CN101442909A - 作为p2x7调节剂的双环杂芳基化合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

公开了双环杂芳基化合物，它们具有如右式(I)所示的式，可以将所述的化合物制备成药物组合物并且可以用于预防和治疗各种哺乳动物、包括人的病症，作为非限制性实例所述病症包括疼痛、炎症、创伤性损伤等。

Description

作为P2X7调节剂的双环杂芳基化合物及其应用
发明领域
本发明涉及能够调节P2X7受体活性的新颖的双环杂芳基类化合物和包含这类化合物的药物组合物。本发明还涉及使用本发明的化合物和药物组合物预防和/或治疗原因上涉及哺乳动物异常P2X7活性的病症、诸如与炎症相关的病症的方法，所述的病症包括(但不限于)类风湿性关节炎，骨关节炎，帕金森病，眼色素层炎，哮喘，心血管病症，包括心肌梗死，治疗和预防疼痛综合征(急性和慢性或神经性)，外伤性脑损伤，急性脊髓损伤，神经变性障碍，炎性肠病和自身免疫性障碍。
发明背景
可以将ATP的细胞表面受体分成促代谢型(P2Y/P2U)和离子型(P2X)类别。促代谢型属于G蛋白偶联受体超家族，其具有七个跨膜片段。离子型成员(P2X1-P2X6)配体门控型离子通道，目前认为是每个亚单位具有两个跨膜结构域的多亚单位蛋白质(Buell等Europ.J.Neurosci.8：2221(1996))。P2Z受体以三种主要方式区别于其它P2受体(Buisman等Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：7988(1988)；Cockcroft等，Nature 279：541(1979)；Steinberg等J.Biol.Chem.262：3118(1987))。首先，P2Z受体的活化不仅产生内向离子电流，而且导致细胞透化。第二，3′-O-(4-苯甲酰基)苯甲酰基ATP(BZATP)为最有效的激动剂，而ATP自身具有的效能相当低。第三，反应受到胞外镁离子强烈抑制，将其解释为表明ATP4-是活性激动剂(DiVirgilio，Immunol.Today 16：524(1995))。
已经从大鼠cDNA文库中分离了P2X受体家族中的第7个成员，并且当在人胚胎肾(HEK293)细胞中表达时，表现出上述三种特性(Surprenant等Science 272：735(1996))。该受体(rP2X7)由此相当于P2Z受体。rP2X7在结构上与P2X家族中的其它成员相关，但它具有更长的胞质C-末端结构域(在相应的同源性区域内具有35-40％氨基酸同一性，而与其它受体中的27-20个氨基酸相比，在rP2X7受体中的C-末端为239个氨基酸长度)。rP2X7受体作为可透过小阳离子的通道和作为溶细胞孔起作用。就其它P2X受体而言，短暂应用ATP(1-2s)暂时地开放了通道。反复或延长应用激动剂导致细胞透化，而降低胞外镁浓度强化了这种作用。rP2X7独特的C-末端结构域为细胞透化和ATP裂解作用所需的(Suprenant等Science 272：735(1996))。
P2Z/rP2X7受体涉及在人T淋巴细胞促有丝分裂刺激中以及多核巨细胞形成中借助细胞毒性T淋巴细胞的抗原呈递细胞的裂解(Blanchard等Blood 85：3173(1995)；Falzoni等J.Clin.Invest.95：1207(1995)；Baricolrdi等Blood 87：682(1996))。在啮齿动物与人之间存在一定的功能性差异(Hickman等Blood 84：2452(1994))。目前已经克隆了人巨噬细胞P2X7受体(P2X7)并且测定了其功能特性(Rassendren等J.Biol.Chem.272：5482(1997)。当与大鼠P2X7受体比较时，人P2X7受体中引起的阳离子选择性电流需要较高浓度的激动剂，更可通过除去胞外镁离子而得到强化并且在除去激动剂时更快地校正。嵌合分子的表达表明在大鼠与人P2X7受体之间的某些差异可以通过交换受体蛋白各自的C-末端结构域而得到校正。
据报导某些化合物作为P2X7拮抗剂起作用。例如，WO99/29660和WO99/29661中公开了某些金刚烷衍生物表现出在治疗类风湿性关节炎和银屑病中具有治疗功效的P2X7拮抗活性。类似地，WO99/29686公开了某些杂环衍生物为P2X7受体拮抗剂并且可用作免疫抑制剂和治疗类风湿性关节炎、哮喘、脓毒性休克和动脉粥样硬化。最终，WO00/71529中公开了某些表现出免疫抑制活性的取代的苯基化合物。将本文所述的所有参考文献完整地引入本文作为参考。
因此，对治疗剂和相应的药物组合物和相关的治疗方法存在需求，它们致力于原因上与异常P2X7活性相关的病症并且针对于执行和满足本发明所涉及的需求。
发明概述
公开了式I-XIIId的双环芳基衍生物及其药物组合物作为治疗哺乳动物与P2X7受体不正常或异常活性相关的病症的治疗剂，包括炎症介导的病症，诸如(但不限于)关节炎，心肌梗死；治疗和预防疼痛综合征(急性和慢性[神经性])，外伤性脑损伤，急性脊髓损伤，神经变性病症，炎性肠病和免疫功能障碍，诸如自身免疫性障碍。
目前已经发现本发明的双环杂芳基化合物能够调节P2X7受体活性。该发现产生了具有治疗价值的新化合物。还产生了具有本发明化合物作为活性组分的药物组合物及其在治疗、预防或改善各种哺乳动物病症中的应用，所述的病症诸如但不限于各种起源或病因的炎症，例如类风湿性关节炎，心脏血管疾病，炎性肠病，急性、慢性炎症和神经性疼痛，牙痛和头痛(诸如偏头痛，丛集性头痛和紧张性头痛)和其它原因上涉及炎症或免疫功能障碍的病症。
本发明的化合物还用于治疗炎性疼痛和相关的痛觉过敏和异常性疼痛。它们还用于治疗神经性疼痛和相关的痛觉过敏和异常性疼痛(例如三叉神经痛或带状疱疹神经痛，糖尿病性神经病，灼痛，交感维持性疼痛和传入神经阻滞综合征，诸如臂丛撕脱伤)。本发明的化合物还用作抗炎药用于治疗如下疾病：关节炎、帕金森病，眼色素层炎，哮喘，心肌梗死，外伤性脑损伤，脊髓损伤，神经变性病症，炎性肠病和自身免疫性障碍，肾病症，肥胖，进食障碍，癌症，精神分裂症，癫痫，睡眠障碍，认知，抑郁症，焦虑，血压，脂代谢紊乱和动脉粥样硬化。
本发明在一个方面中提供了能够调节体内P2X7受体活性的双环杂芳基化合物。在另一个方面中，本发明的化合物能够拮抗(阻抑或抑制)P2X7受体活性且由此治疗那些原因上涉及异常P2X7活性的有代表性的病症。
本发明的化合物可以表现出低毒性，良好的吸收性，良好的半衰期，良好的溶解度，低蛋白质结合亲和力，低药物-药物相互作用，对HERG通道低的抑制活性，低QT延长和良好的代谢稳定性。
因此，本发明在第一个方面中公开了双环杂芳基化合物，它们能够调节体内P2X7受体活性，具有式(I)：
Figure A200780017026D00191
其中
B和Y独立地选自CR2a和CR2aR2b；
W，W′和Z独立地选自CR4和N，条件是W，W′和Z中的所有三个不同时为N；
L1为取代或未被取代的C1-C5亚烷基；
n为0，1，2，3或4；
R1选自取代或未被取代的5-13元芳基和杂芳基；
R2a，R2b，R2′和R2”各自独立地选自氢，卤素，取代或未被取代的C1-C6烷基；或R2′和R2”任意彼此连接形成3-7个原子的环烷基或环杂烷基环；
R3为氢键供体基团；
各个R4独立地选自H，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；
且虚线键为单键或双键；
或其药学上可接受的盐，溶剂合物或前体药物；
及其立体异构体，同位素变体和互变体。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，n为0-4。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，L1为未被取代或被一个或多个选自烷基，氧代，芳基，羟基和羟基烷基的取代基取代的C1-C5亚烷基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，L1为被两个烷基取代的C1-C5亚烷基，并且同一碳原子上的任意两个烷基可以彼此连接形成3-7个原子的环烷基或环杂烷基环。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，L1为C1-C5亚烷基；且R3为氢键供体基团。在一个实施方案中，R3为-OH。在另一个实施方案中，R3为NH2。在另一个实施方案中，R3为-NH-R3′且R3′为烷基，酰基，环烷基或芳基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，L1为键，被氧代取代的C1-C5亚烷基；且R3为氢键供体基团。在一个实施方案中，R3为-OH。另一个实施方案中，R3为NH2。在另一个实施方案中，R3为-NH-R3′且R3′为烷基，酰基，环烷基或芳基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，L1为C1-C5亚烷基且R3为含-NH-的杂环烷基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，B和Y独立地选自CR2a和CR2aR2b。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，B和Y独立地选自CR2aR2b且虚线键为单键。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，B和Y均可以表示CH2且虚线键为单键。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，B和Y独立地选自CR2a且虚线键为双键。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，B和Y均可以表示CH且虚线键为双键。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，n为0，1或2。在一个具体的实施方案中，n为1。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，
Figure A200780017026D0021110107QIETU
的R2′和R2”各自为H或Me。在一个具体的实施方案中，R2′和R2”各自为H。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，
Figure A200780017026D0021110128QIETU
基团的R2′和R2”之一可以选自Me，Et，卤素和Cl且另一个为H。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，R1选自5-13元芳基和杂芳基环系，其未被取代或被一个或多个取代基取代，所述的取代基独立地选自的卤素，羟基，氨基，氰基，磺基，硫烷基，亚磺酰基，酰氨基，羧基，烷氧羰基，烷基，取代的烷基，链烯基，取代的链烯基，炔基，取代的炔基和磺酰胺。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，R1为取代或未被取代的芳基。在一个具体的实施方案中，R1为取代的苯基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，W和W′各自为N。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，W，Z和W′各自为CR4。在一个具体的实施方案中，W，Z和W′各自为CH。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，W和Z各自为CR4，W′为CR5且R5选自H，烷基，环烷基或卤素。在一个实施方案中，R5为环烷基，卤素或烷基。在一个具体的实施方案中，R5为H或卤素。在另一个具体的实施方案中，R5为H，环丙基，Cl，F或Me。
本发明在另一个方面中提供了包含本发明双环杂芳基化合物和药用载体，赋形剂或稀释剂的药物组合物。在本发明的该方面中，药物组合物可以包含一种或多种本文所述的化合物。此外，用于本文公开的药物组合物和治疗方法的本发明化合物均以药学上可接受的方式制备和使用。
在本发明的另一个方面中，本发明提供了治疗易感或患有本文所述的病症的哺乳动物的方法，所述的病症特别是诸如可能与例如炎症相关的这类病症，诸如类风湿性关节炎，骨关节炎，眼色素层炎，哮喘，心肌梗死，外伤性脑损伤；脓毒性休克，动脉粥样硬化，慢性阻塞性肺疾病(COPD)，急性脊髓损伤，炎性肠病和免疫功能障碍，包括自身免疫性障碍；该方法包括给予有效量的一种或多种所述的药物组合物。
在治疗方面的另一种方法中，本发明提供了治疗易感或患有病症的哺乳动物的方法，所述的病症原因上涉及异常P2X7受体活性，并且例如产生疼痛反应或涉及感觉神经基础活性维持方面的失调。本发明的胺化合物可用作止痛药用于治疗各种起源或病因的疼痛，例如急性炎性疼痛(诸如与骨关节炎和类风湿性关节炎相关的疼痛)；各种神经性疼痛综合征(诸如带状疱疹后神经痛，三叉神经痛，交感反射性营养不良，糖尿病性神经病，格-巴综合征，纤维肌痛，幻肢痛，乳房切除术后(post-masectomy)疼痛，周围神经病，HIV神经病和化疗-诱发和其它医源性神经病)；内脏痛(诸如与胃食管反流病，肠易激综合征，炎性肠病，胰腺炎和各种妇科和泌尿障碍相关)，牙痛和头痛(诸如偏头痛，丛集性头痛和紧张性头痛)。
在治疗方面的额外方法中，本发明提供了治疗易感或患有病症的哺乳动物的方法，所述的病症原因上涉及P2X7受体异常活性，诸如神经变性疾病和病症，包括，例如帕金森病，多发性硬化；由神经炎症介导的疾病和病症或导致神经炎症的疾病或病症，诸如，例如外伤性脑损伤和脑炎；中枢介导的神经精神疾病和病症，诸如，例如躁狂性抑郁，双相性精神疾病，焦虑，精神分裂症，进食障碍，睡眠障碍和认知障碍；癫痫和癫痫发作症；前列腺，膀胱和肠功能障碍，诸如，例如尿失禁，排尿犹豫，直肠超敏反应，大便失禁，良性前列腺肥大和炎性肠病；呼吸和气道疾病和病症，诸如，例如过敏性鼻炎，哮喘和反应性气道病和慢性阻塞性肺疾病；由炎症，诸如，例如类风湿性关节炎和骨关节炎，心肌梗死介导或导致它们的疾病和病症，各种自身免疫性疾病和病症，眼色素层炎和动脉粥样硬化；痒/瘙痒，诸如，例如银屑病；肥胖；脂代谢紊乱；癌症；血压；脊髓损伤；和心血管和肾病症，该方法包括给予有效治疗病症或预防病症的用量的所述药物组合物中的一种或多种。
在其它的方面中，本发明提供了合成本发明化合物的方法，在下文中公开了有代表性的合成方案和途径。
因此，本发明的主要目的在于提供一系列新化合物，它们可以改变P2X7受体活性且由此防止或治疗任何原因可能与之相关的疾病。
本发明的另一个目的在于提供一系列可以治疗或缓解相同疾病或其症状，诸如疼痛和炎症的化合物，所述的疾病或症状有原因在可能与P2X7受体活化相关。
本发明的另一个目的在于提供药物组合物，它们有效地治疗或预防各种疾病状态，包括与中枢神经系统相关的疾病，心血管病症，慢性阻塞性肺疾病(COPD)，炎性肠病，类风湿性关节炎，骨关节炎和其它存在炎性成分的疾病。
其它目的和优点对本领域技术人员而言根据对随后的详细描述的考虑显而易见。
发明详述
定义
在描述化合物，包含这类化合物的药物组合物和使用这类化合物和组合物的方法时，除非另作陈述，否则下列术语具有如下含义。还应理解如下文定义的任何部分可以被各种取代基取代并且相应的定义指定包括在其范围内的这类取代部分。进一步应理解术语“基”和“基团”在本文中使用时可以被视为可互换使用。
“酰基”意指基团-C(O)R20，其中如本文定义，R20为氢，烷基，环烷基，环杂烷基，芳基，芳基烷基，杂烷基，杂芳基，杂芳基烷基。有代表性的实例包括，但不限于甲酰基，乙酰基，环己基羰基，环己基甲基羰基，苯甲酰基，苄基羰基等。
“酰氨基”意指基团-NR21C(O)R22，其中如本文所定义，R21为氢，烷基，环烷基，环杂烷基，芳基，芳基烷基，杂烷基，杂芳基，杂芳基烷基且R22为氢，烷基，烷氧基，环烷基，环杂烷基，芳基，芳基烷基，杂烷基，杂芳基或杂芳基烷基。有代表性的实例包括，但不限于甲酰基氨基，乙酰氨基，环己基羰基氨基，环己基甲基-羰基氨基，苯甲酰基氨基，苄基羰基氨基等。
“酰氧基”意指基团-OC(O)R23，其中R23为氢，烷基，芳基或环烷基。
“取代的链烯基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是1-3个取代基的链烯基，所述的取代基选自酰基，酰氨基，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，烷氧羰基，烷氧羰基氨基，氨基，取代的氨基，氨基羰基，氨基羰基氨基，氨基羰基氧基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，氰基，环烷基，取代的环烷基，卤素，羟基，酮基，硝基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代酮基，巯基，烷基-S(O)-，芳基-S(O)-，烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“烷氧基”意指基团-OR24，其中R24为烷基。作为实例，具体的烷氧包括甲氧基，乙氧基，正-丙氧基，异丙氧基，正-丁氧基，叔-丁氧基，仲-丁氧基，正-戊氧基，正-己氧基，1，2-二甲基丁氧基等。
“取代的烷氧基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是1-3个取代基的烷氧基，所述的取代基选自酰基，酰氨基，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，烷氧羰基，烷氧羰基氨基，氨基，取代的氨基，氨基羰基，氨基羰基氨基，氨基羰基氧基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，氰基，环烷基，取代的环烷基，卤素，杂芳基，羟基，酮基，硝基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代酮基，巯基，烷基-S(O)-，芳基-S(O)-，烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“烷氧羰基氨基”意指基团-NR25C(O)OR26，其中R25为氢，烷基，芳基或环烷基且R26为烷基或环烷基。
“烷基”意指特别具有约达11个碳原子的一价饱和烷基，更具体地说是1-8个碳原子，且更具体地说是1-6个碳原子的低级烷基。烃链可以为直链或支链。该术语以如下基团为典型：诸如甲基，乙基，正-丙基，异丙基，正-丁基，异-丁基，叔-丁基，正-己基，正-辛基，叔-辛基等。术语“低级烷基”意指具有1-6个碳原子的烷基。术语“烷基”还包括如下文定义的“环烷基”。
“取代的烷基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是1-3个取代基的烷基，所述的取代基选自酰基，酰氨基，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，烷氧羰基，烷氧羰基氨基，氨基，取代的氨基，氨基羰基，氨基羰基氨基，氨基羰基氧基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，氰基，环烷基，取代的环烷基，卤素，羟基，杂芳基，酮基，硝基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代酮基，巯基，烷基-S(O)-，芳基-S(O)-，烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“亚烷基”意指具有1-11个碳原子且更具体地说是1-6个碳原子的二价饱和烯烃基团，其可以为直链或支链的。该术语以如下基团为典型：诸如亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基异构体(例如-CH2CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-)等。
“取代的亚烷基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是1-3个取代基的亚烷基，所述的取代基选自酰基，酰氨基，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，烷氧羰基，烷氧羰基氨基，氨基，取代的氨基，氨基羰基，氨基-羰基氨基，氨基羰基氧基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，氰基，卤素，羟基，酮基，硝基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代酮基，巯基，烷基-S(O)-，芳基-S(O)-，烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“链烯基”意指优选具有2-11个碳原子，具体地为2-8个碳原子且更具体地说为2-6个碳原子的一价烯族不饱和烃基，它们可以为直链或支链的并且具有至少1个且具体地为1-2个烯族不饱和位置。具体的链烯基包括乙烯基(-CH＝CH2)，正-丙烯基(-CH2CH＝CH2)，异丙烯基(-C(CH3)＝CH2)，乙烯基和取代的乙烯基等。
“亚链烯基”意指特别具有达约11个碳原子且更具体地说为2-6个碳原子的二价烯族不饱和烃基，它们可以为直链或支链的并且具有至少1个且具体地为1-2个烯族不饱和位置。该术语以如下基团为典型：诸如亚乙烯基(-CH＝CH-)，亚丙烯基异构体(例如-CH＝CHCH2-和-C(CH3)＝CH-和-CH＝C(CH3)-)等。
“炔基”意指特别具有2-11个碳原子且更具体地说为2-6个碳原子的炔属或炔族不饱和烃基，它们可以为直链或支链的并且具有至少1个且具体地为1-2个炔基不饱和位置。炔基的具体非限制性实例包括炔，乙炔基(-C≡CH)，炔丙基(-CH2C≡CH)等。
“取代的炔基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是1-3个取代基的炔基，所述的取代基选自酰基，酰氨基，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，烷氧羰基，烷氧羰基氨基，氨基，取代的氨基，氨基羰基，氨基羰基氨基，氨基羰基氧基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，氰基，环烷基，取代的环烷基，卤素，羟基，酮基，硝基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代酮基，巯基，烷基-S(O)-，芳基-S(O)-，烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
本文所用的“烷酰基”或“酰基”意指基团R27-C(O)-，其中R27如上述定义的为氢或烷基。
“芳基”意指通过从母体芳族环系的单一碳原子上除去一个氢原子衍生的一价芳族烃基。典型的芳基包括，但不限于衍生自如下的基团：醋蒽烯，苊，acephenanthrylene，蒽，甘菊环，苯，草屈，晕苯，荧蒽，芴，并六苯，己芬，hexalene，不对称引达省(as-indacene)，对称引达省(s-indacene)，茚满，茚，萘，并八苯，octaphene，octalene，卵苯，戊-2，4-二烯，戊省，并环戊二烯，二苯并菲，二萘嵌苯，phenalene，菲，苉，七曜烯，芘，皮蒽，玉红省，苯并菲，三萘等。特别地，芳基包含6-14个碳原子。
“取代的芳基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是1-3个取代基的芳基，所述的取代基选自酰基，酰氨基，酰氧基，链烯基，取代的链烯基，烷氧基，取代的烷氧基，烷氧羰基，烷基，取代的烷基，炔基，取代的炔基，氨基，取代的氨基，氨基羰基，氨基羰基氨基，氨基羰基氧基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，氰基，环烷基，取代的环烷基，卤素，羟基，硝基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，巯基，烷基-S(O)-，芳基-S(O)-，烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“稠合芳基”意指在其环碳上具有两个与第二个芳基环或脂族环共有的芳基。
“烷芳基”意指如上述定义地被一个或多个烷基取代的上述定义的芳基。
“芳烷基”或“芳基烷基”意指如上述定义地被一个或多个芳基取代的上述定义的烷基。
“芳氧基”意指-O-芳基，其中“芳基”如上述所定义。
“烷氨基”意指基团烷基-NR28R29，其中R28和R29各自独立地选自氢和烷基。
“芳基氨基”意指基团芳基-NR30R31，其中R30和R31各自独立地选自氢，芳基和杂芳基。
“烷氧基氨基”意指基团-N(H)OR32，其中R32表示如本文定义的烷基或环烷基。
“烷氧羰基”意指基团-C(O)-烷氧基，其中烷氧基如本文所定义。
“烷基芳基氨基”意指基团，-NR33R34其中R33表示烷基或环烷基并且R34为如本文定义的芳基。
“烷基磺酰基”意指基团-S(O)2R35，其中R35为如本文定义的烷基或环烷基。有代表性的实例包括，但不限于甲基磺酰基，乙基磺酰基，丙基磺酰基，丁基磺酰基等。
“烷基亚磺酰基”意指基团-S(O)R35，其中R35为如本文定义的烷基或环烷基。有代表性的实例包括，但不限于甲基亚磺酰基，乙基亚磺酰基，丙基亚磺酰基，丁基亚磺酰基等。
“烷硫基”意指基团-SR35，其中R35为如本文定义的可以任选如本文定义地被取代的烷基或环烷基。有代表性的实例包括，但不限于甲硫基，乙硫基，丙硫基，丁硫基等。
“氨基”意指基团-NH2。
“取代的氨基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指基团-N(R36)2，其中R36各自独立地选自氢，烷基，取代的烷基，链烯基，取代的链烯基，炔基，取代的炔基，芳基，环烷基，取代的环烷基，并且其中两个R基团连接成亚烷基。当两个R基团均为氢时，-N(R36)2为氨基。
“氨基羰基”意指基团-C(O)-NR37R37，其中R37各自独立为氢，烷基，芳基和环烷基或其中R37基团连接成亚烷基。
“氨基羰基氨基”意指基团-NR38C(O)NR38R38。其中R38各自独立为氢，烷基，芳基或环烷基或其中两个R基团连接成亚烷基。
“氨基羰基氧基”意指基团-OC(O)NR39R39，其中R39各自独立为氢，烷基，芳基或环烷基或其中R基团连接成亚烷基。
“芳基烷氧基”意指-O-芳基烷基，其中芳基烷基如本文所定义。
“芳基氨基”意指基团-NHR40，其中R40表示如本文定义的芳基。
“芳氧基羰基”意指基团-C(O)-O-芳基，其中芳基如本文所定义。
“芳基磺酰基”意指基团-S(O)2R41，其中R41为如本文所定义的芳基或杂芳基。
“叠氮基”意指基团-N3。
“双环芳基”意指通过从母体双环芳族环系的单一碳原子上除去一个氢原子衍生的一价双环芳族烃基。典型的双环芳基包括，但不限于衍生自茚满，茚，萘，四氢萘等的基团。特别地，芳基包含8-11个碳原子。
“双环杂芳基”意指通过从母体双环芳族环系的单一碳原子上除去一个氢原子衍生的一价双环杂芳族烃基。典型的双环杂芳基包括，但不限于衍生自如下的基团：苯并呋喃，苯并咪唑，苯并吲唑，苯并二噁烷，色烯，色满，噌啉，酞嗪，吲哚，二氢吲哚，吲嗪，异苯并呋喃，异色烯，异吲哚，异二氢吲哚，异喹啉，苯并噻唑，苯并噁唑，萘啶，苯并噁二唑，蝶啶，嘌呤，苯并吡喃，苯并吡嗪，吡啶并嘧啶，喹唑啉，喹啉，喹嗪，喹喔啉，苯并吗啡烷，四氢异喹啉，四氢喹啉等。优选双环杂芳基为9-11元双环杂芳基，其中特别优选5-10元杂芳基。具体的双环杂芳基为那些衍生自苯并噻吩，苯并呋喃，苯并噻唑，吲哚，喹啉，异喹啉，苯并咪唑，苯并噁唑和苯并二噁烷。
“氨基甲酰基”意指基团-C(O)N(R42)2，其中R42各自如本文定义的独立为氢，烷基，环烷基或芳基，其可以任选如本文定义地被取代。
“羧基”意指基团-C(O)OH。
“羧基氨基”意指基团-N(H)C(O)OH。
“环烷基”意指具有3-约10个碳原子并且具有单环或多个稠合环，包括稠合和桥连环系的环状烃基，它们任选可以被1-3个烷基取代。作为实例，这类环烷基可以包括：单环结构，诸如环丙基，环丁基，环戊基，环辛基，1-甲基环丙基，2-甲基环戊基，2-甲基环辛基等；和多环结构，诸如金刚烷基等。
“取代的环烷基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指基具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是1-3个取代基的环烷基，所述的取代基选自酰基，酰氨基，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，烷氧羰基，烷氧羰基氨基，氨基，取代的氨基，氨基羰基，氨基羰基氨基，氨基羰基氧基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，氰基，环烷基，取代的环烷基，卤素，羟基，酮基，硝基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代酮基，巯基，烷基-S(O)-，芳基-S(O)-，烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“环烷氧基”意指基团-OR43，其中R43为环烷基。作为实例，这类环烷氧基包括环戊氧基，环己氧基等。
“环烯基”意指具有3-10个碳原子并且具有单环或多个稠合环，包括稠合和桥连环系并且具有至少一个且特别是1-2个烯族不饱和位置的环状烃基。作为实例，这类环烯基可以包括单环结构，诸如环己烯基，环戊烯基，环丙烯基等。
“取代的环链烯基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指基具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是1-3个取代基的环烯基，所述的取代基选自酰基，酰氨基，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，烷氧羰基，烷氧羰基氨基，氨基，取代的氨基，氨基羰基，氨基羰基氨基，氨基羰基氧基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，氰基，环烷基，取代的环烷基，卤素，羟基，酮基，硝基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代酮基，巯基，烷基-S(O)-，芳基-S(O)-，烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“稠合环链烯基”意指其环碳中的两个与第二个脂族或芳族环共有并且其烯族不饱和位置影响环烯基环的芳族性的环烯基。
“氰酰基”意指基团-OCN。
“氰基”意指基团-CN。
“二烷氨基”意指基团-NR44R45，其中R44和R45独立为如本文定义的烷基，取代的烷基，芳基，取代的芳基，环烷基，取代的环烷基，环杂烷基，取代的环杂烷基，杂芳基或取代的杂芳基。
“乙烯基”意指取代或未被取代的-(C＝C)-。
“亚乙基”意指取代或未被取代的-(C-C)-。
“乙炔基”意指-(C≡C)-。
“卤素”或“卤素”意指氟，氯，溴和碘。优选的卤素基团为氟或氯。
“羟基”意指基团-OH。
“硝基”意指基团-NO2。
“取代的”意指基团，其中一个或多个氢原子各自独立地被相同或不同取代基取代。典型的取代基包括，但不限于-X，-R46，-O-，＝O，-OR46，-SR46，-S-，＝S，-NR46R47，＝NR46，-CX3，-CF3，-CN，-OCN，-SCN，-NO，-NO2，＝N2，-N3，-S(O)2O-，-S(O)2OH，-S(O)2R46，-OS(O2)O-，-OS(O)2R46，-P(O)(O-)2，-P(O)(OR46)(O-)，-OP(O)(OR46)(OR47)，-C(O)R46，-C(S)R46，-C(O)OR46，-C(O)NR46R47，-C(O)O-，-C(S)OR46，-NR48C(O)NR46R47，-NR48C(S)NR46R47，-NR49C(NR48)NR46R47和-C(NR48)NR46R47，其中各自X独立为卤素；R46，R47，R48和R49各自独立为氢，烷基，取代的烷基，芳基，取代的烷基，芳基烷基，取代的烷基，环烷基，取代的烷基，环杂烷基，取代的环杂烷基，杂烷基，取代的杂烷基，杂芳基，取代的杂芳基，杂芳基烷基，取代的杂芳基烷基，-NR50R51，-C(O)R50或-S(O)2R50或任选R50和R51与连接它们的原子共同构成环杂烷基或取代的环杂烷基环；且R50和R51独立为氢，烷基，取代的烷基，芳基，取代的烷基，芳基烷基，取代的烷基，环烷基，取代的烷基，环杂烷基，取代的环杂烷基，杂烷基，取代的杂烷基，杂芳基，取代的杂芳基，杂芳基烷基或取代的杂芳基烷基。
有代表性的取代的芳基的实例包括如下：
和
Figure A200780017026D00312
在这些式中，R52和R53之一可以为氢且R52和R53中的至少一个各自独立地选自烷基，链烯基，炔基，环杂烷基，烷酰基，烷氧基，芳氧基，杂芳氧基，烷氨基，芳基氨基，杂芳基氨基，NR54COR55，NR54SOR55，NR54SO2R57，COO烷基，COO芳基，CONR54R55，CONR54OR55，NR54R55，SO2NR54R55，S-烷基，S-烷基，SO烷基，SO2烷基，S芳基，SO芳基，SO2芳基；或R52和R53可以连接成5-8个原子的环状的环(饱和或不饱和的)，其任选包含一个或多个选自N，O或S的杂原子。R54，R55和R56独立为氢，烷基，链烯基，炔基，全氟烷基，环烷基，环杂烷基，芳基，取代的芳基，杂芳基，取代的或杂烷基等。
“杂”在用于描述化合物或存在于化合物上的基团时意指在该化合物上的一个或多个碳原子被氮，氧或硫原子取代。杂可以应用于上述烃基中的任意种，诸如烷基，例如杂烷基，环烷基，例如环杂烷基，芳基，例如杂芳基，环链烯基，环杂烯基等，它们具有1-5个且尤其是1-3个杂原子。
“杂芳基”意指通过从母体杂芳族环系的单一原子上除去一个氢原子衍生的一价杂芳族基团。典型的杂芳基包括，但不限于衍生自如下的基团：吖啶，砷杂茚，咔唑，β-咔啉，色满，色烯，噌啉，呋喃，咪唑，吲唑，吲哚，二氢吲哚，吲嗪，异苯并呋喃，异色烯，异吲哚，异二氢吲哚，异喹啉，异噻唑，异噁唑，萘啶，噁二唑，噁唑，
Figure A200780017026D0032172801QIETU
啶，菲啶，菲咯啉，吩嗪，酞嗪，蝶啶，嘌呤，吡喃，吡嗪，吡唑，哒嗪，吡啶，嘧啶，吡咯，pyrrolizine，喹唑啉，喹啉，喹嗪，喹喔啉，四唑，噻二唑，噻唑，噻吩，三唑，呫吨等。优选杂芳基为5-15元杂芳基，其中特别优选5-10元杂芳基。具体的杂芳基为那些衍生自噻吩，吡咯，苯并噻吩，苯并呋喃，吲哚，吡啶，喹啉，咪唑，噁唑和吡嗪的基团。
有代表性的杂芳基的实例包括如下：
Figure A200780017026D00321
其中各个Y选自羰基，N，NR58，O和S；且R58独立为氢，烷基，环烷基，环杂烷基，芳基，杂芳基，杂烷基等。
本文所用的术语“环杂烷基”意指稳定的杂环非芳族环和稠合环，其包含一个或多个独立地选自N，O和S的杂原子。稠合杂环系可以包括碳环并且仅要求包括一个杂环。杂环的实例包括，但不限于哌嗪基，高哌嗪基，哌啶基和吗啉基并且如下列例证性实例中所示：
Figure A200780017026D00322
其中各个X选自CR58 2，NR58，O和S；且Y各自选自NR58，O和S；且R58独立为氢，烷基，环烷基，环杂烷基，芳基，杂芳基，杂烷基等。这些环杂烷基环可以任选被一个或多个基团取代，所述的基团选自酰基，酰氨基，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，烷氧羰基，烷氧羰基氨基，氨基，取代的氨基，氨基羰基，氨基羰基氨基，氨基羰基氧基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，氰基，环烷基，取代的环烷基，卤素，羟基，酮基，硝基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代酮基，巯基，烷基-S(O)-，芳基-S(O)-，烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。取代的基团包括例如提供内酰胺和脲衍生物的羰基或硫代羰基。
有代表性的环杂烯基包括如下：
Figure A200780017026D00331
其中各个X选自CR58 2，NR58，O和S；且Y各自选自羰基，N，NR58，O和S；且R58独立为氢，烷基，环烷基，环杂烷基，芳基，杂芳基，杂烷基等。
具有杂原子的包含取代的有代表性的芳基的实例包括如下：
Figure A200780017026D00332
其中各个X选自C-R58 2NR58，O和S；且Y各自选自羰基，NR58，O和S；且R58独立为氢，烷基，环烷基，环杂烷基，芳基，杂芳基，杂烷基等。
“杂取代基”意指含卤素，O，S或N原子的官能基，它可以作为R4C基团中的取代基R4直接存在于本发明化合物的A，B，W，Y或Z上或可以作为取代基存在于本发明化合物中存在的“取代的”芳基和脂族基团中。
杂取代基的实例包括：
-卤素，
-NO2，-NH2，-NHR59，-N(R59)2，
-NRCOR，-NR59SOR59，-NR59SO2R59，OH，CN，
-CO2H，
-R59-OH，-O-R59，-COOR59，
-CON(R59)2，-CONROR59，
-SO3H，-R59-S，-SO2N(R59)2，
-S(O)R59，-S(O)2R59
其中各个R59独立为芳基或脂族基团，其任选被取代。在包含R59基团的杂取代基中，优选具有如本文定义的芳基和烷基R59基团的那些。优选杂取代基为如上所述的那些。
“氢键供体”基团意指含O-H或N-H官能基的基团。“氢键供体”基团的实例包括-OH，-NH2和-NH-R59a且其中R59a为烷基，酰基，环烷基，芳基或杂芳基。
“二羟基磷酰基”意指基团-PO(OH)2。
“取代的二羟基磷酰基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指二羟基磷酰基，其中羟基之一或两个被取代。合适的取代基如下文详细描述。
“氨基羟基磷酰基”意指基团-PO(OH)NH2。
“取代的氨基羟基磷酰基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指氨基羟基磷酰基，其中氨基被一个或两个取代基取代。合适的取代基如下文详细描述。在某些实施方案中，羟基也可以被取代。
“硫代烷氧基”意指基团-SR60，其中R60为烷基。
“取代的硫代烷氧基”包括本文＂取代的＂的定义中所述的那些基团，且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是1-3个取代基的硫代烷氧基，所述的取代基选自酰基，酰氨基，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，烷氧羰基，烷氧羰基氨基，氨基，取代的氨基，氨基羰基，氨基羰基氨基，氨基羰基氧基，芳基，芳氧基，叠氮基，羧基，氰基，环烷基，取代的环烷基，卤素，羟基，酮基，硝基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代酮基，巯基，烷基-S(O)-，芳基-S(O)-，烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“硫烷基”意指基团HS-。“取代的硫烷基”意指诸如RS-这类基团，其中R为本文所述的任意取代基。
“磺酰基”意指二价基团-S(O2)-。“取代的磺酰基”意指诸如R61-(O2)S-这类基团，其中R61为本文所述的任意取代基。“氨基磺酰基”或“磺酰胺”意指基团H2N(O2)S-且“取代的氨基磺酰基”，“取代的磺酰胺”意指诸如R62 2N(O2)S-这类基团，其中R62各自独立为本文所述的任意取代基。
“砜”意指基团-SO2R63。在具体的实施方案中，R63选自H，低级烷基，烷基，芳基和杂芳基。
“硫代芳氧基”意指基团-SR64，其中R64为芳基。
“硫代酮基”意指基团＝S。
“巯基”意指基团-SH。
有机合成领域普通技术人员公认，在稳定的化学上切实可行的杂环(无论其为芳族还是非芳族)中的最大杂原子数均由环的大小，不饱和度以及杂原子的化合价来决定。一般而言，杂环可以具有1-4个杂原子，只要该杂环是化学上切实可行和稳定的。
“药学上可接受的”意指得到联邦或国家政府管理机构批准或列入在美国药典或其它一般公认的用于动物且更具体地说是人的药典中。
“药学上可接受的盐”意指为药学上可接受的并且具有母体化合物的所需药理学活性的本发明化合物的盐。这类盐包括：(1)与无机酸或与有机酸形成的酸加成的盐，所述的无机酸诸如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸等；所述的有机酸诸如乙酸，丙酸，己酸，环戊丙酸，乙醇酸，丙酮酸，乳酸，丙二酸，琥珀酸，苹果酸，马来酸，富马酸，酒石酸，柠檬酸，苯甲酸，3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸，肉桂酸，扁桃酸，甲磺酸，乙磺酸，1，2-乙-二磺酸，2-羟基乙磺酸，苯磺酸，4-氯苯磺酸，2-萘磺酸，4-甲苯磺酸，樟脑磺酸，4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸，葡庚糖酸，3-苯基丙酸，三甲基乙酸，叔丁基乙酸，十二烷基硫酸，葡糖酸，谷氨酸，羟基萘甲酸，水杨酸，硬脂酸，粘康酸等；或(2)在存在于母体化合物上的酸性质子被金属离子，例如碱金属离子，碱土金属离子或铝离子取代时形成的盐；或与有机碱形成的配位化合物，所述的有机碱诸如乙醇胺，二乙醇胺，三乙醇胺，N-甲基葡糖胺等。仅作为实例，盐进一步包括钠，钾，钙，镁，铵，四烷基铵等；且当化合物包含碱性官能基时，为无毒性的有机或无机酸的盐，诸如盐酸盐，氢溴酸盐，酒石酸盐，甲磺酸盐，乙酸盐，马来酸盐，草酸盐等。术语“药学上可接受的阳离子”意指酸性官能基的无毒性可接受的阳离子的抗衡离子。这类阳离子以钠，钾，钙，镁，铵，四烷基铵阳离子等为典型。
“药学上可接受的媒介物”意指与本发明化合物一起给予的稀释剂，佐剂，赋形剂或载体。
“预防(Preventing)”或“预防(prevention)”意指降低获得疾病或病症的风险(即使得所述疾病的临床症状中的至少一种不在可能接触或易感该病的受试者中发生，并且也不经历或表现出该病的症状)。
“前体药物”意指化合物，包括本发明化合物的衍生物，它们具有可裂解基团并且通过溶剂分解或在生理条件下变成在体内具有药物活性的本发明化合物。这类实例包括但不限于胆碱酯衍生物等，N-烷基吗啉酯类等。
“溶剂合物”意指通常通过溶剂分解反应与溶剂结合的化合物。常规的溶剂包括水，乙醇，乙酸等。例如，本发明的化合物可以制备为晶型形式的并且可以使它们溶剂化或水化。合适的溶剂合物包括药学上可接受的溶剂合物，诸如水合物并且进一步包括化学计算量的溶剂合物和非化学计算量的溶剂合物。
“受试者”包括人。术语“人”，“患者”和“受试者”在本文中可以互换使用。
“治疗有效量”意指在对受试者给药治疗疾病时足以对疾病进行这类治疗的化合物用量。“治疗有效量”可以根据化合物、疾病及其严重性和所治疗受试者的年龄，体重等的不同而改变。
在一个实施方案中，“治疗(Treating)”或“治疗(treatment)”任何疾病或病症意指改善该病或病症(即阻止或减缓该病或其至少一种临床症状的发展)。在另一个实施方案中，“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”意指改善至少一种无法被受试者辨别的物理参数。在另一个实施方案中，“治疗(treating)”或“治疗(treatment的稳定化)”意指通过物理的(例如可辨别的症状的稳定化)，生理的(例如物理参数的稳定化)或它们两者调节疾病或病症。在另一个实施方案中，“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”意指延缓疾病或病症发作。
本发明的化合物的其它衍生物具有其酸和酸性衍生物形式的活性，但在酸敏感性形式中其通常提供溶解度、组织相容性或在哺乳动物生物体中延缓释放的优势(参见Bundgard，H.，Design ofProdrugs，pp.7-9，21-24，Elsevier，Amsterdam 1985)。前体药物包括本领域技术人员众所周知的酸性衍生物，诸如，例如通过使母体酸与合适的醇反应制备的酯类或通过使母体酸化合物与取代或未被取代的胺反应制备的酰胺类或酸酐或混合酸酐类。衍生自存在于本发明化合物侧基上的酸性基团的简单的脂族或芳族酯类，酰胺类和酸酐类为优选的前体药物。在某些情况中，理想的是制备双酯型前体药物，诸如(酰氧基)烷基酯类或((烷氧羰基)氧基)烷基酯类。优选本发明化合物的C1-C8烷基，C2-C8链烯基，芳基，C7-C12取代的芳基和C7-C12芳基烷基酯类。
本文所用的术语“同位素变体”意指在构成这类化合物的原子的一个或多个上包含非天然比例的同位素的化合物。例如，化合物的“同位素变体”可以包含一个或多个非放射性同位素，诸如，例如氘(2H或D)，碳-13(13C)，氮-15(15N)等。可以理解在制备这类同位素取代的化合物中，如果存在，那么下列原子可以改变，使得例如任意的氢可以为2H/D，任意的碳可以为13C或任意的氮可以为15N，并且在本领域技术人员技能范围内可以测定这类原子的存在和布局。同样，本发明可以包括使用放射性同位素制备同位素变体，在这种情况中，例如，其中所得化合物可以用于药物和/或底物组织分布研究。放射性同位素氚，即3H和碳-14，即14C因其易于掺入和简便的检测方式而特别用于该目的。此外，可以制备这类化合物，它们被正电子发射同位素，诸如11C，18F，15O和13N取代并且可以用于研究底物受体占有率的正电子发射体层摄影(PET)研究。
本文提供的化合物的所有同位素变体，无论是放射性的还是非放射性的，均包括在本发明范围内。
还应理解具有相同分子式，而性质或其原子键合顺序或其空间排列不同的化合物称作“异构体”。在其原子空间排列上不同的异构体称作“立体异构体”。
彼此为非镜像的立体异构体称作“非对映体”且彼此为不能重叠的镜像的那些称作“对映体”。当化合物具有不对称中心时，例如它键合4个不同的基团，一对对映体对是可能的。对映体的特征在于其不对称中心的绝对构型并且描述为Cahn和Prelog的R-和S-排序规则或分子沿偏振光面旋转的形式并且命名为右旋或左旋(即，分别为(+)或(-)-异构体)。手性化合物可以作为单个对映体或作为其混合物存在。包含等比例对映体的混合物称作“外消旋混合物”。
“互变异构体”意指具体化合物结构的可互换形式并且在氢原子和电子取代方面改变的化合物。因此，两种结构可以通过π电子和原子(通常为H)的运动保持平衡。例如，烯醇类和酮类为互变体，因为它们可通过用酸或碱处理而快速互变。互变异构现象的另一个实例为苯基硝基甲烷的酸式-和硝基-形式，它们同样通过用酸或碱处理形成。
互变异构体形式可以与获得所关注的化合物的最佳化学反应性和生物活性相关。
本发明的化合物可以具有一个或多个不对称中心；这类化合物由此可以作为各(R)-或(S)-立体异构体或作为其混合物产生。除非另作陈述，否则本说明书和权利要求中具体化合物的描述或命名意指包括其各对映体和混合物，外消旋物等。用于测定立体化学和分离立体异构体的方法为本领域众所周知的。
化合物
本发明提供了用于预防和/或治疗宽范围哺乳动物病症的双环杂芳基化合物，所述的病症与P2X7受体活性异常相关，其中有类风湿性关节炎，帕金森病，眼色素层炎，哮喘，心血管病症诸如心肌梗死；治疗和预防疼痛综合征(急性和慢性或神经性)，外伤性脑损伤，急性脊髓损伤，神经变性病症，炎性肠病和免疫功能障碍，诸如自身免疫性疾病或病症。
本发明在第一个方面中公开了能够调节体内P2X7受体活性的双环杂芳基化合物，该化合物具有式(I)：
Figure A200780017026D00391
其中
B和Y独立地选自CR2a和CR2aR2b；
W，W′和Z独立地选自CR4和N，只要W，W′和Z中的所有三个不同时为N；
L1为取代或未被取代的C1-C5亚烷基；
n为0，1，2，3或4；
R1选自取代或未被取代的5-13元芳基和杂芳基；
R2a，R2b，R2′和R2”各自独立地选自氢，卤素，取代或未被取代的C1-C6烷基；或任意的R2′和R2”彼此连接成3-7个原子的环烷基或环杂烷基环；
R3为氢键供体基团；
R4各自独立地选自H，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；
且虚线键为单键或双键；
或其药学上可接受的盐，溶剂合物或前体药物；
及其立体异构体，同位素变体和互变异构体。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，n为0-4。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，L1为未被取代或被一个或多个选自烷基，氧代，芳基，羟基和羟基烷基的取代基取代的C1-C5亚烷基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，L1为被两个烷基取代的C1-C5亚烷基。并且其中位于同一碳原子上的任意两个烷基可以彼此连接成3-7个原子的环烷基或环杂烷基环。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，L1为C1-C5亚烷基；且R3为氢键供体基团。在一个实施方案中，R3为-OH。在另一个实施方案中，R3为NH2。在另一个实施方案中，R3为-NH-R3′且R3′为烷基，环烷基或芳基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，L1为被氧代取代的C1-C5亚烷基；且R3为氢键供体基团。在一个实施方案中，R3为-OH。在另一个实施方案中，R3为NH2。在另一个实施方案中，R3为-NH-R3′且R3′为烷基，环烷基或芳基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，L1为C1-C5亚烷基；且R3为含-NH-的杂环烷基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，B和Y独立地选自CR2a和CR2aR2b。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，B和Y独立地选自CR2aR2b和虚线键为单键。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，B和Y可以均表示CH2和虚线键为单键。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，B和Y独立地选自CR2a且虚线键为双键。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，B和Y可以均表示CH且虚线键为双键。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，n为0，1或2。在一个具体的实施方案中，n为1。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，基团的R2′和R2”各自为H或Me。在一个具体的实施方案中，R2′和R2”各自为H。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，基团的R2′和R2”之一可以选自Me，Et，卤素和Cl且另一个为H。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，R1选自5-13元芳基和杂芳基环系，其未被取代或被一个或多个取代基取代，所述的取代基独立地选自卤素，羟基，氨基，氰基，磺基，硫烷基，亚磺酰基，酰氨基，羧基，烷氧羰基，烷基，取代的烷基，链烯基，取代的链烯基，炔基，取代的炔基和磺酰胺。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，R1为取代或未被取代的芳基。在一个具体的实施方案中，R1为取代的苯基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，R1为取代或未被取代的萘基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，R1为取代或未被取代的杂芳基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，R1为取代或未被取代的吡啶基，取代或未被取代的喹啉，取代或未被取代的苯并间二氧杂环戊烯，取代或未被取代的苯并二噁烷，取代或未被取代的苯并呋喃，取代或未被取代的苯并噻吩和取代或未被取代的苯并二氧杂环庚三烯。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，W和W′各自为N。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，W，Z和W′各自为CR4。在一个具体的实施方案中，W，Z和W′各自为CH。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，W和Z各自为CR4，W′为CR5且R5选自H，烷基，环烷基或卤素。在一个实施方案中，R5为卤素，环烷基或烷基。在一个具体的实施方案中，R5为H或卤素。在另一个具体的实施方案中，R5为H，Cl，F，环烷基或Me。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，该化合物为式I，II，III或IV：
Figure A200780017026D00421
其中
W为CR4；Z为CR4；
L1，R1R2′，R2”，R3和R4如对式I所述；
且R5选自H，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷基氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；
或其药学上可接受的盐，溶剂合物或前体药物；
及其立体异构体，同位素变体和互变异构体。
在另一个实施方案中，就式III-IV的化合物而言，R2′和R2”各自为H。
在另一个实施方案中，就式III-IV的化合物而言，R2′为卤素；且R2”为H。
在另一个实施方案中，就式III-IV的化合物而言，R2′为Cl或F；且R2”为H。
在另一个实施方案中，就式III-IV的化合物而言，R2′为Me或Et；且R2”为H。
在另一个实施方案中，就式III-IV的化合物而言，R2′和R2”各自为Me。
在一个更具体的实施方案中，就式III-IV的化合物而言，R2′为Me；且R2”为H。
在另一个实施方案中，就式II-IV的化合物而言，R1为取代或未被取代的芳基。
在另一个实施方案中，就式II-IV的化合物而言，R1为取代或未被取代的苯基或萘。
在另一个实施方案中，就式II-IV的化合物而言，R1为取代或未被取代的萘。
在另一个实施方案中，就式II-IV的化合物而言，R1为未被取代的萘。
在另一个实施方案中，就式II-IV的化合物而言，R1为取代或未被取代的苯基。
在另一个实施方案中，就式II-IV的化合物而言，R1为取代或未被取代的杂芳基。
在另一个实施方案中，就式II-IV的化合物而言，R1为取代或未被取代的吡啶基，取代或未被取代的喹啉，取代或未被取代的苯并间二氧杂环戊烯，取代或未被取代的苯并二噁烷，取代或未被取代的苯并呋喃，取代或未被取代的苯并噻吩和取代或未被取代的苯并二氧杂环庚三烯。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，该化合物为式V，VI或VII：
Figure A200780017026D00441
或
Figure A200780017026D00442
其中
W为CR4；Z为CR4；
L1，R1，R2′，R2”，R3和R4如对式I所述；R5如对式II-IV所述；
R4a选自H，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，芳氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷基氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；且m选自0-5；
或其药学上可接受的盐，溶剂合物或前体药物；
及其立体异构体，同位素变体和互变异构体。
就如上所述和本文任意和所有部分中所述的本发明化合物而言，其中m为0-5，应理解当m＝0时，环未被取代。
在一个实施方案中，就式VI-VII的化合物而言，R2′和R2”各自为H。
在另一个实施方案中，就式VI-VII的化合物而言，R2′为卤素；且R2”为H。
在另一个实施方案中，就式VI-VII的化合物而言，R2′为C l或F；且R2”为H。
在另一个实施方案中，就式VI-VII的化合物而言，R2′为Me或Et；且R2”为H。
在另一个实施方案中，就式VI-VII的化合物而言，R2′和R2”各自为Me。
在一个更具体的实施方案中，就式VI-VII的化合物而言，R2′为Me；且R2”为H。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，该化合物为式VIII，IX或X：
Figure A200780017026D00451
且其中L1，R1，R2′，R3和R4如对式I所述；R5如对式II-IV所述；且R4a和m如对式V-VII所述。
在一个实施方案中，就式V-X的化合物而言，R2′为H或Me。在另一个实施方案中，R2′为Me。在一个具体的实施方案中，R2′为H。
在另一个实施方案中，就式V-X的化合物而言，m为1，2或3。
在另一个实施方案中，就式V-X的化合物而言，m为1或2。在一个具体的实施方案中，m为2。
在另一个实施方案中，就式V-X的化合物而言，R4a各自独立地选自Me，Et，Ph，Cl，F，Br，CN，OH，OMe，OEt，OPh，COPh，CF3，CHF2，OCF3，i-Pr，i-Bu，t-Bu，SMe，CH＝CH-CO2H，SOMe，SO2Me，SO3H，SO3Me和吡啶基。
在另一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，L1为C1-C5亚烷基。
在另一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，L1为未被取代或被一个或多个选自烷基，羟基，氧代和羟基烷基的取代基取代的C1-C5亚烷基。
在另一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，L1为未被取代或被一个或多个选自Me，Et，i-Pr，羟基和羟甲基的取代基取代的亚乙基。
在另一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，L1为未被取代或被一个或多个选自Me，Et，i-Pr和羟甲基的取代基取代的亚甲基。
在另一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，R3为氢键供体基团。
在另一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，R3选自羟基，氨基，烷氨基，环烷氨基或氨基甲酰基。
在另一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，基团L1-R3选自：
Figure A200780017026D00462
和
Figure A200780017026D00463
在一个具体的实施方案中，就式I-X的化合物而言，基团-L1-R3为
Figure A200780017026D00464
在另一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，基团-L1-R3选自
Figure A200780017026D00466
和
Figure A200780017026D00467
在另一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，基团-L1-R3选自
Figure A200780017026D00471
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，该化合物为式XIa，XIb，XIc，XId，XIe，XIf，XIg，XIh，XIi或XIj：
Figure A200780017026D00472
且其中R5为如对式II-IV所述；且R4a和m如对式V-VII所述。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，该化合物为式XIIa，XIIb或XIIc：
且其中R5如对式II-IV所述；R4a和m如对式V-VII所述；且R2d选自氢，烷基，羟基烷基和取代或未被取代的苯基。在一个具体的实施方案中，R2d为氢，甲基，i-Pr和羟甲基。在另一个具体的实施方案中，R2d为苯基。在另一个具体的实施方案中，R2d为氢。在另一个具体的实施方案中，R2d为甲基。
在另一个实施方案中，就式I的化合物而言，该化合物为式XIIIa，XIIIb，XIIIc或XIIId：
Figure A200780017026D00481
Figure A200780017026D00482
或
Figure A200780017026D00483
且其中R5如对式II-IV所述；且R4a和m如对式V-VII所述。
在一个实施方案中，就式XIa-XIIId的化合物而言，m为1，2或3。
在另一个实施方案中，就式XIa-XIIId的化合物而言，m为1或2。在一个具体的实施方案中，m为2。
在另一个实施方案中，就XIa-XIIId的化合物而言，R4a各自独立地选自Me，Et，Ph，Cl，F，Br，CN，OH，OMe，OEt，OPh，COPh，CF3，CHF2，OCF3，i-Pr，i-Bu，t-Bu，SMe，CH＝CH-CO2H，SOMe，SO2Me，SO3H，SO3Me和吡啶基。
在另一个实施方案中，就V-XIIId的化合物而言，m为1且R4a为CF3。
在另一个实施方案中，就V-XIIId的化合物而言，m为2且R4a为F和CF3。
在另一个实施方案中，就V-XIIId的化合物而言，m为2且R4a为F和Cl。
在一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，W和Z各自独立为CR4。
在一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，W和Z各自独立为CH。
在一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，W为N。
在一个实施方案中，就式I-X的化合物而言，W为N且Z为H。
在一个实施方案中，就式II-XIIId的化合物而言，R5为H。
在一个实施方案中，就式II-XIIId的化合物而言，R5选自烷基，取代的烷基，环烷基，取代的环烷基和卤素。在一个具体的实施方案中，R5选自Me，环丙基，Cl，F和CF3。
在一个实施方案中，就式II-XIIId的化合物而言，R5为Me。
在一个实施方案中，就式II-XIIId的化合物而言，R5为CF3。
在一个实施方案中，就式II-XIIId的化合物而言，R5为F。
在另一个实施方案中，就式II-XIIId的化合物而言，R5为Cl。
在一个实施方案中，就式II-XIIId的化合物而言，R5为环丙基。
在某些方面中，本发明提供了上述式的化合物的前体药物和衍生物。前体药物为本发明化合物的衍生物，它们具有可通过代谢方式被裂解的基团并且通过溶剂分解或在生理条件下成为在体内为具有药物活性的本发明的化合物。这类实例包括，但不限于胆碱酯衍生物等，N-烷基吗啉酯类等。
本发明化合物的其它衍生物在其酸和酸衍生物形式中具有活性，而酸敏感性形式通常提供在哺乳动物生物体中溶解性，组织相容性或延迟释放的优点(参见，Bundgard，H.，Design of Prodrugs，pp.7-9，21-24，Elsevier，Amsterdam 1985)。前体药物包括本领域技术人员众所周知的酸衍生物，诸如，例如通过使母体酸与合适的醇反应制备的酯类或通过使母体酸化合物与取代或未被取代的胺或酸酐或混合酸酐类反应制备的酰胺类。衍生自本发明化合物侧链上的酸性基团的简单脂族或芳族酯类，酰胺类和酸酐类为优选的前体药物。在某些情况中，理想的是制备双酯型前体药物，诸如(酰氧基)烷基酯类或((烷氧羰基)氧基)烷基酯类。优选本发明化合物的C1-C8烷基，C2-C8链烯基，芳基，C7-C12取代的芳基和C7-C12芳基烷基酯类。
药物组合物
当作为药物使用时，一般以药物组合物的形式给予本发明的化合物。可以按照制药领域众所周知的方式制备这类组合物并且包含至少一种活性化合物。
一般而言，以药物有效量给予本发明的化合物。由临床医师根据相关情况确定实际给予的化合物的用量，包括所治疗的病症，选择的给药途径，实际给予的化合物，个体患者的年龄，体重和反应，患者症状的严重性等。
可以通过各种途径给予本发明的药物组合物，包括口服，直肠，透皮，皮下，静脉内，肌内和鼻内。根据预期递送途径的不同，优选将本发明的化合物配制成可注射或口服组合物或用于透皮给药的油膏，洗剂或贴剂。
口服给药用组合物可以采取本体液体溶液或混悬液或整装散剂的形式。然而，更常见的是将组合物制成单位剂型以有利于精确给药。术语“单位剂型”意指适合于作为用于人体受试者和其它哺乳动物的单位剂量的物理分散单位，每个单位包含预定量的计算产生所需治疗作用的活性物质与合适的药物赋形剂。典型的单位剂型包括液体组合物的预填充，预测定的安瓿或注射器或就固体组合物而言为丸剂，片剂，胶囊等。在这类组合物中，呋喃磺酸化合物通常为最少量的成分(约0.1-约50％重量或优选约1-约40％重量)，剩余的为有助于形成所需剂型的各种媒介物或载体或加工助剂。
适合于口服给药的液体剂型可以包括含有缓冲剂，悬浮剂和分散剂，着色剂，调味剂等的合适的水或非水媒介物。固体剂型可以包括，例如下列组分或类似性质的化合物中的任意种：粘合剂，诸如微晶纤维素，黄蓍胶或明胶；赋形剂，诸如淀粉或乳糖，崩解剂，诸如藻酸，Primogel或玉米淀粉；滑润剂，诸如硬脂酸镁；助流剂，诸如胶态二氧化硅；甜味剂，诸如蔗糖或糖精；或调味剂，诸如薄荷，水杨酸甲酯或橙调味剂。
可注射组合物一般基于可注射的无菌盐水或磷酸缓冲盐水或其它本领域公知的可注射载体。如上所述，在这类组合物中的活性化合物一般为少量成分，通常在约0.05-10％重量，其余为可注射载体等。
一般将透皮组合物配制成局部用软膏或霜剂，其通常包含用量在约0.01-约20％重量，优选约0.1-约20％重量，优选约0.1-约10％重量且更优选约0.5-约15％重量的活性组分。当配制成软膏时，一般将活性组分与石蜡或与水混溶的软膏剂基质合并。可选择地，例如，可以使用水包油型霜剂基质将活性组分配制成霜剂。这类透皮制剂为本领域众所周知的并且一般包括其它的组分以便促进活性组分或制剂稳定透皮。所有这类公知的透皮制剂和组分均包括在本发明范围内。
还可以通过透皮装置给予本发明的化合物。因此，可以使用固体基质类型中的储器或多孔膜型贴剂进行透皮给药。
上述用于可口服给药的，可注射的或可局部给药的组合物的成分仅为代表性的。其它材料和加工技术等描述在Remington′s Pharmaceutical Sciences的Part 8，17th edition，1985，MackPublishing Company，Easton，Pennsylvania中，将该文献引入本文作为参考。
还可以以缓释形式或由缓释递药系统给予本发明的化合物。有代表性的缓释材料的描述可以在Remington′s Pharmaceutical Sciences中找到。
下列制剂实施例例证了本发明有代表性的药物组合物。然而，本发明并不限于下列药物组合物。
制剂1-片剂
按照约1:2的重量比将本发明的化合物与干明胶粘合剂混合成干粉。加入少量硬脂酸镁作为润滑剂。用压片机将该混合物制成240-270mg片剂(80-90mg活性酰胺化合物/片)。
制剂2-胶囊
按照约1:1的重量比将本发明的化合物与淀粉稀释剂混合成干粉。将该混合物填充入250mg胶囊(125mg活性酰胺化合物/胶囊)。
制剂3-液体
掺合本发明的化合物(125mg)，蔗糖(1.75g)和黄原胶(4mg)，通过10号美国筛且然后与预先制备的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠(11:89，50mg)在水中的溶液混合。用水稀释苯甲酸钠(10mg)，调味剂和着色剂并且在搅拌下加入。然后加入足量的水至产生5mL总体积。
制剂4-片剂
按照约1:2的重量比将本发明的化合物与干明胶粘合剂混合成干粉。加入少量硬脂酸镁作为润滑剂。用压片机将该混合物制成450-900mg片剂(150-300mg活性酰胺化合物/片)。
制剂5-注射剂
将本发明的化合物溶于或悬浮于缓冲的无菌盐水可注射含水介质中至浓度约为5mg/ml。
制剂6-局部用制剂
在约75℃下熔化十八烷醇(250g)和白凡士林(250g)且然后加入本发明化合物(50g)，对羟基苯甲酸甲酯(0.25g)，对羟基苯甲酸丙酯(0.15g)，十二烷基硫酸钠(10g)和丙二醇(120g)溶于水(约370g)的混合物并且将所得混合物搅拌至它凝结。
治疗方法
本发明的化合物用作治疗原因上涉及或归因于P2X7受体异常活性的哺乳动物病症的治疗剂。因此，本发明的化合物和药物组合物用作预防和/或治疗哺乳动物，包括人的自身免疫性，炎性和心血管病症的治疗剂。
在治疗方面的一种方法中，本发明提供了治疗哺乳动物易感或患有与关节炎，眼色素层炎，哮喘，心肌梗死，外伤性脑损伤，急性脊髓损伤，炎性肠病和自身免疫性疾病相关的病症的方法，该方法包括给予有效量的一种或多种如上所述的药物组合物。
在治疗方面的另一种方法中，本发明提供了治疗哺乳动物易感或患有产生疼痛反应或涉及感觉神经基础活性维持失调的病症的方法。本发明的胺类具有作为治疗各种起源或病因的疼痛的止痛药的应用，所述的疼痛例如：急性，炎性疼痛(诸如与骨关节炎和类风湿性关节炎相关的疼痛)；各种神经性疼痛综合征(诸如疱疹后神经痛，三叉神经痛，交感反射性营养不良，糖尿病性神经病，格-巴综合征，纤维肌痛，幻肢痛，乳腺切除后疼痛，周围神经病，HIV神经病和化疗诱发的和其它医源性神经病)；内脏痛(诸如与胃食管返流疾病，肠易激综合征，炎性肠病，胰腺炎和各种妇科和泌尿障碍相关)，牙痛和头痛(诸如偏头痛，丛集性头痛和紧张性头痛)。
在治疗方面的其它方法中，本发明提供了治疗易感或患有神经变性疾病和病症的哺乳动物的方法，所说的神经变性疾病和病症诸如，例如帕金森病，多发性硬化；由神经炎症介导的疾病和病症或导致神经炎症的疾病或病症，诸如，例如外伤性脑损伤和脑炎；中枢介导的神经精神疾病和病症，诸如，例如躁狂性抑郁，双相性精神疾病，焦虑，精神分裂症，进食障碍，睡眠障碍和认知障碍；癫痫和癫痫发作症；前列腺，膀胱和肠功能障碍，诸如，例如尿失禁，排尿犹豫，直肠超敏反应，大便失禁，良性前列腺肥大和炎性肠病；呼吸和气道疾病和病症，诸如，例如过敏性鼻炎，哮喘和反应性气道病和慢性阻塞性肺疾病；由炎症介导或导致炎症的疾病和病症，诸如，例如类风湿性关节炎和骨关节炎，心肌梗死，各种自身免疫性疾病和病症，眼色素层炎和动脉粥样硬化；痒/瘙痒，诸如，例如银屑病；肥胖；脂代谢紊乱；癌症；血压；脊髓损伤；和肾病症；该方法包括给予有效治疗病症或预防病症的用量的一种或多种如上所述的药物组合物。
作为本发明的另一个方面提供了本发明化合物作为尤其是治疗或预防上述病症和疾病的药物的应用。还提供了本发明化合物在制备治疗或预防上述病症和疾病的药物中的应用。
注射剂量水平在约0.1mg/kg/小时-至少10mg/kg/小时，总计约1-约120小时且尤其是24-96小时。还可以给予约0.1mg/kg-约10mg/kg或更高剂量的前负荷推注以便达到足够的稳态水平。对40-80kg的人体患者而言，预计最大总剂量不会超过约2g/天。
为了预防和/或治疗长期的病症，诸如神经变性和自身免疫性病症，治疗方案通常延长多个月或多年，因此，就患者的便利性和耐受性而言优选口服给药。就口服给药而言，每天1-5且尤其是2-4且一般是三次口服剂量为有代表性的方案。使用这些给药模式，每种剂量提供了约0.01-约20mg/kg的本发明化合物，优选的剂量各自提供了约0.1-约10mg/kg且尤其是约1-约5mg/kg。
一般选择透皮剂量以便提供类似于使用注射剂量获得的或低于其获得的血液水平。
当用于预防神经变性，自身免疫性或炎性病症发作时，对处于发生该病症风险中的患者给予本发明的化合物，一般根据临床医师的建议并且在其监督下进行，其剂量水平如上所述。处于发生特定病症风险中的患者一般包括具有该病症家族史的那些或已经通过遗传测试或筛选鉴定为特别易感该病症的那些患者。
可以将本发明的化合物作为单一活性剂给药或将它们与其它活性剂联合给药，包括表现出相同或类似治疗活性并且确定为可安全和有效地进行这类联合给药的其它化合物。
一般合成操作
易于由可得到的原料，使用下列一般方法和操作制备本发明的双环杂芳基化合物。可以理解，尽管指定典型或优选方法条件(即反应温度，时间，反应剂摩尔比，溶剂，压力等)，但是除非另作陈述，否则也可以使用其它方法条件。最佳反应条件可以根据所用特定反应剂或溶剂的不同而改变，但这类条件可以由本领域技术人员通过常规的最佳操作确定。
另外，正如本领域技术人员显而易见的，常规的保护基是防止某些官能基发生不需要的反应所必需的。对用于特定官能基的合适的保护基的选择以及用于保护和脱保护的合适条件的选择为本领域众所周知的。例如，大量保护基及其引入和除去描述在T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protecting Groups in Organic Synthesis，Second Edition，Wiley，New York，1991及其所引述的参考文献中。
下列方案详细描述了有关上文已经列出的有代表性的双环杂芳基化合物的制备。有机合成领域普通技术人员可以由公知或商购原料和试剂制备本发明的化合物。
有代表性的方案1
Figure A200780017026D00551
有代表性的方案2
Figure A200780017026D00552
有代表性的方案3
其中R′＝R1且R＝-L-R3。
有代表性的方案4
Figure A200780017026D00562
有代表性的方案5
Figure A200780017026D00563
中间体的合成
中间体1
(E)-2-(2-(二甲氨基)-乙烯基)-3-硝基苯甲酸甲酯的制备：
Figure A200780017026D00571
将2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(5.0g，25.6mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(9.18g，77mmol)在DMF(30mL)中的混合物在115℃下搅拌17h。在减压下除去挥发性物质以便得到(E)-2-(2-(二甲氨基)-乙烯基)-3-硝基苯甲酸甲酯，为棕色油状物。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.68(m，2H)，7.07(t，J＝7.5Hz1H)，6.32(d，J＝13.5Hz，1H)，5.65(d，J＝13.5Hz，1H)，3.85(s，3H)，2.82(s，6H)。
中间体2
5-硝基-1H-异色烯-1-酮的制备：
Figure A200780017026D00572
将(E)-2-(2-(二甲氨基)乙烯基)-3-硝基苯甲酸甲酯溶于EtOAc(200mL)和并且加入硅胶(200g)。将所得混悬液在室温下搅拌1h。过滤出EtOAc溶液。用EtOAc(2x150mL)洗涤硅胶并且蒸发合并的有机物且在减压下干燥而得到5-硝基-1H-异色烯-1-酮(4.0g，21.0mmol，两步后82％)，为棕色固体。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.62(d，J＝7.8Hz，1H)，8.47(d，J＝8.1Hz，1H)，7.65(m，1H)，7.42(d，J＝6.3Hz，1H)，7.36(d，J＝6.3Hz，1H)。HPLC保留时间1.72min，10-100％ CH3CN，3.5min梯度；ESI-MS m/z 192.1(M+H)+。
可以参见McDonald，M.C.等BritishJ.Pharmacol.2000，130，843中其它的信息，将该文献引入本文作为参考。
中间体3
5-氨基-1H-异色烯-1-酮的制备
Figure A200780017026D00581
将氯化锡(II)二水合物(41.9g，185.7mmol)加入到搅拌的5-硝基-1H-异色烯-1-酮(7.1g，37.1mmol)在无水THF(120mL)中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌18h。用EtOAc(400mL)稀释所得混合物并且用饱和碳酸氢钠水溶液处理至pH＝10。加入水(100mL)并且分离各层。用乙酸乙酯(2 x 150mL)萃取水相并且用Na2SO4干燥合并的有机级分，过滤并且蒸发至得到5-氨基-1H-异色烯-1-酮(5.8g，36.0mmol，97％)，为黄色固体。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ 7.52(d，J＝7.8Hz，1H)，7.32(d，J＝5.7Hz，1H)，7.27(t，J＝7.8Hz，1H)，7.07(d，J＝7.8Hz，1H)，6.80(d，J＝5.7Hz，1H)。HPLC保留时间1.16min，10-100％ CH3CN，3.5min梯度；ESI-MS m/z 162.3(M+H)+。可以参见Lee，B.S.等J.Org.Chem.2004，69，3319中其它的信息，将该文献引入本文作为参考。
中间体4
6-甲基-5-硝基-1H-异色烯-1-酮的制备：
Figure A200780017026D00582
a.(E)-2-(5-硝基-1-氧代-1H-异色烯-6-基)乙酸叔丁酯
向圆底烧瓶中加入叔丁醇钾(4.4g，0.039mol)和N，N-二甲基甲酰胺(30mL，0.4mol)并且在-20℃下和40分钟期限内缓慢加入乙酸，氯-，1，1-二甲基乙酯(2.5mL，0.017mol)和5-硝基-异色烯-1-酮(3.00g，0.0157mol)在N，N-二甲基甲酰胺(5mL，0.06mol)中的溶液，并且将该反应在相同温度下再搅拌45分钟。将该反应混合物倾入4ml HCl和80mL水中并且用DCM萃取且用盐水洗涤和用Na2SO4干燥。在减压下除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为亮色浓稠油状物。MS m/z＝306.4(M+H)。
b.6-甲基-5-硝基-1H-异色烯-1-酮
向微波小瓶中加入2-(5-硝基-1-氧代-1H-异色烯-6-基)乙酸叔丁酯(800.0mg，0.002620mol)，三氟乙酸(2mL，0.02mol)并且在100℃接触微波20分钟。原料转变成相应的酸。在减压下除去TFA并且再取残余物进入微波管并且加入喹啉(2mL，0.02mol)且在120℃下加热20分钟。反应进行完全并且加入乙酸乙酯(50mL)且用10mL 6NHCl洗涤。用乙酸乙酯(50mL)萃取HC l层并且用水，盐水洗涤合并的有机层且干燥。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化棕色固体残余物而得到纯的产物，为白色固体。MS m/z＝206.4(M+H)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.29(d，J＝8.19Hz，1H)，7.71-7.69(m，2H)，6.57(d，J＝6.02Hz，1H)，2.45(s，3H)。
中间体5
6-环丙基-5-硝基-1H-异色烯-1-酮的制备：
Figure A200780017026D00591
a.6-溴-5-硝基-1H-异色烯-1-酮
向压力管(150mL)中加入4-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(2.1g，0.0077mol)，1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(3.6mL，0.027mol)和N，N-二甲基甲酰胺(5mL，0.06mol)并且在120℃下加热20小时。该反应得到多种产物。除去溶剂并且将残余物溶于乙酸乙酯(100mL，1mol)。然后加入硅胶(20g，0.3mol)并且在室温下将该反应体系搅拌12h。过滤该反应体系并且除去溶剂且通过快速色谱法纯化残余物。MS m/z＝271.2(M+H)。
b.6-环丙基-5-硝基-1H-异色烯-1-酮
向微波管中加入6-溴-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(500.00mg，0.0018516mol)，环丙基硼酸(206.8mg，0.002407mol)，乙酸钯(21mg，0.000092mol)，三环己基膦(52mg，0.00018mol)，磷酸钾(1376mg，0.006481mol)，甲苯(10mL，0.09mol)和水并且在100℃下和微波中加热30分钟。然后用水稀释该反应混合物并且用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，干燥并且蒸发。通过快速色谱法纯化所得残余物而获得产物。产物仅为65％纯度并且不经进一步纯化用于合成本发明的6-环丙基化合物。MS m/z＝232.3(M+H)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 8.22(d，J＝8.63Hz，1H)，7.69(d，J＝5.85Hz，1H)，7.33(d，J＝8.47Hz，1H)，6.51(d，J+6.05Hz，1H)，1.96-1.89(m，1H)，1.19-1.14(m，2H，0.97-0.93(m，2H)。
中间体6
6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮的制备
Figure A200780017026D00601
a.4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸
向圆底烧瓶中加入4-氯-2-甲基苯甲酸(200mg，0.001mol)和硫酸(1mL，0.02mol)。在-20℃下发烟硝酸(0.05mL，0.001mol)并且将该反应体系在70℃下搅拌1小时并且倾入冰冷水，其中沉淀出2-和4-硝基化合物的混合物。过滤沉淀并且溶于乙酸乙酯(30mL)且用饱和碳酸氢钠水溶液，盐水洗涤并且用硫酸钠干燥。使溶剂降低至1/4体积以沉淀出不需要的异构体。过滤沉淀并且干燥滤液而获得异构体的1:1混合物，为白色固体。MS m/z＝214.5(M-H)。
b.4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯
向圆底烧瓶至加入4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸(11.00g，0.05102mol)和甲醇(110mL，2.7mol)并且在0℃下加入亚硫酰氯(4.5mL，0.061mol)，且将该反应体系在75℃下搅拌3小时。在减压下除去溶剂并且将残余物溶于乙酸乙酯(300mL)且用碳酸氢钠水溶液，水和盐水洗涤。用硫酸钠干燥有机萃取物并且除去溶剂而回收酯类。MS m/z＝230.3(M+H)。
c.6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮
向压力管中加入4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(13g，57mmol)，N，N-二甲基甲酰胺(10mL，200mmol)和1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(26.5mL，200mmol)并且将该反应体系加热至120℃下20h。除去溶剂并且将所得棕色残余物重新溶于乙酸乙酯(600mL，6000mmol)并且加入130-270目60A硅胶(500g，6000mmol)，且用机械搅拌器将该反应体系搅拌8h。过滤出硅胶，用乙酸乙酯(400mL)洗涤并且在真空中除去有机层，且通过快速色谱法纯化残余物(330g，2-50％乙酸乙酯/己烷)而得到产率为14％的两种异构体，它们各自的纯度几乎为98％。MS m/z＝226.2(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 8.35(d，J＝8.63Hz，1H)，7.95(d，J＝8.63Hz，1H)，7.76(d，J＝5.91Hz，1H)，6.61(d，J＝6.04Hz，1H)。
有代表性的合成方法
方法A
(化合物65)
2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺
Figure A200780017026D00611
a.5-硝基-异色烯-1-酮
2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(5g，0.02mol)和1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(10mL，0.07mol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(30mL，0.4mol)。将该混合物在115℃下搅拌17小时。用旋转蒸发器除去挥发性物质。将残余物溶于乙酸乙酯(400mL)且然后加入硅胶(400g)。在室温下将该混合物搅拌3小时。过滤，用乙酸乙酯(400mL X 3)冲洗。将合并的滤液浓缩至干而得到棕色固体(3.6g)。MS m/z＝192.0(M+1)。
b.2-(2-羟乙基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮
将5-硝基-异色烯-1-酮(3.60g，0.0170mol)悬浮于甲醇(40mL)中，加入乙醇胺(3.11g，0.0508mol)并且将该反应混合物在70℃下和氮气环境中搅拌2h。将该混合物冷却至室温并且加入三乙胺(5mL)且将该反应混合物在室温下搅拌2天。过滤出所得固体(获得黄色固体，为所需产物，0.9g)。浓缩滤液并且将残余物溶于乙酸乙酯，用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥。除去溶剂而得到黄色固体产物(1.3g)。MS m/z＝235.1(M+1)。
c.2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙酸乙酯
将2-(2-羟乙基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮(2.2g，0.0089mol)溶于二氯甲烷(20mL)和N，N-二甲基甲酰胺(10mL)的混合物中，加入N，N-二异丙基乙胺(2.33mL，0.0134mol)和乙酰氯(1.06g，0.0134mol)并且将该反应混合物在室温下搅拌30min。除去挥发性物质并且用水洗涤残余物且然后用乙醚洗涤而得到产物，为淡黄色固体(2.45g)。MS m/z＝277.0(M+1)。
d.2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙酸乙酯
将2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙酸乙酯(2.45g，0.00842mol)溶于甲醇(100mL)，加入钯/活性炭(10％)并且将该反应混合物在氢气环境中搅拌1小时。将该混合物通过C盐过滤并且除去溶剂。获得产物，为淡橙色固体(1.98g)。MS m/z＝246.5(M+1)。
e.乙酸2-5-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1-氧代-1H-异 喹啉-2-基-乙酯
将2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(131mg，0.000548mol)在亚硫酰氯(5mL)中的溶液在60℃下搅拌1小时。除去亚硫酰氯并且将残余物溶于四氢呋喃(5mL)。加入2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙酸乙酯(100.0mg，0.0003655mol)和N，N-二异丙基乙胺(95.5μL，0.000548mol)并且将该反应混合物在室温下搅拌1小时。除去挥发性物质，将残余物溶于乙酸乙酯，用水，稀HCl和盐水洗涤并且通过柱纯化。获得产物，为米色固体(65mg)。MS m/z＝467.4(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ 10.11(s，1H)，8.08(d，J＝8.0Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.84(d，J＝7.0Hz，1H)，7.75-7.65(m，2H)，7.55-7.42(m，2H)，6.69(d，J＝7.6Hz，1H)，4.33(t，J＝5.1Hz，2H)，4.20(t，J＝5.1Hz，2H)，3.92(s，2H)，1.96(s，3H)。
f.2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-N-(1，2-二氢-2-(2-羟乙基)-1-氧代 异喹啉-5-基)乙酰胺
将乙酸2-5-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基-乙酯(55.0mg，0.000111mol)溶于甲醇(5mL)并且加入2N氢氧化钠溶液(5mL)，且将该反应混合物在室温下搅拌1小时。除去甲醇并且过滤出由此形成的固体，用水洗涤并且在真空烘箱内干燥。获得产物，为米色固体(45mg)。MS m/z＝425.2(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ 10.10(s，1H)，8.08(d，J＝7.9Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.82(d，J＝7.6Hz，1H)，7.78-7.62(m，2H)，7.55-7.40(m，2H)，6.65(d，J＝7.5Hz，1H)，4.89(s，1H)，4.02(t，J＝5.2Hz，2H)，3.92(s，2H)，3.67(t，J＝5.2Hz，2H)。
方法B
(化合物81)
2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-1-羟甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺
Figure A200780017026D00641
a.2-(1，3-二羟基丙-2-基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮
将5-硝基-异色烯-1-酮(4.2g，0.022mol)和丝氨醇(2.0g，0.022mol)在甲醇(40mL，1mol)中回流1小时。TLC显示所有原料耗尽。向该混合物中加入三乙胺(5mL，0.04mol)并且将该反应体系回流过夜。通过旋转蒸发器除去挥发性物质并且通过快速柱色谱法纯化残余物(40g硅胶，0-50％ EtOAc/己烷)并且得到绿黄色固体。MS m/z＝264.7(M+1)。
b.5-氨基-2-(1，3-二羟基丙-2-基)异喹啉-1(2H)-酮
在室温下和氢气环境中(气囊)将2-(1，3-二羟基丙-2-基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮(1.2g，0.0045mol)与钯10％wt./碳酸钙(0.1g，0.0005mol)在甲醇(100mL，2mol)中搅拌1hr以上。过滤催化剂，将滤液浓缩至干而得到淡绿色油状物。MS m/z＝235.0(M+1)。
c.2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-N-(2-(1，3-二羟基丙-2-基)-1-氧代 -1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺
向5-氨基-2-(1，3-二羟基丙-2-基)异喹啉-1(2H)-酮(100.0mg，0.0004055mol)在N，N-二甲基甲酰胺(8mL，0.1mol)中的溶液中加入2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(378.0mg，0.001584mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(448.0mg，0.001178mol)和N，N-二异丙基乙胺(600.0μL，0.003445mol)。将该反应混合物在50℃下搅拌16小时。在旋转蒸发大部分DMF后，将MeOH(20mL)和2N NaOH(5mL)加入到残余物中。在室温下将该溶液搅拌1小时。旋转蒸发MeOH并且加入EtOAc(100mL)，且然后用水(2 x 100mL)，饱和NaHCO3，H2O和盐水洗涤所得溶液。用MgSO4干燥EtOAc层并且旋转蒸发。用DCM洗涤所得溶液且然后用硅胶纯化。获得终产物，为固体。MS m/z＝455.1(M+1)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 10.09(s，1H)，8.09(d，J＝8.0Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.80(d，J＝7.6Hz，1H)，7.75-7.65(m，2H)，7.55-7.40(m，2H)，6.63(d，J＝7.6Hz，1H)，4.98-4.85(m，3H)，3.92(s，2H)，3.85-3.65(m，4H)。
方法C
(化合物232)
2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N-(1-氧代-2-(S)-1-吡咯烷-2-基甲基-1，2-二氢-异喹啉-5-基)-乙酰胺
Figure A200780017026D00651
a.(S)-2-((5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸 叔丁酯
在圆底烧瓶中合并5-硝基-异色烯-1-酮(3.50g，0.0165mol)，(S)-叔丁基2-(氨基甲基)吡咯烷-1-甲酸(4.12g，0.0206mol)和甲醇(100.0mL，2.469mol)。将该混合物在回流状态下加热2小时。使该混合物冷却并且在减压下除去挥发性物质。使用二氯甲烷:甲醇(0-10％)梯度对粗油进行色谱。在真空中减少合并的纯级分而得到标题化合物，为黄色固体。
b.(S)-2-((5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔 -丁酯
在圆底烧瓶中合并(S)-2-((5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.54g，0.00412mol)，钯/C(0.04g，0.0004mol)和甲醇(60mL，1mol)。净化烧瓶并且使用氢气抽三次真空。将该混合物在室温和1atm下搅拌3小时。用C盐床过滤该混合物并且在真空中减少滤液而得到淡棕色油状物，将其通过二氯甲烷：甲醇(0-10％)梯度的硅胶柱色谱法纯化。在真空中减少合并的纯级分而得到黄褐色固体。
c.(S)-2-((5-(2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代异喹 啉-2(1H)-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(S)-2-((5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(248.0mg，0.0006860mol)在N，N-二甲基甲酰胺(10mL，0.1mol)中的溶液中加入2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)乙酸(350.0mg，0.001467mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(530.0mg，0.001394mol)和N，N-二异丙基乙胺(488.0μL，0.002802mol)。将该反应混合物在50℃下搅拌16小时。检查LC/MS并且显示反应完成。加入EtOAc(100ML)并且用水(2 x 100mL)，饱和NaHCO3，H2O和盐水洗涤所得溶液。用MgSO4干燥EtOAc层并且进行旋转蒸发。通过硅胶柱纯化黄色残余物。
d.2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-N-(1，2-二氢-1-氧代-2-(((S)-吡咯 烷-2-基)甲基)异喹啉-5-基)乙酰胺
在20ml反应容器中合并(S)-2-((5-(2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(20.0mg，0.0000355mol)和1，4-二噁烷(5mL，0.06mol)。滴加作为2.0M醚溶液的氯化氢(0.016g，0.00044mo l)。将该反应体系搅拌过夜。形成白色沉淀并且过滤，用乙醚洗涤并且干燥。将产物溶于二乙胺和DMSO(1mL)并且通过使用Phenomenex AXIA填充的C18柱(100 X21.2 10微米)的HPLC在pH 10下纯化。在真空中减少合并的级分而得到标题化合物，为白色固体。LC/MS M+H＝464.2。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.21(s，1H)，8.98(d，1H，J＝93.24Hz)，8.10(d，1H，J＝8.03Hz)，7.90(s，1H)，7.85(dd，1H，J＝7.85Hz)，7.73-7.68(m，2H)，7.60(d，1H，J＝7.67Hz)，7.50(t，1H，J＝7.96Hz)，6.76(d，1H，J＝7.65Hz)，4.36-4.22(m，2H)，3.94(s，2H)，3.80(br′s′，1H)，3.29-3.24(m，1H)，3.12-3.06(m，1H)，2.15-2.07(m，1H)，1.99-1.86(m，2H)，1.74-1.64(m，1H)。
方法D
(化合物235)
2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-甲基氨基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺
Figure A200780017026D00671
a.2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基氨基甲酸叔丁基甲酯
在圆底烧瓶中合并5-硝基-异色烯-1-酮(5.00g，0.0235mol)，2-氨基乙基甲基氨基甲酸叔丁酯(7.18g，0.0412mol)，N，N-二异丙基乙胺(4.92mL，0.0282mol)和甲醇(150mL，3.7mol)。将该混合物在回流状态下加热3小时。将内含物冷却，在真空中减少并且溶于二氯甲烷(250ml)且用等份的水和盐水洗涤。分离有机层，用硫酸钠干燥并且在真空中减少。通过使用甲醇:二氯甲烷(0-5％)梯度的柱色谱法纯化该混合物。在真空中减少合并的纯级分而得到标题化合物，为橙色固体。
b.2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯
在500ml圆底烧瓶中合并2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基氨基甲酸叔丁基甲酯(4.25g，0.0122mol)，甲醇和钯/C(0.1g，0.001mol)。净化烧瓶并且用氢气抽真空三次。在室温和氢气环境(1atm)中搅拌该混合物。将烧瓶抽真空并且用C盐过滤内含物。在真空中减少滤液至得到橙色油状物。通过使用甲醇:二氯甲烷(0-5％)梯度的柱色谱法纯化油状物。在真空中减少合并的纯级分而得到标题化合物，为淡橙色固体。
c.(2-5-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉 -2-基-乙基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯
在20ml反应容器中合并2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.00045mol)，2-(4-氯-3-三氟甲基)苯基)-乙酸(0.214g，0.000898mol)N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(427mg，0.00112mol)N，N-二异丙基乙胺(391μL，0.00224mol)和N，N-二甲基甲酰胺(0.03mL，0.0004mol)。将该混合物在50℃下搅拌2小时，冷却并且倾入饱和碳酸氢钠(200ml)。用二氯甲烷(3X100ml)萃取该混合物。用硫酸钠干燥合并的萃取物并且在真空中减少。通过使用乙腈:水梯度的反相制备型HPLC在pH10下纯化该混合物。在真空中减少合并的纯级分而得到化合物，为黄白色固体。
d.2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-甲基氨基-乙基)-1-氧代 -1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺盐酸盐
在20ml反应容器中合并(2-5-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基-乙基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯(126mg，0.000234mol)和1，4-二噁烷(5mL，0.06mol)。滴加作为2.0M醚溶液的氯化氢(20mg，0.00054mol)。将该反应体系搅拌过夜。形成白色沉淀并且过滤，用乙醚洗涤并且干燥而得到标题化合物。LC/MSM+H＝438.2。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.22(s，1H)，8.64(br′s′，1H)，8.09(d，1H，J＝8.14Hz)，7.90(s，1H)，7.83(d，1H，J＝7.76Hz)，7.73-7.68(m，2H)，7.51-7.47(m，2H)，6.74(d，1H，7.57Hz)，4.26(t，2H，J＝5.74Hz)，3.94(s，2H)，3.31-3.25(m，2H)，2.57(t，3H，J＝5.28)
方法E
(化合物236)
(S)-2-{5-[2-(3，4-二氯-苯基)-乙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺
Figure A200780017026D00691
a.(S)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
向5-硝基-异色烯-1-酮(1.5g，0.0078mol)在甲醇(20mL，0.4mol)中的溶液中加入三乙胺(2mL，0.02mol)和(S)-2-氨基丙酰胺氢溴酸盐(1.6g，0.0094mol)并且将所得混合物在50℃下加热过夜。将该反应混合物冷却至室温，其中沉淀出产物。过滤沉淀并且干燥而得到纯的产物，为黄色固体。MS m/z＝262.2(M+H)。
b.(S)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
向(S)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(1.3g，0.0050mol)在甲醇(40mL，1mol)和二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入钯/活性炭(0.2g，0.001mol)并且在氢气环境(1atm)中搅拌2h。用C盐过滤该反应混合物并且在减压下除去滤液而得到纯的产物，为灰白色固体。MS m/z＝232.5(M+H)。
c.(S)-2-(5-(2-(3，4-二氯苯基)乙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙酰胺
向搅拌的3，4-二氯苯基乙酸(0.12g，0.00056mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.3g，0.0009mol)和N，N-二异丙基乙胺(0.2mL，0.0009mol)在N，N-二甲基甲酰胺(5mL，0.06mol)中的溶液中加入(S)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(0.10g，0.00043mol)。将该反应体系在室温下搅拌16h。用水淬灭该反应体系，用二氯甲烷萃取，用2N HCl，饱和碳酸氢钠溶液，盐水洗涤并且用硫酸钠干燥。在减压下除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物(12g，0-10％MeOH/DCM)而得到产物，为白色固体。
MS m/z＝419.2(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 10.08(s，1H)，8.07(d，J＝8.42Hz，1H)，7.82(d，J＝8.42Hz，1H)7.66-7.61(m，3H)，7.48-7.43(m，2H)，7.38(d，J＝9.08Hz，1H)，7.23(bs，1H)，6.67(d，J＝8.42Hz，1H)，5.50-5.45(q，J＝7.24Hz，1H)，3.82(s，2H)，1.54(d，J＝7.50Hz，3H)。
方法F
(化合物237)
(S)-2-{5-[2-(4-氯-2-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺
a.(S)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在圆底烧瓶中加入5-硝基-异色烯-1-酮(1.5g，0.0078mol)，甲醇(20mL，0.4mol)，三乙胺(2mL，0.02mol)和(S)-2-氨基丙酰胺氢溴酸盐(1.6g，0.0094mol)并且将该反应体系在50℃下加热过夜。将该反应混合物冷却至室温，其中沉淀出产物。过滤沉淀并且干燥而得到纯的产物，为黄色固体。MS m/z＝262.2(M+H)。
b.(S)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在圆底烧瓶中加入(S)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(1.3g，0.0050mol)，甲醇(40mL，1mol)，二氯甲烷(5mL)和钯/活性炭(0.2g，0.001mol)并且将该混合物在氢气(1atm)环境中搅拌2h。用C盐过滤该反应混合物并且在减压下除去溶剂而得到纯的产物，为黄白色固体。MS m/z＝232.5(M+H)。
c.(S)-2-(5-(2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代异喹啉 -2(1H)-基)丙酰胺
在圆底烧瓶中加入2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)乙酸(0.13g，0.00056mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.3g，0.0009mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.2mL，0.0009mol)，N，N-二甲基甲酰胺(5mL，0.06mol)和(S)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(0.1g，0.0004mol)并且将该反应体系在室温下搅拌16h。用水使反应淬灭并且用二氯甲烷萃取，用2N HCl，饱和碳酸氢钠溶液，盐水洗涤并且用硫酸钠干燥。在减压下除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物(12g，0-10％MeOH/DCM)而得到产物，为白色固体。MS m/z＝452.4(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 10.11(s，1H)，8.07(d，J＝8.80Hz，1H)，7.79-7.76(m，3H)7.64-7.60(m，2H)，7.49(d，J＝8.08Hz，1H)，7.45(t，J＝7.7Hz，1H)，7.23(bs，1H)，6.71(d，J＝7.77Hz，1H)，5.50-5.45(q，J＝7.24Hz，1H)，4.06(s，2H)，1.55(d，J＝7.54Hz，3H)。
方法G
(化合物238)
(R)-2-{5-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺
Figure A200780017026D00711
a.(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在圆底烧瓶中加入5-硝基-异色烯-1-酮(2g，0.01mol)，甲醇(40mL，1mol)，(R)-2-氨基丙酰胺盐酸盐(2.0g，0.016mol)和三乙胺(2.6mL，0.019mol)并且在52℃下搅拌3小时。产物(黄色固体)沉淀，将其过滤并且不经任何进一步纯化进行下一步反应。MSm/z＝262.3(M+H)。
b.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(5.0g，0.018mol)，钯/活性炭(10％)(0.3g，0.003mol)和甲醇(200mL，5mol)和乙酸乙酯(80mL)。将该反应混合物在氢气(1atm)环境中和室温下搅拌40分钟。用C盐过滤该混合物，除去溶剂而得到产物，为淡黄色固体。MS m/z＝232.3(M+H)。
c.(R)-2-(5-(2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代异喹啉 -2(1H)-基)丙酰胺
在圆底烧瓶中加入2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(0.13g，0.00056mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.3g，0.0009mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.2mL，0.0009mol)，N，N-二甲基甲酰胺(3mL，0.04mol)和(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(0.1g，0.0004mol)。将该反应体系在室温下搅拌16h。在减压下除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物(12g，0-10％MeOH/DCM)而得到产物，为白色固体。MS m/z＝451.8(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 10.10(s，1H)，8.07(d，J＝8.42Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.82(d，J＝8.47Hz，1H)7.73-7.68(m，2H)，7.63(s，1H)，7.46(d，J＝7.57Hz，2H)，7.23(bs，1H)，6.68(d，J＝8.02Hz，1H)，5.50-5.45(q，J＝7.24Hz，1H)，3.92(s，2H)，1.54(d，J＝7.66Hz，3H)。
方法H
(化合物249)
2-{5-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-乙酰胺
Figure A200780017026D00731
a.2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙酰胺
在圆底烧瓶中加入5-硝基-异色烯-1-酮(2.5g，0.013mol)，甲醇(50mL，1mol)，甘氨酰胺盐酸盐(3.0g，0.027mol)和三乙基铝(4.4mL，0.033mol)并且在85℃下加热3小时。在碱性下除去溶剂而得到产物，为黄色固体。MS m/z＝248.2(M+H)。
b.2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙酰胺
在圆底烧瓶中加入2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙酰胺(0.98g，0.0040mol)，甲醇(200mL，4mol)和10％重量的钯/活性炭0.1g，0.001mol)并且将该反应体系在氢气化环境(1atm)中搅拌1小时。过滤该反应混合物并且在减压下除去溶剂且通过快速色谱法纯化残余物(40g，0-10％MeOH/DCM)而得到产物，为灰白色固体。MS m/z＝218.3(M+H)。
c.N-(2-(2-氨基-2-氧代乙基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5- 基)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
在圆底烧瓶中加入2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(170mg，0.00072mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(400mg，0.001mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.2mL，0.001mol)，N，N-二甲基甲酰胺(2mL，0.03mol)和2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙酰胺(120mg，0.00055mol)。将该反应体系在室温下搅拌16h并且在除去溶剂且通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为白色粉末。MS m/z＝437.8(M+1)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 10.09(s，1H)，8.04(d，J＝8.07Hz，1H)，7.89(bs，1H)，7.83(d，J＝8.07Hz，1H)，7.73-7.70(m，2H)，7.63(bs，1H)，7.46(t，J＝8.0Hz，1H)，7.42(d，J＝7.76Hz，1H)7.19(bs，1H)，6.64(d，J＝7.70Hz，1H)，4.56(s，2H)，3.92(s，2H)。
方法J
(化合物250)
(S)-2-{5-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-3-羟基-丙酰胺
Figure A200780017026D00741
a.(S)-3-羟基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在圆底烧瓶中加入5-硝基-异色烯-1-酮(2g，0.01mol)，甲醇(40mL，1mol)，(S)-2-氨基-3-羟基丙酰胺盐酸盐(2.2g，0.016mol)和三乙胺(2.55mL，0.0183mol)并且在52℃下搅拌过夜。产物沉淀出来并且过滤且干燥而得到纯的产物，为黄色固体。MS m/z＝278.3(M+H)。
b.(S)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-羟基丙酰胺
在圆底烧瓶(250mL)中加入(S)-3-羟基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(0.2g，0.0007mol)和甲醇(20mL，0.5mol)和10％重量的钯/活性炭(0.02g，0.0001mol)并且借助于真空从烧瓶中抽出空气并且借助于气囊将该反应体系在氢气环境中(1atm)搅拌。将该反应体系搅拌45分钟，此时反应完成。过滤该反应体系并且在减压下除去溶剂而得到纯的产物，为淡黄色固体。MS m/z＝248.3(M+H)。
c.(S)-2-5-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1-氧代-1H-异 喹啉-2-基-3-羟基-丙酰胺
在圆底烧瓶中加入2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(0.12g，0.00052mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.3g，0.0008mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.0008mol)和(S)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-羟基丙酰胺(0.1g，0.0004mol)。将该反应体系在室温下搅拌16h并且除去溶剂且通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为白色粉末。MS m/z＝468.3(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 10.09(s，1H)，8.07(d，J＝8.34Hz，1H)，7.89(bs，1H)，7.81(d，J＝7.78Hz，1H)，7.73-7.66(m，3H)，7.53(d，J＝8.21Hz，1H)，7.44(t，J＝7.88Hz，1H)，7.30(bs，1H)，6.64(d，J＝7.88Hz，1H)，5.50(t，J＝6.69Hz，1H)，5.16(t，J＝5.48Hz，1H)，3.98-3.96(m，2H)，3.92(s，2H)。
方法K
(化合物252)
(R)-2-{5-[2-(4-氯-苯基)-丙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-3-羟基-丙酰胺
Figure A200780017026D00751
a.(R)-3-羟基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯
在圆底烧瓶中加入5-硝基-异色烯-1-酮(10g，0.05mol)，甲醇(200mL，5mol)，三乙胺(18mL，0.13mol)和(R)-2-氨基-3-羟基丙酸甲酯盐酸盐(9.8g，0.063mol)，由此该反应体系变均匀。然后将该反应体系在70℃下加热过夜。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物(120g，0-10％ MeOH/DCM)而得到产物，为黄色固体。MS m/z＝293.5(M+H)。
b.(R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉 -2(1H)-基)丙酸甲酯
在圆底烧瓶中加入(R)-3-羟基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯(4g，0.01mol)和二氯甲烷(40mL，0.5mol)和1H-咪唑(1.6g，0.023mol)并且在0℃下加入叔-丁基二甲基甲硅烷基氯(2.3g，0.015mol)且将该反应体系温至室温并且搅拌16h。用水使该反应混合物淬灭并且用二氯甲烷萃取。在减压下除去溶剂而得到纯的产物。MS m/z＝407.5(M+H)。
c.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-(叔丁基二甲基甲硅 烷氧基)丙酸甲酯
在圆底烧瓶中加入(R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯(5.5g，0.014mol)，甲醇(100mL，2mol)；10％重量的钯/活性炭(0.3g，0.003mol)并且将该反应体系在氢气环境(1 atm)中搅拌2h。用C盐过滤该反应体系并且在减压下除去溶剂且通过快速色谱法纯化残余物(40g，0-10％ MeOH/DCM)而得到产物，为黄色粘性团块。MS m/z＝377.5(M+H)。
d.(2R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-(2-(4-氯苯基)丙酰氨 基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)丙酸甲酯(500mg，0.001mol)，N，N-二甲基甲酰胺(2mL，0.03mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.5mL，0.003mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(1g，0.003mol)和2-(4-氯苯基)丙酸(340mg，0.0018mol)并且将该反应体系在室温下搅拌过夜并再搅拌12h。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为白色固体。MS m/z＝545.4(M+H)。
e.(2R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-(2-(4-氯苯基)丙酰氨 基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-丙酰胺
在圆底烧瓶中加入(2R)-3-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-(2-(4-二氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯(200mg，0.00032mol)和5mL在甲醇中的氨(2M)并且将该反应在密封试管内加热至70℃过夜。反应仅部分完成。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为淡黄色油状物。MS m/z＝529.2(M+H)。
f.N-(2-((R)-1-氨基-3-羟基-1-氧代丙-2-基)-1-氧代-1，2-二氢异 喹啉-5-基)-2-(4-氯苯基)-丙酰胺
将(2R)-3-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-(2-(4-二氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(60mg，0.0001mol)，四氢呋喃(3mL，0.04mol)和氟化四-正-丁基铵(0.037mL，0.00012mol)的混合物在室温下搅拌30分钟，在此过程中反应完成。在减压下除去溶剂通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为白色固体。MSm/z＝414.3(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 9.98(s，1H)，8.06(d，J＝8.0Hz，1H)，7.73(t，J＝7.81Hz，1H)，7.65(s，1H)，7.49(m，6H)，7.29(s，1H)，6.46-6.43(dd，J＝4.61&3.42Hz，1H)，5.48(t，J＝6.03Hz，1H)，5.15(s，1H)，4.06-4.01(q，J＝6.64Hz，1H)，3.98-3.96(m，2H)，1.45(d，J＝7.14Hz，3H)。
方法L
(化合物257)
2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N-(1-氧代-2-哌啶-4-基甲基-1，2-二氢-异喹啉-5-基)-乙酰胺
Figure A200780017026D00781
a.4-(5-硝基-1-氧代-1H-异喹啉-2-基甲基)-哌啶-1-甲酸-叔丁酯
在圆底烧瓶中合并5-硝基-异色烯-1-酮(2.0g，0.0094mol)，4-(氨基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯盐酸盐(4.7g，0.019mol)和甲醇(80mL，2mol)。将该混合物在回流状态下加热1.5小时。将该混合物冷却至室温并且搅拌过夜。LC-MS显示原料完全耗尽。除去挥发性物质并且通过在甲醇:二氯甲烷(0-10％)梯度中的硅胶纯化所得油状物。合并通过TLC和LC-MS测定的包含所需产物的级分并浓缩得到黄色固体(3.22g)。MS m/z＝388.1(M+1)。
b.4-((5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在圆底烧瓶中合并4-(5-硝基-1-氧代-1H-异喹啉-2-基甲基)-哌啶-1-甲酸-叔丁酯(3.22g，0.00790mol)，钯/C(0.48g，0.0045mol)和甲醇(100mL，2mol)。将该反应混合物在氢气囊中和室温下搅拌1hr。用C盐过滤该混合物，除去MeOH并且获得产物，为固体(2.68g)。m/z＝357.9(M+1)。
c.2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-N-(1-氧代-2-(哌啶-4-基甲 基)-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺盐酸盐
向4-((5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(100.0mg，0.0002658mol)在N，N-二甲基甲酰胺(5mL，0.06mol)中的溶液中加入2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(143.0mg，0.0005994mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(360.0mg，0.0009468mol)和N，N-二异丙基乙胺(305.0μL，0.001751mol)。将该反应混合物在50℃下搅拌16小时。检查LC/MS并且反应完成。加入EtOAc(100mL)并且用水(2x100mL)，饱和NaHCO3，H2O和盐水洗涤该混合物。用MgSO4干燥EtOAc层并且旋转蒸发。通过硅胶柱纯化黄色残余物并且获得纯Boc保护的产物。向Boc-保护的产物在2mL二噁烷中的溶液中加入在EtOEt中的2M HCl(15mL)。然后将该混合物在室温下搅拌2小时而得到最终的化合物，为亮色固体(65.3mg)。MS m/z＝478.2(M+1)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 10.25(s，1H)，8.83(s，1H)，8.08(d，J＝7.5Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.82(d，J＝6.9Hz，1H)，7.72(bs，2H)，7.55-7.40(m，2H)，6.71(d，J＝6.8Hz，1H)，4.20-3.80(m，4H)，3.28-3.15(m，2H)，2.90-2.70(m，2H)，2.10(bs，1H)，1.80-1.60(m，2H)，1.52-1.35(m，2H)。
方法M
(化合物258)
N-[2-(3-氨基-2-氯甲基-丙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺
a.3-((5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔 丁酯
在圆底烧瓶中合并5-硝基-异色烯-1-酮(0.5g，0.002mol)，3-(氨基甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.975g，0.00523mol)，甲醇(15mL，0.37mol)并且将该混合物在回流状态下加热2小时。将该混合物冷却至室温。LC-MS显示原料完全耗尽。除去挥发性物质并且通过在甲醇:二氯甲烷(0-10％)梯度和在EtoAc:己烷(30-80％)中的硅胶将所得油状物纯化两次。获得淡黄色固体(0.56g)。m/z＝360.0(M+1)。
b.3-(5-氨基-1-氧代-1H-异喹啉-2-基甲基)-氮杂环丁烷-1-甲酸-叔 丁酯
在圆底烧瓶中合并3-((5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.56g，0.0015mol)，钯/C(0.16g，0.0015mol)和甲醇(50mL，1mol)。将该反应混合物在氢气囊中和室温下搅拌过夜。用C盐过滤该混合物，除去MeOH并且通过硅胶柱纯化两次(DCM:MeOH和EtOAc:己烷)。获得白色固体(190mg)。MS m/z＝330.0(M+1)。
c.N-(2-(3-氨基-2-(氯甲基)丙基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5- 基)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
向3-(5-氨基-1-氧代-1H-异喹啉-2-基甲基)-氮杂环丁烷-1-甲酸-叔丁酯(96.0mg，0.000277mol)在N，N-二甲基甲酰胺(5mL，0.06mol)中的溶液中加入2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(150.0mg，0.0006287mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(230.0mg，0.0006049mol)和N，N-二异丙基乙胺(215μL，0.00123mol)。将该反应混合物在50℃下搅拌16小时。检查LC/MS并且发现反应完成。加入EtOAc(100mL)并且用水(2 x 100mL)，饱和NaHCO3，H2O和盐水洗涤该混合物。用MgSO4干燥EtOAc层并且旋转蒸发。通过硅胶柱纯化黄色残余物而得到纯的Boc保护的产物。
向Boc-保护的产物在2mL二噁烷中的溶液中加入在EtOEt中的2M HCl(15mL)并且在室温下搅拌2小时而得到标题产物，通过HPLC纯化。MS m/z＝487.2(M+1)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ10.15(s，1H)，8.08(d，J＝8.0Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.84(d，J＝7.5Hz，1H)，7.75-7.65(m，2H)，7.55-7.42(m，2H)，6.73(d，J＝7.6Hz，1H)，5.30-4.30(bs，2H)，4.08(dd，J＝13.4，7.3Hz，1H)，3.97(dd，J＝13.5，6.6Hz，1H)，3.93(s，2H)，3.80(dd，J＝11.2，4.8Hz，1H)，3.73(dd，J＝11.2，5.1Hz，1H)，2.67(d，J＝6.0Hz，2H)，2.45-2.30(m，1H)。
方法N
(化合物267)
(R)-2-{5-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-丙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺
a.(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
向5-硝基-异色烯-1-酮(2g，0.01mol)在甲醇(40mL，1mol)中的溶液中加入(R)-2-氨基丙酰胺盐酸盐(2.0g，0.016mol)和三乙胺(2.6mL，0.019mol)并且在52℃下搅拌3hr。产物(黄色固体)沉淀出来并且进行下一步反应。MS m/z＝262.1(M+1)。
b.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在圆底烧瓶中合并(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(5.0g，0.018mol)，钯/C(0.3g，0.003mol)和甲醇(200mL，5mol)(加入约80mL EtOAc以便溶解反应剂)。将该反应混合物在氢气囊中和室温下搅拌40min。用C盐过滤该混合物，除去MeOH并且获得固体(4.02g)。MS m/z＝232.4(M+1)。
c.N-(2-((R)-1-氨基-1-氧代丙-2-基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5- 基)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)丙酰胺
向(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(183.1mg，0.0007522mol)在N，N-二甲基甲酰胺(6mL，0.08mol)中的溶液中加入2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)丙酸(110.0mg，0.0004137mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(360mg，0.00095mol)和N，N-二异丙基乙胺(305μL，0.00175mol)。将该反应混合物在50℃下搅拌过夜。检查LC/MS并且反应完成。在后处理中，向反应溶液中加入EtOAc(100mL)并且用水(2x100mL)，饱和NaHCO3，H2O和盐水洗涤该溶液。用MgSO4干燥该混合物并且旋转蒸发。通过HPLC纯化残余物。回收产物，为固体。MS m/z＝466.1(M+1)。
1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 10.08(s，1H)，8.07(d，J＝7.9Hz，1H)，7.92(s，1H)，7.80-70(m，3H)，7.63(s，1H)，7.50-7.40(m，2H)，7.23(s，1H)，6.51(dd，J＝7.6，4.8Hz，1H)，5.47(q，J＝7.2Hz，1H)，4.16(q，J＝7.0Hz，1H)，1.58-1.45(m，6H)。
方法O
(化合物270)
(R)-2-{5-[2-(3，4-二氯-苯基)-丙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-3-羟基-N-甲基-丙酰胺
Figure A200780017026D00821
a.(R)-3-羟基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯
在圆底烧瓶中加入5-硝基-异色烯-1-酮(10g，0.05mol)，甲醇(200mL，5mol)，三乙胺(18mL，0.13mol)和(R)-2-氨基-3-羟基丙酸甲酯盐酸盐(9.8g，0.063mol)，由此该反应体系变均匀。然后将该反应体系在70℃下加热过夜。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物(120g硅胶，0-10％ MeOH/DCM)而获得产物，为黄色固体。MSm/z＝293.5(M+H)。
b.(R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉 -2(1H)-基)丙酸甲酯
在圆底烧瓶中加入(R)-3-羟基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯(4g，0.01mol)，二氯甲烷(40mL，0.5mol)和1H-咪唑(1.6g，0.023mol)并且在0℃下加入叔-丁基二甲基甲硅烷基氯(2.3g，0.015mol)，且将该反应体系温热至室温并且搅拌16h。用水使该反应混合物淬灭并且用二氯甲烷萃取。在减压下除去溶剂以便回收纯的产物，为橙色固体。MS m/z＝407.5(M+H)。
c.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-(叔丁基二甲基甲硅 烷氧基)丙酸甲酯
在圆底烧瓶中加入(R)-3-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯(5.5g，0.014mol)，甲醇(100mL，2mol)和10％重量钯/活性炭(0.3g，0.003mol)并且将该反应体系在氢气环境(1atm)中搅拌2h。用C盐过滤该反应体系，在减压下除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物(40g硅胶，0-10％MeOH/DCM)而得到产物，为黄色粘性团块。MS m/z＝377.5(M+H)。
d.(2R)-3-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-(2-(3，4-二氯苯基)丙 酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)丙酸甲酯(300mg，0.0008mol)，2-(3，4-二氯苯基)丙酸(200mg，0.00092mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(600mg，0.002mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.3mL，0.002mol)和N，N-二甲基甲酰胺(2mL，0.03mol)并且将该反应体系在室温下搅拌过夜。反应未完成。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为固体。MS m/z＝578.3(M+H)。
e.(2R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-(2-(3，4-二氯苯基)丙 酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-N-甲基丙酰胺
将(2R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-(2-(3，4-二氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯(200mg，0.0003mol)，5mL甲胺和四氢呋喃(2M)的混合物在密封试管内加热至70℃下过夜。反应仅部分完成。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为淡黄色油状物。MS m/z＝577.4(M+H)。
f.(2R)-2-(5-(2-(3，4-二氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)- 基)-3-羟基-N-甲基丙酰胺
在圆底烧瓶中加入(2R)-3-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(5-(2-(3，4-二氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-N-甲基丙酰胺(60mg，0.0001mol)，四氢呋喃(3mL，0.04mol)和氟化四-正-丁基铵(0.037mL，0.00012mol)并且将该反应体系在室温下搅拌30分钟，在此过程中反应完成。在减压下除去溶剂通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为白色固体。MS m/z＝463.3(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 10.02(s，1H)，8.12(m，1H)，8.06(d，J＝8.26Hz，1H)，7.74(t，J＝7.29Hz，1H)，7.68(d，J＝1.82Hz，1H)，7.64(d，J＝8.43Hz，1H)，7.51(dd，J＝7.97&3.17Hz，1H)，7.46-7.42(m，2H)，6.37(dd，J＝5.04&2.04Hz，1H)，5.47(t，J＝6.94Hz，1H)，5.15-5.13(m，1H)，4.05(q，J＝7.24Hz，1H)，3.95-3.92(m，2H)，2.57(d，J＝4.25Hz，3H)，1.47(d，J＝7.22Hz，3H)。
方法P
(化合物273)
(R)-2-(4-氯-苯基)-N-[(R)-2-(1-羟甲基-2-甲基-丙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-丙酰胺
Figure A200780017026D00841
a.(R)-4-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)戊基乙酸酯
在圆底烧瓶中合并5-硝基-异色烯-1-酮(5.50g，0.0259mol)，(R)-2-氨基-4-甲基戊-1-醇(6.07g，0.0518mol)和甲醇(160mL，4.1mol)。将该混合物在回流状态下加热3小时。将该混合物冷却，在真空中减少并且用高度真空干燥约1小时。加入二氯甲烷(200mL，3mol)和乙酰氯(4.1g，0.052mol)并且将该混合物在50℃下加热3小时。在真空中减少所得溶液并且纯化。通过柱色谱法，使用甲醇：二氯甲烷(0-3％)梯度纯化该混合物。在真空中减少合并的纯级分而得到标题化合物，为深黄色固体，将其不经进一步纯化用于下一步。
b.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-4-甲基戊基乙酸酯
在圆底烧瓶中合并(R)-4-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)戊基乙酸酯(3.00g，0.00903mol)，钯/C(0.1g，0.0009mol)和甲醇(170mL，4.1mol)。将该反应混合物在氢气环境中和室温下搅拌并且监测进程。在40分钟时，根据在LC-MS分析中不存在任何原料判断反应完成。使用DryDisk系统将该混合物过滤两次以便除去催化剂。在真空中除去挥发性物质并且通过柱色谱法，使用乙酸乙酯:己烷(0-100％)梯度纯化该混合物。在真空中减少合并的纯级分而得到标题化合物，为黄色油状物。
c.(R)-2-(4-氯-苯基)-N-[2-((R)-1-羟甲基-3-甲基-丁基)-1-氧代 -1，2-二氢-异喹啉-5-基]-丙酰胺
在20ml反应瓶中合并(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-4-甲基戊基乙酸酯(0.23g，0.00076mol)，(R)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.175g，0.000949mol)N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.58g，0.0015mol)N，N-二异丙基乙胺(0.26mL，0.0015mol)和N，N-二甲基甲酰胺(4mL，0.06mol)。将该混合物在50℃下加热3小时并且使其冷却至室温。将该混合物倾倒在饱和碳酸氢钠(200ml)上并且用乙酸乙酯(3 X 100ml)萃取。用硫酸钠干燥合并的萃取物并且在真空中减少至得到淡棕色油状物。将该油溶于甲醇(10ml)并且加入2N NaOH(10ml)。将该混合物搅拌过夜。除去挥发性物质并且用二氯甲烷(2 X 20ml)萃取该混合物。在真空中减少合并的萃取物并且通过反相制备型HPLC，使用乙腈:水梯度在pH10下纯化该混合物。在真空中减少合并的纯级分而得到标题化合物，为黄色固体。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.97(s，1H)，8.07(d，1H，J＝7.93Hz)，7.23(d，1H，J＝7.67Hz)，7.48-7.41(m，6H)，6.47(t，1H，J＝7.57Hz)，4.81(m，1H)，4.63(br′s′，1H)，4.03(q，1H，J＝6.95Hz)，3.83-3.77(m，1H)，3.72-3.66(m，1H)，2.16-2.10(m，1H)，1.45(dd，3H，J＝7.03Hz)，1.03(d，3H，J＝6.45Hz)，0.66(d，3H，J＝6.67Hz)。
方法Q
(化合物276)
(R)-2-{5-[(S)-2-(4-氯-苯基)-丙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-3，N-二甲基-丁酰胺
Figure A200780017026D00861
a.(R)-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酸甲酯
将5-硝基-异色烯-1-酮(5g，0.03mol)和D-缬氨酸甲酯盐酸盐(5g，0.03mol)在含有三乙胺(5g，0.05mol)的甲醇(40mL，1mol)中回流2小时。通过旋转蒸发器除去挥发性物质并且通过快速柱色谱法(40g硅胶，0-30％ EtOAc/己烷)纯化残余物而得到棕色油状物。MSm/z 305.2(M+H)。
b.(R)-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酸
在0℃下将(R)-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酸甲酯(0.6g，0.002mol)与氢氧化锂(0.09g，0.004mol)一起在叔丁醇(4mL，0.04mol)和水(2mL，0.1mol)中搅拌3小时。加入1N HCl，直到pH<7，且然后用CH2Cl2(40mL x 3)萃取该反应混合物。用MgSO4干燥有机层，过滤，通过快速色谱法纯化(12g硅胶，0-50％EtOAc/己烷)而得到黄色油状物。MS m/z 291.0(M+H)+
c.(R)-3，N-二甲基-2-(5-硝基-1-氧代-1H-异喹啉-2-基)-丁酰胺
在室温下将(R)-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酸(2g，0.007mol)，甲胺(7mL，0.01mol)，1-羟基苯并三唑水合物(2g，0.01mol)，N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(3g，0.01mol)，N，N-二异丙基乙胺(4g，0.03mol)在二氯甲烷(20mL，0.3mol)中搅拌16小时。用CH2Cl2(200mL)稀释该反应混合物，用饱和NaHCO3洗涤，用MgSO4干燥，过滤，通过快速色谱法纯化(40g硅胶，0-50％ EtOAc/己烷)而得到黄色固体。m/z 304.2(M+H)+。
d.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-N，3-二甲基丁酰胺
在室温下和氢气环境(气囊)中将(R)-3，N-二甲基-2-(5-硝基-1-氧代-1H-异喹啉-2-基)-丁酰胺(1.4g，0.0045mol)与10％wt.钯/碳酸钙(1.4g，0.00068mol)一起在甲醇(100mL，2mol)中搅拌1h。过滤出催化剂，将滤液浓缩至干而得到黄色固体。MS m/z 273.9(M+H)+。
e.(R)-2-(5-((S)-2-(4-氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)- 基)-N，3-二甲基丁酰胺
在室温下(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-N，3-二甲基丁酰胺(0.2g，0.0007mol)，(S)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.16g，0.00088mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.56g，0.0015mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.4g，0.003mol)在二氯甲烷(3mL，0.05mol)和N，N-二甲基甲酰胺(1mL，0.01mol)中搅拌一个周末。用CH2Cl2(100mL)稀释该反应混合物，用NaHCO3(20mL x 3)洗涤，用Na2SO4干燥，通过快速色谱法(12g硅胶，0-90％ EtOAc/己烷)且然后使用制备型HPLC纯化而得到白色固体。1HNMR(CDCl3)δ：9.23(d，J＝8.1Hz，1H)，8.00(t，J＝7.5Hz，1H)，7.52-7.36(m，6H)，7.04(br，1H)，6.17(br，1H)，6.03-6.00(m，1H)，5.07(d，J＝11.4Hz，1H)，3.82(q，J＝7.0Hz，1H)，2.76(d，J＝4.8Hz，3H)，2.56-2.48(m，1H)，1.65(dd，J＝1.8，7.1Hz，3H)，1.06(d，J＝6.4Hz，3H)，0.75(dd，J＝2.6，6.6Hz，3H)。MS m/z 440.0(M+H)+。
方法R
(化合物278)
(S)-N-[2-((R)-氨基甲酰基-苯基-甲基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(3，4-二氯-苯基)-丙酰胺
a.(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙酰胺
在圆底烧瓶中加入5-硝基-异色烯-1-酮(2g，0.01mol)，甲醇(20mL，0.5mol)，三乙胺(3mL，0.02mol)和(R)-2-氨基-2-苯基乙酰胺盐酸盐(2.3g，0.012mol)并且将该反应体系在50℃下搅拌3小时。原料消失并且在减压下除去溶剂且通过快速色谱法纯化残余物(40g硅胶，0-10％ MeOH/DCM)而得到产物，为棕色固体。MS m/z＝324.3(M+H)。
b.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙酰胺
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙酰胺(2.3g，0.0071mol)，甲醇(30mL，0.7mol)和10％重量钯/活性炭(110mg，0.00090mol)并且抽出烧瓶中的空气并且在氢气环境(1atm)中搅拌1.5小时。用C盐过滤该反应混合物并且在压力下除去溶剂。通过快速色谱法纯化残余物(40g硅胶，0-10％ MeOH/DCM)而得到产物，为淡黄色固体。MS m/z＝294.5(M+H)。
c.(S)-N-(2-((R)-2-氨基-2-氧代-1-苯基乙基)-1-氧代-1，2-二氢异 喹啉-5-基)-2-(3，4-二氯苯基)-丙酰胺
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙酰胺(120mg，0.00041mol)，N，N-二甲基甲酰胺(1.5mL，0.019mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.0008mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.3g，0.0008mol)和(S)-2-(3，4-二氯苯基)丙酸(0.11g，0.00049mol)并且将该反应体系在室温下搅拌过夜。除去溶剂并且通过快速色谱法且还用制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为白色固体。MS m/z＝495.2(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 9.98(s，1H)，8.13-8.11(d，J＝8.37Hz，1H)，8.03(s，1H)，7.74-7.72(d，J＝7.90Hz，1H)，7.64-7.63(d，J＝2.06Hz，1H)，7.61-7.59(d，J＝7.94Hz，1H)，7.55(s，1H)，7.50-7.33(m，6H)，7.00-6.98(d，J＝8.02Hz，1H)，6.74(s，1H)，6.39-6.37(d，J＝8.02Hz，1H)，4.02-3.96(q，J＝7.01Hz，1H)，1.45-1.43(d，J＝7.55Hz，3H)。
方法S
(化合物279)
(S)-N-[2-((R)-氨基甲酰基-苯基-甲基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(4-氯-苯基)-丙酰胺
Figure A200780017026D00891
a.(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙酰胺
在圆底烧瓶中加入5-硝基-异色烯-1-酮(2g，0.01mol)，甲醇(20mL，0.5mol)，三乙胺(3mL，0.02mol)和(R)-2-氨基-2-苯基乙酰胺盐酸盐(2.3g，0.012mol)并且将该反应体系在50℃下加热3小时。原料消失并且在减压下除去溶剂且通过快速色谱法纯化残余物(40g硅胶，0-10％ MeOH/DCM)而得到产物，为棕色固体。MS m/z＝324.3(M+H)。
b.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙酰胺
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙酰胺(2.3g，0.0071mol)，甲醇(30mL，0.7mol)，10％重量钯/活性炭(110mg，0.00090mol)并且抽出烧瓶中的空气且在氢气环境(1atm)中搅拌1.5h。用C盐过滤该反应混合物并且在压力下除去溶剂。通过快速色谱法纯化残余物(40g硅胶，0-10％MeOH/DCM)而得到产物，为淡黄色固体。MS m/z＝294.5(M+H)。
c.(S)-N-(2-((R)-2-氨基-2-氧代-1-苯基乙基)-1-氧代-1，2-二氢异 喹啉-5-基)-2-(4-氯苯基)-丙酰胺
将(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙酰胺(120mg，0.00041mol)，N，N-二甲基甲酰胺(1.5mL，0.019mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.0008mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.3g，0.0008mol)和(S)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.091g，0.00049mol)的混合物在室温下搅拌过夜。除去溶剂并且通过快速色谱法(12g硅胶，0-10％ MeOH/DCM)并且还通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为灰白色固体。MS m/z＝460.3(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 9.95(s，1H)，8.13-8.11(d，J＝7.99Hz，1H)，8.02(s，1H)，7.74-7.72(d，J＝7.60Hz，1H)，7.71-7.69(d，J＝8.03Hz，1H)，7.55(s，1H)，7.50-7.32(m，10H)，6.99-6.97(dd，J＝7.89&1.86Hz，1H)，6.74(s，1H)，6.39-6.37(d，J＝8.02Hz，1H)，4.00-3.94(q，J＝6.97Hz，1H)，1.44-1.41(d，J＝7.11Hz，3H)。
方法T
(化合物281)
(R)-2-{5-[(S)-2-(4-氯-苯基)-丙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-N-环丙基-3-甲基-丁酰胺
Figure A200780017026D00911
a.(R)-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酸甲酯
将5-硝基-异色烯-1-酮(5g，0.03mol)和D-缬氨酸甲酯盐酸盐(5g，0.03mol)在含有三乙胺(5g，0.05mol)的甲醇(40mL，1mol)中回流2小时。通过旋转蒸发器除去挥发性物质并且通过快速柱色谱法纯化残余物(40g硅胶，0-30％ EtOAc/己烷)而得到棕色油状物。MSm/z 305.2(M+H)+。
b.(R)-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酸
在0℃下将(R)-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酸甲酯(0.6g，0.002mol)与氢氧化锂(0.09g，0.004mol)在叔丁醇(4mL，0.04mol)和水(2mL，0.1mol)中搅拌3小时。加入1N HCl，直到pH<7，且然后用CH2Cl2(40mL x 3)萃取该反应混合物。用MgSO4干燥有机层，过滤，通过快速色谱法纯化(12g硅胶，0-50％ EtOAc/己烷)而回收黄色油状物。MS m/z 291.0(M+H)+。
c.(R)-N-环丙基-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酰 胺
在室温下将(R)-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酸(4g，0.01mol)，1-羟基苯并三唑水合物(2.5g，0.016mol)，N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(3.2g，0.016mol)，环丙基胺(0.91g，0.016mol)在二氯甲烷(100mL，2mol)中搅拌16小时。用CH2Cl2(200mL)稀释该反应混合物，用饱和NaHCO3洗涤，用MgSO4干燥，过滤，通过快速色谱法纯化(40g硅胶，0-50％ EtOAc/己烷)而得到黄色固体。MS m/z 330.3(M+H)+。
d.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-N-环丙基-3-甲基丁酰 胺
在室温下和氢气环境(气囊)中将(R)-N-环丙基-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酰胺(1.3g，0.0039mol)与10％wt.钯/碳酸钙(0.2g，0.0001mol)一起在甲醇(60mL，1mol)中搅拌1h。过滤出催化剂，将滤液浓缩至干而得到棕色油状物。MS m/z 301.1(M+H)+。
e.(R)-2-(5-((S)-2-(4-氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)- 基)-N-环丙基-3-甲基丁酰胺
在室温下将(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-N-环丙基-3-甲基丁酰胺(0.2g，0.0007mol)，(S)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.16g，0.00088mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.56g，0.0015mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.4g，0.003mol)在N，N-二甲基甲酰胺(3mL，0.04mol)中搅拌一个周末。用CH2Cl2(100mL)稀释该反应混合物，用NaHCO3(20mL x 3)洗涤，用Na2SO4干燥，通过快速色谱法(12g硅胶，0-90％ EtOAc/己烷)且然后使用制备型HPLC纯化而得到白色固体。1H NMR(CDCl3)δ：8.22(d，J＝8.0Hz，1H)，8.00(t，J＝7.4Hz，1H)，7.52-7.37(m，6H)，7.14(br，1H)，6.35(br，1H)，6.06-6.03(m，1H)，5.01(d，J＝11.3Hz，1H)，3.82(q，J＝7.2Hz，1H)，2.65-2.61(m，1H)，2.52-2.32(m，1H)，1.64(d，J＝11.1Hz，3H)，1.06(d，J＝6.4Hz，3H)，0.90-0.67(m，5H)，0.51-0.41(m，2H)。MS m/z 465.8(M+H)+。
方法U
(化合物284)
(R)-2-{5-[(R)-2-(4-氯-苯基)-丙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-3-甲基-丁酰胺
Figure A200780017026D00931
a.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-甲基丁酰胺
将5-硝基-异色烯-1-酮(2g，0.01mol)和H-D-Val-NH2HCl(1.9g，0.012mol)在含有三乙胺(5g，0.05mol)的甲醇(40mL，1mol)中搅拌2小时。通过旋转蒸发器除去挥发性物质并且通过快速柱色谱法纯化残余物(40g硅胶，0-30％ EtOAc/己烷)而得到黄色固体。MS m/z290.2(M+H)+。
b.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-甲基丁酰胺
将在室温下和氢气环境(气囊)中将(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-甲基丁酰胺(1.38g，0.00477mol)与10％wt.钯/碳酸钙(0.2g，0.0001mol)在甲醇(60mL，1mol)中搅拌1h。过滤出催化剂，浓缩滤液至干而得到棕色固体。m/z 260.2(M+H)+。
c.(R)-2-(5-((R)-2-(4-氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)- 基)-3-甲基丁酰胺
在室温下将(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-甲基丁酰胺(0.2g，0.0007mol)，(R)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.16g，0.00088mol)N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.33g，0.00088mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.4g，0.003mol)在N，N-二甲基甲酰胺(3mL，0.04mol)中搅拌一个周末。用CH2Cl2(100mL)稀释该反应混合物，用NaHCO3(20mL x 3)洗涤，用Na2SO4干燥，通过快速色谱法(12g硅胶，0-90％ EtOAc/己烷)且然后通过制备型HPLC纯化而得到白色固体。1H NMR δ(CDCl3)δ：8.24(d，J＝8.1Hz，1H)，7.99(t，J＝7.2Hz，1H)，7.53-7.33(m，6H)，7.07(br，1H)，6.26(br，1H)，6.06-6.03(m，1H)，5.31(br，1H)，5.14(d，J＝11.4Hz，1H)，3.82(q，J＝7.2Hz，1H)，2.55-2.48(m，1H)，1.62(d，J＝11.1Hz，3H)，1.13(d，J＝6.4Hz，3H)，0.76(dd，J＝2.1，6.6Hz，3H)。MS m/z 426.2(M+H)+。
方法V
(化合物308)
(R)-2-{5-[(S)-2-(4-氯-苯基)-丙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-N-环丙基-丙酰胺
Figure A200780017026D00941
a.(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯
将5-硝基-异色烯-1-酮(5g，0.03mol)和D-丙氨酸甲酯(4g，0.04mol)在甲醇(40mL，1mol)中回流2小时。通过旋转蒸发器除去挥发性物质并且通过快速柱色谱法纯化残余物(330g硅胶，0-50％EtOAc/己烷)而得到黄色固体。MS m/z 277.2(M+H)+。
b.(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸
将(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯(5.2g，0.019mol)和碘化锂(10g，0.08mol)在乙酸乙酯(200mL，2mol)中回流64小时。过滤出固体并且浓缩滤液且得到棕色固体。MS m/z264.1(M+H)+。
c.(R)-N-环丙基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在室温下将(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸(3g，0.01mol)，1-羟基苯并三唑水合物(2.1g，0.014mol)，N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(2.6g，0.014mol)，N，N-二异丙基乙胺(4g，0.03mol)在二氯甲烷(100mL，2mol)中搅拌16小时。用CH2Cl2(200mL)稀释该反应混合物，用饱和NaHCO3洗涤，用MgSO4干燥，过滤，通过快速色谱法纯化(40g硅胶，0-50％ EtOAc/己烷)并且得到黄色固体。MS m/z 302.3(M+H)+。
d.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-N-环丙基丙酰胺
在室温下和氢气(气囊)环境中将(R)-N-环丙基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(0.6g，0.002mol)与10％wt.钯/碳酸钙(0.1g，0.00005mol)在甲醇(30mL，0.7mol)中一起搅拌1小时以上。过滤催化剂，浓缩滤液至干而得到棕色固体。MS m/z 271.7(M+H)+。
e.(S)-2-(4-氯苯基)-N-(2-((R)-1-(环丙基氨基)-1-氧代丙-2- 基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)丙酰胺
在室温下将(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-N-环丙基丙酰胺(0.2g，0.0007mol)，(S)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.16g，0.00088mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.33g，0.00088mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.4g，0.003mol)在N，N-二甲基甲酰胺(3mL，0.04mol)中搅拌1周以上。用CH2Cl2(100mL)稀释该反应混合物，用NaHCO3(20mL x 3)洗涤，用Na2SO4干燥，通过快速色谱法(12g硅胶，0-90％ EtOAc/己烷)且然后通过制备型HPLC纯化而得到白色固体。1H NMRδ(CDC l3)δ：8.23(d，J＝8.5Hz，1H)，7.95(d，J＝7.9Hz，1H)，7.52-7.39(m，5H)，7.22(d，J＝7.6Hz，1H)，7.09(br，1H)，6.44(br，1H)，6.06-6.03(m，1H)，5.58(q，J＝7.0Hz，1H)，3.83(q，J＝6.7Hz，1H)，2.63(br，1H)，1.64(d，J＝7.2Hz，3H)，1.56(d，J＝5.2Hz，3H)，0.78-0.67(m，2H)，0.51-0.40(m，2H)。MS m/z 438.3(M+H)+。
方法W
(化合物315)
(S)-N-{2-[氨基甲酰基-(4-氯-苯基)-甲基]-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基}-2-(4-氯-苯基)-丙酰胺
Figure A200780017026D00961
a.2-(4-氯苯基)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙酸甲酯
在圆底烧瓶中加入5-硝基-异色烯-1-酮(2.5g，0.013mol)，甲醇(40mL，1mol)，三乙胺(4mL，0.03mol)和2-氨基-2-(4-氯苯基)乙酸甲酯盐酸盐(4.0g，0.017mol)并且将该反应体系在50℃下加热4小时。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物(40g硅胶，0-10％MOH/DCM)而得到产物，为黄色固体。MS m/z＝373.3(M+H)。
b.2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-(4-氯苯基)乙酸甲酯
在圆底烧瓶中加入在水中(60mL，3mol)的2-(4-氯苯基)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙酸甲酯(4.2g，0.011mol)乙醇(60mL，1mol)和氯化铵(6g，0.1mol)并且在80℃下加热该反应体系且间隔5分钟分四部分加入铁(2g，0.04mol)。将该反应体系在该温度下再加热1h并且冷却至室温且倾入200ml二氯甲烷并且萃取。除去溶剂而得到产物，为淡棕色固体。MS m/z＝343.0(M+H)。
c.2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-(4-氯苯基)乙酰胺
在压力管中加入在甲醇(7mL，2M溶液)中的2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-(4-氯苯基)乙酸甲酯(1.35g，0.00394mol)和氨并且将该反应体系在70℃下加热16小时。将该反应混合物冷却至室温并且检查完成情况。反应仅完成20％。再将该反应体系加热6小时未显示出有助于反应进展。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为淡黄色固体。MS m/z＝328.2(M+H)。
d.(2S)-N-(2-(2-氨基-1-(4-氯苯基)-2-氧代乙基)-1-氧代-1，2-二 氢异喹啉-5-基)-2-(4-氯苯基)丙酰胺
在圆底烧瓶中加入2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-(4-氯苯基)乙酰胺(100mg，0.3mmol)，N，N-二甲基甲酰胺(1mL，10mmol)，N，N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.6mmol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(200mg，0.6mmol)和(S)-2-(4-氯苯基)丙酸(68mg，0.37mmol)并且将该反应体系在室温下搅拌过夜。除去溶剂并且通过快速色谱法(12g硅胶，0-10％MeOH/DCM)，随后通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为灰白色固体。MS m/z＝477.1(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 9.97(s，1H)，8.12-8.10(d，J＝8.18Hz，1H)，8.03(s，1H)，7.75-7.70(dd，J＝8.18&5.63Hz，1H)，7.59(s，1H)，7.501-7.34(m，9H)，7.03-7.00(d，J＝8.01Hz，1H)，6.71(s，1H)，6.40-6.38(d，J＝8.27Hz，1H)，4.00-3.94(q，J＝6.97Hz，1H)，1.44-1.41(d，J＝7.11Hz，3H)。
方法X
(化合物316)
(R)-2-{6-氯-1-氧代-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺
Figure A200780017026D00971
a.(R)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在圆底烧瓶中加入6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(950mg，0.0042mol)，甲醇(30mL，0.7mol)，三乙胺(0.64mL，0.0046mol)和(R)-2-氨基丙酰胺盐酸盐(0.58g，0.0046mol)并且将该反应体系加热至55℃下过夜。反应进行至90％完成。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物(40g硅胶，0-10％MeOH/DCM)而得到纯产物，为淡黄色固体。MS m/z＝296.4(M+H)。
b.(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在圆底烧瓶中加入在水(4mL，0.2mol)中的(R)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(120mg，0.00040mol)，乙醇(4mL，0.07mol)和氯化铵(200mg，0.004mol)并且将该反应体系在85℃下加热且间隔5分钟分两部分加入铁(90mg，0.002mol)。将该反应体系在该温度下搅拌30分钟并且加入乙酸乙酯且滗析。除去溶剂而得到产物，为黄色固体。MS m/z＝266.2(M+H)。
c.(R)-2-(6-氯-1-氧代-5-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)异喹啉 -2(1H)-基)丙酰胺
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(50mg，0.0002mol)，N，N-二甲基甲酰胺(1mL，0.01mol)，N，N-二异丙基乙胺(60μL，0.0004mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(100mg，0.0004mol)和2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(46mg，0.00022mol)并且将该反应体系在室温下搅拌过夜。反应仅完成60％。再搅拌6小时不会改善反应。除去溶剂通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为灰白色固体。MS m/z＝452.2(M+H)。1H NMR(400MHz；DMF)δ 10.41(s，1H)，8.34(d，J＝8.71Hz，1H)，7.93(d，J＝8.22Hz，1H)，7.84(d，J＝10.96Hz，1H)，7.80(t，J＝9.13Hz，1H)，7.68(d，J＝8.53Hz，1H)，7.44(bs，1H)，6.62(d，J＝7.89Hz，1H)，5.67-5.61(q，J＝7.24Hz，1H)，4.09(s，2H)，1.72(d，J＝7.50Hz，3H)。
方法Y
(化合物322)
(R)-2-{5-[(S)-2-(4-氯-苯基)-丙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-丙酸
a.(R)-2-(5-((S)-2-(4-氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙酸
在0℃下将(R)-2-(5-((S)-2-(4-氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酸甲酯(0.23g，0.00050mol)与氢氧化锂(0.03g，0.001mol)在叔丁醇(4mL，0.04mol)和水(2mL，0.1mol)中搅拌1小时。加入1N HCl，直到pH<7并且用CH2Cl2(40mL x 3)萃取该反应混合物。用MgSO4干燥有机层，过滤，通过快速色谱法纯化(12g硅胶，0-50％ EtOAc/己烷)并且得到淡黄色固体。1H NMR δ(CDCl3)δ：8.05-8.01(m，1H)，7.89-7.62(m，2H)，7.38-7.29(m，5H)，6.89-6.80(m，1H)，6.04-5.94(m，1H)，5348-5.39(m，1H)，3.86(d，J＝6.6Hz，1H)，3.03-2.88(m，6H)。MS m/z399.0(M+H)+。
方法Z
(化合物323)
(R)-2-{5-[(S)-2-(4-氯-苯基)-丙酰氨基]-1-氧代-1H-异喹啉-2-基}-3-甲基-丁酸
Figure A200780017026D00992
a.(R)-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酸甲酯
将5-硝基-异色烯-1-酮(5g，0.03mol)和D-缬氨酸甲基酯盐酸盐(5g，0.03mol)在含有三乙胺(5g，0.05mol)的甲醇(40mL，1mol)酯回流2小时。通过旋转蒸发器除去挥发性物质并且通过快速柱色谱法纯化残余物(40g硅胶，0-30％ EtOAc/己烷)且得到棕色油状物。MS m/z305.2(M+H)+。
b.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-甲基丁酸甲酯
在室温下和氢气(气囊)环境中将(R)-3-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丁酸甲酯(2.8g，0.0091mol)与10％wt.钯/碳酸钙(0.23g，0.00011mol)在甲醇(40mL，1mol)中搅拌1h。过滤催化剂，浓缩滤液至干并且得到黄色油状物。MS m/z274.8(M+H)+。
c.(R)-2-(5-((S)-2-(4-氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)- 基)-3-甲基丁酸甲酯
在室温下将(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-甲基丁酸甲酯(0.3g，0.001mol)，(S)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.4g，0.002mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.8g，0.002mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.6g，0.004mol)在N，N-二甲基甲酰胺(3mL，0.04mol)中搅拌1周以上。用CH2Cl2(100mL)稀释该反应混合物，用NaHCO3(20mL x 3)洗涤，用Na2SO4干燥，通过快速色谱法(12g硅胶，0-90％ EtOAc/己烷)且然后通过制备型HPLC纯化而得到淡黄色油状物。MS m/z441.3(M+H)+。
d.(R)-2-(5-((S)-2-(4-氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)- 基)-3-甲基丁酸
在0℃下(R)-2-(5-((S)-2-(4-氯苯基)丙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-3-甲基丁酸甲酯(0.43g，0.00088mol)与氢氧化锂(0.05g，0.002mol)在叔丁醇(6mL，0.06mol)和水(3mL，0.2mol)中搅拌1小时。加入1N HCl，直到pH<7且然后用CH2Cl2(40mL x 3)萃取该反应混合物。用MgSO4干燥有机层，过滤，通过快速色谱法纯化(12g硅胶，0-50％ EtOAc/己烷)并且得到淡黄色固体。1H NMR δ(CDCl3)δ：8.17(br，1H)，7.86(br，1H)，7.52-7.29(m，6H)，7.03(br，1H)，6.09-6.05(m，1H)，5.00-4.87(m，1H)，3.87-3.82(m，1H)，2.70-2.60(m，1H)，1.64(d，J＝7.0Hz，3H)，1.14(d，J＝6.5Hz，3H)，0.78(d，J＝6.4Hz，3H)。MS m/z427.1(M+H)+。
方法AA1
(化合物333)
2-(3，4-二氯-苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺
Figure A200780017026D01011
a.(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
将5-硝基-异色烯-1-酮(6.81g，0.0320mol)，(2R)-2-氨基丙-1-醇(5.0mL，0.064mol)和甲醇(210mL，5.1mol)的混合物在回流状态下加热1小时。加入10ml三乙胺并且将使该反应混合物降至60℃且在该温度下搅拌3小时。LC-MS分析显示原料耗尽。在真空下减少该反应混合物并且在高度真空中放置该反应烧瓶1小时。将黑色残余物溶于二氯甲烷(200mL，2mol)和N，N-二甲基甲酰胺(7.6mL，0.098mol)的混合物。加入乙酰氯(9.1mL，0.13mol)和N，N-二异丙基乙胺(14mL，0.078mol)并且将该反应体系在40℃下搅拌5小时。LC-MS分析显示反应未完成。2当量的乙酰氯和1当量的N，N-二异丙胺并且保持该反应体系在室温下放置搅拌过夜。在分析显示50％以下的原料耗尽后，加入4个以上当量的乙酰氯和2当量的N，N-二异丙基乙胺并且使反应温度升至40℃。将该反应体系再搅拌4小时以上。LC-MS分析显示存在约5％的未反应原料。将烧瓶冷却至室温并且在真空至减少。将暗黄色残余物溶于300ml乙酸乙酯并且用50ml水洗涤3次。加入饱和氯化钠以便除去任何在层之间形成的乳状液。大部分所需产物保留在有机层中，不过，少量在水层中。用硫酸钠干燥有机层并且在真空中减少至得到褐黄色油状物，通过快速色谱法，使用120g正相硅胶柱和乙酸乙酯:己烷梯度(0-60％)纯化。收集纯级分并且在减压下除去挥发性物质而得到黄色油状物。
M+1＝291.01H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.63(dq，1H)，8.48(dd，1H)，7.83(d，1H，J＝8.02Hz)，7.69(t，1H，J＝8.02Hz)，7.09(dd，1H，J＝8.02Hz)，5.32-5.22(m，1H)，4.33(d，2H，J＝6.26Hz)，1.93(s，3H)，1.40(d，3H，J＝7.11Hz)。
b.(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
向(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(5.34g，0.0184mol)在乙醇(100mL，2mol)中的混悬液中加入在水(100mL，6mol)中的氯化铵(9.840g，0.1840mol)。在85℃下加热该反应体系并且间隔3分钟分四部分加入铁(4.11g，0.0736mol)。反应体系开始变暗色并且完全变成棕色。2小时后，从油浴中取出烧瓶并且在烧瓶中加入150ml乙酸乙酯。滗析有机层并且用乙酸乙酯再萃取水层。用硫酸钠干燥合并的有机层并且在减压下浓缩而得到亮黄色油状物。
M+1＝261.11H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.43(d，1H，J＝7.81Hz)，7.38(d，1H，J＝7.82Hz)，7.16(t，1H，J＝7.85Hz)，6.85(dd，1H，J＝7.92Hz)，7.78(d，1H，J＝7.80Hz)，5.67(s，2H)，5.30-5.21(m，1H)，4.29(d，2H，J＝6.50Hz)，1.91(s，3H)，1.34(d，3H，J＝7.08Hz)。
c.(R)-2-(3，4-二氯苯基)-N-(2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代-1，2-二氢 异喹啉-5-基)乙酰胺
向(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(100mg，0.0004mol)在二氯甲烷(2mL，0.03mol)中的溶液中加入3，4-二氯苯基乙酸(120mg，0.00058mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(360mg，0.00096mol)和N，N-二异丙基乙胺(300μL，0.002mol)。在室温下将该反应混合物搅拌过夜。然后通过柱色谱法，使用乙酸乙酯:己烷(0-40％)梯度纯化该混合物。在真空下减少合并的纯级分并且溶于甲醇(3mL，0.07mol)，加入碳酸钾(200mg，0.001mol)和几滴水并且在室温下将该混合物搅拌1小时。随后通过使用柱色谱法(乙酸乙酯:己烷，0-100％)纯化而产生标题化合物。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.06(s，1H)，8.08(d，1H，J＝8.03Hz)，7.79(d，1H，J＝7.84Hz)，7.65(d，1H，J＝1.87Hz)，7.62(d，1H，J＝8.21Hz)，7.52(d，1H，J＝7.82Hz)，7.44(t，1H，J＝7.95Hz)，7.38(dd，1H，J＝8.34Hz)，6.64(d，1H，J＝7.89Hz)，5.08-5.00(m，1H)，4.93(t，1H，J＝5.41Hz)，3.81(s，2H)，3.69-3.57(m，2H)，1.29(d，3H，J＝7.00Hz)。
方法AA2
(化合物330)
2-(4-氯-3-氟苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺
Figure A200780017026D01031
a.(R)-2-(4-氯-3-氟苯基)-N-(2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代-1，2-二 氢异喹啉-5-基)乙酰胺
向乙酸(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酯(800mg，0.003mol)在二氯甲烷(20mL，0.2mol)中的溶液中加入2-(4-氯-3-氟苯基)乙酸(870mg，0.0046mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(2900mg，0.0077mol)和N，N-二异丙基乙胺(3000μL，0.02mol)。将该反应混合物在室温下搅拌过夜且然后浓缩。加入甲醇(20mL，0.6mol)和碳酸钾(1000mg，0.009mol)并且将该混合物在室温下搅拌1小时。除去挥发性物质并且将残余物溶于二氯甲烷(100ml)。用NaHCO3水溶液(150ml)，盐水(150ml)和水(200ml)洗涤该混合物。分离各层并且用Na2SO4干燥有机层且在减压下浓缩。然后通过快速色谱法(乙酸乙酯:己烷，0-40％)纯化该混合物。在真空中减少合并的纯级分而得到标题化合物，为黄色固体。M+1＝389.1
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.06(s，1H)，8.08(d，1H，J＝7.98Hz)，7.79(dd，1H，J＝7.94Hz)，7.57(t，1H，J＝8.15Hz)，7.52(d，1H，J＝7.85Hz)，7.46-7.41(m，2H)，7.25(dd，1H，J＝8.25Hz)，6.64(d，1H)，5.08-5.00(m，1H)，4.93(t，1H，J＝5.38Hz)，3.82(s，2H)，3.69-3.57(m，2H)，1.29(d，3H，J＝7.04Hz)。
方法AB
(化合物344)
(R)-2-{6-甲氧基-1-氧代-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺
a.(R)-2-(5-氨基-6-甲氧基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
将(R)-2-(6-甲氧基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(200mg，0.0007mol)，甲醇(20mL，0.5mol)和10％钯重量/活性炭(21mg，0.00017mol)的混合物在氢气(1atm)环境中搅拌3h。用C盐过滤该反应混合物并且除去溶剂而得到产物，为棕色固体。MS m/z＝263.3(M+H)。
b.(R)-2-(6-甲氧基-1-氧代-5-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)异 喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
将(R)-2-(5-氨基-6-甲氧基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(98.34mg，0.0003764mol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(115.2mg，0.0005646mol)，N，N-二异丙基乙胺(163.9μL，0.0009409mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(357.8mg，0.0009409mol)和N，N-二甲基甲酰胺(2mL，0.02mol)的混合物在室温下搅拌过夜。反应仅完成40％。除去溶剂，通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到纯产物，为淡黄色固体。MS m/z＝448.3(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 9.71(s，1H)，8.17(d，J＝8.87Hz，1H)，7.74(d，J＝7.76Hz，2H)，7.62(d，J＝7.76Hz，2H)，7.34-7.29(m，2H)，7.20(s，1H)，6.28(d，J＝8.48Hz，1H)，5.45(q，J＝7.07Hz，1H)，3.90(s，3H)，3.84(s，2H)，1.49(d，J＝7.39Hz，3H)。
方法AC
(化合物345)
(S)-2-{6-氯-1-氧代-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰氨基]-1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺
Figure A200780017026D01051
a.(S)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
将6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(230mg，0.00102mol)，(S)-2-氨基丙酰胺盐酸盐(127mg，0.00102mol)，三乙胺(142μL，0.00102mol)和甲醇(20mL，0.5mol)的混合物在60℃下搅拌3小时。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为黄色固体。MS m/z＝262.3(M+H)。
b.(S)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
将(S)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(201mg，0.000679mol)，乙醇(10mL，0.2mol)，氯化铵(363.03mg，0.0067868mol)和水(10mL，0.6mol)的混合物在85℃下加热并且间隔2分钟分三部分加入铁(152mg，0.00271mol)。将该反应体系在该温度下搅拌1小时并且倾入二氯甲烷(150mL)且分离各层。用盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥并且在减压下除去溶剂而得到纯产物，为淡黄色固体。MS m/z＝232.5(M+H)。
c.(S)-2-(6-氯-1-氧代-5-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)异喹啉 -2(1H)-基)丙酰胺
将(S)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(100.0mg，0.0003764mol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(115.2mg，0.0005646mol)，N，N-二异丙基乙胺(163.9μL，0.0009409mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(357.8mg，0.0009409mol)和N，N-二甲基甲酰胺(2mL，0.02mol)的混合物在60℃下搅拌3天。反应仅完成约40％。除去溶剂，通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为淡黄色固体。MS m/z＝452.1(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 10.21(s，1H)，8.15(d，J＝8.68Hz，1H)，7.74(d，J＝7.76Hz，2H)，7.66-7.58(m，4H)，7.49(d，J＝7.95Hz，1H)，7.25(s，1H)，6.43(d，J＝7.50Hz，1H)，5.47-5.42(q，J＝7.07Hz，1H)，3.90(s，2H)，1.53(d，J＝7.39Hz，3H)。
方法AD
(化合物369)
2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-1，1-二甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺
Figure A200780017026D01061
a.2-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
将5-硝基-异色烯-1-酮(1.02g，0.00480mol)，2-氨基-2-甲基-1-丙醇(0.921mL，0.00960mol)和甲醇(23mL，0.58mol)和三乙胺(2mL，0.01mol)的混合物在80℃下搅拌过夜。LC-MS分析显示所需产物形成。在减压下除去挥发性物质并且将残余物溶于二氯甲烷(20mL，0.3mol)和N，N-二甲基甲酰胺(0.85mL，0.011mol)的混合物。加入乙酰氯(1.0mL，0.014mol)和N，N-二异丙基乙胺(1.5mL，0.0088mol)。将该混合物在40℃下搅拌5小时。将烧瓶冷却至室温并且在真空中除去溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯并且用NaHCO3水溶液洗涤两次。用硫酸钠干燥有机层且在减压下浓缩。通过柱色谱法，使用乙酸乙酯:己烷(0-100％)梯度纯化残余物而得到所需产物。
M+1＝263.2
b.2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-甲基丙基乙酸酯
向2-甲基-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(1.28g，0.00441mol)在乙醇(20mL，0.4mol)中的混悬液中加入在水(20mL)中的氯化铵(2.359g，0.04410mol)并且将该反应体系加热至85℃且间隔3分钟分四部分加入铁(0.985g，0.0176mol)。该反应体系开始变暗色并且完全变成棕色。将该反应体系加热2小时且从油浴中取出该反应体系。在烧瓶中加入150ml二氯甲烷并且将该混合物转入锥形瓶，保持大部分铁在反应烧瓶中。分离各层并且用盐水将有机层洗涤两次。用硫酸钠干燥合并的有机层且在减压下除去溶剂而得到亮黄色油状物。
M+1＝275.01H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.83(d，1H，J＝8.13Hz)，7.26-7.21(m，2H)，6.94(dd，1H，J＝7.71Hz)，6.42(d，1H，J＝8.11Hz)，4.73(s，2H)，4.30(bs，2H)，1.95(s，3H)，1.70(s，6H)。
c.2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-N-(2-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1- 氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺
向2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)-2-甲基丙基乙酸酯(90.0mg，0.000328mol)在二氯甲烷(2mL，0.03mol)中的溶液中加入2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(120mg，0.00049mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(310mg，0.00082mol)和N，N-二异丙基乙胺(300μL，0.002mol)。将该反应混合物在室温下搅拌过夜。然后通过HPLC纯化该混合物。在真空中浓缩合并的纯级分并且溶于甲醇(2mL，0.06mol)。加入碳酸钾(136mg，0.000984mol)并且将该混合物在室温下搅拌1小时。随后通过使用HPLC纯化而产生标题化合物。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.06(s，1H)，8.06(d，1H，J＝8.09Hz)，7.88(d，1H，J＝1.06Hz)，7.77(dd，1H，J＝7.79Hz)，7.73-7.67(m，2H)，7.51(d，1H，J＝8.16Hz)，7.40(t，1H，J＝7.91Hz)，6.56(d，1H，J＝8.14Hz)，4.99(t，1H，J＝5.64Hz)，3.91(s，2H)，3.88(d，2H，J＝5.69Hz)，1.57(s，6H)。
方法AE1
(化合物377)
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺
Figure A200780017026D01081
a.(R)-6-氯-2-(1-羟基丙-2-基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮
在微波小瓶中加入6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(80.0mg，0.000355mol)，(2R)-2-氨基丙-1-醇(29mg，0.00039mol)，三乙胺(0.15mL，0.0011mol)和甲醇(4mL，0.1mol)并且在100℃下进行接触微波30分钟。反应进行至完成，其中具有10％的环化产物与所需产物。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为淡黄色固体。MS m/z＝283.2(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 8.43(d，J＝8.86Hz，1H)，7.80(d，J＝8.86Hz，1H)，7.75(d，J＝7.98Hz，1H)，6.36(d，J＝7.09Hz，1H)，5.03-4.86(m，2H)，3.63-3.52(m，2H)，1.30(d，J＝7.0Hz，3H)。
b.(R)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
将(R)-6-氯-2-(1-羟基丙-2-基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮(750.0mg，0.002653mol)，乙酸酐(0.325mL，0.00345mol)，吡啶(0.322mL，0.00398mol)和二氯甲烷(20mL，0.3mol)的混合物在45℃下加热过夜。在减压下除去溶剂并且干燥至得到纯的产物，为粘稠黄色油状物。MS m/z＝325.4(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO)δ 8.42(d，J＝8.61Hz，1H)，7.47(d，J＝8.61Hz，1H)，7.23(d，J＝8.6Hz，1H)，6.29(d，J＝8.03Hz，1H)，5.34-5.29(m，1H)，4.28-4.20(m，2H)，1.94(s，3H)，1.40(d，J＝6.96Hz，3H)。
c.(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(160.0mg，0.0004927mol)和乙醇(7mL，0.1mol)并且在85℃下加热该反应体系。加入在水(7mL，0.4mol)中的氯化铵(264mg，0.00493mol)，随后分两部分添加铁(110mg，0.0020mol)。将该反应体系在该温度下再加热1小时。将该反应混合物倾入二氯甲烷(60mL)并且萃取。用盐水洗涤萃取物，用硫酸钠干燥并且在减压下除去溶剂而得到产物，为无色固体。MS m/z＝295.5(M+H)。
d.(R)-2-(6-氯-5-(2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代 异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在反应瓶中加入(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(210mg，0.00071mol)，2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(300mg，0.001mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(600mg，0.002mol)，N，N-二异丙基乙胺(600μL，0.003mol)并且将该反应体系在50℃下搅拌5天。此时，反应仅完成50％。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为淡黄色油状物。MS m/z＝499.3(M+H)。
e.(R)-N-(6-氯-2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5- 基)-2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(6-氯-5-(2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(250mg，0.00050mol)，碳酸钾(100mg，0.00075mol)和甲醇(8mL，0.2mol)和2滴水。将该反应体系在室温下搅拌30分钟。过滤该反应混合物，用甲醇洗涤。除去溶剂，通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为灰白色固体(约150mg)。MS m/z＝457.4(M+1)。1H NMR(400MHz；DMSO)δ 10.17(s，1H)，8.16(d，J＝8.85Hz，1H)，7.82(d，J＝7.76Hz，1H)，7.72-7.74(m，1H)，7.59(d，J＝8.84Hz，1H)，7.54-7.49(m，2H)，6.42(d，J＝7.50Hz，1H)，5.03-4.93(m，2H)，3.90(s，2H)，3.66-3.56(m，2H)，1.28(d，J＝7.63Hz，3H)。
方法AE2
(化合物375)
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺
a.(R)-2-(6-氯-5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代 异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在小瓶中加入(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(160mg，0.00054mol)，二氯甲烷(10mL，0.2mol)，2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酸(145mg，0.000651mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(413mg，0.00108mol)和N，N-二异丙基乙胺(0.189mL，0.00108mol)并且在40℃下搅拌2天。反应仅完成50％。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物(0-75％乙酸乙酯/己烷)而得到产物，为无色油状物。MSm/z＝499.3(M+H)
b.(R)-N-(6-氯-2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5- 基)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(6-氯-5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(1.200g，0.002406mol)，碳酸钾(0.997g，0.00722mol)和甲醇(20mL，0.5mol)和2滴水。将该反应体系在室温下搅拌1小时，此时反应完成。用Na2SO4过滤该反应混合物并且用甲醇反复洗涤。在减压下除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为白色固体。MS m/z＝457.3(M+H)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 10.20(s，1H)，8.17(d，J＝8.54Hz，1H)，7.79(t，J＝8.21Hz，1H)，7.60(d，J＝8.87Hz，1H)，7.56-7.51(m，2H)，7.45(d，J＝8.54Hz，1H)，6.44(d，J＝7.90Hz，1H)，5.03-4.99(m，1H)，4.94(t，J＝5.21Hz，1H)，3.94(s，2H)，3.68-3.56(m，2H)，1.28(d，J＝7.51Hz，3H)。
方法AF1
(化合物384)
N-[6-环丙基-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺
Figure A200780017026D01111
a.(R)-2-(6-环丙基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中加入(R)-6-环丙基-2-(1-羟基丙-2-基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮(30mg，0.0001mol)，乙酸酐(0.015mL，0.00016mol)，吡啶(0.015mL，0.00019mol)和二氯甲烷(4mL，0.06mol)并且将该反应体系在室温下搅拌过夜。然后除去溶剂并且将产物不经纯化用于下一步。MS m/z＝331.5(M+H)。
b.(R)-2-(5-氨基-6-环丙基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(6-环丙基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(28mg，0.000085mol)，乙醇(10mL，0.2mol)和10％重量钯/活性炭(1.0mg，0.0000085mol)并且抽出烧瓶中的任何空气并且充两次氢气且在室温下和氢气(1atm)环境中搅拌2小时。用C盐过滤该反应体系并且除去溶剂而得到产物。MS m/z＝301.2(M+H)。
c.(R)-2-(6-环丙基-5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1- 氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在反应瓶酯加入(R)-2-(5-氨基-6-环丙基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(23.0mg，0.0000766mol)，2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酸(26mg，0.00011mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(73mg，0.00019mol)，N，N-二异丙基乙胺(33μL，0.00019mol)和二氯甲烷(2mL，0.03mol)并且将该反应体系在40℃下搅拌过夜。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物(0-70％乙酸乙酯)而得到产物，为淡黄色固体。MS m/z＝505.3(M+H)。
d.(R)-N-(6-环丙基-2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉 -5-基)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(6-环丙基-5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(23mg，0.000046mol)，碳酸钾(9.4mg，0.000068mol)和甲醇(2mL，0.05mol)和2滴水并且将该反应体系搅拌30分钟。然后用C盐过滤该反应混合物并且在减压下除去溶剂。然后通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为粘性块。MS m/z＝463.5(M+H)。1H NMR(400MHz；丙酮-d)δ 9.02(s，1H)，8.03(d，J＝8.15Hz，1H)，7.61(t，J＝7.52Hz，1H)，7.42(d，J＝5.01Hz，1H)，7.39(s，1H)，7.24(d，J＝7.52Hz，1H)，6.91(d，J＝8.15Hz，1H)，6.36(d，J＝8.15Hz，1H)，4.99-4.97(m，1H)，3.93(s，2H)，3.68-3.64(m，2H)，2.04-1.94(m，1H)，1.24(d，J＝7.32Hz，3H)，0.81-0.77(m，2H)，0.60-0.56(m，2H)。
方法AF2
(化合物393)
N-[6-甲基-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺
Figure A200780017026D01131
a.(R)-2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮
在圆底烧瓶中加入6-甲基-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(260.00mg，0.0012673mol)，(2R)-2-氨基丙-1-醇(143mg，0.00190mol)，三乙胺(1.6mL，0.011mol)和甲醇(5mL，0.1mol)并且将该反应体系在80℃下加热过夜。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到为淡黄色固体的产物和为黄色固体的环化乙缩醛。然后将环化乙缩醛溶于甲醇并且加入三乙胺(2mL)且在110℃下的微波中加热1小时而得到未环化产物。MS m/z＝263.4(M+H)。
b.乙酸(R)-2-(6-甲基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酯
将(R)-2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮(100.0mg，0.0003813mol)，吡啶(0.062mL，0.00076mol)，乙酐(0.0432mL，0.000458mol)和二氯甲烷(5mL，0.08mol)的混合物在室温下搅拌过夜。该反应进行至完成并且在减压下除去溶剂且在真空至干燥所得产物(黄色油状物)并且不经任何纯化用于下一步反应。MS m/z＝305.4(M+H)。
c.(R)-2-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(6-甲基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(110.0mg，0.0003615mol)，乙醇(10mL，0.2mol)并且在85℃下加热该反应体系且加入在水(2mL，0.1mol)中的氯化铵(193.4mg，0.003615mol)，随后分两部分加入铁(80.7mg，0.00144mol)并且持续加热30分钟。反应进行至完成并且倾入DCM(50mL)且萃取。在减压下除去溶剂而得到纯的产物，为油状物。MS m/z＝275.4(M+H)。
d.(R)-2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基-1-氧 代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(175mg，0.000638mol)，2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酸(210mg，0.00096mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(610mg，0.0016mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.28mL，0.0016mol)和N，N-二甲基甲酰胺(8mL，0.1mol)并且将该反应体系在45℃下搅拌24小时。反应未进行完成。然后用水使反应淬灭并且用乙酸乙酯萃取，用NaHCO3，盐水洗涤且干燥。在减压下除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，未淡黄色油状物。MS m/z＝479.3(M+H)
e.(R)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基 -1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酯(300.00mg，6.2704E-4mol)，碳酸钾(260mg，0.0019mol)，甲醇(20mL，0.4mol)和2滴水。将该反应体系在室温下搅拌20分钟。除去溶剂并且用乙酸乙酯萃取该反应混合物且除去溶剂而得到淡黄色固体。MS m/z＝437.5(M+H)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 9.91(s，1H)，8.07(d，J＝8.45Hz，1H)，7.79(t，J＝7.85Hz，1H)，7.53(d，J＝12.68Hz，1H)，7.45(d，J＝7.85Hz，2H)，7.37(d，J＝8.45Hz，1H)，6.44(d，J＝7.66Hz，1H)，5.05-5.00(m，1H)，4.93(t，J＝5.66Hz，1H)，3.92(s，2H)，3.67-3.51(m，2H)，2.22(s，3H)，1.28(d，J＝7.51Hz，3H)。
方法AG
(化合物385)
2-(2-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-乙基)-6-(2-羟基-乙基氨基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺
Figure A200780017026D01151
a.2-(2-(2-乙酰氧基乙基)-5-硝基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-6-基氨 基)乙基乙酸酯
在圆底烧瓶中加入2-(2-羟乙基)-6-(2-羟乙基氨基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮(300.0mg，0.0010mol)，乙酸酐(0.24mL，0.0026mol)，吡啶(0.33mL，0.0041mol)和二氯甲烷(10mL，0.2mol)并且将该反应体系在45℃下加热过夜。反应进行至完成并且除去溶剂而得到产物，将其不经进一步纯化用于下一步反应。MS m/z＝378.2(M+H)。
b.2-[6-(2-乙酰氧基-乙基氨基)-5-氨基-1-氧代-1H-异喹啉-2-基]- 乙基乙酸酯
在85℃下加入2-(2-(2-乙酰氧基乙基)-5-硝基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-6-基氨基)乙基乙酸酯(350mg，0.00093mol)，乙醇(20mL，0.3mol)，氯化铵(496.1mg，0.009275mol)和水(10mL，0.6mol)的混合物。间隔5分钟分两部分加入铁(207mg，0.00371mol)并且将该反应体系在该温度下搅拌1小时。然后将该反应混合物倾入二氯甲烷(100mL)并且分离各层且用盐水洗涤有机层且用硫酸钠干燥。在减压下除去溶剂并且不经进一步纯化用于下一步反应。MS m/z＝348.5(M+H)。
c.2-(2-(2-乙酰氧基乙基)-5-(2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨 基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-6-基氨基)乙基乙酸酯
在反应瓶至加入2-[6-(2-乙酰氧基-乙基氨基)-5-氨基-1-氧代-1H-异喹啉-2-基]-乙基乙酸酯(100.00mg，0.00028788mol)，2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(76.74mg，0.0003454mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(274mg，0.000720mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.125mL，0.000720mol)和二氯甲烷(3mL，0.05mol)并且将该反应体系在40℃下加热5h。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为黄白色固体。MS m/z＝552.3(M+H)。
d.2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-N-(2-(2-羟乙基)-6-(2-羟乙基氨 基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺
在圆底烧瓶中加入2-(2-(2-乙酰氧基乙基)-5-(2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-6-基氨基)乙酸乙酯(120mg，0.00022mol)，碳酸钾(45mg，0.00033mol)和甲醇(3mL，0.07mol)和2滴水并且将该反应体系在室温下搅拌30分钟且用硫酸钠过滤并且除去溶剂且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为白色固体。MS m/z＝468.4(M+H)。1H NMR(400MHz)δ 9.45(s，1H)，7.98(d，J＝8.95Hz，1H)，7.79(t，J＝7.45Hz，1H)，7.70(t，J＝7.09Hz，1H)，7.40(t，J＝7.83Hz，1H)，7.22(d，J＝7.83Hz，1H)，6.91(d，J＝9.08Hz，1H)，6.16(d，J＝7.73Hz，1H)，5.64(t，J＝5.72Hz，1H)，4.84(t，J＝5.33Hz，1H)，4.76(t，J＝5.48Hz，1H)，3.96(s，2H)，3.91(t，J＝5.27Hz，2H)，3.62-3.53(m，4H)，3.27(q，J＝6.15Hz，2H)。
方法AH
(化合物386)
N-[6-氯-2-(2-羟基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺
Figure A200780017026D01171
a.4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸
圆底烧瓶中加入4-氯-2-甲基苯甲酸(200mg，0.001mol)和硫酸(1mL，0.02mol)并且在-20℃下加入发烟硝酸(0.05mL，0.001mol)且在70℃下将该反应体系搅拌1小时且倾入冰冷水，其中沉淀出2-和4-硝基化合物的混合物。过滤沉淀并且溶于乙酸乙酯(30mL)且用饱和碳酸氢钠水溶液，盐水洗涤且用硫酸钠干燥。减少溶剂1/4体积并且沉淀出不需要的异构体。过滤沉淀且干燥滤液至得到异构体的1:1混合物，为白色固体。MS m/z＝214.5(M-H)。
b.4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯
在圆底烧瓶中加入4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸(11.00g，0.05102mol)和甲醇(110mL，2.7mol)并且在0℃下加入亚硫酰氯(4.5mL，0.061mol)且将该反应体系在75℃下加热3小时。在减压下除去溶剂并且将残余物溶于乙酸乙酯(300mL)且用碳酸氢钠水溶液，水和盐水洗涤。用硫酸钠干燥合并的有机萃取物并且除去溶剂而得到酯类。MSm/z＝230.3(M+H)。
c.6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮
在压力管内加入在N，N-二甲基甲酰胺(10mL，200mmol)中的4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(13g，57mmol)中加入1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(26.5mL，200mmol)并且将该反应体系加热至120℃下20h。除去溶剂并且将所得棕色残余物再溶于乙酸乙酯(600mL，6000mmol)并且加入130-270目60A硅胶(500g，6000mmol)且使用机械搅拌器将该反应体系搅拌8h。过滤出硅胶，用乙酸乙酯(400mL)洗涤并且在真空至除去有机层通过快速色谱法纯化残余物(330g硅胶，2-50％乙酸乙酯/己烷)而得到两种异构体，产率为14％，各自的纯度基本上为98％。MS m/z＝226.2(M+H)。1H NMR(400MHz；DMSO)δ 8.35(d，J＝8.63Hz，1H)，7.95(d，J＝8.63Hz，1H)，7.76(d，J＝5.91Hz，1H)，6.61(d，J＝6.04Hz，1H)。
d.6-氯-2-(2-羟乙基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮
在微波小瓶中加入6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(1.0g，0.00443mol)，乙醇胺(0.401mL，0.00665mol)，三乙胺(1.24mL，0.00886mol)和甲醇(30mL，0.7mol)并且使该反应体系接触100℃下的微波1小时。反应完成，其意味着所有原料耗尽，但形成的主要产物为胺取代氯。除去溶剂并且通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为黄色固体。MS m/z＝269.4(M+H)。1H NMR(400MHz；CDCl3)δ8.41(d，J＝8.56Hz，1H)，7.52(d，J＝8.56Hz，1H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，6.31(d，J＝8.56Hz，1H)，4.17(t，J＝44.88Hz，2H)，3.99(t，J＝5.11Hz，2H)，2.55(bs，1H)。
e.2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基乙酸酯
在圆底烧瓶中加入6-氯-2-(2-羟乙基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮(400.0mg，0.00149mol)，乙酸酐(0.21mL，0.0022mol)，吡啶(0.18mL，0.0022mol)和二氯甲烷(20mL，0.2mol)并且将该反应体系在室温下搅拌过夜。除去溶剂而得到产物，为黄色固体。MS m/z＝311.3(M+H)。
f.2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基乙酸酯
在85℃下在圆底烧瓶中加入在水(10mL，0.6mol)中的2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基乙酸酯(450.00mg，0.0014484mol)，乙醇(20mL，0.3mol)和氯化铵(774.8mg，0.01448mol)，随后分两部分加入铁(324mg，0.00579mol)。将该反应体系在该温度下搅拌45分钟且然后倾入二氯甲烷(200mL)并且萃取。除去溶剂而得到纯的产物，为淡黄色固体。MS m/z＝281.3(M+H)
g.2-(6-氯-5-(2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代异喹 啉-2(1H)-基)乙基乙酸酯
在反应瓶中加入2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基乙酸酯(60.0mg，0.000214mol)，2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(57.0mg，0.000256mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(203mg，0.000534mol)，N，N-二异丙基乙胺(0.093mL，0.00053mol)和二氯甲烷(3mL，0.05mol)并且将该反应体系在45℃下搅拌4天。反应未达到完成并且极性副产物开始增加且由此终止反应并且除去溶剂且通过快速色谱法纯化残余物而得到淡黄色固体。MS m/z＝485.2(M+H)
h.N-(6-氯-2-(2-羟乙基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)-2-(4-氟 -3-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
在圆底烧瓶中加入2-(6-氯-5-(2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基乙酸酯(80.0mg，0.000165mol)，碳酸钾(34.2mg，0.000248mol)，甲醇和2滴水并且将该反应体系在室温下搅拌20分钟。然后用硫酸钠和C盐过滤该反应体系并且用甲醇洗涤。除去溶剂通过制备型HPLC(反相)纯化残余物而得到产物，为淡黄色固体。MS m/z＝443.3(M+H)1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ 10.18(s，1H)，8.15(d，J＝8.81Hz，1H)，7.82(d，J＝6.7Hz，1H)，7.77-7.74(m，1H)，7.59(d，J＝8.81Hz，1H)，7.52(t，J＝9.52Hz，1H)，7.46(d，J＝7.40Hz，1H)，6.40(d，J＝7.59Hz，1H)，4.88(t，J＝5.0Hz，1H)，4.00(t，J＝5.55Hz，2H)，3.89(s，2H)，3.65(q，J＝5.55Hz，2H)。
方法AJ
(化合物388)
N-[2-(2-乙酰氨基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(4-氯-3-氟-苯基)-乙酰胺
Figure A200780017026D01201
a.N-(2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基)乙酰胺
在圆底烧瓶中合并5-硝基-异色烯-1-酮(5.00g，0.0235mol)，N-乙酰基乙二胺(7.21g，0.0706mol)和甲醇(150mL，3.7mol)。将该混合物在回流状态下加热1.5小时。将该混合物冷却至室温并且搅拌过夜。LC-MS显示原料完全消耗。除去挥发性物质并且用甲醇：二氯甲烷(0-10％)梯度纯化所得油状物。合并如通过TLC和LC-MS测定的包含所需产物的级分并且浓缩至产生黄色固体。
b.N-(2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基)乙酰胺
在圆底烧瓶中合并N-(2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基)乙酰胺(3.27g，0.0119mol)，钯/C(1.6g，0.015mol)和乙醇(250mL，4.2mol)。将该反应混合物在氢气环境中和室温下搅拌过夜。用C盐过滤该混合物，在真空中除去挥发性物质，产生标题化合物，为黄色固体。将该化合物不经进一步纯化用于下一步。
c.N-(2-(2-乙酰氨基乙基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)-2-(4-氯 -3-氟苯基)乙酰胺
在20ml反应瓶中合并N-(2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基)乙酰胺(20mg，0.00008mol)，2-(4-氯-3-氟苯基)乙酸(30.55mg，0.0001620mol)，N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(72.66mg，0.0001911mol)N，N-二异丙基乙胺(61.6μL，0.000353mol)和N，N-二甲基甲酰胺(1mL，0.02mol)。将该混合物在50℃下加热2小时，冷却并且倾入饱和碳酸氢钠(200ml)。用二氯甲烷(3 X 100ml)萃取该混合物。用硫酸钠干燥合并的萃取物并且在真空中减少。通过反相制备型HPLC，使用乙腈:水梯度在pH10下纯化该混合物。在真空中减少合并的纯级分而得到标题化合物，为黄白色固体。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.06(s，1H)，8.07(d，1H，J＝8.01Hz)，7.96(t，1H，J＝5.89Hz)，7.83(dd，1H，J＝7.84Hz)，7.56(t，1H，J＝8.13Hz)，7.47-7.41(m，2H)，7.36(d，1H，J＝7.66Hz)，7.24(dd，1H，J＝8.37Hz)，6.36(d，1H，J＝7.63Hz)，3.98(t，2H，J＝5.93Hz)，3.82(s，2H)，3.39-3.35(m，2H)，1.75(s，3H)。
方法AK
(化合物401)
N-[6-甲基-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2，3，4-四氢-异喹啉-5-基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺
Figure A200780017026D01211
a.(R)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基 -1-氧代-1，2，3，4-四氢异喹啉-5-基)乙酰胺
在圆底烧瓶中加入(R)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺(50.0mg，0.000114mol)，乙醇(6mL，0.1mol)和10％重量钯/活性炭(1.4mg，0.000011mol)并且将烧瓶抽真空且充氢气。将抽真空和充气重复两次并且将该反应体系在氢气(气囊)环境中搅拌过夜。然后用C盐过滤该反应混合物并且在减压下除去溶剂。然后通过快速色谱法纯化残余物而得到产物，为白色固体。
MS m/z＝439.5(M+H)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 9.70(s，1H)，7.78(t，J＝7.75Hz，1H)，7.71(d，J＝8.00Hz，1H)，7.49(d，J＝12.25Hz，1H)，7.41(d，J＝8.50Hz，1H)，7.22(d，J＝8.25Hz，1H)，4.73(t，J＝5.73Hz，1H)，4.69-4.63(m，1H)，3.85(s，2H)，3.48-3.38(m，2H)，2.73-2.61(m，2H)，2.17(s，3H)，2.02-1.98(m，1H)，1.42-1.39(m，1H)，1.06(d，J＝6.90Hz，3H)。
实施例1
P2X7受体在巨噬细胞-衍生细胞系，包括但不限于，J774(小鼠巨噬细胞系，American Type Culture Collection(ATCC)，Rockville，MD，ATCC TIB-67)，P388(小鼠细胞系，ATCC CCL-46)，P815(小鼠肥大细胞肥大细胞瘤-衍生的品系，ATCC TIB-64)，THP-1(人单核细胞-衍生的细胞系，ATCC TIB202)和U937(来源于组织细胞淋巴瘤可诱导至单核细胞分化的人细胞系，ATCC CRL-1593.2)和在分离的巨噬细胞培养物中强力表达。使用如下所述的操作分离人或非-人的动物巨噬细胞。
P2Z/P2X7受体的特征在于确定通道开放，例如离子流和/或评价孔形成，包括监测在天然表达该受体的细胞中染料吸收或细胞裂解。化合物，诸如ATP，2′和3′-(O)-(4-苯甲酰基苯甲酰基)ATP(BzATP)影响这些细胞质膜中的孔形成，特别是在低胞外二价离子浓度下的形成(Buisman等Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：7988(1988)；Zambon等Cell.Immunol 156：458(1994)；Hickman等Blood84：2452(1994))。可以观察到大分子大小的染料，包括普罗匹定染料YO-PRO-1在细胞记录过程中进入巨噬细胞-衍生的细胞系(Hickman等Blood 84：2452(1994)；Wiley等BrJPharmacol 112：946(1994)；Steinberg等J Biol Chem 262：8884(1987))。还可以监测溴化乙锭(一种荧光DNA探针)，其中可以观察到胞内DNA-结合的溴化乙锭荧光增加。重组大鼠或人rP2X7在细胞，包括HEK293细胞和非洲爪蟾属(Xenopus)卵母细胞中的表达根据完整细胞记录和YO-PRO-1荧光证实了流入和孔形成(Suprenant等Science 272：735(1996)；Rassendren等J Biol Chem 272：5482(1997))。
可以测试本发明化合物对P2X7受体的拮抗剂活性。进行的测试包括并且选自：(i)电生理实验；(ii)YO-PRO1荧光；(iii)溴化乙锭荧光；和(iv)IL-1β从刺激的巨噬细胞中释放，包括如下所述的内容。可以在体内动物模型中测试化合物，包括炎症模型(例如爪水肿模型，胶原蛋白-诱导的关节炎，MS的EAE模型)。
人巨噬细胞的分离
如Blanchard等所述制备单核细胞-衍生的人或非-人的动物巨噬细胞培养物(Blanchard等J Cell Biochem 57：452(1995)；Blanchard等J Immunol 147：2579(1991))。简言之，从获自健康志愿者的白细胞浓缩物中分离单核细胞。将白细胞悬浮于含20％血清(人的人体细胞)，2mM谷氨酰胺，5mM HEPES和100μg/ml链霉素的RPMI 1460培养基(Life Techologies，Inc.)。使细胞粘附培养瓶1-2h，此后洗涤掉非粘附性细胞。在该培养基+干扰素-γ(人的人体细胞)(1000个单位/ml)中将粘附细胞培养7-14d。通过移取冷磷酸缓冲盐水从培养瓶中回收巨噬细胞并且在玻璃盖玻片上铺板以便随后进行12-24h的电生理或其它实验。
实施例2
电生理学实验
使用EPC9膜片钳放大器和脉冲获取程序进行全细胞记录(HEKA，Lambrecht，Germany)。全细胞记录获自细胞，例如J774A.1细胞(American Type Culture Collection，Rockville，MD，ATCC TIB-67))；用快速流动的U形管递送系统将激动剂施用1-3s期限[E.M.Fenwick，A.Marty，E.Neher，J.Physiol，(London)331，577(1982)]。内标吸移溶液为140mM天冬氨酸铯或天冬氨酸钾，20mM NaCl，10mM EGTA和5mM Hepes；标准外部溶液为145mM NaCl，2mM KCl，2mM CaCl2，1mM MgCl2，10mM Hepes和12mM葡萄糖。低二价外标溶液为标称不含镁的含0.3mM CaCl2。在低二价溶液中，通过记录作为在8min间隔施用1s激动剂响应的电流构建浓度-响应曲线，其中在每次施用前提供标准外标溶液6min。该方案对防止持续内向电流发生是必不可少的。
通过施用ATP(300μM)或BzATP(30μM)(controls)或测试化合物获得反转电位(Erev)，同时使膜保持在不同电位或通过施加-120-30或50mV的变速电压保持膜。由Erev，通过首先计算内(i)和外(o)标浓度[Na]1＝20mM，[Na]0＝145mM的α(＝PNa/PK′其中P为渗透率)，来自α＝([145/exp(ErevFIRT)]-20)/140的[K]0＝0mM和[K]1＝140mM(其中F为法拉第，R为气体常数且T为绝对温度)计算渗透比。在[X]0＝145mM，[Na]1＝20mM，[K]1＝140mM和[Na]0＝[K]0＝[X]1＝0mM时，由Px/PNa＝[(exp)ErevF/RT]](20+140α))/145计算其它Px/PNa值。按大小次序，X为铯，甲胺，三(羟甲基)-氨基甲烷，四乙基铵和N-甲基-D-葡糖胺。内标溶液还包含10mM EGTA和5mM Hepes。外标溶液还包含10mM葡萄糖和标准或低浓度的二价阳离子；使用HCl将pH维持在7.3，如果需要加入组胺酸或Hepes并且所有溶液的重量克分子渗透浓度均为295-315。
实施例3
YO-PRO1荧光
使用用于显微荧光测定的光电子成像(IDEA)系统(Photonics，Planegg，Germany)。将盖玻片放置在Zeiss Axiovert 100或相当的倒置显微镜台上并且使用40X Fluor物镜在油浸法中观测。在3-6min电生理记录过程中将YO-PRO-1(10μM；Molecular Probes，Eugene，OR)加入到表面灌流流体中，此后转换成低二价溶液并且在转回到标准二价溶液时洗涤掉，此后开启荧光灯并且使用异硫氰酸荧光素滤器检查细胞。使用491/509nm激发/发射波长测定YO-PRO1荧光。在使用YO-PRO1和不同浓度的对照品ATP，BzATP或测试化合物的连续表面灌流(2ml/min)过程中在5-20s间隔获得影像。对每次实验而言，对10-20个单个细胞获得YO-PRO1荧光的时程且然后求平均值以便获得平均荧光信号。将结果表示为在3min时rP2X7的平均信号并且在10min的信号用于P2X7和人巨噬细胞。所有实验均在室温下进行。
实施例4
溴化乙锭
通过监测孔形成时进入表达P2X7受体的细胞的溴化乙锭测试本发明的化合物对P2X7受体的拮抗剂活性。本试验在96-孔平底微量滴定板中进行，所述的孔填充了250μl测试溶液，其包含200μl表达P2X7的细胞(例如THP-1细胞，J774细胞等)(2.5x106个细胞/ml)的混悬液，该混悬液包含10-4M溴化乙锭，25μl含10-5M BzATP的高钾缓冲溶液和25μl含测试化合物的高钾缓冲溶液。给平板覆盖塑料布并且在37℃下孵育1小时。然后在Perkin-Elmer荧光平板读出器中读取平板，激发520nm，发射595nm，狭缝宽：Ex 15nm，EM 20nm。为了比较目的，BzATP(P2X7受体激动剂)和吡哆醛5-磷酸(P2X7受体激动剂)单独用于本试验中作为对照品。从获得的读数来看，计算各测试化合物的IC50数值，该数值为将BzATP激动剂活性降低50％所必需的测试化合物浓度的负对数。
实施例5
IL-1β释放
本实施例表示本发明化合物作为P2X7-介导的IL-1β从人巨噬细胞中释放的抑制剂功效的测试，所述的人巨噬细胞由阿尔茨海默β淀粉样蛋白肽1-42活化。
细胞分离
如下从外周血单核细胞(PBMCs)中分离单核细胞。使全血在Histopak 1077-1柱(Sigma Biochemicals)上直接分层并且以800xg离心15分钟。将细胞PBMC带取出放入新鲜的50ml培养管中并且用洗涤缓冲液(磷酸缓冲盐水，pH 7.4，其包含2mM EDTA和5mg/ml BSA)按照1:1稀释，随后以800xg离心5分钟。然后通过依次将细胞沉淀重新悬浮于洗涤缓冲液中并且以600xg离心5分钟洗涤细胞。重复洗涤过程，直到污染有血小板的上清液澄清(一般5-6次洗涤)。然后通过使用包含针对非-单核细胞的抗体的单核细胞分离试剂盒(MiltenyiBiotec，Inc.)进行负选择，使细胞上磁性柱运行以除去抗体-结合的细胞并且收集透过单核细胞体积的流量从PBMCs中纯化单核细胞。用洗涤缓冲液将单核细胞洗涤一次并且在100μl不含血清的RPMI1640中以100,000个细胞/孔接种在96-孔平板中并且在37℃下和5％CO2/95％加湿组织培养箱中孵育1小时。1小时后，用100μl完全培养基(RPMI 1640，10％人血清-AB型(热灭活的)，25mM HEPES，2mM谷氨酰胺，青霉素和链霉素各50U/ml)替代上述培养基并且孵育过夜(16小时)。
给药方案
第2天，在不存在或存在人β淀粉样蛋白1-42肽(5μM)下用100μl新鲜完全培养基取代该培养基并且在37℃下和5％ CO2/95％加湿组织培养箱中孵育5小时。然后取出培养基并且弃去。用包含1mM CaCl2的Hanks缓冲盐水(HBSS)将各孔洗涤一次，随后添加80μl本发明的HBSS/CaCl2抑制性化合物(10x在HBSS/CaC l2中的储备溶液，终浓度为23nM和206nM)并且在加湿组织培养箱中孵育15分钟，随后添加10μl HBSS/CaCl2或10μl苯甲酰基ATP(BzATP；3mM在HBSS/CaCl2中的储备溶液，终浓度300μM)并且在加湿组织培养箱中再孵育30分钟。然后取出培养基放入新的96-孔平板用于储存在-70℃下，直到通过ELISA(来自R&D Systems)定量IL-1β含量。用HBSS/CaCl2将细胞洗涤一次，随后使用100μl冰冷裂解缓冲液(100mM Tris，pH 7.6，1％ Triton X-100和来自Roche Biochemicals，Inc的1片/30ml完全TM蛋白酶抑制剂)裂解细胞。将细胞裂解物储存在-70℃下，直到通过ELISA定量IL-1β。
实施例6
体内动物模型
A.本实施例例证了本发明化合物在治疗多发性硬化中的功效。如本文所述，实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型用于证实这种功效。在该模型中使用如下操作。
动物
8周龄的SJL/J雌性小鼠获自Jackson Laboratories。
抗原
髓鞘蛋白脂蛋白(PLP 139-151)(HSLGKWLGHPDKF)(Cat # H-2478)获自BACHEM，Bioscience，Inc.，3700 Horizon Dr.，King ofPrussia，Pa.19406，1-610-239-0300(电话)，1-610-239-0800(传真)。
弗氏完全佐剂H37 Ra[1mg/ml结核分枝杆菌(MycobacteriumTuberculosis)H37 Ra]获自Difco 1-800-521-0851(Cat #3114-60-5，6X10ml)。
结核分枝杆菌还获自Difco，1-800-521-0851(Cat # 3114-33-8，6×100mg)。
百日咳毒素
百日咳博德特菌(Bordetella Pertussis)，(含PBS和乳糖的冻干粉)获自List Biological Laboratories，1-408-866-6363(Product #180，50μg)。
EAE在小鼠中的诱导
将PLP139-151肽溶于H2O:PBS(1:1)溶液至浓度为7.5mg/10ml(就75μg PLP/组而言)并且用补充了40mg/10ml热-灭活的结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis)H37Ra的等体积的CFA乳化。给小鼠经s.c.在腹侧注射0.2ml肽乳剂(每侧0.1ml)。在同一天和72小时后，给小鼠经i.v.分别注射100％ 35ng和50ng在盐水中的百日咳博德特菌。
临床评价
0级：正常
0.5级：部分跛行尾
1级：完全跛行尾
2级：翻正反射受损
2.5级：翻正反射延缓(并非弱至足以达到3级)。
3级：部分后肢肢体麻痹
3.5级：一条腿完全麻痹，而一条腿部分麻痹
4级：后肢完全肢体麻痹
4.5级：腿完全麻痹和垂死
5级：因EAE致死
EAE的临床过程
急性期：首次临床发作(10-18天)
消退：临床发作后的临床改善期；特征在于在急性期或疾病恶化峰值评分后至少2天的临床评分减小(>＝1级)。
恶化：在获得消退后至少2天的临床评分至少为1级的增加。
一般预计使用本发明化合物治疗的动物在临床评分方面表现出改善。
B.本实施例例证使用动物模型测定本发明化合物治疗中风的功效。
使体重为280-320g的雄性Sprague Dawley大鼠(Charles River)自由摄食和饮水并且在用于实验前进行最少4天的环境适应。在手术前的1天在3:00pm开始禁食用于研究的所有大鼠，但可自由饮水。在手术前，对每只大鼠称重。最初用5％异氟烷(Aerrane，Fort Dodge)诱导大鼠，合并30％ O2，70％ N2O，持续2-5分钟。然后将大鼠放在循环水-热垫上并且使鼻锥体自主吸入麻醉剂气体。使异氟烷减至2％。插入直肠探针并且将体温维持在36.5-37.5℃。在所有手术部位修剪毛发且然后使用聚维酮碘擦拭这些区域。
手术操作
将颞肌探针放入右侧颞肌并且监测＂脑＂温。在大鼠上胸腔实施颈部正中切口。对胸骨乳头肌，二腹肌和胸骨舌骨肌谨慎进行剥离，分离和收缩以暴露右颈总内外动脉。使用5-0号丝缝合线分离右颈总动脉。在手术过程中释放缝线以便每隔2-4分钟进行一次再灌注。还分离右颈外和上甲状腺动脉并且烧灼上甲状腺动脉，同时将颈外动脉与在远端用5-0号丝缝线结扎。将另一5-0号丝缝线在颈外动脉周围松弛结扎。分离枕动脉，结扎和切开。分离颈内动脉。
由于颈总和颈内动脉固定，所以将动脉瘤夹放置在颈内动脉上。在颈外动脉远端做小切口。然后将涂敷了聚-L-赖氨酸的3-0尼龙缝线插入颈外动脉并且向上插入颈总动脉。现在将颈外动脉周围松弛结扎的5-0丝缝线围绕丝逐步扎紧。然后切开颈外动脉并且用丝线旋转颈外动脉剩余段，使得该丝线插入颈内动脉，其插入长度取决于重量和大鼠品种。在Sprague Dawley大鼠中，将单丝插入18-19mm(体重<300gm的大鼠：18mm；体重≥.300gm的大鼠：19mm)有效阻断了流至大脑中动脉的血流。
给颈外静脉插PE50套管，以便I.V.给予化合物。将套管在预先修剪的颈背上外插并且在合适的位置缝合。用缝合线封闭伤口。给右股动脉插导管以便在手术过程中进行血液毒剂和葡萄糖测定。
在插入单丝缝合线后2小时，用与最初使用相同的麻醉剂组合再麻醉大鼠并且将其放回到异氟烷浓度降至2％的鼻锥体中。重新开放颈部切口以暴露颈外动脉。通过从颈动脉中完全拉出管腔内缝合线恢复血流。然后使用3-0丝线在中断的缝线中封闭切口。
化合物给药
对5组15只动物实施上述方法。在MCAo后不同时间期限内输注不同剂量的化合物(I.V.)(剂量响应)。在MCAo后不同时间间隔开始的预定的时间期限内输注预定的浓度。媒介物-治疗的对照组通常接受0.9ml/hr输注。同时试验阳性对照化合物。
神经学试验
在手术前，在局部缺血发作后2小时和局部缺血后24小时进行一组神经学试验。为检验上体姿势设计姿势反射试验，此时将大鼠尾高于平面悬垂。正常大鼠伸展整体并且两前肢与平面相对。具有梗死形成的大鼠始终弯曲对侧肢体并且表现出身体旋转的体征。大鼠对使用手指双肩后缓慢侧向推动起反应。正常大鼠可以抵抗这类推动，而具有梗死形成的大鼠不会。伸出的前肢放置对视觉和触觉刺激起反应。动物由身体支撑，使侧或背侧前爪表面与工作台相对放置。重复本试验，但此时会阻碍大鼠视线。
在每次实验完成时，使用异氟烷(5％)深度麻醉所有动物，断头处死并且取出脑，用氯化四唑以组织学方式验证局部缺血损害的程度和位置。
C.本实施例使用2，4-二硝基苯磺酸(DNBS)诱导的远端结肠炎模型(炎性肠病模型)例证了本发明化合物的抗炎活性。
测试物质和给药模式
将本发明的化合物溶于2％ Tween 80在蒸馏水中的媒介物，以便以50mg/kg的剂量进行口服给药，或溶于2％ Tween 80和0.9％ NaCl的媒介物以便以30mg/kg的剂量进行腹膜内注射。将该剂量每日给予一次，连续7天。给药体积为10ml/kg。在第2天给药后2小时用DNBS攻击。
动物
在这些研究中，雄性Wistar，Long Evans大鼠由MDS PanlabsTaiwan，Ltd.的动物育种中心提供并且可以使用由NationalLaboratory Animals Breeding Research中心(NALBRC，Taiwan)提供的Balb/cByJ来源的雄性小鼠(体重为20±2gms)。6只动物的空间分配可以为45 x 23 x 15cm。使动物寄居在
Figure A200780017026D0130135102QIETU
笼(Allentown Caging，Allentown，N.J.08501，USA)中的正压隔离器内(
Figure A200780017026D0130135115QIETU
，Mode：Nu-605，气流速度50±5ft/min，HEPA Filter)并且维持在受控温度(22℃-24℃)和湿度(60％-80％)环境中，持续至少1周，其中在使用前在MDS Panlabs Taiwan实验室中进行12小时光照黑暗循环。允许大鼠自由使用标准实验室食物(Fwusow Industry Co.，Limited，Taiwan)和自来水。在此项工作的所有方面，包括寄居，实验和动物处置均可以按照Biomedical Research Involving Animals的InternationalGuiding Principles进行(CIOMS Publication No.ISBN 92 90360194，1985)。
化学物质
DNBS获自TCI，Tokyo，Japan，乙醇来自Merck，Germany且柳氮磺胺吡啶购自Sigma，USA。
仪器
电子天平(Tanita，1140型，Japan)，电子天平(Sartorius，R160P，Germany)，玻璃注射器(2ml，Mitsuba，Japan)，大鼠口腔用针头，皮下针头(25G×1＂TOP Corporation，Japan)，不锈钢剪刀(Klappenclear，Germany)，不锈钢钳(Klappenclear，Germany)。
方法
使用体重为180±20gms的3只Wistar来源的雄性大鼠组。通过结肠内滴注DNBS(2，4-二硝基苯磺酸，在0.5ml 30％乙醇中30mg)诱发远端结肠炎，此后，通过插管缓慢注射2ml空气以确保溶液保留在结肠中。通过口服(PO)给予50mg/kg剂量或通过腹膜内(IP)给予30mg/kg剂量的测试物质，每日一次，连续7天。在第2天给药后2小时将DNBS滴注入每只动物的远端结肠。使用单独的媒介物治疗对照组并且将柳氮磺吡啶(300mg/kg，PO)用作参比活性剂。使动物禁食24小时，此后和最终治疗后24小时进行DNBS攻击。此时处死它们并且取出各自结肠且称重。在实验过程中，每日记录存在的腹泻。当在取出结肠前打开腹腔时，注意到结肠与其它器官之间存在粘连。在称重结肠后，观察并且也关注结肠溃疡的程度。然后对每只动物按照公式计算结肠与体重之比：结肠(g)/BWx100％。媒介物-对照品+DNBS组相对于媒介物-对照组的＂净＂增加比例用作与测试物质治疗组比较的基础值并且表示为炎症减轻％。每一测试物质治疗组相对于＂净＂媒介物+DNBS治疗组的＂净＂结肠-体重比下降为30％或30％以上(30％)被视为有意义。
D.本实施例使用角叉菜胶诱导的爪水肿模型(炎症模型，角叉菜胶)例证了本发明化合物的抗炎活性。
测试物质和给药模式
将本发明的化合物溶于2％ Tween 80/0.9％ NaCl的媒介物并且在使用角叉菜胶(1％ 0.1ml/爪)攻击前30分钟通过腹膜内以30mg/kg的剂量给药。给药体积为10ml/kg。
动物
按照上述实施例中所述的操作赋予动物条件。
化学物质
角叉菜胶获自TCI，Japan；无热原盐水来自Astar，Taiwan；且阿司匹林购自ICN BioMedicals，USA。
仪器
玻璃注射器(1ml和2ml Mitsuba，Japan)，皮下针头24Gx1＂(Top Corporation，Japan)，器官充满度测量器#7150(UGOBasile，Italy)和25mm直径水池，#7157(UGO Basile，Italy)。
方法
在右侧后爪注射角叉菜胶(0.1ml的1％混悬液，足底内)后30分钟，通过IP对3只Long Evans来源的雄性过夜禁食的体重为150±20gms的大鼠的组给予测试物质(实施例)(30mg/kg)。在使用器官充满度测量器(Ugo Basile Cat.#7150)与水池(25mm直径，Cat.#7157)进行角叉菜胶给药后3小时记录作为炎症量度的后爪水肿。后爪水肿减少30％或30％以上(≥30％)表示显著的急性抗炎活性。
E.本实施例使用发生单克隆抗体(mAb)II型胶原蛋白诱导的关节炎的Balb/c小鼠模型例证了本发明化合物的抗炎活性。
测试物质和给药模式
将本发明的化合物以50或30的剂量溶于2％Tween 80/0.9％ NaCl的媒介物并且注射胶原蛋白的单克隆抗体后通过口服(50mg/kg)或腹膜内以30mg/kg给药，每日一次，连续3天。给药体积为20ml/kg。
动物
按照上述实施例中所述的操作给动物施加条件。
化学物质
脂多糖获自Sigma，USA；吲哚美辛来自Sigma，USA；Arthrogen-CIA.TM。单克隆抗体D8，F10，DI-2G和A2获自IBL，Japan；磷酸缓冲盐水购自Sigma，USA；且Tween 80来自Wako，Japan。
仪器
器官充满度测量器(Ugo Basile，Italy)和水池(Ugo Basile，Italy)。
方法
5只6-8周龄的Balb/cByJ小鼠品种的组用于对II型胶原蛋白+脂多糖(LPS)起反应的单克隆抗体(mAbs)诱导关节炎。通过静脉内给予动物4种不同mabs的组合，在第0天时总计4mg/小鼠，随后在72小时后(第3天)静脉内给予25μg LPS。从第3天开始，LPS给药后1小时给予50mg/kg(PO)的ML-659或30mg/kg(IP)和媒介物(2％ Tween80/0.9％ NaCl，PO)以及阳性对照吲哚美辛3mg/kg(PO)，每日一次，连续3天。器官充满度测量器(Ugo Basile Cat #7150)与水池(12mm直径)用于测定在第0，5，7，10，14和17天时两后爪体积的增加。通过下式计算体积增加的抑制百分比：
抑制(％)：[1-(Tn-To)/(Cn-Co)]x100
其中：
Co(Cn)：在媒介物对照组中的第0天的体积(第n天)
To(Tn)：在测试化合物治疗组中的第0天的体积(第n天)
两后爪水肿减轻30％以上被视为有意义。
实施例7
神经性疼痛模型
本实施例使用单神经性疼痛的坐骨神经结扎模型例证了本发明化合物的止痛活性。
测试系统
使用称重为250-300gm的成年雄性Sprague Dawley(SD)大鼠(Charles River Laboratories，San Diego，CA)。对动物室进行12-hr光照-黑暗循环(从7:00A.M.到7:00P.M)的人工光照，可自由饮水和取食。将动物随机分成组。
模型诱导
坐骨神经结扎(SNL，Seltzer′s模型)：
在使用戊巴比妥(50mg/kg，i.p.)和无菌技术麻醉下，通过按照Seltzer的方法(1990)紧密结扎共同的坐骨神经的选择部分产生选择性神经损伤。简言之，在皮肤切开后暴露高位大腿水平的左侧坐骨神经，并且钝性分离肌肉，其部位接近恰远离后二头肌半腱神经从总坐骨神经分支的点的转子。然后使用精细镊，通过将神经外膜夹在其背面，谨慎不要压迫神经下面的结构而将该神经固定在该位置上。将8-0号硅-处理的丝缝线插入具有3/8弯曲的神经，逆转切开术用小型针头并且紧密结扎，使得神经的背侧1/3-1/2被截留在结扎处。分层缝合肌肉并且用创伤夹封闭皮肤。然后将动物放回到其寄居笼中。将表现出术后神经缺陷或难以修饰的大鼠从实验中排除。
仪器
下列仪器用于本研究：von Frey丝组合(Touch-Test SensoryEvaluator，North Coast Medical Inc.，Morgan Hill，CA)。
统计学方法：
在每种实验中，分别使用平均值、平均值的标准误和未配对双尾t-检验功能，应用Microsoft 
Figure A200780017026D0134114140QIETU
计算平均值(SEM)的标准误和统计学显著性。使用用于单因素或双因素方差分析(ANOVA)功能的Prism(GraphPad Software Inc.，San Diego，CA)测定各实验之间观察到的具有统计学显著性的作用。使用0.95的置信限和0.05的显著性水平进行统计学分析。
实施例8
孔形成
以200,000个细胞/孔的浓度将THP-1细胞(ATCC Cat #285-IF-100)在96孔平板中铺板并且使其在含10％FBS，100IU/mL青霉素，100ug/mL链霉素，100ng/mL LPS和100ng/mL IFN-γ的RPMI-1640培养基(ATCC Cat # 30-2001)中分化16小时。在分化后，在含100IU/mL青霉素，100ug/mL链霉素的RPMI-1640培养基中用适当浓度的所关注的化合物将细胞预处理30分钟。然后用含5uMYo-Pro 1(Molecular Probes Cat # Y3603)和适当浓度的所关注的化合物的测定缓冲液(20mM HEPES，10mM d-葡萄糖，118mM NMDG，5mM KCl，0.4mM CaCl2)替代预处理培养基并且将细胞再孵育10分钟。然后加入2′，3′-O-(4-苯甲酰基苯甲酰基)-腺苷5′-三磷酸(SigmaAldrich Cat # B6396)至终浓度为40uM并且使用Tecan Safire平板读出器在491/509激发/发射每隔1分钟测定一次荧光读数，持续50分钟。在次过程中将温度维持在37℃。将药物处理和未处理的细胞的背景调节的荧光水平用于计算抑制百分比。
实施例9
IL-1β释放测定
将THP-1细胞(ATCC Cat # 285-IF-100)以200,000个细胞/孔的浓度放入96孔平板并且使其在含10％ FBS，100IU/mL青霉素，100ug/mL链霉素，100ng/mL LPS和100ng/mL IFN-γ的RPMI-1640培养基(ATCC Cat # 30-2001)中分化16小时。在分化后，在含100IU/mL青霉素，100ug/mL链霉素和100ng/mL新鲜LPS的RPMI-1640培养基中再处理2小时细胞。然后用适当浓度的所关注的化合物在含100IU/mL青霉素，100ug/mL链霉素的RPMI培养基中将细胞预处理30分钟。在预处理后，加入2′，3′-O-(4-苯甲酰基苯甲酰基)-腺苷5′-三磷酸(Sigma Aldrich Cat # B6396)至终浓度为250uM并且将细胞再孵育45分钟。然后收集30uL细胞上清液并且通过ELI SA(R&D系统Cat.# HSLB50)，按照制造商的说明，使用Tecan Safire平板读出器测定IL-1β水平。将药物处理和未处理的细胞的背景调节的IL-1β水平用于计算抑制百分比。
提供本申请中所述合成和生物实施例的目的是为了例证本发明，但不以任何方式来限定本发明的范围。在实施例中，所有的温度均为摄氏度(除非另作陈述)。在下表中提供了按照本发明制备的化合物与其生物活性数据。按照如上所述的方法进行这些有代表性的化合物的合成。
本发明的典型化合物
已经或可以按照上述合成方法制备如下化合物。为了下表1的目的，如下表示可以使用实施例9中所述IL-1β测定方法测定的各化合物的活性：
“+”   化合物在0.3μM浓度下表现出0-25％抑制
“++”  化合物在0.3μM浓度下表现出26-50％抑制
“+++” 化合物在0.3μM浓度下表现出51-75％抑制
“++++”化合物在0.3μM浓度下表现出76％或76％以上抑制
“*”   化合物在0.1μM浓度下表现出0-25％抑制
“**”  化合物在0.1μM浓度下表现出26-50％抑制
“***” 化合物在0.1μM浓度下表现出51-75％抑制
“****”化合物在0.1μM浓度下表现出76％或76％以上抑制
特别关注具有由＂++++＂或“****”表示的抑制百分比的化合物。
就如下提供的质谱(MS)数据而言，“△”表示可能的Na离子加合物的观察结果。
表1：典型化合物的IL-1β抑制％
Figure A200780017026D01371
Figure A200780017026D01391
Figure A200780017026D01401
Figure A200780017026D01411
Figure A200780017026D01421
Figure A200780017026D01431
Figure A200780017026D01441
Figure A200780017026D01451
Figure A200780017026D01461
Figure A200780017026D01471
Figure A200780017026D01481
Figure A200780017026D01491
Figure A200780017026D01501
Figure A200780017026D01511
Figure A200780017026D01521
Figure A200780017026D01531
Figure A200780017026D01541
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Figure A200780017026D01571
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Figure A200780017026D01601
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Figure A200780017026D01661
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Figure A200780017026D01751
Figure A200780017026D01761
Figure A200780017026D01791
Figure A200780017026D01801
IC 50 测定
测试表1中所列的化合物在如本文所述的细胞模型中的活性。特别地，用不同量的化合物在试验条件下预处理细胞并且如上述实施例9中确定释放的IL-1β。进行测定并且通过使用GraphPad Prism软件(GraphPad Software，Inc)使数据拟合4参数逻辑方程测定下表2中所列的IC50值。用下式表示方程：
Y＝基础值+(峰值-基础值)/(1+10^((LogEC50-X)*希尔斜率))其中X为浓度的对数，Y为响应值且Y从下部开始并且以S字形达到峰值。
表2：IL-1β典型化合物的IC50
Figure A200780017026D01851
Figure A200780017026D01861
Figure A200780017026D01871
Figure A200780017026D01881
Figure A200780017026D01891
人肝微体(HLM)中的半衰期
在37℃和96-深孔平板上孵育测试化合物(1μM)与在100mM磷酸钾缓冲液(pH 7.4)中的3.3mM MgCl2和0.78mg/mLHLM(HL101)。将该反应混合物分成两组，即非-P450和P450组。向P450组的反应混合物中仅加入NADPH。在0，10，30和60min时间点采集P450组样品的等分部分，其中0min时间点表示将NADPH加入P450组反应混合物的时间。在-10和65min时间点采集非-P450组样品的等分部分。使用含内标的乙腈溶液提取所采集的等分部分。在离心机(2000rpm，15min)中旋降沉淀蛋白质。通过LC/MS/MS系统测定上清液中的化合物浓度。
通过绘制化合物/内标峰面积比的自然对数与时间关系的图获得半衰期值。通过点的最适线的斜率产生代谢速率(k)。使用下列等式将该值转化成半衰期：
半衰期＝1n2/k
将测试结果和相应的T1/2值列在下表3中。
表3：以小时计的典型化合物的T-半衰期
      半衰期                     半衰期
ID                          ID
      (hr)                       (hr)
4     1.97                  250  0.9
8     1.41                  254  1.46
62    0.37                  256  1.29
65    1.03                  263  2.31
81    0.72                  265  0.97
232   7.37                  267  1.28
236   0.97                  268  1.36
238   1.59                  269  0.93
247   2.11                  285  1.24
       半衰期                       半衰期
ID                         ID
       (hr)                         (hr)
290    1.64                362      0.97
298    3.35                364      3.15
316    3.25                369      0.55
319    1.22                375      1.63
324    0.7                 376      0.9
330    1.41                377      1.01
335    0.93                382      1.34
339    0.93                383      3.65
342    1.16                386      1.08
351    2.36                393      1.45
353    1.01                394      0.70
357    1.54                400      3.73
359    1.16
化合物在大鼠静脉内和口服给药后的药代动力学评价
在实验开始前使雄性Sprague-Dawley大鼠适应至少24小时。在适应期过程中，所有动物可自由取食和饮水。然而，在实验开始前至少12小时从动物笼中取出食物，但不取出水。在实验的前3小时过程中，动物仅接受自由饮水。对至少3只动物各自测试静脉内和口服剂量。就静脉内制剂而言，将化合物溶于(0.25-1mg/mL)3％二甲亚砜，40％ PEG 400和剩余百分比的40％ Captisol在水(w/v)中的混合物。在给药前称重动物。测定的体重用于计算每只动物的给药量(dose volume)。
给药量(mL/kg)＝1mg/kg/制剂浓度(mg/mL)。在制剂浓度低于0.5mg/mL的情况中，给药量约为2mL/kg。
就口服制剂而言，将本发明的化合物悬浮(0.5-0.75mg/mL)于5％的10％ Tween 80在水(v/v)和95％的0.5％甲基纤维素在水(w/v)中的混合物中。一般通过口腔管饲法按照与IV相同的剂量体积配方对PO大鼠给药，以便获得1-5mg/kg的剂量水平。就IV给药而言，在给药后2，5，15，30，60，120，180，300，480和1440分钟时通过颈静脉导管采集血样(使用预肝素化的注射器)。就PO给药而言，在给药后5，15，30，60，120，180，300，480和1440分钟时通过颈静脉导管采集血样。在每一时间点从动物获得约250uL血液。替代等体积的0.9％生理盐水以防止脱水。将全血样品保持在冰上至离心为止。然后在4℃下以14,000rpm将血样离心10分钟并且将上部血浆层转入清洁小瓶且储存在-80℃下。然后通过液相色谱法-串联质谱法分析所得血浆样品。在测定血浆样品和给药溶液后，绘制血浆浓度-时间曲线。将血浆暴露量计算为外推至无穷大的浓度-时间曲线下的面积(AUCinf)。求AUCinf的平均值并且将各动物的口服生物利用度(％F)计算为：
AUCinf(PO)/AUCinf(IV)，以其相应剂量水平校准。
将％F报道为口服给予特定水平的本发明化合物的所有动物中的平均％F(参见下表4)。
就表4的目的而言，将化合物的口服生物利用度各自表示如下：
“+”     0-25％ F
“++”    26-50％ F
“+++”   51-75％ F
“++++”  >75％ F
表4：典型化合物的口服生物利用度
Figure A200780017026D01931
水溶性的测定
可以通过将10mM测试化合物在DMSO中的溶液掺入到pH7.4和pH2的5-10mL缓冲液中测定化合物的溶解动力学。将该混合物涡旋1小时并且在室温下平衡过夜。将该混合物通过饱和滤膜过滤并且通过LC/MS/MS分析滤液。
将试验结果和相应的溶解度值列在下表5中。
就表5的目的而言，将化合物的溶解度各自表示如下：
“+”    0-25μM在pH 7.4下的溶解度
“++”   26-50μM在pH 7.4下的溶解度
“+++”  51-75μM在pH 7.4下的溶解度
“++++” >75μM在pH 7.4下的溶解度
表5：典型化合物的溶解度
Figure A200780017026D01951
本领域技术人员可以根据上述描述对本发明的组合物和方法进行各种变型和改变。指定其中包括所有这类属于待批权利要求范围内的变型。
将本申请中引述的所有公开文献，包括但不限于专利和专利申请引入本文作为参考，就如同将所述的每篇公开文献各自特别和分别完整地引入本文作为参考相同。
使用Open Eye Software的Lexichem命名工具，SymyxRenaissance Software的Reaction Planner或MDL的ISIS DrawAutonom Software工具生成本发明化合物的化学名，但未验证。

Claims (82)

1.具有下式的双环杂芳基化合物：
Figure A200780017026C00021
其中
B和Y独立地选自CR2a和CR2aR2b；
W，W′和Z独立地选自CR4和N，条件是W，W′和Z所有三个不同时为N；
L1为取代或未被取代的C1-C5亚烷基；
n为0，1，2，3或4；
R1选自取代或未被取代的5-13元芳基和杂芳基；
R2a，R2b，R2′和R2”各自独立地选自氢，卤素，取代或未被取代的C1-C6烷基；或任意的R2′和R2”彼此连接形成3-7个原子的环烷基或环杂烷基环；
R3为氢键供体基团；
各个R4独立地选自H，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；
且所述虚线键为单键或双键；
或其药学上可接受的盐，溶剂合物或前体药物；
及其立体异构体，同位素变体和互变异构体。
2.权利要求1的化合物，其中B和Y各自为CR2aR2b；且虚线键为单键。
3.权利要求1的化合物，其中B和Y各自为CH2；且虚线键为单键。
4.权利要求1的化合物，其中B和Y各自为CR2a；且虚线键为双键。
5.权利要求1的化合物，其中B和Y各自为CH；且虚线键为双键。
6.权利要求1的化合物，其中R2′和R2各自为H。
7.权利要求1的化合物，其中R2′和R2”之一独立为Me且另一个为H。
8.权利要求1的化合物，其中R2′和R2”各自为Me。
9.权利要求1的化合物，其中n为0，1或2。
10.权利要求1的化合物，其中n为1。
11.权利要求1的化合物，其中R1选自5-13元芳基和杂芳基，其未被取代或被一个或多个取代基取代，所述的取代基独立地选自卤素，羟基，氨基，氰基，磺基，硫烷基，亚磺酰基，酰氨基，羧基，烷氧羰基，烷基，取代的烷基，链烯基，取代的链烯基，炔基，取代的炔基和磺酰胺。
12.权利要求1的化合物，其中R1为取代或未被取代的芳基。
13.权利要求1的化合物，其中R1为取代或未被取代的苯基。
14.权利要求1的化合物，其中R1为取代或未被取代的萘基。
15.权利要求1的化合物，其中R1为取代或未被取代的杂芳基。
16.权利要求1的化合物，其中R1为取代或未被取代的吡啶基，取代或未被取代的喹啉，取代或未被取代的苯并间二氧杂环戊烯，取代或未被取代的苯并二噁烷，取代或未被取代的苯并呋喃，取代或未被取代的苯并噻吩，和取代或未被取代的苯并二氧杂环庚三烯。
17.权利要求1的化合物，其中该化合物为式I，II，III或IV：
Figure A200780017026C00041
其中
W为CR4；Z为CR4；
L1，R1，R2′，R2”，R3和R4如权利要求1中所述；
且R5选自H，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；
或其药学上可接受的盐，溶剂合物或前体药物；
及其立体异构体，同位素变体和互变异构体。
18.权利要求17的化合物，其中各自R2′和R2”为H。
19.权利要求17的化合物，其中R2′为Cl或F；且R2”为H。
20.权利要求17的化合物，其中R2′为Me；且R2”为H。
21.权利要求17的化合物，其中R1选自取代或未被取代的苯基。
22.权利要求17的化合物，其中R1选自取代或未被取代的萘。
23.权利要求1的化合物，其中该化合物为式V，VI或VII：
Figure A200780017026C00051
其中
W为CR4；Z为CR4；
L1，R1R2′，R2”，R3和R4如权利要求1中所述；
R5选自H，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；
R4a选自氢，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，芳氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；且m选自0-5；
或其药学上可接受的盐，溶剂合物或前体药物；
及其立体异构体，同位素变体和互变异构体。
24.权利要求23的化合物，其中R2′和R2”各自为H。
25.权利要求23的化合物，其中R2′为Cl；且R2”为H。
26.权利要求23的化合物，其中R2′为Me；且R2”为H。
27.权利要求23的化合物，其中R2′为F；且R2”为H。
28.权利要求23的化合物，其中R2′为Et；且R2”为H。
29.权利要求1的化合物，其中该化合物为式VIII，IX或X
Figure A200780017026C00061
其中
W为CR4；Z为CR4；
L1，R3和R4如权利要求1中所述；R2′为H或Me；
R5选自H，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；
R4a选自氢，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，芳氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；且m选自0-5；
或其药学上可接受的盐，溶剂合物或前体药物；
及其立体异构体，同位素变体和互变异构体。
30.权利要求23或29任一项的化合物，其中m为1，2或3。
31.权利要求23或29任一项的化合物，其中m为1。
32.权利要求23或29任一项的化合物，其中m为2。
33.权利要求30-32中任意一项的化合物，其中各个R4a独立地选自Me，Et，Ph，Cl，F，Br，CN，OH，OMe，OEt，OPh，COPh，CF3，CHF2，OCF3，i-Pr，i-Bu，t-Bu，SMe，CH＝CH-CO2H，SOMe，SO2Me，SO3H，SO3Me和吡啶基。
34.权利要求1-33中任意一项的化合物，其中L1为未被取代或被一个或多个选自烷基，氧代，芳基，羟基和羟基烷基的取代基取代的C1-C5亚烷基。
35.权利要求1-33中任意一项的化合物，其中L1为被两个烷基取代的C1-C5亚烷基，并且其中同一碳原子上的任意两个烷基可以彼此连接形成3-7个原子的环烷基或环杂烷基环。
36.权利要求1-35中任意一项的化合物，其中R3为氢键供体基团。
37.权利要求1-35中任意一项的化合物，其中R3选自羟基，氨基，烷氨基或氨基甲酰基。
38.权利要求1-33中任意一项的化合物，其中基团-L1-R3选自：
Figure A200780017026C00081
Figure A200780017026C00082
和
Figure A200780017026C00083
39.权利要求1-33中任意一项的化合物，其中基团-L1-R3选自：
Figure A200780017026C00084
Figure A200780017026C00085
和
Figure A200780017026C00086
40.权利要求1-33中任意一项的化合物，其中基团-L1-R3选自：
Figure A200780017026C00087
41.权利要求1-40中任意一项的化合物，其中R2′为Me。
42.权利要求1-40中任意一项的化合物，其中R2′为H。
43.权利要求1的化合物，其中该化合物为式XIa，XIb，XIc，XId，XIe，XIf，XIg，XIh，XIi或XIj：
Figure A200780017026C00091
其中R4a独立地选自氢，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，芳氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；且m选自0-5；且R5选自H，烷基，环烷基或卤素。
44.权利要求1的化合物，其中该化合物为式XIIa，XIIb或XIIc：
Figure A200780017026C00092
其中R4a独立地选自氢，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，芳氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；且m选自0-5；R5选自H，烷基，环烷基或卤素；
且R2d选自氢，烷基，羟基烷基和取代或未被取代的苯基。
45.权利要求44的化合物，其中R2d为甲基，i-Pr或羟甲基。
46.权利要求44的化合物，其中R2d为苯基。
47.权利要求1的化合物，其中该化合物为式XIIIa，XIIIb，XIIIc或XIIId：
其中R4a独立地选自氢，烷基，取代的烷基，酰基，取代的酰基，取代或未被取代的酰氨基，取代或未被取代的烷氨基，取代或未被取代的烷硫基，取代或未被取代的烷氧基，芳氧基，烷氧羰基，取代的烷氧羰基，取代或未被取代的烷基芳基氨基，芳基烷氧基，取代的芳基烷氧基，氨基，芳基，取代的芳基，芳基烷基，取代或未被取代的亚砜，取代或未被取代的砜，取代或未被取代的硫烷基，取代或未被取代的氨基磺酰基，取代或未被取代的芳基磺酰基，硫酸，硫酸酯，取代或未被取代的二羟基磷酰基，取代或未被取代的氨基二羟基磷酰基，叠氮基，羧基，取代或未被取代的氨基甲酰基，氰基，取代或未被取代的环烷基，取代或未被取代的环杂烷基，取代或未被取代的二烷氨基，卤素，杂芳氧基，取代或未被取代的杂芳基，取代或未被取代的杂烷基，羟基，硝基和硫代；且m选自0-5；且R5选自H，烷基，环烷基或卤素。
48.权利要求43-47中任意一项的化合物，其中m为1，2或3。
49.权利要求43-47中任意一项的化合物，其中m为1或2。
50.权利要求43-47中任意一项的化合物，其中m为2。
51.权利要求48-50中任意一项的化合物，其中各自R4a独立地选自Me，Et，Ph，Cl，F，Br，CN，OH，OMe，OEt，OPh，COPh，CF3，CHF2，OCF3，i-Pr，i-Bu，t-Bu，SMe，CH＝CH-CO2H，SOMe，SO2Me，SO3H，SO3Me和吡啶基。
52.权利要求23-47中任意一项的化合物，其中m为1且R4a为CF3。
53.权利要求23-47中任意一项的化合物，其中m为2且R4a为F和CF3。
54.权利要求23-47中任意一项的化合物，其中m为2且R4a为F和Cl。
55.权利要求1-16中任意一项的化合物，其中W为CR4。
56.权利要求1-42中任意一项的化合物，其中W且Z各自独立为CH。
57.权利要求1-16中任意一项的化合物，其中W为N。
58.权利要求1-16中任意一项的化合物，其中W为N且Z为CH。
59.权利要求17-58中任意一项的化合物，其中R5为H。
60.权利要求17-58中任意一项的化合物，其中R5为Me，环丙基，Cl，F或CF3。
61.权利要求1的化合物，其中该化合物选自表1中所列的化合物。
62.药物组合物，其包含药学上可接受的载体和药物有效量的前述权利要求中任意项的化合物。
63.权利要求62所述的药物组合物，其中所述的载体为非肠道用载体。
64.权利要求62所述的药物组合物，其中所述的载体为口服用载体。
65.权利要求62所述的药物组合物，其中所述的载体为局部用载体。
66.预防、治疗或改善哺乳动物原因上涉及体内P2X7受体异常活性的疾病或病症的方法，包括对该哺乳动物给予有效治疗疾病或治疗病症用量的权利要求1-61中任意项的化合物或权利要求62的药物组合物。
67.权利要求66所述的方法，其中所述的疾病或病症为疼痛病症。
68.权利要求66所述的方法，其中所述的疾病或病症为自身免疫疾病。
69.权利要求66所述的方法，其中所述的疾病或病症为炎性疾病或病症。
70.权利要求66所述的方法，其中所述的疾病或病症为神经性或神经变性疾病或病症。
71.预防、治疗或改善哺乳动物疾病或病症的方法，所述的疾病或病症选自：疼痛，包括急性，炎性和神经性疼痛，慢性疼痛，牙痛和头痛，包括偏头痛，丛集性头痛和紧张性头痛，帕金森病，多发性硬化；由神经炎症、外伤性脑损伤和脑炎介导或导致它们的疾病和病症；中枢介导的神经精神疾病和障碍，躁狂性抑郁，双相性精神疾病，焦虑，精神分裂症，进食障碍，睡眠障碍和认知障碍；癫痫和癫痫发作症；前列腺、膀胱和肠功能障碍，尿失禁，排尿犹豫，直肠超敏反应，大便失禁，良性前列腺肥大和炎性肠病；呼吸和气道疾病和障碍，过敏性鼻炎，哮喘和反应性气道病和慢性阻塞性肺疾病；由炎症，关节炎、类风湿性关节炎和骨关节炎介导和导致它们的疾病和障碍，心肌梗死，各种自身免疫性疾病和障碍，眼色素层炎和动脉粥样硬化；痒/瘙痒，银屑病；肥胖；脂代谢紊乱；癌症；血压；脊髓损伤；和肾病症；该方法包括对所述的哺乳动物给予有效治疗疾病或治疗病症用量的权利要求1-61中任意项的化合物或权利要求62的药物组合物。
72.权利要求71所述的方法，其中所述的疾病或病症为帕金森病。
73.权利要求71所述的方法，其中所述的疾病或病症为类风湿性关节炎。
74.权利要求71所述的方法，其中所述的疾病或病症为外伤性脑损伤。
75.权利要求71所述的方法，其中所述的疾病或病症为骨关节炎。
76.权利要求71所述的方法，其中所述的疾病或病症为疼痛。
77.权利要求71所述的方法，其中所述的疾病或病症为神经性疼痛。
78.治疗患有至少一种症状的哺乳动物的方法，所述的症状选自接触辣椒碱的症状，因接触热导致的灼伤或刺激症状，因接触光导致的灼伤或刺激症状，灼伤症状，因接触催泪性毒气导致的支气管收缩或刺激，以及因接触酸导致的灼伤或刺激症状，该方法包括对所述的哺乳动物给予有效治疗疾病或治疗病症用量的权利要求1-61中任意项的化合物或权利要求62的药物组合物。
79.权利要求77所述的方法，其中所述的疼痛与选自如下的病症相关：乳腺切除后疼痛综合征，残肢痛，幻肢痛，口腔神经性疼痛，夏科痛，牙痛，毒蛇咬伤，蜘蛛咬伤，昆虫螫伤，疱疹后神经痛，糖尿病性神经病，交感反射性营养不良，三叉神经痛，骨关节炎，类风湿性关节炎，纤维肌痛，格-巴综合征，感觉异常性股痛，口腔灼热综合征，双侧周围神经病，灼痛，坐骨神经炎，周围神经炎，多神经炎，节段性神经炎，贡博神经炎，神经元炎，颈臂神经痛，颅神经痛，膝状节神经痛(egniculate neuralgia)，舌咽神经痛，偏头痛性神经痛，特发性神经痛，肋间神经痛，乳腺内的神经痛，下颌关节痛，摩顿神经痛，鼻睫部神经痛，枕神经痛，红斑性肢痛病，斯路德神经痛，蝶腭神经痛(splenopalatine neuralgia)，眶上神经痛，维杜斯神经痛，窦性头痛，紧张性头痛，产程，分娩，肠气，月经，癌症和创伤。
80.权利要求1-61中任意一项的化合物，用作药物。
81.权利要求1-61中任意一项的化合物，用作治疗或预防疾病或病症的药物，所述的疾病或病症选自疼痛，包括急性、炎性和神经性疼痛，慢性疼痛，牙痛和头痛，包括偏头痛，丛集性头痛和紧张性头痛，帕金森病，多发性硬化；由神经炎症，外伤性脑损伤，脑炎介导的疾病和病症或导致它们的疾病和病症；中枢介导的神经精神疾病和病症，躁狂性抑郁，双相性精神疾病，焦虑，精神分裂症，进食障碍，睡眠障碍和认知障碍；癫痫和癫痫发作症；前列腺、膀胱和肠功能障碍，尿失禁，排尿犹豫，直肠超敏反应，大便失禁，良性前列腺肥大和炎性肠病；呼吸和气道疾病和病症，过敏性鼻炎，哮喘和反应性气道病和慢性阻塞性肺疾病；由炎症、关节炎、类风湿性关节炎和骨关节炎介导和导致它们的疾病和障碍，心肌梗死，各种自身免疫性疾病和障碍，眼色素层炎和动脉粥样硬化；痒/瘙痒，银屑病；肥胖；脂代谢紊乱；癌症；血压；脊髓损伤；和肾病症。
82.权利要求1-61中任意项的化合物在制备用于治疗或预防疾病或病症的药物中的应用，所述的疾病或病症选自：疼痛，包括急性、炎性和神经性疼痛，慢性疼痛，牙痛和头痛，包括偏头痛，丛集性头痛和紧张性头痛，帕金森病，和多发性硬化；由神经炎症、外伤性脑损伤和脑炎介导的疾病和病症或导致它们的疾病和障碍；中枢介导的神经精神疾病和病症，躁狂性抑郁，双相性精神疾病，焦虑，精神分裂症，进食障碍，睡眠障碍和认知障碍；前列腺、膀胱和肠功能障碍，尿失禁，排尿犹豫，直肠超敏反应，大便失禁，良性前列腺肥大和炎性肠病；呼吸和气道疾病和病症，过敏性鼻炎，哮喘和反应性气道病和慢性阻塞性肺疾病；由炎症、关节炎、类风湿性关节炎和骨关节炎介导和导致它们的疾病和障碍，心肌梗死，各种自身免疫性疾病和障碍，眼色素层炎和动脉粥样硬化；痒/瘙痒，银屑病；肥胖；脂代谢紊乱；癌症；血压；因免疫功能障碍导致或与之相关的脊髓损伤病症；和肾病症。
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