CN101536979A - 一种依达拉奉脂微球制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种依达拉奉脂微球制剂及其制备方法。所述的依达拉奉脂微球制剂，以特定比例的大豆磷脂和泊洛沙姆188混合乳化剂作为乳化剂，以注射用大豆油作为油相溶剂，包含药剂上常规的抗氧剂，制备而成的依达拉奉脂微球注射制剂，不仅工艺简单、成本低、易于工业化生产，而且所得注射剂相对于现有的依达拉奉注射剂，具有明显改善的稳定性。

Description

一种依达拉奉脂微球制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种脂微球制剂，具体涉及一种依达拉奉脂微球制剂及其制备方法，属于医药技术领域。

背景技术

依达拉奉是由苯肼和丁酮酰胺合成的吡唑啉酮类化合物，具有强大的自由基清除作用，可有效减轻脑梗塞后脑组织损伤造成的神经症状和功能障碍，已于2001年在日本上市，临床上通过抑制脑水肿、脑梗塞、神经症状、迟发性神经细胞死亡等缺血性脑血管障碍的产生及进程恶化，从而发挥其脑保护作用，主要用于治疗急性脑梗塞，可减轻神经功能损害，降低病残率，促进康复，具有疗效高和副作用小的特点，

依达拉奉是一种脑保护剂(自由基清除剂)。临床研究提示N-乙酰门冬氨酸(NAA)是特异性的存活神经细胞的标志，脑梗塞发病初期含量急剧减少。脑梗塞急性期患者给予依达拉奉，可抑制梗塞周围局部脑血流量的减少，使发病后第28天脑中NAA含量较甘油对照组明显升高。临床前研究提示，大鼠在缺血/缺血再灌注后静脉给予依达拉奉，可阻止脑水肿和脑梗塞的进展，并缓解所伴随的神经症状，抑制迟发性神经元死亡。机理研究提示，依达拉奉可清除自由基，抑制脂质过氧化，从而抑制脑细胞、血管内皮细胞、神经细胞的氧化损伤。

固体状态的依达拉奉比较稳定，但其水溶液易发生氧化还原反应而降解，目前，临床应用的依达拉奉制剂为水针剂，处方中加入了L-半胱氨酸和亚硫酸氢钠作为抗氧剂，制备过程中充入氮气，有效地提高了稳定性，但长期放置质量不能保证，仍然会发生降解。中国专利CN1241565C、CN100358520C和CN101288650A分别描述了依达拉奉冻干粉针剂的制备方法，主要在溶解性上进行了改进，而且加入了一些稳定剂，但其稳定性仍然不能得到保证，很难达到有效期的质量要求。

发明内容

针对现有技术中依达拉奉注射剂存在的缺陷，本发明的目的在于提供一种新的依达拉奉注射剂，以解决现有的依达拉奉注射剂稳定性差的问题。

本发明解决的技术方案如下：

本发明提供一种依达拉奉脂微球制剂，其以依达拉奉为活性成分，包含乳化剂、抗氧剂、注射用大豆油、注射用水制备而成的脂微球注射制剂，其特征在于所述的乳化剂为大豆磷脂和泊洛沙姆188，且大豆磷脂∶泊洛沙姆188重量比为(1～5)∶1，优选(1.5～3)∶1。

其中，上述所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量百分比，依达拉奉0.5％-5％，乳化剂1％-20％，抗氧剂0.5％-3％，注射用大豆油1％-50％，注射用水20％-80％。

优选地，上述所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量百分比，依达拉奉1％-3％，乳化剂5％-15％，抗氧剂1％-2％，注射用大豆油5％-40％，注射用水25％-70％。

本发明上述所述的依达拉奉脂微球制剂，其中根据需要还可以含有助乳化剂，例如还可以包含重量百分比为0.1％-10％的助乳化剂。所述的助乳化剂没有特别限制，可以是本领域中常规的助乳化剂，例如优选助乳化剂为C₁₀-C₂₀的脂肪酸或其生理上可接受盐中的一种或一种以上，其中所述脂肪酸优选为硬脂酸、油酸、亚油酸、棕榈酸、亚油精酸或十四烷酸。所述的盐，例如可以为碱金属盐，如钠盐、钾盐等，或者为碱土金属盐，例如钙盐、镁盐等。

本发明上述所述的依达拉奉脂微球制剂，其中所述的抗氧剂，没有特别限制，可以为本领域中常规的抗氧剂，例如可以为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、甲醛合亚硫酸氢钠、抗坏血酸、硫脲、硫代硫酸钠、维生素E、没食子酸丙酯、特丁基对苯二酚、抗坏血酸棕榈酸酯或叔丁基对羟基茴香醚中的一种或一种以上。

作为本发明一个最优选的实施方式，其中所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉10份，大豆磷脂50份，泊洛沙姆188 20份，亚油酸8份，亚硫酸氢钠15份，注射用大豆油180份，注射用水1500份。

作为本发明另一个最优选的实施方式，其中所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉15份，大豆磷脂120份，泊洛沙姆188 50份，棕榈酸20份，抗坏血酸棕榈酸酯60份，注射用大豆油400份，注射用水2500份。

作为本发明第三个最优选的实施方式，其中所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉30份，大豆磷脂100份，泊洛沙姆188 60份，油酸35份，甲醛合亚硫酸氢钠40份，注射用大豆油600份，注射用水5000份。

本发明上述所述的依达拉奉脂微球制剂，优选其通过包含如下步骤的方法制备而成脂微球注射制剂：

(1)将依达拉奉，或者将依达拉奉和抗氧剂，溶于乙醇后，加入注射用大豆油中，得油相；

(2)将乳化剂、助乳化剂和抗氧剂，或者将乳化剂和助乳化剂，溶于注射用水中，得水相；

(3)将油相和水相混合，搅拌乳匀成脂微球。

作为本发明另一发明目的，还提供一种上述所述依达拉奉脂微球制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将依达拉奉，或者将依达拉奉和抗氧剂，溶于乙醇后，加入注射用大豆油中，得油相；

(2)将乳化剂、助乳化剂和抗氧剂，或者将乳化剂和助乳化剂，溶于注射用水中，得水相；

(3)将油相和水相混合，搅拌乳匀成脂微球，过滤，充氮，灌封，灭菌，即得依达拉奉脂微球注射制剂。

本发明令人意外地发现，以特定的大豆磷脂和泊洛沙姆188混合乳化剂作为乳化剂，以注射用大豆油作为油相溶剂，包含药剂上常规的抗氧剂，制备而成的依达拉奉脂微球注射制剂，不仅工艺简单、成本低、易于工业化生产，而且所得注射剂相对于现有的依达拉奉注射剂，具有明显改善的稳定性。

本发明提供的依达拉奉脂微球制剂，进行稳定性试验考察，在高温60℃、光照4500Lx条件下放置10天，各项检测指标均无明显变化；在高温40℃、相对湿度75％±5％条件下加速试验6个月，各项检测指标没有明显变化；在高温25℃、相对湿度60％±10％条件下长期试验18个月，各项检测指标没有明显变化。

本发明提供的依达拉奉脂微球制剂，进行急性毒性试验、异常毒性试验和热源检查，均符合规定，安全性得到证明。

本发明提供的依达拉奉脂微球制剂及其制备方法，突出的优点表现在：

(1)依达拉奉被包裹于脂微球内，大大提高了制剂的稳定性，保证了产品质量；

(2)药物载体脂微球体内降解、无毒性和无免疫原性，而且可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用；

(3)采用常规的工艺设备，可工业规模、高效率生产，产品质量稳定，是一种独特和普遍适用的，低成本的工业化制备方法。

具体实施方式

以下通过实施例进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。

实施例1依达拉奉脂微球制剂的制备

处方(1000瓶)：依达拉奉        10g

              大豆磷脂        50g

              泊洛沙姆188      20g

              亚油酸           8g

              亚硫酸氢钠       15g

              注射用大豆油     180g

              注射用水         1500g

制备工艺

(1)将10g依达拉奉溶于30ml乙醇，加入180g大豆油中，得油相；

(2)将50g大豆磷脂、20g泊洛沙姆188、8g亚油酸、15g亚硫酸氢钠溶于水中，得水相；

(3)将油相和水相混合，转移至组织捣碎机中，转速10000r/min，高速搅拌10分钟，微孔滤膜过滤，充氮，灌封，115℃高压灭菌，即得。

实施例2依达拉奉脂微球制剂的制备

处方(1000瓶)：依达拉奉            15g

              大豆磷脂            120g

              泊洛沙姆188         50g

              棕榈酸              20g

              抗坏血酸棕榈酸酯    60g

              注射用大豆油        400g

              注射用水            2500g

制备工艺

(1)将15g依达拉奉和60g抗坏血酸棕榈酸酯溶于100ml乙醇，加入400g大豆油中，得油相；

(2)将120g大豆磷脂、50g泊洛沙姆188、20g棕榈酸溶于水中，得水相；

(3)将油相和水相混合，转移至组织捣碎机中，转速12000r/min，高速搅拌30分钟，微孔滤膜过滤，充氮，灌封，115℃高压灭菌，即得。

实施例3依达拉奉脂微球制剂的制备

处方(1000瓶)：依达拉奉           30g

              大豆磷脂           100g

              泊洛沙姆188        60g

              油酸               35g

              甲醛合亚硫酸氢钠   40g

              注射用大豆油       600g

              注射用水           5000g

制备工艺

(1)将30g依达拉奉溶于100ml乙醇，加入600g大豆油中，得油相；

(2)将100g大豆磷脂、60g泊洛沙姆188、35g油酸、40g甲醛合亚硫酸氢钠溶于水中，得水相；

(3)将油相和水相混合，转移至组织捣碎机中，转速8000r/min，高速搅拌20分钟，微孔滤膜过滤，充氮，灌封，115℃高压灭菌，即得。

试验例1粒径的测定

对实施例1-3制备的脂微球制剂的粒径进行检测，具体方法为：取本发明制备的脂微球注射液5ml，加入至300ml水中，用H3LA920激光散射粒度仪进行检测。结果，70％的粒径小于150nm，90％的粒径小于200nm，符合静脉注射用脂微球制剂的相关要求。

试验例2包封率的测定

将实施例1-3制备的脂微球制剂高速离心，5000r/min，离心30min，取清液1ml，用乙醇溶解，以高效液相色谱法测定马来酸桂哌齐特含量，确定被包封的含量M₁，脂微球制剂中马来酸桂哌齐特总量为M₀，包封率N为：

N＝M₁/M₀×100％

结果，本发明制备的脂微球制剂包封率均大于98％。

试验例3安全性试验

取实施例1-3制备的脂微球制剂，分别按中国药典2005版方法进行无菌和热源检查，结果均符合规定。

取本发明制备的脂微球制剂，分别进行过敏性和溶血性试验，结果无过敏性，无溶血性，安全性得到保障。

试验例4稳定性研究

将以上实施例1-3制备的样品与上市的依达拉奉注射液(南京先声东元药业有限公司生产，批号20081009)在高温60℃、光照4500Lx条件下放置10天进行影响因素试验考察，结果见表1；在高温40℃、相对湿度75％±5％条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表2；在高温25℃、相对湿度60％±10％条件下18个月，进行长期试验考察，检测各项质量指标的变化，结果见表3。

表1影响因素结果

表2加速试验结果

表3长期试验结果

由以上结果发现加速3月、6月，长期12月、18月时上市的依达拉奉注射液澄明度不符合规定，pH值下降较大，含量降低明显，有关物质升高；而本发明制备的样品外观性状没有明显变化，为乳白色澄明溶液，澄明度、pH值、含量和有关物质也没有明显的变化。说明本发明制备的样品长期贮存质量稳定性更好。

对比例1依达拉奉脂微球制剂的制备

处方(1000瓶)：依达拉奉          10g

              蛋黄磷脂          250g

              亚油酸            8g

              亚硫酸氢钠        15g

              注射用大豆油      180g

              注射用水          1500g

制备工艺同实施例1，结果制得的脂微球制剂包封率较低，按试验例2方法检测，仅为75％；脂微球粒径按试验例1方法进行检测，粒径为600-1000nm，分布不均匀，不符合静脉注射的相关要求。

对比例2依达拉奉脂微球制剂的制备

处方(1000瓶)：依达拉奉            15g

              氢化蛋黄磷脂        120g

              吐温80              50g

              棕榈酸              20g

              抗坏血酸棕榈酸酯    60g

              注射用大豆油        400g

              注射用水            2500g

制备工艺同实施例2，结果制得的脂微球制剂包封率较低，按试验例2方法检测，仅为68％；进行试验例4稳定性试验，含量明显降低，有关物质升高，pH值变化较大，澄明度不符合规定；脂微球粒径按试验例1方法进行检测，粒径为400-800nm，分布不均匀，不符合静脉注射的相关要求。

对比例3依达拉奉脂微球制剂的制备

处方(1000瓶)：依达拉奉            30g

              大豆磷脂            160g

              油酸                35g

              甲醛合亚硫酸氢钠    40g

              注射用大豆油        600g

              注射用水            5000g

制备工艺同实施例3，结果制得的脂微球制剂包封率较低，按试验例2方法检测，仅为73％；进行试验例4稳定性试验，含量明显降低，有关物质升高，pH值变化较大，澄明度不符合规定。

已经根据优选实施例对本发明作了描述。应当理解的是前面的描述和实施例仅仅为了举例说明本发明而已。在不偏离本发明的精神和范围的前提下，本领域技术人员可以设计出本发明的多种替换方案和改进方案，其均应被理解为在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1、一种依达拉奉脂微球制剂，其以依达拉奉为活性成分，包含乳化剂、抗氧剂、注射用大豆油、注射用水制备而成的脂微球注射制剂，其特征在于所述的乳化剂为大豆磷脂和泊洛沙姆188，且大豆磷脂∶泊洛沙姆188重量比为(1～5)∶1，优选(1.5～3)∶1。

2、根据权利要求1所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量百分比，依达拉奉0.5％-5％，乳化剂1％-20％，抗氧剂0.5％-3％，注射用大豆油1％-50％，注射用水20％-80％。

3、根据权利要求1-2所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量百分比，依达拉奉1％-3％，乳化剂5％-15％，抗氧剂1％-2％，注射用大豆油5％-40％，注射用水25％-70％。

4、根据权利要求1-3所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于还包含重量百分比为0.1％-10％的助乳化剂，优选助乳化剂为C₁₀-C₂₀的脂肪酸或其生理上可接受盐中的一种或几种，所述脂肪酸优选为硬脂酸、油酸、亚油酸、棕榈酸、亚油精酸或十四烷酸。

5、根据权利要求1-4所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于所述的抗氧剂为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、甲醛合亚硫酸氢钠、抗坏血酸、硫脲、硫代硫酸钠、维生素E、没食子酸丙酯、特丁基对苯二酚、抗坏血酸棕榈酸酯或叔丁基对羟基茴香醚中的一种或多种。

6、根据权利要求1-5所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉10份，大豆磷脂50份，泊洛沙姆188 20份，亚油酸8份，亚硫酸氢钠15份，注射用大豆油180份，注射用水1500份。

7、根据权利要求1-5所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉15份，大豆磷脂120份，泊洛沙姆188 50份，棕榈酸20份，抗坏血酸棕榈酸酯60份，注射用大豆油400份，注射用水2500份。

8、根据权利要求1-5所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉30份，大豆磷脂100份，泊洛沙姆188 60份，油酸35份，甲醛合亚硫酸氢钠40份，注射用大豆油600份，注射用水5000份。

9、根据权利要求1-8所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于通过包含如下步骤的方法制备而成脂微球注射制剂：

(1)将依达拉奉，或者将依达拉奉和抗氧剂，溶于乙醇后，加入注射用大豆油中，得油相；

(2)将乳化剂、助乳化剂和抗氧剂，或者将乳化剂和助乳化剂，溶于注射用水中，得水相；

(3)将油相和水相混合，搅拌乳匀成脂微球。

10、一种权利要求1-9所述依达拉奉脂微球制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将依达拉奉，或者将依达拉奉和抗氧剂，溶于乙醇后，加入注射用大豆油中，得油相；

(2)将乳化剂、助乳化剂和抗氧剂，或者将乳化剂和助乳化剂，溶于注射用水中，得水相；

(3)将油相和水相混合，搅拌乳匀成脂微球，过滤，充氮，灌封，灭菌，即得依达拉奉脂微球注射制剂。