CN101679256B

CN101679256B - 组蛋白脱乙酰酶抑制剂的单盐酸盐

Info

Publication number: CN101679256B
Application number: CN2008800163514A
Authority: CN
Inventors: J·W·J·迪肯斯; I·N·豪皮斯; Y·L·兰; C·利斯; S·C·M·斯托克布罗克斯; J·E·E·维尔茨
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2007-05-14
Filing date: 2008-05-13
Publication date: 2013-06-26
Anticipated expiration: 2028-05-13
Also published as: PT2155677E; EA018326B1; TW200914024A; CR11163A; JP2010526851A; US8759519B2; EP2155677A1; NZ599674A; ES2525456T3; HK1140479A1; CN101679256A; AU2008250047B2; CA2683195C; MX2009012332A; AR066550A1; ECSP099729A; CO6140031A2; AP2717A; AP2009005039A0; AU2008250047A1

Abstract

本发明提供了作为一种组蛋白脱乙酰酶的抑制剂的JNJ-26481585的单-HCl盐类和单-HCl盐水合物的新颖的晶体形式。本发明也关于制造这些形式的方法、用于这些方法的中间体、包含这些形式的药物组合物以及这些形式用于医学治疗上的用途，例如作为抑制增生症状(如癌症或白血病)的药物。

Description

组蛋白脱乙酰酶抑制剂的单盐酸盐

技术领域

本发明涉及JNJ-26481585(一种组蛋白脱乙酰酶的抑制剂)的单-HCl盐类和单-HCl盐水合物的新颖的结晶形式。本发明还涉及制造这些形式的方法、涉及用于这些方法的中间体、涉及包含这些形式的药物组合物以及涉及这些形式用于医学治疗上的用途，例如作为抑制增生症状(如癌症或白血病)的药物。

背景技术

许多的药物实体固体可以不同的物理形式存在，例如非晶形式、一种或数种结晶形式(例如无水或溶剂化物形式)、不同结晶形式的混合物形式或为非晶形式和结晶形式的混合物。

非晶形式为其中不存在三维长程有序排列的形式。在非晶形式中，分子相对于彼此的位置基本上为随机的，即在晶格结构上无规律的分子排列。非晶和无序材料通常具有改良改进的性质，但产生和稳定该状态可能是大的挑战。

晶体或结晶形式为其中分子相对于彼此的位置根据三维晶格结构组织化的形式。结晶形式通常包括多晶型物和拟多晶型物(pseudopolymorphs)。多晶型物为相同化合物在固体状态下因不同的分子排列所产生的不同结晶形式。由于晶格中分子的不同组装，不同的多晶型物具有不同的晶体结构。这造成了不同的晶体对称和/或晶胞参数。多晶型物彼此的区别在于其物化参数而非其化学组成。多晶现象通常难以控制并且对医疗盖仑制剂师(galenist)具有挑战性。拟多晶现象，也称为溶剂化物，为固态结晶形式的特别状况，其中化学计量或非化学计量量的溶剂分子存在或并入化合物的晶格结构中。水溶剂化物也称为水合物。

固态化学是医药工业所关心的，特别是对适合剂型的开发所涉及的那些。例如，固态形变可严重地影响药物的稳定性(保存期限)。相应于环境条件、加工处理或时间变化，亚稳态的药物固体形式可转变为晶体结构(例如由非晶形变为晶体)或溶剂化物/去溶剂化物。

相同药物的不同的结晶形式或非晶形式在此类医药上重要的性质如溶解速率、热力学溶解度和生物可利用率上，可能具有显著的差异。在患者胃液中活性成分的溶解速率可能具有治疗上的重要性，因为其使得速率具有上限，在该速率口服给药的活性成分可到达患者的血液循环中。溶解速率因此为配制固体剂型和液体药品(例如糖浆或酏剂)时的考虑因素。

同样的，不同的晶体或非晶形式可具有不同的加工处理性质，例如吸湿性、流动性、密实性等，这些可影响其作为商业生产的活性医药的适合性。

在医药的临床发展中，如果多晶型物形式无法保持恒定，则各批所用或所研究的精确剂型可能无法相比。当化合物用于临床研究或商业产品时，用于制造具有高纯度所选择的多晶型物形式的化合物的方法也是合意的，因为杂质的存在可能产生不合意的毒物学效应。某些多晶型物形式可展现增强的热动力学稳定性或可以高纯度更快速地大量制造，因此更适合包含于医药配制剂中。

JNJ-26481585具有下列结构：

该化合物为组蛋白脱乙酰酶(HDAC)的抑制剂。

于2006年2月2日公开的WO 2006/010750公开了JNJ-26481585.C₂HF₃O₂盐和二-HCl盐的非晶形式和用于制备它们的方法。

最初描述于WO 97/21701中的JNJ-26481585.C₂HF₃O₂盐的合成如方案1所示。

其中，在步骤1中，式(III)的中间体通过将式(I)的中间体与式(II)的甲醛在四氢硼酸钠的存在下于甲醇中反应而制备。

在步骤2中，式(IV)的中间体通过将式(III)的中间体与氢氧化钠于乙醇中反应而制备。

在步骤3中，式(V)的中间体通过将式(IV)的中间体与O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟胺在适合的试剂例如N’-(乙基羰亚氨基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺，单盐酸盐(EDC)和1-羟基-1H-苯并三唑(HOBT)的存在下反应而制备。该反应在二氯甲烷和四氢呋喃的混合物中进行。

在步骤4中，式(VI)的异羟肟酸C₂HF₃O₂盐通过将式(V)的中间体与三氟乙酸反应而制备。该反应在甲醇中进行。

方案I

或者，如最初描述于WO 97/21701中的，JNJ-26481585.2HCl盐通过将式(III)的中间体与羟胺在氢氧化钠的存在下反应而制备。该反应在甲醇中进行，进一步转变为二-HCl盐是在乙醇中制备。

公开于WO 2006/010750的方法，由于在不同的处理步骤中低产率和高杂质量的结果，随后需要数个色谱步骤，所以不适合用于大量制造。由于需要消耗溶剂和专门的设备进行大规模的色谱，所以使用色谱纯化化合物昂贵且对环境不利。

通过本发明解决的问题是提供JNJ-26481585的单-HCl盐类和单-HCl盐水合物的新颖的晶体形式。本发明另一方面为以高产率和高纯度得到新颖的晶体单-HCl盐和单-HCl盐水合物形式的方法。本发明HCl形式的有利的性质为优越的物化性质，包括其无吸湿本质和化学稳定性促成此化合物的成药性。

附图说明

图1为形式I的红外线(IR)光谱图示。

图2为形式I的X射线粉末衍射(XPRD)图示。

图3为形式I的差示扫描量热(DSC)曲线。

图4为作为相对湿度函数的形式I的重量变化。

图5为形式I的吸附-脱附(ADS/DES)曲线图示。

图6为形式II的IR光谱图示。

图7为形式II的XPRD图示。

图8为形式II的DSC曲线。

图9为作为相对湿度函数的形式II的重量变化。

图10为形式II的ADS/DES曲线图示。

图11为水合物形式I的IR光谱图示。

图12为水合物形式的XPRD图示。

图13为不同温度下形式I和形式II在乙醇中的浆液转化研究的XPRD图谱叠加。

图14为不同温度下形式I和形式II在乙醇/水(90/10，体积/体积％)中的浆液转化研究XPRD图谱叠加。

图15为不同温度下形式I和形式II在水中的浆液转化研究的XPRD图谱叠加。

图16为不同温度下水合物在乙醇中的浆液转化研究的XPRD图谱叠加。

发明描述

中间体的制备

A.式(I)中间体的制备

a)式(XI)的中间体可通过式(IX)的中间体与式(X)的中间体在适合的溶剂例如极性或非极性非质子烃溶剂如甲苯、二氯甲烷、乙酸异丙酯、乙酸乙酯、四氢呋喃等的存在下反应来制备。其它的芳族或脂族醛可用于此方法中。该反应也可在质子溶剂例如甲醇、乙醇、异丙醇等中进行。所述反应可在25℃至60℃的温度进行，优选在45℃的温度。由于式(X)中间体的潜在的不稳定性，不建议使用较高的温度。

b)式(VIII)的中间体可在适合的氧化物例如间氯过氧苯甲酸(MCPBA)的存在下，在适合的溶剂例如极性或非极性非质子烃溶剂例如甲苯、二氯甲烷、乙酸异丙酯、乙酸乙酯、四氢呋喃等中，通过转变式(VII)的中间体来制备。所述反应可在-20℃至40℃的温度进行，优选在0℃至5℃的温度，更优选在0℃。在较高温度时，间氯过氧苯甲酸不稳定且式(VIII)中间体可能分解。中间体(VII)完全转化为中间体(VIII)可通过添加适量的MCPBA来获得。因此MCPBA的量优选大于1当量。

c)式(I)的中间体可通过式(VIII)的中间体与式(XI)的中间体在适合的溶剂例如极性或非极性非质子烃溶剂或其混合物如甲苯、二氯甲烷、乙酸异丙酯、四氢呋喃、二异丙基乙基胺或其它季胺碱和乙酸乙酯的混合物等的存在下反应来制备。该反应可在-20℃至40℃的温度进行，优选在0℃至5℃的温度，更优选在0℃温热至25℃。

该合成伴随有式(IX)的氨基哌啶暂时保护、式(X)的对硝基苯甲醛、形成式(XI)的中间体，使得更多经取代的环氮优先反应。如果没有进行此保护作用，则随着式(IX)中间体的二个氮与式(VIII)的中间体反应，有大量的二聚物(A)和异构体(B)形成。将反应混合物温热过夜确保式(XI)的中间体完全反应成式(I)的中间体和任何剩余的式(IX)中间体完全转化为二聚物(A)，其与剩余的MCPBA可容易地在随后的酸后处理中移除。

本发明一个实施方案包括式(XI)中间体。

B.式(XIII)中间体的制备

a)式(XII)的中间体可通过式(I)的中间体与式(II)的中间体在适合的溶剂中反应来制备。该反应可在50℃至150℃的温度进行，优选在110℃的温度(甲苯的回流温度)。该反应需进行共沸移除水。作为溶剂，可使用极性或非极性非质子烃溶剂例如甲苯、乙酸异丙酯等。这些溶剂可与水良好共沸。

b)将式(XII)的中间体以四氢硼酸钠在适合的溶剂例如极性或非极性非质子和质子烃溶剂及其混合物如甲苯、乙酸异丙酯、乙醇、甲醇、异丙醇等中处理。以四氢硼酸钠还原可在0℃至50℃进行。优选在10℃。还原期间优选为低温以避免过度还原的杂质形成。

c)随后，盐的形成以富马酸在带有5％体积/体积水的丙酮/乙醇混合物中进行，形成式(XIII)的中间体。

本发明一个实施方案包括式(XIII)的富马酸盐。

C.式(XVIII)中间体的制备

第一种尝试中试图找出生产JNJ-26481585的更好的合成方法，将式(III)中间体与O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟胺在碱和溶剂的存在下(但无偶合剂)反应。该尝试并未成功。

第二种尝试中试图以酸不稳定保护基团保护氨基和异羟肟酸基团，以便于同时完成去保护-盐形成。

因此，将式(XIII)中间体转变为游离碱，得到式(III)的中间体并进一步转变为式(XIV)的中间体，其中R为叔丁基、苯甲基或富烯基(fulveneyl)，接着由NaOH于乙醇中水解，并通过酸化和从反应混合物中直接结晶将式(XV)的中间体分离。

将式(XV)与O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟胺于标准的氨基酸偶合条件下(EDC、HOBT、三乙胺、四氢呋喃)偶合，以杰出产率得到式(XVI)的中间体。式(XV)中间体的偶合反应，其中R为富烯基，由于需要三乙胺供最适宜的偶合，而造成一些富烯基-基团的裂解。

然后在各种条件下(溶剂：乙醇、乙酸乙酯、甲苯、丙酮、甲基异丁基酮、二甲基甲酰胺；酸：乙磺酸、甲磺酸、盐酸、三氟乙酸)尝试进行式(XVI)中间体(其中R为叔丁基)的去保护。不幸地，在环境温度(2-3小时)或在50℃(10分钟)观察到的唯一产物为来自吲哚部分裂解的产物。

尝试在氢气气氛和适当催化剂(例如碳载钯)的存在下将式(XVI)的中间体(其中R为苄基)氢化，由于异羟肟酸产物上N-O键的竞争性裂解(高达20％)而判断为不成功。在另一方面，式(XVI)中间体(其中R为富烯基)的富烯基的裂解，本文中有关式(XVI-a)中间体在温和条件下和通过使用硫醇硅胶捕集富烯基副产物为成功的。对应的式(V)的游离胺在如下述的类似条件下(1.05当量的盐酸、乙醇、70℃)可得到式(XIX)化合物。

a)最后，可通过氢氧化钠水溶液中和并在甲基四氢呋喃中萃取，得到中间体(XIII)的游离碱。然后将含游离碱的有机层以3摩尔当量的氢氧化钠水溶液于回流下进行碱水解。然后将水层中的钠盐从甲基四氢呋喃层中分离并以5摩尔当量的HCl于10℃下酸化。

式(XVII)的中间体可具有可变的水含量。立即干燥后，水含量为0.7％。当将样本于大气压下放置24小时时，水含量增加且稳定于8％水，其代表2摩尔的水。

b)水在中间体(XVII)的效应为关键性的，如下列偶合反应需要特定量的水才会成功。中间体(XVII)中的水量优选为15至25体积/体积％，最优选约16体积/体积％。

式(XVIII)的中间体可通过式(XVII)中间体与O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟胺在适当的试剂，例如N-(乙基羰亚氨基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺，单盐酸盐(EDC)作为偶合试剂的存在下反应来制备。反应可在极性或非极性非质子和质子烃溶剂及其混合物中进行，例如甲基四氢呋喃、二甲基甲酰胺(DMF)、二氯甲烷(DCM)、甲苯、异丙醇、乙醇、乙腈、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、其混合物和一种或多种不同的溶剂与水的混合物，优选乙酸乙酯与乙醇的混合物，更优选乙酸乙酯、乙醇与水的混合物。反应期间的温度可在10℃-40℃，优选在室温。

当有足够的水存在时，反应快速且完全。在干燥的条件下反应较缓慢，较多的杂质存在且反应速率朝向产物下降。

c)式(XVIII)的中间体可溶解在溶剂中例如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，优选二甲基乙酰胺。添加助溶剂会使产物结晶出。可使用助溶剂例如丙酮、甲基异丁基酮或甲基乙基酮，优选甲基异丁基酮。纯化可在25℃-90℃的温度进行，优选50℃至70℃。结晶时间不应超过5小时。在较高的温度下或较长的结晶期间，最终产物的产率下降。可在溶剂例如乙醇中，在助溶剂例如甲基乙基酮的存在下，于50℃至70℃的温度，优选于70℃下进行再结晶。

本发明一个实施方案包括式(XVII)和(XVIII)的盐酸盐。

晶体形式的制备

式(XVIII)的中间体，当反应混合物在所需温度时，在适合的溶剂例如乙醇或甲醇中通过添加盐酸，可转变为式(XIX)的HCl盐。

本发明提供了制备晶体单-HCl形式I的方法，包括：

a)将式(XVIII)化合物溶于含有低于0.1％重量/重量水的醇溶剂中，同时加热到50℃至70℃，优选50℃至60℃的溶剂中；

b)将盐酸添加至反应混合物中；和

c)搅拌反应混合物同时将温度保持在50℃至70℃，优选50℃至60℃，更优选55℃。

在一实施方案中，上述段落中所提及的制备形式I的方法包括添加浓度为10.3至20.6升/摩尔的乙醇或甲醇，优选浓度为10.3升/摩尔。

在另一实施方案中，上述提及的制备形式I的方法包括在步骤a)中，以30分钟至3小时的时间段溶解化合物，优选以30分钟至45分钟的时间段。

在另一实施方案中，上述提及的制备形式I的方法包括在步骤b)中，添加浓度为0.05至0.4当量浓HCl的盐酸，优选浓度为0.05至1.1当量，优选浓度为0.05至0.4当量。

在另一实施方案中，上述第1至3段中提及的制备形式I的方法包括在步骤b)中，添加浓度为0.03至0.07当量HCl(1摩尔浓度)的盐酸，优选0.03至0.05当量的浓度。

在另一实施方案中，上述第1至3段中提及的制备形式I的方法包括在步骤b)添加浓度为在异丙醇中0.03至0.05当量HCl的盐酸。

在另一实施方案中，上述提及的制备形式I的方法包括在步骤c)中，以30分钟至3小时的时间段溶解化合物，优选以30分钟至45分钟的时间段。

在另一实施方案中，上述提及的制备形式I的方法包括在步骤c)中，搅拌混合物30分钟至16小时，优选16小时。

本发明进一步提供制备水合物形式的方法，包括：

a)将式(XVIII)化合物溶于含有高于5％水的乙醇/水或甲醇/水混合物中，同时加热到50℃至70℃，优选50℃至60℃的溶剂；

b)将盐酸添加至反应混合物中；和

c)搅拌反应混合物同时将温度保持在50℃至70℃，优选在50℃至60℃，更优选在55℃。

在一个实施方案中，上段提及的制备水合物形式的方法包括添加浓度为10.3至20.6升/摩尔的乙醇或甲醇，优选10.3升/摩尔的浓度。

在另一实施方案中，上述所提的制备水合物形式的方法包括在步骤

a)中，以30分钟至3小时的时间段溶解化合物，优选以30分钟至45分钟的时间段。

b)中，添加浓度为0.05至0.4当量浓HCl的盐酸，优选0.05至1.1当量的浓度，优选0.05至0.4当量的浓度。

在另一实施方案中，上述第1至3段中提及的制备水合物形式的方法包括在步骤b)中，添加浓度为0.03至0.07当量HCl的盐酸(1摩尔浓度)，优选0.03至0.05当量的浓度。

在另一实施方案中，上述第1至3段中提及的制备水合物形式的方法包括在步骤b)中，添加浓度为在异丙醇中0.03至0.05当量HCl的盐酸。

在另一实施方案中，上述提及的制备水合物形式的方法包括在步骤c)中，以30分钟至3小时的时间段溶解化合物，优选以30分钟至45分钟的时间段。

在另一实施方案中，上述提及的制备水合物形式的方法包括在步骤c)中，搅拌混合物30分钟至16小时，优选16小时。

本发明进一步提供了制备形式I的制浆方法，包括：

-将形式II在选自乙醇或甲醇的溶剂中，在至少50℃，优选70℃或更高的温度下制浆；或

-将形式I和形式II的混合物在选自乙醇或甲醇的溶剂中，在至少50℃，优选70℃或更高的温度下制浆；

在另一实施方案中，上述所提的制备形式I的制浆方法可包括10％的水，优选＜2％的水，最优选＜0.07％的水。

在另一实施方案中，制备形式I的制浆方法进一步包括搅拌至少4至7天期间。

本发明进一步提供了制备水合物形式的制浆方法，包括：

-将形式II在包含至少10％水的乙醇/水或甲醇/水混合物中制浆；或

-将形式I和形式II的混合物在包含至少10％水的乙醇/水或甲醇/水混合物中制浆；

-将形式I和形式II的混合物在包含至少90％水的水性介质中制浆。

在另一实施方案中，上述所提的制备水合物形式的制浆方法进一步包括搅拌至少4至7天期间。

在另一实施方案中，制备形式I的方法进一步包括在形式II在醇溶剂中制浆后，或在形式I和形式II混合物在上述所指的溶剂中制浆后，将得到的沉淀过滤。

在另一实施方案中，制备形式I的制浆方法进一步包括在上段的过滤步骤后，在形式II在醇溶剂中制浆后，或在形式I和形式II混合物在上述所指的溶剂中制浆后，洗涤得到的过滤的沉淀，其中洗涤步骤以制浆步骤期间所用的相同溶剂来进行。

为了制备本发明的任何形式(其由式(XVIII)的化合物溶液进行)，本领域技术人员应了解固体形式的起始材料对固体形式的最终产物并无影响，且对所得固体形式的控制是经由控制处理参数来进行。

本发明也提供上述制备形式I的方法，包括在步骤a)和b)间以形式I对混合物种晶。

本发明也提供上述制备水合物形式的方法，包括在步骤a)和b)间以形式I对混合物种晶。

本发明也提供了方法，其中得到的晶体形式通过过滤或离心来分离，任选结合洗涤和干燥。

用于本发明方法的起始材料可为式(XVIII)化合物的任何晶体形式。

术语“本发明化合物”是指式(XI)、(XIII)、(XVII)、(XVIII)或(XIX)的化合物。

在一个实施方案中，用于制备本发明晶体形式的溶剂为医药上可接受的溶剂。在另一实施方案中，用于制备本发明晶体形式的溶剂为医药上不可接受的溶剂，因为发现它们可用于制备医药上可接受的多晶型物。

用于制造本发明晶体形式的方法典型地包括由式(XIX)化合物溶解于溶剂介质的溶液或分散体中，或由式(XIX)化合物制浆，得到晶体固体材料。

本领域技术人员应了解，可修改结晶相关条件以改进结晶过程或引发沉淀，且不影响得到的多晶型物形式。这些条件可包括使式(XVIII)或(XIX)化合物的溶液、分散体或浆液和溶剂达到所需的浓度，使该溶液、分散体或浆液达到所需的温度，添加所需浓度的盐酸，添加晶种，施加任何适合的压力，移除和/或分离不合意的物质或杂质，将形成的结晶干燥，得到固态的多晶型物(如果此状态为所需的)。

引发沉淀的一种优选途径是降低本发明化合物的溶解度。化合物的溶解度可例如通过添加反溶剂来降低。

使本发明化合物的溶液、分散体或浆液和溶剂达到所需的浓度并不意味着必须增加本发明化合物的浓度。在某些情况下，降低或不改变本发明化合物的浓度可能是优选的。用来得到所需浓度的技术为本领域中常见的技术，例如以常压蒸馏、真空蒸馏、分馏、共沸蒸馏来蒸发、薄膜蒸发、加热、冷却、本领域中公知的其它技术及其组合。得到所需浓度的可选方法可能同样涉及本发明化合物溶液和溶剂的饱和度，例如通过添加足量的非溶剂至溶液中以达到饱和点。其它使溶液饱和的适合技术包括，例如将额外的本发明化合物引入至溶液中和/或从溶液中蒸发一部分溶剂。如文中所提，饱和溶液包含在饱和点或超过饱和点(即过饱和)溶液。几乎饱和的溶液是指接近饱和但未达到饱和点的溶液。

促进本发明结晶过程的方法通过以产物的结晶来种晶或以玻璃棒刮结晶器的内表面。或者，结晶可在无任何诱发下自动发生。本发明包括其中式(XIX)化合物的特定形式结晶为自动发生或为经诱发或加速(除非这种诱发或加速为得到特定形式的关键)二者的实施方案。

术语“种晶”是指添加晶体材料以促进结晶。术语“晶种”是指先前得到的式(XIX)化合物的晶体形式的粉末。可用于制备形式I的本发明特定的晶种或种晶物质如下：

-形式I的化合物(XIX)和式(XVIII)化合物混合物的晶种；

-形式I的晶种；或

-形式II的晶种。

通过使上述溶液、分散体或浆液达到所需的温度，本领域技术人员将了解为加热、冷却或放置于环境温度的动作。加热溶液、分散体或浆液可能是完全溶解本发明化合物所必需的。

移除和/或分离任何不合意的物质或杂质可通过纯化、过滤、洗涤、沉淀或类似技术来进行。分离，例如可通过已知的固体-液体分离技术来进行。本领域技术人员已知的过滤程序也可用于本发明方法。在其它方法中，过滤可通过将溶液、分散体或浆液通过纸、烧结玻璃过滤器或其它膜材料，通过离心或使用Buchner过滤器、Rosenmund过滤器或板式或框式压滤器来进行。优选，线试(in-line)过滤或安全过滤可有利地置入上述所公开的方法中，以增加生成的多晶型物形式的纯度。此外，过滤剂例如硅胶、

硅藻土(dicalite diatomite)等也可用来从有关的结晶中分离杂质。

得到的结晶也可干燥，且如果应用超过一种的结晶路径，此类干燥方法可任选用于不同的结晶路径。干燥程序包括本领域技术人员所知道的所有技术，例如加热、施加真空、循环空气或气体、添加干燥剂、冷冻干燥、喷雾干燥、蒸发等或其任何组合。

结晶式(XIX)化合物多晶型物的方法可包括多种技术组合及其变化。由此且例如，结晶式(XIX)化合物的多晶型物可通过在适合的温度将式(XIX)化合物置于溶剂中溶解、分散或制浆，由此蒸发部分所述溶剂，增加式(XIX)化合物在上述溶液、分散体或浆液中的浓度，冷却所述混合物并任选洗涤和/或过滤并干燥生成的式(XIX)化合物结晶来进行。任选，式(XIX)化合物的多晶型物可通过将式(XIX)化合物置于溶剂介质中溶解、分散或制浆，冷却所述溶液、分散体或浆液并随后将得到的多晶型物过滤和干燥。制备式(XIX)化合物晶体形式的另一实例可通过将式(XIX)化合物置于溶剂介质中变成饱和，并任选将得到的结晶过滤、洗涤和干燥。

结晶形成也可包含超过一种的结晶方法。在某些情况下，出于不同理由，例如增加生成晶体形式的量，可有利地进行一个、二个或三个额外的结晶步骤。

通过将本发明化合物在溶剂中溶解、分散或制浆，可得到不同程度的分散体，例如悬浮液、浆液或混合物；或优选得到均匀的单相溶液。术语“悬浮液”是指二相体系，其由细粉状固体(非晶、晶体形式或其混合物)分散(悬浮)在液体或悬浮介质(通常为溶剂)中构成。术语“浆液”是指当一定量的粉末混入液体中时所形成的悬浮液，其中固体仅略微地溶解(或不溶解)。“制浆”是指制造浆液。

任选，溶剂介质可含有添加剂，例如一种或多种分粉剂、表面活性剂或其它添加剂或常用于制备晶体悬浮液且在文献中充分记载类型的其混合物。添加剂可通过增加容量(leniency)和降低表面积有利地用于修饰结晶形状。

含固体的溶剂介质可任选搅拌一段时间或使用例如高剪切混合机或均质机或这些的组合剧烈震荡，以产生该有机化合物所需的粒径。

沉淀温度的控制和种晶可另外用来增进结晶过程的再现性、粒径分布和产物的形式。就此，结晶可在没有由式(XIX)化合物晶体种晶下进行，或优选在式(XIX)化合物晶体存在下进行(其通过加入晶种导入溶液中)。种晶也可在各种温度下进行数次。晶种材料的量取决于实验的量且可容易地由本领域技术人员决定。典型地，种晶材料的量为反应中预计的晶体材料的量的约0.1至1重量％。

各结晶步骤的结晶时间将取决于所用的条件、所用的技术和/或所用的溶剂。

结晶转化后，可另外进行分裂大颗粒或颗粒团以得到所需和均匀的粒径。因此，式(XIX)化合物的多晶型物形式的结晶、粉末团和粗粉末在经历转化后，可任选磨碎和依大小分类。磨碎或研磨是指使用本领域中公知的方法和装置来物理上分裂大颗粒或颗粒团，降低粉末颗粒的大小。产生的粒径范围可从毫米至纳米，产生，即纳米晶体或微晶。

优选的磨碎或研磨装置为流能研磨机或微粒粉碎机(micronizer)(因为其产生窄分布的小颗粒的能力)。微粒粉碎机使用碰撞动能在悬浮颗粒间用快速移动的液体流分割颗粒。气流喷射为优选的流能研磨机。悬浮的颗粒在加压下被注入再循环的颗粒流中。较小的颗粒被向上带至研磨机的内部并被扫入与粒径分类器相连的通风口，例如旋风分离器。本领域技术人员应了解，有些晶体形式在粉碎颗粒期间可转变为另一种形式。

晶体形式的表征

本发明提供了式(XIX)化合物的固态单-HCl盐类，进一步其特征为其处于晶体形式。在一实施方案中，本发明提供了选自形式I、形式II和水合形式的式(XIX)的化合物晶体形式。这些形式基本上不含杂质。适合地，这些形式含有不多于10％的杂质，更适合地其含有不多于5％的杂质，又更适合地其含有不多于1％的杂质。多晶型物的纯度可通过XPRD来测试，以峰下的面积来计算多晶型物的纯度。这些形式基本上为纯的。术语“基本上纯的”是指大于90％纯度，适合地大于95％纯度，更适合地大于97％纯度，最适合的大于99％纯度。

本发明进一步提供了式(XIX)化合物的两种或更多种晶体形式的混合物，其中所述晶体形式选自形式I、形式II和水合形式。

在一实施方案中，提供了包含式(XIX)化合物的形式I和形式II的混合物。

在另一实施方案中，提供了包含式(XIX)化合物的形式I和水合形式的混合物。

在另一实施方案中，提供了包含式(XIX)化合物的水合形式和形式II的混合物。

在另一实施方案中，提供了包含式(XIX)化合物的形式I、水合形式和形式II的混合物。

本发明进一步提供了式(XIX)化合物的一种或多种晶体形式和式(XIX)化合物的非HCl盐的非晶型，其中该晶体形式选自形式I、形式II和水合形式。

表征形式I、形式II和水合形式的XPRD强度峰位置以2-θ角度表示。

化合物(XIX)的形式I特征在于典型的衍射峰在2-θ位置15.1°±0.2°、17.2°±0.2°、23.4°±0.2°、24.4°±0.2°和27.7°±0.2°。形式I进一步特征在于X射线粉末衍射峰在2-θ位置7.6°±0.2°、12.0°±0.2°和12.5°±0.2°。

化合物(XIX)的形式II特征在于典型的衍射峰在2-θ位置10.8°±0.2°、13.7°±0.2°、17.8°±0.2°和26.7°±0.2。形式II进一步特征在于X射线粉末衍射峰在2-θ位置7.4°±0.2°和22.9°±0.2°。

化合物(XIX)的水合形式特征在于典型的衍射峰在2-θ位置10.0°±0.2°、13.4°±0.2°和26.5°±0.2°。水合形式进一步特征在于X射线粉末衍射峰在2-θ位置21.6°±0.2°和24.9°±0.2°。

形式I的X射线粉末衍射图谱(XPRD)基本上如图2所示。形式II的X射线粉末衍射图谱基本上如图7所示。水合形式的X射线粉末衍射图谱基本上如图12所示。

所有形式的XPRD数据和图谱图示使用带有发生器PW3040的PhilipsX′PertPRO MPD衍射仪PW3050/60得到。该仪器配置有Cu LFF X射线管PW3373/00。待分析的化合物涂布在零背景样本装载器上。仪器的参数如下：

-发生器电压： 45kV

-发生器安培数： 40mA

-几何： Bragg-Brentano

-平台：旋转器平台。

形式I、II和水合形式的扫描参数如下：范围为3°至50°2-θ，以0.01675°/步、29.845秒/步的速率连续扫描。旋转器旋转时间为1秒，放射线型式CuKα，和放射线波长为

形式I和II的扫描参数如下：范围为3°至50°2-θ，以0.01675°/步、29.845秒/步的速率连续扫描。旋转器旋转时间为1秒，放射线型式CuKα，和放射线波长为

水合形式的扫描参数如下：范围为3°至50°2-θ，以0.01675°/步、59.690秒/步的速率连续扫描。旋转器旋转时间为1秒，放射线型式CuKα，和放射线波长为

形式I、II和水合形式的入射光路径参数如下：

-程序发散狭缝： 15mm

-Soller狭缝： 0.04rad

-电子束掩模(beam mask)： 15mm

-抗散射狭缝： 1°

-电子束刀： +

形式I、II和水合形式的衍射光路径参数如下：

-长抗散射罩： +

-Soller狭缝： 0.04rad

-Ni过滤器： +

-检测器： X′Celerator

由于实验差异，例如仪器操作、样本制备及其类似差异，供给形式I、II和水合形式XPRD峰位置的精确度定义为0.2°。

表征形式I、II和水合形式的IR吸收峰位置以波数cm^-1表示。

化合物(XIX)的形式I特征在于红外线光谱(IR)微衰减反射光谱在3119±2cm^-1、2756±2cm^-1、1634±2cm^-1、1475±2cm^-1、1371±2cm^-1、1333±2cm^-1、1275±2cm^-1、1226±2cm^-1，1128±2cm^-1和1066cm^-1±2cm^-1具有典型的吸收带。

化合物(XIX)的形式II特征在于红外线光谱(IR)微衰减反射光谱在约3553±2cm^-1、3203±2cm^-1、3014±2cm^-1和1541cm^-1±2cm^-1具有典型的吸收带。

化合物(XIX)的水合物形式于40℃/75％相对湿度储存42天后，特征在于红外线光谱(IR)微衰减反射光谱在约3558±2cm^-1、3238±2cm^-1、1607±2cm^-1和997cm^-1±2cm^-1具有典型的吸收带。

形式I的IR图谱基本上如图1所示。形式II的IR图谱基本上如图6所示。水合形式的IR图谱基本上如图11示。

IR数据和图谱图示使用红外线光谱(IR)微衰减全反射(microATR)以Nexus FTIR光谱仪得到。所述微ATR配件为带有Si结晶的Harrick SplitPea。所用的检测器为带有KBr窗的DTGS。形式I、II和水合形式扫描参数如下：

-扫描次数： 32

-分辨率： 2cm^-1

-波长范围： 4000至400cm^-1

-基线校正：有

-分光器： Ge在KBr上。

由于实验差异，例如仪器操作、样本制备及其类似差异，供给形式I、II和水合形式IR吸收峰的精确度定义为2cm^-1。

表征形式I和II的差示扫描量热法(DSC)吸热峰位置或范围以℃表示。

化合物(XIX)的形式I熔化分解。在约216.8℃观察到放热信号。

化合物(XIX)的形式II在约197.3℃熔化分解。在约203.6℃观察到放热信号。由于溶剂蒸发，在DSC曲线上约71.5℃处观察到额外的吸热信号。

形式I的DSC曲线基本上如图3所示。形式II的DSC曲线基本上如图8所示。

DSC数据和曲线图示使用配置有RCS冷却单元的TA-InstrumentsQ1000MTDSC得到。样本的重量约3毫克，转移到标准铝TA-Instruments样本盘。将样本以10℃/分钟从25℃扫描至300℃的最终温度。烘箱中以50毫升/分钟的流速恒定地通入氮气。

由于实验差异，例如仪器操作、样本制备及其类似差异，供给形式I和II的DSC曲线公差定义为3℃。

形式I和形式II的吸附-脱附特性以质量变化％来表示。

化合物(XIX)的形式I在高相对湿度时吸附至多0.6％水，其在试验期间没有显示吸湿行为且保持为晶体。

化合物(XIX)的形式II为吸湿性产物。其在高相对湿度时吸附至多9.6％水。此产物在脱附循环期间完全干燥且在试验期间保持为晶体。

形式I的ADS/DES曲线基本上如图5所示。形式II的ADS/DES曲线基本上如图10所示。

ADS/DES数据使用SMS动力蒸气吸收模型DVS-1得到，且重量变化在大气湿度25℃下记录。样本的重量为约17毫克的形式I和24毫克的形式II。将样本于无水氮中干燥60分钟。平衡为小于或等于0.01％/分钟，最低15分钟和最高160分钟。数据间隔为0.05％或2.0分钟。

相对湿度(％)测量点为：

第一组：5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、95、90、80、70、60、50、40、30、20、10、5

第二组：5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、95、90、80、70、60、50、40、30、20、10、5、0。

晶体形式的药物用途

本发明进一步提供了式(XIX)化合物的形式I、形式II或水合形式、式(XIX)化合物的两种或更多种晶体形式的混合物、式(XIX)化合物的至少形式I或水合形式与式(XIX)化合物的非HCl盐非晶形式的混合物，用作药品。在一个实施方案中，用作药品的晶体形式(单独或任何上述混合物)选自形式I、形式II或水合形式。

本发明进一步提供了式(XIX)化合物的至少形式I、形式II或水合形式、式(XIX)化合物的两种或更多种晶体形式的混合物、或式(XIX)化合物的至少形式I或水合形式与式(XIX)化合物的非HCl盐非晶形式的混合物用于制造药品以治疗HDAC相关症状的用途。在一个实施方案中，用于制造药品的晶体形式(单独或任何上述的混合物)选自形式I、形式II和水合形式。

本发明还提供了治疗患有HDAC-相关症状的哺乳动物的方法，包括将式(XIX)化合物的至少形式I、形式II或水合形式、式(XIX)化合物的两种或更多种晶体形式的混合物、或式(XIX)化合物的至少形式I或水合形式与式(XIX)化合物的非HCl盐非晶形式的混合物施用于有需要的哺乳动物。在一个实施方案中，该治疗方法包括施用选自形式I、形式II或水合形式的晶体形式(单独或任何上述的混合物)。

如文中所用，术语“组蛋白脱乙酰酶”和“HDAC”意指从组蛋白N-末端的赖氨酸残基的ε-氨基基团移除乙酰基团的酶家族中的任何一种。

除非文中另有指出，否则术语“组蛋白”是指任何组蛋白，包括来自任何种类的H1、H2A、H2B、H3、H4和H5。人类HDAC蛋白或基因产物，包括但不限于HDAC-1、HDAC-2、HDAC-3、HDAC-4、HDAC-5、HDAC-6、HDAC-7、HDAC-8、HDAC-9、HDAC-10和HDAC-11。组蛋白脱乙酰酶也可衍生自原生动物或真菌来源。

术语“治疗”是指哺乳动物(特别是人类)病理症状的任何治疗，并包括一种或多种下列行为：

(i)在易患有该症状但还未诊断出该症状的对象中预防病理症状发生，和因此，治疗包括对疾病症状的预防性治疗；

(ii)抑制病理症状，即阻止其发展；

(iii)减轻病理症状，即引起病理症状回复；或

(iv)减轻由病理症状所介导的症状。

术语“本发明的(一种或多种)多晶型物”是指式(XIX)化合物的至少形式I、形式II或水合形式、式(XIX)化合物的两种或更多种晶体形式的混合物、或式(XIX)化合物的至少形式I或水合形式与式(XIX)化合物的非HCl盐非晶形式的混合物。

本发明提供了通过施用有效量的本发明多晶型物抑制细胞(包括转化细胞)的异常生长的方法。细胞的异常生长是指细胞生长不依赖于正常的调节机制(例如失去接触抑制)。这包括直接通过造成癌细胞生长阻滞、终端分化和/或凋亡，和间接通过抑制肿瘤血管新生二者来抑制肿瘤生长。

本发明也提供了通过在有需要的对象中，例如哺乳动物(更特别地为人类)施用有效量的本发明多晶型物来抑制肿瘤生长的方法。特别地，本发明提供了通过施用有效量的本发明多晶型物来抑制肿瘤生长的方法。可被抑制的肿瘤实例包括但不限于肺癌(例如腺癌和包括非小细胞肺癌)、胰腺癌(例如胰腺癌如外分泌胰腺癌)、结肠癌(例如结肠直肠腺癌，如结肠腺癌和结肠腺瘤)、前列腺癌包括晚期疾病、淋巴系统的造血组织肿瘤(例如急性淋巴性白血病、B-细胞淋巴癌、Burkitt淋巴癌)、霍奇金氏病和非霍奇金氏病、骨髓性白血病(例如急性骨髓性白血病(AML))、甲状腺滤泡性癌、骨髓发育不良综合征(MDS)、间质源肿瘤(例如纤维肉瘤、横纹肌肉瘤)、黑素瘤、畸胎癌、成神经细胞瘤、胶质瘤、皮肤良性肿瘤(例如角化棘皮瘤)、乳腺癌(例如晚期乳腺癌)、肾癌、卵巢癌、膀胱癌和上皮癌。

此外本发明提供了包含式(XIX)化合物的至少形式I、形式II或水合形式、式(XIX)化合物的两种或更多种晶体形式的混合物、或式(XIX)化合物的至少形式I或水合形式与式(XIX)化合物的非HCl盐非晶形式的混合物以及医药上可接受赋形剂的药物组合物。在一个实施方案中，该医药组合物包括选自形式I、形式II和水合形式的晶体形式(单独或任何上述的混合物)。

医药组合物可制备成药品以口服、非经肠(包括皮下、肌肉内和静脉内)、直肠地、经皮、颊内或鼻内给药。适合口服给药的形式包括粉剂、颗粒、颗粒团、片剂、压制或包衣药丸、糖衣药丸、袋剂、硬或明胶胶囊、糖浆和悬浮液。适合的非经肠给药形式包括水性或非水性溶液或乳液，而用于直肠给药的适合给药形式包括带有亲水性或疏水性载体的栓剂。对于局部给药，本发明提供了本领域中已知的适合的经皮递送系统，而对于鼻内递送，提供了本领域中已知的适合的气雾剂递送系统。虽然在任何给予的情况下最适合的给药将依所需治疗症状的性质和严重度而定，但本发明的最优选路径为口服。

剂量可方便地以单位剂型呈现和以任何医药领域中公知的方法来制备。另外，剂型可以一个、二个、三个或四个或更多个亚剂量存在于一整天中，从而以适合的间隔给药。所用的单位剂量优选约1毫克至约1000毫克的式(XIX)化合物的碱同等物，更优选约5至约400毫克。

本发明的药物组合物包括式(XIX)化合物的形式I、形式II或水合形式。医药组合物可仅包括单一形式的式(XIX)化合物的形式I、形式II或水合形式，或式(XIX)化合物各种型式的混合物，有或无式(XIX)化合物的非HCl盐非晶形式。除了一种或多种活性成分外，所述医药组合物还包含一种或多种赋形剂或佐剂。赋形剂的选择和所用的量可容易地由医药制剂者依照经验和考虑标准制造过程与本领域中参照工艺来决定。

适合的赋形剂的实例有阿拉伯胶、氧化镁、碳酸镁、磷酸钾、乳糖、葡萄糖或淀粉，特别是玉米淀粉。适合的油性赋形剂或溶剂是蔬菜或动物油，例如葵花油或鳕鱼肝油。用于水性或醇溶液的适合溶剂是水、乙醇、糖溶液或其混合物。聚乙二醇和聚丙二醇也可作为用于其它给药形式的另外的辅剂。

对于皮下或静脉内给药，本发明的多晶型物，如果需要，则与常用物质例如增溶剂、乳化剂或其它辅剂一起加至溶液、悬浮液或乳液中。本发明的多晶型物也可冻干且该得到的冻干物用于例如制造注射或输注制剂。适合的溶剂是例如水、生理食盐水溶液或醇类例如乙醇、丙醇、甘油，另外还有糖溶液例如葡萄糖或甘露糖醇溶液，或另外所提及的各种溶剂的混合物。

适合以气雾或喷雾形式给药的药物组合物有例如本发明多晶型物溶于医药上可接受溶剂例如乙醇或水或此类溶剂之混合物的溶液、悬浮液或乳液。如果需要，配制剂也可另外含有其它医药辅剂例如表面活性剂、乳化剂和稳定剂以及推进剂。这种制剂通常含有浓度为约0.1至50％，特别是约0.3至3重量％的活性化合物。

应了解，除了上述特别提及的成分外，本发明的药物组合物还可包括本领域中有关所讨论的配制剂类型的其它常规试剂，例如适合口服给药的药物组合物可包括调味剂或味道遮蔽剂。

作为本发明另一方面，还可设想式(XIX)化合物的形式I、形式II或水合形式、式(XIX)化合物的两种或更多种晶体形式的混合物、或式(XIX)化合物的至少形式I或水合形式与式(XIX)化合物的非HCl盐非晶形式的混合物与另外的抗癌剂的组合，特别是用作药物，更特别是治疗癌症或相关疾病。

对于治疗上述症状，本发明的多晶型物可有利地与一种或多种药剂组合，更特别地与其它抗癌剂组合。抗癌剂的实例包括但不限于：

-铂配位化合物，例如顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)或奥沙利铂(oxalyplatin)；

-紫杉类(taxane)化合物，例如太平洋紫杉醇(paclitaxel)或多烯紫杉醇(docetaxel)；

-拓朴异构酶I(topoisomerase I)抑制剂，例如喜树碱(camptothecin)化合物如依立替康(irinotecan)或拓扑替康(topotecan)；

-拓朴酶II抑制剂例如抗肿瘤表鬼臼毒素(epipodophyllotoxins)或鬼臼毒素(podophyllotoxin)衍生物，如依托泊苷(etoposide)或替尼泊苷(teniposide)；

-抗肿瘤长春花生物碱(vinca alkaloid)例如长春花碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)或长春瑞滨(vinorelbine)；

-抗肿瘤核苷衍生物例如5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)、亚叶素(leucovorin)、吉西他滨(gemcitabine)或卡培他滨(capecitabine)；

-烷基化剂例如氮芥或亚硝基脲，例如环磷酰胺(cyclophosphamide)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、卡莫司汀(carmustine)、噻替哌(thiotepa)、美伐林(mephalan)或洛莫司汀(lomustine)；

-抗肿瘤蒽环衍生物、例如柔红霉素(daunorubicin)、多柔比星(doxorubicin)、doxil、依达比星(idarubicin)或米托蒽醌(mitoxantrone)；

-靶向IGF-1受体的分子，例如鬼臼苦素(picropodophilin)；

-替曲卡星(tetracarcin)衍生素例如替曲卡星A(tetrocarcin A)；

-糖皮质素例如泼尼松(prednisone)；

-抗体例如曲妥珠单抗(trastuzumab)(HER2抗体)、利妥昔单抗(rituximab)(CD20抗体)、吉妥单抗(gemtuzamab)、西妥昔单抗(cetuximab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)或贝伐单抗(bevacizumab)；

-雌激素受体拮抗剂或选择性雌激素受体调节剂，例如他莫司芬(tamoxifen)、氟维司群(fulvestrant)、托瑞米芬(toremifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、伐索戴司(faslodex)或雷洛昔芬(raloxifene)；

-芳香酶抑制剂例如伊西美坦(exemestane)、阿那曲唑(anastrozole)、来曲唑((letrazole)和伏氯唑(vorozole)；

-分化剂例如类维生素A、维生素D或视黄酸和视黄酸代谢阻断剂(RAMBA)，例如同维甲酸(accutane)；

-DNA甲基移转酶抑制剂，例如氮杂胞苷(azacytidine)或地西他滨(decitabine)；

-抗叶酸剂例如培美曲塞二钠(premetrexed disodium)；

-抗生素例如放射菌素D(antinomycin D)、博来霉素(bleomycin)、米他霉素C(mitomycin C)、更生霉素(dactinomycin)、洋红霉素(carminomycin)或道诺霉素(daunomycin)；

-抗代谢物例如氯伐拉滨(chlofarabine)、氨基蝶呤(aminopterin)、胞嘧啶阿糖胞苷(cytosine arabinoside)或甲氨蝶呤(methotrexate)；

-凋亡诱发剂和抗血管生成剂，例如Bcl-2抑制剂如YC 137、BH 312、ABT 737、棉酚(gossypol)、HA 14-1、TW 37或癸酸；

-微管蛋白结合剂，例如康布斯他汀(combrestatin)、秋水仙素(colchicines)或诺考达唑(nocodazole)；

-激酶抑制剂，例如佛罗匹多(flavoperidol)、甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate)、埃罗替尼(erlotinib)或吉非替尼(gefitinib)；

-法呢基移转酶(farnesyltrahsferase)抑制剂例如替批法呢(tipifarnib)；

-组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂，例如丁酸钠、辛二酰苯胺羟酰氨酸(SAHA)、酯肽(depsipeptide)(FR 901228)、NVP-LAQ824、R306465、JNJ-26481585或曲古菌素A(trichostatin A)；

-泛素-蛋白酶体途径的抑制剂，例如PS-341、MLN.41或硼替佐米(bortezomib)；

-Yondelis；

-端粒酶抑制剂，例如泰落他汀(telomestatin)；

-基质金属蛋白酶抑制剂，例如巴马司他(batimastat)、马立马司他(marimastat)、普林如果司他(prinostat)或美司他(metastat)。

就其有用的药理性质而论，本发明组合的组分，即其它药剂与本发明多晶型物可配制成各种用于投药目的的药物形式。此类组分可分开配制成个别的药物组合物或含二种组分的单一医药组合物。

本发明一个实施方案因此也关于包含其它药剂和本发明多晶型物连同与一种或多种医药载剂的药物组合物。

本发明进一步涉及本发明组合在制造用于抑制肿瘤细胞生长的医药组合物的用途。

本发明进一步涉及含有作为第一活性成分的本发明多晶型物和作为第二成分的抗癌剂的产品，作为组合的制剂来同时、分开或相继用于治疗患有癌症的患者。

其它药剂和本发明多晶型物可同时(例如以分开或单一组合物)或相继地以任一种顺序来给药。在后一情况中，二种化合物在一段时间内以足以取保可达到有利的或协同效应的量和方式来给药。应了解，优选的方法和给药顺序和组合的各组分的个别的剂量和给药方案将取决于所需施用的特定的其它药剂和多晶型物、其给药路径、所需治疗的特定肿瘤和所需治疗的特定宿主。最佳方法和给药顺序以及剂量和给药方案可容易地由本领域技术人员使用现有方法和依照本文所示的数据来决定。

铂配位化合物有利地以每平方米体表面积1至500毫克(mg/m²)的剂量给药，例如50至400mg/m²，特别是每次疗程对顺铂约75mg/m²的剂量和卡铂约300mg/m²。

紫杉类化合物有利地以每平方米体表面积50至400毫克(mg/m²)的剂量给药，例如75至250mg/m²，特别是每次疗程对太平洋紫杉醇约175至250mg/m²的剂量和对多烯紫杉醇约75至150mg/m²。

喜树碱化合物有利地以每平方米体表面积0.1至400毫克(mg/m²)的剂量给药，例如1至300mg/m²，特别是每次疗程对依立替康约100至350mg/m²的剂量和对拓朴替康约1至2mg/m²。

抗肿瘤鬼臼毒素衍生物有利地以每平方米体表面积30至300毫克(mg/m²)的剂量给药，例如50至250mg/m²，特别是每次疗程对依托泊苷约35至100mg/m²的剂量和对替尼泊苷约50至250mg/m²。

抗肿瘤长春花生物碱有利地以每平方米体表面积2至30毫克(mg/m²)的剂量给药，特别是每次疗程对长春花碱约3至12mg/m²，对长春新碱约1至2mg/m²的剂量，和对长春瑞滨约10至30mg/m²的剂量。

抗肿瘤核苷衍生物有利地以每平方米体表面积200至2500毫克(mg/m²)的剂量给药，例如700至1500mg/m²，特别是每次疗程对5-FU来说200至500mg/m²的剂量，对吉西他滨约800至1200mg/m²的剂量，对卡培他滨约1000至2500mg/m²。

烷基化剂例如氮芥或亚硝基脲有利地以每平方米体表面积100至500毫克(mg/m²)的剂量给药，例如120至200mg/m²，特别是每次疗程对环磷酰胺约100至500mg/m²的剂量，对苯丁酸氮芥约0.1至0.2mg/kg，对卡莫司汀约150至200mg/m²的剂量，对洛莫司汀约100至150mg/m²的剂量。

抗肿瘤蒽环衍生物有利地以每平方米体表面积10至75毫克(mg/m²)的剂量给药，例如15至60mg/m²，特别是每次疗程对多柔比星约40至75mg/m²的剂量，对柔红霉素约25至45mg/m²的剂量，和对依达比星约10至15mg/m²的剂量。

抗雌激素药剂依照特定的药剂和所需治疗的症状，有利地以每天约1至100毫克的剂量给药。他莫司芬有利地以5至50毫克的剂量口服给药，优选10至20毫克每天二次，持续治疗足够的时间以达到和保持治疗效用。托瑞米芬(toremifene)有利地以约60毫克的剂量每天一次口服给药，持续治疗足够的时间以达到和保持治疗效用。阿那曲唑有利地以约1毫克的剂量每天一次。屈洛昔芬有利地以约20-100毫克的剂量每天一次口服给药。雷洛昔芬有利地以约60毫克的剂量每天一次口服给药。伊西美坦有利地以约25毫克的剂量每天一次口服给药。

抗体有利地以每平方米体表面积约1至5毫克(mg/m²)的剂量给药，或如果不同，如本领域中已知的剂量给药。曲妥珠单抗有利地以每平方米体表面积1至5毫克(mg/m²)的剂量给药，特别是每次疗程2至4mg/m²。

这些剂量可给药例如每个疗程一次、二次或更多次，其可例如每7、14、21或28天重复。

方便地可将本发明多晶型物储存于包装材料中，其可保护免于机械、环境、生物或化学伤害或降解。调理药物物质可通过使用水气无法穿透的包装物质来达成，例如密闭气密袋。调理药物产品例如片剂、胶囊，可应用例如铝泡罩来达成。

实验部分

下列实施例希望说明本发明而非将限制本发明在此范围。

实施例1：中间体(I)的制备

a)将4-哌啶甲胺(2.6摩尔)和乙酸乙酯(5.2升)置于惰性反应器(20升)中并温热至45℃。加入4-硝基苯甲醛(2.7摩尔)并将反应混合物于45℃搅拌2小时。将反应冷却至0℃，然后加入二异丙基乙基胺(6.6摩尔)，得到溶液1。

b)将2-(甲硫基)-5-嘧啶羧酸乙酯(2.7摩尔)和乙酸乙酯(2.6升)置于惰性反应器中并冷却至0℃。在1小时的时间内在0℃至5℃的温度加入间-氯过氧苯甲酸(1.2摩尔)的乙酸乙酯(2.6升)溶液。将反应混合物于0℃搅拌30分钟，得到溶液2。

c)在1小时的时间内在0℃至5℃的温度将溶液2加至溶液1中。将反应混合物在室温下放置过夜。将混合物以640毫升浓盐酸的10升水溶液酸化至pH2。收集水层并以1升的乙酸乙酯洗涤。收集水层并加入1升二氯甲烷。将混合物以450毫升50％氢氧化钠碱化至pH10。反应混合物在室温搅拌30分钟。收集有机层得到级分1。将水层进一步以2升二氯甲烷萃取并收集有机层，得到级分2。将级分1和2合并并蒸发二氯甲烷，得到511.25克(1.93摩尔)的中间体(I)(产率74％)。

实施例2：中间体(XIII)的制备

a)将中间体(I)(0.97摩尔)和甲苯(4.5升)加到惰性反应器(20升)中。将1-甲基-1H-吲哚-3-甲醛(0.97摩尔)在室温下加到反应混合物中。将反应混合物温热至回流温度，回流过夜并冷却至室温。加入以甲醇简并的(degenerated)乙醇(1.5升)，得到溶液3。

b)将四氢硼酸钠(55.2克)和甲苯(1.5升)加到惰性反应器(20升)中。持续搅拌下使混合物达到10℃。将溶液3在1小时的时间内在#10℃的温度加到混合物中。将混合物于#10℃的温度搅拌1小时。让反应混合物达到室温。在30分钟的时间加入丙酮(8.79摩尔)。将反应混合物搅拌4小时。在15分钟的时间内将水(5.1升)滴入反应混合物中。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将水层丢弃并以300克的碳酸氢钠的4.1升水溶液洗涤有机层二次。以硫酸镁过滤有机层并蒸发，得到级分3(蒸发后，397克的残余物)。

c)将以2％甲基乙基酮简并的乙醇(5升)在室温下加到级分3中。在室温下加入浓丙酮(5升)和0.5升水并随后将混合物温热至50℃。制备富马酸(0.97摩尔)、以2％甲基乙基酮简并的乙醇(1.4升)、丙酮(1.4升)和140毫升水的混合物，得到溶液4。将溶液4在2小时的时间内于50℃的温度下加到反应混合物中。将反应混合物在50℃搅拌2小时，冷却4小时至室温并在室温下搅拌过夜。收集沉积物并随后用1.4升经2％甲基乙基酮简并的乙醇、1.4升浓丙酮和140毫升水洗涤。将沉积物于50℃干燥过夜，得到371克(0.7摩尔)的中间体(XIII)(产率73％)。

实施例3：中间体(XVII)的制备

在四颈烧瓶(2升)中装入中间体(XIII)(100克；191.0毫摩尔)。加入水(3升/摩尔-纯限制试剂；573.0毫升)和2-甲基四氢呋喃(2.2升/摩尔-纯-限制试剂；420.2毫升)。搅拌后，加入氢氧化钠50％(2.5摩尔/摩尔-纯-限制试剂；477.5毫摩尔；25.13毫升)。将反应混合物在室温再搅拌40-60分钟，之后放置反应使其沉降(settle)。收集上方有机层并以水(2升/摩尔-纯-限制试剂；382.0毫升)洗涤。将水(1.5升/摩尔-纯-限制试剂；286.5毫升)和氢氧化钠(3摩尔/摩尔-纯-限制试剂；573.0毫摩尔；45.84克)加到有机层。将反应混合物温热至80℃并搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温并收集下方水层。加入异丙醇(90毫升；1.177摩尔)并将混合物于冰浴中冷却至10℃。以浓盐酸(5摩尔/摩尔-纯-限制试剂；954.9毫摩尔；100.9克)将反应混合物酸化至pH1(pH13.8：深绿色溶液；pH7.5深粉红色；pH4.7：粉红色溶液，白色沉淀)。将反应混合物于10℃搅拌4小时。过滤白色沉淀，以水洗涤4次并于40℃真空干燥，得到84克中间体(XVII)(产率：97％)。

实施例4：中间体(XVIII)的制备

a)在四颈烧瓶(1升)中装入0.093摩尔的中间体(XVII)和加入220毫升乙酸乙酯。搅拌反应混合物并加入5毫升水，得到溶液5。在250毫升烧瓶中装入0.122摩尔的N-(乙基羰亚氨基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺，单盐酸盐(EDC)在130毫升乙醇中的溶液并搅拌反应混合物，得到溶液6。将O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-羟胺(0.123摩尔)加到溶液5中并以26毫升的乙酸乙酯洗涤添加漏斗。之后立即在1小时30分钟的时间内将200毫升溶液6加到包含溶液5的反应混合物中(当加入90％的溶液6时，反应混合物变得均匀，然后所需的产物结晶析出)。将反应混合物在室温下搅拌5小时。过滤沉淀并以55毫升乙酸乙酯洗涤并于50℃真空干燥16小时，得到35.7克(0.07摩尔)的中间体(XVIII)(产率：71％)。

b)在氮气气氛下向四颈烧瓶(1升)中装入0.073摩尔中间体(XVIII)。加入N，N二甲基乙酰胺(377毫升)和377毫升甲基异丁基酮，并将混合物温热至70℃。将反应混合物于70℃搅拌5小时，然后在1小时的时间内冷却至25℃，然后于25℃再搅拌一小时。过滤沉淀并随后以94毫升N，N二甲基乙酰胺和甲基异丁基酮的混合物洗涤，然后以150毫升的甲基异丁基酮的浆液洗涤，然后150毫升的甲基异丁基酮置换洗涤。将沉淀在50℃真空干燥2天，得到33.4克纯化的中间体(XVIII)(产率：89％)。

实施例5：制备JNJ-26481585HCl盐晶体形式I

a)在惰性四颈烧瓶(0.5升)中装入0.03摩尔纯化的中间体(XVIII)。加入乙醇(300毫升)(典型的水含量为0.07％(重量/重量))。搅拌反应混合物并温热至57℃-60℃。以30毫克中间体(XVIII)JNJ-26481585.HCl(30毫克)形式I种晶。将浓盐酸(0.05摩尔％)在57℃加到反应混合物中并将反应混合物搅拌16小时。在50℃过滤沉淀并以20毫升的乙醇洗涤3次，得到10克JNJ-26481585HCl盐晶体形式I。

b)在惰性四颈烧瓶(50毫升)中装入2.6克在步骤a)中得到的JNJ-26481585HCl盐晶体形式I。加入乙醇(20毫升)。在氮气下和黑暗中搅拌反应混合物并温热至50℃。将反应混合物于50℃搅拌12小时，在1小时时间内冷却至40℃并过滤。以20毫升乙醇洗涤沉淀一次和以20毫升丙酮洗涤二次。然后于50℃下将产物真空干燥16小时，产生2克(80％)纯化的JNJ-26481585HCl盐晶体形式I。

实施例6：使用浆液程序转化多晶型物I和II的混合物

a)制备浆液

称取约25毫克形式I和约25毫克形式II至小瓶中。加入约0.2毫升乙醇并关闭小瓶。制备三支小瓶并将各小瓶在不同的温度，4℃(冰箱)、40℃和70℃存放4天。

对乙醇/水(90/10，体积/体积％)和水中的浆液，重复该过程。将浆液在不同的温度储存4天和7天。储存后，打开小瓶并通过将数毫克浆液涂布在滤纸上来干燥样本。

b)分析技术(粉末XRD)

将所有得到的级分使用粉末XRD分析。

X射线粉末衍射(XRPD)分析在带有发生器PW3040的PhilipsX′PertPRO MPD衍射仪PW3050/60中进行。该仪器配置有Cu LFF X射线管PW3373/00。化合物铺展在零背景样本承载器上。

仪器参数

发生器电压： 45kV

发生器安培数： 40mA

几何： Bragg-Brentano

平台：旋转器平台。

测量条件

扫描模式：连续

扫描范围： 3至50°2θ

步长大小： 0.01675°/步

计数时间： 29.85秒/步

旋转器旋转时间： 1秒

放射线类型： CuKα

放射线波长：

入射光路径衍射光路径

程序发散狭缝：15mm 长抗散射罩： +

Soller狭缝： 0.04rad Soller狭缝： 0.04rad

电子束掩模： 15mm Ni过滤器： +

抗散射狭缝： 1° 检测器： X′Celerator

电子束刀： +

c)结果

储存于乙醇4天和7天后浆液转化研究中所得到的结果收集于下表A中。

浆液时间和温度	4天后乙醇	7天后乙醇
			4℃冰箱40℃70℃	溶剂化物+形式I+形式II的混合物形式I+形式II的混合物(^*)形式I	溶剂化物+形式I的混合物溶剂化物+形式I的混合物形式II

溶剂化形式的XRD图谱与水合物的XRD图谱相相当。

储存于乙醇/水(90/10，体积/体积％)中4天和7天后浆液转化研究中得到的结果收集于下表B中。

浆液时间和温度	4天后乙醇/水(90/10，体积/体积％)	7天后乙醇/水(90/10，体积/体积％)
			4℃冰箱40℃70℃	水合物+形式I的混合物形式I+形式II的混合物(^*)水合物+形式I的混合物	水合物+形式I的混合物水合物+形式I的混合物形式I+微量水合物

(^*)浆液中的溶剂完全蒸发。储存四天后再将0.2毫升溶剂加入至混合物中。

储存于水中4天后在浆液转化研究中得到的结果收集于下表C中。

浆液时间和温度	4天后水
		4℃冰箱40℃	水合物水合物

70℃

水合物

这些水合样本(例如水浆液)以0.1毫升乙醇在不同的温度，40℃、50℃和70℃储存3天。

水合样本在40℃和50℃储存3天后仍为水合物。

水合样本在70℃储存3天后完全液化(油)。

实施例7：形式I的稳定性

a)化合物信息

图示化学式：

盐酸盐(1∶1)

化学名称：N-羟基-2-[4-[[[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)甲基]氨基]甲基]-1-哌啶基]-5-嘧啶甲酰胺盐酸盐

分子式：C₂₁H₂₆N₆O₂.HCl

分子量：430.94

b)吸附/脱附研究

通过17毫克形式I分析在25℃在不同相对湿度条件下对水的吸附和脱附。

记录作为相对湿度函数的重量变化。

结果如图4所示。

形式I级分在高相对湿度时吸收至多0.6％水，其显示没有吸湿行为且在试验期间保持为晶体。

c)溶解度

在不同pH的溶剂中测量形式I的水溶解度。在20℃以溶剂使过量的溶质平衡24小时。移除不溶的化合物后，使用UV光谱测定溶液的浓度。

溶解度列于下表D中：

溶剂	溶解度(毫克/毫升溶液)
		形式I
水0.01N HCl0.001N HCl缓冲液pH2(柠檬酸/NaOH/HCl)缓冲液pH4(柠檬酸/HCl/NaOH)缓冲液pH6(柠檬酸/NaOH)缓冲液pH8(硼酸/HCl/NaOH)缓冲液pH10(硼酸/KCl/NaOH)	1.4(pH4.5)1.4(pH2.0)1.5(pH2.9)0.95(pH2.0)1.2(pH3.9)1.5(pH6.0)1.3(pH7.8)1.3(pH9.8)

d)晶体学稳定性

将化合物在室温(RT)、在＜5％、56％和75％相对湿度(RH)、50℃和40℃/75％RH下储存于开放条件下六星期后，研究形式I晶体结构的稳定性。

以热重法(TGA)、差示扫描量热法(DSC)、X射线粉末衍射(XRPD)和红外线光谱(IR)分析样本。

试验结果如下表E所示。

～Ref：与参照物相同

Cryst.：晶体

形式I熔化分解，因此无熔解热报道。

形式I为晶体学稳定的。

在不同的条件下储存后，没有观察到变化。

储存前和储存后的IR光谱、XRD图谱和DSC曲线保持相同。

e)化学稳定性

将形式I储存于不同的开放条件下1、4和8星期。这些条件为40℃/75％RH，50℃，RT/＜5％RH，RT/56％RH，RT/75％RH和0.3da ICH光。

储存后以HPLC和肉眼检验来分析化合物。

试验结果如下表F所示。

形式I显示出对光敏感，这是由于在0.3da ICH光条件下储存后杂质增加的总和。

实施例8：形式II的稳定性

a)化合物信息

图示化学式：

盐酸盐(1∶1)

分子式：C₂₁H₂₆N₆O₂.HCl

分子量：430.94

b)吸附/脱附研究

通过约24毫克的形式II分析在25℃于不同相对湿度条件下对水的吸附和脱附。

记录作为相对湿度函数的重量变化作。

结果如图9所示。

在最初干燥步骤期间记录形式II失重1.67％。得到的干燥产物是吸湿性的。其在高相对湿度时吸收至多9.6％水。

在脱附循环期间，产物完全干燥且在试验期间保持为晶体。

c)晶体学稳定性

将化合物在室温(RT)、在＜5％、56％和75％相对湿度(RH)、50℃和40℃/75％RH下储存于开放条件下六星期后，研究形式II晶体结构的稳定性。

试验结果如下表G所示。

～Ref：与参照物相同

Cryst.：晶体

形式II熔化分解，因此无熔解热报道。

DSC曲线中额外的吸热信号是由于溶剂蒸发。

形式II为晶体学不稳定的。

在不同的湿度条件下储存后，观察到改变。

起始材料与在RT/56％RH、RT/75％RH和40℃/75％RH条件下储存后的IR光谱和XRD图谱不同。

在RT/56％RH、RT/75％RH和40℃/75％RH条件下储存后的变化由于吸收水分。

d)化学稳定性

将形式II储存于不同的开放条件下1、4和8星期。这些条件为40℃/75％RH、50℃、RT/＜5％RH、RT/56％RH、RT/75％RH和0.3da ICH光。

储存后以HPLC和肉眼检视来分析化合物。

试验结果如下表H所示。

R425754的化学稳定性研究是由下列观察产生的：

R425754显示出对光敏感，这是由于在0.3da ICH光条件下储存后杂质增加的总和。

也在0.3da ICH光储存后观察到从白色至或橙色-棕色的颜色变化和在RT/56％RH、RT/75％RH和40℃/75％RH湿度条件下和50℃的升高的温度下储存后从白色至粉红色的颜色变化。