CN101433568A

CN101433568A - 牛蒡根水提物的提取及应用

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Publication number: CN101433568A
Application number: CNA2008102384829A
Authority: CN
Inventors: 陈靠山; 喻丽珍; 郭敏; 姚佳; 张鹏英; 李丽华; 何圣红; 陈世雄
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2008-12-19
Filing date: 2008-12-19
Publication date: 2009-05-20

Abstract

一种牛蒡根水提物的提取及应用，提取方法为：取牛蒡根除质，洗净切片，加6－8倍牛蒡根重量的水煎煮，过滤得一次药液；药渣加3倍水，煎煮过滤得二次药液；合并两次滤液浓缩至浓度为2g/ml的水煎药液，滤除固含物，经浓缩、冷冻干燥后得牛蒡根提取物干粉；所得牛蒡根提取物的干粉含多糖为95－98％。牛蒡根水提物作为药物原料和功能性食品原料，按照常规制备方法分别制成胶囊剂、片剂、散剂、颗粒剂、口服液体制剂或复方制剂。本发明所得牛蒡根水提物可用于预防和治疗男性勃起功能障碍。

Description

牛蒡根水提物的提取及应用

技术领域

本发明涉及一种牛蒡根水提物的提取及应用，属于生物技术领域。

背景技术

男性勃起功能障碍(Erectile dysfunction，简称ED)是指阴茎不能勃起、勃起不坚或坚而不持久以致不能性交者；国际阳痿学会对此作出的定义为：性交时阴茎不能有效地勃起导致性交不满足。ED是男性最常见的一种性功能障碍，据不完全统计，在男性人群中，ED发生率就达15％。

牛蒡根是菊科两年生大型草本植物牛蒡的根。牛蒡根呈纺锤形，肉质而直立。皮部黑褐色，有皱纹，易折断，断面黄白色，味微苦而性粘。经常食用牛蒂根能促进血液循环、清除肠胃垃圾、防止人体过早衰老、润泽肌肤、防止中风和高血压、清肠排毒、降低胆固醇和血糖，并适合糖尿病患者长期食用对类风湿、抗真菌有一定疗效，对癌症和尿毒症也有很好的预防和抑制作用，因此被誉为大自然的最佳清血剂。

在日本牛蒡成为寻常百姓家强身健体、防病治病的保健菜，它可以与人参相媲美，因此被称作东洋参。但对其药用价值等方面的报道很少，尤其是在治疗勃起功能障碍(ED)等方面的研究未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种牛蒡根水提物的提取及应用。

本发明通过大量的化学和药理研究测定，牛蒡根含有多糖、多酚物质及内酯类成分，可作为药物制剂或功能性食品的原料。

一种牛蒡根水提物的提取方法，提取方法如下：

1)取新鲜的牛蒡根，除去残根、杂质，洗净，切片后，加6倍牛蒡根重量的水煮沸后，文火煎煮30分钟，多次搅拌，过滤得一次药液；或干燥的牛蒡根，除去残根、杂质，洗净，切片后，加8倍牛蒡根重量的水煮沸后文火煎煮30分钟，多次搅拌，过滤得一次药液；

2)步骤1)所得药渣加3倍重量的水，煮沸后文火煎煮30分钟，过滤得二次药液；

3)合并两次滤液，用电炉将滤液浓缩至浓度为2g/ml的水煎药液；

4)将步骤3)所得的水煎药液过滤，滤除固含物，经浓缩、冷冻干燥后得到取率为4-7％牛蒡根提取物干粉；

5)所得干粉提取物通过苯酚硫酸法测定，牛蒡根提取物的干粉含多糖为95—98％。

一种牛蒡根水提物在防治和辅助治疗男性勃起功能障碍药物和食品中的应用，以牛蒡根水提物作为药物或功能性食品原料，按照常规制备方法分别制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、固体功能性食品；配比是：取1重量份牛蒡根水提物，与1-3重量份微晶纤维素、0.3-0.5重量份可压性淀粉、0.02-0.06重量份聚乙二醇-4000或聚乙二醇-6000混合；或按1重量份牛蒡根水提物与1～3重量份赋形剂混合。

所述的赋形剂为淀粉或糊精或乳糖或羟丙甲基纤维素或它们的混合物。

经动物实验研究证明，牛蒡根水提物具有防治或辅助治疗男性勃起功能障碍(ED)作用。包括增强阳虚小鼠机体功能，提高应激能力，补肾壮阳作用；促进去势小鼠的性功能；增强正常大鼠的勃起功能，升高NO、NOS和cGMP的含量及促进性激素分泌；能够明显缩短去势大鼠电刺激勃起潜伏期，增加去势大鼠血清中NO的含量，增加去势大鼠前列腺和精囊腺等脏器的重量；明显扩张A-ED大鼠阴茎组织的血管，升高大鼠阴茎组织的NO和cGMP含量。

具体实施方式

以下举例实施更具体说明本发明，实施例所示成分、比率、操作条件和顺序可在不脱离本发明精神的限定内适当变更。

实施例1：一种牛蒡根水提物的提取方法，提取方法如下：

1)取新鲜的牛蒡根3500g，除去残根、杂质，洗净，切片后，加6倍牛蒡根重量的水煮沸后文火煎煮30分钟，多次搅拌，过滤得一次药液；

3)合并两次滤液，用电炉将滤液浓缩至1650ml，得浓度为2g/ml的水煎药液；

4)将步骤3)所得水煎药液过滤，滤除固含物，经浓缩、冷冻干燥后得到取率为4-7％牛蒡根提取物干粉；

5)所得干粉通过苯酚硫酸法测定，牛蒡根提取物的干粉含多糖为95％。

实施例2：

一种牛蒡根水提物的提取方法，提取方法如下：

1)取干燥的牛蒡根3500g，除去残根、杂质，洗净，切片后，加8倍牛蒡根重量的水煮沸后文火煎煮30分钟，多次搅拌，过滤得一次药液；

5)所得干粉通过苯酚硫酸法测定，牛蒡根提取物的干粉含多糖为98％。

实施例3：

用牛蒡根水提物制备胶囊剂：取1重量份牛蒡根水提物与1.5份微晶纤维素、0.3重量份可压性淀粉、0.02重量份PEG6000混合均匀，填充即得。

实施例4：

用牛蒡根水提物制备片剂：取1重量份牛蒡根水提物与2.5份微晶纤维素、0.35重量份可压性淀粉混合均匀，按常规方法，压片即得。

实施例5：

用牛蒡根水提物制备颗粒剂：取1重量份牛蒡根水提物与2.85重量份微晶纤维素、0.35重量份可压性淀粉、0.02重量份PEG4000，湿法制粒，干燥即得。

实施例6：

用牛蒡根水提物制备固体功能性食品：取1重量份牛蒡根水提物与2.65重量份微晶纤维素及0.01重量份乳糖混合均匀后制粒，可填充胶囊或压制成片。

实施例7：牛蒡水提物对阳虚小鼠的影响

将雄性小鼠(体重20±2g)随机分成6组，每组11只：正常对照组(等容量蒸馏)、阳虚模型组(等容量蒸馏水)、阳性对照组(甲睾酮0.0013g/kg)及牛蒡水提物2、1、0.5g/kg三个剂量组。灌胃给药7天后开始造模，除正常对照组外每组小鼠后腿外侧肌肉注射氢化可的松0.25mg/d，连续注射9天，同时灌胃给药。之后继续灌胃给药7天后小鼠称重，测量小鼠肛温、低温负重游泳时间、自主活动次数及相关免疫、性器官脏器系数。实验结果表明，牛蒡水提物各剂量组能显著性增加阳虚小鼠的体温、低温负重游泳时间和自主活动次数，与模型组比较有显著性差异。同时牛蒡水提物2、1g/k可明显增加免疫器官脾脏和胸腺的重量，也可增加性腺器官包皮腺、前列腺、精囊腺、肾脏等的体重。结果见表1、2。

表1 牛蒡水提物对阳虚小鼠的影响(x±s n＝11)

注：与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01.

表2 牛蒡水提物对阳虚小鼠脏器系数的影响(x±s n＝11)

注：与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01.

实施例10：牛蒡根水提物对去势小鼠性功能的测定

昆明种雄性小鼠60只，同期饲养18～22g雌性小鼠60只。雄性小鼠随机分成6组，每组10只：正常对照组(等容量蒸馏)、阳虚模型组(等容量蒸馏水)、阳性对照组(甲睾酮0.0013g/kg)及牛蒡水提物2、1、0.5g/k三个剂量组。给药7d后，除正常对照组外其他组双侧摘除睾丸，继续给药14天，最后一次给药后60min，将雄性小鼠单只置于笼中，每笼中加入雌性小鼠1只，记录自雌性小鼠投于笼中雄鼠第1次捕捉雌鼠的时间即捕捉潜伏期，以及30min内雄性小鼠爬背的次数。

实验结果表明：去势小鼠给予牛蒡水提物0.5、1、2g/kg可使延长的捕捉潜伏期显著缩短，去势小鼠30min内爬背次数为1.9±1.0，较正常对照组明显减少，去势小鼠给予牛蒡水提物0.5、1、2g/kg可使小鼠爬背次数显著增加，结果见表3。

表3 牛蒡水提物对去势小鼠性功能的影响

注：与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01.

实施例11：牛蒡根水提物对正常大鼠勃起功能的影响

将雄性SD大鼠(200±10g)40只，随机分成四组：正常组(等体积蒸馏水)，牛蒡水提物1、0.5、0.25g/kg三个剂量组。连续灌胃给药10d，测量勃起潜伏期(刺激条件为电压8V，频率7Hz，波宽1.1ms)、阿朴吗啡诱导的勃起次数、血清和阴茎组织中NO、NOS含量、阴茎组织和睾丸cGMP含量(放免法)等。

实验结果表明：牛蒡水提物各剂量组均可极显著性缩电刺激勃起潜伏期、增加阿朴吗啡诱导的勃起次数与正常对照组比较有显著性差异。同时牛蒡水提物各剂量组均能升高血清中睾酮、NO、NOS含量，其中1、0.5g/kg剂量组还能显著升高阴茎组织NO、NOS、cGMP和睾丸组织中cGMP含量，实验结果见表4—8。

表4 牛蒡水提物对正常大鼠勃起潜伏期血清睾酮的影响(x±s n＝10)

注：与正常对照组比较，*p<0.05，**p<0.01.

表5 APO对正常大鼠的影响(x±s，n＝10)

注：与正常对照组比较，*p<0.05，**p<0.01.

表6 牛蒡水提物对正常大鼠对血清NO和NOS含量的影响(x±s，n＝10)

注：与正常对照组比较，*p<0.05，**p<0.01。

表7 牛蒡水提物对阴茎组织NO、NOS的影响(x±s n＝10)

注：与正常对照组比较，*p<0.05，**p<0.01.

表8 牛蒡水提物对正常大鼠对阴茎组织和睾丸cGMP的影响(x±s n＝10)

注：与正常对照组比较，*p<0.05，**p<0.01.

实施例12：牛蒡水提物对去势大鼠的影响

将雄性大鼠(140±20g)随机分为7组：假手术组(等容量蒸馏水)、模型组(等容量蒸馏水)、阳性对照组(甲睾酮0.9mg/kg)、牛蒡水提物1、0.5、0.25g/kg组。灌胃给药后7天后，戊巴比妥钠麻醉后摘除大鼠双侧睾丸建立去势模型。造模后继续给药14天后，测量大鼠电刺激勃起潜伏期，检血清中NO含量，解剖相关脏器。

实验结果表明，牛蒡根水提物能显著缩短去势大鼠勃起潜伏期，极显著升高血清中NO含量，与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。实验结果见表9。

表9 牛蒡根水提物对去势大鼠勃起潜伏期和血清中NO的影响(x±s n＝10)

注：与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01.

实施例13：牛蒡根水提物对血管型ED大鼠的影响

将雄性大鼠(140±20g)随机分为8组，每组10只：假手术组(等容量蒸馏水组)、模型组(等容量蒸馏水)、阳性对照组(甲睾酮和西地那非组)、牛蒡水提物1、0.5、0.25g/kg组。灌胃给药7天后大鼠经戊巴比妥钠麻醉后腹腔麻醉后，做下腹正中切口，切开皮肤、皮下组织、腹膜，进入腹腔，于髂总动脉分叉处向下找到髂总动脉，向下可见膀胱上动脉起自髂总动脉，其深面找到左髂内动脉，游离血管周围组织、筋膜，用6-0丝线于髂内动脉起始端结扎左髂内动脉，同法结扎右侧髂内动脉。假手术组打开腹腔后，即关腹不做髂内动脉结扎。手术后继续给药14天后，测定各组大鼠电刺激勃起潜伏期及阴茎组织中NO、cGMP含量。

实验结果表明，牛蒡根水提物各剂量组均能缩短大鼠电刺激勃起潜伏期，并显著升高阴茎组织中NO、cGMP含量，与模型组大鼠比较有显著性差异(P<0.01)。实验结果见表10、11。

表10 牛蒡根水提物对A-ED模型大鼠勃起潜伏期的影响

注：与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01.

表11 牛蒡水提物对A-ED模型大鼠阴茎组织NO和cGMP的影响(x±s n＝10)

注：与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01.

实施例14：牛蒡根治疗男性勃起功能障碍临床观察

临床资料

75例ED患者，均来自皖南医学院附设弋矶山医院门诊，2006年3月至2007年12月，采用随机分组，其中45例给予牛蒡根水提物制剂治疗(治疗组)，另30例给予六味地黄丸治疗(对照组)。其中治疗组年龄22～61岁，平均(36.56±11.39)岁，病程3个月～7年，平均(2.24±1.63)年；对照组年龄24～59岁，平均(37.81±10.09)岁，病程4个月～6年，平均(1.86±1.02)年。2组患者年龄、病程、勃起功能积分和病情轻重程度等方面比较均无显著性差异。

诊断标准和纳入标准

参照国际ED诊断原则，即男子在性刺激下，不能持续地达到或维持足够硬度的阴茎勃起以完成满意性交，且病程在3个月以上，国际勃起功能评分问卷≤21分，诊断为ED。排除病例标准：确诊的中度以上器质性勃起功能障碍患者；严重脏器疾病或精神病；配偶不能充分配合者。

治疗和观察方法

治疗组服用牛蒡根水提物10g/日，3次/日；对照组服用六味地黄丸(8粒/次，3次/日；两组均治疗8周。治疗前、治疗4周、治疗8周分别观察勃起功能、国际问卷(IIEF-5)积分改变，包括阴茎勃起信心、成功插入次数、勃起硬度、维持勃起能力和性交满意度5个问题。

临床疗效比较

治疗组临床控制5，显效9例，有效15例，总有效率为72.5％；对照组临床控制2例，显效2例，有效7例，总有效率为36.7％。治疗组疗效优于对照组。

勃起功能评分改变情况

治疗组在治疗4周、8周，勃起功能评分与治疗前比较显著增加(P<0.01)；治疗后治疗组与对照组勃起功能评分有显著性差异(P<0.05)。见表12

表12 两组治疗前后勃起功能评分积分改变比较(x±s)

注：与本组治疗前比较，△P<0.01；与对照组治疗后比较，*P<0.05

Claims

1、一种牛蒡根水提物的提取方法，其特征在于，提取方法如下：

2、一种牛蒡根水提物在防治和辅助治疗男性勃起功能障碍的药物和食品中的应用，其特征在于，以牛蒡根水提物作为药物或功能性食品的原料，按照常规制备方法分别制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、固体功能性食品；配比是：取1重量份牛蒡根水提物，与1～3重量份微晶纤维素、0.3-0.5重量份可压性淀粉、0.02-0.06重量份聚乙二醇-4000或聚乙二醇-6000混合；或按1重量份牛蒡根水提物与1-3重量份赋形剂混合。

3、如权利要求2所述的牛蒡根水提物在防治和辅助治疗男性勃起功能障碍的药物和食品中的应用，其特征在于，所述的赋形剂为淀粉或糊精或乳糖或羟丙甲基纤维素或它们的混合物。