CN101700270B - 一种用于神经衰弱的中药组合物及其制备方法和质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药组合物，该中药组合物是由一定比例的黄芪和灵芝药材及辅料经加工制成。该中药组合物对于神经衰弱，失眠健忘，食少体倦，气短多汗等症有良好的疗效。本发明同时还公开了该中药组合物的制备方法和质量控制方法。

Description

一种用于神经衰弱的中药组合物及其制备方法和质量控制方法

技术领域

本发明涉及一种中药组合物，具体讲涉及一种用于神经衰弱的中药组合物，本发明也涉及该中药组合物的制备方法和质量控制方法。属于中药制药技术领域。

技术背景

神经衰弱是一种常见的神经症，其病因可能与大脑过度紧张或情绪的长期压抑有关。神经衰弱主要表现为精神特别容易兴奋又特别容易疲劳：兴奋时病人往往控制不住回忆和联想，一点刺激都难以忍受；疲劳时多数病人很快会感到脑力不够用，头昏脑胀，打不起精神，注意力不集中或不能持久集中，记忆力下降，甚至浑身疲乏体力不支。其次，病人总感到心情紧张，放松不下来，而且特别容易烦恼、激动或发脾气，有的人甚至出现轻度焦虑抑郁或疑病观念。近些年来由于社会竞争压力，神经衰弱的患者称上升趋势，从事脑力劳动的人患神经衰弱的更多；曾有调查发现，在15～59岁的居民中总患病率为13.03％，占全部神经症病例的58.7％；严重的影响了人们的健康。西医在治疗神经衰弱方面目前临床上主要应用安定、舒乐安定、硝基安定、舒宁、海洛神等药物，易成瘾，且毒副作用严重，不宜长期服用，停药易反复，病情加重。中医在治疗神经衰弱方面的中成药很多，由于每个品种的症瘊都不完全相同，适应人群受到一定限制，而且这些产品均存在疗效不够理想，易复发等缺陷。因此探索一种疗效好，且无毒副作用的治疗神经衰弱的中成药非常必要。

发明内容

本发明的目的在于针对本领域现有技术所存在的上述缺陷，通过发掘祖国丰富的中医药资源，结合我们多年的临床用药经验，为临床治疗神经衰弱提供了一种安全有效，疗效稳定，治愈率高，且无任何毒副作用的中药组合物。

中医理论：神经衰弱的发病机制，多属气血和脏腑功能失调，气虚血运不畅，经络运行受阻。治疗则以气血运行通畅为原则。本发明所述的中药组合物是在此基础上结合设计者多年的临床实践，辩证与辨病相结合，通过对祖国中医药资源加以精选而制得。灵芝，《神农本草经》中列为养命无毒，久服不伤人之上品药物。具有补气安神，止咳平喘的功效；用于眩晕不寐、心悸气短，虚劳咳喘。黄芪，《本草逢原》载黄芪能补五脏诸虚，治脉弦自汗，泻阴火，去肺热，无汗则发，有汗则止。现代药理实验研究证明：灵芝具有中枢抑制作用，灵芝的多种剂型及其发酵浓缩均能减少小鼠的自发性活动，能增强巴比妥类药物的中枢抑制作用；能抑制过高的免疫反应，具有明显的免疫增强作用和抗肿瘤作用；同时还证明灵芝能刺激造血系统，保护肝细胞免受中毒损伤，能提高动物对缺氧的耐受力，消除超氧阴离子自由基和抑制脂持过氧化，能明显降低血液粘度，降低胆固醇和甘油三脂，预防血栓的形成；具有强心作用，能扩张冠状动脉，改善心肌微循环等作用。本发明以灵芝为主药，配以补气固表，利尿的黄芪，以增强灵芝的补益功效。全方配伍简明，各药共同补益，相得益彰，共奏养心安神，补气益血。用于神经衰弱，失眠健忘，食少体倦，气短多汗的辅助治疗疗效显著。

本发明的另一目是提供该中药组合物的制备方法和质量控制方法。

本发明是这样实现的：

按重量组分计算，本发明中药组合物是由如下重量配比的原料制备而成：

黄芪600～1600份  灵芝200～800份  淀粉5～40份。

经优选后确定本发明中药组合物原料的最优配比为：

黄芪1000份  灵芝500份  淀粉15份。

该中药组合物可制备成片剂、胶囊剂等剂型。

本发明中药组合物片剂的制备方法如下：

取黄芪加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得黄芪膏粉；取灵芝酌予碎断，加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得灵芝膏粉。将灵芝膏粉，黄芪膏粉及淀粉，混匀，制粒，干燥，压片，包衣，即得本发明片剂。

本发明中药组合物胶囊剂的制备方法如下：

取黄芪加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得黄芪膏粉；取灵芝酌予碎断，加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得灵芝膏粉。将灵芝膏粉，黄芪膏粉及淀粉，混匀，制粒，干燥，装入胶囊，即得本发明胶囊剂。

为了有效控制本发明产品的质量，本发明人还制定了其质量控制方法，包括含量测定部分和定性鉴别部分。

定量方法如下：

供试品溶液制备：取装量差异项下的本品内容物，研细，取约1.5g，精密称定，加硅藻土2g，混合均匀，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取5小时至提取液无色，提取液回收甲醇并浓缩至干。残渣加水25ml使溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取5次(40、30、30、30、20ml)，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的浓氨溶液洗涤2次(20、10ml)，再用正丁醇饱和的水洗涤3次(20、20、10ml)，正丁醇液蒸干，残渣加水20ml温热溶解，通过D₁₀₁型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，装柱长12cm)，以水70ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇30ml洗脱，弃去30％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

对照品溶液制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液3μl，对照品溶液1μl与2μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13∶6∶2)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃烘约5～7分钟，至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B薄层扫描法)进行扫描，波长：λs＝530nm，λR＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品收度积分值，计算，即得。

本品每粒含黄芪以黄芪甲苷(C₄₁H₆₈0₁₄)计，不得少于0.15mg。

定性鉴别方法可以包含以下中的一种或全部：

(1)取本品1-3g，内容研细，加乙醇30ml，置水浴上加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取灵芝对照药材2g，加水40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇30ml充分搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液4μl，分别点与同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的：上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在于对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(2)取本品1-3g，内容物研细，精密称定，加硅藻土2g混合均匀，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取5小时至提取液无色，提取液回收甲醇并浓缩至干。残渣加水25ml使溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取5次(40、30、30、30、20ml)，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的浓氨溶液洗涤2次(20、10ml)，再用正丁醇饱和的水洗涤3次(20、20、10ml)，正丁醇液蒸干，残渣加水20ml温热溶解，通过D₁₀₁型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，装柱长12cm)，以水70ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇30ml洗脱，弃去30％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取黄芪对照药材粉末3g，加水50ml，置水浴上加热回流2小时，滤过，滤液用水饱和的正丁醇萃取3次，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的浓氨溶液洗涤2次，再用正丁醇饱和的水溶液洗涤2次，正丁醇液蒸干，残渣加水20ml，温热溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，装柱长12cm)以水70ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇30ml洗脱，弃去30％乙醇洗脱液，继用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法，吸取供试品溶液与对照药材溶液各2-5μl，分别点与同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃烘约5-7分钟，至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

主要药效学实验

实验目的：通过对本发明胶囊剂和灵芝片的镇静、安神、抗惊厥、抗疲劳及改善记忆等作用的药理实验研究，将本发明胶囊剂和灵芝片进行对比，观察其药理作用的强弱。

试验方法：本发明胶囊剂和灵芝片对小鼠自主活动的影响；对戊巴比妥钠致小鼠睡眠的影响；对抗尼克刹米致小鼠惊厥的作用；对小鼠抗疲劳的作用；对小鼠改善记忆力的作用。

一、对小鼠自主活动的影响

实验材料

1、动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22g。

2、药物：灵芝片组(市场购买)；本发明胶囊剂(按照实施例2制得)大、中、小三个剂量组。药物在实验前用

蒸馏水配置，灌胃给药。

实验方法

昆明种小鼠50只，雌雄各半，体重18～22g，随机分成5组，每组10只。对照组灌胃同体积的蒸馏水；本发明胶囊剂组分别灌胃给药1.2、2.4、4.8g生药/kg；灵芝片组灌胃给药4.8g生药/kg。连续给药7d，每日1次，末次给药1h后，将小鼠置于小动物自主活动测定仪中，先适应环境5min，然后开始记时，测定5min内小鼠自主活动次数。

实验结果：见表1

表1对小鼠自主活动的影响(x±s)

与对照组相比＊＊P＜0.01；与灵芝片组比ΔP＜0.05。

结果表明：本发明胶囊剂组和灵芝片组可明显减少小鼠自主活动次数，且有一定量效关系，剂量越大，作用越明显。本发明胶囊剂大、中、小剂量组和灵芝片组小鼠自主活动次数明显低于对照组(P＜0.01)；本发明胶囊剂大剂量组和灵芝片组相比较有显著性差异(P＜0.05)。可见，本发明胶囊剂组比灵芝片组镇静作用强。

二、对戊巴比妥钠致小鼠睡眠的影响

实验材料

1、动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22g。

2、药物：灵芝片组(市场购买)；本发明胶囊剂(按照实施例2制得)大、中、小三个剂量组；戊巴比妥钠。药物在实验前用蒸馏水配置，灌胃给药。

实验方法

昆明种小鼠50只，雌雄各半，体重18～22g，随机分成5组，每组10只。对照组灌胃同体积的蒸馏水；本发明胶囊剂组分别灌胃给药1.2、2.4、4.8g生药/kg；灵芝片组灌胃给药4.8g生药/kg。连续给药7d，每日1次，末次给药后1h称重并腹腔注射0.3％戊巴比妥钠0.15ml/10g，记录小鼠发生睡眠的潜伏期及睡眠时间。

实验结果：见表2

表2对戊巴比妥钠致小鼠睡眠的影响(x±s)

与对照组相比＊＊P＜0.01；与灵芝片组比ΔP＜0.05。

结果表明：本发明胶囊剂组和灵芝片组能显著缩短戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏期，延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间。本发明胶囊剂大、中、小剂量组和灵芝片组与对照组相比有极显著性的差异(P＜0.01)；本发明胶囊剂大剂量组和灵芝片组相比较有显著性差异(P＜0.05)。可见，本发明胶囊剂组比灵芝片组的安神作用强。

三、对抗尼克刹米致小鼠惊厥的作用

实验材料

1、动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22g。

2、药物：灵芝片组(市场购买)；本发明胶囊剂(按照实施例2制得)大、中、小三个剂量组；尼克刹米。药物在

实验前用蒸馏水配置，灌胃给药。

实验方法

昆明种小鼠50只，雌雄各半，体重18～22g，随机分成5组，每组10只。对照组灌胃同体积的蒸馏水；本发明胶囊剂组分别灌胃给药1.2、2.4、4.8g生药/kg；灵芝片组灌胃给药4.8g生药/kg。连续给药7d，每日1次，末次给药后1h称重并腹腔注射尼克刹米240mg/kg，即刻开始秒表记时，记录小鼠惊厥潜伏期及10min内阵发性惊厥的发生阵数，30min内不发生惊厥者，潜伏期记为30min。

实验结果：见表3

表3对抗尼克刹米致小鼠惊厥的作用(x±s)

与对照组相比＊＊P＜0.01；与灵芝片组比ΔP＜0.05。

结果表明：本发明胶囊剂组和灵芝片组均可延长小鼠尼克刹米所致的惊厥潜伏期，对惊厥发生的次数也具有明显减少的作用。本发明胶囊剂大、中、小剂量组和灵芝片组与对照组相比有极显著性的差异(P＜0.01)；本发明胶囊剂大剂量组和灵芝片组相比较有显著性差异(P＜0.05)。可见，本发明胶囊剂组比灵芝片组的抗惊厥作用强。

四、对小鼠抗疲劳的作用

实验材料

1、动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22g。

2、药物：灵芝片组(市场购买)；本发明胶囊剂(按照实施例2制得)大、中、小三个剂量组。药物在实验前用蒸馏水配置，灌胃给药。

实验方法

昆明种小鼠50只，雌雄各半，体重18～22g，随机分成5组，每组10只。对照组灌胃同体积的蒸馏水；本发明胶囊剂组分别灌胃给药1.2、2.4、4.8g生药/kg；灵芝片组灌胃给药4.8g生药/kg。连续给药10d，每日1次，末次给药1h后，小鼠尾根部束2g的铅，分别将小鼠置于玻璃缸中游泳，水深20cm，水温保持25±0.5℃，记录游泳时间，当小鼠头部沉入水中10s不能浮出水面者即为体力耗竭，即刻计时为小鼠游泳时间。

实验结果：见表4

表4对小鼠抗疲劳的作用(x±s)

与对照组相比＊＊P＜0.01；与灵芝片组比ΔP＜0.05。

结果表明：本发明胶囊剂组和灵芝片组可明显延长小鼠的负重游泳时间，且有一定量效关系，剂量越大，负重游泳时间越长。本发明胶囊剂大、中、小剂量组和灵芝片组的小鼠负重游泳时间明显低于对照组(P＜0.01)；本发明胶囊剂大剂量组和灵芝片组相比较有显著性差异(P＜0.05)。本发明胶囊剂组比灵芝片组的抗疲劳作用强。

五、对小鼠改善记忆力的作用

实验材料

1、动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22g。

2、药物：灵芝片组(市场购买)；本发明胶囊剂(按照实施例2制得)大、中、小三个剂量组；氢溴酸东莨菪碱注

射液。药物在实验前用蒸馏水配置，灌胃给药。

实验方法

昆明种小鼠50只，雌雄各半，体重18～22g，随机分成5组，每组10只。对照组灌胃同体积的蒸馏水；本发明胶囊剂组分别灌胃给药1.2、2.4、4.8g生药/kg；灵芝片组灌胃给药4.8g生药/kg。连续给药10d，每日1次，第9d上午开始训练，训练前20min各组小鼠腹腔注射氢溴酸东莨菪碱注射液2mg/kg造成记忆缺损模型，然后将小鼠放人明箱内训练5min，末次给药1h后，将小鼠再次放人明箱内，记录小自放人明箱内到钻洞进入暗箱的潜伏期及5min错误次数。实验结果：见表5

表5对小鼠改善记忆力的作用(x±s)

与对照组相比＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；与灵芝片组比ΔP＜0.05。

结果表明：本发明胶囊剂组和灵芝片组能延长小鼠钻洞进入暗箱的潜伏期，减少错误次数，对东莨菪碱致小鼠获得性记忆障碍有改善作用。本发明胶囊剂大、中剂量组与对照组相比有极显著性的差异(P＜0.01)；本发明胶囊剂小剂量组和灵芝片组与对照组相比有显著性的差异(P＜0.05)；本发明胶囊剂大剂量组和灵芝片组相比较有显著性差异(P＜0.05)。可见，本发明胶囊剂组比灵芝片组的改善记忆力作用强。

实验结果：本发明胶囊剂和灵芝片能明显减少小鼠自主活动次数；显著缩短戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏期，延长小鼠睡眠时间；延长尼克刹米所致小鼠的惊厥潜伏期，减少小鼠惊厥发生的次数；明显延长小鼠的负重游泳时间；能延长小鼠钻洞进入暗箱的潜伏期，减少错误次数，对东莨菪碱致小鼠获得性记忆障碍有改善作用。

结论：本发明胶囊剂比灵芝片的镇静、安神、抗惊厥、抗疲劳及改善记忆等药理作用强。因此，本发明胶囊剂临床上用于神经衰弱，失眠健忘，食少体倦等作用强于灵芝片。

临床试验：

一、典型病例

1、xxx 女 32岁，患者于3个月前晚上难以入眠，且入眠后夜间易醒。白天头昏脑胀，情绪低落，记忆力下降，注意力不集中，心烦易怒，坐立不安，浑身无力，经检查被诊断为神经衰弱，服用本发明胶囊剂2个疗程后，睡眠、心烦易怒症状明显减轻，记忆力好转。再服用本发明1个疗程，睡眠恢复正常，其他症状基本消失，经检查，神经衰弱痊愈。

2、xx 女 46岁，患者于6个月前，失眠多梦，食欲不振，记忆力下降，头晕脑胀，浑身无力，经检查被诊断为失眠健忘，服用本发明胶囊剂一个疗程后，失眠多梦，健忘等症明显减轻，继续服用了两个疗程后，彻底治愈。

3、XXX 男 28岁，六年前曾患有神经衰弱，经治疗和调节，四年未发作，最近两年，由于工作压力大，经常失眠，初期服西药安眠片可见明显效果，后随病情加重逐步失效。最近4个月，经常彻夜不眠，白天头晕头沉，乏力，精神疲惫，耳鸣腰酸，记忆力下降，心烦易怒，坐立不安，食欲不振；肢倦乏力，身体状况日差，不能正常工作。经检查患神经衰弱，服用本发明2个疗程后，睡眠逐渐正常，头晕目眩，身体乏力等症消失，再服用3个疗程后，经检查，神经衰弱痊愈。

4、李某 男 35岁，公司业务主管，最近3个月由于工作压力大，经常加班熬夜，生活没有规律，入睡困难，浅睡多梦，而且经常彻夜不眠。白天精神疲惫，记忆力下降，心烦易怒，坐立不安。经诊断为：神经衰弱综合症。服用本发明2个疗程后，病情明显改善，睡眠逐渐正常。头晕目眩，身体乏力等症消失，再服用2个疗程后，入睡不再困难，睡眠每晚7-8小时，白天精神佳。神经衰弱综合症彻底痊愈。

5、xx 男 50岁，最近1个月，整天头晕脑胀，浑身无力，气短多汗，情绪低落，食欲下降，记忆力减退，去医院检查被诊断为轻度神经衰弱，服用本发明胶囊剂一个疗程后，睡眠改善了，食欲也渐渐好了，情绪也好转了，再继续服用了1个疗程后，其临床症状全部消除了。

二、治疗方法：

本发明胶囊剂(按实施例2制得)，每1粒胶囊含药材1.5g，一次口服4粒，一日三次，一个月为一个疗程。

本发明具体实施方式：

1、本发明片剂：

处方：黄芪1000g  灵芝500g  淀粉15g。

制法：取黄芪加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得黄芪膏粉；取灵芝酌予碎断，加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得灵芝膏粉。将灵芝膏粉，黄芪膏粉及淀粉，混匀，制粒，干燥，压制成1000片，包衣，即得本发明片剂。

2、本发明胶囊剂：

处方：黄芪1000g  灵芝500g  淀粉15g。

制法：取黄芪加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得黄芪膏粉；取灵芝酌予碎断，加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得灵芝膏粉。将灵芝膏粉，黄芪膏粉及淀粉，混匀，制粒，干燥，装胶囊1000粒，即得本发明胶囊剂。

3、本发明颗粒剂：

处方：黄芪1000g  灵芝500g  糊精15g。

制法：取黄芪加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得黄芪膏粉；取灵芝酌予碎断，加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得灵芝膏粉。将灵芝膏粉，黄芪膏粉及淀粉，混匀，制粒，干燥，得颗粒1000g，即得本发明颗粒剂。

Claims (7)

1.一种用于神经衰弱的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由如下重量配比的原料制成：

黄芪1000份    灵芝500份    淀粉15份。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述中药组合物制成片剂。

3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述中药组合物制成胶囊剂。

4.根据权利要求1所述中药组合物的制备方法，其特征在于：取黄芪1000份加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得黄芪膏粉；取灵芝500份酌予碎断，加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得灵芝膏粉；将灵芝膏粉，黄芪膏粉及淀粉15份，混匀，制粒，干燥，压片，包衣，即得片剂。

5.根据权利要求1所述中药组合物的制备方法，其特征在于：取黄芪1000份，加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得黄芪膏粉；取灵芝500份酌予碎断，加水煎煮二次，每次3小时，分次滤过，合并滤液，浓缩成膏，低温干燥，粉碎即得灵芝膏粉；将灵芝膏粉，黄芪膏粉及淀粉15份，混匀，制粒，干燥，装入胶囊，即得胶囊剂。

6.根据权利要求3所述的中药组合物的定性检测方法，其特征在于包括如下步骤：

1)、取本品1-3g，内容物研细，加乙醇30ml，置水浴上加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取灵芝对照药材2g，加水40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇30ml充分搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液3-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为15∶5∶1的60-90℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在于对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

2)、取本品1-3g，内容物研细，精密称定，加硅藻土2g混合均匀，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取5小时至提取液无色，提取液回收甲醇并浓缩至干；残渣加水25ml使溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取5次：第一次40ml，第二次30ml，第三次30ml，第四次30ml，第五次20ml；合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的浓氨溶液洗涤2次：第一次20ml，第二次10ml；再用正丁醇饱和的水洗涤3次：第一次20ml，第二次20ml，第三次10ml；正丁醇液蒸干，残渣加水20ml温热溶解，通过内径1.5cm装柱长12cm的D₁₀₁型大孔吸附树脂柱，以水70ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇30ml洗脱，弃去30％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；取黄芪对照药材粉末3g，加水50ml，置水浴上加热回流2小时，滤过，滤液用水饱和的正丁醇萃取3次，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的浓氨溶液洗涤2次，再用正丁醇饱和的水溶液洗涤2次，正丁醇液蒸干，残渣加水20ml，温热溶解，通过内径1.5cm装柱长12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水70ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇30ml洗脱，弃去30％乙醇洗脱液，继用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法，吸取供试品溶液与对照药材溶液2-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为15∶40∶22∶10的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃烘约5-7分钟，至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

7.根据权利要求3所述中药组合物的定量检测方法，其特征在于包括如下步骤：

供试品溶液制备：取本品内容物，研细，取约1-3g，精密称定，加硅藻土2g混合均匀，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取5小时至提取液无色，提取液回收甲醇并浓缩至干；残渣加水25ml使溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取5次：第一次40ml，第二次30ml，第三次30ml，第四次30ml，第五次20ml；合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的浓氨溶液洗涤2次：第一次20ml，第二次10ml；再用正丁醇饱和的水洗涤3次，正丁醇液蒸干，残渣加水20ml温热溶解，通过内径1.5cm装柱长12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水70ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇30ml洗脱，弃去30％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

对照品溶液制备：另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；

测定方法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液3μl，对照品溶液1μl与2μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以比例为13∶6∶2的氯仿-甲醇-水的溶液在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃烘约5～7分钟，至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照中国药典2005年版一部附录VIB薄层扫描法的薄层色谱法进行扫描，波长：λs＝530nm，λR＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品收度积分值，计算，即得。