CN101569682A - 治疗风湿性关节炎的药物组合物及制备和质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗风湿性关节炎的药物组合物及制备和质量控制方法。本发明的药物组合物原料药组成为：生川乌、生草乌、马钱子(制)、羌活、乌梢蛇、三七、骨碎补(制)、乌梅、金银花、细辛、人参、鹿茸、黄柏、没药、广地龙、地枫皮、老鹳草、刺五加、续断、麻黄、甘草、槲寄生、淫羊藿、牛膝、桂枝。制备方法为：以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮一到三次，合并煎液，滤液浓缩得清膏A；生川乌、生草乌等其余十三味，粉碎成细粉，过筛，得药粉B；清膏A与药粉B混匀，制成制剂。

Description

治疗风湿性关节炎的药物组合物及制备和质量控制方法

技术领域

本发明涉及一种药物组合物及制备方法和质量控制方法，特别涉及一种治疗风湿性关节炎的药物组合物及制备方法和质量控制方法。

背景技术

风湿性关节炎属变态反应性疾病，是风湿热的主要表现之一。多以急性发热及关节疼痛起病，典型表现是轻度或中度发热，游走性多关节炎，受累关节多为膝、踝、肩、肘、腕等大关节，常见由一个关节转移至另一个关节，病变局部呈现红、肿、灼热、剧痛，部分病人也有几个关节同时发病，急性炎症一般于2-4周消退，不留后遗症，但常反复发作。若风湿活动影响心脏，则可发生心肌炎，甚至遗留心脏瓣膜病变。

目前西医治疗风湿性关节炎主要应用非甾抗炎药、免疫抑制剂及激素等药物，虽然能够暂时止痛，缓解症状，起到一定的治疗作用，然而却不能从根本上治疗该病，而且长期用药还可能破坏人体免疫系统，最终出现不可逆转的胃、肝、肾等内脏器官严重损伤，其产生的副作用绝对不容忽视。

本病属中医“痹证”范畴。中医学认为居处潮湿，触冒风雨等是产生痹证的外来条件；素体虚弱，气血不足，腠理不密是产生痹证的内在因素。风寒热湿之邪乘虚入侵，留滞经络肌肉关节，气血闭阻不通，从而产生肢节酸麻疼痛、屈伸不利诸症，若以热盛或湿热蕴蒸为主，则见关节红、肿、热、痛；若寒湿偏盛则关节冷痛，遇寒痛增；若久病不愈，还可出现气血不足，肝肾亏损或病邪深入内脏等变化。

祖国医学长期以来对“风湿病”的治疗有丰富的经验，积累了许多行之有效的验方，相较西医而言，祖国医学疗效确切、使用方便、不良反应小等优势明显，因此更适宜在临床上推广应用。

发明内容

本发明目的在于提供一种药物组合物；本发明另一目的在于提供一种治疗风湿性关节炎的药物组合物；本发明的第三个目的在于提供该药物组合物的制备方法；本发明的第四个目的在于提供该药物组合物的质量控制方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现：

本发明药物组合物的原料药组成为：

生川乌50-680重量份、生草乌50-680重量份、马钱子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、乌梢蛇50-680重量份、三七50-680重量份、骨碎补(制)50-680重量份、乌梅50-680重量份、金银花50-680重量份、细辛50-680重量份、人参50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黄柏50-680重量份、没药50-680重量份、广地龙50-680重量份、地枫皮50-680重量份、老鹳草50-680重量份、刺五加50-680重量份、续断50-680重量份、麻黄50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。

本发明药物组合物的原料药组成还可以为：

生川乌50-680重量份、生草乌50-680重量份、马钱子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、乌梢蛇50-680重量份、红花50-680重量份、骨碎补(制)50-680重量份、乌梅50-680重量份、金银花50-680重量份、细辛50-680重量份、红参50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黄柏50-680重量份、没药50-680重量份、广地龙50-680重量份、地枫皮50-680重量份、老鹳草50-680重量份、五加皮50-680重量份、续断50-680重量份、麻黄50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

生川乌200-450重量份、生草乌200-450重量份、马钱子(制)200-450重量份、羌活200-450重量份、乌梢蛇200-450重量份、红花200-450重量份、骨碎补(制)200-450重量份、乌梅200-450重量份、金银花200-450重量份、细辛100-330重量份、红参200-450重量份、鹿茸130-360重量份、黄柏200-450重量份、没药200-450重量份、广地龙200-450重量份、地枫皮200-450重量份、老鹳草270-600重量份、五加皮200-450重量份、续断200-450重量份、麻黄200-450重量份、甘草200-450重量份、槲寄生200-450重量份、淫羊藿200-450重量份、牛膝200-450重量份、桂枝200-450重量份。

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

生川乌280重量份、生草乌380重量份、马钱子(制)300重量份、羌活280重量份、乌梢蛇380重量份、红花300重量份、骨碎补(制)280重量份、乌梅380重量份、金银花300重量份、细辛280重量份、红参380重量份、鹿茸300重量份、黄柏280重量份、没药380重量份、广地龙300重量份、地枫皮280重量份、老鹳草380重量份、五加皮300重量份、续断280重量份、麻黄380重量份、甘草300重量份、槲寄生280重量份、淫羊藿380重量份、牛膝300重量份、桂枝280重量份。

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

生川乌200重量份、生草乌200重量份、马钱子(制)200重量份、羌活200重量份、乌梢蛇200重量份、红花200重量份、骨碎补(制)200重量份、乌梅200重量份、金银花200重量份、细辛100重量份、红参200重量份、鹿茸130重量份、黄柏200重量份、没药200重量份、广地龙200重量份、地枫皮200重量份、老鹳草270重量份、五加皮200重量份、续断200重量份、麻黄200重量份、甘草200重量份、槲寄生200重量份、淫羊藿200重量份、牛膝200重量份、桂枝200重量份。

本发明药物组合物制备方法为：步骤1、以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮一到三次，合并煎液，滤液浓缩得清膏A；

步骤2、生川乌、生草乌、马钱子(制)、羌活、乌梢蛇、红花、乌梅、金银花、细辛、红参、鹿茸、没药、桂枝十三味，粉碎成细粉，过筛，得药粉B；

步骤3、清膏A与药粉B混匀，再加入常规辅料，经常规方法，制成临床接受的剂型。

本发明药物组合物制备方法优选为：步骤1、以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小时，加水量为药材体积的8倍，第二次1.5小时，加水量为药材体积的6倍，第三次1小时，加水量为药材体积的6倍，合并煎液，滤液浓缩至80℃时相对密度为1.20～1.30的清膏A；

步骤2、生川乌、生草乌、制马钱子、羌活、乌梢蛇、红花、乌梅、金银花、细辛、红参、鹿茸、没药、桂枝十三味，粉碎成100目的细粉，过筛，得药粉B；

步骤3、清膏A与药粉B混匀，再加入常规辅料，经常规方法，制成临床接受的剂型。

本发明药物组合物质量控制方法包括如下检测方法中的一种或几种：

a.人参的定性检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加乙醚20-30ml，超声处理10-20分钟，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇40-60ml，超声处理25-35分钟，滤过，滤液用氨试液25-35ml提取，弃去下层液，用水15-30ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取红参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取人参甙Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以13-18∶35-50∶20-25∶8-12比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，100-110℃烘数分钟；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

b.金银花的定性检测

取相当于含生药量2.45g的制剂内容物，研细，加石油醚(30-60℃)2-5ml，浸渍20-40min，取上清液作为供试品溶液；另取金银花对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7-10∶1-5比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

c.没药的定性检测

取鉴别b项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取没药对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7-10∶1-3比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

d.乌头碱的限量检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加10％氨水3-10ml湿润，加三氯甲烷20-40ml，超声处理20-30分钟，滤过，残渣用少量三氯甲烷清洗2-4次，合并三氯甲烷溶液，浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一含0.2％氢氧化钠溶液的硅胶G薄层板上，以7-10∶0.5-3比例氨蒸气饱和10-20分钟的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液显色；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置的斑点上，不得比对照品斑点颜色深；

e.绿原酸的定量检测：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以7-10∶90-95比例的乙睛-0.4％磷酸为流动相；检测波长为327nm；理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含绿原酸0.15mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

供试品溶液的制备  取相当于含生药量3.5g的制剂内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加40-60％甲醇20-30ml，精密称重，回流提取50-75分钟，放凉后，用40-60％甲醇补失重量，摇匀，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

相当于含生药量12.25g的制剂内容物含绿原酸(C16H18O9)计，不得少于0.5mg。

本发明药物组合物质量控制方法优选如下检测方法中的一种或几种：

a.人参的定性检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加乙醚25ml，超声处理15分钟，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨试液30ml提取，弃去下层液，用水20ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取红参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取人参甙Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘数分钟；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

b.金银花的定性检测

取相当于含生药量2.45g的制剂内容物，研细，加石油醚(30-60℃)3ml，浸渍30min，取上清液作为供试品溶液；另取金银花对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

c.没药的定性检测

取鉴别b项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取没药对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

d.乌头碱的限量检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加10％氨水5ml湿润，加三氯甲烷30ml，超声处理25分钟，滤过，残渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一含0.2％氢氧化钠溶液的硅胶G薄层板上，以9∶0.5比例氨蒸气饱和15分钟的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液显色；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置的斑点上，不得比对照品斑点颜色深；

e.绿原酸的定量检测：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)为流动相；检测波长为327nm；理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含绿原酸0.15mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

供试品溶液的制备  取相当于含生药量3.5g的制剂内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密称重，回流提取60分钟，放凉后，用50％甲醇补失重量，摇匀，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

相当于含生药量12.25g的制剂内容物含绿原酸(C16H18O9)计，不得少于0.5mg。

本发明药物组合物舒筋活血，祛风镇痛，益气养血，滋补肝肾，温经散寒，化淤通络，消肿止痛。用于筋骨麻木，手足拘挛，腰腿疼痛，风湿性关节炎。故方中取大辛、大热、大毒之生川乌、生草乌合而为君，生川乌祛风温里散寒，即可发热肌表之寒湿，善疗寒湿阻络之痹病，又可温通脏腑之阴寒。功具温阳通络以开痹，故除内外之寒湿：生草乌功用略同生川乌，但其长于搜风出寒祛湿，且其止痛除痹功较强，合而用之，温通表里，直中寒湿阻络症机，故为君。马钱子(制)苦、温，功擅通络止痛，散结消肿“能搜筋骨入骱之风湿，祛皮里膜外凝结之痰毒”尤其是“其开通经络，透达关节之力实远胜于他药也。”故与二乌相伍，侧重舒筋止痛亦为君。伍以大队湿补通经之淫羊藿、鹿茸、细辛、牛膝、槲寄生、骨碎补(制)、五加皮、乌梢蛇、羌活、续断、红参、老鹳草、地枫皮以加强三君药温阳祛寒、舒筋通络、消肿止痛之力；寒主收引，湿阻气机均易生瘀，故取广地龙、没药、红花活血化瘀以通达痹阻之经络。麻黄、桂枝相互辛温走表，宣肺以化湿，共为臣，君药诸药多为辛、香、燥烈之品，耗气伤津之味，故取乌梅生津敛液，开中寓合，以防止辛散之品伤津燥血，温郁气机，易伴郁热，故取金银花、黄柏清热燥湿，又可防止君药辛温太过之弊，共为佐。甘草调和诸药为使，本方药味虽多，但多而不杂，君臣有序，佐使分明，祛邪为主兼扶正，温通之中佐清透开合又寓收敛。故而诸药合用共奏舒筋活血，祛风镇痛之佳效。

本发明药物组合物经实验研究证实：有效成份可通过神经系统间接刺激脑垂体，使肾上腺皮质机能亢进，皮质激素分泌增加，抗组织胺分泌以止痛；方中制川乌、制草乌对风湿，类风湿因子有较强的亲和力，可以直接杀伤致病因子，祛风除湿，温经止痛，消肿排脓；抑制关节滑膜细胞增殖，阻断病情持续发展；改善人体微循环、抑制炎症反应，减轻疼痛；迅速增强骨髓的免疫机能，激活骨髓健康循环系统，消除风湿疼痛。

通过对比试验发现，本发明组合物对风湿性关节炎的药效显著，并且本发明所述的范围在可以实现本发明药效的同时，经过筛选，意外的发现，在组合物的某些范围内，具备更为突出的药效。

本发明所提供的中药组合物的质量控制方法，是通过大量具体创造性试验筛选后得到，鉴别方法中通过对样品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得鉴别专属性很好，而且方法经济适用、结果快速，并且对不同的薄层板都能应用。含量测定方法中通过对样品、供试品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得含量测定方法可以很有效的对产品进行质量控制，并且用该方法测定的产品相比其他方法测定的产品在药效上表现的更为稳定。

具体实施方式

以下实验例和实施例用于进一步说明本发明但不限于本发明

实验例1片剂的工艺研究

水提加水量

按处方配置黄柏、骨碎补(制)、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄、甘草、槲寄生3份药材，分三组进行试验，第一组加水量6倍量、4倍量、4倍量，第二组加水量8倍量、6倍量、6倍量，第三组加水量10倍量、8倍量、8倍量，以出膏量为指标，确定加水量。结果见表1：

表1：水提加水量

以出膏量为指标，可以看出加水8倍量、6倍量、6倍量出膏量较好，生产中选用加水量8倍量、6倍量、6倍量。

表2：主要技术参数

表3：三批中试生产数据

从上述试验可以看出，本发明制备工艺成品率高，稳定可行。

实验例2人参的鉴别方法试验

(1)供试品溶液的提取溶剂选择

供试品溶液的提取溶剂选择方法a.取实施例12所制成品25片，除去糖衣，研细，加乙醚25ml，超声处理15分钟，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨试液30ml提取，弃去下层液，用水20ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

供试品溶液的提取溶剂选择方法b取实施例12所制成品25片，除去糖衣，研细，加水饱和正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨试液30ml提取，弃去下层液，用水20ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

供试品溶液的提取溶剂选择方法c取实施例12所制成品25片，除去糖衣，研细，加三氯甲烷25ml，超声处理15分钟，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨试液30ml提取，弃去下层液，上层液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

另取红参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取人参甙Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干数分钟。观察供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，斑点情况。结果见表4：

表4供试品溶液提取溶剂的选择

组别      a        b         c

展开效果  好     有干扰  斑点不清晰

结果表明，供试品溶液制备方法a的效果最佳，因此，选用制备方法a作为红参鉴别的供试品溶液制备方法。

(2)供试品溶液的回流时间

取实施例12所制成品25片，除去糖衣，研细，加乙醚25ml，按下表所列时间超声处理，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨试液30ml提取，弃去下层液，用水20ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取红参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取人参甙Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干数分钟。观察供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表5：

表5超声处理时间的优选试验结果

提取时间(min)	10	15	20	30
					显色效果	供试品在相应对照品位置斑点显色较浅	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰	供试品在相应对照品位置斑点分离不好

由表5可以看出，回流提取时间选定为15min，能有效检测样品中所含的人参甙Re。

(3)供试品溶液的超声时间

取实施例12所制成品25片，除去糖衣，研细，加乙醚25ml，超声处理15分钟，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇50ml，按下表所列时间超声处理，滤过，滤液用氨试液30ml提取，弃去下层液，用水20ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取红参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取人参甙Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干数分钟。观察供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表6：

表6超声处理时间的优选实验结果

提取时间(min)	20	30	40	50
					显色效果	供试品在相应对照品位置斑点显色较浅	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰	供试品在相应对照品位置斑点分离不好

由表6可以看出，回流提取时间选定为30min，能有效检测样品中所含的人参甙Re。

(4)本检测方法中展开剂用量配比的优选：

取上述供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水配比为10∶40∶20∶10，15∶40∶22∶10，25∶40∶22∶10，15∶30∶22∶10的10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干数分钟，观察颜色变化。观察供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表7：

表7展开剂用量配比优选实验结果

展开剂配比	10∶40∶20∶10	15∶40∶22∶10	25∶40∶22∶10	15∶30∶22∶10
					展开效果	很差	好	差	较差

从表7可以看出展开剂配比为15∶40∶22∶10时，供试品溶液展开效果最好，没有出现拖尾、主斑点分离不好等现象。

(5)本检测方法中样品溶液点样量的优选：

分别取供试品溶液各1μl、2μl、5μl、8μl、15μl，点于同一硅胶G薄层板上，用石油醚(60～90℃)-苯-乙酸乙酯-冰醋酸10∶20∶7∶0.5的展开剂展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点清晰。观察供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表8：

表8样品溶液点样量优选实验结果

点样量	3μl	5μl	7μl	9μl	11μl
						效果	供试品在相应对照品位置无斑点	供试品在相应对照品位置斑点显色好	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰但较浅	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰但较浅	供试品在相应对照品位置斑点分离不好

从表8可以看出供试品点样量在5μl时，在薄层板上显色效果较好，适合试验要求。

(6)阴性对照试验

取缺人参的阴性样品，照上述检测方法中供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液，展开后在对照品溶液对应位置上没有出现相应斑点，说明所选取的检测实验专属性强。

根据以上实验确定本发明制剂中红参的定性检测方法为：

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加乙醚25ml，超声处理15分钟，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨试液30ml提取，弃去下层液，用水20ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取红参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取人参甙Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干数分钟。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实验例3金银花的鉴别方法试验

(1)供试品溶液的提取溶剂选择

供试品溶液的提取溶剂选择方法a取实施例12所制成品除去糖衣，研细，称取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，浸渍30min，取上清液作为供试品溶液。

供试品溶液的提取溶剂选择方法b.取实施例12所制成品除去糖衣，研细，称取1.4g，加甲醇5ml，放置12小时，滤过，取滤液作为供试品溶液。

供试品溶液的提取溶剂选择方法c.取实施例12所制成品除去糖衣，研细，称取1.4g，加50％甲醇25ml超声处理30分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。

另取金银花对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(8∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰。观察供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，斑点情况。结果见表9：

表9供试品溶液提取溶剂的选择

组别	a	b	c
				展开效果	好	有干扰	斑点不清晰

结果表明，供试品溶液制备方法a的效果最佳，因此，选用制备方法a作为金银花鉴别的供试品溶液制备方法。

(2)供试品溶液的浸渍时间

取实施例12所制成品除去糖衣，研细，称取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，按下表所列时间浸渍，取上清液作为供试品溶液。另取金银花对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(8∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰。观察供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表10：

表10浸渍时间的优选实验结果

提取时间

15

30

45

60

(min)
					显色效果	供试品在相应对照品位置斑点显色较浅	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰	供试品在相应对照品位置斑点分离不好

由表10可以看出，浸渍时间选定为30min，能有效检测样品中所含的金银花(绿原酸)。

(3)本检测方法中展开剂用量配比的优选：

取上述供试品溶液、对照药材溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯配比为9∶2，9∶3，8∶3，7∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰。观察供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表11：

表11展开剂用量配比优选实验结果

展开剂配比	9∶2	9∶3	8∶3	7∶3
					展开效果	很差	差	好	较差

从表11可以看出展开剂配比为8∶3时，供试品溶液展开效果最好，没有出现拖尾、主斑点分离不好等现象。

(4)本检测方法中样品溶液点样量的优选：

分别取供试品溶液各1μl，2μl，3μl，5μl，7μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯配比为8∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰。观察供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表12：

表12样品溶液点样量优选实验结果

点样量	1μl	2μl	3μl	5μl	7μl
						效果	供试品在相应对照品位置无斑点	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰但较浅	供试品在相应对照品位置斑点显色好	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰但较浅	供试品在相应对照品位置斑点分离不好

从表12可以看出供试品点样量在3μl时，在薄层板上显色效果较好，适合试验要求。

(5)阴性对照试验

取缺金银花的阴性样品，照上述检测方法中供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液，展开后在对照品溶液对应位置上没有出现相应斑点，说明所选取的检测实验专属性强。

根据以上实验确定本发明制剂中金银花的检测方法为：

取相当于含生药量2.45g的制剂内容物，研细，加石油醚(30-60℃)3ml，浸渍30min，取上清液作为供试品溶液。另取金银花对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(8∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实验例4没药的鉴别方法试验

(1)供试品溶液的提取溶剂选择

供试品溶液的提取溶剂选择方法a：取实施例12所制成品除去糖衣，研细，称取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，浸渍30min，取上清液作为供试品溶液。

供试品溶液的提取溶剂选择方法b：.取实施例12所制成品除去糖衣，研细，称取1.4g，加乙醚，超声20分，滤过，挥干，残渣加甲醇溶解做供试品溶液。

供试品溶液的提取溶剂选择方法c：.取实施例12所制成品除去糖衣，研细，称取1.4g，加乙醇，超声30分，滤过，浓缩，做供试品溶液。

另取没药对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰。观察供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，斑点情况。结果见表13：

表13供试品溶液提取溶剂的选择

组别	a	b	c
				展开效果	好	有干扰	斑点不清晰

结果表明，供试品溶液制备方法a的效果最佳，因此，选用制备方法a作为没药鉴别的供试品溶液制备方法。

(2)供试品溶液的浸渍时间

取实施例12所制成品除去糖衣，研细，称取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，按下表所列时间浸渍，取上清液作为供试品溶液。另取没药对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰。观察供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表14：

表14浸渍时间的优选实验结果

提取时间(min)	15	30	45	60
					显色效果	供试品在相应对照品位置斑点显色较浅	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰	供试品在相应对照品位置斑点分离不好

由表14可以看出，浸渍时间选定为30min，即能有效检测样品中所含的没药。

(3)本检测方法中展开剂用量配比的优选：

取上述供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯配比为8∶2.0，9∶1.5，10∶1.0，11∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰。观察供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表15：

表15展开剂用量配比优选实验结果

展开剂配比	8∶2.0	9∶1.5	10∶1.0	11∶0.5
					展开效果	很差	好	差	较差

从表15可以看出展开剂配比为9∶1.5时，供试品溶液展开效果最好，没有出现拖尾、主斑点分离不好等现象。

(4)本检测方法中样品溶液点样量的优选：

分别取供试品溶液各1μl，2μl，3μl，5μl，7μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯配比为9∶1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰。观察供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表16：

表16样品溶液点样量优选实验结果

点样量	1μl	2μl	3μl	5μl	7μl
						效果	供试品在相应对照品位置无斑点	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰但较浅	供试品在相应对照品位置斑点显色好	供试品在相应对照品位置斑点显色清晰但较浅	供试品在相应对照品位置斑点分离不好

从表16可以看出供试品点样量在2～3μl时，在薄层板上显色效果较好，适合试验要求。

(5)阴性对照试验

取缺没药的阴性样品，照上述检测方法中供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液，展开后在对照品溶液对应位置上没有出现相应斑点，说明所选取的检测实验专属性强。

根据以上实验确定本发明制剂中没药的检测方法为：

取金银花鉴别项下的供试品溶液作为供试品溶液。另取没药对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实验例5乌头碱的限量检查

(1)供试品制备方法

取实施例12所制成品除去糖衣，研细，称取三份，每份7g，加10％氨水5ml湿润，分别加三氯甲烷20，25，30，35，40ml，超声处理25分钟，滤过，残渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，浓缩至2ml，作为供试品溶液。

另取乌头碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一含0.2％氢氧化钠溶液的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(9∶0.5)(氨蒸气饱和15分钟)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液显色。观察供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置的斑点比较斑点颜色，并相互比较。结果见表17：

表17溶剂用量考察结果

斑点颜色	20	25	30	35	40
						与对照品比较	浅	浅	浅	浅	浅
与前一项比较	-	加深	加深不明显	未加深	未加深

从表17可以看出三氯甲烷的用量在30ml以上的溶出无明显变化，且斑点均浅于对照品溶液斑点。

(2)展开剂的选择

取上述供试品溶液、对照品溶液各5μl，分别点于同一含0.2％氢氧化钠溶液的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇配比为10∶0.1，9∶0.5，9∶1，8∶2(氨蒸气饱和15分钟)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液显色。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置的斑点上，不得比对照品斑点颜色深。结果见表18：

表18展开剂用量配比优选实验结果

展开剂配比	10∶0.1	9∶0.5	9∶1	8∶2
					展开效果	很差	好	差	较差

从表18可以看出展开剂配比为9∶0.5时，供试品溶液展开效果最好，没有出现拖尾、主斑点分离不好等现象，斑点最均匀。

根据以上实验确定本发明制剂中乌头碱的限量检测方法为：

乌头碱限量  取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加10％氨水5ml湿润，加三氯甲烷30ml，超声处理25分钟，滤过，残渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取乌头碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一含0.2％氢氧化钠溶液的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(9∶0.5)(氨蒸气饱和15分钟)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液显色。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置的斑点上，不得比对照品斑点颜色深。

实验例6绿原酸的含量测定方法试验

检测仪器：岛津公司SPD-10ATvp型高效液相色谱仪

色谱柱：迪玛公司(Zorbax C18 4.6×150mm，5μm)与C18保护柱

流动相：乙睛-0.4％磷酸(v/v)(9∶91)(乙睛为色谱级，磷酸为分析级，水为重蒸水)

检测波长：327nm    流速：1.000ml/min    柱温：室温

对照品：绿原酸  购于中国药品生物制品检定所  批号：753-200210

测定方法：取实施例12所制成品按定量检测项下供试品溶液的制备方法制备样品液；并按本发明制备方法制备缺金银花的空白样品，制备阴性对照液，用微孔滤膜(0.45μm)过滤。分别精密吸取阴性对照液，对照品液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

含量测定方法考察：

(1)空白试验

空白溶液的制备是按处方中药味的比例，自配不含金银花、红花、马钱子、淫羊藿的群药，按其工艺制成空白制剂，再按供试品溶液制备方法制备，上述色谱条件测定，结果空白溶液在与绿原酸对照品相同保留时间处未显色谱峰，故认为无干扰。

(2)稳定性试验

取绿原酸对照品溶液(0.16mg/ml)，分别于配制后0、2、4、6、12、24小时进样3ul，依法测定，结果表明，其在24小时内基本稳定，结果见表19：

表19稳定性试验结果

(3)线性关系考察  取绿原酸对照品溶液(0.16mg/ml)摇匀，分别精密吸取1、2、3、4、7μl注入高效液相色谱仪，测定峰面积，结果见表20，表明绿原酸对照品在0.16μg-1.12μg间呈线性关系，其回归方程为：

Area＝2963859.729*Amt-129002.2925(r＝0.999966789)

表20线性关系考察结果

(4)精密度试验  精密吸取对照品溶液3μl，重复进样5次，求得相对标准偏差＜2％，结果见表21：

表21精密度试验结果

(5)重现性试验  按正文方法，取实施例12所制成品5份，对每份进行测定，求得相对标准偏差＜2％，结果见表22：

表22重现性试验结果

(6)回收率试验  取实施例12所制成品粉末1g，精密称定，再精密加入绿原酸(0.16mg/ml)对照品5ml，50％甲醇20ml，按正文供试品溶液的制备方法操作，测定其含量，并计算其回收率，测定结果见表23：

表23回收率试验结果

2.含量测定结果见表24：

样品	含量(mg/g)
		实施例2	1.1642
实施例7	1.1305
		实施例12	1.1708

根据以上数据，将含量限度定为：片剂每1g含绿原酸，不得少于0.5mg。

实验例7疗效实验

本发明药物组I(根据实施例5处方比例及制法所得药物)

本发明药物组II(根据实施例6处方比例及制法所得药物)

1、性别与年龄

男性239例，女性261例，最小16岁，最大65岁，以20-50岁年龄组最为多见。

2、病程

最短者25天，最长者20年，三年以内最多，共500例。

治疗方法：按说明书服用，伴月为一疗程，一般需服2-3个疗程，共分为两组，本发明药物组I 200例、本发明药物组II 200例和对照药物组(风湿筋骨片)100例。

3、疗效判定标准：

(1)临床治愈

症状全部消失，功能活动恢复正常，主要参考指标(血沉，抗链O，类风湿因子)正常。

(2)显效

全部症状消失或主要症状消除，关节功能基本恢复，能参加正常工作和劳动，主要参考指标(各种理化检查)基本正常。观察结果见表25：

表25总疗效统计分析

本发明组与对照药物组比较P＜0.05

表25结果表明本发明药物组I与本发明药物组II治疗效果显著，有效率分别为93％、93.5％，治愈率分别为25.5％、25.0％。

(3)疗程与疗效比较

表26疗效与疗程比较分析表

本发明药物组与对照药物组比较P＜0.05

表26结果表明本发明药物组I与本发明药物组II与对照组药物比较对本病治疗效果不论病程长短，疗效均有显著提高。

(4)主症指标与疗效比较

表27主症指标与疗效比较表

本发明组与对照药物组比较*P＜0.05

从表27治疗前后症状对比分析，可见本发明药物组I与本发明药物组II与对照组药物比较对消除关节疼痛，减轻红肿热，恢复运动机能等方面均有显著疗效，可使抗0和血沉下降或恢复正常，部分类风湿因子试验转阴，对有环形红斑或硬结者，有消除作用。

4、副作用

本观察组200例使用本药均无副作用。

下述实施例均能够实现上述实验例所述的效果

实施例1

生川乌280g、生草乌380g、马钱子(制)300g、羌活280g、乌梢蛇380g、红花300g、骨碎补(制)280g、乌梅380g、金银花300g、细辛280g、红参380g、鹿茸300g、黄柏280g、没药380g、广地龙300g、地枫皮280g、老鹳草380g、五加皮300g、续断280g、麻黄380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g

以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.30(80℃)的清膏A；生川乌、生草乌、马钱子(制)、羌活、乌梢蛇、红花、乌梅、金银花、细辛、红参、鹿茸、没药、桂枝十三味，粉碎成细粉，过筛，得药粉B；清膏A与药粉B混匀，再加入常规辅料，经常规方法，制成临床接受的丸剂10000g。

实施例2

生川乌200g、生草乌200g、马钱子(制)200g、羌活200g、乌梢蛇200g、红花200g、骨碎补(制)200g、乌梅200g、金银花200g、细辛200g、红参200g、鹿茸200g、黄柏200g、没药200g、广地龙200g、地枫皮200g、老鹳草200g、五加皮200g、续断200g、麻黄200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g

以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.30(80℃)的清膏A；生川乌、生草乌、马钱子(制)、羌活、乌梢蛇、红花、乌梅、金银花、细辛、红参、鹿茸、没药、桂枝十三味，粉碎成细粉，过筛，得药粉B；清膏A与药粉B混匀，再加入常规辅料，经常规方法，制成临床接受的胶囊10000粒。

实施例3

生川乌200g、生草乌200g、马钱子(制)200g、羌活200g、乌梢蛇200g、红花200g、骨碎补(制)200g、乌梅200g、金银花200g、细辛100g、红参200g、鹿茸130g、黄柏200g、没药200g、广地龙200g、地枫皮200g、老鹳草270g、五加皮200g、续断200g、麻黄200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g

A、以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.30(80℃)的清膏A；

B、生川乌、生草乌、马钱子(制)、羌活、乌梢蛇、红花、乌梅、金银花、细辛、红参、鹿茸、没药、桂枝十三味，粉碎成细粉，过筛，得药粉B；

C、清膏A与药粉B混匀，再加入常规辅料，经常规方法，制成临床接受的颗粒剂10000袋。

实施例4

生川乌280g、生草乌380g、马钱子(制)300g、羌活280g、乌梢蛇380g、红花300g、骨碎补(制)280g、乌梅380g、金银花300g、细辛280g、红参380g、鹿茸300g、黄柏280g、没药380g、广地龙300g、地枫皮280g、老鹳草380g、五加皮300g、续断280g、麻黄380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g

A、以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.30(80℃)的清膏A；

B、生川乌、生草乌、马钱子(制)、羌活、乌梢蛇、红花、乌梅、金银花、细辛、红参、鹿茸、没药、桂枝十三味，粉碎成细粉，过筛，得药粉B；

C、清膏A与药粉B混匀，再加入常规辅料，经常规方法，制成临床接受的滴丸10000粒。

实施例5

生川乌680g、生草乌600g、马钱子(制)450g、羌活50g、乌梢蛇180g、红花350g、骨碎补(制)80g、乌梅100g、金银花370g、细辛650g、红参620g、鹿茸210g、黄柏550g、没药50g、广地龙680g、地枫皮320g、老鹳草580g、五加皮420g、续断200g、麻黄550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g

A、以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.30(80℃)的清膏A；

B、生川乌、生草乌、马钱子(制)、羌活、乌梢蛇、红花、乌梅、金银花、细辛、红参、鹿茸、没药、桂枝十三味，粉碎成细粉，过筛，得药粉B；

C、清膏A与药粉B混匀，再加入常规辅料，经常规方法，制成临床接受的合剂1000瓶。

实施例6

生川乌200g、生草乌200g、马钱子(制)200g、羌活200g、乌梢蛇200g、红花200g、骨碎补(制)200g、乌梅200g、金银花200g、细辛100g、红参200g、鹿茸130g、黄柏200g、没药200g、广地龙200g、地枫皮200g、老鹳草270g、五加皮200g、续断200g、麻黄200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g

A、以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.30(80℃)的清膏A；

B、生川乌、生草乌、马钱子(制)、羌活、乌梢蛇、红花、乌梅、金银花、细辛、红参、鹿茸、没药、桂枝十三味，粉碎成细粉，过筛，得药粉B；

C、清膏A与药粉B混匀，干燥，粉碎，制粒，压制成10000片，干燥，包衣，即得。

实施例7

生川乌680g、生草乌600g、马钱子(制)450g、羌活50g、乌梢蛇180g、红花350g、骨碎补(制)80g、乌梅100g、金银花370g、细辛650g、红参620g、鹿茸210g、黄柏550g、没药50g、广地龙680g、地枫皮320g、老鹳草580g、五加皮420g、续断200g、麻黄550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g

本药物组合物实施例1中方法制成丸剂。

实施例8

生川乌280g、生草乌380g、马钱子(制)300g、羌活280g、乌梢蛇380g、红花300g、骨碎补(制)280g、乌梅380g、金银花300g、细辛280g、红参380g、鹿茸300g、黄柏280g、没药380g、广地龙300g、地枫皮280g、老鹳草380g、五加皮300g、续断280g、麻黄380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g

本药物组合物实施例2中方法制成胶囊剂。

实施例9

生川乌200g、生草乌200g、马钱子(制)200g、羌活200g、乌梢蛇200g、红花200g、骨碎补(制)200g、乌梅200g、金银花200g、细辛100g、红参200g、鹿茸130g、黄柏200g、没药200g、广地龙200g、地枫皮200g、老鹳草270g、五加皮200g、续断200g、麻黄200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g

本药物组合物实施例3中方法制成颗粒剂。

实施例10

生川乌200g、生草乌200g、马钱子(制)200g、羌活200g、乌梢蛇200g、红花200g、骨碎补(制)200g、乌梅200g、金银花200g、细辛100g、红参200g、鹿茸130g、黄柏200g、没药200g、广地龙200g、地枫皮200g、老鹳草270g、五加皮200g、续断200g、麻黄200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g

本药物组合物实施例4中方法制成滴丸剂。

实施例11

生川乌680g、生草乌600g、马钱子(制)450g、羌活50g、乌梢蛇180g、红花350g、骨碎补(制)80g、乌梅100g、金银花370g、细辛650g、红参620g、鹿茸210g、黄柏550g、没药50g、广地龙680g、地枫皮320g、老鹳草580g、五加皮420g、续断200g、麻黄550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g

本药物组合物实施例5中方法制成合剂。

实施例12

生川乌280g、生草乌380g、马钱子(制)300g、羌活280g、乌梢蛇380g、红花300g、骨碎补(制)280g、乌梅380g、金银花300g、细辛280g、红参380g、鹿茸300g、黄柏280g、没药380g、广地龙300g、地枫皮280g、老鹳草380g、五加皮300g、续断280g、麻黄380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g

本药物组合物实施例6中方法制成片剂。

实施例13

生川乌680g、生草乌600g、马钱子(制)450g、羌活50g、乌梢蛇180g、红花350g、骨碎补(制)80g、乌梅100g、金银花370g、细辛650g、红参620g、鹿茸210g、黄柏550g、没药50g、广地龙680g、地枫皮320g、老鹳草580g、五加皮420g、续断200g、麻黄550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g

本药物组合物实施例6中方法制成片剂。

实施例14本发明制剂的质量控制方法

取实施例13制成品进行限量检测和定量检测：

d.乌头碱的限量检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加10％氨水5ml湿润，加三氯甲烷30ml，超声处理25分钟，滤过，残渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一含0.2％氢氧化钠溶液的硅胶G薄层板上，以9∶0.5比例氨蒸气饱和15分钟的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液显色；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置的斑点上，不得比对照品斑点颜色深；

e.绿原酸的定量检测：

照《中国药典》2005版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)为流动相；检测波长为327nm；理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含绿原酸0.15mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

供试品溶液的制备  取相当于含生药量3.5g的制剂内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密称重，回流提取60分钟，放凉后，用50％甲醇补失重量，摇匀，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本品每克含绿原酸(C16H18O9)计，不得少于0.5mg。

实施例15本发明制剂的质量控制方法

取实施例12制成品进行定性检测：

a.人参的定性检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加乙醚25ml，超声处理15分钟，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨试液30ml提取，弃去下层液，用水20ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取红参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取人参甙Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘数分钟；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

b.金银花的定性检测

取相当于含生药量2.45g的制剂内容物，研细，加石油醚(30-60℃)3ml，浸渍30min，取上清液作为供试品溶液；另取金银花对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

c.没药的定性检测

取鉴别b项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取没药对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

实施例16本发明制剂的质量控制方法

取实施例6内容物进行检测：

a.人参的定性检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加乙醚25ml，超声处理15分钟，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨试液30ml提取，弃去下层液，用水20ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取红参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取人参甙Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘数分钟；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

b.金银花的定性检测

取相当于含生药量2.45g的制剂内容物，研细，加石油醚(30-60℃)3ml，浸渍30min，取上清液作为供试品溶液；另取金银花对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

c.没药的定性检测

取鉴别b项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取没药对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

d.乌头碱的限量检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加10％氨水5ml湿润，加三氯甲烷30ml，超声处理25分钟，滤过，残渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一含0.2％氢氧化钠溶液的硅胶G薄层板上，以9∶0.5比例氨蒸气饱和15分钟的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液显色；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置的斑点上，不得比对照品斑点颜色深；

e.绿原酸的定量检测：

照《中国药典》2005版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)为流动相；检测波长为327nm；理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含绿原酸0.15mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

供试品溶液的制备  取相当于含生药量3.5g的制剂内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密称重，回流提取60分钟，放凉后，用50％甲醇补失重量，摇匀，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本品每克含绿原酸(C16H18O9)计，不得少于0.5mg。

实施例17

生川乌280g、生草乌380g、马钱子(制)300g、羌活280g、乌梢蛇380g、红花300g、骨碎补(制)280g、乌梅380g、金银花300g、细辛280g、红参380g、鹿茸300g、黄柏280g、没药380g、广地龙300g、地枫皮280g、老鹳草380g、五加皮300g、续断280g、麻黄380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g

以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.30(80℃)的清膏A；生川乌、生草乌、马钱子(制)、羌活、乌梢蛇、红花、乌梅、金银花、细辛、红参、鹿茸、没药、桂枝十三味，粉碎成细粉，过筛，得药粉B；清膏A与药粉B混匀，干燥，粉碎，制粒，压制成10000片，干燥，包衣，即得。

a.人参的定性检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加乙醚25ml，超声处理15分钟，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨试液30ml提取，弃去下层液，用水20ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取红参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取人参甙Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘数分钟；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

b.金银花的定性检测

取相当于含生药量2.45g的制剂内容物，研细，加石油醚(30-60℃)3ml，浸渍30min，取上清液作为供试品溶液；另取金银花对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

c.没药的定性检测

取鉴别b项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取没药对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

d.乌头碱的限量检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加10％氨水5ml湿润，加三氯甲烷30ml，超声处理25分钟，滤过，残渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一含0.2％氢氧化钠溶液的硅胶G薄层板上，以9∶0.5比例氨蒸气饱和15分钟的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液显色；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置的斑点上，不得比对照品斑点颜色深；

e.绿原酸的定量检测：

照《中国药典》2005版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)为流动相；检测波长为327nm；理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含绿原酸0.15mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

供试品溶液的制备  取相当于含生药量3.5g的制剂内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密称重，回流提取60分钟，放凉后，用50％甲醇补失重量，摇匀，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本品每克含绿原酸(C16H18O9)计，不得少于0.5mg。

实施例18

生川乌200g、生草乌200g、马钱子(制)200g、羌活200g、乌梢蛇200g、三七200g、骨碎补(制)200g、乌梅200g、金银花200g、细辛100g、人参200g、鹿茸130g、黄柏200g、没药200g、广地龙200g、地枫皮200g、老鹳草270g、刺五加200g、续断200g、麻黄200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g

本药物组合物实施例2中方法制成胶囊剂。

实施例19

生川乌280g、生草乌380g、马钱子(制)480g、羌活280g、乌梢蛇380g、三七480g、骨碎补(制)280g、乌梅380g、金银花480g、细辛280g、人参380g、鹿茸480g、黄柏280g、没药380g、广地龙480g、地枫皮280g、老鹳草380g、刺五加480g、续断280g、麻黄380g、甘草480g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝480g、桂枝280g

本药物组合物实施例4中方法制成丸剂。

实施例20

生川乌680g、生草乌600g、马钱子(制)450g、羌活50g、乌梢蛇180g、三七350g、骨碎补(制)80g、乌梅100g、金银花370g、细辛650g、人参620g、鹿茸210g、黄柏550g、没药50g、广地龙680g、地枫皮320g、老鹳草580g、刺五加420g、续断200g、麻黄550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g

本药物组合物实施例6中方法制成片剂。

Claims (10)

1、一种治疗风湿病的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为：生川乌50-680重量份、生草乌50-680重量份、马钱子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、乌梢蛇50-680重量份、三七50-680重量份、骨碎补(制)50-680重量份、乌梅50-680重量份、金银花50-680重量份、细辛50-680重量份、人参50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黄柏50-680重量份、没药50-680重量份、广地龙50-680重量份、地枫皮50-680重量份、老鹳草50-680重量份、刺五加50-680重量份、续断50-680重量份、麻黄50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。

2、如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于其中三七50-680重量份、人参50-680重量份、刺五加50-680重量份分别用如下原料药替代：红花50-680重量份、红参50-680重量份、五加皮50-680重量份。

3、如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为：生川乌50-680重量份、生草乌50-680重量份、马钱子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、乌梢蛇50-680重量份、红花50-680重量份、骨碎补(制)50-680重量份、乌梅50-680重量份、金银花50-680重量份、细辛50-680重量份、红参50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黄柏50-680重量份、没药50-680重量份、广地龙50-680重量份、地枫皮50-680重量份、老鹳草50-680重量份、五加皮50-680重量份、续断50-680重量份、麻黄50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。

4、如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为：生川乌200-450重量份、生草乌200-450重量份、马钱子(制)200-450重量份、羌活200-450重量份、乌梢蛇200-450重量份、红花200-450重量份、骨碎补(制)200-450重量份、乌梅200-450重量份、金银花200-450重量份、细辛100-330重量份、红参200-450重量份、鹿茸130-360重量份、黄柏200-450重量份、没药200-450重量份、广地龙200-450重量份、地枫皮200-450重量份、老鹳草270-600重量份、五加皮200-450重量份、续断200-450重量份、麻黄200-450重量份、甘草200-450重量份、槲寄生200-450重量份、淫羊藿200-450重量份、牛膝200-450重量份、桂枝200-450重量份。

5、如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为：生川乌280重量份、生草乌380重量份、马钱子(制)300重量份、羌活280重量份、乌梢蛇380重量份、红花300重量份、骨碎补(制)280重量份、乌梅380重量份、金银花300重量份、细辛280重量份、红参380重量份、鹿茸300重量份、黄柏280重量份、没药380重量份、广地龙300重量份、地枫皮280重量份、老鹳草380重量份、五加皮300重量份、续断280重量份、麻黄380重量份、甘草300重量份、槲寄生280重量份、淫羊藿380重量份、牛膝300重量份、桂枝280重量份。

6、如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为：生川乌200重量份、生草乌200重量份、马钱子(制)200重量份、羌活200重量份、乌梢蛇200重量份、红花200重量份、骨碎补(制)200重量份、乌梅200重量份、金银花200重量份、细辛100重量份、红参200重量份、鹿茸130重量份、黄柏200重量份、没药200重量份、广地龙200重量份、地枫皮200重量份、老鹳草270重量份、五加皮200重量份、续断200重量份、麻黄200重量份、甘草200重量份、槲寄生200重量份、淫羊藿200重量份、牛膝200重量份、桂枝200重量份。

7、如权利要求2-6中任意一项所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为：

步骤1、以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮一到三次，合并煎液，滤液浓缩得清膏A；

步骤2、生川乌、生草乌、马钱子(制)、羌活、乌梢蛇、红花、乌梅、金银花、细辛、红参、鹿茸、没药、桂枝十三味，粉碎成细粉，过筛，得药粉B；

步骤3、清膏A与药粉B混匀，再加入常规辅料，经常规方法，制成临床接受的剂型。

8、如权利要求7所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为：

步骤1、以上二十五味，黄柏、骨碎补、广地龙、牛膝、地枫皮、老鹳草、五加皮、续断、淫羊藿、麻黄，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小时，加水量为药材体积的8倍，第二次1.5小时，加水量为药材体积的6倍，第三次1小时，加水量为药材体积的6倍，合并煎液，滤液浓缩至80℃时相对密度为1.20～1.30的清膏A；

步骤2、生川乌、生草乌、制马钱子、羌活、乌梢蛇、红花、乌梅、金银花、细辛、红参、鹿茸、没药、桂枝十三味，粉碎成100目的细粉，过筛，得药粉B；

步骤3、清膏A与药粉B混匀，再加入常规辅料，经常规方法，制成临床接受的剂型。

9、如权利要求2-6中任意一项所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法包括如下检测方法中的一种或几种：

a.人参的定性检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加乙醚20-30ml，超声处理10-20分钟，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇40-60ml，超声处理25-35分钟，滤过，滤液用氨试液25-35ml提取，弃去下层液，用水15-30ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取红参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取人参甙Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以13-18∶35-50∶20-25∶8-12比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，100-110℃烘数分钟；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

b.金银花的定性检测

取相当于含生药量2.45g的制剂内容物，研细，加石油醚(30-60℃)2-5ml，浸渍20-40min，取上清液作为供试品溶液；另取金银花对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7-10∶1-5比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

c.没药的定性检测

取鉴别b项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取没药对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7-10∶1-3比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

d.乌头碱的限量检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加10％氨水3-10ml湿润，加三氯甲烷20-40ml，超声处理20-30分钟，滤过，残渣用少量三氯甲烷清洗2-4次，合并三氯甲烷溶液，浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一含0.2％氢氧化钠溶液的硅胶G薄层板上，以7-10∶0.5-3比例氨蒸气饱和10-20分钟的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液显色；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置的斑点上，不得比对照品斑点颜色深；

e.绿原酸的定量检测：

照《中国药典》2005版一部附录VI D高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以7-10∶90-95比例的乙睛-0.4％磷酸为流动相；检测波长为327nm；理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含绿原酸0.15mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

供试品溶液的制备  取相当于含生药量3.5g的制剂内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加40-60％甲醇20-30ml，精密称重，回流提取50-75分钟，放凉后，用40-60％甲醇补失重量，摇匀，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；相当于含生药量12.25g的制剂内容物含绿原酸(C16H18O9)计，不得少于0.5mg。

10、如权利要求9所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法包括如下检测方法中的一种或几种：

a.人参的定性检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加乙醚25ml，超声处理15分钟，滤过，药渣挥去溶剂，加水饱和正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨试液30ml提取，弃去下层液，用水20ml洗涤，弃去水层，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取红参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取人参甙Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘数分钟；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

b.金银花的定性检测

取相当于含生药量2.45g的制剂内容物，研细，加石油醚(30-60℃)3ml，浸渍30min，取上清液作为供试品溶液；另取金银花对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

c.没药的定性检测

取鉴别b项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取没药对照药材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2-3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

d.乌头碱的限量检测

取相当于含生药量12.25g的制剂内容物，研细，加10％氨水5ml湿润，加三氯甲烷30ml，超声处理25分钟，滤过，残渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一含0.2％氢氧化钠溶液的硅胶G薄层板上，以9∶0.5比例氨蒸气饱和15分钟的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液显色；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置的斑点上，不得比对照品斑点颜色深；

e.绿原酸的定量检测：

照《中国药典》2005版一部附录VI D高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)为流动相；检测波长为327nm；理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含绿原酸0.15mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

供试品溶液的制备  取相当于含生药量3.5g的制剂内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密称重，回流提取60分钟，放凉后，用50％甲醇补失重量，摇匀，取此液用微孔滤膜过滤，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

相当于含生药量12.25g的制剂内容物含绿原酸(C16H18O9)计，不得少于0.5mg。