CN101642185B - 一种注射型大豆分离蛋白及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种注射型大豆分离蛋白及其制备方法，属于大豆蛋白及其加工技术领域。本发明采用低温豆粕为原料，经过碱提、脱气、酸沉制备分离蛋白凝乳，然后使用中性蛋白酶对分离蛋白凝乳进行酶解，反应结束后进过加热灭酶、灭菌、闪蒸、均质、喷雾干燥，最后在喷雾干燥所得的干粉上喷涂大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末状羟基化改性大豆磷脂的水溶液或液体状羟基化改性大豆磷脂，得到分散性、吸水性、保水性、吸油性和凝胶性都较好的大豆蛋白。该大豆分离蛋白可以用在注射型肉制品、低温肉制品、固体饮料、面制品、调味品等行业。
Description
技术领域
本发明涉及大豆蛋白及其加工技术领域，具体涉及一种注射型大豆分离蛋白及其制备方法。
背景技术
大豆分离蛋白具有很高的营养价值和良好的功能性质，广泛应用于食品的多个领域，作为多种食品的基础原料，应用于香肠、火腿、罐头等凝胶型产品加工中，不仅可以起到与动物蛋白的互补作用，提高肉制品的营养价值，还可以使肉制品的脂肪降低、组织细腻、富有弹性、增加肉香味及保水性，延长保质期。
与凝胶型分离蛋白相比较，高档肉制品生产中使用的注射型分离蛋白更为重要，对分离蛋白产品功能性的要求更为全面。在肉制品生产过程中需要将分离蛋白利用专用针头注射到大块肉中，要求分离蛋白具有良好的吸水性、保水性、吸油性和凝胶性的同时，具有较高的溶解性。
申请号为200610045807.2的发明专利申请公开说明书(公开号CN1840680A)公开了一种双酶法改性生产注射型大豆分离蛋白工艺，该发明采用低温脱脂豆粕为原料，在生产大豆分离蛋白过程中采用蛋白酶和酰基转移酶对大豆分离蛋白进行复合改性，提高产品的吸水性、保水性、吸油性和凝胶性。但该方法存在三个缺陷：首先，酰基转移酶的价格很昂贵，在国内市场进口的酰基转移酶价格在1800元/kg以上，大大地提高了大豆分离蛋白的成本，很难被市场接受；其次，酰基转移酶的酶解时间要求2～3个小时，生产流程过于缓慢，降低了工业生产中的生产效率；最后，在此发明中，必须两次离心分离大豆分离蛋白凝块，两次分离蛋白凝块，将大大增加大豆分离蛋白的流失率，降低产品的得率。该发明难以满足工业化生产的需求。
因此，需要这样一种注射型大豆分离蛋白，其分散性、吸水性、保水性、吸油性和凝胶性都较好，同时又可以实现大规模的工业化生产，以更大范围应用于食品工业中。
发明内容
鉴于以上现有技术中存在的缺陷，本发明旨在提供一种注射型大豆分离蛋白及其制备方法。
本发明的一个方面提供一种制备注射型大豆分离蛋白的方法，所述方法包括如下步骤：
(1)以低温脱脂豆粕为原料，经过碱提、脱气、酸沉制备分离蛋白凝乳；
(2)将所述分离蛋白凝乳与水形成浓度8-15％的范围内的底物；
(3)以与所述底物的重量比为0.01∶100-0.2∶100的量在所述底物中加入中性蛋白酶，在pH值6.5-7.5，温度45-55℃的范围内酶解10-60分钟，得到中性蛋白酶酶解产物；
(4)对所述酶解产物进行灭酶、杀菌、均质、喷雾干燥，得到干粉；
(5)在所述干粉上喷涂：
(i)由HLB值为7-13的大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末状羟基化改性大豆磷脂与水形成的浓度为15-50％的水溶液，所述水溶液温度为50-60℃，所述大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末状羟基化改性大豆磷脂与所述干粉的重量比为0.01∶100-0.65∶100，混拌；或
(ii)与所述干粉的重量比为0.01∶100-0.65∶100的HLB值范围为7-13的液体状羟基化改性大豆磷脂，所述液体状羟基化改性大豆磷脂温度为50-60℃，混拌。
本发明的再一个方面是提供以上所述的方法制备的注射型大豆分离蛋白。
发明的详细描述
本发明的主要原料采用低温脱脂豆粕。低温脱脂豆粕NSI(氮溶解指数)高，有利于蛋白的溶出，同时低温豆粕颜色呈淡黄色，有利于保证最终产品的色泽。
本发明的关键在于注射型大豆分离蛋白的制备方法的步骤(3)和步骤(5)。
本发明中酶解反应的目的是通过酶解反应有效地降低大豆分离蛋白的分子量，从而适当降低大豆分离蛋白的凝胶性，增强其分散性，同时要合理控制酶解反应的进程，使大豆分离蛋白的分散性与凝胶性处于均衡状态。
步骤(3)酶解反应的关键是酶的选择和酶的加入量。本发明中步骤(3)中所使用的酶是中性蛋白酶，选择中性蛋白酶作为酶解反应的酶可以有效的防止由于pH值的调节所带来的不必要的盐量的增加。市场上可以购买到的各种品牌的中性蛋白酶均可使用在本发明的步骤(3)中。
在本发明制备注射型大豆分离蛋白的方法的优选实施方案中，中性蛋白酶的加入量为该中性蛋白酶与该底物的重量比的0.08∶100-0.16∶100。
磷脂分子中含亲油的脂肪酸基团和亲水的磷酸基团，可以以薄膜状包裹在油脂的表面，与水分子结合，形成乳浊液，具有优良的乳化特性，是天然的乳化剂。在本发明的步骤(4)所得的干粉上喷涂一定量的磷脂，可以有效增加大豆分离蛋白在水中的乳化性，增强大豆分离蛋白的吸水性、吸油性
《中华人民共和国行业标准磷脂通用技术条件LS/T 3219-1994(SB/T 10206-1994)》将磷脂划分为三类：浓缩磷脂、粉末磷脂和卵磷脂。粉末磷脂和卵磷脂的亲水性较好，易溶于水；浓缩磷脂的亲油性较好(HLB值在3左右)，易溶于油，难溶于水。在本发明的步骤(4)所得的干粉上喷涂一定量的大豆粉末磷脂和大豆卵磷脂的水溶液可以有效地增加大豆分离蛋白在水中的乳化性，增强大豆分离蛋白的吸水性、吸油性，而喷涂浓缩磷脂则不会增加上述的特性。
《中华人民共和国国家标准食品添加剂改性大豆磷脂GB12486-90》规定了粉末状羟基化改性大豆磷脂的理化指标。在实际的工业化产品中，羟基化改性大豆磷脂有粉末状和液态两种，都具有亲水性好的特点，在本发明的步骤(4)所得的干粉上喷涂一定量的粉末状羟基化改性大豆磷脂的水溶液和液态羟基化改性大豆磷脂可以有效的增加大豆分离蛋白在水中的乳化性，增强大豆分离蛋白的吸水性、吸油性。
HLB值是Hydrophile-Lipophile Balance Number的缩写，称亲水疏水平衡值，亲水亲油平衡值(HLB值)是用来表示表面活性剂亲水或亲油能力大小的值。
在本发明制备注射型大豆分离蛋白的方法的优选实施方案中，在步骤(5)中所述大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末状羟基化改性大豆磷脂与所述干粉的重量比为0.3∶100-0.6∶100。
在本发明制备注射型大豆分离蛋白的方法的另一优选实施方案中，在步骤(5)中所述液体状羟基化改性大豆磷脂的HLB值范围为9-11。
在本发明制备注射型大豆分离蛋白的方法的又一优选实施方案中，在步骤(5)中所述液体状羟基化改性大豆磷脂与所述干粉的重量比为0.3∶100-0.6∶100。
本发明所述的注射型大豆分离蛋白的制备方法中步骤(1)以低温脱脂豆粕为原料，经过碱提、脱气、酸沉制备分离蛋白凝乳所述制备分离蛋白凝乳的操作包括步骤：
(1a)将所述低温脱脂豆粕原料与48℃-—52℃的水按水与所述原料的重量比为9∶1-7∶1在浸出罐中配制成第一混合物，并用浓度为25％-30％的氢氧化钠将所述第一混合物的pH值调至7.2-8.0，对经pH调整的所述第一混合物进行匀速搅拌，保持20-30分钟，分离机分离，分离所述第一混合物得到液相的一次浸出的蛋白液和固相的一次浸出豆渣，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，一次浸出的蛋白液蛋白浓度为5-15％；
(1b)将所述一次浸出豆渣与48℃-52℃的水按水与所述一次浸出豆渣的重量比为7∶1-—5∶1在浸出罐中配制成第二混合物，pH值保持自然，对第二混合物进行匀速搅拌，保持5-—15分钟，分离机分离，分离所述第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，二次浸出的蛋白液蛋白浓度为3-10％；
(1c)合并所述一次浸出蛋白液和所述二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，将对所述合并浸出蛋白液打入脱气罐中，加入适量消泡剂进行脱气；
(1d)经一个在线混拌器加浓度为29-30％的食品级盐酸调节所述经脱气的蛋白液的pH值至4.2-4.6，经酸沉后的蛋白液由分离机以3000-4000rpm分离，出的轻相为乳清，重相为凝乳，乳清要求离心沉淀物≤0.05ml/15ml，凝乳的固形物≥35％；
(1e)将凝乳在解碎机中加水稀释。
本发明所述的注射型大豆分离蛋白的制备方法中步骤(4)操作包括如下步骤：
(4a)加热所述酶解产物至120-170℃，作用4-12s进行灭酶和灭菌，得到无菌酶解产物；
(4b)均质所述无菌酶解产物，均质的压力为8-15MPa；
(4c)喷雾干燥所述均质后的无菌酶解产物：高压泵出口压力20-40MPa，进料量为5-7T/h，出口温度为60-80℃，喷嘴压力20-40MPa，得到干粉。加热所述酶解产物至120-170℃，可以有效的提高大豆分离蛋白的凝胶性。
在本发明制备注射型大豆分离蛋白的方法的优选实施方案中，在步骤(4a)之后，步骤(4b)之前对所述无菌酶解产物进行闪蒸，真空度-0.04--0.09MPa。闪蒸的目的是以快速降低经杀菌过程的大豆蛋白水解物的温度，保持蛋白的活性，同时去除大豆蛋白水解物的腥味。
按照本发明方法制备的所述的注射型分离蛋白的制备方法制备的注射型大豆分离蛋白的感官指标、理化指标、微生物指标如下：
感官要求应符合表1的规定
表1感官要求
| 项目 | 要求 |
| 色泽 | 乳白色或淡黄色(色泽均匀一致) |
| 组织形态 | 粉状，无结块，有少量微粒 |
| 滋、气味 | 具有本品固有的滋、气味，无异味 |
| 杂质 | 无肉眼可见杂质 |
理化指标应符合表2的规定
表2理化指标
| 项目 | 指标 |
| 粗蛋白(以干基计，N×6.25)，％ ≥ | 88.5 |
| 灰分(以干基计)，％ ≤ | 6.5 |
| 水分，％ ≤ | 7.0 |
| 铅(以Pb计)，mg/kg ≤ | 0.2 |
| 铜(以Cu计)，mg/kg ≤ | 20.0 |
| 无机砷(以As计)，mg/kg ≤ | 0.1 |
| 黄曲霉毒素B1，ug/kg ≤ | 5.0 |
| 六六六，mg/kg ≤ | 0.05 |
| 滴滴涕，mg/kg ≤ | 0.05 |
微生物指标应符合表3的规定
表3微生物指标
| 项目 | 指标 |
| 菌落总数，cfu/g ≤ | 30000 |
| 大肠菌群，MPN/100g ≤ | 30 |
| 致病菌 | 不得检出 |
本发明创造的优点：
1、本方法生产的产品在水中迅速分散并溶解，无团粒，在肉制品加工中不堵塞注射针头。
2、本方法生产的产品使其在低温肉制品的加工中应用更方便，具有良好的保水性，防止离水，提高出品率；具有良好的凝胶性，弹力加强，添加后制成的产品营养价值高，口感好，色泽鲜。
3、本方法生产工艺简单，产品功能性良好，产品不扬尘，溶解性好，使用方便。
本发明的用途或应用领域：注射型肉制品、低温肉制品、固体饮料、面制品、调味品等行业。
附图说明
图1为制备注射型大豆分离蛋白的方法的一种实施方案的流程图。
实施例
本实施例中所采用的低温脱脂豆粕购自哈高科油脂公司，所使用的Pritex7L酶购自无锡杰能科生物工程有限公司；Neutrase0.8L酶购自诺维信生物技术有限公司；Corolase7089、CorolaseLAP购自德国AB酶制剂公司；庞博中性蛋白酶、东恒华道中性蛋白酶、日成中性蛋白酶购自广西南宁庞博生物工程有限公司、南宁东恒华道生物科技有限公司、肇东市日成酶制剂有限公司；其他试剂来自市售。
本实施例中所采用的ADM大豆粉末磷脂、九三大豆粉末磷脂、美亚斯大豆粉末磷脂、美亚斯大豆卵磷脂、粉末状美亚斯羟基化改性大豆磷脂、羟基化改性大豆磷脂Yelkin1080、羟基化改性大豆磷脂Centromix E磷脂购自美国ADM公司、九三油脂有限责任公司、北京美亚斯磷脂技术有限公司、美国中央大豆公司；
所采用的设备浸出罐、中和罐自制，市场上销售的浸出罐、中和罐可以满足本发明的实施要求；分离机500、分离机601购自阿法拉伐公司；分离机CC458购自维斯伐利亚公司，流化床购自美国劳力公司。
实施例一：
将1600公斤低温脱脂豆粕原料与48℃的水按水与原料重量比为9∶1在浸出罐中配制成第一混合物，并用浓度为29％-30％的氢氧化钠将第一混合物的pH调至7.2-7.6，对经pH调整的第一混合物进行匀速搅拌，保持20分钟，分离机分离第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10300公斤和固相的一次浸出豆渣3020公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，一次浸出蛋白液中蛋白的浓度为7-8％(重量比)；将一次浸出豆渣与48℃的水按水与一次浸出豆渣的重量比为7∶1在浸出罐中配制成第二混合物，pH保持自然，保持5分钟，分离机分离第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液19070公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，二次浸出蛋白液中蛋白的浓度为3-4％(重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脱气罐中对所述合并浸出蛋白液加消泡剂乳化硅油(购自湖北枣阳四海化工)进行脱气；经脱气的蛋白液经泵进入酸沉罐前，经一个在线混拌器加浓度为29-30％的食品级盐酸调PH，将pH控制在4.2-4.6，经酸沉的蛋白液由分离机以3500rpm分离，分离出的轻相为乳清，重相为凝乳1870公斤，乳清要求离心沉淀物≤0.05ml/15ml，凝乳的固形物≥35％。将凝乳在解碎机中加水稀释，凝乳与水形成浓度为8％的底物。底物进入中和罐中进行酶解，在底物中加入Neutrase0.8L酶，Neutrase0.8L酶加入量为与底物的重量比为0.1％，pH控制在7.0-7.2之间，温度控制在45-48℃的范围内，酶解40分钟，得到Neutrase0.8L酶酶解产物；该酶解产物经泵进入杀菌管中，加热至150℃，作用9s进行灭酶和灭菌，得到无菌大豆蛋白水解物；将无菌大豆蛋白水解物经泵通过杀菌管进入闪蒸罐闪蒸，闪蒸罐的真空度为-0.06MPa，闪蒸的气体为废气，液相进入均质机中均质，均质的压力为10MPa；经均质后的无菌大豆蛋白水解物进入喷雾干燥塔进行喷雾干燥：高压泵出口压力20-40MPa，进料量为5-7T/h，出口温度为75-80℃，喷嘴压力20-40MPa，得到干粉700公斤；喷雾干燥后的干粉在流化床内喷涂由HLB值为7的美亚斯大豆粉末磷脂与水形成的浓度为25-30％的水溶液，水溶液温度为50-60℃，所喷涂的美亚斯大豆粉末磷脂与干粉的重量比为0.4∶100-0.45∶100，即喷涂美亚斯大豆粉末磷脂2.8-3.15公斤，经混拌器混拌后，进行包装。
实施例二：
将1600公斤低温脱脂豆粕原料与48℃的水按水与原料重量比为8∶1在浸出罐中配制成第一混合物，并用浓度为29％-30％的氢氧化钠将第一混合物的pH调至7.2-7.6，对经pH调整的第一混合物进行匀速搅拌，保持25分钟，分离机分离第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10270公斤和固相的一次浸出豆渣3060公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，一次浸出蛋白液中蛋白的浓度为8-9％(重量比)；将一次浸出豆渣与48℃的水按水与一次浸出豆渣的重量比为6∶1在浸出罐中配制成第二混合物，pH保持自然，保持6分钟，分离机分离第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液19000公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，二次浸出蛋白液中蛋白的浓度为3.5-4.5％(重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脱气罐中对所述合并浸出蛋白液加消泡剂乳化硅油(购自湖北枣阳四海化工)进行脱气；经脱气的蛋白液经泵进入酸沉罐前，经一个在线混拌器加浓度为29-30％的食品级盐酸调PH，将pH控制在4.2-4.6，经酸沉的蛋白液由分离机以3600rpm分离，分离出的轻相为乳清，重相为凝乳1940公斤，乳清要求离心沉淀物≤0.05ml/15ml，凝乳的固形物≥35％。将凝乳在解碎机中加水稀释，凝乳与水形成浓度为9％的底物。底物进入中和罐中进行酶解，在底物中加入庞博中性蛋白酶，庞博中性蛋白酶加入量为与底物的重量比为0.14％，pH控制在7.0-7.2之间，温度控制在45-48℃的范围内，酶解30分钟，得到庞博中性蛋白酶酶解产物；酶解产物经泵进入杀菌管中，加热至145℃，作用10s进行灭酶和灭菌，得到无菌大豆蛋白水解物；将无菌大豆蛋白水解物经泵通过杀菌管进入闪蒸罐闪蒸，闪蒸罐的真空度为-0.065MPa，闪蒸的气体为废气，液相进入均质机中均质，均质的压力为9MPa；经均质后的无菌大豆蛋白水解物进入喷雾干燥塔进行喷雾干燥：高压泵出口压力20-40MPa，进料量为5-7T/h，出口温度为75-80℃，喷嘴压力20-40MPa，得到干粉720公斤。喷雾干燥后的干粉在流化床内喷涂由HLB值为9的九三大豆粉末磷脂与水形成的浓度为30-35％的水溶液，水溶液温度为50-60℃，所喷涂的九三大豆粉末磷脂与干粉的重量比为0.35∶100-0.4∶100，即喷涂九三大豆粉末磷脂2.52-2.88公斤，经混拌器混拌后，进行包装。
实施例三：
将1600公斤低温脱脂豆粕原料与48℃的水按水与原料重量比为7∶1在浸出罐中配制成第一混合物，并用浓度为29％-30％的氢氧化钠将第一混合物的pH调至7.2-7.6，对经pH调整的第一混合物进行匀速搅拌，保持28分钟，分离机分离第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10230公斤和固相的一次浸出豆渣3120公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，一次浸出蛋白液中蛋白的浓度为7.5-8.5％(重量比)；将一次浸出豆渣与48℃的水按水与一次浸出豆渣的重量比为5∶1在浸出罐中配制成第二混合物，pH保持自然，保持5.5分钟，分离机分离第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液18900公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，二次浸出蛋白液中蛋白的浓度为3-3.5％(重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脱气罐中对所述合并浸出蛋白液加消泡剂乳化硅油(购自湖北枣阳四海化工)进行脱气；经脱气的蛋白液经泵进入酸沉罐前，经一个在线混拌器加浓度为29-30％的食品级盐酸调PH值，将pH控制在4.2-4.6，经酸沉的蛋白液由分离机以3700rpm分离，分离出的轻相为乳清，重相为凝乳1885公斤，乳清要求离心沉淀物≤0.05ml/15ml，凝乳的固形物≥35％。将凝乳在解碎机中加水稀释，凝乳与水形成浓度为10％的底物。底物进入中和罐中进行酶解，首先在底物中加入Corolase7089酶，Corolase7089酶加入量为与底物的重量比为0.06％，pH控制在7.0-7.2之间，温度控制在45-48℃的范围内，酶解18分钟，得到Corolase7089酶酶解产物，然后在Corolase7089酶酶解产物中加入CorolaseLAP酶，CorolaseLAP酶加入量为与底物的重量比为0.06％，pH控制在7.0-7.2之间，温度控制在45-48℃的范围内，酶解18分钟，得到CorolaseLAP酶酶解产物，酶解产物经泵进入杀菌管中，加热至155℃，作用6s进行灭酶和灭菌，得到无菌大豆蛋白水解物；将无菌大豆蛋白水解物经泵通过杀菌管进入闪蒸罐闪蒸，闪蒸罐的真空度为-0.07MPa，闪蒸的气体为废气，液相进入均质机中均质，均质的压力为8MPa；经均质后的无菌大豆蛋白水解物进入喷雾干燥塔进行喷雾干燥：高压泵出口压力20-40MPa，进料量为5-7T/h，出口温度为75-80℃，喷嘴压力20-40MPa，得到干粉702公斤。喷雾干燥后的干粉在流化床内喷涂由HLB值为7的美亚斯大豆卵磷脂与水形成的浓度为30-35％的水溶液，水溶液温度为50-60℃，所喷涂的美亚斯大豆卵磷脂与干粉的重量比为0.45∶100-0.5∶100，即喷涂美亚斯大豆卵磷脂3.16-3.51公斤，经混拌器混拌后，进行包装。
实施例四：
将1600公斤低温脱脂豆粕原料与48℃的水按水与原料重量比为9∶1在浸出罐中配制成第一混合物，并用浓度为29％-30％的氢氧化钠将第一混合物的pH调至7.2-7.6，对经pH调整的第一混合物进行匀速搅拌，保持20分钟，分离机分离第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10300公斤和固相的一次浸出豆渣3020公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，一次浸出蛋白液中蛋白的浓度为7-8％(重量比)；将一次浸出豆渣与48℃的水按水与一次浸出豆渣的重量比为7∶1在浸出罐中配制成第二混合物，pH保持自然，保持5分钟，分离机分离第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液19070公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，二次浸出蛋白液中蛋白的浓度为3-4％(重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脱气罐中对所述合并浸出蛋白液加消泡剂乳化硅油(购自湖北枣阳四海化工)进行脱气；经脱气的蛋白液经泵进入酸沉罐前，经一个在线混拌器加浓度为29-30％的食品级盐酸调PH，将pH控制在4.2-4.6，经酸沉的蛋白液由分离机以3500rpm分离，分离出的轻相为乳清，重相为凝乳1870公斤，乳清要求离心沉淀物≤0.05ml/15ml，凝乳的固形物≥35％。将凝乳在解碎机中加水稀释，凝乳与水形成浓度为8％的底物。底物进入中和罐中进行酶解，在底物中加入日成中性蛋白酶，日成中性蛋白酶加入量为与底物的重量比为0.08％，pH控制在7.0-7.2之间，温度控制在45-48℃的范围内，酶解45分钟，得到日成中性蛋白酶酶解产物；该酶解产物经泵进入杀菌管中，加热至150℃，作用9s进行灭酶和灭菌，得到无菌大豆蛋白水解物；将无菌大豆蛋白水解物经泵通过杀菌管进入闪蒸罐闪蒸，闪蒸罐的真空度为-0.06MPa，闪蒸的气体为废气，液相进入均质机中均质，均质的压力为10MPa；经均质后的无菌大豆蛋白水解物进入喷雾干燥塔进行喷雾干燥：高压泵出口压力20-40MPa，进料量为5-7T/h，出口温度为75-80℃，喷嘴压力20-40MPa，得到干粉700公斤；喷雾干燥后的干粉在流化床内喷涂由HLB值为10的粉末状美亚斯羟基化改性大豆磷脂与水形成的浓度为25-30％的水溶液，水溶液温度为50-60℃，所喷涂的粉末状美亚斯羟基化改性大豆磷脂与干粉的重量比为0.3∶100-0.35∶100，即喷涂粉末状美亚斯羟基化改性大豆磷脂2.1-2.45公斤，经混拌器混拌后，进行包装。
实施例五：
将1600公斤低温脱脂豆粕原料与48℃的水按水与原料重量比为8∶1在浸出罐中配制成第一混合物，并用浓度为29％-30％的氢氧化钠将第一混合物的pH调至7.2-7.6，对经pH调整的第一混合物进行匀速搅拌，保持25分钟，分离机分离第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10270公斤和固相的一次浸出豆渣3060公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，一次浸出蛋白液中蛋白的浓度为8-9％(重量比)；将一次浸出豆渣与48℃的水按水与一次浸出豆渣的重量比为6∶1在浸出罐中配制成第二混合物，pH保持自然，保持6分钟，分离机分离第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液19000公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，二次浸出蛋白液中蛋白的浓度为3.5-4.5％(重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脱气罐中对所述合并浸出蛋白液加消泡剂乳化硅油(购自湖北枣阳四海化工)进行脱气；经脱气的蛋白液经泵进入酸沉罐前，经一个在线混拌器加浓度为29-30％的食品级盐酸调PH，将pH控制在4.2-4.6，经酸沉的蛋白液由分离机以3600rpm分离，分离出的轻相为乳清，重相为凝乳1940公斤，乳清要求离心沉淀物≤0.05ml/15ml，凝乳的固形物≥35％。将凝乳在解碎机中加水稀释，凝乳与水形成浓度为9％的底物。底物进入中和罐中进行酶解，在底物中加入东恒华道中性蛋白酶，东恒华道中性蛋白酶加入量为与底物的重量比为0.06％，pH控制在7.0-7.2之间，温度控制在45-48℃的范围内，酶解50分钟，得到东恒华道中性酶酶解产物；酶解产物经泵进入杀菌管中，加热至145℃，作用10s进行灭酶和灭菌，得到无菌大豆蛋白水解物；将无菌大豆蛋白水解物经泵通过杀菌管进入闪蒸罐闪蒸，闪蒸罐的真空度为-0.065MPa，闪蒸的气体为废气，液相进入均质机中均质，均质的压力为9MPa；经均质后的无菌大豆蛋白水解物进入喷雾干燥塔进行喷雾干燥：高压泵出口压力20-40MPa，进料量为5-7T/h，出口温度为75-80℃，喷嘴压力20-40MPa，得到干粉720公斤。喷雾干燥后的干粉在流化床内喷涂由HLB值为9的羟基化改性大豆磷脂Yelkin1080与水形成的浓度为30-35％的水溶液，水溶液温度为50-60℃，所喷涂的羟基化改性大豆磷脂Yelkin1080与干粉的重量比为0.35∶100-0.4∶100，即喷涂羟基化改性大豆磷脂Yelkin10802.52-2.88公斤，经混拌器混拌后，进行包装。
实施例六：
将1600公斤低温脱脂豆粕原料与48℃的水按水与原料重量比为7∶1在浸出罐中配制成第一混合物，并用浓度为29％-30％的氢氧化钠将第一混合物的pH调至7.2-7.6，对经pH调整的第一混合物进行匀速搅拌，保持28分钟，分离机分离第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10230公斤和固相的一次浸出豆渣3120公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，一次浸出蛋白液中蛋白的浓度为7.5-8.5％(重量比)；将一次浸出豆渣与48℃的水按水与一次浸出豆渣的重量比为5∶1在浸出罐中配制成第二混合物，pH保持自然，保持5.5分钟，分离机分离第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液18900公斤，液相的主要成分为可溶性蛋白、碳水化合物和盐，二次浸出蛋白液中蛋白的浓度为3-3.5％(重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脱气罐中对所述合并浸出蛋白液加消泡剂乳化硅油(购自湖北枣阳四海化工)进行脱气：经脱气的蛋白液经泵进入酸沉罐前，经一个在线混拌器加浓度为29-30％的食品级盐酸调PH值，将pH控制在4.2-4.6，经酸沉的蛋白液由分离机以3700rpm分离，分离出的轻相为乳清，重相为凝乳1885公斤，乳清要求离心沉淀物≤0.05ml/15ml，凝乳的固形物≥35％。将凝乳在解碎机中加水稀释，凝乳与水形成浓度为10％的底物。底物进入中和罐中进行酶解，首先在底物中加入Corolase7089酶，Corolase7089酶加入量为与底物的重量比为0.08％，pH控制在7.0-7.2之间，温度控制在45-48℃的范围内，酶解12分钟，得到Corolase7089酶酶解产物，然后在Corolase7089酶酶解产物中加入CorolaseLAP酶，CorolaseLAP酶加入量为与底物的重量比为0.08％，pH控制在7.0-7.2之间，温度控制在45-48℃的范围内，酶解12分钟，得到CorolaseLAP酶酶解产物，酶解产物经泵进入杀菌管中，加热至155℃，作用6s进行灭酶和灭菌，得到无菌大豆蛋白水解物；将无菌大豆蛋白水解物经泵通过杀菌管进入闪蒸罐闪蒸，闪蒸罐的真空度为-0.07MPa，闪蒸的气体为废气，液相进入均质机中均质，均质的压力为8MPa；经均质后的无菌大豆蛋白水解物进入喷雾干燥塔进行喷雾干燥：高压泵出口压力20-40MPa，进料量为5-7T/h，出口温度为75-80℃，喷嘴压力20-40MPa，得到干粉702公斤。喷雾干燥后的干粉在流化床内喷涂由HLB值为10的羟基化改性大豆磷脂Centromix E与水形成的浓度为30-35％的水溶液，水溶液温度为50-60℃，所喷涂的羟基化改性大豆磷脂Centromix E与干粉的重量比为0.45∶100-0.5∶100，即喷涂羟基化改性大豆磷脂Centromix E 3.16-3.51公斤，经混拌器混拌后，进行包装。
试验例高分散型分离蛋白的分散性、分散稳定性、粘度、保水性、凝胶的实验和相关数据：
测定方法：
1、分散性的测定
1.1、实验仪器
十分之一天平(感量0.1的天平)一台
500ml干燥烧杯一个
250ml量筒一个
玻璃棒一支
秒表一块
1.2、实验方法
首先称取12g样品放于500ml干燥烧杯中，再量取188ml冰水(0℃的水)放入烧杯中，用玻璃棒充分搅拌，观察产品完全分散的时间及泡沫情况。
1.3、实验结果
产品在30秒内完全分散，且无泡沫。
2、分散稳定性的测定
2.1试剂
蒸馏水(16-25℃)
2.2仪器
天平(感量为0.1g)、离心机、磁力搅拌器、玻璃棒、烧杯(250ml)、离心管(10ml)、量筒(100ml)
2.3测试步骤
用天平称取5.0g分离蛋白，置于烧杯中，用100ml量筒量取95ml蒸馏水，倒入烧杯中
用玻璃棒搅拌均匀后。在室温下，用磁力搅拌器搅拌60min。用离心管量取10ml蛋白液，1500转/分离心5min。读出未分散到水中的样品的体积数X。
2.4分析结果
10——倒入离心管中的10ml蛋白液
X——未分散到水中的样品的体积数
3、粘度测定
3.1试剂
蒸馏水(16-25℃)、消泡剂
3.2仪器
3.2.1天平(感量0.01g)
3.2.2烧杯(500ml)
3.2.3温度计(0℃-100℃)
3.2.4玻璃棒
3.2.5量筒(250ml)
3.2.6洗瓶
3.2.7数显粘度计(NDJ-8S)
3.2.8钢勺
3.2.9离心筒(250ml)
3.2.10手持高速搅拌器
3.3测定方法
称取试样30.00g于500ml塑料烧杯中，倒入170ml蒸馏水，加10滴消泡剂(消泡剂∶水＝2∶1)，用玻璃棒搅拌30秒，将挂于烧杯壁上的试样全部溶于水中，用手持高速搅拌器低速档搅拌30秒后，在2分钟内，用数显粘度计测定其粘度，直接读取并记录。
粘度计选取的参数
| S | R | |
| 转子 | 4号 | —— |
| 转速 | —— | 60 |
3.4结果分析
每个试样要求做大于或等于2个平行样，取平行性好的2个值平均报告。
4、保水性的测定
4.1试剂
蒸馏水(16-25℃)
4.2仪器
天平(感量为0.1g)、离心机、磁力搅拌器、玻璃棒、带刻度离心管10ml、量筒(100ml)、烧杯(250ml)、
4.3测试步骤
称5.0g分离蛋白样品，置于烧杯中，加蒸馏水45ml。在室温下，用玻璃棒搅拌均匀后，用磁力搅拌器搅拌5min。用离心管量取10ml蛋白液，在2500转/分下离心25min。读出未被分离蛋白吸收的水(析出的水)的毫升数X。
4.4分析结果
持水性(％)＝(10-X)×100％
X——未被分离蛋白吸收的水(析出的水)的毫升数，ml
10——倒入离心管中的蛋白液体积，ml
5、凝胶性的测定
5.1试剂
蒸馏水(18-25℃)
5.2仪器
5.2.1凝胶测定仪：美国凝胶制造者协会(GMIA)推荐使用的英国TAXT 2i型物性测定仪，探头选用AOAC探头(英国TAXT 2i型物性测定仪配件中P/0.5，1/2英寸直径，35mm长直角下缘探头)
5.2.2水浴锅(室温-100℃)
5.2.3高速手持搅拌器(8000-10000转/分)
5.2.4离心机(5000转/分)及250ml离心筒
5.2.5电子天平(0.01g)
5.2.6玻璃棒、钢勺、500ml塑料烧杯、100ml量筒、塑料薄膜、橡皮套、壁纸刀、10cm直尺
5.3测定方法
5.3.1试样制备：
称取待测粉末样品25.0g置于烧杯中，用量筒量取100ml蒸馏水加入烧杯中，用璃棒充分混合后，用高速手持搅拌器高速档进一步搅拌2分钟直至搅拌均匀，将试样用钢勺全部转移至250ml离心筒中，放入离心机中，以2500转/分离心5分钟，取出离心筒用塑料薄膜封口，用橡皮套套严。放入90℃水浴中(液面高于凝胶面)，保持30分钟，取出后放置室温5分钟后，将凝胶块从离心筒中取出，用塑料薄膜包好并做好标记，同时作平行样。
5.3.2试样储存：
将制备好的试样放入4℃冰箱中保持16小时。
5.3.3试样测定：
从冰箱中取出冷却后的凝胶，在室温下，用10cm直尺量取30mm高度，用壁纸刀从上下两侧整齐平整的切出30mm高度的凝胶块。以底部做为测定面，用已设定好参数(具体参数见表1)的2.2.1凝胶仪在凝胶块的中心位置测定一点。
表1
2.2.1凝胶仪具体参数设定：
5.4图形分析
每次测定形成一个曲线，选取最高点抛锚，测定该点凝胶强度(g)、凝胶长度(mm)、压迫时间(s)、予以记录。
5.5分析结果：
凝胶强度(g)、凝胶长度(mm)、压迫时间(s)均可在仪器上直接读取，予以记录。
以两平行样测定值的平均值作为凝胶性的测定结果并报告。
相关数据：
| 实施例 | 产品流水号 | 分散性s | 分散稳定性％ | 粘度Pa·s | 保水性％ | 凝胶性g/mm |
| 1 | 104553 | 30 | 88 | 7.693 | 500 | 871.8/16.375 |
| 2 | 104558 | 30 | 82 | 6.99 | 450 | 746.9/15.135 |
| 3 | 104561 | 30 | 86 | 7.573 | 480 | 780.7/13.430 |
| 4 | 104565 | 30 | 86 | 8.28 | 480 | 727.8/14.882 |
| 5 | 104568 | 30 | 85 | 7.18 | 500 | 807.8/15.153 |
| 6 | 104570 | 30 | 86 | 6.48 | 470 | 736.1/13.425 |
Claims (8)
1.一种制备注射型大豆分离蛋白的方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)以低温脱脂豆粕为原料，经过碱提、脱气、酸沉制备分离蛋白凝乳；
(2)将所述分离蛋白凝乳与水形成浓度8-15％的范围内的底物；
(3)以与所述底物的重量比为0.01∶100-0.2∶100的量在所述底物中加入中性蛋白酶，在pH值6.5-7.5，温度45-55℃的范围内酶解10-60分钟，得到中性蛋白酶酶解产物；
(4)对所述中性蛋白酶酶解产物进行灭酶、杀菌、均质、喷雾干燥，得到干粉；
(5)在所述干粉上喷涂：
(i)由HLB值为7-13的大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末状羟基化改性大豆磷脂与水形成的浓度为15-50％的水溶液，所述水溶液温度为50-60℃，所述大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末状羟基化改性大豆磷脂与所述干粉的重量比为0.01∶100-0.65∶100，混拌；或
(ii)与所述干粉的重量比为0.01∶100-0.65∶100的HLB值范围为7-13的液体状羟基化改性大豆磷脂，所述液体状羟基化改性大豆磷脂温度为50-60℃，混拌。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(3)所述中性蛋白酶与所述底物的重量比为0.08∶100-0.16∶100。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)所述制备分离蛋白凝乳的操作包括步骤：
(1a)将低温脱脂豆粕原料与48℃-52℃的水按水与原料的重量比为9∶1-7∶1配制成第一混合物，并用浓度为25％-30％的氢氧化钠将所述第一混合物的pH调至7.2-8.0，对经pH调整的第一混合物进行匀速搅拌，保持20-30分钟，分离第一混合物得到液相的一次浸出蛋白液和固相的一次浸出豆渣；
(1b)将所述一次浸出豆渣与48℃-52℃的水按水与所述一次浸出豆渣的重量比为7∶1-5∶1配制成第二混合物，保持5-15分钟，分离所述第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液；
(1c)合并所述一次浸出蛋白液和所述二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，对所述合并浸出蛋白液进行脱气；
(1d)调节经脱气的蛋白液的pH至4.2-4.6，以3000-4000rpm分离出的轻相为乳清，重相为凝乳；
(1e)将凝乳加水稀释。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(4)操作包括如下步骤：
(4a)加热所述中性蛋白酶酶解产物至120-170℃，作用4-12s进行灭酶和灭菌，得到无菌酶解产物；
(4b)均质无菌酶解产物，均质的压力为8-15MPa；
(4c)喷雾干燥均质后的无菌酶解产物：高压泵出口压力20-40MPa，进料量为5-7T/h，出口温度为60-80℃，喷嘴压力20-40MPa，得到干粉。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤(4a)之后，步骤(4b)之前对所述无菌酶解产物进行闪蒸，真空度-0.04--0.09MPa。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(5)中的所述大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末状羟基化改性大豆磷脂与所述干粉的重量比为0.3∶100-0.6∶100。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(5)中的所述液体状羟基化改性大豆磷脂的HLB值范围为9-11。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(5)中的所述液体状羟基化改性大豆磷脂与所述干粉的重量比为0.3∶100-0.6∶100。
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