CN1015776B - 罗氏海盘车明胶代血浆的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明是关于罗氏海盘车明胶代血浆的制备方法，是属于医学血液学领域里的血浆代用品(简称为：代血浆)的制备方法。该工艺方法开发了海洋药物资源，利用物产丰富的罗氏海盘车—海洋棘皮动物为原料，经过独特的工艺处理，使罗氏海盘车的体壁热压降解成为分子量适中的明胶代血浆。该代血浆临床疗效确切，用药安全，并能参与创伤、烧伤机体的蛋白质合成代谢有利于创伤修复，在国外爱滋病流行时，尤其求助于该代血浆来治疗创伤、烧伤及其它失血性休克症。

Description

本发明是关于罗氏海盘车明胶代血浆的制备方法，是属于医学血液学领域里的血浆代用品的制备方法。血浆代用品（简称：代血浆）是一种治疗创伤及其它疾病的重要血容扩充剂。

当前在医学临床中，普遍应用的代血浆是右旋糖酐、羟乙基淀粉和明胶衍生物。前两种代血浆，它们的制备工艺复杂，工艺条件控制较难，并且其制成品价格较高。其中右旋糖酐在临床应用中有诱发类过敏或过敏反应。这些过敏反应包括轻度的皮肤反应到严重的呼吸和循环衰竭，甚者有导致死亡的可能;羟乙基淀粉在血液循环中易被血液淀粉酶所水解，其存留时间较短。然而明胶代血浆在临床应用中过敏反应症状却比血浆蛋白或右旋糖酐都轻微。在血源紧张的情况下，应用上述前两种代血浆往往由于产量少、价格高而“供不应求”。因此开发明胶衍生物。这种明胶代血浆质高价廉是很有必要的。

本发明的目的是：开发海洋药物资源，以利于满足军民，在平战时期所用代血浆的需求，设计出一种药物资源丰富，制备工艺简单的明胶代血浆制备方案。使用该工艺方法，可以生产出具有无特异抗原性、分子量适中，可参加人体内代谢，可大量多次输入，无毒性反应的明胶代血浆。

本发明的任务是由下述工艺方案而完成的：

选用新鲜的海洋棘皮动物-海星（最好是罗氏海盘车Aste-rias    rollestoni    Bell）洗涤洁净后，首先酸浸：即加入3～21%（重量、体积比）的盐酸溶液，以浸没海星躯体为宜，并经常翻拌海星，使其酸浸均匀。浸酸的目的是除去海星体中的钙盐等矿物 质，使其躯体骨质柔软而有弹性，利于提取胶朊。该工艺步骤的工艺条件是：控制酸浸液的温度在13℃以下，在16～20天时间内每隔8小时检查并保持酸浸液的浓度不低于3%（重量、体积比）。在上述温度、浓度的工艺条件下酸浸步骤可顺利进行。待浸酸完毕后，剖开海星，除尽其内脏。再用自来水反复冲洗至PH值近中性。

其次碱浸：

将上述经酸浸的海星（最好是罗氏海盘车）的体壁，投入0.03～5%（重量、体积比）的石灰水中，经常翻拌。碱浸的目的是利用石灰乳中的OH^-离子，打破蛋白质的二、三级结构，以达到溶解胶朊以外的粘性蛋白质、强性蛋白质，使肽链胶朊溶出，同时还可使海星体壁的残余脂肪发生皂化反应而被除去。该工艺步骤的主要工艺条件是：控制碱浸液的温度在15℃以下，在20～30天内视碱浸液颜色变深时，更换石灰水。20～30天之后，取出海星体壁，用自来水漂洗至中性;再将漂洗至中性的海星体壁投入5-15%（重量、体积比）氢氧化钠溶液中去，适当搅拌2-15分钟，以不破碎体壁为度。二次碱浸其目的是进一步分解除去杂蛋白。二次碱浸后，立即排除碱浸液，再用自来水漂洗至PH值7.5-7.0微弱碱性;再加入蒸馏水漂洗两次，供熬胶用。

再次熬胶：

将上述经酸、碱处理的海星（最好是罗氏海盘车）的体壁，投入注射用水中去煮沸，除尽上层泡沫后，再进行热压降解处理，其工作表压为0.5～2.5kg/cm²，保压处理0.2～3小时。热压处理后，排尽压力观察胶液溶出情况，测定并调整降解后胶液的相对粘度在1.5～2.0之间，再将相对粘度在1.5～2.0的胶液投入1-2%（重量、体积比）的活性炭，常压煮沸脱色，之后用纸浆过滤，取滤 液;再投入2%（重量、体积比）的活性炭，常压煮沸再脱色，经石棉板减压抽滤，取滤液放冷待用。

最后配液：

将放冷的上述胶液分别经强酸性阳离子交换树脂和强碱性阴离子交换树脂处理，用以除去无机盐类;所得淋液再调整其PH值在4～7;加入注射用氯化钠使胶液氯化钠含量为0.9%，经微孔滤膜精滤，并装瓶密封后，在0.7kg/cm²工作表压下，灭菌30分钟，即得。

本发明所设计的罗氏海盘车明胶代血浆的制备方法，工艺设计合理，制备工艺简便，生产成本较低。应用罗氏海盘车制备的明胶代血浆，其原料资源丰富，我国渤、黄海沿岸海域均有大量罗氏海盘车生长分布。在经应用罗氏海盘车明胶代血浆的临床320例实验证明：该药品临床疗效确切，用药安全，并能参与创伤机体的蛋白质的合成代谢，有利于创伤修复，尤其是在国外爱滋病流行，使用人血或血浆制品难于保证其安全性，这就求助于该代血浆来治疗创伤、烧伤等失血性休克。该代血浆具有扩充血容量作用，抗休克有效率为93.9%，由于该代血浆体内半存留期较长，在应用于创伤扩容输液中，未见伤口渗血现象，而且还有提升血小板的作用。在应用于流行性出血热所致低血压休克的治疗中有明显升压作用。该代血浆可与20余种静脉用药物配伍，而无理化配伍禁忌。经实验测试，应用该代血浆对人体、心脏、肾脏、血液均无明显影响，未发现副作用和毒性反应。

本发明的实施例如下：

实施例1：药品批号：801122

取新鲜海盘车若干，投入到10%盐酸溶液中去，溶液面高于海盘车面5cm。每日翻拌1-3次，保持酸浸液的温度在10℃±2℃。 在第二、三、七、十、十四天分别补充酸液，使得酸浸液浓度维持在含酸量在5%以上。第十八天海盘车骨质全部软化后，取出海盘车除尽内脏，用自来水冲洗至近中性。

取上述经酸浸的海盘车之体壁投入到0.2%石灰水中，不时翻拌，控制碱浸液温度在10℃±1℃。在第十天时，更换石灰水一次。共浸石灰水21天。取出海盘车体壁，用自来水洗漂至近中性。分批投入8%氢氧化钠溶液中，适当搅拌5分钟，取出体壁用自来水漂洗至近中性（PH值为7.5～7.0），再加注射用水漂洗两次。迅速投入注射用水中煮沸后，除尽上表层泡沫。再将胶液置于密闭受压容器内，热压降解处理一小时，其工作表压为1kg/cm²。热压处理后，测定胶液含胶量为8%（重量/体积），加注射用水稀释至4%的含胶量，此时胶液相对粘度为1.8。所得全部胶液再加入2%（重量/体积）的活性炭，煮沸5分钟，立即通过纸浆制过滤介质减压过滤;取滤液，再加滤液体积的2%（重量/体积）活性炭煮沸3分钟，经石棉板减压过滤。放冷滤液，再通过强酸性732阳离子交换树脂处理，和强碱性717阴离子交换树脂处理。得淋液后，测定其含胶量，并用注射用水，稀释至含胶量为4%（重量/体积），再加入注射用氯化钠溶解入胶液中，使胶液含氯化钠量为0.9%（重量/体积），调整胶液PH值为5.0;经微孔滤膜精滤，装入500ml盐水瓶，共制得750瓶，封口后，在0.7kg/cm²热压下灭菌30分钟即得到橙黄色透明液体。这就是罗氏海盘车明胶代血浆，其平均分子量为2.2万，PH值为5.2，明胶含量为4.2%，相对粘度1.7，不含皂甙，热源及无菌检查合格，重金属含量＜1.5ppm，豚鼠全身过敏试验阴性，临床应用无不良反应。

实施例2：药品批号：841207

取新鲜海盘车若干，投入15%盐酸溶液中去。每日翻拌一次，保持并控制酸浸液温度为5℃±2℃，在第二、五、九、十七天分别补充新鲜酸液，使酸液浓度维持在3%以上。第二十天后，海盘车骨质全部软化。取出海盘车除尽内脏，用自来水冲洗近中性;再将海盘车体壁投入1%石灰水中，不时翻拌。保持并控制碱浸液温度为4℃±1℃，在第九天更换石灰水并保持碱浸液浓度为1%（含CaO）。在第二十八天后取出海盘车体壁，用自来水冲洗至近中性。再分批投入5%的氢氧化钠溶液中，不断搅拌8分钟后，以不破碎体壁为度，取出该体壁，用自来水漂洗至近PH值7.5-7.0;再用注射用水漂洗3次，迅速投入注射用水中煮沸5分钟，除尽上层泡沫，再将该胶液置于密闭容器，热压降解一小时，工作表压1.2kg/cm²，取样测定该胶液含胶量为6%，加注射用水稀释至4%后，测定其相对粘度为2.5，故过高，再经1kg/cm²热压处理30分钟，取样测定胶液相对粘度为1.9，故热降解完毕。取全部胶液加入该胶液量的2%（重量/体积）活性炭煮沸5分钟，通过纸浆制介质过滤，取滤液再加2%（重量/体积）活性炭煮沸3分钟后，经石棉板介质减压过滤，取滤液放冷。再将滤液分别通过强酸性732阳离子交换树脂和强碱性717阴离子交换树脂处理，将淋洗液测定其含胶量，并用注射用水稀释至含胶量为4%，再加入注射用氯化钠，使其溶解并含氯化钠量为0.9%，调整PH值为6.0后，经微孔滤膜精滤，灌入500ml盐水瓶，共制得980瓶，再于0.7kg/cm²热压灭菌30分钟，即得到橙黄色透明的胶液，该胶液微显乳光，其平均分子量为2.95万，PH值5.7，明胶含量为3.8%，相对粘度1.85，不含皂甙，热源、灭菌检查合格，重金属含量低于1.5ppm，豚鼠全身过敏试验阴性，临床应用无不良反应。

Claims (2)

1、一种罗氏海盘车明胶代血浆的制备方法，其由新鲜海星经过下述步骤而制成的：

(1)酸浸：

(1·1)加盐酸溶液浸没洁净的海星，间歇翻拌；

(1·2)控制酸浸液之温度；

(1·3)在16～20天内检查并保持酸浸液之浓度；

(1·4)待所投海星体壁全部软化后，剖除其内脏，用自来水反复冲洗至近中性；

(2)碱浸：

(2·1)将上述海星体壁投入石灰水中，经常翻拌；

(2·2)控制碱浸液之温度，共浸20～30天；

(2·3)用自来水漂洗至近中性；

(2·4)投入氢氧化钠溶液，搅拌适时，以不破碎海星体壁为度；

(2·5)排除碱浸液后，用自来水漂洗至PH值7.5-7.0微弱碱性，再加蒸馏水漂洗两次；

(3)熬胶：

(3·1)将上述海星体壁投入注射用水中煮沸，除尽上表层泡沫，进行热降解；

(3·2)热降解结束后，视胶液溶出情况，调整胶液浓度，使胶液相对粘度在1.5～2.0间；

(3·3)加1～2%(重量/体积)的活性炭煮沸后，以纸浆过滤，取滤液；

(3·4)滤液再用2%(重量/体积)活性炭煮沸，经石棉板减压抽滤，取滤液放冷待用；

(4)配液：

(4·1)放冷的上述胶液，分别经强酸、碱性，阳、阴离子交换树脂处理；

(4·2)树脂处理后，调整PH值4～7；

(4·3)加入注射用氯化钠，使胶液含氯化钠0.9%，经微孔滤膜精滤；

(4·4)装瓶密封，在0.7kg/cm²热压灭菌，30分，保存备用；

此外其特征在于：

(1·1)中所说的盐酸溶液浓度为：3～21%(重量/体积)；

(1·2)中所说的控制酸浸液之温度在13℃以下；

(1·3)中所说的酸浸液浓度为：每隔8小时检查并保持酸浸液之浓度在3%以上(重量/体积)；

(2·1)中所说的投石灰水之浓度在0.03～5%(重量/体积)；

(2·2)中所说的控制碱浸液之温度为：15℃以下；

(2·4)中所说的投入氢氧化钠溶液之浓度为：5～15%(重量/体积)，攪拌2～15分钟；

(3·1)中所说的热降解还包括采用热压降解处理，其工作表压为：0.5～2.5kg/cm²，处理时间为0.2～3小时。

2、按照权利要求1所述的罗氏海盘车明胶代血浆的制备方法，其特征在于所采用的新鲜海星是以罗氏海盘车（Asterias  roll-estoni  Bell）为最佳原料。