得；
(4)、所述口服液的制备方法包括如下步骤：将重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料依次混合，配液，过滤，灌装，灭菌，灯检，最后包装即得；
(5)、所述注射剂的制备方法包括如下步骤：将重量百分比为90％～10％的毛冬青提取物和重量百分比为10％～90％的药学可接受的辅料依次混合，配液，过滤，灌封，灭菌，灯检，最后包装即得。
6.如权利要求1-3中任一项所述的药物组合物的含量测定方法，其特征在于所述方法为：
高效液相条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸(15∶84∶1)溶液为流动相；检测波长为280nm；理论板数按原儿茶醛峰计算应不低于4000；
样品溶液的制备：取毛冬青茎提取物，或者根和茎提取物1.5克，精密称定，研细，取约1g，精密称定，精密加入50％甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补充减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，水浴上蒸干，残渣用水约6ml分次转移至分液漏斗中，用乙酸酸乙酯振摇提取4次(15ml、15ml、10ml、5ml)，合并乙酸乙酯提取液，水浴上蒸干，残渣加50％甲醇溶解，并转移至10ml量瓶中并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备：精密称取原儿茶醛对照品适量，加甲醇制成每1ml含原儿茶醛8μg的溶液，即得；
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，测定；
本品每克含原儿茶醛(C7H6O3)，不得少于200μg。
7.如权利要求1-4中任一项所述的药物组合物在制备治疗血栓闭塞性脉管炎或中心性视网膜炎、静脉曲张、冠状动脉硬化性心脏病及小儿肺炎的药物中的应用。
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