CN101420965B - 长双歧杆菌在制备预防和治疗炎症的药物中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及长双歧杆菌ATCC BAA-999在制备用于预防或减轻哺乳动物炎症的药物或治疗性营养组合物中的用途。

Description

长双歧杆菌在制备预防和治疗炎症的药物中的用途
本发明涉及预防和治疗炎症的方法。 
过去，由于发现一些细菌菌株在摄入后表现出对人有价值的性质，而吸引了大量关注。特别是发现乳杆菌属(Lactobacillus)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)的特定菌株能够在肠道中建群，并在肠内短暂增殖，减少病原菌对肠上皮的附着，具有免疫调节效应，并帮助维持健康。此类细菌一般被称为益生菌。 
已经对鉴别新的益生菌菌株展开了广泛的研究。例如，EP 0 199 535、EP 0 768 375、WO 97/00078、EP 0 577 903和WO 00/53200公开了乳杆菌和双歧杆菌的特定菌株及其有益的效果。 
炎症是先天性免疫系统的复杂反应，涉及白细胞和血浆蛋白质在感染、毒素接触或细胞损伤部位的聚集和活化。虽然炎症在控制感染和促进组织修复中具有保护性功能，但是它还可以导致组织损伤和疾病。胃肠疾病例如炎症性肠病(例如克隆病、溃疡性结肠炎和隐窝炎)、食物过敏和由食物过敏导致的过敏性皮炎总是伴随着不同程度的异常肠炎症反应。已经建议通过平衡促炎性和抗炎性细胞因子或者诱导调节性细胞因子来减轻该肠道炎症作为这些慢性疾病的可能治疗。有大量此类细胞因子，其中例如IFN-γ、IL1、IL8、IL12和TNF-α被视为促炎性细胞因子，而例如IL10和TGF-β则被视为抗炎性细胞因子。 
巨噬细胞是组织中自单核细胞衍生的吞噬细胞，在先天性免疫反应中扮演重要角色。它们被微生物组分激活，并且一旦被激活，它们自身可以分泌促炎性和抗炎性细胞因子。在“Stimulation of the Secretion ofPro-Inflammatory Cytokines by Bifidobacterium Strains”(Microbiol.Immunol.，46(11)，781-785，2002)中，He等人研究了不同双歧杆菌菌株 对巨噬细胞衍生的细胞因子的产生的影响。他们发现，“成人类型”双歧杆菌例如青春双岐杆菌(Bifidobacterium adolescentis)和长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)与“婴儿类型”双歧杆菌例如两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)和婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)相比，诱导显著更多的促炎性细胞因子分泌。此外，他们还注意到，特别是青春双歧杆菌不刺激抗炎性细胞因子IL-10的产生。他们得出结论，成人类型的双歧杆菌可以更有力地倍增，却比较难以下调炎症反应。 
最近，鉴别供人类使用的最有希望的抗炎性益生菌菌株的尝试已经表明，He等人做出的归纳很可能被证明是不可信的，因为目前已经证明不能通过参考它的分类学类别来准确预测特定菌株的性质——例如它的抗炎症性质。 
发明概述 
本发明人惊奇地发现，长双歧杆菌名为长双歧杆菌ATCC BAA-999的具体益生菌株具有特殊的抗炎症性质。 
因此，本发明提供了长双歧杆菌ATCC BAA-999在生产用于预防或降低哺乳动物炎症的药物或治疗性营养组合物中的用途。 
发明还延及预防或降低有需要的哺乳动物患者中炎症的方法，包含向患者施用治疗量的长双歧杆菌ATCC BAA-999。 
本发明还可以在需要预防或降低肠道炎症的情况中使用，而不论炎症的根本原因，其可以是例如对食物过敏原的反应，由肠道疾病导致的慢性或急性肠炎例如炎症性肠病或结肠炎，老年人中的感染后炎症或慢性亚临床炎症，以及出于预防的意义，即在不存在导致炎症的潜在情况时，在需要预防炎症的情况中使用。 
本发明的优点是可以通过口服包含益生元(probiotic)的治疗性营养组合物或药物，而用于降低或预防哺乳动物的炎症。可以理解，对于患者，此类口服给药比需要静脉或皮下施用的组合物更容易接受和更方便，后者 不仅需要受过专业训练的人员，而且还既不安全也不方便。 
发明的详细描述 
在本说明书中，当阅读和解释说明书、实施例和权利要求时，对下列词给出的定义必须列入考虑。 
“婴儿”：年龄小于12个月的幼儿。 
“婴儿制剂”：意在作为出生后前四个月至前六个月婴儿的完全营养食物，和作为至多12个月婴儿的其它食物的补充物。 
“益生元”：对宿主的健康或康乐具有有益效果的微生物细胞制品或微生物细胞的组分(Salminen S，Ouwehand A.Benno Y.等人，“Probiotics：how should they be defined”，Trend Food Sci.Technol.1999:10107-10)。 
哺乳动物可以是人或者伴侣动物例如狗或猫。 
长双歧杆菌ATCC BAA-999(“BL999”)可以单独施用，例如可以封闭在胶囊内，每个胶囊含有例如108个菌落形成单位(cfu)，或者添加到营养性组合物中例如营养完全制剂(例如婴儿制剂或临床营养品)、乳制品、饮料粉末、脱水汤料、食品添加剂、替代餐、能量棒、谷物食品、糖食制品或干燥的宠物食品。当添加到营养性组合物中时，BL999可以以相当于104至1012cfu/g(干重)的量存在于组合物中。这些量的表示包括了细菌作为活的、失活或死亡的，或者甚至是作为碎片例如DNA或细胞壁材料或作为代谢物存在的可能性。换言之，以细菌这种菌落形成能力量的方式表述的细菌量，就好像细菌是全部存活的一样，而不管实际上这些菌是否是活的、失活的或死亡的、碎片化的或任意或全部上述状态的混合物。优选BL999存在的量等价于105至1010，更优选107至1010cfu/g干燥组合物。 
可以从日本Morinaga Milk Industry公司获得商标为BB536的BL999。其可以根据任何合适的方法进行培养，并通过例如冷冻干燥或喷雾干燥制备用于胶囊化或添加到营养组合物中。可选的，也可以购买已制备成供添加到食品中的其合适的形式。
在本发明中使用的营养完全制剂可以包含蛋白质源，优选的膳食蛋白质例如动物蛋白质(如奶、肉或蛋的蛋白质)、植物蛋白质(如大豆、小麦、稻或豌豆蛋白质)、游离氨基酸的混合物；或其组合。奶蛋白质例如酪蛋白和乳清蛋白以及大豆蛋白质是特别优选的，组合物还可以包含碳水化合物源和脂肪源。 
如果制剂包括脂肪源，则优选提供制剂能量的5％至55％；例如能量的20％至50％。构成脂肪源的脂类可以是任何合适的脂肪或脂肪混合物。植物脂肪例如大豆油、棕榈油、椰子油、红花油、向日葵油、玉米油、卡拉诺油(canola oil)和卵磷脂是特别合适的。如果需要也可以添加动物脂肪例如奶脂肪。 
如果制剂包括碳水化合物源，则优选提供制剂能量的40％至80％。可以使用任何合适的碳水化合物，例如蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖浆固体、麦芽糖糊精及其混合物。如果需要还可以添加膳食纤维。膳食纤维可以来自任何合适的来源，包括例如大豆、豌豆、燕麦、果胶、胍尔豆胶、阿拉伯树胶、果寡糖、半乳寡糖、唾液酸化乳糖和自动物乳衍生的寡糖。营养制剂可以包括合适的维生素和矿物质，它们的量符合合适的指导条例。 
如果需要，营养制剂可以添加一种或多种食品级的乳化剂，例如二乙酰酒石酸的甘油单酯和二酯、卵磷脂的甘油单酯和二酯。相似的，可以包括合适的盐和稳定剂。 
可以以任何合适的方式制备营养完全制剂。例如，以合适的比例将蛋白质源、碳水化合物源和脂肪源混合在一起。如果使用了乳化剂，其也可以包括在混合物中。可以在此时添加维生素和矿物质，但通常稍后再加入以避免热降解。任何亲脂性维生素、乳化剂等都可以在混合之前溶解于脂肪源中。水，优选已经过反渗透的水，可随后混合进去以形成液体混合物。 
然后，可以加热处理液体混合物以减少细菌负载量。例如，可以快速加热液体混合物至约80℃至约110℃范围约5秒钟至约5分钟。其可以通过蒸汽注入或通过热交换器例如板式热交换器来完成。
然后，可以将液体混合物冷却至约60℃至约85℃，例如通过瞬时冷却。然后将液体混合物搅匀，例如以两个步骤进行，第一步在大约10Mpa至大约30Mpa下，第二步在大约2Mpa至大约10Mpa下进行。然后进一步冷却搅匀的混合物，以便添加任何热敏感成分例如维生素和矿物质。此时适宜地对搅匀的混合物的pH和固体含量进行标准化。 
将搅匀的混合物转移至合适的干燥设备中，例如喷雾干燥器或冷冻干燥器，将其转变为粉末。该粉末应该具有按重量计少于约5％的含湿量。可以通过干燥混合将BL999以需要的量加入到粉末中。 
本发明中使用的干燥宠物食品可以包括任意一种或多种碳水化合物源、蛋白质源和脂肪源。 
可以使用任何合适的碳水化合物源。优选的以谷类、面粉或淀粉的形式提供碳水化合物源。例如，碳水化合物源可以是稻、大麦、高粱、黍、燕麦、玉米粉或小麦粉。也可以使用简单的糖类例如蔗糖、葡萄糖和玉米糖浆。碳水化合物源提供的碳水化合物的量可以根据需要选择。例如，宠物食品可以包含至多按重量计约60％的碳水化合物。 
合适的蛋白质源可以选自任何合适的动物或植物蛋白质源；例如肌肉或骨骼肌、肉骨粉、家禽粉、鱼粉、乳蛋白、玉米谷蛋白、面筋、大豆粉、大豆蛋白质浓缩物、大豆蛋白质分离物、卵蛋白、乳清、酪蛋白、谷蛋白等。对于老年动物，优选的蛋白质源包含高质量的动物蛋白质。蛋白质源提供的蛋白质的量可以根据需要选择。例如，宠物食品可以包含按干物质重量计的约12％至约70％的蛋白质。 
宠物食品可以包含脂肪源。可以使用任何合适的脂肪源。优选的脂肪源是动物脂肪源例如动物脂。还可以使用植物油例如玉米油、向日葵油、红花油、油菜籽油、大豆油、橄榄油和其它富含单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的油类。除了必须的脂肪酸(亚油酸和α-亚油酸)，脂肪源可以包括长链脂肪酸。合适的长链脂肪酸包括，γ亚油酸、十八碳四烯酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸。鱼油是二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的合适来源。琉璃苣油、黑醋栗籽油和月见草油是γ亚油酸的 合适来源。油菜籽油、大豆油、亚麻籽油和胡桃油是α-亚麻酸的合适来源。红花油、向日葵油、玉米油和大豆油是亚油酸的合适来源。橄榄油、油菜籽油(卡拉诺)、高油酸的向日葵油、红花油、花生油和米糠油是单不饱和脂肪酸的合适来源。脂肪源提供的脂肪的量可以根据需要选择。例如，宠物食品可以包含按干物质重量计约5％至约40％的脂肪。优选的，宠物食品具有相对降低量的脂肪。 
碳水化合物、蛋白质和脂类源的选择不是关键的，并且可以基于动物的营养、适口性考虑和生产的产品类型需要而选择。进一步地，根据需要宠物食品中还可以添加多种其它成分，例如，糖、盐、香料、调味料、维生素、矿物质、风味剂、树胶和益生性微生物。 
对于老年宠物，宠物食品优选地包含比年轻宠物的宠物食品比例更低的脂肪。此外，淀粉源可以包括一种或多种燕麦、稻、大麦、小麦和玉米。 
可以通过挤压熟化生产宠物食品，但是也可以使用烘烤和其它合适的方法。当挤压熟化时通常以粗碎的形式提供宠物食品。优选的，将BL999包裹在干燥的宠物食品表面或填充在其内部。欧洲专利申请No0862863中描述了合适的方法。 
通过参考下列实施例进一步描述本发明。 
在附图中： 
附图1比较了在四种不同的双歧杆菌存在下，用LPS体外刺激小肠细胞后的NFκB活性的百分比(基于细胞的NFκB报告基因检测)； 
附图2比较了有和没有BL999干预的条件下，在模拟IBD病理学的小鼠结肠炎模型中(DSS诱导的结肠炎)观察到的粪便评分； 
附图3比较了有和没有BL999干预的条件下，在模拟IBD病理学的小鼠结肠炎模型中(DSS诱导的结肠炎)观察到的目测炎症评分； 
附图4A至E比较了在TNBS诱导的结肠炎模型中观察到的个体Wallace评分(A)、平均Wallace评分(B)、保护百分比(C)、髓过氧化物酶活性(D)和两天减重(E)，其中两组接受不同剂量水平的BL999干预，对照组不接受细菌；和
附图5比较了在相同的小鼠结肠炎模型中BL999的保护能力，长双歧杆菌NCC2705、鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)ATCC 53103、约氏乳杆菌(L.johnsonii)CNCM I-1225、植物乳酸杆菌(L.plantarum)NCIMB8826、乳酸乳杆菌(L.lactis)NZ9000和MG1363；以及药品氢化泼尼松的保护效果。 
实施例1 
下面给出了本发明中使用的婴儿制剂的组合物的实施例。该组合物仅用于示例。 
Figure G200780012798XD00071
Figure G200780012798XD00081
实施例2 
该实施例比较了在基于核因子kappa B(NFκB)细胞的报告基因检测中，BL999的抑制活性与其它益生菌株的抑制效果。 
已经有大量文献公开了转录因子NFκB在炎症事件的诱导和持续中发挥中心作用。对肠-侵入病原菌和其它炎性刺激的应答中活化NFκB，所述刺激导致炎症分子的产生，例如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-8(IL-8)、细胞内黏附分子-1(ICAM-1)和诱导性环加氧酶(COX-2)的产生。 
在该研究中使用稳定表达由内源性NFκB启动子调控的报告基因构建体(分泌性碱性磷酸酶)的人小肠上皮细胞系(HT29 NFκB)(Blum S等人，Riedel C.等人，World J Gastroenterol.2006已录用)。检测在这些细胞中四种双歧杆菌菌株抑制脂多糖(LPS)-诱导的NFκB活性的能力。细胞与新鲜制备的两歧双歧杆菌(NCC189，CNCM I-2333)，婴儿 双歧杆菌(NCC 200，CNCM I-2334)、假链状双歧杆菌(B.pseudocatenulatum，NCC 291)和长双歧杆菌(NCC 3001，ATCC BAA-999)混合，细胞与细菌的比例为1：100。在细胞与细菌预孵育1小时后，添加10ng/ml的LPS再孵育额外4个小时，收集废弃的培养上清液用于NFκB介导的报告基因活性的测量。检测进行双份，并重复至少3次，每次重复都以无菌对照，即没有细菌条件下的LPS刺激进行归一。附图1中显示的数据是作为LPS-刺激的NFκB活性±SEM的平均百分比。 
在孵育4小时后，用LPS处理的细胞具有10倍诱导的NFκB活性。所有四种双歧杆菌都下调了NFκB活性，但是，BL999在该测试中具有最大的抑制活性。总之，当抑制炎症活性具有极大价值时，BL999是供应用的优秀的候选菌株。 
实施例3 
该实施例证明了BL999及其代谢物在小鼠IBD模型中预防炎症的能力。 
该实验使用的是被视为IBD病理学相关模型的葡聚糖硫酸钠(DSS)-诱导的小鼠结肠炎模型(Blumberg RS等人，Current Opin.Immunol.1999；11(6):648-56)。施用DSS诱导大肠内的组织病理学损伤，其与在溃疡性结肠炎患者中观察到的相似。因此施用DSS处理来诱导急性肠炎。 
实验组和饮食：
“对照-MRS”：小鼠随意的饲喂对照餐(表1)，在整个实验期间可以自由获得自来水，并在第1天至第14天接受每日一次胃内管饲MRS。 
“DSS-MRS”：在整个实验期间小鼠随意的饲喂对照餐，在第7天至第14天可以自由获得含有1％DSS的自来水，并在第1天至第14天接受每日一次胃内管饲MRS。 
“DSS-BL”：在整个实验期间(第1天至第14天)小鼠饲喂对照餐，在第7天至第14天可以自由获得含有1％DSS自来水，并在第1天至第14天接受每日一次胃内管饲BL999(NCC3001)(109cfu/小鼠/天)。
表1：对照餐 
  
组分 餐中的百分比(重量％)
抗性淀粉(Cerestar SF12018) 40.0
可溶性酪蛋白 20.0
蔗糖 27.3
DL-甲硫氨酸 0.3
玉米油 5.0
纤维素 2.0
矿物质预混合物AIN93 4.4
维生素预混合物AIN93 1.0
如下进行动物实验。将雄性BALBc/J小鼠(8周龄，Janvier，法国)随机分为4个实验组(n＝每组10只小鼠)。在7天适应期内，小鼠可以自由获得自来水并接受对照餐。然后，DSS-BL组中的小鼠接受为期14天，每日一次胃内管饲含培养上清液的BL999(109cfu/小鼠/天)，同时，其它两组的小鼠接受每日一次的胃内管饲MRS。另外，从第7天至第14天，DSS-MRS和DSS-BL组的小鼠都接受含有1％DSS的饮用水，同时对照组只接受普通自来水。 
在实验期内，每2天检查一次每只小鼠的粪便样本，并记录黏稠度，和是否存在出血(Hemoccult II，SKD，Roissy，法国)。表2中显示了计算的粪便评分，结果显示在附图2中。 
表2.小鼠临床症状评分的等级 
Figure G200780012798XD00101
在14天末，通过颈脱位法处死小鼠。从动物中快速移除盲结肠段，将其用生理盐水缓冲液轻柔洗涤，使用以前由Appleyard和Wallace公开等级的修订等级为目测炎症症兆打分(Appleyard C.B和Wallace J.L.“Reactivation of hapten-induced colitis and its prevention byantiinflammatory drugs”，Am J.Physiol 269，G119-125)(表3)。结果显示在附图3中。 
表3.用于盲结肠损伤目测评分的标准(Appleyard和Wallace) 
Figure G200780012798XD00111
从附图2和3中可见，与DSS-MRS组的观察结果相比BL999有效地使粪便性质正常化，并且，它显著的降低了在盲肠、近端和远端结肠中的炎症。因此，可见BL999有效地预防了DSS-BL组小鼠中由DSS诱导的炎症，该小鼠在DSS施用前和施用中均接受了细菌。 
实施例4 
在该实施例中，使用TNBS诱导的急性结肠炎小鼠模型，研究了BL999细菌的抗炎症潜力，并与其它乳酸菌菌株和常用的消炎药物氢化泼尼松进行比较。 
研究了下列细菌菌株： 
Figure DEST_PATH_G46250630150138000D000021
乳杆菌属菌株在MRS培养基(Difco)中37℃好氧生长。双歧杆菌在添加了0.05％L-盐酸半胱氨酸(Sigma)的MRS中37℃厌氧生长。乳酸乳杆菌MG1363和乳酸乳杆菌NZ9000在添加了0.5％葡萄糖的M17培养基中30℃生长。通过测量在600nm处的吸光度(A600)并使用每种菌株各自的标准曲线评估在稳定生长期的细菌数(cfu)。对于常规的体内实验，细菌生长18小时，在pH7.2无菌PBS中洗涤两次，并且以108和2×109cfu/ml重悬在含有2％葡萄糖的0.2M NaHCO3缓冲液中。 
从Charles River购买7至8周龄的成年雌性BALB/C小鼠。按每组10只小鼠将它们随机分入实验组。小鼠分组圈养(每笼8至10只)并可以自由接触到水和标准啮齿类食物。在进行任何干预前都经历至少1周的适应。从开始诱导结肠炎的四天前到诱导结肠炎当天，在细菌处理组中的小鼠，通过胃内管饲细菌悬浮液(相应于108cfu/小鼠/天)的含有2％葡萄糖的0.2M NaHCO3缓冲液，pH8.5。在氢化泼尼松处理组中的小鼠，接受10mg/kg体重/天的氢化泼尼松。对照组中的小鼠不接受任何细菌或氢化泼尼松。此外，通过用2×109cfu/小鼠/天的BL999来处理另一组从而研究剂量水平的效应。 
在诱导结肠炎之前，所有小鼠都通过腹腔内注射溶解在0.9％氯化钠中的3mg氯胺酮(ketamine)(Imalgene 1000，Mérial，Lyon，法国)、46.7μg地西泮(diazepam)(Valium，Roche Diagnostics，法国)和15μg阿托品(atropine)(Aguettant Laboratory，Lyon，法国)来麻醉。然后，按100-120mg/kg体重的剂量，通过直肠内施用50μl溶解在0.9％NaCl/乙醇(50/50v/v)中的三硝基苯磺酸(TNBS，Fluka，法国)来诱导结肠炎。在TNBS施用48小时后评估死亡率和炎症评分。在TNBS施用前和处死时称重小鼠，通过颈脱位法处死小鼠。 
移除结肠，剥离脂肪和肠系膜，小心地打开并用PBS清洗。根据Wallace标准评估结肠损伤和炎症(Wallace J.L.等人，“Inhibition ofleukotriene synthesis markedly accelerates healing in a rat model ofinflammatory bowel disease”Gastroenterology 96：29-36，1989)。这些用于目测评分的标准在小鼠研究中已经普遍认可，并且反应了炎症的强度、结肠粘膜的增厚和溃疡的程度。由两名研究人员对结肠损伤和炎症进行双盲评分。 
此外，还根据Bradley等人的修正方法(“Measurement of cutaneousinflammation：estimation of neutrophil content with an enzyme marker”JInvest Dermatol.60(3):618-22)确定髓过氧化物酶(MPO)活性，其是多形核嗜中性粒细胞初级颗粒的标志物。通过Lowry的方法确定蛋白质浓度，用U MPO/cm肠表示MPO活性。 
在处死后立即确定近端结肠组织中的MPO活性。取距盲结连接处3cm的结肠样本(1cm长)，悬浮在磷酸钾缓冲液(50mmol/L，pH6.0)中，并在冰上使用polytron均质化。实施三次冻融循环后，悬浮液在10000g、4℃离心15分钟。弃上清，将沉淀重新悬浮在去垢剂十六烷基三甲基溴化铵缓冲液(HTAB 0.5％，w/v，在50mmol/L磷酸钾缓冲液中，pH6.0)中，诱导MPO从多形核嗜中性粒细胞初级颗粒中释放。获得的悬浮液在冰上超声处理，再次在4℃离心15分钟。用含有0.167mg/mL邻联茴香胺二盐酸盐和0.0005％过氧化氢(H2O2)的磷酸钾缓冲液(pH6.0)稀释上清液。使用来自人嗜中性粒细胞的MPO(0.1U/100mL，Sigma)作为标准。经过5分钟和10分钟，用微平板分光光度计(ELX808，Bio-TekInstrument，CA)记录450nm吸光度的改变。在25℃降解1mmol过氧化氢/分钟/mL的MPO的量定义为一个MPO活性单位。 
通过Mann-Whitney U检验的无参数单因素方差分析来分析结果。当P值＜0.05时判断差异具有统计学显著性。 
结果显示在附图4，A至E和附图5中。附图4A和B比较了处理小鼠以及没有接受细菌的对照组的个体Wallace评分和平均Wallace评分，所述处理小鼠分别用两个剂量水平108cfu/小鼠/天和2×109cfu/小鼠/天的BL999处理。可见接受BL999的两组小鼠的Wallace评分都显著低于对照组小鼠的Wallace评分。 
附图4C显示了BL999提供保护的百分比。其对应于细菌处理小鼠(n＝10)的平均目测炎症相对于TNBS-处理对照小鼠(NaOHCO3缓冲液-处理的小鼠，n＝10)平均分的减少。 
附图4D比较了用两个剂量水平的BL999处理小鼠与对照组的平均MPO活性。可见接受BL999的两组小鼠的MPO活性都显著低于对照组小鼠的MPO活性。 
附图4E比较了用两个剂量水平的BL999处理小鼠与对照组小鼠的2天减重。可见来自接受BL999的两组小鼠体重减少都显著低于对照组小鼠体重减少。 
附图5比较了测试用不同乳酸菌菌株和氢化泼尼松施用所提供的保护百分比。可见BL999比测试用其它细菌菌株提供了显著较高程度的保护，以及提供了与药物相当的保护水平。 

Claims (9)

1.长双歧杆菌ATCC BAA-999在制备用于预防或减轻哺乳动物非感染性炎症的药物或治疗性营养组合物中的用途。
2.权利要求1的用途，其中该治疗性营养组合物是婴儿制剂。
3.权利要求1的用途，其中该治疗性营养组合物是宠物食品。
4.权利要求1-3中任一项的用途，其中该炎症是肠炎。
5.权利要求1-3中任一项的用途，其中该治疗性营养组合物含有基于干重104至1012cfu/g的长双歧杆菌ATCC BAA-999。
6.权利要求1-3中任一项的用途，其中该治疗性营养组合物含有基于干重105至1010cfu/g的长双歧杆菌ATCC BAA-999。
7.权利要求1-3中任一项的用途，其中该治疗性营养组合物含有基于干重107至1010cfu/g的长双歧杆菌ATCC BAA-999。
8.长双歧杆菌ATCC BAA-999在制备用于治疗炎症性肠疾病的药物或治疗性营养组合物中的用途。
9.长双歧杆菌ATCC BAA-999在制备用于减轻与食物过敏相关肠炎的药物或治疗性营养组合物中的用途。
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