CN101480394B - 抗肿瘤药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种组合物，它含有(a)如式I所示的阿朴菲类生物碱，

Description

抗肿瘤药物组合物

技术领域

本发明涉及药物学领域，更具体地涉及含有阿朴菲类生物碱与细胞有丝分裂抑制剂的药物组合物。

背景技术

随着工业的发展，恶性肿瘤严重威胁着人类的健康，传统的化疗和放疗缺乏特异性，取得疗效的同时也往往给患者带来较大的毒副作用。细胞有丝分裂抑制剂能影响细胞微管的聚合作用，进而阻止癌细胞的分裂，同時细胞在这个阶段也容易走向死亡，起到抑制癌细胞的有丝分裂的作用。但同时，细胞有丝分裂抑制剂也存在严重的副作用，例如过敏反应、神经毒性、骨髓抑制、造血抑制、胃消化道粘膜炎等。这些毒副作用的产生主要与给药剂量关系密切。

现代药理学研究发现，阿朴菲类生物碱具有肾上腺素受体作用活性、离子通道作用活性、血清素作用活性、细胞毒性、抗氧化活性、抗血小板聚集活性、神经系统作用活性、免疫调节活性、抗病毒活性等多种药理活性。阿朴菲类生物碱是自然界中广泛分布并具有重要生物活性的一类生物碱，广泛存在于木兰科、防己科、大戟科、樟科、马钱科、番荔枝科、马兜铃科、小檗科、罂粟科、毛莨科、芸香科等植物中。细胞毒性是阿朴菲类生物碱的一个较显著的生物活性，它提示可以将阿朴菲类生物碱用于针对肿瘤细胞系。

本领域需要提供一种药物组合物，它具有能够彼此增强的抗肿瘤活性成分、同时又能降低细胞有丝分裂抑制剂的毒副作用。

发明内容

本发明旨在提供一种药物组合物。

本发明的另一个目的是提供所述药物组合物的制备方法。

本发明的再一个目的是提供所述药物组合物的用途。

在本发明的第一方面，提供了一种药物组合物，它含有以下组分：

(a)如式I所示的阿朴菲类生物碱，

式中，

R1代表氢、羟基、甲基、醛基或乙酰基；

R2代表氢(有R或S两种不同的立体构型)；

R3代表氢、羟基或甲基；

R11代表氢、羟基或甲基；

R12代表氢或醛基；

R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10分别选自氢、羟基或甲氧基；或R8和R9组成烷氧环；

(b)细胞有丝分裂抑制剂；和

(c)药学上可接受的载体；

其中，阿朴菲类生物碱和细胞有丝分裂抑制剂的重量之和占组合物总重量的0.1-99.9％，并且所含的阿朴菲类生物碱与细胞有丝分裂抑制剂的重量比为1∶100-100∶1，较佳为1∶20-20∶1，更佳为1∶5-5∶1。

在另一优选例中，所述的如式I的化合物选自下组：

或

在另一优选例中，所述的阿朴菲类生物碱从罂粟科紫堇属植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang.)中提取。

在另一优选例中，所述的细胞有丝分裂抑制剂选自下组：长春碱(Vinblastine)，长春新碱(Vincristine)，长春地辛(Vindesine)，长春瑞滨(Vinorelbine)，秋水仙胺(Demecolcine)，秋水仙碱(Colchicine)，秋水仙酰胺(Colchicine Amide)，鬼臼毒素(Podophyllotoxin)，依托泊苷(Etoposide)，替尼泊苷(Teniposide)，紫杉醇(Pacl itaxel)，或多西他赛(Docetaxel)。

在另一优选例中，所述的药物组合物的剂型选自下组：注射剂、注射用无菌粉末、片剂、胶囊、醑剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、酊剂、气雾剂、粉雾剂、或栓剂。

在本发明的第二方面，提供了一种如上述的药物组合物的制备方法，它包括步骤：将(a)如式I所示的阿朴菲类生物碱，

式中，

R1代表氢、羟基、甲基、醛基或乙酰基；

R2代表氢(有R或S两种不同的立体构型)；

R3代表氢、羟基或甲基；

R11代表氢、羟基或甲基；

R12代表氢或醛基；

R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10分别选自氢、羟基、或甲氧基；或R8和R9组成烷氧环；(b)细胞有丝分裂抑制剂；和(c)药学上可接受的载体混合得到如权利要求1所述的药物组合物；

其中，阿朴菲类生物碱和细胞有丝分裂抑制剂的重量之和占组合物总重量的0.1-99.9％，并且所含的阿朴菲类生物碱与细胞有丝分裂抑制剂的重量比为1∶100-100∶1，较佳为1∶20-20∶1，更佳为1∶5-5∶1。

在本发明的第三方面，提供了一种如上述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。

在另一优选例中，所述的如式I的化合物选自下组：

或

在另一优选例中，所述的药物组合物可用于制备增加细胞有丝分裂抑制剂抗肿瘤效果的药物。

在另一优选例中，所述的肿瘤选自下组：肾癌、肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、乳腺癌、骨癌、皮肤癌、淋巴癌、或白血病。

在另一优选例中，所述的药物组合物可用于制备降低细胞细胞有丝分裂抑制剂副作用的药物。

据此，本发明提供了一种药物组合物，它具有能够彼此增强的抗肿瘤活性成分、同时又能降低细胞有丝分裂抑制剂的毒副作用。

附图说明

图1显示了HGC细胞周期示意图；

其中A显示阴性对照组，B显示单独用药a组，C显示单独用药b组，D显示单独用药c组，E显示单独用药d组，F显示联合用药a组，G显示联合用药b组。

具体实施方式

本发明人经过广泛而深入的研究，发现延胡索中提取的阿朴菲类生物碱与细胞有丝分裂抑制剂(如紫杉醇)一起施用时，对于肾癌、肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、乳腺癌等肿瘤的治疗可发挥协同作用，增加疗效，减少细胞有丝分裂抑制剂用量，从而显著降低其毒副作用。

阿朴菲类生物碱

本发明所述的阿朴菲类生物碱是指一类结构如式I所示的化合物，

式中，

R1代表氢、羟基、甲基、醛基或乙酰基；

R2代表氢(有R或S两种不同的立体构型)；

R3代表氢、羟基或甲基；

R11代表氢、羟基或甲基；

R12代表氢或醛基；

R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10分别选自氢、羟基、或甲氧基；或R8和R9组成烷氧环.

较佳地，所述的阿朴菲类生物碱选自下组：

或

本发明所述的阿朴菲类生物碱包括化学合成的如式I所示结构的化合物，也包括含有阿朴菲类生物碱的植物提取物或含有阿朴菲类生物碱的原药材。所述植物提取物来自木兰科、防己科、大戟科、樟科、马钱科、番荔枝科、马兜铃科、小檗科、罂粟科、毛莨科、芸香科等植物，优选罂粟科紫堇属植物延胡索(Corydalis yanhusuo W.T.Wang.)。

本发明提供了一种阿朴菲类生物碱的用途，就是将其用于增加细胞有丝分裂抑制剂的效果，减少其用量从而减少其毒副作用。鉴于这样的用途，本发明提供了一种含有阿朴菲类生物碱和细胞有丝分裂抑制剂的组合物。

组合物

本发明提供的组合物含有以下组分：

(a)本发明提供的如式I所示的阿朴菲类生物碱；

(b)细胞有丝分裂抑制剂；和

(c)药学上可接受的载体；

其中，阿朴菲类生物碱和细胞有丝分裂抑制剂的重量之和占组合物总重量的0.1-99.9％，并且所含的阿朴菲类生物碱与细胞有丝分裂抑制剂的重量比为1∶100-100∶1，较佳地为1∶20-20∶1，更佳地为1∶5-5∶1。

在本发明中，优选的细胞有丝分裂抑制剂选自下组：长春碱，长春新碱，长春地辛，长春瑞滨，秋水仙胺，秋水仙碱，秋水仙酰胺，鬼臼毒素，依托泊苷，替尼泊苷，紫杉醇，或多西他赛。

本发明的组合物可以是普通型(即活性成分的浓度适合于直接使用)，也可以是浓缩型(即活性成分的浓度需经稀释后才可使用)。在本发明的组合物中所含的有效成分，即阿朴菲类生物碱和细胞有丝分裂抑制剂的重量之和占组合物总重量的0.1-99.9％，较佳地为1∶100-100∶1，更佳地为1∶20-20∶1，最佳地为1∶5-5∶1。可根据所选的有效成分的种类以及所要治疗的疾病及症状的程度等适当增减。

如本文所用，术语“药学上可接受的载体”指用于治疗剂给药的载体，包括各种赋形剂和稀释剂。该术语指这样一些药剂载体：它们本身并不是必要的活性成分，且施用后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的。在Remington’s Pharmaceutical Sciences(Mack Pub.Co.，N.J.1991)中可找到关于药学上可接受的赋形剂的充分讨论。在组合物中药学上可接受的载体可包括液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些载体中还可能存在辅助性的物质，如崩解剂、润湿剂、乳化剂、pH缓冲物质等。阿朴菲类生物碱和细胞有丝分裂抑制剂之外的成分，以及其他非必要成分(例如其他辅助性药材)，也包括在药学上可接受的载体的定义中。

本发明提供的组合物可以通过将(a)本发明提供的如式I所示的阿朴菲类生物碱；(b)细胞有丝分裂抑制剂；和(c)药学上可接受的载体混合得到本发明提供的组合物；其中，阿朴菲类生物碱和细胞有丝分裂抑制剂的重量之和占组合物总重量的0.1-99.9％，并且所含的阿朴菲类生物碱与细胞有丝分裂抑制剂的重量比为1∶100-100∶1，较佳地为1∶20-20∶1，更佳地为1∶5-5∶1。

组合物用途

本发明提供的组合物可用于治疗肿瘤，代表性的例子包括(但并不限于)：肾癌、肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、乳腺癌、骨癌、皮肤癌、淋巴癌、和白血病。

所用的活性成分的有效剂量可随给药模式和待治疗疾病的严重程度而变化。对大部分大型哺乳动物而言，每天施以有效成分的总剂量(即阿朴菲类生物碱和细胞有丝分裂抑制剂的总重量)约为0.01-1000mg。通常，成人临床给药量的范围为0.01-200mg/日，优选为0.05-100mg/日。

在使用本发明组合物治疗肿瘤时，还可与其他治疗剂联用。例如与选自下组的一种或多种辅助活性成分联用：喜树碱、高三尖杉酯碱、丙卡巴肼、门冬酰胺酶、顺铂、卡铂、米托蒽醌、他莫昔芬、环磷酰胺、盐酸氮芥、洛莫司汀、司莫司汀、塞替派、白消安、氮甲、苯丁酸氮芥、氟尿嘧啶、喃氟啶、优氟啶、卡莫氟、巯嘌呤、甲氨蝶呤、阿糖胞苷、环胞苷、巯鸟嘌呤、六甲蜜胺、羟基脲、丝裂霉素、阿霉素、表柔比星、博莱霉素、培莱霉素、阿伐司汀、赫赛汀、格列卫、吉西他滨、托泊替康、和/或亮丙瑞林。

本发明还包括治疗肿瘤的方法，它包括给哺乳动物施用药物有效量的本发明组合物。

通常，当本发明组合物用于上述用途时，它们可与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合制成不同给药途径的药物剂型，如片剂、胶囊、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、口服液、醑剂、酊剂、气雾剂、粉雾剂、注射剂、注射用无菌粉末、栓剂等。

本发明的化合物可经过口服、静脉内、肌内或皮下途径给药。

上述剂型中可经口服给药的剂型为：片剂、胶囊、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、醑剂。固态载体包括：淀粉、乳糖、磷酸氢钙、微晶纤维素、蔗糖、白陶土、微粉硅胶、滑石粉、低取代羟丙基纤维素、羧甲基淀粉钠、聚乙烯吡咯烷酮。而液态载体包括：无菌水、乙醇、聚乙二醇、非离子型表面活性剂和食用油(如玉米油、花生油和芝麻油)。在制备药物组合物的过程中通常使用的佐剂包括：调味剂、着色剂、防腐剂(如羟苯烷基丁酯、苯甲酸钠、山梨酸)和抗氧化剂(如维生素E、维生素C、焦亚硫酸钠和二丁基羟基甲苯)。

上述剂型中可用于注射途径给药的剂型包括：注射剂、注射用无菌粉末，它们是将药物与一种或多种药学上可接受的赋形剂混合制成以供注射给药的形式。溶剂包括：无菌水、乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇。此外，还需加入抑菌剂(如苯甲醇、羟苯丁酯、硫柳汞)、等渗调节剂(如氯化钠、葡萄糖)、助悬剂(如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素)、增溶剂(吐温-80、卵磷酯)、抗氧化剂(如维生素E、维生素C、焦亚硫酸钠)和填充剂(如乳糖、甘露醇)。

从易于制备和给药的立场看，优选的药物组合物是固态组合物，尤其是片剂和固体填充或液体填充的胶囊。优选口服给药。

在本发明中，除了将阿朴菲类生物碱或含有该类化合物的植物提取物或含有该类化合物的药材和细胞有丝分裂抑制剂配制在一起形成组合物之外，还可以将两者分别配制成药物组合物，再将两种组合物制剂置于同一药盒中，形成含有阿朴菲类生物碱组合物和细胞有丝分裂抑制剂组合物两种组合物的药盒。尤其是对于那些不便于制备于同一剂型中的阿朴菲类生物碱或含有该类化合物的植物提取物或含有该类化合物的药材和细胞有丝分裂抑制剂。使用时，可以将这种药盒中的两种组合物分别(同时或先后)施用，或者混合在一起施用。

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

本发明的主要优点在于：

1、强协同效应。本发明提供的可以治疗肿瘤的药物组合物，与单独的阿朴菲类生物碱或细胞有丝分裂抑制剂相比，对于肾癌、肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、乳腺癌、骨癌、皮肤癌、淋巴癌、白血病等肿瘤的治疗具有较强的协同作用。

2、显著降低细胞有丝分裂抑制剂的用量，从而减少毒副作用。

以下结合具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分比和份数均按重量计。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例1

延胡索中提取阿朴菲类生物碱

(1)浸泡及过滤

延胡索根茎5.6Kg，粉碎机完全粉碎后用体积30L乙醇(浓度95％)热回流3小时，然后过滤除去药材粉末残渣。

(2)乙醇回收

蒸馏回收30L乙醇，温度不超过60℃，回流2小时，将反应釜中的浸膏移出至收集桶中(浸膏呈棕红色，略粘稠状)。

(3)第二次热回流

用回收过的30L乙醇第二次热回流，过滤及蒸馏要求同前。

(4)第三次热回流

用回收过的30L乙醇第三次热回流，过滤及蒸馏要求同前。得到总浸膏355g。

(5)总生物碱的提取

将总浸膏355g溶于1.5L水中，超声波振荡3小时，然后用稀盐酸调pH为2-3，搅拌3h，静置24h。将酸液过滤，用碳酸钠饱和溶液(pH为10)调pH为9-10。搅拌3h，静置24h。碱液用氯仿萃取，浓缩，得总生物碱38g。碘化铋钾显色呈阳性。

(6)产品的分离精制

将总生物碱用100g 100-200目粗硅胶拌样，用石油醚、氯仿、丙酮以及甲醇依次淋洗，得各自提取物。

再将氯仿提取物17g用100-200目粗硅胶拌样，200-300目硅胶柱层析，氯仿-丙酮梯度洗脱，每200mL收集一次，分别得到不同极性部位，合并(TCL氯仿∶丙酮＝4∶1，Rf＝0.6)的斑点。将合并的组份浓缩后，再拌样于100-200目粗硅胶，用300-400目硅胶进行柱层析，用氯仿-甲醇体系梯度洗脱，每200mL收集一次，分别得到不同的极性部位，合并(TCL氯仿∶甲醇＝15∶1，Rf＝0.6)的斑点。将合并的组份浓缩后，用凝胶Sephadex LH-20甲醇淋洗，50mL收集一次，合并(TCL氯仿∶甲醇＝15∶1，Rf＝0.6)的斑点。得到纯度＞90％的产品。

(7)标准品的精制

将纯度＞90％的样品30mg溶于70％甲醇中，用Lichroprep RP-18(40-63μ)柱进行反相洗脱，用TCL检测，收集70％洗脱下来的样品，合并得到纯度＞98％的标准品。收率约80％。标准品的性状、分子式、熔点和UV，IR，EIMS，¹H-NMR，¹³C-NMR的归属如下：白色针晶(95％乙醇)，分子式：C₂₁H₂₅NO₄ mp 221-223℃

UVλ_max(ETOH，nm)：280(4.13)，301(4.10)；

IR(KBr)cm^-12500，1600，1580，1500；

EIMS m/z：355(M⁺，98)，354(M⁺-1，100)，340(M⁺-CH₃，55)，324(M⁺-OCH₃，30)，312(M⁺-43，14)，297(M⁺-58，14)，281(M⁺-74，21)；

¹H-NMR(CDCl₃)δ：8.10(1H，s，11-H)，6.80(1H，s，8-H)，6.60(1H，s，3-H)，3.93(3H，s，OMe)，3.91(3H，s，OMe)，3.88(3H，s，OMe)，3.64(3H，s，OMe)，3.05(4H，m，4-He，5-He，6a-He，7-He)，2.61(3H，m，4-Ha，5-Ha，7-Ha)，2.55(3H，s，N-Me)；

¹³C-NMR(CDCl₃)δ：151.9(C-2)，148.0(C-3)，147.5(C-10)，144.3(C-1)，129.39(C-7a)，128.8(C-6b)，127.1(C-3a)，126.9(C-11b)，124.5(C-11a)，111.7(C-11)，110.9(C-8)，110.4(C-3a)，62.5(C-6a)，60.3(OCH3)，60.1(OCH3)，55.9(OCH3)，55.8(OCH3)，53.2(C-5)，43.9(NCH₃)，34.5(C-7)，29.2(C-4)；

综合上述数据，表明获得的化合物是具有上述结构的海罂粟碱。

实施例2

阿朴菲类生物碱对人胃癌HGC细胞周期的影响

实验药品：

海罂粟碱(如式II所示化合物)实施例1制备得到，紫杉醇购自四川九峰天然药业股份有限公司，长春新碱购自上海安体康生植物化学有限公司。

体外培养HGC细胞，生长状态良好时，消化并接种1×10⁵个细胞于6cm培养皿中，过夜贴壁。等细胞状态良好后，吸去培养基，随机分为7组：

单独用药a组，加入以培养基稀释的海罂粟碱，终浓度为2μM；

单独用药b组，加入以培养基稀释的海罂粟碱，终浓度为50nM；

单独用药c组，加入以培养基稀释的长春新碱，终浓度为10nM；

单独用药d组，加入以培养基稀释的紫杉醇，终浓度为50nM；

联合用药a组，分别加入终浓度为50nM的海罂粟碱，和终浓度为10nM的长春新碱；

联合用药b组，分别加入终浓度为50nM的海罂粟碱，和终浓度为50nM的紫杉醇；

阴性对照孔加入培养基，37℃培养24小时。

镜下观察细胞形态变化。用胰酶消化细胞(0.25％胰酶/0.02％EDTA)，轻轻吹下，移入离心管，2000rpm离心5min，PBS洗涤2次，1000rpm离心5min。向细胞沉淀中缓缓加入75％乙醇(-20℃预冷)800μl，边滴边振荡(Vortex)，尽量使之形成单细胞。4℃固定过夜后，1000rpm离心5min，PBS洗涤两次，离心。重悬于300μl PBS，加预先煮沸过的RNase(终浓度为50μg/ml)，37℃孵育30min。300目尼龙网过滤，加入碘化丙啶(PI)(终浓度为25μg/ml)，4℃避光1小时，流式细胞仪检测细胞周期。

实验结果：

结果显示(如图1)，单独用药b、c、d组作用后，细胞周期未发现明显改变。在联合用药后，G1、S期细胞明显减少，G2期细胞明显增加，使人胃癌HGC细胞停滞于G2-M期，使其受阻断，阻止肿瘤细胞进行正常的有丝分裂。表明海罂粟碱与细胞有丝分裂抑制剂呈现显著的协同增效作用。

实施例3

阿朴菲类生物碱与有丝分裂抑制剂合用对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用

实验动物：

雄性SPF级KM小鼠，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，体重为18-22g，SPF级动物房饲养，12小时光照/12小时黑暗，自由摄取饲料和水。

实验药品：

海罂粟碱，实施例1制备得到，紫杉醇购自四川九峰天然药业股份有限公司，阿朴吗啡(如结构式V所示)购自青海制药厂有限公司，紫堇碱(如结构式IV所示)购自湖南诺伊尔生物制药有限公司，山豆碱(如结构式III所示)购自美国NADUCS，Inc.。

实验方法：

除正常组外，取接种7天的S180腹水小鼠，无菌条件下抽取腹水，用生理盐水调整细胞浓度至5×10⁶/ml。将S180细胞悬液以0.2ml/只的量接种在小鼠右前肢腋部皮下。接种24小时后，将小鼠分别随机分为11组(每组10只)：

联合用药a组，用蒸馏水溶解制备实施例1制得到的海罂粟碱，分别给与25mg/kg的海罂粟碱和2mg/kg的紫杉醇；

联合用药b组，分别给与25mg/kg的阿朴吗啡(式V)和2mg/kg的紫杉醇；

联合用药c组，分别给与25mg/kg的山豆碱(式III)和2mg/kg的紫杉醇；

联合用药d组，分别给与25mg/kg的紫堇碱(式IV)和2mg/kg的紫杉醇；

单独用药a组，给与25mg/kg的实施例1制备得到的海罂粟碱；

单独用药b组，给与25mg/kg的阿朴吗啡(式V)；

单独用药c组，给与25mg/kg的山豆碱(式III)；

单独用药d组，给与25mg/kg的紫堇碱(式IV)；

单独用药e组，给与10mg/kg的紫杉醇；

单独用药f组，给与2mg/kg的紫杉醇。

对照组给予蒸馏水，给药体积为0.1ml/10g。

以上均为腹腔注射给药，每天1次，连续10天。末次给药24小时后，摘眼球取血，检测血中白细胞总数(WBC)，并处死小鼠，剥取瘤块称重，计算每组平均值，进行t检验。计算抑瘤率：

抑瘤率＝(对照组瘤重-给药组瘤重)/对照组瘤重×100％。

表1阿朴菲类生物碱与有丝分裂抑制剂合用对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用

*表示p＜0.05，与对照组相比，具有显著性差异；

**表示p＜0.01，与对照组相比，具有极显著性差异。

表2阿朴菲类生物碱与有丝分裂抑制剂合用对白细胞的影响

组别	数量(只)	WBC(1×109/L)
			正常组	10	8.12±1.21

对照组	10	7.82±1.48
			联合用药a组	10	7.59±0.97
联合用药b组	10	8.36±1.25
			联合用药c组	10	7.63±1.38
联合用药d组	10	8.01±1.56
			单独用药a组	10	7.32±1.89
单独用药b组	10	7.55±0.86
			单独用药c组	10	8.02±1.39
单独用药d组	10	7.88±1.66
			单独用药e组	10	1.91±0.26**
单独用药f组	10	7.46±1.23

*表示p＜0.01，与对照组相比，具有极显著性差异。

结果见表1，联合用药a、b、c、d组、单独用药a、b、c、d、e组分别连续给药10天后，给药组小鼠肿瘤的重量明显低于对照组。

联合用药a、b、c、d组小鼠的体重、状态以及毛发情况均较佳，并且对白细胞数没有影响(如表2所示)，而单独给与紫杉醇(10mg/kg)治疗时，小鼠的白细胞数降至1.91±0.26，与正常组相比具有极显著性差异(p＜0.01)，表明阿朴菲类生物碱可显著降低紫杉醇的用量，从而降低其毒副作用。本实验结果显示，阿朴菲类生物碱可与紫杉醇一起使用从而发挥协同减毒、增效作用。

实施例4

片剂的制备

利用常规技术，混合以下组分，然后直接压片，制备片剂形式的药物组合物，其配方如下：

成分	处方量(g/1000片)
		阿朴菲类生物碱(实施例1制备得到)	50
紫杉醇	1
		乳糖	79
微晶纤维素	60

玉米淀粉	6
		羧甲基淀粉钠	3
硬脂酸镁	1
		总量	200

实施例5

注射剂的制备

成分	处方(g/1000ml)
		阿朴菲类生物碱(实施例1制备得到)	10
长春新碱	0.5
		尼泊金	0.2
羧甲基纤维素钠	5
		吐温-80	1.5
注射用水	加至1000ml

①将尼泊金加于500ml注射用水中，加入羧甲基纤维素钠，混匀，浸泡过夜(24小时)，全溶后，用210目尼龙布过滤；

②将溶液①水浴加热，加入吐温-80，混匀；

③至水浴沸腾，加入实施例1制备得到的阿朴菲类生物碱，混匀，继续加热30分钟，取出冷却至室温；

④另将长春新碱冻干粉加注射用水适量进行溶解；

⑤将③和④溶液混合，G₆垂熔玻璃漏斗过滤，加无菌注射用水至1000ml，混匀，灌封，即得。

实施例8

药盒的制备

药盒的组分：

第一剂：海罂粟碱片剂

按照以下处方制备海罂粟碱片剂100片

成分	处方量(g/100片)
		海罂粟碱(式II)	5
乳糖	8
		微晶纤维素	6
玉米淀粉	0.6
		羧甲基淀粉钠	0.3
硬脂酸镁	0.1
		总量	20

第二剂：紫杉醇片剂

按照以下处方制备紫杉醇片剂100片

成分	处方量(g/100片)
		紫杉醇	0.1
乳糖	8
		微晶纤维素	6
玉米淀粉	适量
		羧甲基淀粉钠	0.3
硬脂酸镁	0.1
		总量	20

将海罂粟碱片剂100片以及紫杉醇片剂100片放置在同一药盒中，使用时可按照1∶1(片数比)的配比服用，两剂可同时服用，也可以先后服用。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种药物组合物，其特征在于，它含有以下组分：

(a)阿朴菲类生物碱，

(b)细胞有丝分裂抑制剂；和

(c)药学上可接受的载体；

其中，阿朴菲类生物碱和细胞有丝分裂抑制剂的重量之和占组合物总重量的0.1-99.9％，并且所含的阿朴菲类生物碱与细胞有丝分裂抑制剂的重量比为1∶5-12.5∶1；

所述阿朴菲类生物碱选自下组：

所述的细胞有丝分裂抑制剂选自长春新碱，或紫杉醇。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所含的阿朴菲类生物碱与细胞有丝分裂抑制剂的重量比为1∶5-5∶1。

3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的阿朴菲类生物碱从罂粟科紫堇属植物延胡索中提取。

4.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物的剂型选自下组：注射剂、注射用无菌粉末、片剂、胶囊、醑剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、酊剂、气雾剂、粉雾剂、或栓剂。

5.一种如权利要求1所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，它包括步骤：将(a)阿朴菲类生物碱；所述阿朴菲类生物碱选自下组：

(b)细胞有丝分裂抑制剂；所述的细胞有丝分裂抑制剂选自长春新碱，或紫杉醇；和

(c)药学上可接受的载体混合得到如权利要求1所述的药物组合物；

其中，阿朴菲类生物碱和细胞有丝分裂抑制剂的重量之和占组合物总重量的0.1-99.9％，并且所含的阿朴菲类生物碱与细胞有丝分裂抑制剂的重量比为1∶5-12.5∶1。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所含的阿朴菲类生物碱与细胞有丝分裂抑制剂的重量比为1∶5-5∶1。

7.一种如权利要求1所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。

8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物用于制备增加细胞有丝分裂抑制剂抗肿瘤效果的药物。

9.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的肿瘤选自下组：肾癌、肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、乳腺癌、骨癌、皮肤癌、淋巴癌、或自血病。

10.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物用于制备降低细胞有丝分裂抑制剂副作用的药物。

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