CN101579388A

CN101579388A - 一种治疗骨质疏松症的药物组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN101579388A
Application number: CNA2008101067785A
Authority: CN
Inventors: 段震文; 郭树仁
Original assignee: Beijing Peking University WBL Biotech Co Ltd
Current assignee: Beijing Peking University WBL Biotech Co Ltd
Priority date: 2008-05-15
Filing date: 2008-05-15
Publication date: 2009-11-18
Anticipated expiration: 2028-05-15
Also published as: CN101579388B

Abstract

本发明公开一种治疗骨质疏松症的药物组合物，该组合物由红曲、骨碎补和淫羊藿组成。本发明药物组合物治疗骨质疏松症效果显著，特别是治疗绝经期和绝经后引起骨质疏松症尤其突出，且无副作用。

Description

一种治疗骨质疏松症的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种药物组合物，特别是涉及一种治疗骨质疏松症的药物组合物。

背景技术

近年骨质疏松症成为绝经期和绝经后妇女的常见病，骨质疏松症是一种生理性退行性病变，对人体健康的损害很大，临床发病率很高。在临床上多以腰背疼痛、骨折、不明原因的陈旧性骨折或增生性脊柱炎，年龄多在35-55之间。骨质疏松症是一种与内分泌功能有关的全身性骨量减少及骨组织结构改变，伴有骨脆性及易导致骨折的疾病。常给中老年人生活带来不便和痛苦，甚至因骨折而丧失生命，增加了家庭和社会负担。随着社会老龄化，预防和治疗骨质疏松症已成为重要的医学科研课题。而目前临床上治疗方法主要是雌激素替代疗法，但长期应用雌激素可能增加乳腺癌和子宫内膜癌发病的危险。

发明内容

本发明目的在于提供一种治疗骨质疏松症的药物组合物。

本发明的另一目的在于提供该药物组合物的制备方法和新用途。

本发明是通过如下技术方案实现的：

本发明药物组合物的原料药组成为：

红曲1-5重量份骨碎补1-5重量份淫羊藿1-5重量份

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

红曲3重量份骨碎补3重量份淫羊藿3重量份

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

红曲2重量份骨碎补4重量份淫羊藿2重量份

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

红曲4重量份骨碎补2重量份淫羊藿4重量份

本发明药物组合物的制备方法为：取1/2红曲粗粉，浸泡过夜，以6-10倍量蒸馏水70-90℃下浸提2-4次，每次1-3h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物A；取其余红曲粗粉，浸泡过夜，以6-10倍量70-95％乙醇回流提取2-4次，每次1-3h，合并提取液，回收乙醇，减压干燥后得70-95％乙醇提取物B；骨碎补、淫羊藿以6-10倍量水，提取2-4次，每次1-3h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物C；水提物A、B、C混合，加入常规辅料制成临床接受的剂型。

本发明药物组合物的制备方法为：取1/2红曲粗粉，浸泡过夜，以8倍量蒸馏水80℃下浸提3次，每次2h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物A；取其余红曲粗粉，浸泡过夜，以8倍量95％乙醇回流提取3次，每次2h，合并提取液，回收乙醇，减压干燥后得95％乙醇提取物B；骨碎补、淫羊藿各3重量份以8倍量水，提取3次，每次2h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物C；水提物A、B、C混合，加入常规辅料制成临床接受的剂型。本发明药物组合物加入常规辅料，按照常规工艺，制成片剂、胶囊剂、散剂、软胶囊剂、滴丸、蜜丸、丸剂、颗粒剂、蜜炼膏剂、缓释制剂、速释制剂、控释制剂、口服液体制剂、冻干粉针剂或注射制剂。

本发明药物组合物治疗骨质疏松症效果显著，特别是治疗绝经期和绝经后引起骨质疏松症尢其突出，且无副作用。

下面实验和实施例用于进一步说明但不限于本发明。

实验例：实验采用新生大鼠颅骨ROB体外培养法，考察本发明药物组合物和红曲95％乙醇提取物对ROB增殖分化的影响。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1药品与试剂

本发明药物组合物和红曲95％乙醇提取物；己烯雌酚(DES)；新生牛血清；DMEM培养基、胰蛋白酶、II型胶原酶(Gibco)；四甲基偶氮唑盐(MTT)(AMRESCO)；

碱性磷酸酶(ALP)试剂盒、考马斯亮兰试剂盒。

1.1.2仪器

HERA CELL 150型CO2培养箱(Kendro LaboratoryPoducts GmbH)；超净工作台；XDS-1B型倒置生物显微镜；ELX808型酶标仪。

1.1.3实验动物：新生SD大鼠(1～3d)。

1.2方法

1.2.1实验药物制备

取1/2红曲粗粉，浸泡过夜，以8倍量蒸馏水80℃下浸提3次，每次2h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物A；取余下红曲粗粉，浸泡过夜，以8倍量95％乙醇回流提取3次，每次2h，合并提取液，回收乙醇，减压干燥后得95％乙醇提取物B；骨碎补、淫羊藿以8倍量水，提取3次，每次2h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物C；水提物A、B、C混合，得本发明药物组合物。取红曲粗粉，浸泡过夜，以8倍量95％乙醇回流提取3次，每次2h，合并提取液，回收乙醇，减压干燥后得95％乙醇提取物。

1.2.2ROB增殖功能测定

MTT法中吸光度与细胞数目线性关系考察

将第3代ROB经0.25％胰蛋白酶消化制成细胞悬液，分别以0.25×104、0.5×104、0.75×104、1.0×104、1.25×104和1.5×104cellPwell密度接种于96孔·10·ACMP1Aug，2007，Vol135，No13板，每组设6个复孔，培养24h后，采用MTT法，用酶标仪于570nm处测定各孔的吸光度。

1.2.3ROB分化功能测定

1.2.4ALP试剂盒法中吸光度与细胞数目线性关系考察

制备细胞悬液，分别以0.25×104、0.5×104、0.75×104、1.0×104和1.25×104cellPwell密度接种于96孔板，每组设6个复孔，培养24h，加0.1％TritonX-100PPBS液裂解细胞12h。按ALP试剂盒法用酶标仪于520nm处测定吸光度。

1.2.5细胞分化功能测定

制备细胞悬液，按1×104cellPwell密度接种于96孔板，培养24h，更换含药培养基，继续培养72h后，裂解细胞，按ALP试剂盒法于520nm处测定吸光度，再按考马斯亮兰法于595nm处测定蛋白质含量(gPL)。ALP活性以UPg·port表示。

结果：

对ROB增殖的影响

MTT法线性关系考察，以6孔吸光度的平均值(y)与细胞数目(x)作线性回归，得回归方程：y＝2E-05x+0.228(R2＝0.9928，n＝6)，在(0.25～1.5)×104cellPwell范围内，细胞数与吸光度呈较好的线性关系。对ROB增殖的影响：本发明药物组合物明显促进ROB增殖，增殖率明显高于对照组(P＜0.05)95％乙醇提取物能明显促进ROB增殖，10-3mgPml浓度组作用最强，增殖率显著高于空白对照组(P＜0.01)。本发明药物组合物明显高于95％乙醇提取物对照组。

2.2对ROB分化的影响

ALP试剂盒法线性关系考察，以6孔吸光度的平均值(y)与细胞数目(x)作线性回归，得回归方程：y＝1E-05x+0.1077(R2＝0.9945，n＝6)，在(0.25～1.25)×104cellPwell范围内，细胞数与吸光度呈较好的线性关系。

对ROB分化的影响：95％乙醇提取物和均显著提高ROB的ALP活性水平(P＜0.01)；本发明药物组合物和95％乙醇提取物能明显提高ALP活性水平(P＜0.05)；本发明药物组合物明显高于95％乙醇提取物对照组。

骨形成过程中，ROB代谢经历4个阶段：细胞增殖、细胞外基质分泌与成熟、细胞外基质矿化和细胞休止与凋亡。碱性磷酸酶(ALP)是ROB分泌的一种酶蛋白，ALP活性的高表达是ROB分化的特异性标志。ROB的增殖率和ALP活性是最常见评价骨形成能力的指标。本实验考察了本发明药物组合物和95％乙醇提取物对ROB增殖和分化的影响，结果表明，两者都能明显促进ROB增殖和分化，尤其是本发明药物组合物的作用效果显著。在细胞水平上证实了本发明药物组合物对骨质疏松症的防治作用。

实验证明，本发明药物组合物灌胃可明显提高去势大鼠骨密度值，改善骨的生物力学性能。

下述实施例均能实现上述实验例的效果。

具体实施方式

实施例1：

红曲3kg 骨碎补3kg 淫羊藿3kg

取1/2红曲粗粉，浸泡过夜，以8倍量蒸馏水80℃下浸提3次，每次2h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物A；取红曲粗粉，浸泡过夜，以8倍量70-95％乙醇回流提取3次，每次2h，合并提取液，回收乙醇，减压干燥后得70-95％乙醇提取物B；骨碎补、淫羊藿以8倍量水，提取3次，每次2h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物C；水提物A、B、C混合，加入常规辅料制成口服液。

实施例2：

红曲2kg 骨碎补4kg 淫羊藿2kg

上述药物按照常规工艺加入常规辅料制成胶囊。

实施例3：

红曲4kg 骨碎补2kg 淫羊藿4kg

上述药物按照常规工艺加入常规辅料制成缓释片剂。

实施例4：

红曲2kg 骨碎补2kg 淫羊藿4kg

上述药物按照常规工艺加入常规辅料制成冻干粉针剂。

实施例5：

红曲4kg 骨碎补4kg 淫羊藿2kg

上述药物按照常规工艺加入常规辅料制成注射剂。

Claims

1、一种治疗骨质疏松症的药物组合物，其特征在于该药物组合物原料药组成为：红曲1-5重量份骨碎补1-5重量份淫羊藿1-5重量份。

2、如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物原料药组成为：红曲3重量份骨碎补3重量份淫羊藿3重量份。

3、如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物原料药组成为：红曲2重量份骨碎补4重量份淫羊藿2重量份。

4、如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物原料药组成为：红曲4重量份骨碎补2重量份淫羊藿4重量份。

5、如权利要求1-4之一所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为：在该药物组合物中加入常规辅料，按照常规工艺，制成片剂、胶囊剂、散剂、软胶囊剂、滴丸、蜜丸、丸剂、颗粒剂、蜜炼膏剂、缓释制剂、速释制剂、控释制剂、口服液体制剂、冻干粉针剂或注射制剂。

6、如权利要求1-4之一所述的药物组合物的制备方法为：，其特征在于该方法为：取1/2红曲粗粉，浸泡过夜，以6-10倍量蒸馏水70-90℃下浸提2-4次，每次1-3h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物A；取其余红曲粗粉，浸泡过夜，以6-10倍量70-95％乙醇回流提取2-4次，每次1-3h，合并提取液，回收乙醇，减压干燥后得70-95％乙醇提取物B；骨碎补、淫羊藿以6-10倍量水，提取2-4次，每次1-3h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物C；水提物A、B、C混合，加入常规辅料制成临床接受的剂型。

7、如权利要求6所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为：取1/2红曲粗粉，浸泡过夜，以8倍量蒸馏水80℃下浸提3次，每次2h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物A；取其余红曲粗粉，浸泡过夜，以8倍量95％乙醇回流提取3次，每次2h，合并提取液，回收乙醇，减压干燥后得95％乙醇提取物B；骨碎补、淫羊藿各3重量份以8倍量水，提取3次，每次2h，合并水提液，浓缩，减压干燥后得水提物C；水提物A、B、C混合，得本发明药物组合物。

8、如权利要求1-4之一所述的药物组合物在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用。