CN101497638B - 一种nad+类似物及其合成和应用 - Google Patents
一种nad+类似物及其合成和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101497638B CN101497638B CN200810010285A CN200810010285A CN101497638B CN 101497638 B CN101497638 B CN 101497638B CN 200810010285 A CN200810010285 A CN 200810010285A CN 200810010285 A CN200810010285 A CN 200810010285A CN 101497638 B CN101497638 B CN 101497638B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- analogue
- nad
- saccharomyces cerevisiae
- nmr
- difference
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title abstract 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title abstract 2
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-O NAD(+) Chemical class NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-O 0.000 title 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims abstract description 84
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 48
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 85
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 26
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical class C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 24
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 24
- 238000009833 condensation Methods 0.000 claims description 23
- 230000005494 condensation Effects 0.000 claims description 23
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 claims description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 12
- -1 2-oxo-3-oxazolidinyl Chemical group 0.000 claims description 8
- RAABOESOVLLHRU-UHFFFAOYSA-N diazene Chemical compound N=N RAABOESOVLLHRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 8
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 7
- 229910000071 diazene Inorganic materials 0.000 claims description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 6
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N phosphoryl trichloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylpropanoyl chloride Chemical compound CC(C)(C)C(Cl)=O JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 5
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 4
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 4
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 claims description 4
- 235000010378 sodium ascorbate Nutrition 0.000 claims description 4
- PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M sodium ascorbate Substances [Na+].OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M 0.000 claims description 4
- 229960005055 sodium ascorbate Drugs 0.000 claims description 4
- PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M sodium-L-ascorbate Chemical compound [Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M 0.000 claims description 4
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 3
- GFAUNYMRSKVDJL-UHFFFAOYSA-N formyl chloride Chemical compound ClC=O GFAUNYMRSKVDJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-Dichloroethane Chemical compound ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SNTWKPAKVQFCCF-UHFFFAOYSA-N 2,3-dihydro-1h-triazole Chemical compound N1NC=CN1 SNTWKPAKVQFCCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JAPYIBBSTJFDAK-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tri(propan-2-yl)benzenesulfonyl chloride Chemical compound CC(C)C1=CC(C(C)C)=C(S(Cl)(=O)=O)C(C(C)C)=C1 JAPYIBBSTJFDAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KLDLRDSRCMJKGM-UHFFFAOYSA-N 3-[chloro-(2-oxo-1,3-oxazolidin-3-yl)phosphoryl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1COC(=O)N1P(=O)(Cl)N1CCOC1=O KLDLRDSRCMJKGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 claims description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 claims description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical group [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HXBZCHYDLURWIZ-UHFFFAOYSA-N diphenyl hydrogen phosphate;hydrochloride Chemical compound Cl.C=1C=CC=CC=1OP(=O)(O)OC1=CC=CC=C1 HXBZCHYDLURWIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HCIBTBXNLVOFER-UHFFFAOYSA-N diphenylcyclopropenone Chemical compound O=C1C(C=2C=CC=CC=2)=C1C1=CC=CC=C1 HCIBTBXNLVOFER-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 claims description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Natural products C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000004950 naphthalene Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 2
- KQIADDMXRMTWHZ-UHFFFAOYSA-N chloro-tri(propan-2-yl)silane Chemical compound CC(C)[Si](Cl)(C(C)C)C(C)C KQIADDMXRMTWHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 abstract description 56
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 abstract description 13
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 abstract description 3
- 125000004417 unsaturated alkyl group Chemical group 0.000 abstract description 3
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 abstract description 2
- DAYLJWODMCOQEW-TURQNECASA-O NMN(+) Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O2)O)=C1 DAYLJWODMCOQEW-TURQNECASA-O 0.000 abstract 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 abstract 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 abstract 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 57
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 47
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 47
- 230000009471 action Effects 0.000 description 38
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 37
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 description 37
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 23
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 22
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 21
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 19
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 19
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 16
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 15
- 241000793189 Saccharomyces cerevisiae BY4741 Species 0.000 description 9
- 0 CCC(C)C*(C)c1c[n](CC)nn1 Chemical compound CCC(C)C*(C)c1c[n](CC)nn1 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 5
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 4
- 150000004713 phosphodiesters Chemical group 0.000 description 4
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- JXOVILXSQJGWMC-UHFFFAOYSA-N 3-dichlorophosphoryl-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound ClP(Cl)(=O)N1CCOC1=O JXOVILXSQJGWMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KWOLFJPFCHCOCG-UHFFFAOYSA-N Acetophenone Chemical compound CC(=O)C1=CC=CC=C1 KWOLFJPFCHCOCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N Cyanamide Chemical group NC#N XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012847 fine chemical Substances 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- NFADSNXIZZWWGU-UHFFFAOYSA-O CCN(C(C1O)OC(COP([O](C)C(C)OP(O)(OCC(C(C2O)O)OC2[n+]2cccc(C(N)=O)c2)=O)=O)C1O)c(ncnc1N)c1N Chemical compound CCN(C(C1O)OC(COP([O](C)C(C)OP(O)(OCC(C(C2O)O)OC2[n+]2cccc(C(N)=O)c2)=O)=O)C1O)c(ncnc1N)c1N NFADSNXIZZWWGU-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- IZWWNJIXYXPTHV-ZRZGDYATSA-O COP(OC)(OCC([C@@H]([C@@H]1O)O)OC1[n+]1cccc(C(N)=O)c1)=O Chemical compound COP(OC)(OCC([C@@H]([C@@H]1O)O)OC1[n+]1cccc(C(N)=O)c1)=O IZWWNJIXYXPTHV-ZRZGDYATSA-O 0.000 description 1
- LXZNUBRBJAPZOB-FUNUNJKWSA-O COPOCC(C(C1O)O)O[C@H]1[n+]1cccc(C(N)=O)c1 Chemical compound COPOCC(C(C1O)O)O[C@H]1[n+]1cccc(C(N)=O)c1 LXZNUBRBJAPZOB-FUNUNJKWSA-O 0.000 description 1
- DEZIDURUGQCXDR-UHFFFAOYSA-N COc1ccccc1OCCCCCO Chemical compound COc1ccccc1OCCCCCO DEZIDURUGQCXDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UZCBNJHDGRJSRJ-UHFFFAOYSA-O COc1ccccc1OCCOCC[OH2+] Chemical compound COc1ccccc1OCCOCC[OH2+] UZCBNJHDGRJSRJ-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 1
- 239000001116 FEMA 4028 Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- NVXLIZQNSVLKPO-UHFFFAOYSA-N Glucosereductone Chemical compound O=CC(O)C=O NVXLIZQNSVLKPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100285000 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) his-3 gene Proteins 0.000 description 1
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZUAURMBNZUCEAF-UHFFFAOYSA-N OCCOCCOc1ccccc1 Chemical compound OCCOCCOc1ccccc1 ZUAURMBNZUCEAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SIOZMPIEDLGPKF-UHFFFAOYSA-N OCCc1c[n](CCCCC(NC(C2C=CC=CC2)c2ccccc2)=O)nn1 Chemical compound OCCc1c[n](CCCCC(NC(C2C=CC=CC2)c2ccccc2)=O)nn1 SIOZMPIEDLGPKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710157860 Oxydoreductase Proteins 0.000 description 1
- 108050002485 Sirtuin Proteins 0.000 description 1
- 102000011990 Sirtuin Human genes 0.000 description 1
- DPDMMXDBJGCCQC-UHFFFAOYSA-N [Na].[Cl] Chemical compound [Na].[Cl] DPDMMXDBJGCCQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N adenosine monophosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(OP(O)(O)=O)C1O LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 1
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 description 1
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000366 copper(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 1
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 125000000627 niacin group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- KRIOVPPHQSLHCZ-UHFFFAOYSA-N propiophenone Chemical compound CCC(=O)C1=CC=CC=C1 KRIOVPPHQSLHCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 125000000548 ribosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- ABDKAPXRBAPSQN-UHFFFAOYSA-N veratrole Chemical compound COC1=CC=CC=C1OC ABDKAPXRBAPSQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011708 vitamin B3 Substances 0.000 description 1
- 235000019160 vitamin B3 Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
技术领域
本发明涉及一类NAD+类似物,具体地说是具有各种取代基的饱和及不饱和烷烃、芳香烃为腺苷一磷酸(adenosine monophosphate,AMP)类似物的磷酸二酯化合物以及以一系列缩合试剂合成NAD+类似物——具有磷酸二酯结构NAD+类似物的方法,以及该化合物作为微生物(如大肠杆菌和酿酒酵母)生长的促进剂;也可作为脱氢酶辅因子用于催化氧化还原反应。
背景技术
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)以及它相应的还原态(NADH),就是通常所说的辅酶I,是生物体不可缺少的小分子化合物,参与生命体中的氧化还原代谢及其它一系列重要生物化学过程,其结构式如下:
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的化学结构
在细胞内,NAD+主要起传递氢和电子的作用,许多重要氧化还原酶都依赖于NAD+。
除了氧化还原功能外,在细胞的许多非氧化还原生命过程中,NAD+同样起到非常重要的作用。NAD+在细胞的繁殖、生长、分化、凋亡等生命活动中都是不可缺少的小分子化合物。NAD+同样可以作为组蛋白去乙酰化酶(sirtuins)的底物,在酶催化下,将组蛋白上的乙酰基移去(G.Blander et al.Annu Rev Biochem 2004,73,417-435.),使组蛋白能够顺利完成DNA复制、转录和修复等重要功能(H.N.Lin Org.Biomol.Chem.2007,5,2541-2554.)。有文献报道,NAD+浓度的提高有助于延长酵母的寿命(Haigis,M.C.;Guarente,L.P.Genes DeV.2006,20,2913-21.)。
基于NAD+结构复杂,性质不稳定等特点,人们对其进行了许多化学改造。目前,对NAD+的改造工作很多,最近的一些工作有对腺苷一磷酸(AMP)部分(C.J.W.Mort et al.Bioorg.Med.Chem.2004,12,475-487.)改造、核糖环(G.-C.Zhou et al.J.Am.Chem.Soc.2004,126,5690-5698.)改造以及烟酰胺部分(N.E.Batoux et al.Tetrahedron 2004,60,6609-6617.)改造,对焦磷酸的改造也有报道(L.Chen et al.Bioorg.Med.Chem.Lett.2007,17,3152-3155.)。上述工作都是建立在对NAD+原有结构进行化学修饰基础上,难以克服其化学性质上不稳定性,化学合成、分离困难等缺点。
H.C.Lo et al.(Inorg.Chem.2001,40,6705-6716.)曾经采用甲醇为腺苷一磷酸(AMP)部分的替代物与烟酰胺单核苷酸在DCC/DMAP下,合成了NAD+类似物但是这种方法产率低、副产物多、分离困难,并且产物在分离过程中容易分解。另外,如果采用其他的醇为腺苷一磷酸(AMP)部分的替代物,则找不到合适的溶剂溶解烟酰胺单核苷酸,同时糖环上2’,3’羟基也会参加反应,所以此种方法不适合合成本发明的NAD+类似物。
H.C.Lo et al.(Angew.Chem.Int.Ed.2002,41,478-481.)报道了用上述类似物作为马肝脱氢酶(HLADH)的辅因子还原酮为手性醇的例子,但所用的还原试剂为稀有金属Rh,价格昂贵,操作繁琐,对空气敏感,辅因子结构过于简单,与酶的结合不够紧密。
发明内容
本发明的目的在于避免技术背景中困难,对NAD+结构进行了分析,保留了烟酰胺单核苷催化功能区,对腺苷和焦磷酸部分进行改造-以结构简单的醇和磷酸二酯结构替代,合成了一种磷酸二酯类NAD+类似物,这种类似物具有结构相对简单,化学性质相对稳定的特点。
本发明另一目的是提供了合成具有磷酸二酯骨架NAD+类似物的方法。
本发明的目的还在于提供这种NAD+类似物可以作为微生物(如大肠杆菌和酿酒酵母)生长的促进剂;也可用NaBH4或玻碳电极将NAD+类似物还原后,作为脱氢酶辅因子用于催化氧化还原反应,具有更易于与HLADH结合,更经济,操作简便,酶的催化活性更高等特点。
本发明的NAD+类似物具有如下结构式:
结构式中烟酰胺单核苷酸为β-构型;核糖为D-构型;
与烟酰胺单核苷酸相连的R为C4-C15饱和或不饱和的烷基,或含有氧、氮、氯、溴或硫杂原子的C2-C10饱和或不饱和烷基,以下称之为A;
或R为以下称之为B,其中Ar1为芳香烃或与烟酰胺单核苷酸磷酸相连的链中X=CH2、O或S,n=0-3;R1为卤素、C1-C5烷氧基、C1-C5烷巯基、C1-C5烷基氨基、芳基酰胺基、烷基酰胺基或C1-C5卤代烃基;
或R为以下称之为D,其中Ar3为芳香环 或R2为C1-C5烷基、C1-C5烷氧基、C1-C5烷硫基、C1-C5烷基酰氨基、C1-C5卤代烃基或卤素,各连接链中n=0-10,m=0-10或1=0-2,卤(素)为F、Cl或Br。
本发明中NAD+类似物合成方法如下:
1)参照文献(S.M.Graham,D.J.Macaya,R.N.Sengupta et al.Org.Lett.2004,6,233-236.)合成2’,3’-二乙酰基烟酰胺单核苷酸吡啶盐;
2)在有机溶剂中,加入步骤1)合成的吡啶盐、醇和缩合试剂,在-10~35℃搅拌反应16-72小时,再经脱乙酰化,得到含有R为A或B取代基的目标NAD+类似物;
其中2’,3’-二乙酰基烟酰胺单核苷酸吡啶盐、醇和缩合试剂的摩尔比例为1∶1~5∶1~20;有机溶剂为DMF和吡啶的混合溶剂,混合体积比例为1∶1~15;所用缩合试剂为碳酰亚胺衍生物、酰氯、磷酰氯、双(2-氧代-3-恶唑烷基)磷酰氯(BOP-Cl)、2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(TPS-Cl)或1-对硝基苯磺酸基-1,2,4-三唑(TPS-N);所用醇为A-OH或B-OH;
3)采用步骤2)的方法,当其选用的醇为时,获取其中间产物将此中间产物和叠氮化合物或溶解于混合溶剂中,加入催化剂,10~40℃搅拌反应12-48小时,经脱乙酰化,得到含有C或D取代基的目标NAD+类似物;
其中叠氮化物和催化剂的摩尔比例为1∶1~10∶0.1~20,混合溶剂为甲醇,乙醇,丙醇,叔丁醇,正丁醇,二氯甲烷,氯仿,1,2-二氯乙烷,N,N-二甲基甲酰胺,甲酰胺,吡啶,乙腈,丙酮或二甲基亚砜和水(其中水的体积占30~50%)的混合溶剂,催化剂为Cu/CuSO4(摩尔比为1~10∶1)或抗坏血酸钠/CuSO4(摩尔比为1~10∶1),叠氮化合物中Ar2和Ar3依上所述。
所述碳酰亚胺衍生物为N,N’-二环己基碳酰二亚胺(DCC)、N,N’-二异丙基碳酰二亚胺(DIC)或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDC);所述酰氯为新戊酰氯(PV-Cl)或1-金刚烷甲酰氯(AC-Cl);所述磷酰氯为氯磷酸二苯酯(DPCP)。
本发明所得NAD+类似物可以作为微生物促进剂,用于促进微生物(如大肠杆菌和酿酒酵母)的生长;也可作为脱氢酶辅因子用于催化氧化还原反应
本发明所得NAD+类似物的应用方法如下:
将NAD+类似物加入到微生物培养液中,促进大肠杆菌和酿酒酵母生长,在生物化工领域具有重要价值;或将NAD+类似物作为马肝脱氢酶辅因子,用于催化合成手性醇,在精细化工领域具有重要价值。
本发明合成了一种含有烟酰胺单核苷酸的磷酸二酯化合物,而且反应条件温和,原料易得,分离纯化简单易行,操作简便,产率较高。
本发明的NAD+类似物能明显促进大肠杆菌和酿酒酵母生长,在生物化工领域具有应用价值;而且,本发明的NAD+类似物还能作为马肝脱氢酶的辅因子,用于催化合成手性醇,在生物催化和精细化工领域具有应用前景。
具体实施方式
以下实施例有助于了解本专利,但不局限于本发明的内容。
实施例中所用的原料分别参照文献(S.M.Graham,D.J.Macaya,R.N.Sengupta et al.Org.Lett.2004,6,233-236.)合成2’,3’-二乙酰基烟酰胺单核苷酸吡啶盐;参照文献(R.Fiammengo,K.Musílek and A.Jschke J.Am.Chem.Soc.2005,127,9271-9276.)合成醇A-OH或B-OH;参照文献(P.van der Peet,C.T.Gannon,I.Walker et al.ChemBioChem 2006,7,1384-1391.)合成叠氮化物。
实施例1
将0.63mmol Ac2NMN溶解于7ml吡啶和7ml DMF混合溶剂中,加入2-苯乙醇(200μl,1.67mmol),加入2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(TPS-Cl)(757mg,2.5mmol),10℃搅拌反应10h,减压除掉溶剂,滴入10ml水,二氯甲烷洗涤,水相浓缩,反相硅胶柱层析,收集产物,浓缩得到黄色糖浆状固体。
将上述产物溶解于0.7ml甲醇中,降温到-5℃,加入7M的NH3的甲醇溶液115μl,混合物在-5℃下搅拌过夜,TLC检测直至反应进行完全,除去溶剂,残渣加水1ml,经过反向硅胶柱层析,收集产物,浓缩后,再经过阴离子交换树脂(201×4,HCO2 -型),浓缩,冷冻干燥产物,产率:60%。
1H NMR(400MHz,D2O):δ2.78(t,J=6.04Hz,2H),3.65(dd,J=1.96,9.64Hz,1H),3.94(m,3H),4.11(t,J=2.2,1H),4.35(s,1H),6.01(d,J=5.36,1H),7.14(m,5H),8.02(t,J=7.48,1H),8.77(d,J=8,1H),9.01(d,J=6.04,1H),9.19(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ167.0,148.4,144.7,141.9,141.2,136.2,131.6,131.0,130.8,128.9,102.2,89.7,89.6,80.1,73.4,69.2,66.7,38.5,38.5.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.31.
HRMS:calcd for C19H23N2O8P(M+H+)439.1270,found(M+H+)439.1284.
该化合物分子量438.12,在264nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为5100L·mol-1·cm-1,淡黄色糖浆状固体,易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
将LB培养基(蛋白胨2g·L-1,酵母粉1g·L-1,氯化钠2g·L-1,pH 7.0)10ml中加入上述化合物至终浓度为100μM,以1∶100接种大肠杆菌DH5α(北京鼎国生物技术公司)种子液(OD600=2),在37℃,200rpm条件下培养;与对照组(无NAD+类似物)相比,培养4h后添加类似物的大肠杆菌的OD600值比对照组高0.8,说明NAD+类似物对大肠杆菌DH5α生长具有促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
将YEPD培养基(葡萄糖2g·L-1,酵母粉1g·L-1,蛋白胨2g·L-1,pH 6.5)10ml中加入上述化合物至终浓度为100μM,以1∶200接种酿酒酵母菌S288c(购自Invitrogen公司)种子液(OD600=7.9),在30℃,200rpm条件下培养;与对照组(无NAD+类似物)相比,培养12h后添加类似物的酵母菌的OD600值比对照组高3.5,说明NAD+类似物对酿酒酵母S288c生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶辅因子催化合成手性醇的实验
将上述类似物配成5mM溶液,用等体积5mM NaBH4水溶液处理,得到类似物还原态,备用;或将类似物在5mM Tris-10mM NaCl缓冲液中,以Pt电极为对电极,饱和甘汞电极为参比电极,用玻碳电极为工作电极将其还原,然后加入到磷酸钾缓冲液(5ml,100mM,pH=7)中,再依次加入苯乙酮0.005mmol,马肝脱氢酶10U,室温反应24h,用GC(β-环糊精手性柱)检测反应,积分产率为24%,S构型的e.e.值为97%。
实施例2
同实施例1方法;与实施例1不同之处在于,所用的醇为反应温度为30℃,反应时间为38h,所用缩合试剂为1-对硝基苯磺酸基-1,2,4-三唑,吡啶盐、醇和缩合试剂的摩尔比例为1∶1∶5,产率:59%。
1H NMR(400MHz,D2O):δ0.75(t,2H),1.23(q,2H),1.44(t,2H),3.75(q,2H),4.03(d,J=5.32Hz,1H),4.20(d,J=10.28Hz,1H),4.42(t,J=5.08Hz,1H),4.51(s,1H),6.11(d,J=5.12Hz,1H),9.01(d,J=6.04,1H),8.88(d,J=7.56Hz,1H),8.18(t,J=7.44Hz,1H),9.34(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ168.2,148.4,144.9,142.2,136.4,130.9,102.3,89.7,80.2,73.5,68.7,66.8,34.4,20.8,15.4.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.57.
HRMS:calcd for C15H23N2O8P(M+H+)391.1230,found(M+H+)391.1244.
该化合物分子量390.12,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为5600L·mol-1·cm-1,无色或微黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于,培养5h后,添加类似物的大肠杆菌HB101(北京鼎国生物技术公司)的OD600值比对照组高0.6,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,培养10h后,添加类似物的酿酒酵母BY4741(购自ATCC,基因型:Mat a;his3Δ1;leu2Δ0;met15Δ0;ura3Δ0)的OD600比对照组高2.5,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于,积分产率为29%,S构型的e.e.值为95%。
实施例3
1H NMR(400MHz,D2O):δ1.20(t,2H),1.28(d,6H),1.42(d,3H),1.51(d,3H),1.69(s,3H),3.74(q,2H),4.01(dd,J=4.92,10.4Hz,1H),4.17(dd,J=3.96,9.92Hz,1H),4.28(s,1H),4.43(s,1H),4.48(s,1H),6.09(d,J=5.04,1H),8.16(t,J=7.04,1H),8.87(d,J=8.04,1H),9.14(d,J=6.2,1H),9.32(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ167.5,148.4,144.7,141.9,141.2,136.2,131.6,131.0,130.8,128.9,65.3,45.7,42.6,38.2,,31.6,29.3,19.8.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.63.
HRMS:calcd for C23H33N2O8P(M+H+)497.2210,found(M+H+)497.2254.
该化合物分子量496.22,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为4600L·mol-1·cm-1,淡黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于,培养3h后,添加类似物的大肠杆菌BL21(北京鼎国生物技术公司)的OD600值比对照组高0.4,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于,培养11h后,添加类似物的酿酒酵母S288c的OD600比对照组高2.8,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,加入苯丙酮0.005mmol,积分产率为21%,S构型的e.e.值为93%。
实施例4
同实施例1方法;与实施例1不同之处在于,所用的醇为吡啶盐、醇和缩合试剂的摩尔比例为1∶4∶3,产率:13%。
1H NMR(400 MHz,D2O):δ1.87(s,1H),2.41(s,2H),3.83(m,2H),4.14(d,J=15.8Hz,1H),4.26(d,J=14.48Hz,1H),4.35(s,1H),4.43(s,1H),4.53(s,1H),5.35(d,J=5.04Hz,1H),8.21(t,J=6.4Hz,1H),8.91(t,J=7.88Hz,1H),9.15(t,J=7.92Hz,1H),9.35(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ168.4,148.4,144.8,141.3,136.4,133.7,102.3,89.7,86.2,80.1,73.5,68.2,66.8,34.3,23.4.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.31.
HRMS:calcd for C15H19N2O8P(M+H+)387.0970,found(M+H+)387.0964.
该化合物分子量386.09,在265nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为5900L·mol-1·cm-1,淡黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养6h后,添加类似物的大肠杆菌DH5α的OD600值比对照组高0.7,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,培养12h后,添加类似物的酿酒酵母S288c的OD600比对照组高3.5,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,积分产率为21%,S构型的e.e.值为92%。
实施例5
同实施例1方法;与实施例1不同之处在于,所用的醇为反应温度为10℃,反应时间为20h,所用缩合试剂为双(2-氧代-3-恶唑烷基)磷酰氯,吡啶盐、醇和缩合试剂的摩尔比例为1∶5∶10,体积比DMF∶Py=1∶10,产率:41%。
1H NMR(400MHz,D2O):δ3.64(t,J=4.28Hz,2H),3.74(t,J=4.16Hz,2H),3.91(m,2H),3.99(m,3H),4.15(dd,J=2.46,5.48,2H),4.25(d,J=5.28,1H),4.29(d,J=2.64,1H),4.38(s,1H),5.93(d,J=5.40,1H),6.73(d,J=8.24,2H),6.82(t,J=7.36,1H),7.13(t,J=7.72,1H),8.05(t,J=6.68,1H),8.69(d,J=8.12,1H),9.06(d,J=6.24,1H),9.16(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ167.9,160.2,148.3,144.8,142.1,136.2,132.3,131.0,124.0,117.0,102.3,89.6,80.2,73.2,72.7,71.7,69.6,67.6,66.9.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.36.
HRMS:calcd for C21H27N2O10P(M+H+)499.1440,found(M+H+)499.1484.
该化合物分子量498.14,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为6600L·mol-1·cm-1,淡黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养5h后,添加类似物的大肠杆菌JM109(北京鼎国生物技术公司)的OD600值比对照组高0.6,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养10h后,添加类似物的酿酒酵母S288c的OD600比对照组高2.6,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶辅因子用于催化合成手性醇实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于加入2-苯丁酮0.005mmol,积分产率为29%,S构型的e.e.值为95%。
实施例6
同实施例1方法;与实施例1不同之处在于,所用的醇为反应温度为0℃,反应时间为60h,所用缩合试剂为1-金刚烷甲酰氯,吡啶盐、醇和缩合试剂的摩尔比例为1∶4∶18,产率:34%。
1H NMR(400MHz,D2O):δ3.61(t,J=4.12,2H),3.70(t,J=4.16,2H),3.86(m,2H),3.99(m,3H),4.13(ddd,J=2.40,3.88,11.88,2H),4.18(dd,J=2.88,4.68,1H),4.23(t,J=5.12,1H),4.32(t,J=2.4,1H),5.87(d,J=5.20,1H),6.70(t,J=7.60,2H),6.79(d,J=8.28,1H),7.03(m,2H),8.00(t,J=6.44,1H),8.63(d,J=8.08,1H),8.99(d,J=6.28,1H),9.10(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ167.6,162.7,155.7,148.2,144.7,142.0,136.0,132.6,130.9,130.8,124.6,124.0,116.6,102.2,89.4,89.3,80.1,73.0,72.8,71.5,71.0,67.7,67.7,66.8.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.29.
HRMS:calcd for C21H26ClN2O10P(M+H+)533.1092,found(M+H+)533.1092.
该化合物分子量532.1,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为6100L·mol-1·cm-1,微红色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养6h后,添加类似物的大肠杆菌DH5α的OD600值比对照组高0.7,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养16h后,添加类似物的酿酒酵母BY4741的OD600比对照组高3.0,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于积分产率为30%,S构型的e.e.值为95%。
实施例7
1H NMR(400MHz,D2O):δ2.04(s,3H),3.59(t,J=4.16,2H),3.67(t,J=7.16,2H),3.88(m,4H),3.97(ddd,J=1.96,4.8,12.12,1H),4.15(ddd,J=1.85,3.36,12.12,1H),4.21(m,1H),4.25(t,J=5.08,1H),4.34(s,1H),5.86(d,J=5.24,1H),6.43(m,2H),6.57(d,J=7.52,1H),6.93(t,J=8.28,1H),7.99(t,J=7.52,1H),8.63(d,J=8.08,1H),9.00(d,J=6.24,1H),9.08(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ167.6,162.8,160.1,148.1,144.6,142.6,141.9,136.0,132.0,130.9,129.2,124.6,117.5,113.6,102.2,89.5,89.4,80.1,73.0,72.7,72.7,71.6,69.4,67.7,67.6,66.8.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.32.
HRMS:calcd for C22H29N2O11P(M+H+)529.1521,found(M+H+)439.1562.
该化合物分子量528.15,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为7700L·mol-1·cm-1,淡黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养5h后,添加类似物的大肠杆菌DH5α的OD600值比对照组高0.7,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养12h后,添加类似物的酿酒酵母S288c的OD600比对照组高3.8,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于积分产率为28%,S构型的e.e.值为93%。
实施例8
1H NMR(400MHz,D2O):δ3.65(s,2H),3.75(t,J=3.84,2H),3.91(m,2H),3.99(m,3H),4.17(dd,J=3.88,11.96,1H),4.26(t,J=2.32,1H),4.33(m,1H),4.40(d,J=2.16,1H),5.97(d,J=5.24,1H),6.56(m,3H),7.12(m,1H),8.10(t,J=8.12,1H),8.73(d,J=8.71,1H),9.08(d,J=6.2,1H),9.21(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ167.6,166.9,161.6,148.3,144.8,142.1,136.2,133.2,133.1,131.0,130.8,112.9,110.6,110.3,104.7,104.4,102.3,89.6,89.5,80.2,73.2,72.8,72.7,71.5,69.9,67.6,66.9.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.36.
19F NMR(376MHz,D2O):δ-111.5.
HRMS:calcd for C21H26FN2O10P(M+H+)517.1406,found(M+H+)517.1387.
该化合物分子量516.14,在265nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为6700L·mol-1·cm-1,淡红色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养5h后,添加类似物的大肠杆菌JM109的OD600值比对照组高0.5,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养12h后,添加类似物的酿酒酵母BY4741的OD600比对照组高2.8,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于积分产率为26%,S构型的e.e.值为98%。
实施例9
1H NMR(400MHz,D2O):δ3.50(m,2H),3.78(m,2H),3.90(m,4H),3.98(s,1H),4.07(d,1H),4.21(s,1H),4.26(s,1H),5.71(s,1H),6.40(s,1H),6.82(m,2H),6.96(s,1H),7.24(s,2H),7.34(s,1H),7.51(s,2H),7.89(d,J=6.36,1H),8.52(m,1H),8.89(d,J=6.2Hz,1H),8.94(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ172.5,168.3,167.7,166.3,161.5,147.4,144.7,142.2,136.2,135.5,134.9,132.1,130.9,124.5,117.7,114.0,102.3,89.6,80.1,73.1,70.5,68.7,66.8,33.4,31.9,30.4,24.4.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.21.
HRMS:calcd for C28H32N3O11P(M+H+)618.1857,found(M+H+)618.1897.
该化合物分子量617.18,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为16000L·mol-1·cm-1,淡黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养5h后,添加类似物的大肠杆菌DH5α、HB101和BL21的OD600值分别比对照组高0.4、0.5和0.4,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养12h后,添加类似物的酿酒酵母S288c的OD600比对照组高4.8,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于加入2-丁酮0.005mmol,积分产率为23%,S构型的e.e.值为93%。
实施例10
1H NMR(400MHz,D2O):δ3.62(m,5H),3.92(m,4H),4.04(m,3H),4.27(s,1H),5.46(d,J=5.08,1H),6.31(t,J=4.08,1H),6.97(d,J=3.96,2H),7.16(m,2H),7.34(d,J=7.92Hz,1H),7.56(t,J=7.08Hz,1H),7.68(d,J=8.12,1H),8.12(d,J=7.96,1H),8.65(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ168.6,165.8,161.1,151.1,145.6,141.6,133.0,131.0,130.4,128.2,122.4,116.6,114.6,102.3,89.6,89.3,79.1,71.0,70.7,69.4,68.5,67.7,67.6,66.8.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.34.
HRMS:calcd for C25H29N2O10P(M+H+)549.1631,found(M+H+)549.1594.
该化合物分子量548.16,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为7800L·mol-1·cm-1,微黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养3h后,添加类似物的大肠杆菌HB101的OD600值比对照组高0.5,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养12h后,添加类似物的酿酒酵母BY4741的OD600比对照组高4.3,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于积分产率为20%,S构型的e.e.值为94%。
实施例11
1H NMR(400MHz,D2O):δ1.42(q,2H),1.56(t,2H),1.66(t,2H),3.80(q,2H),3.93(t,2H),4.00(ddd,J=2.28,2.36,12.12,1H),4.16(ddd,J=2.00,2.08,12.04 1H),4.29(t,1H),4.36(t,1H),4.46(d,J=1.88,1H),6.03(d,J=5.12,1H),6.81(t,J=7.72,1H),6.92(d,J=8.28,1H),7.13(t,J=7.72,1H),7.22(d,J=9.96,1H),8.11(t,J=7.72,1H),8.73(d,J=8.08,1H),9.11(d,J=6.20,1H),9.27(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ173.5,167.7,156.0,148.3,144.8,142.3,136.2,132.6,131.0,130.8,124.5,116.9,102.4,89.5,80.2,73.1,71.8,68.8,66.8,31.9,30.3.24.3.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.67.
HRMS:calcd for C22H28ClN2O9P(M+H+)531.1113,found(M+H+)531.1119.
该化合物分子量530.11,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为6600L·mol-1·cm-1,无色或微黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养6h后,添加类似物的大肠杆菌JM109的OD600值比对照组高0.6,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养15h后,添加类似物的酿酒酵母S288c的OD600比对照组高5.2,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于积分产率为20%,S构型的e.e.值为90%。
实施例12
1H NMR(400MHz,D2O):δ1.37(q,2H),1.54(t,2H),1.63(t,2H),3.66(s,3H),3.76(q,2H),3.84(t,2H),4.01(dd,J=4.52,12.2,1H),4.16(dd,J=2.12,9.96,1H),4.27(t,1H),4.34(t,1H),4.45(s,1H),5.99(d,J=5.16,1H),6.81(m,4H),8.08(t,J=7.32,1H),8.72(d,J=8.00,1H),9.06(d,J=6.16,1H),9.22(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ167.8,162.7,150.7,149.7,148.3,144.7,142.2,136.2,130.9,130.6,129.3,124.0,123.9,115.7,114.5,89.6,80.1,73.1,71.2,68.7,66.8,57.9,3 1.9,30.3,24.2.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.61.
HRMS:calcd for C23H31N2O10P(M+H+)527.1734,found(M+H+)527.1714.
该化合物分子量526.17,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为8000L·mol-1·cm-1,淡黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养5h后,添加类似物的大肠杆菌DH5α和JM109的OD600值分别比对照组高0.6和0.5,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养12h后,添加类似物的酿酒酵母S288c的OD600比对照组高3.5,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于积分产率为27%,S构型的e.e.值为94%。
实施例13
同实施例1方法;与实施例1不同之处在于,所用的醇为反应时间为38h,吡啶盐、醇和缩合试剂的摩尔比例为1∶2∶10,体积比DMF∶Py=1∶5,产率:21%。
1H NMR(400MHz,D2O):δ1.37(q,2H),1.57(t,2H),1.64(q,2H),3.78(q,2H),3.87(t,2H),4.05(dd,J=4.52,11.56,1H),4.20(dd,J=4.32,12,1H),4.3 1(m,1H),4.38(t,1H),4.48(s,1H),6.05(d,J=5.32,1H),6.60(m,3H),7.15(m,1H),8.14(t,J=7.2,1H),8.78(d,J=8.00,1H),9.12(d,J=6.12,1H),9.28(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ167.5,162.4,148.4,144.8,142.2,136.3,133.2,133.1,131.0,113.1,110.3,110.1,104.7,104.5,102.4,89.7,89.6,80.2,73.2,71.0,68.8,66.8.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.64.
19F NMR(376MHz,D2O):δ-111.5.
HRMS:calcd for C22H28FN2O9P(M+H+)515.1516,found(M+H+)515.1578.
该化合物分子量514.15,在214nm和266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为10000 L·mol-1·cm-1和27000,微红色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养4h后,添加类似物的大肠杆菌HB101和DH5α的OD600值分别比对照组高0.8和0.6,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养10h后,添加类似物的酿酒酵母BY4741的OD600比对照组高3.8,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于积分产率为25%,S构型的e.e.值为89%。
实施例14
在25ml尖底烧瓶中,将0.035mmol和0.035mmol溶解于0.8ml混合溶剂(H2O:350μl,EtOH:200μl,t-BuOH:250μl,DMF:100μl)中,加入0.7mol/l硫酸铜溶液3μl,Cu粉0.0035mmol,20℃搅拌24h,减压除去溶剂,加入4ml水,二氯甲烷洗涤,水相反相硅胶柱层析,阴离子交换树脂(201×4,HCO2 -型),冷冻干燥得白色固体。
将上述产物溶解于0.06ml甲醇中,降温到-5℃,加入7M的NH3的甲醇溶液10μl,混合物在-5℃下搅拌过夜,TLC检测直至反应进行完全,除去溶剂,反向硅胶柱层析,浓缩后,再经过阴离子交换树脂(201×4,HCO2 -型),冷冻干燥得白色固体,产率:95%。
1H NMR(400MHz,D2O):δ2.84(t,J=5.92Hz,2H),3.52(ddd,J=1.84,4.64,11.88,1H),3.70(ddd,J=2.24,4.40,12,1H),3.91(dd,J=5.92,JHP=11.84,2H),4.10(dd,J=2.48,4.76,1H),4.15(t,J=2.16,1H),4.25(t,J=5.16,1H),5.35(s,2H),5.93(d,J=5.48,1H),7.2(m,5H),7.76(s,1H),7.98(dd,J=6.48,7.76,1H),8.73(d,J=8.12,1H),8.94(d,J=7.88,1H),9.16(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ168.0,148.4,147.5,144.7,142.2,142.2,137.5,136.4,131.6,131.2,130.9,130.7,126.6,102.2,89.5,80.1,73.3,67.2,66.7,56.3,28.8.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.01.
HRMS:calcd for C22H27N5O8P(M+H+)520.1597,found(M+H+)520.1617.
该化合物分子量519.15,在265nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为7200L·mol-1·cm-1,淡黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,培养5h后,添加类似物的大肠杆菌HB101和LB21的OD600值分别比对照组高0.6和0.4,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,培养12h后,添加类似物的酿酒酵母S288c的OD600比对照组高3.8,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,加入2-苯丁酮0.005mmol,积分产率为22%,S构型的e.e.值为80%。
实施例15
同实施例14方法;与实施例14不同之处在于,所用的叠氮化物为反应温度为30℃,反应时间为38h,用摩尔比为1∶1的Cu/CuSO4催化剂,叠氮化物和催化剂的摩尔比例为1∶10∶0.5,混和溶剂为二甲基亚砜∶二氯甲烷∶水=2∶3∶5,产率:92%。
1H NMR(400MHz,D2O):δ1.35(m,2H),1.68(m,2H),2.15(t,2H),2.77(t,2H),3.70(ddd,J=2.08,5.08,11.96,1H),3.78-3.86(m,3H),4.13-4.18(m,3H),4.26(t,1H),5.87(d,J=5.24,1H),6.92(m,1H),7.10(d,5H),7.64(s,1H),7.94(t,J=6.6,1H),8.67(d,J=8.12,1H),8.89(d,J=6.24,1H),9.08(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ177.1,173.4,168.1,167.8,162.9,148.2,147.1,144.6,142.0,139.2,136.2,131.5,130.8,127.8,126.4,124.0,102.1,89.3,80.0,73.1,67.2,66.6,52.3,37.9,31.2,28.7,24.5.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.01.
HRMS:calcd for C26H33N6O9P(M+H+)605.2122,found(M+H+)605.2180.
该化合物分子量604.21,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为6000L·mol-1·cm-1,无色或微黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养5h后,添加类似物的大肠杆菌DH5α、BL21的OD600值分别比对照组高0.8和0.7,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养12h后,添加类似物的酿酒酵母BY4741的OD600比对照组高2.8,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,积分产率为32%,S构型的e.e.值为96%。
实施例16
1H NMR(400MHz,D2O):δ1.48(m,2H),1.80(m,2H),2.31(t,2H),2.86(t,2H),3.80(dd,J=3.72,10.6Hz,1H),3.91-3.96(m,3H),4.13-4.18(m,3H),4.20(s,1H),4.26-4.32(m,3H),4.38(s,1H),6.02(d,J=5.24Hz,1H),6.84-6.91(m,2H),7.28(dd,J=2.72,8.76Hz,1H),7.31(s,1H),8.09(t,J=6.72,1H),8.81(d,J=8.12,1H),9.05(d,J=6.28,1H),9.24(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ178.1,168.0,148.4,144.8,142.1,136.4,130.9,130.0,126.5,114.0,113.7,107.0,106.8,106.5,102.3,89.5,80.1,73.3,67.2,66.8,52.3,37.4,31.2,28.7,24.6.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.08.
19F NMR(376MHz,D2O):δ-111.8,-118.9.
HRMS:calcd for C26H31F2N6O9P(M+H+)641.1930,found(M+H+)641.1981.
该化合物分子量640.19,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为9100L·mol-1·cm-1,无色或微黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养4h后,添加类似物的大肠杆菌HB101的OD600值比对照组高0.4,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养12h后,添加类似物的酿酒酵母S288c和BY4741的OD600分别比对照组高5.8和6.0,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于加入2-苯丁酮0.005mmol,积分产率为29%,S构型的e.e.值为94%。
实施例17
1H NMR(400MHz,D2O):δ1.57(m,2H),1.77(m,2H),2.18(t,2H),2.92(t,2H),3.65,3.73(ddd,J=2.08,5.08,11.96,1H),3.91,4.03-4.26(m,3H),4.36(m,3H),5.87(d,J=5.24,1H),7.10,7.19,7.29,7.31,7.51,7.64,7.64(s,1H),7.77,7.94(t,J=6.6,1H),8.67(d,J=8.12,1H),8.89(d,J=6.24,1H),9.08(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ173.0,168.1,167.8,162.9,148.2,147.1,144.6,142.0,139.2,136.2,133.9,133.5,132.6,131.5,130.8,128.6,127.8,126.5,126.4,124.3,102.1,89.9,81.0,76.1,68.2,66.6,52.3,42.4,37.9,36.2,27.4,24.5,23.2.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.21.
HRMS:calcd for C31H37N6O9P(M+H+)669.2413,found(M+H+)669.2373.
该化合物分子量668.63,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为6200L·mol-1·cm-1,无色或微黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养5h后,添加类似物的大肠杆菌DH5α、BL21的OD600值分别比对照组高0.8和0.7,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养12h后,添加类似物的酿酒酵母BY4741的OD600比对照组高2.8,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于积分产率为31%,S构型的e.e.值为86%。
实施例18
同实施例14方法;与实施例14不同之处在于,所用的叠氮化物为反应温度为26℃,反应时间为20h,用摩尔比为8∶1的抗坏血酸钠/CuSO4催化剂,叠氮化物和催化剂的摩尔比例为1∶9∶20,混和溶剂为二甲基亚砜∶二氯甲烷∶水=3∶2∶4产率:92%。
1H NMR(400MHz,D2O):δ1.57(m,2H),1.77(m,2H),2.18(t,2H),2.92(t,2H),3.73(ddd,J=2.1,5.1,11.3,1H),3.38-3.96(m,3H),4.23-4.1(m,3H),4.28(t,1H),5.67(d,J=5.24,1H),6.16,6.92(m,1H),7.06,7.07,7.14(d,5H),7.26,7.64(s,1H),7.64(t,J=6.6,1H),8.27(d,J=8.12,1H),8.8(d,J=6.24,1H),9.1(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ173.0,168.1,167.8,162.9,148.2,147.1,144.6,142.8,142.0,139.2,136.2,131.5,130.8,129.3,128.3,127.8,126.4,124.0,102.1,89.3,80.0,73.1,67.2,66.6,52.3,51.8,37.9,36.5,31.2,30.5,28.7,24.5,23.2.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.12.
HRMS:calcd for C33H39N6O9P(M+H+)695.2531,found(M+H+)695.2473.
该化合物分子量694.67,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为8800L·mol-1·cm-1,无色或微黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养6h后,添加类似物的大肠杆菌DH5α、BL21的OD600值分别比对照组高0.8和0.7,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养12h后,添加类似物的酿酒酵母BY4741的OD600比对照组高2.6,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于积分产率为27%,S构型的e.e.值为97%。
实施例19
同实施例14方法;与实施例14不同之处在于,所用的叠氮化物为反应温度为14℃,反应时间为23h,用摩尔比为6∶1的Cu/CuSO4催化剂,叠氮化物和催化剂的摩尔比例为1:8∶5,混和溶剂为二甲基亚砜∶N,N-二甲基甲酰胺∶水=3∶2∶4产率:90%。
1H NMR(400MHz,D2O):δ1.57(m,2H),1.77(m,2H),2.29,2.65(t,2H),2.77(t,2H),2.92,3.65(ddd,J=2.0,5.0,11.6,1H),3.28-3.46(m,3H),4.03-4.08(m,3H),4.36(t,1H),4.46(t,2H),5.37(d,J=5.24,1H),6.72(m,1H),7.12(d,2H),7.36(s,1H),7.48(s,1H),7.64(s,1H),7.94(t,J=6.6,1H),8.67(d,J=8.12,1H),8.89(d,J=6.24,1H),9.08(s,1H).
13C NMR(100MHz,D2O):δ177.1,173.0,168.2,166.8,162.9,148.2,147.1,144.6,142.0,139.2,136.2,131.5,130.8,129.3,127.9,127.7,127.5,126.4,124.0,102.1,89.3,80.0,73.1,67.2,66.6,52.3,37.9,36.2,31.2,28.7,27.4,24.5,23.2.
31P NMR(160MHz,D2O):δ0.04.
HRMS:calcd for C33H39N6O9P(M+H+)695.2522,found(M+H+)695.2580.
该化合物分子量694.67,在266nm处有紫外吸收,其摩尔消光系数为9000L·mol-1·cm-1,无色或微黄色糖浆状固体,极易吸收空气中的水分而变粘稠,且颜色变深,温度高于40℃半小时即分解,颜色逐渐变暗至黑色。
促进大肠杆菌生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养5h后,添加类似物的大肠杆菌DH5α、BL21的OD600值分别比对照组高0.8和0.7,表明类似物对大肠杆菌生长具有明显促进作用。
促进酿酒酵母生长实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于培养12h后,添加类似物的酿酒酵母BY4741的OD600比对照组高2.8,表明类似物对酿酒酵母生长具有促进作用。
作为马肝脱氢酶催化合成手性醇的辅因子实验
方法同实施例1,与实施例1不同之处在于积分产率为22%,S构型的e.e.值为86%。
表一
其他含C或D结构的实施例见表二,其中R”=-N3或同实施例14方法;与实施例14不同之处在于如下表:
表二
Claims (6)
1.一种NAD+类似物,其特征在于:其具有如下结构式:
结构式中烟酰胺单核苷酸为β-构型;核糖为D-构型;
与烟酰胺单核苷酸相连的R为C4-C15的烷基,或含有氧、氮、氯、溴或硫杂原子的C2-C10烷基,以下称之为A;
或R为以下称之为B,其中Ar1为芳香烃X=CH2、O或S,n=0-3;R1为卤素、C1-C5烷氧基、C1-C5烷巯基、C1-C5烷基氨基或C1-C5卤代烃基;
5.一种权利要求1所述NAD+类似物的合成方法,其特征在于:
1)按常规方法合成2’,3’-二乙酰基烟酰胺单核苷酸吡啶盐;
2)在有机溶剂中,加入步骤1)合成的吡啶盐、醇和缩合试剂,在-10~35℃搅拌反应16-72小时,再经脱乙酰化,得到含有R为A或B取代基的目标NAD+类似物;
其中2’,3’-二乙酰基烟酰胺单核苷酸吡啶盐、醇和缩合试剂的摩尔比例为1∶1~5∶1~20;有机溶剂为DMF和吡啶的混合溶剂,混合体积比例为1∶15;所用缩合试剂为N,N’-二环己基碳酰二亚胺(DCC)、N,N’-二异丙基碳酰二亚胺(DIC)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDC)、新戊酰氯(PV-Cl)、1-金刚烷甲酰氯(AC-Cl)、氯磷酸二苯酯(DPCP)、双(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷酰氯(BOP-Cl)、2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(TIPS-Cl)或1-对硝基苯磺酸基-1,2,4-三唑(TIPS-N);所用醇为A-OH或B-OH;A和B为权利要求1所述A和B;
6.一种权利要求1所述NAD+类似物的应用,其特征在于:权利要求1所述NAD+类似物作为微生物促进剂,用于促进微生物的生长;或者作为脱氢酶辅因子用于催化氧化还原反应。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN200810010285A CN101497638B (zh) | 2008-01-30 | 2008-01-30 | 一种nad+类似物及其合成和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN200810010285A CN101497638B (zh) | 2008-01-30 | 2008-01-30 | 一种nad+类似物及其合成和应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101497638A CN101497638A (zh) | 2009-08-05 |
CN101497638B true CN101497638B (zh) | 2012-09-26 |
Family
ID=40944925
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN200810010285A Expired - Fee Related CN101497638B (zh) | 2008-01-30 | 2008-01-30 | 一种nad+类似物及其合成和应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101497638B (zh) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010039548A2 (en) * | 2008-09-23 | 2010-04-08 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Chemical modifications of monomers and oligonucleotides with cycloaddition |
CN104946706B (zh) * | 2014-03-26 | 2019-07-05 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种nad类似物的还原方法 |
US9855289B2 (en) * | 2015-08-05 | 2018-01-02 | Metro International Biotech, Llc | Nicotinamide mononucleotide derivatives and their uses |
GB2542881B (en) | 2015-10-02 | 2020-01-01 | Carr Andrew | Crystal forms of ß-nicotinamide mononucleotide |
CN109836377B (zh) * | 2017-11-29 | 2022-04-29 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸类似物及其合成方法与应用 |
AU2019214858B2 (en) | 2018-01-30 | 2023-02-02 | Metro International Biotech, Llc | Nicotinamide riboside analogs, pharmaceutical compositions, and uses thereof |
CN111217744A (zh) * | 2018-11-26 | 2020-06-02 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种d-氨基酸基nad+类似物及其合成和应用 |
US11939348B2 (en) | 2019-03-22 | 2024-03-26 | Metro International Biotech, Llc | Compositions comprising a phosphorus derivative of nicotinamide riboside and methods for modulation of nicotinamide adenine dinucleotide |
US10618927B1 (en) | 2019-03-22 | 2020-04-14 | Metro International Biotech, Llc | Compositions and methods for modulation of nicotinamide adenine dinucleotide |
CA3219033A1 (en) | 2021-05-27 | 2022-12-01 | Metro International Biotech, Llc | Crystalline solids of nicotinic acid mononucleotide and esters thereof and methods of making and use |
CN113817009B (zh) * | 2021-11-23 | 2022-06-03 | 中立安(北京)医药科技有限公司 | 烟酰胺单核苷类衍生物及其制备方法和应用 |
CN114652850B (zh) * | 2022-03-31 | 2023-12-29 | 深圳深创生物药业有限公司 | 一种具有抗衰老作用的多肽偶联nmn化合物及其应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007012494A1 (de) * | 2005-07-28 | 2007-02-01 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Stabile nad/nadh-derivate |
-
2008
- 2008-01-30 CN CN200810010285A patent/CN101497638B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007012494A1 (de) * | 2005-07-28 | 2007-02-01 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Stabile nad/nadh-derivate |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Christoph W. Woenckhaus.Synthesen biochemische Eigenschaften was stoffübertragender Coenzymmodelle.《Chemische Berichte》.1964,第97卷(第9期),2439-2446. * |
H. Christine Lo,et al..Biomimetic NAD+ Models for Tandem Cofactor Regeneration, Horse Liver Alcohol Dehydrogenase Recognition of 1,4-NADH Derivatives, and Chiral Synthesis.《Angew. Chem. Int. Ed.》.2002,第41卷(第3期),478-481. * |
M.Jarman,et al..Potential Coenzyme Inhibitors-V1 The Synthesis and some Properties of 4-methylnicotinamide Adenine Dinucleotide.《Biochemical Pharmacology》.1972,第21卷455-464. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101497638A (zh) | 2009-08-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101497638B (zh) | 一种nad+类似物及其合成和应用 | |
Srinivas et al. | Ruthenium catalyzed synthesis of 2, 3-unsaturated C-glycosides from glycals | |
JP6978492B2 (ja) | 二重保護されたプロセレンテラジン基質 | |
CN113307804B (zh) | 含氟吲哚喹啉类化合物的合成方法及其应用 | |
CN104086488B (zh) | 一种2,4,6-三取代嘧啶类化合物的合成方法 | |
Kumamoto et al. | Synthesis of (±)-4′-ethynyl and 4′-cyano carbocyclic analogues of stavudine (d4T) | |
CN102477057B (zh) | 硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、其中间体及它们的制备方法 | |
Morin et al. | Replication of biosynthetic reactions enables efficient synthesis of A-factor, a γ-butyrolactone autoinducer from Streptomyces griseus | |
CN106496130A (zh) | 一种甲基酮衍生物及其制备方法与应用 | |
Kumamoto et al. | Synthesis of (±)-4′-ethynyl-5′, 5′-difluoro-2′, 3′-dehydro-3′-deoxy-carbocyclic thymidine: a difluoromethylidene analogue of promising anti-HIV agent Ed4T | |
Liu et al. | Synthesis of phosphodiester-type nicotinamide adenine dinucleotide analogs | |
Reddy et al. | Stereoselective synthesis of tetrahydrofuranyl 1, 2, 3-triazolyl C-nucleoside analogues by ‘click’chemistry and investigation of their biological activity | |
Liu et al. | Synthesis and anti-HIV activity of 4′-modified cyclopentenyl pyrimidine C-nucleosides | |
TANAKA et al. | Synthesis of Chiral 5-Deazaflavin Derivatives and Their Use in Asymmetric Reduction of Ethyl Benzoylformaten | |
Huang et al. | An improved synthesis of isonucleoside of tubercidin | |
PL223441B1 (pl) | 4'-O-β-D-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-α,β-dihydrochalkon oraz sposób jego wytwarzania | |
CN106146233B (zh) | 一种(z)-2-烷基-3-烯丙基硫基-3-芳基烯丙醇类化合物的制备方法 | |
Kim et al. | Synthesis and Potent Anti-Leukemic Activity of Novel 5′-Deoxycarbocyclic C-Nucleoside Phosphonic Acids | |
Chang | Synthesis of Modified Ribose Spin-label | |
JPH01252295A (ja) | 2,3−ジシアノ−5,6−ジシアノピラジンの製造方法 | |
PL222788B1 (pl) | 4'-O-β-D-4'''-metoksy-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-α,β-dihydrochalkon i sposób jego otrzymywania | |
CN115611900A (zh) | 咪唑吡嗪酮类荧光素及其制备方法 | |
CN111675681A (zh) | 一种靶向于丙酮酸脱氢酶激酶和人乳酸脱氢酶a的双靶点抑制剂 | |
Shang et al. | Study on disulfur-backboned nucleic acids: Part IV. Efficient synthesis of 3′, 5′-dithio-2′-deoxyguanosine | |
Kumamoto et al. | 3'-Carbon-substituted pyrimidine nucleosides having a 2', 3'-dideoxy and 2', 3'-didehydro-2', 3'-dideoxy structure: synthesis and antiviral evaluation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20120926 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |