CN101439152B - 一种治疗白内障的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗白内障的中药组合物及其制备方法和质量控制方法。该中药组合物由石斛、枳壳、麦冬、黄芩、决明子、甘草、天冬、牛膝、菟丝子等原料药组成，按常规工艺加入辅料制成片剂、胶囊剂、滴丸剂、丸剂、颗粒剂等临床可接受的剂型。本发明药物组合物质量控制方法包括麦冬、菟丝子、五味子的薄层鉴别及黄芩中黄芩苷的含量测定，该方法能有效控制药品质量，保证药品疗效。本发明药物具有滋养肝肾，益气明目的功效，用于昏眇内障，视力减退，瞳神散大及圆翳内障，云雾移睛之视物昏朦，迎风流泪等症效果好。

Description

一种治疗白内障的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种用于治疗眼部疾病的中药组合物及其制备方法和质量控制方法，尤其涉及一种治疗白内障的中药组合物及其制备方法和质量控制方法，属于中药技术领域。

背景技术

白内障发病的原因主要是肝阳上亢引起的眼部微循环不畅和晶状体代谢蛋白不能完全分解排除体外，造成眼睛内晶状体发生混浊由透明变成不透明，阻碍光线进入眼内，从而影响了视力。初期混浊对视力影响不大，当浑浊加重时，阻碍了光线透过晶体聚焦于位于眼球内壁的光敏组织视网膜，晶体的浑浊由组成晶体的晶体蛋白变性凝聚所致，明显影响视力甚至失明。

白内障是目前国内外首要致盲眼病之一。在我国发病率为0.21-1.64％，致盲率为10-20％。白内障的主要症状是无痛无觉的视力减退和视物模糊，轻者视力减退，重者视力可能只看见手动或光感，此外还可表现为近视度数加深，需要经常频繁更换眼镜；单眼复视或多视症，眼前固定性黑影或视物发暗，色彩失去鲜明度，及畏光、眩光等症状，一般情况下白内障无红痛症状。如不及时预防和治疗，视力将严重下降和失明，白内障的治疗不及时和治疗不当，都可造成对人眼睛的极大危害。

对白内障的医治近年虽有新的发展，但医学上大多数还是推崇手术治疗和药物保守治疗两大方法，手术治疗是目前治疗白内障比较有效的手段，但手术治疗有它的适应性和局限性，除费用较高外，对手术的条件，尤其是医生的技术水平有较高的要求。另外手术治疗是停留在对“症”的治疗上，没有根本解决“因”的问题，换句话说即没有彻底改善眼部微循环，仍存在有复发的可能。另一方面，由于白内障患者大多是年老体弱的高龄人，且又不同程度存在着一些疾病，如心脏病、高血压、糖尿病、眼底病等一些老年综合疾病，这些疾病都给手术治疗带来很多不确定的风险因素，一旦出现意外，可以导致终身失明。传统医学研究证明，白内障通过中医药整体科学治疗，可完全达到彻底治愈的目的，所以最科学有效的方法就是服用药物进行治疗，但目前用于治疗白内障的中药很少，疗效相对显著的就更少，所以提供一种能有效治疗白内障的药物是非常有必要的。

发明内容

本发明目的在于提供一种治疗白内障的中药组合物；

本发明目的还在于提供一种治疗白内障的中药组合物制备方法；

本发明目的还在于提供一种治疗白内障的中药组合物的质量控制方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现的：

本发明所述的治疗白内障的中药组合物是由如下重量比的原料药制成的：

石斛    25～40重量份  枳壳    30～40重量份  麦冬    65～75重量份

黄芩    18～25重量份  决明子        30～40重量份  甘草      18～25重量份

天冬    65～75重量份  牛膝          30～40重量份  菟丝子    18～25重量份

熟地黄  65～75重量份  茯苓          30～40重量份  苦杏仁    30～40重量份

蒺藜    30～40重量份  菊花          18～25重量份  密蒙花    30～40重量份

知母    40～50重量份  川芎          10～20重量份  五味子    18～25重量份

党参    18～25重量份  黄芪          18～25重量份  地黄      65～75重量份

枸杞子  30～40重量份  水牛角浓缩粉  40～50重量份  防风      18～25重量份

羚羊角  10～20重量份  栀子          10～20重量份  当归      18～25重量份

锁阳    30～40重量份

上述原料药优选为以下配比：

石斛    40重量份    枳壳        33重量份    麦冬      70重量份

黄芩    20重量份    决明子      35重量份    甘草      23重量份

天冬    69重量份    牛膝        35重量份    菟丝子    23重量份

熟地黄  69重量份    茯苓        35重量份    苦杏仁    35重量份

蒺藜    35重量份    菊花        23重量份    密蒙花    35重量份

知母    43重量份    川芎        18重量份    五味子    23重量份

党参    25重量份    黄芪        23重量份    地黄      70重量份

枸杞子  35重量份    水牛角浓缩粉45重量份    防风      23重量份

羚羊角  17重量份    栀子        15重量份    当归      23重量份

锁阳    35重量份

本发明所述的治疗白内障的中药组合物还可由如下重量比的原料药制成的：

石斛    25～40重量份  枳壳          30～40重量份  麦冬       65～75重量份

黄芩    18～25重量份  决明子        30～40重量份  甘草       18～25重量份

天冬    65～75重量份  牛膝          30～40重量份  菟丝子     18～25重量份

熟地黄  65～75重量份  茯苓          30～40重量份  苦杏仁     30～40重量份

蒺藜    30～40重量份  菊花          18～25重量份  青葙子     30～40重量份

知母    40～50重量份  川芎          10～20重量份  五味子     18～25重量份

人参    18～25重量份  山药          18～25重量份  地黄       65～75重量份

枸杞子  30～40重量份  水牛角浓缩粉  40～50重量份  防风       18～25重量份

羚羊角  10～20重量份  栀子          10～20重量份  当归       18～25重量份

杜仲    30～40重量份  石决明        20～30重量份  沙苑子     18～25重量份

上述原料药还可以优选为以下配比：

石斛    40重量份    枳壳      33重量份    麦冬      70重量份

黄芩    20重量份    决明子    35重量份    甘草      23重量份

天冬    69重量份    牛膝      35重量份    菟丝子    23重量份

熟地黄  69重量份    茯苓      35重量份    苦杏仁    35重量份

蒺藜    35重量份    菊花        23重量份    青葙子    35重量份

知母    43重量份    川芎        18重量份    五味子    23重量份

人参    25重量份    山药        23重量份    地黄      70重量份

枸杞子  35重量份    水牛角浓缩粉45重量份    防风      23重量份

羚羊角  17重量份    栀子        15重量份    当归      23重量份

杜仲    35重量份    石决明      25重量份    沙苑子    25重量份

本发明所述的治疗白内障的中药组合物原料药中杜仲需盐水炒、当归需酒浸、枳壳需麸炒、蒺藜需盐水炒。

白内障中医称圆翳内障，主要是年老体弱，阴阳失调，气血不足，气滞血淤，精气不能上荣于目，导致晶珠混浊而形成。其发病多与肝、肾、脾亏虚有着密切关系；另外，肾精亏损也可导致阴虚火旺，虚火上炎，损伤神膏、神水而发病。本发明药物组合物中石斛、天冬、麦冬清热凉血、养阴生津，以清虚热。熟地黄、枸杞子、杜仲、菟丝子、沙苑子、五味子、牛膝，补益肝肾益精明目。人参、山药、茯苓、甘草补脾益气，以助气血生化之源，以上诸药补肝肾、益精血，益气养阴，濡养眼目。水牛角、知母、黄芩、栀子、羚羊角、决明子、青葙子、石决明清热泻火，凉血明目。菊花、蒺藜、川芎、当归、防风、苦杏仁、枳壳活血行气，疏风明目。诸药合用，共奏滋养肝肾，益气明目之效。

本发明所述的组合物可按常规工艺加入辅料制成片剂、胶囊剂、滴丸剂、丸剂、颗粒剂等临床可接受的剂型；所述辅料包括溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂、润滑剂、基质等。

本发明所述的中药组合物片剂的制备方法为：

称取原料药：

石斛    34.7重量份    枳壳          34.7重量份    麦冬      69.6重量份

黄芩    23.1重量份    决明子        34.7重量份    甘草      23.1重量份

天冬    69.3重量份    牛膝          34.7重量份    菟丝子    23.1重量份

熟地黄  69.3重量份    茯苓          34.7重量份    苦杏仁    34.7重量份

蒺藜    34.7重量份    菊花          23.1重量份    青葙子    34.7重量份

知母    46.3重量份    川芎          16.1重量份    五味子    23.1重量份

人参    23.1重量份    山药          23.1重量份    地黄      69.3重量份

枸杞子  34.7重量份    水牛角浓缩粉  46.3重量份    防风      23.1重量份

羚羊角  17.3重量份    栀子          16.1重量份    当归      23.1重量份

杜仲    34.7重量份    石决明        24.5重量份    沙苑子    23.1重量份

以上三十味，水牛角浓缩粉粉碎至200目以上，备用；人参、羚羊角、五味子、枸杞子、川芎、山药、地黄、当归、黄芩、栀子、防风、石决明粉碎至120目，备用；其余石斛等十七味加水煎煮，第一次加8倍量水煎煮3小时，第二次加6倍量水煎煮2小时，合并煎液，静置沉淀，吸取上清液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.30(80℃)的稠膏，加入上述药 粉及水牛角浓缩粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，制粒，压片，包薄膜衣；包薄膜衣时，包衣锅进风温度为40℃，喷液速度为25kg/h，包衣锅转速开始为4转/分，逐渐到7转/分；喷液结束后，用热风干燥5分钟，即得。

本发明所述的中药组合物的质量控制方法包括以下鉴别方法和/或质量控制方法中的一种或几种：

鉴别：

(1)取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物，研细，加三氯甲烷20ml，盐酸1ml，水浴回流20～40分钟，放凉，滤过，滤液用水洗涤2～3次，每次20ml，三氯甲烷液浓缩至2ml作为供试品溶液；另取麦冬对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液1～2μl，对照药材溶液1～2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(30～60℃)-三氯甲烷(2～4∶4～8)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)取相当于原料药材7.2g的本发明药物组合物，研细，加石油醚(30-60℃)40ml，超声处理20～40分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇30ml超声处理10～15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI  B)试验，吸取上述供试品溶液4～8μl，对照药材溶液1～3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(7～11∶4～6∶3～5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(3)取相当于原料药材12g的本发明药物组合物，研细，加三氯甲烷30ml，加热回流20～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4～7μl，分别点于同一硅胶G F₂₅₄薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(12～17∶3～6∶1～3)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(4)取相当于原料药材12g的本发明药物组合物，研细，加乙酸乙酯40ml，加热回流20～40分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取柚皮苷对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(3～6∶2～4∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热数分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(5)取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物，研细，加甲醇30ml，加热回流05～1.5 小时，滤过，滤液蒸干，残渣加25％硫酸溶液30ml使溶解，加热回流1.5～2.5小时，放冷，用乙醚振摇提取1～3次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取牛膝对照药材2g，同法制成对照药材溶液照。薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(3～5∶1～2∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(6)取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物，研细，加乙醚10ml，振摇8～12分钟，弃去乙醚。残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯30ml，加热回流0.5～1.5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(8～12∶5～9∶1～3∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

含量测定：

照高效液相色谱法(2005版中国药典一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-冰醋酸(40～60∶30～50∶0.2～0.5)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备  精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含黄芩苷0.12mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得。

供试品溶液的制备取相当于原料药材1.2g的本发明药物组合物，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇20ml，精密称重，超声处理20～40分钟，放凉后，用甲醇补失重量，摇匀，取此液用微孔滤膜过滤，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。相当于原料药材0.72g的本发明药物组合物含黄芩以黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₁)计，不得少于1mg。

本发明所述的中药组合物的质量控制方法优选为以下鉴别方法和/或质量控制方法中的一种或几种：

鉴别：

(1)取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物，研细，加三氯甲烷20ml，盐酸1ml，水浴回流30分钟，放凉，滤过，滤液用水洗涤2次，每次20ml，三氯甲烷液浓缩至2ml作为供试品溶液；另取麦冬对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液2μl，对照药材溶液1μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以石油醚(30～60℃)-三氯甲烷(2∶6)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)取相当于原料药材7.2g的本发明药物组合物，研细，加石油醚(30-60℃)40ml，超声 处理30分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇30ml超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10∶5∶4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(3)取相当于原料药材12g的本发明药物组合物，研细，加三氯甲烷30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G F₂₅₄薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(4)取相当于原料药材12g的本发明药物组合物，研细，加乙酸乙酯40ml，加热回流30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取柚皮苷对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热数分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(5)取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物，研细，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加25％硫酸溶液30ml使溶解，加热回流2小时，放冷，用乙醚振摇提取2次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取牛膝对照药材2g，同法制成对照药材溶液照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(4∶1∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(6)取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物，研细，加乙醚10ml，振摇10分钟，弃去乙醚。残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(10∶7∶2∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

含量测定：

照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶0.4)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含黄芩苷0.12mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得。

供试品溶液的制备取相当于原料药材1.2g的本发明药物组合物，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇20ml，精密称重，超声处理30分钟，放凉后，用甲醇补失重量，摇匀，取此液用微孔滤膜过滤，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

相当于原料药材0.72g的本发明药物组合物含黄芩以黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₁)计，不得少于1mg。

本发明所提供的中药组合物的质量控制方法，是通过大量具体创造性试验筛选后得到，鉴别方法中通过对样品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得鉴别专属性很好，而且方法经济适用、结果快速。含量测定方法中通过对供试品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得含量测定方法可以很有效的对产品进行质量控制，并且用该方法测定的产品要相比其他方法测定的产品在药理效果上表现的更为稳定。

下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。

试验例1工艺研究试验

本发明药物组合物处方药味较多，在设计制备工艺时根据各味药所含有效成份的不同，经过多次考察，最后确定将其中部分原料药材直接粉碎入药，另一部分原料药材则以水提取物入药，这样不仅满足了制剂的需要，而且最大限度保留了药物中的有效成份。下面是部分工艺试验的结果。

1、水提取工艺考察

按石斛26g、枳壳(炒)26g、麦冬52.2g、杜仲(去粗皮盐水炒)26g、决明子26g、甘草17.3g、天冬52g、牛膝26g、菟丝子17.3g、熟地黄52g、茯苓(去皮)26g、苦杏仁26g、蒺藜(盐水炒)26g、菊花17.3g、青葙子26g、知母34.7g配置3份药材，分三组进行试验，第一组加水量6倍量、4倍量，第二组加水量8倍量、6倍量，第三组加水量10倍量、8倍量，以出膏量为指标，确定加水量。结果见表1：

表1：水提加水量

以出膏量为指标，可以看出加水8倍量、6倍量出膏量较好，所以生产中加水提取两次，第一次加8倍量水，第二次加6倍量水。

2、粉碎工艺考察

按以下重量份配置药材，每份含人参10.4g、羚羊角7.8g、五味子10.4g、枸杞子15.6g、川芎7.28g、山药10.4g、地黄31.2g、当归10.4g、黄芩10.4g、栀子10.4g、防风10.4g，分别分四组做实验：粉碎细度分别为：80目、100目、120目、200目， 分别以粉碎损耗为指标确定粉碎细度。结果见表2：

表2：粉碎试验结果

以上结果表明：粉碎细度为120目时，各项指标较好，故生产中选用120目。

3、成型工艺研究

以下主要是对片剂成型工艺考察的部分试验方法和结果。

1)水牛角浓缩粉粒度对于制剂的成型工艺有很大的影响。为此我们选择了100目、200目、300目的水牛角浓缩粉进行成型工艺的研究。

取不同目数的水牛角浓缩粉20g，分别加入药粉131g，混合均匀，加入170g浸膏，混合均匀，制备成颗粒，压片，测定崩解时限。结果见表3。

表3  成型工艺的考察

结果表明：采用200目以上水牛角浓缩粉，所压片剂光滑，色泽均匀无斑点，颗粒感较少，崩解迅速。因此选用200目以上水牛角浓缩粉制备片剂。

2)片剂包衣工艺研究

为了保护本发明药物不受空气中湿气、氧气等作用，增加药品的稳定性，采用包薄膜衣。这是因为包薄膜衣生产周期短，操作简便，干燥速度快，药物受湿热影响小，有利于提高产品质量。下面对本发明药物片剂包衣工艺进行研究。

(1)试验设计：

参考有关文献及包衣粉厂家的资料，我们确定包衣粉的浓度为8％。下面对影响包衣的几个关键工艺参数：进风温度，喷枪的喷液速度，包衣锅转速进行优选。由于上述三因素在包衣过程中会相互影响，故以片子的外观、片重差异为考察指标，对其进行三因素三水平的正交试验。试验考察的因素及水平设计如下表4：

表4  包衣工艺试验因素及水平设计表

(2)试验过程：

①试验材料：胃溶型包衣粉，95％乙醇，纯化水。

②主要设备及仪器：高效流动层包衣机、喷枪、空压机、GB-1崩解时限测定仪、分析天平(梅特勒AE-240)

③包衣基本处方：胃溶型包衣粉、95％乙醇、纯化水、本发明药物素片

④包衣液配制：将胃溶型包衣粉准确称量后，加入95％乙醇适量，搅拌半个小时后，加纯化水配成乙醇浓度为80％，包衣液浓度为8％的包衣溶液，继续搅拌摇匀，待包衣液完全溶解，既可。

⑤包衣操作：

取本发明药物素片置包衣锅中，按设计好的正交试验方案进行试验，密切关注各试验在包衣过程中的变化，对其外观和片重差异进行检查。我们把片外观分为三个等级：1.片表面有蜂窝；2.包衣时发生粘连；3表面光滑。把片重差异的检查结果情况划分为三个等级：1.片子偏重；2.片子偏轻；3.符合要求。

⑥正交实验结果见下表5-7：

表5正交试验结果表

表6  片外观方差分析表

表7  片重差异方差分析表

⑦试验结果分析：

通过正交实验结果可以看出，从片子外观来看，A因素进风温度有显著性差异，最佳工艺为A₂B₃C₂D₁，从片子片重差异来看，B因素喷枪的喷液速度有显著性差异，最佳工艺为A₂B₃C₃D₁，而C因素包衣锅转速均无显著性差异，故结合生产综合考虑，确定最佳工艺为A₂B₃C₂D₁，即进风温度为40℃，喷液速度为25kg/h，包衣锅转速为7转/分，考虑到刚开始包衣时，为了避免引起素片的磨损，开始时选用4转/分的速度，随着薄膜衣层在素片表面的不断形成，再逐步增加转速，直到7转/分。

(2)对包衣工艺进行验证，经过以上包衣工艺研究，以正交确定的包衣工艺进行包衣，进风温度为40℃，喷液速度为25kg/h，包衣锅转速开始时选用4转/分的速度，随着薄膜衣层在素片表面的不断形成，再逐步增加转速，直到7转/分。喷液结束后，用热风干燥5分钟。验证结果如下表8：

表8  包衣工艺验证试验

验证实验表明：三次验证实验，各项指标均较好，参数稳定，所以确定包衣工艺为进风温度为40℃，喷液速度为25kg/h，包衣锅转速开始时选用4转/分的速度，随着薄膜衣层在素片表面的不断形成，再逐步增加转速，直到转速为7转/分。喷液结束后，用热风干燥5分钟。

试验例2质量控制方法试验研究

1、麦冬的薄层鉴别

1)供试品溶液的制备

取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物共四份，研细，分别加三氯甲烷20ml，盐酸1ml，水浴回流10、20、30、40分钟，放凉，滤过，滤液用水洗涤1、2、3次，每次20ml，三氯甲烷液浓缩至2ml作为供试品溶液；按照供试品及供试品溶液制备方法，制备缺麦冬的阴性对照品溶液；另取麦冬对照药材0.5g，同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液、阴性对照品溶液各2μl，对照药材溶液1μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以石油醚(30～60℃)-三氯甲烷(2∶6)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，比较供试品溶液、阴性对照品溶液与对照药材溶液在薄层板上的显色效果，结果见下表9：

表9供试品溶液制备方法

从上表结果可以看出，供试品溶液和对照品溶液的制备中，加热回流30min，水洗涤2次，所得供试品溶液和对照品溶液在薄层板上的显色效果已经符合试验要求，各斑点显色清晰，且阴性无干扰。

2)展开剂配比的选择

按照上述优选方法制备供试品溶液、阴性对照品溶液和对照药材溶液，吸取供试品溶液、阴性对照品溶液2μl，对照药材溶液1μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以石油醚(30～60℃)-三氯甲烷为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，比较不同配比展开剂下，供试品溶液、阴性对照品溶液与对照品溶液在薄层板上的展开效果，结果见下表10：

表10  展开剂配比的选择

从上表结果可以看出，石油醚(30～60℃)-三氯甲烷展开剂配比为2∶6时，薄层板上各斑点显色效果好，分离清晰，阴性无干扰，符合试验要求。

2、菟丝子的薄层鉴别

1)供试品溶液的制备

取相当于原料药材7.2g的本发明药物组合物四份，研细，分别加石油醚(30-60℃)40ml，超声处理10、20、30、40分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇30ml超声处理5、10、20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml作为供试品溶液。按照供试品及供试品溶液制备方法，制备缺菟丝子的阴性对照品溶液；另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制成对照药材溶液。

照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10∶5∶4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。比较供试品溶液、阴性对照品溶液与对照药材溶液在薄层板上的显色效果，结果见下表11：

表11  供试品溶液制备方法的考察

从上表可以看出，石油醚提取30min后，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇提取10min所得供试品溶液、阴性对照品溶液、对照药材溶液，在薄层板上展开后，各斑点显色清晰，分离效果好，无干扰，符合实验要求。

2)展开剂配比的选择

按上述优选方法制备供试品溶液和对照品溶液，吸取上述供试品溶液、阴性对照品溶液各5μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。比较不同配比展开剂，供试品和对照药材在薄层板上的展开效果，结果见下表12：

表12展开剂配比的选择

从上表可以看出，选择甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10∶5∶4)的配比为展开剂时，供试品和对 照药材在薄层板上的展开效果好，无脱尾及分离不清晰的现象，且阴性无干扰，符合试验要求。

3、五味子的薄层鉴别

方法一：取相当于原料药材12g的本发明药物组合物，研细，加三氯甲烷30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。按照供试品及供试品溶液制备方法，制备缺五味子的阴性对照品溶液。另取五味子甲素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G F₂₅₄薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。方法二：取相当于原料药材12g的本发明药物组合物，研细，加石油醚(30～60℃)20ml，超声处理20min滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚(30～60℃)0.5ml使溶解，作为供试品溶液。按照供试品及供试品溶液制备方法，制备缺五味子的阴性对照品溶液；另取五味子甲素对照品，加石油醚(30～60℃)制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G F₂₅₄薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。

上述方法一和方法二均能鉴别本发明药物中的五味子，但方法二重现性差，不稳定，所以选择方法一作为鉴别本发明药物中五味子的优选方法。

4、枳壳的薄层鉴别：

供试品溶液的制备：取相当于原料药材12g的本发明药物组合物，研细，加乙酸乙酯40ml，加热回流30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。

阴性对照品溶液的制备：按照供试品及供试品溶液制备方法，制备缺枳壳的阴性对照品溶液。对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热数分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。比较不同配比展开剂，供试品溶液、阴性对照品溶液和对照品溶液在薄层板上的展开效果，结果见下表13：

表13展开剂配比的选择

从上表可以看出，展开剂乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水的配比为5∶3∶1∶1时，展开效果好，各斑点分离效果好，且阴性无干扰。

5、牛膝的薄层鉴别

供试品溶液与对照品溶液制备方法：

方法一：取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物，研细，加乙醇20ml，加热回流40分钟，静置。取上清液10ml，加盐酸1ml，加热回流1小时后浓缩至约5ml，加水10ml，用石油醚(60～90℃20ml提取，提取液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。按照供试品及供试品溶液制备方法，制备缺牛膝的阴性对照品溶液；另取牛膝对照药材2g，同法制成对照药材溶液。

方法二：取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物，研细，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加25％硫酸溶液30ml使溶解，加热回流2小时，放冷，用乙醚振摇提取2次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。按照供试品及供试品溶液制备方法，制备缺牛膝的阴性对照品溶液；另取牛膝对照药材2g，同法制成对照药材溶液。

照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述方法一和方法二的三种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(4∶1∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。比较不同方法制备的供试品溶液、阴性对照品溶液和对照药材溶液在薄层板上的展开效果，结果见下表14：

表14供试品溶液制备方法的考察

从上表可以看出，在薄层色谱条件一定的情况下，方法一所制备的供试品溶液和对照品溶液展开效果好，且阴性无干扰。

6、栀子的薄层鉴别

方法一：取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物，研细，加乙醚10ml，振摇10分钟，弃去乙醚。残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。制备缺栀子的阴性样品，按照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(10∶7∶2∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，且阴性无干扰。

方法二：取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物，研细，加75％乙醇30ml，置温水浴中浸2小时，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含4mg的溶液，作为对照品溶液。制备缺栀子的阴性样品，按照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各5μl， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5∶5∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇(5→10)溶液，在110℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，但阴性有干扰。

方法三：取相当于原料药材4.8g的本发明药物组合物，研细，加乙醚25ml，浸渍1小时，时时振摇，滤过，弃去乙醚，药渣挥去乙醚，加乙酸乙酯30ml，超声处理25分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。制备缺栀子的阴性样品，按照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(12∶10∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，但斑点不清晰，有脱尾现象。

从以上对栀子的薄层鉴别的三种方法可以看出，方法一效果最好，不仅无干扰，而且重现性好。

4、黄芩的含量测定

1、供试品溶液制备方法的考察

取按实施例1制备的本发明药物，研细，取粉末约0.5g共4份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇20ml，精密称重，分别超声处理10、20、30、40分钟，放凉后，用甲醇补失重量，摇匀，用微孔滤膜过滤，比较不同超声时间所得供试品溶液中黄芩苷的含量，结果见下表15：

表15  甲醇超声时间考察

从上表可以看出，供试品加甲醇超声处理30min，已经基本将黄芩苷提取完全，所以选择超声处理30分钟。

2、含量测定方法考察：

检测仪器：岛津公司SPD-10ATvp型高效液相色谱仪

色谱柱：迪玛公司(ZorbaxC₁₈4.6×150mm，5μm)与C₁₈保护柱

流动相：甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶0.4)(甲醇为色谱级，冰醋酸为分析级，水为重蒸水)

检测波长：280nm    流速：1.200ml/min    柱温：室温

对照品：黄芩苷购于中国药品生物制品检定所    批号：0715-9909色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶0.4)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含黄芩苷 0.12mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得。

按照上述优选方法制备供试品溶液和阴性对照品溶液，即得。

(1)稳定性试验

取黄芩苷对照品溶液(0.12mg/ml)，分别于配制后0、2、4、6、12、24小时进样5ul，依法测定，结果表明，其在24小时内基本稳定，结果见下表16：

表16稳定性试验结果

(2)线性关系考察

取黄芩苷对照品溶液(0.12mg/ml)摇匀，分别精密吸取1、3、5、7、9μl注入高效液相色谱仪，测定峰面积，结果见下表，并绘制标准曲线，表明黄芩苷在0.12μg^-1.08μg间呈线性关系，其回归方程为：Area＝2856440.833*Amt-69684.5(r＝0.999957)，结果见下表17：

表17线性关系考察结果

(3)精密度试验精密吸取对照品溶液5pl，重复进样5次，求得相对标准偏差＜2％，结果见下表18：

表18精密度试验结果

(4)重现性试验按实施例1制备的本发明药物，取同一批本发明药物5份，对每份进行测定，求得相对标准偏差＜2％，结果见下表19：

表19重现性试验结果

(5)回收率试验  按实施例1制备的同一批本发明药物，精密称取0.25g，再精密加入黄芩苷(0.06mg/ml)对照品20ml，按正文供试品溶液的制备方法操作，测定其含量，并计算其回收率，测定结果见下表20：

表20  回收率试验结果

(6)空白试验  吸取阴性对照品溶液，注入高效液相色谱仪，阴性对照品色谱图在相同保留时间，未出现黄芩苷色谱峰，阴性无干扰。

从以上方法学考察结果可以看出，本发明药物所选含量测定方法的稳定性、重现性、精密度等各方面均符合要求，能够有效制产品质量，保证药物疗效。

试验例3药效学试验研究

1材料和方法

1.1  实验材料

动物：SD清洁级大白鼠，体重40.0±2.5g，雌雄各半，由湖南省中医药研究院动物室提供。新西兰纯种白家兔，体重2.5±0.5kg，由湖南医科大学实验动物学部提供。

药物：①本发明药物I，按照实施例1制备的片剂；本发明药物II，按照实施例2制备的片剂；本发明药物III，按照实施例3制备的片剂。

②石斛夜光丸由广州陈李济制药厂提供。

③D-半乳糖上海试剂二厂出品。

主要仪器：医用裂隙灯为苏州光学仪器厂生产；WBX多部位微循环分析仪为徐州光学仪器厂生产。

1.2实验方法

1.2.1大鼠白内障的实验与观察方法

选用3周龄大鼠120只，经散瞳后裂隙灯检查晶状体透明。将动物随机分为6组，每组动物20只：①对照组给予蒸馏水5ml/kg灌胃；②D-半乳糖腹腔注射模型组简称为模型组；③D-半乳糖腹腔注射加石斛夜光丸剂灌胃称为丸剂组，灌胃剂量为1.08g/kg；④～⑥组为D-半乳糖腹腔注射加本发明药物I、II、III组，灌胃剂量为0.72g/kg，即相当于临床等效剂量的4倍。

造模腹腔注射剂量：配成50％D-半乳糖生理盐水溶液含5mmol氯化钾，每天30ml/kg，每日1次，连续20天，经常规消毒后一次腹腔注射。造模后动物有的死亡，以最后存活动物数观察和统计。

1.2.2家兔球结膜微循环的实验与观察方法

将清醒状态下的白毛家兔侧卧于一特制长方形兔盒内，使头及两耳外露，以铁环和兔头夹固定兔头、颈和嘴部，剪去眼睫毛，用眼科开睑器撑开上下睑，暴露球结膜血管，然后将高压灯呈45°斜射至结膜上，在动物安静状态下，用WBX微循环分析仪观察。用分子量为44000的10％高分子右旋糖酐6～7ml/kg耳缘静脉注射，使用6号针头可顺利推注药液的速度推注时间约5min，即可出现弥散性血管内凝血。根据药物动力学特点观察同一视野注射药物前后血液颜色、微血管管经、微血管血流速度和毛细血管网交叉点小血管周围变化。

分组方法：家兔40只，雌雄兼用，随机分为5组，每组8只，分别为：①生理盐水对照组；②～④本发明药物I、II、III组(0.72g/kg)；④石斛夜光丸剂组(1.08g/kg)，分别灌胃给药60min后，于耳缘静脉注射高分子右旋糖酐。

2结果

2.1对大鼠实验性白内障的作用

未注射D-半乳糖的大鼠晶状体始终保持透明，注射D-半乳糖的各组大鼠晶状体混浊程度记录可见表21。

表21本发明药物对各组大白鼠白内障形成的观察(％)

注：1)与模型组比较*P＜0.05

本发明药物I、II、III组、石斛夜丸剂组与模型组比较，均能延缓白内障的形成，本发明药物组药物对延缓大白鼠白内障的形成与模型组比较有显著性改善，效果均较石斛夜光丸疗效好，其中本发明药物I的效果最好。

2.2对家兔球结膜微循环的作用

给家兔注射高分子右旋糖酐后各组兔都现不同程度的弥漫性血管内凝血，对家兔球结膜微循环的影响，结果见表22：

表22本发明药物对家兔球结膜微循环的影响

(续表2)

注：P值为各组与对照组比较，用t检验和秩和检验

从上表可以看出，使用本发明药物及石斛夜光丸后，可部分抑制弥漫性血管内凝血，与对照组比较，血流速度增加，流态有不同程度改善。其中本发明药物的作用高于石斛夜光丸，以本发明药物I的作用最显著。

以上药效学实验结果表明本发明药物能明显延缓大鼠D-半乳糖所致白内障的形成，并能改善家兔球结膜微循环，其作用高于同等剂量的石斛夜光丸，说明本发明药物能有效治疗白内障。

具体实施例

实施例1

石斛  40g    枳壳        33g    麦冬      70g

黄芩  20g    决明子      35g    甘草      23g

天冬  69g    牛膝        35g    菟丝子    23g

熟地黄69g    茯苓        35g    苦杏仁    35g

蒺藜  35g    菊花        23g    青葙子    35g

知母  43g    川芎        18g    五味子    23g

人参  25g    山药        23g    地黄      70g

枸杞子35g    水牛角浓缩粉45g    防风      23g

羚羊角17g    栀子        15g    当归      23g

杜仲  35g    石决明      25g    沙苑子    25g

以上原料药材，除水牛角浓缩粉(粉碎至200目以上)外，人参、羚羊角、五味子、枸杞子、川芎、山药、地黄、当归、黄芩、栀子、防风、石决明粉碎成细粉(120目)，备用；其余石斛等十七味加水煎煮，第一次加8倍量水煎煮3小时，第二次加6倍量水煎煮2小时，合并煎液，静置沉淀，吸取上清液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.30(80℃)的稠膏，加入上述药粉及水牛角浓缩粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，制粒，压制成1000片，包薄膜衣，即得。包薄膜衣时，包衣锅进风温度为40℃，喷液速度为25kg/h，包衣锅转速开始为4转/分，逐渐到7转/分。

鉴别：

(1)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末2g，加三氯甲烷20ml，盐酸1ml，水浴回流30分钟，放凉，滤过，滤液用水洗涤2次，每次20ml，三氯甲烷液浓缩至2ml作为供试品溶液；另取麦冬对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液2μl，对照药材溶液1μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄ 薄层板上，以石油醚(30～60℃)-三氯甲烷(2∶6)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末3g，加石油醚(30-60℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇30ml超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10∶5∶4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(3)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末5g，加三氯甲烷30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(4)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末5g，加乙酸乙酯40ml，加热回流30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取柚皮苷对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热数分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(5)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末2g，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加25％硫酸溶液30ml使溶解，加热回流2小时，放冷，用乙醚振摇提取2次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取牛膝对照药材2g，同法制成对照药材溶液照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(4∶1∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(6)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末2g，加乙醚10ml，振摇10分钟，弃去乙醚。 残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(10∶7∶2∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实施例2

石斛  40g    枳壳        33g    麦冬    70g

黄芩  20g    决明子      35g    甘草    23g

天冬  69g    牛膝        35g    菟丝子  23g

熟地黄69g    茯苓        35g    苦杏仁  35g

蒺藜  35g    菊花        23g    密蒙花  35g

知母  43g    川芎        18g    味子    23g

党参  25g    黄芪        23g    地黄    70g

枸杞子35g    水牛角浓缩粉45g    防风    23g

羚羊角17g    栀子        15g    当归    23g

锁阳  35g

以上原料药材，除水牛角浓缩粉(粉碎至200目以上)外，羚羊角、五味子、枸杞子、川芎、地黄、当归、黄芩、栀子、防风粉碎成细粉(120目)，备用；其余石斛等十八味加水煎煮，第一次加8倍量水煎煮3小时，第二次加6倍量水煎煮2小时，合并煎液，静置沉淀，吸取上清液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.30(80℃)的稠膏，加入上述药粉及水牛角浓缩粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，制粒，压制成1000片，包薄膜衣，即得。包薄膜衣时，包衣锅进风温度为40℃，喷液速度为25kg/h，包衣锅转速开始为4转/分，逐渐到7转/分。

含量测定：

照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶0.4)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含黄芩苷0.12mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得。

供试品溶液的制备取本品适量除去薄膜衣，粉碎成细粉，取粉末约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇20ml，精密称重，超声处理30分钟，放凉后，用甲醇补失重量，摇匀，取此液用微孔滤膜过滤，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每片含黄芩以黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₁)计，不得少于1mg。

实施例3

石斛    34.7g    枳壳    34.7g    麦冬    69.6g

黄芩    23.1g    决明子      34.7g    甘草      23.1g

天冬    69.3g    牛膝        34.7g    菟丝子    23.1g

熟地黄  69.3g    茯苓        34.7g    苦杏仁    34.7g

蒺藜    34.7g    菊花        23.1g    青葙子    34.7g

知母    46.3g    川芎        16.1g    五味子    23.1g

人参    23.1g    山药        23.1g    地黄      69.3g

枸杞子  34.7g    水牛角浓缩粉46.3g    防风      23.1g

羚羊角  17.3g    栀子        16.1g    当归      23.1g

杜仲    34.7g    石决明      24.5g    沙苑子    23.1g

以上原料药材，除水牛角浓缩粉(粉碎至200目以上)外，人参、羚羊角、五味子、枸杞子、川芎、山药、地黄、当归、黄芩、栀子、防风、石决明粉碎成细粉(120目)，备用；其余石斛等十七味加水煎煮，第一次加8倍量水煎煮3小时，第二次加6倍量水煎煮2小时，合并煎液，静置沉淀，吸取上清液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.30(80℃)的稠膏，加入上述药粉及水牛角浓缩粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，制粒，压制成1000片，包薄膜衣，即得。包薄膜衣时，包衣锅进风温度为40℃，喷液速度为25kg/h，包衣锅转速开始为4转/分，逐渐到7转/分。

鉴别：

(1)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末2g，加三氯甲烷20ml，盐酸1ml，水浴回流30分钟，放凉，滤过，滤液用水洗涤2次，每次20ml，三氯甲烷液浓缩至2ml作为供试品溶液；另取麦冬对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液2μl，对照药材溶液1μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄ 薄层板上，以石油醚(30～60℃)-三氯甲烷(2∶6)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末3g，加石油醚(30-60℃)40ml，超声处  30分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇30ml超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10∶5∶4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(3)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末5g，加三氯甲烷30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检 视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(4)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末5g，加乙酸乙酯40ml，加热回流30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取柚皮苷对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热数分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(5)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末2g，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加25％硫酸溶液30ml使溶解，加热回流2小时，放冷，用乙醚振摇提取2次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取牛膝对照药材2g，同法制成对照药材溶液照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(4∶1∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(6)取本品适量，去薄膜衣，研细，称取粉末2g，加乙醚10ml，振摇10分钟，弃去乙醚。残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(10∶7∶2∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

含量测定：

照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶0.4)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml中含黄芩苷0.12mg，取此液用微孔滤膜过滤，即得。

供试品溶液的制备取本品适量除去薄膜衣，粉碎成细粉，取粉末约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇20ml，精密称重，超声处理30分钟，放凉后，用甲醇补失重量，摇匀，取此液用微孔滤膜过滤，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每片含黄芩以黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₁)计，不得少于1mg。

实施例4

石斛    25g    枳壳      30g    麦冬    65g

黄芩    18g    决明子    30g    甘草    18g

天冬    65g    牛膝        30g    菟丝子    18g

熟地黄  65g    茯苓        30g    苦杏仁    30g

蒺藜    30g    菊花        18g    密蒙花    30g

知母    40g    川芎        10g    五味子    18g

党参    18g    黄芪        18g    地黄      65g

枸杞子  30g    水牛角浓缩粉40g    防风      18g

羚羊角  10g    栀子        10g    当归      18g

锁阳    30g

以上原料药材，除水牛角浓缩粉(粉碎至200目以上)外，羚羊角、五味子、枸杞子、川芎、地黄、当归、黄芩、栀子、防风粉碎成细粉(120目)，备用；其余石斛等十八味加水煎煮，第一次加8倍量水煎煮3小时，第二次加6倍量水煎煮2小时，合并煎液，静置沉淀，吸取上清液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.30(80℃)的稠膏，加入上述药粉及水牛角浓缩粉，混匀，干燥，粉碎至60～80目，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例5

石斛  40g    枳壳        40g    麦冬    75g

黄芩  25g    决明子      40g    甘草    25g

天冬  75g    牛膝        40g    菟丝子  25g

熟地黄75g    茯苓        40g    苦杏仁  40g

蒺藜  40g    菊花        25g    密蒙花  40g

知母  50g    川芎        20g    五味子  25g

党参  25g    黄芪        25g    地黄    75g

枸杞子40g    水牛角浓缩粉50g    防风    25g

羚羊角20g    栀子        20g    当归    25g

锁阳  40g

以上原料药材，除水牛角浓缩粉(粉碎至200目以上)外，羚羊角、五味子、枸杞子、川芎、地黄、当归、黄芩、栀子、防风粉碎成细粉(120目)，备用；其余石斛等十八味加水煎煮，第一次加8倍量水煎煮3小时，第二次加6倍量水煎煮2小时，合并煎液，静置沉淀，吸取上清液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.30(80℃)的稠膏，加入上述药粉及水牛角浓缩粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，用水泛丸，干燥，制成500g，即得。

实施例6

石斛  35g    枳壳    33g    麦冬      70g

黄芩  20g    决明子  35g    甘草      23g

天冬  69g    牛膝    35g    菟丝子    23g

熟地黄69g    茯苓    35g    苦杏仁    35g

蒺藜  35g    菊花    23g    青葙子    35g

知母  43g    川芎    18g    五味子    23g

人参    23g    山药        23g    地黄    70g

枸杞子  35g    水牛角浓缩粉45g    防风    23g

羚羊角  17g    栀子        15g    当归    23g

杜仲    35g    石决明      25g    沙苑子  25g

以上原料药材，除水牛角浓缩粉(粉碎至200目以上)外，人参、羚羊角、五味子、枸杞子、川芎、山药、地黄、黄芩、栀子、当归、防风、石决明粉碎成细粉(120目)，备用；其余石斛等十七味加水煎煮，第一次加8倍量水煎煮3小时，第二次加6倍量水煎煮2小时，合并煎液，静置沉淀，吸取上清液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.30(80℃)的稠膏，加入上述药粉及水牛角浓缩粉，混匀，干燥，粉碎至150目，与熔融的聚乙二醇4000按照1∶3的比例混合均匀，滴入冷却的液体石蜡中，制成滴丸，即得。

实施例7

石斛    34.7g    枳壳          34.7g    麦冬      69.6g

黄芩    23.1g    决明子        34.7g    甘草      23.1g

天冬    69.3g    牛膝          34.7g    菟丝子    23.1g

熟地黄  69.3g    茯苓          34.7g    苦杏仁    34.7g

蒺藜    34.7g    菊花          23.1g    青葙子    34.7g

知母    46.3g    川芎          16.1g    五味子    23.1g

人参    23.1g    山药          23.1g    地黄      69.3g

枸杞子  34.7g    水牛角浓缩粉  46.3g    防风      23.1g

羚羊角  17.3g    栀子          16.1g    当归      23.1g

杜仲    34.7g    石决明        24.5g    沙苑子    23.1g

以上原料药材，除水牛角浓缩粉(粉碎至200目以上)外，人参、羚羊角、五味子、枸杞子、川芎、山药、地黄、当归、黄芩、栀子、防风、石决明粉碎成细粉(120目)，备用；其余石斛等十七味加水煎煮，第一次加8倍量水煎煮3小时，第二次加6倍量水煎煮2小时，合并煎液，静置沉淀，吸取上清液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.30(80℃)的稠膏，加入上述药粉、水牛角浓缩粉、加糊精350g及甜橘素5g，混匀，制粒、干燥，制成1000g，即得。

Claims (3)

1.一种的治疗白内障的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由如下重量比的原料药制成的：

石斛    25～40重量份  枳壳          30～40重量份  麦冬    65～75重量份

黄芩    18～25重量份  决明子        30～40重量份  甘草    18～25重量份

天冬    65～75重量份  牛膝          30～40重量份  菟丝子  18～25重量份

熟地黄  65～75重量份  茯苓          30～40重量份  苦杏仁  30～40重量份

蒺藜    30～40重量份  菊花          18～25重量份  密蒙花  30～40重量份

知母    40～50重量份  川芎          10～20重量份  五味子  18～25重量份

党参    18～25重量份  黄芪          18～25重量份  地黄    65～75重量份

枸杞子  30～40重量份  水牛角浓缩粉  40～50重量份  防风    18～25重量份

羚羊角  10～20重量份  栀子          10～20重量份  当归    18～25重量份

锁阳    30～40重量份。

2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由如下重量比的原料药制成的：

石斛    40重量份    枳壳          33重量份    麦冬    70重量份

黄芩    20重量份    决明子        35重量份    甘草    23重量份

天冬    69重量份    牛膝          35重量份    菟丝子  23重量份

熟地黄  69重量份    茯苓          35重量份    苦杏仁  35重量份

蒺藜    35重量份    菊花          23重量份    密蒙花  35重量份

知母    43重量份    川芎          18重量份    五味子  23重量份

党参    25重量份    黄芪          23重量份    地黄    70重量份

枸杞子  35重量份    水牛角浓缩粉  45重量份    防风    23重量份

羚羊角  17重量份    栀子          15重量份    当归    23重量份

锁阳    35重量份。

3.如权利要求1或2所述中药组合物，其特征在于该中药组合物原料药可按常规工艺加入辅料制成片剂、胶囊剂、滴丸剂、丸剂、颗粒剂；所述辅料包括溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂、润滑剂、基质。