CN101647773A - 一种醋酸奥曲肽注射液 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种醋酸奥曲肽注射液，含有醋酸奥曲肽、甘露醇、吐温－80和柠檬酸，其中醋酸奥曲肽、甘露醇、吐温－80和柠檬酸的用量按重量比为1.2∶8～12∶0.001～0.0015∶0.1～0.5。本发明公开的醋酸奥曲肽注射液具有稳定性好的优点，可以在常温下放置6个月，不需避光。

Description

一种醋酸奥曲肽注射液

技术领域

本发明属于医药技术领域，更具体地，本发明公开了一种注射液及其制备方法。

背景技术

奥曲肽是人工合成的天然生长抑素的八肽衍生物，其化学名为D-苯丙氨酰-L-半胱氨酰-L-苯丙氨酰-D-色氨酰-L-赖氨酰-L-苏氨酰-L-半胱氨酰-L-苏氨醇环2→7)二硫化物，其药理作用与生长抑素相似但作用持续时间更长。它抑制生长激素(GH)和胃肠胰(GEP)内分泌系统肽的病理性分泌增加。

在动物体内，奥曲肽在抑制生长激素、胰高血糖素和胰岛素释放方面比生长抑素更强，而且对生长激素和胰高血糖素选择性更高。

奥曲肽对健康受试者表现出如下的抑制作用：抑制精氨酸、运动或胰岛素诱发的低血糖症引起的生长激素的释放；抑制餐后胰岛素、胰高血糖素、胃泌素和GEP系统其它肽类的释放以及精氨酸引起的胰岛素和胰高血糖素的释放；抑制由促甲状腺素释放激素(TRH)引起的促甲状腺素(TSH)的释放。与生长抑素相比，奥曲肽对生长激素分泌的抑制比对胰岛素分泌的抑制更强，而且不引起激素的反弹性高分泌(例如：肢端肥大症中的生长激素)。对肢端肥大症患者，奥曲肽可以降低血浆生长激素和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的浓度。几乎90％的病人其血浆水平下降50％或更多，且半数病例生长激素降至5ng/ml以下。多数病人的临床症状有明显减轻，如头痛，皮肤增厚，软组织水肿，多汗，关节疼痛和感觉异常等。此外，奥曲肽可使垂体大腺瘤病人的瘤体缩小。对GEP内分泌系统功能性肿瘤患者，奥曲肽通过其广泛的活性使多种临床症状得到改善。对曾接受过手术、肝动脉栓塞、化疗(链脲霉素或5-氟尿嘧啶等)后仍有与肿瘤相关的严重症状者，奥曲肽可起到良好的改善作用。

目前临床使用的奥曲肽商品名为善宁，为奥曲肽的醋酸盐注射液，并在其中加入了乳酸、甘露醇作为赋形剂，苯酚作为抑菌剂，由于中国药典规定静脉用注射液不能加入抑菌剂，所以善宁的生产厂家诺华公司又对配方进行了改进，利用乳酸、甘露醇为辅料得到了奥曲肽醋酸盐注射液，虽然此注射液的稳定性较好(避光2～8C可以保存5年)，但常温下只能保存两周，很不稳定，不利于储存和运输。

发明内容

为了解决上述问题，本专利的发明人进行了大量实验，改进了醋酸奥曲肽的配方，利用甘露醇和吐温-80作为稳定剂，利用柠檬酸作为PH调节剂，并对上述辅料的用量进行了优化，完成了本发明。

具体地，本发明公开了一种醋酸奥曲肽注射液，含有醋酸奥曲肽、甘露醇、吐温-80和柠檬酸。

更具体地，本发明公开的上述醋酸奥曲肽注射液，其中醋酸奥曲肽、甘露醇、吐温-80和柠檬酸的用量按重量比为1.2∶8～12∶0.001～0.0015∶0.1～0.5。

优选地，本发明公开的上述醋酸奥曲肽注射液，其中醋酸奥曲肽、甘露醇、吐温-80和柠檬酸的用量按重量比为1.2∶10∶0.0012∶0.3。

本发明的发明人在实验过程中发现，利用甘露醇和吐温-80作为醋酸奥曲肽注射液的稳定剂可以达到令人惊奇的效果，通过稳定性实验和光照实验，发现得到的醋酸奥曲肽注射液可以在常温下放置6个月且不需避光保存，达到了本发明的目的。

具体实施方式

以下实施例、实验例仅仅对本发明进行进一步说明，不应理解为对本发明的限制。

实施例1

醋酸奥曲肽注射液的制备

处方(以1000支计)：

醋酸奥曲肽1.2克

甘露醇8克

吐温-800.001克

柠檬酸0.1克

注射用水加至1000毫升

制备过程：加入8克甘露醇溶于100毫升注射用水中，后加入吐温-800.001克，溶解后加入醋酸奥曲肽1.2克，测PH，加入柠檬酸0.1克调PH至4.0～4.5之间，后加入注射用水至1000毫升。

药液配制后，经过0.22微米除菌薄膜进行无菌过滤，然后按制剂1毫升/支进行灌装，灌装后压塞，扎盖，灯检后进行包装。

实施例2

处方(以1000支计)：

醋酸奥曲肽1.2克

甘露醇12克

吐温-800.0015克

柠檬酸0.5克

注射用水加至1000毫升

制备过程同实施例1

实施例3

处方(以1000支计)：

醋酸奥曲肽1.2克

甘露醇10克

吐温-800.0012克

柠檬酸0.3克

注射用水加至1000毫升

制备过程同实施例1

实验例

检查方法与条件

色谱条件与系统提适应性试验  用于十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-1mol/L四甲基氢氧化铵溶液-水(100∶20∶880)并用磷酸调节PH值至4.5的溶液作为流动相A；以乙腈-1mol/L四甲基氢氧化铵溶液-水(600∶20∶380)并用磷酸调节PH值至4.5的溶液作为流动相B；采用梯度洗脱，流动相B的比例在12分钟内由29％～49％，并维持4分钟，检测波长为210mm。理论板数按奥曲肽峰计算应不低于5000，奥曲肽主峰保留时间应在4.5～7.5分钟之间，奥曲肽降解峰的保留时间应在5.5～8.5分钟之间，奥曲肽降解峰和奥曲肽峰的分离度应符合要求。

奥曲肽降解物的制备  取奥曲肽对照品适量，加水制成每1ml中约含0.1mg的溶液，置水浴中加热4小时，取该溶液20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，色谱图中相对于主峰保留时间约为1.1的杂质峰即为该降解产物。

有关物质  取供试品溶液；精密量取奥曲肽(市售标准品)1ml至100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。量取上述两种溶液各20ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰(辅料及溶剂峰除外)，量取各杂质峰的面积，它们的总和不得大于对照溶液主成分峰面积的3倍(3％)，其中降解产物奥曲肽峰的面积不得大于对照溶液主要成分峰面积的2倍(2％)。

实验例1影响因素的试验

按实施例1～3各制备三批样品，每批抽样，并以市售善宁作为对照品进行实验。

对本品受光照、高温、高湿度的影响进行考察，观测本品的外观性状、分(降)解产物、吸湿重量、及奥曲肽含量的变化。

醋酸奥曲肽注射液分(降)解产物及含量的HPLC分析：采用上述检查方法与条件中公开的HPLC方法进行。

1.光照试验

取供试品，在4500lx光照度下放置，并于5、10天取样，测定各项指标，与0天的数据进行比较。试验结果表明：实施例1～3产品经4500lx光照10天，分降解杂质很少，小于1％，可以不用避光保存，而对照品善宁分降解杂质显著增加(大于15％)，奥曲肽含量显著减小，故为保证质量，应避光保存。

2、高温试验

取供试品，分别在8℃、25℃、40℃和60℃条件下放置，并于5、10天取样考察，与0天的数据进行比较。试验结果表明：实施例1～3产品在60℃放置10天，分降解杂质很少，小于1％，奥曲肽含量基本没有减少；分别在8℃、25℃和40℃放置10天，各项指标均没有明显改变，故可以在室温下保存。而对照品善宁分降解杂质显著增加(大于15％)，奥曲肽含量显著减小，为保证品质，应凉处贮藏。

3、高湿度试验

取供试品，分别在室温相对湿度为75％和92.5％的条件下放置10天，并于5、10天取样考察，与0天数据比较，结果表明，所有样品在室温相对湿度为75％和92.5％条件下放置10天，各项指标均没有改变。

实验例2

按实施例1～3各制备三批样品，每批抽样，并以市售善宁作为对照品进行实验。

1.加速试验

取供试品置40℃相对湿度为75％条件下放置6月，并于1，2，3，6月取样，测定各项指标，与0时的数据比较，试验结果表明：实施例1~3产品在40℃相对湿度为75％条件下放置6月，分降解杂质无明显增加，奥曲肽含量无明显改变，说明本发明实施例得到的样品相对稳定；而对照品善宁分降解杂质显著增加(大于10％)。

2.长期试验考察

取供试品分别于8℃、25℃及长期试验条件下放置，定期于3，6，9，12……个月取样，测定各项指标，与0时的数据，试验结果表明：实施例1~3产品8℃、25℃及长期试验条件下放置试验6个月稳定，而对照品善宁在8℃长期试验条件下放置试验6个月比较稳定，在25℃放置试验6个月含量明显降低。

3.稳定性试验结论

对供试品的稳定性试验结果表明，实施例1~3产品8℃、25℃、长期试验、及加速试验条件下稳定，60℃高温试验条件下分降解杂质无明显增加，可以常温保存6个月，不避光。

实验例3醋酸奥曲肽注射液溶血试验

动物：新西兰家兔，体重2.24kg，雄性，购自中山医院大学试验动物中

药物：醋酸奥曲肽注射液，实验例1产品。实验前用注射用生理盐水溶液成12ml备用。

方法：取家兔1只，自颈动脉取血约20ml，置三角瓶中，用竹签搅拌去除纤维蛋白，然后将血移入刻度离心管内，加入生理盐水5-10ml，混合后离心10分钟(2000-2500/分)，去除上清夜，再用生理盐水混合离心，反复洗3-4次，至上清夜呈无色透明方可用于试验。将所得红细胞按其容积，用生理盐水稀释成2％的混悬液。

取试管7支，编号排列于试管架上，按下表加入各种溶液：

表1醋酸奥曲肽注射液对家兔急性溶血实验

第6管为不容血对照管，第7管为完全溶血对照管。轻轻摇匀后，置37℃恒温水浴中观察5小时，于孵育0.5小时及1小时内各观察一次，1小时后，每隔1小时观察一次。

结果判断标准如下：

①+++：完全溶血，溶液澄明红色，管底无细胞残留。

②++：部分溶血，溶液澄明红色或棕色，管底有少量红细胞残留。

③-：无溶血，红细胞全部下沉，上层液体无色澄明。

④+：凝集，虽不溶血，但出现红细胞凝集，振摇后不能分散或出现药物性沉淀。

结果：实验结果表明，第1-6号均无溶血和凝集现象，第7管完全溶血。表明醋酸奥曲肽注射液在37℃保温环境下，5小时以内均未引起家兔红细胞溶血或凝集，说明适用于静脉途径给药。

实施例2、实施例3产品也进行上述实验，结果与实施例1产品相同。

实验例4过敏试验

实验目的：观察动物重复注射受试物后所产生的过敏反映情况。

受试药物：

实施例1产品

溶液配制：致敏液  原液

          供试液  原液

对照药物

(1)阳性对照药物：

品名：牛血清白蛋白

规格：1g/瓶

提供单位：上海丽珠东风生物技术有限公司

批号：9905084

溶液配制：

致敏液  0.5％牛血清白蛋白溶液

供试液  0.5％牛血清白蛋白溶液

(2)阴性对照药物

品名：氯化钠注射液

规格：250ml

提供单位：上海长征制药厂

批号：9711112

溶液配制：

致敏液  氯化钠注射液

供试液  氯化钠注射液

试验动物：

名称：豚鼠    性别：阳性组为♀余为♂    体重：250-350g

来源：上海生物制品研究所合格证号：医动字第02-21-19号

实验方法：

设供试品1组，阳性对照1组、阴性对照组1组，每组取健康豚鼠6只，连续3次间日腹腔注射致敏液0.5ml/只，然后将每组豚鼠均分为二部分，各3只，分别于第一次注射后14日及21日自静脉注射供试液1ml/只，观察注射后15分钟内动物的过敏反应情况，并继续观察24小时。

结果：

a)阴性对照组(性别：♂)

b)阳性对照组(性别：♀)

c)受试药物组

结论：本品经豚鼠过敏试验，无过敏反应。

实施例2、实施例3产品同样进行上述实验，结果与实施例1产品实验结果相同。

实验例5醋酸奥曲肽注射液降压物质检查方法

检查方法  本实验所用猫购自中山医科大学实验动物中心，体重3.3kg，雌性未孕。戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，固定于保温手术台，分离气管并插入插管以使呼吸畅通。在一侧颈动脉插入连接测压计的动脉套管，管内充满适宜的抗凝剂溶液，以RM6200多导生理盐水记录仪(日本光电)记录血压。在一侧股静内插入静脉插管，供注射药液用。试验中应保持动物体温。全部手术完毕后，将测压计调节到与动物血压相当的高度，14.5Kpa，开启动脉夹，待血压稳定后，即可进行药液注射。各次注射速度相同，每次注射后立即注入2ml的氯化钠注射液，相邻两次注射的间隔时间5分钟，每次注射应在前一次反应恢复稳定以后进行。

自静脉轮流注入上述对照品稀释液，剂量按动物体重每1kg注射组胺0.05ug、0.1ug及0.15ug，每个剂量应各重复2～3次。

取对照品稀释液按动物体重每1kg注射组胺0.1ug的剂量(d_S)，供试品溶液(实施例1产品)按上述文中规定的剂量(d_T)，照下列次序注射一组4个剂量：d_S、d_T、d_T、d_S、d_T由于奥曲肽文献报道剂量选择范围较大，故ds皆选择组胺0.1ug/kgd_T则选择了4个剂量，即10.0ug/kg、3.3ug/kg、1.0ug/kg、0.3ug/kg，每次为同一剂量，实验分别重复了4次。

结果：

1、灵敏度检查

组胺对照品降压灵敏度(kpa)

组胺剂量(ug/kg)	0.05	0.1	0.15
				降压幅度(Kpa)	3.0	3.8	4.5

2、样品检查

醋酸奥曲肽注射液降压检查(Kpa)

本实验所组胺三个剂量组降压明显，0.1ug剂量降压大于2.67Kpa，结果说明动物符合标准，试验灵敏度符合规定。醋酸奥曲肽注射液四个剂量组皆未引起明显血压下降，彼此之间亦无差别，故实验证明实施例1产品的降压物质检查符合规定。

实施例2、实施例3产品经过上述实验，结果与实施例1产品实验结果相同。

Claims (4)

1.一种醋酸奥曲肽注射液，含有醋酸奥曲肽、甘露醇、吐温-80和柠檬酸。

2.权利要求1所述的醋酸奥曲肽注射液，其中醋酸奥曲肽、甘露醇、吐温-80和柠檬酸的用量按重量比为1.2∶8～12∶0.001～0.0015∶0.1～0.5。

3.权利要求2所述的醋酸奥曲肽注射液，其中醋酸奥曲肽、甘露醇、吐温-80和柠檬酸的用量按重量比为1.2∶10∶0.0012∶0.3。

4.权利要求1～3任一所述的醋酸奥曲肽注射液，还含有注射用水。