CN101569702A - 猴头健胃灵中药的质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
猴头健胃灵中药的质量检测方法,其步骤包括对延胡索的薄层色谱鉴别,通过高效液相色谱法测定白芍中芍药苷的含量不少于0.40mg,本发明还涉及以下检测以下步骤:a.对香附的薄层色谱进行鉴别;b.对白芍、甘草的薄层色谱进行鉴别;c.采用高效液相色谱法测定腺苷C10H13N5O4的含量不得少于0.070mg。本发明的方法可以有效地提高猴头健胃灵中药的质量标准,燕通过发明的检测方法,对有关检测指标推陈出新,增加检测指标,严格控制产品质量和确保疗效。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药的质量检测方法,特指猴头健胃灵中药的质量检测方法。
背景技术
猴头菌被历代宫廷视为佳肴珍品,历代的药学家都认为猴头菌有极高的药用价值,我国的药学名著《本草纲目拾遗》、《全国中药汇编》以及《中药大辞典》都有记载。猴头菌具有抗炎、消胀、解毒等作用,对于治疗各种胃肠疾病以及人体虚弱有独特疗效,随着科学技术的发展和生物制药技术的不断更新,猴头菌日益被世界所关注,成为科学研究的热点,日本、韩国以及东南亚国家都在开发研究。
猴头健胃灵胶囊在国内开创了名贵食用菌与多种中药配伍冶疗胃肠疾病的先河,填补了我国中药与食用菌配伍后治疗胃肠疾病的空白。
猴头健胃灵是国家中药保护品种,它的功能主治是:舒肝和胃,理气止痛。用于肝胃不和,胃脘胁肋胀痛,呕吐吞酸;慢性胃炎、胃及十二指肠溃疡属上述证候者;是一个治疗胃病的特效药。特别是对胃幽门螺旋杆菌有抑杀的作用,长期服用对消化道癌变有一定的预防作用,并且对胃癌能缓解症状,无毒副作用,是目前市场上治疗胃病的新特药。
猴头健胃灵胶囊质量标准被收载入2005年版《中国药典》一部,但其质量标准相对偏低,不能够严格控制产品质量,影响本品的质量和疗效,因此,原有的对猴头健胃灵中药的质量检测方法已不能适应对猴头健胃灵中药的质量的严格控制,需要提供一种新的,更严格地检测方法对质量进行控制。
发明内容
本发明的目的旨在提高猴头健胃灵中药的质量标准,通过发明的检测方法,对有关检测指标推陈出新,增加检测指标,严格控制产品质量和确保疗效。
发明人通过对原有的猴头健胃灵中药的质量标准的研究发现,原标准在鉴别上需上对糖类成份化学鉴别、氨基酸鉴别及延胡索鉴别,及测定白芍中芍药苷的含量,但是所检测的项目中,除延胡索的鉴别及测定白芍中芍药苷的含量外的其余两个检测项目实际上对产品质量的控制并没有产生积极的作用。因此发明人在原质量标准的基础上,对质量控制这一块做了全面的研究,确定了除延胡索的鉴别及测定白芍中芍药苷的含量的控制外,新增了对香附、白芍和苷草的定性鉴别,并加入有效成分腺苷的含量测定,并通过以上的技术突破,控制君药猴头菌培养物中腺苷的含量,有专属性,更好控制产品质量。
本发明的目的是通过下述方式实现的:
猴头健胃灵中药的质量检测方法,其步骤包括对延胡索的薄层色谱鉴别,通过高效液相色谱法测定白芍中芍药苷的含量不少于0.40mg,还包括以下步骤:
a、对香附的薄层色谱进行鉴别;
b、对白芍、甘草的薄层色谱进行鉴别;
c、采用高效液相色谱法测定腺苷C10H13N5O4的含量不得少于0.070mg。
所述的香附的薄层色谱鉴别过程为:取猴头健胃灵胶囊内容物10g,置500ml圆底烧瓶中,加水200ml,连接挥发油测定器,自测定器上端加水使充满刻度部分,并溢流入烧瓶为止,再加乙酸乙酯2ml,连接回流冷凝管,加热回流2小时,分取乙酸乙酯液,作为供试品溶液;另取香附对照药材1g,同法制成对照药材溶液;再取α-香附酮对照品,加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;吸取上述三种溶液各10μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸92∶5∶5为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯254nm下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;喷以二硝基苯肼试液,放置片刻,斑点渐变为橙红色;
所述的白芍、甘草的薄层色谱鉴别过程为:取猴头健胃灵胶囊内容物5g,加乙醚50ml,加热回流1小时,滤过,滤液弃去,药渣加甲醇40ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加水40ml使溶解,用正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用水洗涤3次,每次20ml,蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草对照药材1g,同法制成对照药材溶液;再取芍药苷对照品,加乙醇制成每1ml含1mg溶液,作为对照品溶液;吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水15∶1∶1∶2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与甘草对照药材色谱及芍药苷对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;再置紫外光灯365nm下检视,供试品色谱中,在与甘草对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;
所述的采用高效液相色谱法测定腺苷的含量过程:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水6∶94为流动相;检测波长为260nm;理论板数按腺苷峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备:取腺苷对照品适量,精密称定,加水制成每1ml含10μg的溶液,即得;
供试品溶液的制备:取猴头健胃灵胶囊装量差异项下的内容物,混匀,取约2g,精密称定,精密加入水50ml,密塞,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,即得;猴头健胃灵胶囊每粒含腺苷(C10H13N5O4)不得少于0.070mg。
所述的延胡索的薄层色谱鉴别是:取猴头健胃灵中药5g,加甲醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水适量使溶解,加浓氨试液调至碱性,用乙醚振摇提取3次,每次10ml,合并乙醚提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取延胡索对照药材1g,同法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以环己烷-二氯甲烷-甲醇15∶8∶2为展开剂,在用展开剂预饱和的展开缸内展开,取出,晾干,置碘蒸气中熏至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;在空气中挥尽板上吸附的碘后,置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
所述的延胡索的薄层色谱鉴别过程中,发明人还改用毒性较低的环己烷-二氯甲烷-甲醇(15∶8∶2)为展开剂更有利于环保要求。
通过上述本发明的检测方法可有效地实现对猴头健胃灵中药产品的质量的控制,具有良好的精密度、重现性、稳定性和回收率。
具体的实施方式
实施例1
猴头菌培养物 160g 海螵蛸 80g 醋延胡索 40g
酒白芍 40g 醋香附 40g 甘草 40g
以上六味,取猴头菌培养物160g,其中取80g,加水煎煮二次,第一次加水10倍量,第二次加水8倍量,每次2小时,合并煎液,滤过,滤液减压浓缩成相对密度为1.15(70℃)的清膏,加入剩余的猴头菌培养物粉末80g,混匀,干燥,粉碎成细粉,过筛,与上述猴头菌培养物浸膏粉末及适量的淀粉混匀,灭菌,装入胶囊制成1000粒,即得本品胶囊剂,内容物为棕黄色至棕褐色的粉末;气芳香,味甜、微苦。
检测方法:
(1)取本品内容物5g,加甲醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水适量使溶解,加浓氨试液调至碱性,用乙醚振摇提取3次,每次10ml,合并乙醚提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取延胡索对照药材1g,同法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录VI B)试验,吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以环己烷-二氯甲烷-甲醇(15∶8∶2)为展开剂,在用展开剂预饱和的展开缸内展开,取出,晾干,置碘蒸气中熏至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;在空气中挥尽板上吸附的碘后,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(2)取本品10g,置500ml圆底烧瓶中,加水200ml,连接挥发油测定器,自测定器上端加水使充满刻度部分,并溢流入烧瓶为止,再加乙酸乙酯2ml,连接回流冷凝管,加热回流2小时,分取乙酸乙酯液,作为供试品溶液。另取α-香附酮对照品,加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录VI B)试验,吸取上述三种溶液各10μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(92∶5∶5)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;喷以二硝基苯肼试液,放置片刻,斑点渐变为橙红色。
(3)取本品粉末5g,加乙醚50ml,加热回流1小时,滤过,滤液弃去,药渣加甲醇40ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加水40ml使溶解,用正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用水洗涤3次,每次20ml,蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g,同法制成对照药材溶液。再取芍药苷对照品,加乙醇制成每1ml含1mg溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录VI B)试验,吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与甘草对照药材色谱及芍药苷对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。再置紫外光灯(365nm)下检视,供试品色谱中,在与甘草对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。。
【检查】应符合胶囊剂项下有关的各项规定(附录I L)。
【含量测定】白芍照高效液相色谱法(中国药典一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(25∶75)为流动相;检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 取芍药苷对照品适量,精密称定,加流动相制成每1ml含20μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品内容物,研细,取约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇50ml,称定重量,充分振摇后,超声处理(功率250W,频率33kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,放置30分钟,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含白芍以芍药苷(C23H28O11)计,不得少于0.40mg。
腺苷 照高效液相色谱法(中国药典一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(6∶94)为流动相;检测波长为260nm。理论板数按腺苷峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备 取经五氧化二磷减压干燥12小时的腺苷对照品适量,精密称定,加水制成每1ml含10μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品装量差异项下的内容物,混匀,取约2g,精密称定,精密加入水50ml,密塞,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含腺苷(C10H13N5O4)不得少于0.070mg。
实施例2
取湖南新汇制药有限公司生产的猴头健胃灵胶囊按实施例1的检测方法得到以下结果:
Claims (2)
1、猴头健胃灵中药的质量检测方法,其步骤包括对延胡索的薄层色谱鉴别,通过高效液相色谱法测定白芍中芍药苷的含量不少于0.40mg,其特征在于,还包括以下步骤:
a、对香附的薄层色谱进行鉴别;
b、对白芍、甘草的薄层色谱进行鉴别;
c、采用高效液相色谱法测定腺苷C10H13N5O4的含量不得少于0.070mg。
2根据权利要求1所述的猴头健胃灵中药的质量检测方法,其特征在于,
a、香附的薄层色谱鉴别是:取猴头健胃灵胶囊内容物10g,置500ml圆底烧瓶中,加水200ml,连接挥发油测定器,自测定器上端加水使充满刻度部分,并溢流入烧瓶为止,再加乙酸乙酯2ml,连接回流冷凝管,加热回流2小时,分取乙酸乙酯液,作为供试品溶液;另取香附对照药材1g,同法制成对照药材溶液;再取α-香附酮对照品,加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;吸取上述三种溶液各10μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸92∶5∶5为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯254nm下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;喷以二硝基苯肼试液,放置片刻,斑点渐变为橙红色;
b、白芍、甘草的薄层色谱鉴别是:取猴头健胃灵胶囊内容物5g,加乙醚50ml,加热回流1小时,滤过,滤液弃去,药渣加甲醇40ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加水40ml使溶解,用正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用水洗涤3次,每次20ml,蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草对照药材1g,同法制成对照药材溶液;再取芍药苷对照品,加乙醇制成每1ml含1mg溶液,作为对照品溶液;吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水15∶1∶1∶2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与甘草对照药材色谱及芍药苷对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;再置紫外光灯365nm下检视,供试品色谱中,在与甘草对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;
c、采用高效液相色谱法测定腺苷的含量:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水6∶94为流动相;检测波长为260nm;理论板数按腺苷峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备:取腺苷对照品适量,精密称定,加水制成每1ml含10μg的溶液,即得;
供试品溶液的制备:取猴头健胃灵胶囊装量差异项下的内容物,混匀,取约2g,精密称定,精密加入水50ml,密塞,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,即得;猴头健胃灵胶囊每粒含腺苷(C10H13N5O4)不得少于0.070mg。
3、根据权利要求2所述的猴头健胃灵中药的质量检测方法,其特征在于,所述的延胡索的薄层色谱鉴别是:取猴头健胃灵胶囊5g,加甲醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水适量使溶解,加浓氨试液调至碱性,用乙醚振摇提取3次,每次10ml,合并乙醚提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取延胡索对照药材1g,同法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以环己烷-二氯甲烷-甲醇15∶8∶2为展开剂,在用展开剂预饱和的展开缸内展开,取出,晾干,置碘蒸气中熏至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;在空气中挥尽板上吸附的碘后,置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Open date: 20091104 |