CN101411760B - 苹果属花楸苹果组植物的新用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了苹果属花楸苹果组植物在制备降血糖的药物或保健食品中的用途。本发明还提供了一种降血糖的苹果属花楸苹果组植物提取物和含有该提取物的药物组合物。发明人通过试验发现苹果属花楸苹果组植物及提取物用于降血糖具有显著的药效，并通过指纹图谱进行质量控制，药效学试验证明苹果属花楸苹果组植物及其提取物的药效明显，安全稳定。

Description

苹果属花楸苹果组植物的新用途

技术领域

本发明提供了一种苹果属花楸苹果组植物的用途，属药物领域。

背景技术

糖尿病是一种常见的代谢性内分泌系统疾病，是由于体内的一种激素——胰岛素的绝对缺乏或相对不足，或是该物质本身质量及其他原因造成不能发挥正常生理作用，而引起的以糖代谢为主的糖、脂肪、蛋白质三大物质的代谢混乱的一种综合病症。1999年9月世界卫生组织(WHO)颁布的糖尿病诊断标准为：(1)有“三多一少”(多饮、多食、多尿、体重减轻)糖尿病症状，且符合以下三条之一者，即可诊断为糖尿病。空腹血糖≥7.0mmol/L；随机(一天中任意时间)血糖≥11.1mmol/L；口服葡萄糖耐量试验(OGTT)：餐后2小时血糖≥11.1mmol/L。(2)如果没有明显症状，只要重复两次血糖化验结果均达到以上标准，也可诊断为糖尿病。

糖尿病分为四型：即I型糖尿病、II型糖尿病、妊娠糖尿病和特殊类型糖尿病。I型糖尿病主要由自身免疫损害所致，约占糖尿病患者总数的5％，发病年龄较早，多见于儿童和青少年。II型糖尿病由遗传和环境因素共同作用的结果，约占糖尿病总人数的90％以上，多见于体型超重或肥胖的中、老年人，有明显的家族遗传性。妊娠糖尿病是指妊娠期间发生的糖尿病，它是由于怀孕期间雌激素、孕激素等拮抗胰岛素的激素分泌增加，导致胰岛素绝对或相对不足所致。特殊类型糖尿病主要包括遗传性β细胞缺陷、胰岛疾病、内分泌疾病以及药物因素所致的糖尿病。

糖尿病(DM)因其发病率、死亡率、致残率高，严重危害人类健康而日益受到医学界的广泛关注。糖尿病一直在国内肆虐，10年间，糖尿病患者人数增长了33％。其中II型(非胰岛素依赖型)糖尿病患者的统计数据更加令人担忧。从临床发病情况来看，其中绝大部分为2型糖尿病(T2DM)。T2DM普遍存在于胰岛素抵抗(IR)，IR是T2DM发病机制中的一个重要因素，并且是其他疾病如高血压、肥胖、血脂异常、冠心病等代谢综合征的一个重要特征。II型糖尿病约占糖尿病总人数的90％以上，在30—35岁年龄段的人群中，这种类型糖尿病患者人数增加了70％。在40—49岁的人群中，增加了40％，在50岁以上的人群中，患病比例达到31％，远远超出过去的状况。现在越来越多的年轻人和儿童被诊断为II型糖尿病患者，这一状况被称为MODY(青年成熟期突发型糖尿病)。

糖尿病是以高血糖为主要症状，高血糖是指当血糖值高过规定的水平时所形成的高血糖症。它可能历时数日或在几个小时内即能形成。但高血糖不一定就是糖尿病，不能等同，但长期高血糖有可能诱发糖尿病。产生高血糖的原因较多，如(1)所使用的胰岛素或口服降糖药的剂量不够；(2)运动量明显减少，胰岛素不能有效发挥作用；(3)摄食过多特别是甜食或含糖饮料；(4)过度肥胖；(5)情绪或精神上的压力过重；(6)低血糖后出现反跳性高血糖被称为SOMOGYI现象；(7)饮酒可导致低血糖，也可导致高血糖；(8)服用某些药物，如强的松、地塞米松等会引起高血糖的药；又如服用了某些止咳糖浆；(9)在生病或其它应急情况下，原先使用的胰岛素或口服降糖药的剂量不够等等。

目前治疗糖尿病的方法有：①饮食控制疗法；②运动疗法；③胰岛素及口服降糖药物疗法；④胰岛移植疗法；⑤中医中药疗法。但就每一个具体病人而言，应根据自己的病情特点、生活环境、工作条件等不同情况，寻找一种或数种适合自己的治疗方法。糖尿病治疗需终身服药，西药治疗糖尿病能降低血糖，但由于长期服用易产生毒副作用及耐药性，且对并发症疗效不佳；中医药在DM防治方面有着悠久的历史，形成了自己独特的理论体系和临床上行之有效的方药，根据临床辩证施治，多采用复方治疗，在降血糖方面效果不甚理想，降血糖强度不如西药，但在治疗并发症方面有一定优势。总的来说，目前急需疗效明显，毒副作用低，适于长期服用的药品或保健食品。

蔷薇科(Rosaceae)，苹果亚科(Maloideae Weber)，苹果属(Malus)，花楸苹果组(Sect.Sorbomalus Zabel)，分以下3系：1.三叶海棠系(Sieboldianae Rehd.)。中国有1种：三叶海棠(M.sieboldii Rehd.)。2.陇东海棠系(kansuensi Rehd)。中国有以下4种：①陇东海棠(M.kansuensisSchneid)。②山楂海棠(M.komarovii Rehd.)。③变叶海棠(M.toringoidesHughes.)。④花叶海棠(M.transitoria Schneid.)3.滇池海棠系(YunnanensisRehd)。中国有以下4种：①西蜀海棠(M.prattii Schneid.)。②河南海棠(M.honanensis Rehd.)。③滇池海棠(M.yunnanensis Schneid.)。④沧江海棠(M.ombrophila hand.et Mazz.)。

变叶海棠(Malus toringoides(Rehd.)Hughes)(别名：大白石枣)。其形态特征、种质特性(耐盐、耐旱、耐热、耐寒、耐涝、抗腐烂病和根腐病等)、分布的生态环境等均具有极其复杂的多样性。变叶海棠作苹果砧木利用，具有抗逆性强、半矮化、早结果、丰产和提高果实品质等优良性状，是极其重要的种质资源。目前对变叶海棠的研究多集中在其形态多样性及种植栽培方面，如：廖飞雄、李育农，变叶海棠(Malus toringoides(Rehd.)Hughes)无孢子生殖的胚胎学观察，西南农业大学学报，1997年4月，第19卷第2期；廖飞雄、李育农，变叶海棠(M.toringoides(Rehd.)Hughfes)无融合生殖胚胎发育的特征与结果，江西农业大学学报，第18卷第3期，1996年9月；张云贵、成明昊，变叶海棠变异类型的初步研究，西南园艺1998年第3期；邓洪平、成明昊、陈亚飞，黄琳，变叶海棠变异类型的形态多样性分化与陇东海棠关系的研究，西南师范大学学报(自然科学版)，第27卷，第1期；成明昊、李晓林、王玫、曾维光、吴福寿、金强，变叶海棠变异类型的研究，园艺学报，1992，19(3)；233-239；变叶海棠育苗试验初报，炉霍林业局马国中，甘孜科技，22期；杨平、代学冬、刘大建，变叶海棠育苗与造林技术，林业实用技术，2006年第9期；石胜友，成明昊，梁国鲁，苹果优良砧木资源--变叶海棠，西南农业大学学报(自然科学版)，第26卷第1期，2004年2月。对花叶海棠、陇东海棠的研究也集中在其形态多样性及种植栽培方面，如成明昊等，苹果优良种质—花叶海棠区系地理学研究，《西南农业大学学报》，2000年22卷4期。陈斌，花叶海棠作苹果砧木利用的调查初探，《重庆师专学报》，2001年20卷2期。王玫，变叶海棠(Malus toringoides)、陇东海棠(M.kansuensis)研究，《西南农业大学学报》，1991年13卷3期；据《新华本草纲要》记载：陇东海棠、三叶海棠的果实具有和中消积，散瘀行滞的功效，用于胃酸缺乏症，小儿伤乳的消化不良，经行腹痛或产后下腹瘀痛，心绞痛。

但将变叶海棠及其它苹果属花楸苹果组植物的叶、茎或根及其提取物用于药品、保健食品尚无相关文献报道。

发明内容

本发明解决的技术问题是提供了一种苹果属花楸苹果植物的用途，本发明还提供了一种苹果属花楸苹果植物提取物，本发明还提供了含有该类植物提取物的用于降血糖的药物或保健食品组合物。

本发明提供了苹果属花楸苹果组植物在制备降血糖的药物或保健食品中的用途。

本发明提供的降血糖的药物或保健食品组合物主要针对II型糖尿病病人使用。

其中，所述的植物及提取物来源于：稻城海棠M.douchengensis(LiC.L.)Ponom、小金海棠xiaojinensis Cheng.et.Jiang.、陇东海棠M.kansuensis(Batal.)Schneid.、陇东海棠(原变型)Malus kansuensis(Batal.)Schneid.f.kansuensis、光叶陇东海棠Malus kansuensis(Batal.)Schneid.f.calva Rehd.、陇东海棠光叶变型M.Kansuensis、马尔康海棠M.maerkangensisCheng，Zeng et.Jin.、变叶海棠M.toringoides(Rehd.)Hughes.、花叶海棠M.transitoria(Batal.)Schneid.、花叶海棠(原变种)Malus transitoria(Batal.)Schneid.var.transitoria、长圆果花叶海棠Malus transitoria(Batal.)Schneid.var.centralasiatica(Vass.)Yü、花叶海棠长圆果变种M.Transitoria、沧江海棠M.ombrophila Hand.-Mazz.、滇池海棠M.yunnanensis(Franch.)Schneid.、滇池海棠川鄂变种M.Yunnanensis、滇池海棠(原变种)Malus yunnanensis(Franch.)Schneid.var.yunnanensis、川鄂滇池海棠Malus yunnanensis(Franch.)Schneid.var.veitchii(Veitch)Rehd.、西蜀海棠M.prattii(Hemsl.)Schneid.、山楂海棠M.komarovii(Sarg.)Rehd.、三叶海棠Malus sieboldii(Regel)Rehd.、河南海棠Malus honanensis Rehd.。

其中，上述植物来源于海拔1000～3900米的植物。

所述的药物是以苹果属花楸苹果组植物原生药或苹果属花楸苹果组植物的提取物为活性成分制备而成。

其中，所述的植物提取物为水或有机溶液提取物。

其中，所述的植物提取物来自所述植物的叶、茎或根。

本发明还提供了一种降血糖的苹果属花楸苹果组植物提取物，苹果属花楸苹果组植物提取物具有以下HPLC指纹图谱特征，即同时具有六个明显特征峰，它们的保留时间分别为：H₁峰9.0±0.3；H₂峰9.8±0.3；H₃峰12.7±0.3；H₄峰14.1±0.3H₅峰15.8±0.3；H₆峰22.8±1.0。其中，H6峰面积与H1-5五个特征峰面积和的比例大于10。提取物中含有根皮苷。

本发明还提供了一种降血糖的药物或保健食品组合物，它是含有所述的植物或其提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

其中，所述的制剂是口服或外用制剂。

苹果属花楸苹果组植物用于制备降血糖药物时，可以是将苹果属花楸苹果组植物原生药直接加工成药物，也可以是对苹果属花楸苹果组植物原生药进行化学分离提取，将各提取物(包括水提物、有机溶剂提取物、总黄酮提取物)制备成药品。也可以是将苹果属花楸苹果组植物原生药或其各种提取物与其它植物药制成复方制剂，可以是苹果属花楸苹果组植物原生药与其它降糖类传统中药组成复方中药及其制剂。

用苹果属花楸苹果组植物原生药(叶、茎、根)任一种为原料直接加工制成药品。可以是将上述原生药净制后粉碎，过80～120目筛，制成细粉，再将细粉装胶囊。或制备成胶囊、片剂、丸剂、颗粒剂、散剂。

发明人通过试验发现苹果属花楸苹果组提取物用于降血糖具有显著的药效，并通过指纹图谱进行质量控制，药效学试验证明苹果属花楸苹果组植物提取物的药效明显，安全稳定。

以下通过具体实施方式对本发明作进一步的详细描述，但并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变和变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。

附图说明

图1是五种苹果属花楸苹果组植物混合物的提取物HPLC指纹图谱

图2是变叶海棠醇提取物HPLC指纹图谱

图3是变叶海棠水提取物HPLC指纹图谱

图4是苹果属花楸苹果组不同植物混合物的总黄酮提取物HPLC指纹图谱

图5是陇东海棠总提取物HPLC指纹图谱

图6是苹果属花楸苹果组不同植物的HPLC重叠色谱图

具体实施方式

实施例1变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠原生药品的制备

以苹果属花楸苹果组植物中一种为原料，即变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠，净制后按常规方法粉碎，过筛，制成粒度小于60目的细粉1000克，细粉灌装2000粒胶囊，灭菌，分装即成。

实施例2变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠提取物的制备

取变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠中一种为原料，溶剂法提取(煎煮法、浸渍法、渗漉法、回流法)，提取溶剂可以是水；也可以是有机溶剂，如醇类或含醇的混合物，其中醇类优选为乙醇和甲醇。提取液浓缩；浓缩液精制，溶液吸附、洗脱、洗脱液回收溶剂，干燥，得提取物。

实施例3变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠水提取物的制备

取变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠中一种为原料，取原生药1000g，粗碎后加入10倍量水，加热回流提取3小时，过滤，滤渣用8倍和6倍水再加热回流提取两次，每次分别为2小时和1小时，过滤，合并三次滤液，浓缩，精制，干燥，得水提物。

实施例4变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠醇提取物的制备

取变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠中一种为原料，取原生药1000g，粗碎后加入90％乙醇溶液8升，加热回流提取3小时，过滤，滤渣用6倍和4倍90％乙醇溶液再加热回流提取两次，每次分别为2小时和1小时，过滤，合并三次滤液，浓缩，精制，干燥，得醇提物。

实施例5变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠总黄酮提取物的制备

取实施例3和4中的水提物或醇提物加入7-8倍的水溶解，搅拌，放置，过滤。将滤液过大孔吸附树脂M130，用水洗杂，用60％乙醇洗脱，浓缩洗脱液，干燥得总黄酮提取物。

以芦丁为标准品计算总黄酮含量。

实施例6变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠提取物的胶囊剂的制备

取实施例2～5中的任一种提取物细粉，按药品和保健食品剂量要求与药学上可接受的辅料或辅助性成分混匀成细粉或制粒，并按胶囊剂生产工艺灌装胶囊，灭菌，分装即成。

规格：250mg/粒，相当于含原生植物5g。

实施例7本发明提取物HPLC指纹图谱

检测仪器及方法：Waters2695，色谱柱：C—18；流速：1ml/min；柱温：25℃；流动相A乙腈—乙酸乙酯，流动相B：硫酸水溶液，流动相A与流动相B的体积比为2∶8，PAD285.0nm。

其中，图1是五种苹果属花楸苹果组植物混合物的提取物的HPLC指纹图谱，其中，植物混合物提取物的制备方法为：取变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠五种为原料，各取原生药200g，粗碎后加入90％乙醇溶液8升，加热回流提取3小时，过滤，滤渣用6倍和4倍90％乙醇溶液再加热回流提取两次，每次分别为2小时和1小时。过滤。合并三次滤液，浓缩，干燥，得提取物。

图2是实施例4所述的方法制备的变叶海棠醇提取物的HPLC图谱。按实施例4方法将变叶海棠制备的醇提取物。

图3是实施例3所述的方法制备的变叶海棠水提取物的HPLC图谱。按实施例3方法将变叶海棠制备的水提取物。

图4是苹果属花楸苹果组植物混合物的总黄酮提取物HPLC指纹图谱

取变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠五种为原料，各取原生药200g，共计1000g，按实施例4方法制备成的醇提物加入7-8倍的水溶解，搅拌，放置，过滤。将滤液过大孔吸附树脂M130，用水洗杂，用60％乙醇洗脱，浓缩洗脱液，干燥得总黄酮提取物。

图5是陇东海棠总提取物HPLC指纹图谱

取陇东海棠原生药1000g，粗碎后加入90％乙醇溶液8升，加热回流提取3小时，过滤，滤渣用6倍和4倍90％乙醇溶液再加热回流提取两次，每次分别为2小时和一小时，过滤，合并三次滤液，浓缩，干燥，得陇东海棠总提取物。

图6是苹果属花楸苹果组不同植物的HPLC重叠色谱图。

变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠、陇东海棠(原变型)、花叶海棠(原变种)、沧江海棠共八种，按实施例4所述的方法制备成醇提取物，进行HPLC指纹图谱测定。

实施例中所有提取物经HPLC检测均有特征峰，说明苹果属花楸苹果组不同植物具有相似性。

综合图谱可知，苹果属花楸苹果组植物提取物具有以下HPLC指纹图谱特征，即同时具有六个明显特征峰，它们的保留时间分别为：H₁峰9.0±0.3；H₂峰9.8±0.3；H₃峰12.7±0.3；H₄峰14.1±0.3H₅峰15.8±0.3；H₆峰22.8±1.0。

其中，图2中各个峰面积百分比为：H1:0.24，H2:0.93，H3:0.37，H4:0.58H5:0.20H6:92.39，H6峰面积与H1-5五个特征峰面积和的比值为：39.8；图3中各个峰面积百分比为：H1:0.41，H2:1.95，H3:0.43，H4:0.21H5:0.92H6:83.59，H6峰面积与H1-5五个特征峰面积和的比值为：21.3；图4中各个峰面积百分比为：H1:0.10，H2:0.10，H3:0.12，H4:0.40H5:0.04H6:96.16，H6峰面积与H1-5五个特征峰面积和的比值为：129.9；图5中各个峰面积百分比为：H1:0.42，H2:2.08，H3:0.38，H4:0.19H5:1.02H6:82.32，H6峰面积与H1-5五个特征峰面积和的比值为：20.1。综上，将本发明苹果属花楸苹果组HPLC图谱中H6峰面积与H1-5五个特征峰面积和的比例大于10。

本发明通过具体药效学试验证明本发明的有益效果。

试验例1本发明苹果属花楸苹果组植物的药效实验

一、实验材料

药品：苹果属花楸苹果组植物。维E烟碱酯胶囊(黑龙江省佳木斯晨星药业有限责任公司)。四氧嘧啶(sigma公司)。血脂检测试剂盒(上海蓝怡科技有限公司)。优降糖(天津太平洋制药有限公司)。

动物：KM小鼠，18～22g，鼠龄7-8周。

仪器：；电子天平(上海第二天平制造厂MA-200型)。恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司)。全自生化分析仪(美国贝克曼CX7型)。美国强生ONE Touch血糖仪及其随机试纸条。

数据处理

各组数据以x±s表示，用SPSS11.0统计软件包处理。两两比较用t检验，多组比较采用方差分析。

二、实验方法与结果

1、药物配制

各苹果属花楸苹果组植物的叶分别加水煎煮二次，过滤后，浓缩至0.5g/ml(以原药材计)，共得五组浓缩液备用，使用时根据需要调节药物浓度。每组取维E烟碱酯粉末0.7g溶于40ml蒸馏水，混匀。

2、对小鼠血糖的影响

每种植物组各取小鼠50只，以Alloxan160mg/kg腹腔注射，每天1次，共2天。制备四氧嘧啶性糖尿病小鼠模型。晨8时空腹从小鼠眼眶静脉丛穿刺取血，用血糖试条测定血糖。模型制备后取40只小鼠按血糖随机分为4组，分别灌服不同药物或等容积蒸馏水，另取血糖正常小鼠30只，分别灌服不同药物或等容积蒸馏水，每只0.1ml/10g，连续给药三天。于灌服的第4天晨8时复测血糖。结果见表1、2。

表1苹果属花楸苹果组植物对正常小鼠血糖的影响

表2变叶海棠茶对高血糖小鼠血糖的影响

*表示与模型组相比p<0.05

结果表明：所选苹果属花楸苹果组植物能显著降低高血糖动物血糖，但对正常动物血糖无明显影响。

试验例2：变叶海棠提取物调节血糖作用药效实验

1、材料和方法

1.1样品

本发明药物(由实施例4制备的变叶海棠醇提取物，再按实施例6的方法制备成胶囊剂。)

1.2试验动物

清洁级雌性昆明种小鼠，体重24-28g，实验前检疫一周，整个实验过程中，动物饲养于屏障级动物房，动物自由摄食和饮水，动物房温度21℃-23℃，相对湿度65％-75％。

1.3主要仪器与试剂

SUPER GLUCOCARD II血糖仪；四氧嘧啶(Alloxan)，美国Sigma公司，A7413。

1.4剂量设计

人体推荐剂量为2.7g/d，即0.045g/kg.bw；按成人推荐剂量的10、20、30倍设计低、中、高三个剂量组(即分别为0.45、0.90、1.35g/kg.bw)。

1.5正常动物试验

选用20只健康动物适应7天后，禁食3h，自由饮水，取尾血测血糖值，按血糖水平随机分成两组，连续给试验组动物以受试物高剂量水平(1.35g/kg.bw)连续灌胃30天(称取1.35g样品，加蒸馏水至20ml混悬，按2ml/100g.bw经口灌胃)，给对照给用同量蒸馏水灌胃，灌胃体积为小鼠体重的2％。第30天禁食3h，取尾血测空腹血糖，观察受试物对正常动物空腹血糖的影响。

1.6高血糖模型动物试验

1.6.1高血糖动物模型建立：造模型前随机取10只动物禁食3h测血糖，作为基础血糖(平均值为4.86±0.90mmol/L)。临用前用新鲜制备四氧嘧啶生理盐水液，令动物禁食24小时，然后按160mg/(kg.bw)腹腔注射四氧嘧啶生理盐水液，注射后7天禁食3h取尾血测血糖，筛选血糖值在10mmol/L以上的动物作为本试验高血糖模型动物。

1.6.2操作步骤：按血糖水平将高血糖模型动物分成四组。给三个试验组动物以受试物低、中、高剂量水平连续灌胃30天(分别称取0.45、0.90、1.35g样品，各加蒸馏水至20ml混悬，按2ml/100g.bw经口灌胃)，给对照组动物用同等体积蒸馏水灌胃。第30天禁食3h，取尾血测空腹血糖；以受试物或蒸馏水灌胃，0.5h后立即用葡萄糖溶液(剂量为2.0g/kg.bw)灌胃，测餐后0.5h和2h血糖，并按以下公式计算血糖曲线下面积；血糖曲线下面积＝0.25*(0小时血糖值+4*0.5小时血糖值+3*2小时血糖值)。

1.7资料处理

用EXCEL录入数据，用PEMS进行方差分析或t-检验，观察各组指标有无显著差异。

2.结果

2.1对正常小鼠体重的影响

如表3所示，试验前、后两组动物体重及增重均无显著差异(P>0.05)

表3本发明药物对正常小鼠体重的影响

2.2对正常小鼠空腹血糖的影响

表4本发明药物对正常小鼠空腹血糖的影响

2.3对高血糖模型小鼠体重的影响

各组动物试验前、后体重无显著差异(P>0.05，见表5)。

表5本发明药物对高血糖模型小鼠体重的影响

2.4对高血糖模型小鼠空腹血糖的影响

由表5可见，给予受试物30天后，各剂量组动物空腹血糖值和血糖下降幅度与对照组比较有显著差异(P<0.05)，可判定该受试物样品降空腹血糖实验结果阳性。

表6本发明药物对高血糖模型小鼠空腹血糖的影响

注：^*与对照组比较有显著差异，P<0.05。

2.5对高血糖模型小鼠餐后血糖的影响

给予受试物30天后，尽管各剂量组动物餐后0h血糖值有显著差异(P<0.05)，餐后0.5h、2h血糖值、血糖曲线下面积与对照组相比，无显著差异(见表7，P>0.05)。

表7本发明药物对高血糖模型小鼠餐后血糖的影响

注：^*与对照组比较有显著差异，P<0.05。

1、小结

将本发明药物按0.45、0.90和1.35g/kg.bw(分别相当于人体推荐摄入量的10、20和30倍)经口给高血糖模型动物灌胃30天后，各剂量试验组动物空腹血糖值和血糖下降幅度与对照组比较有显著差异(P<0.05)，即空腹血糖试验阳性，且对正常动物空腹血糖无影响。根据评价标准，本发明药物对小鼠具有辅助降血糖作用。本发明所述的降血糖的药物或保健食品组合物急性毒性实验结果LD₅₀>10g/kg。慢性毒性实验合格。本发明药物或保健食品使用安全。

试验例3本发明药物临床试验

将实施例1制备的药物或保健食品组合物主要针对II型糖尿病病人使用。

临床人数：35人；按1999年9月世界卫生组织(WHO)颁布的糖尿病诊断标准，

均具有糖尿病症状，且符合以下三条之一，即：空腹血糖≥7.0mmol/L；随机(一天中任意时间)血糖≥11.1mmol/L；口服葡萄糖耐量试验(OGTT)：餐后2小时血糖≥11.1mmol/L。或如果没有明显症状，重复两次血糖化验结果均达到以上标准。

口服给药：本发明药物胶囊(按实施例6制备)，每人每次2粒，每天两次，饭后服用。

服用一个疗程(3个月)后，测35人的空腹血糖值，均在5.4mmol/L～7.0mmol/L之间，有效率100％。

综上所述，本发明药物具有降低血糖作用，可用于治疗II型糖尿病，是一种疗效明显，毒副作用低，适于长期服用的药品或保健食品。

Claims (14)

1.苹果属花楸苹果组植物在制备降血糖的药物或保健食品中的用途；

其中，所述的植物为：变叶海棠M.toringoides(Rehd.)Hughes.、花叶海棠M.transitoria(Bata1.)Schneid.、陇东海棠M.kansuensis(Bata1.)Schneid.、滇池海棠M.yunnanensis(Franch.)Schneid.、西蜀海棠M.prattii(Hems1.)Schneid.。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的植物为变叶海棠M.toringoides(Rehd.)Hughes.。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的植物为花叶海棠M.transitoria(Bata1.)Schneid.。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的用途，其特征在于：所述的植物来源于海拔1000～3900米的植物。

5.根据权利要求1-4任意一项所述的用途，其特征在于：所述的药物是以苹果属花楸苹果组植物原生药或苹果属花楸苹果组植物的提取物为活性成分制备而成。

6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于：所述的植物提取物为水或有机溶液提取物。

7.根据权利要求5或6所述的用途，其特征在于：所述的植物提取物来自所述植物的叶、茎或根。

8.一种权利要求5所述的苹果属花楸苹果组植物在制备降血糖的药物或保健食品中的用途，其特征在于：所述提取物具有以下HPLC指纹图谱特征，即同时具有六个明显特征峰，它们的保留时间分别为：H₁峰9.0±0.3；H₂峰9.8±0.3；H₃峰12.7±0.3；H₄峰14.1±0.3；H₅峰15.8±0.3；H₆峰22.8±1.0；

其中，所述的提取物的制备方法为：

(1)取变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠中一种为原料，取原生药1000g，粗碎后加入10倍量水，加热回流提取3小时，过滤，滤渣再用8倍和6倍水回流提取两次，每次分别为2小时和1小时，过滤，合并三次滤液，浓缩，精制，干燥，即得水提物；或

(2)取变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠中一种为原料，取原生药1000g，粗碎后加入90％乙醇溶液8升，加热回流提取3小时，过滤，滤渣再用6倍和4倍90％乙醇溶液回流提取两次，每次分别为2小时和1小时，过滤，合并三次滤液，浓缩，精制，干燥，即得醇提物；或

(3)取步骤(1)的水提物或步骤(2)的醇提物，加入7-8倍的水溶解，过滤，将滤液过大孔吸附树脂M130，水洗后，用60％乙醇洗脱，浓缩洗脱液，干燥，即得总黄酮提取物；

(4)取变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠五种为原料，各取原生药200g，粗碎后加入90％乙醇溶液8升，加热回流提取3小时，过滤，滤渣再用6倍和4倍90％乙醇溶液回流提取两次，每次分别为2小时和1小时，过滤，合并三次滤液，浓缩，干燥，得提取物；或

(5)取变叶海棠、花叶海棠、陇东海棠、滇池海棠、西蜀海棠五种为原料，各取原生药200g，粗碎后加入90％乙醇溶液8升，加热回流提取3小时，过滤，滤渣再用6倍和4倍90％乙醇溶液回流提取两次，每次分别为2小时和1小时，过滤，合并三次滤液，浓缩，精制，干燥，得醇提物，在醇提物加入7-8倍的水溶解，搅拌，放置，过滤，将滤液过大孔吸附树脂M130，用水洗杂，用60％乙醇洗脱，浓缩洗脱液，干燥，即得总黄酮提取物；

HPLC指纹图谱的色谱条件为：

色谱柱：C-18；流速：1ml/min；柱温：25℃；流动相A乙腈-乙酸乙酯，流动相B：硫酸水溶液，流动相A与流动相B的体积比为2∶8，PAD285.0nm。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：H6峰面积与H1-5五个特征峰面积和的比例大于10。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：提取物中含有根皮苷。

11.根据权利要求10所述的用途，其特征在于：该药物或保健食品是由权利要求8-10任意一项所述的提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

12.根据权利要求11所述的用途，其特征在于：所述的制剂是口服制剂。

13.权利要求11所述的用途是在制备治疗II型糖尿病的药物中的用途。

14.权利要求11所述的用途是在制备辅助治疗II型糖尿病的保健食品中的用途。

Images