CN101402936A - 普陀鹅耳枥芽体培养基及组培快繁方法 - Google Patents
普陀鹅耳枥芽体培养基及组培快繁方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101402936A CN101402936A CNA200810121614XA CN200810121614A CN101402936A CN 101402936 A CN101402936 A CN 101402936A CN A200810121614X A CNA200810121614X A CN A200810121614XA CN 200810121614 A CN200810121614 A CN 200810121614A CN 101402936 A CN101402936 A CN 101402936A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- substratum
- salt
- vitamin
- putuo
- sucrose
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000726221 Gemma Species 0.000 title claims abstract description 15
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 241000726768 Carpinus Species 0.000 title claims description 12
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 25
- 241000015730 Carpinus putoensis Species 0.000 claims abstract description 22
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 20
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims abstract description 19
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims abstract description 19
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims abstract description 19
- JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N indole-3-butyric acid Chemical compound C1=CC=C2C(CCCC(=O)O)=CNC2=C1 JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims abstract description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 21
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 21
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 19
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 claims description 18
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 claims description 18
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 9
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 claims description 3
- 239000003415 peat Substances 0.000 claims description 3
- 239000010451 perlite Substances 0.000 claims description 3
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 claims description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 claims description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 claims description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 3
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 claims description 3
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 abstract description 7
- 230000035784 germination Effects 0.000 abstract description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract 2
- 229920002148 Gellan gum Polymers 0.000 abstract 1
- 230000010152 pollination Effects 0.000 abstract 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 abstract 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 abstract 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 10
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 238000012549 training Methods 0.000 description 2
- 241000219495 Betulaceae Species 0.000 description 1
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 1
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
一种普陀鹅耳枥芽体培养基由1/3MS盐类、MT维生素、0－60mg/l的IBA即吲哚丁酸、50－150mg/l的肌醇、占培养基总重量0.2％－0.4％的水晶洋菜和1.5％－4.5％的蔗糖配制而成，能有效培养无菌试管芽和诱导生根，快速培育、大量繁殖出再生苗。用本组织培养基组培快繁普陀鹅耳枥经过下列四个步骤：一是外植体的采集与消毒，二是无菌芽的培养，三是二段化诱导生根，四是驯化移栽。首创了用芽体作外植体组培快繁普陀鹅耳枥树苗的方法，克服了该树萌芽性差、花粉寿命短和发芽率低，有效授粉期不足的生理缺陷，为该树提供了繁殖及保存的生物工程技术措施，拯救了几乎灭绝的普陀鹅耳枥物种资源。
Description
【技术领域】
本发明涉及一种组织培养基及组培快繁方法，是针对濒临灭绝的乔木普陀鹅耳枥的芽体培养基及组培快繁方法。
【背景技术】
普陀鹅耳枥(Carpinus putoensis)，隶属于鹅耳枥属CarpinusL，桦木科Betulaceae。普陀鹅耳枥是我国特有的珍稀树种，其分布范围极为狭窄，仅见于浙江舟山群岛，是我国10种几近灭绝的树种之一。由于该树萌芽性差、花粉寿命短，花粉活力于七日内递降败育、种子发芽率低，，受生态和人为破坏等因素而导致濒临灭绝。根据调查资料，野生状态下的普陀鹅耳枥现在仅在普陀山残存1株。鉴于此，普陀鹅耳枥的物种保护引起植物学研究机构的重视。目前经过多年的育苗、造林试验，采用播种、扦插、嫁接等方法培育苗木379株，速度过慢，满足不了快速恢复这一稀有物种的迫切需求，探索与尝试用组培快繁方法扩大该树的栽种量，有其积极的现实意义，然而，经检索和调查，至今尚无人涉足，未见对该树种通过生物技术组培快繁方法育苗的有关资料报道和实物问世。
【发明内容】
本发明要解决的技术问题是用普陀鹅耳枥芽体为外植体，配制一种有效的组织培养基，提供整套普陀鹅耳枥组培快繁方法。
解决上述问题的技术方案是：
提供普陀鹅耳枥组织培养基，由下列成份及配比而成，0-1/3MS盐类(即需用MS盐类的则用其1/3重量的大量元素盐和全额的微量元素盐)或0-60mg/L的IBA即吲哚丁酸、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖，分别配制成芽体成活生长培养基、一阶段生根培养基和二阶段生根培养基，各培养基的pH值均为5.0-6.0。
由1/3MS盐类、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖配制成普陀鹅耳枥芽体成活生长培养基。
由40-60mg/L的IBA、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖配制成普陀鹅耳枥一阶段生根培养基。
由1/3MS盐类、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖配制成普陀鹅耳枥二阶段生根培养基。
用上述培养基对本普陀鹅耳枥进行组培快繁的方法包括如下步骤：
(1)外植体的采集与消毒：对两年生树苗进行喷药杀菌、杀虫处理1-2周后，采集其芽体带回实验室，自来水冲洗2小时，在稀释10倍的5％NaCI0溶液中，真空条件下浸泡10min，用无菌水冲洗5-6次，再在相同浓度的NaCI0溶液中浸泡4-5秒，无菌水冲洗5次后，显微镜下切取长0.5-1cm的芽尖组织；
(2)无菌芽培养：将切得的芽尖接种于由1/3MS盐类、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖制成的芽体成活生长培养基中，pH值5.0-6.0，在25±2℃、光照强度2500Lux、16h/d光照下培养，两周后新叶萌发，培育出普陀鹅耳枥无菌芽；
(3)两段式诱导生根：将该无菌芽接种到一阶段生根培养基中，即由40-60mg/LIBA、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖配制成的培养基中，培养4-7天后，移植到二阶段生根培养基中，即由1/3MS盐类、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖配制成的培养基中，pH值5.0-6.0，在25±2℃、光照强度3700Lux、16h/d光照下培养，10-14天后开始生成根；
(4)驯化移栽：将生根良好的幼苗移至驯化室，光照强度20000Lux，驯化1-2周，将苗从试管取出，用温水冲洗苗根部培养基，再用冷水冲洗，移栽至体积比为蛭石∶珍珠岩∶泥炭＝1∶1∶1混合而成的盆装人工基质中，每盆苗套上透明塑料袋，每隔3天将袋子剪一小口，9-12d去袋移至温室即成。
本发明的有益效果是：首创了普陀鹅耳枥芽体培养基及组培快繁方法，为进一步探索普陀鹅耳枥的基因工程、拓宽外植体材料等奠定了基础。另一方面，弥补了该树萌芽性差、花粉寿命短和发芽率低，有效授粉期不足的繁殖生理缺陷，为该树提供了繁殖及保存的技术措施，拯救了几乎灭绝的普陀鹅耳枥物种资源。
【具体实施方式】
本发明下面结合实施例作进一步说明：MS盐类、MT维生素，可市售获得，按商品说明书所示常规方法配用，为行业所通用。但在本发明中所用的MS，只用其1/3重量的大量元素盐和全量的微量元素盐，为简明起见，用1/3MS盐类表示。本发明在不同培育阶段分别应用的芽体成活生长培养基中不含有IBA，一阶段生根培养基中不含有1/3MS盐类，二阶段生根培养基中不含IBA，这一方面是因为三个阶段是连续进行的，前一阶段采用的1/3MS盐类或IBA，对组培体尚存效果，后一阶段可不用。二方面是经过反复多次的对比试验，后阶段不重复用对组培体的生长更有利，而且还节省成本，因此作上述选定。凝固剂中水晶洋菜比琼脂纯净，因而透明易观察，价廉，故选前者。糖类营养剂选蔗糖是因其成本低。这是同行技术人员明白的，故在实施例中未列入琼脂及其它糖类营养剂。三个阶段的培养基中需要用生长调节剂IBA的，加入的合适量是40-60mg/L，最佳是50mg/L；肌醇的加入合适量50-150mg/L，最佳量100mg/L；水晶洋菜的加入合适量占培养基总重量0.2％-0.4％，最佳量0.25％，蔗糖的加入合适量占培养基总重量的(为简便起见，以下不再说明，只给出百分数)1.5％-4.5％，最佳量3％；培养基的pH值5.0-6.0，最佳值为5.7。
现将三种培养基的四个实施例的原料与配比值列于表中：
参照上表，以最佳方案的实施例1分步骤来说明本发明：
(1)外植体的采集与消毒：采对温室盆栽两年生树苗进行喷药杀菌、杀虫处理1-2周后，采集其芽体带回实验室，自来水冲洗2小时，在稀释10倍的5％NaCI0溶液中，真空条件下灭菌10min，用无菌水冲洗5-6次，再在相同浓度的NaCI0溶液中浸泡4-5秒，无菌水冲洗5次后，显微镜下切取长0.5-1cm的芽尖组织；
(2)无菌芽培养：将切得的芽尖接种于由1/3MS盐类、MT维生素、100mg/L的肌醇、占培养基总重量0.25％的水晶洋菜和3％的蔗糖配制成的芽体成活生长培养基中，pH值为5.7，在25±2℃、光照强度2500Lux、16h/d光照下培养，两周后新叶萌发，培育出普陀鹅耳枥无菌芽；
(3)两段式诱导生根：将该无菌芽接种到一阶段生根培养基中，即由50mg/L IBA、MT维生素、100mg/L的肌醇、占培养基总重量0.25％的水晶洋菜和3％的蔗糖配制成的培养基中，培养4-7天后，移植到二阶段生根培养基，即由1/3MS盐类、MT维生素100mg/L的肌醇、占培养基总重量0.25％的水晶洋菜和3％的蔗糖配制成的培养基中，pH值5.7，在25±2℃、光照强度3700Lux、16h/d光照下培养，10-14天后开始生成根；
(4)驯化移栽：将生根良好的幼苗移至驯化室，光照强度20000Lux，驯化1-2周，将苗从试管取出，用温水冲洗苗根部培养基，再用冷水冲洗，移栽至体积比为蛭石∶珍珠岩∶泥炭＝1∶1∶1混合而成的盆装人工基质中，每盆苗套上透明塑料袋，每隔3天将袋子剪一小口，9-12d去袋移至温室即成。
其余实施例2-4参照表中相应原料及配比值，与实施列1相同步骤，均能分化、诱导、快繁出普陀鹅耳枥树苗，只是分化率、生根率、壮弱程度上的差异。
Claims (5)
1、一种普陀鹅耳枥芽体培养基，由下列成份及配比而成，MS盐类、MT维生素，其特征是需取用MS的则用其1/3重量的大量元素盐和全额的微量元素盐即1/3MS盐类或0-60mg/L的IBA即吲哚丁酸、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖，分别配制成芽体成活生长培养基、一阶段生根培养基和二阶段生根培养基，各培养基的pH值均为5.0-6.0。
2、如权利要求1所述的普陀鹅耳枥芽体培养基，其特征是由1/3MS盐类、MT维生素、100mg/L的肌醇、占培养基总重量0.25％的水晶洋菜和3％的蔗糖配制成普陀鹅耳枥芽体成活生长培养基。
3、如权利要求1所述的普陀鹅耳枥芽体培养基，其特征是由40-60mg/L的IBA、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖配制成普陀鹅耳枥一阶段生根培养基。
4、如权利要求1所述的普陀鹅耳枥芽体培养基，其特征是由1/3MS盐类、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖配制成普陀鹅耳枥二阶段生根培养基。
5、一种用权利要求1-4任一项所述的普陀鹅耳枥芽体培养基进行组培快繁的方法，其特征是经过下列步骤：
(1)外植体的采集与消毒：对两年生树苗进行喷药杀菌、杀虫处理1-2周后，采集其芽体带回实验室，自来水冲洗2小时，在稀释10倍的5％NaCIO溶液中，真空条件下浸泡10min，用无菌水冲洗5-6次，再在相同浓度的NaCIO溶液中浸泡4-5秒，无菌水冲洗5次后，显微镜下切取长0.5-1cm的芽尖组织；
(2)无菌芽培养：将切得的芽尖接种于由1/3MS盐类、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖配制成的芽体成活生长培养基中，pH值5.0-6.0，在25±2℃、光照强度2500Lux、16h/d光照下培养，两周后新叶萌发，培育普陀鹅耳枥无菌芽；
(3)两段式诱导生根：将该无菌芽接种到一阶段生根培养基中，即由40-60mg/L IBA、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖配制成的培养基中，培养4-7天后，移植到二阶段生根培养基，即由1/3MS盐类、MT维生素、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2％-0.4％的水晶洋菜和1.5％-4.5％的蔗糖配制成的培养基中，pH值5.0-6.0，在25±2℃、光照强度3700Lux、16h/d光照下培养，10-14天后开始生成根；
(4)驯化移栽：将生根良好的幼苗移至驯化室，光照强度20000Lux，驯化1-2周，将苗从试管取出，用温水冲洗苗根部培养基，再用冷水冲洗，移栽至体积比为蛭石∶珍珠岩∶泥炭＝1∶1∶1混合而成的盆装人工基质中，每盆苗套上透明塑料袋，每隔3天将袋子剪一小口，9-12d去袋移至温室即成。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA200810121614XA CN101402936A (zh) | 2008-10-14 | 2008-10-14 | 普陀鹅耳枥芽体培养基及组培快繁方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA200810121614XA CN101402936A (zh) | 2008-10-14 | 2008-10-14 | 普陀鹅耳枥芽体培养基及组培快繁方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101402936A true CN101402936A (zh) | 2009-04-08 |
Family
ID=40537099
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNA200810121614XA Pending CN101402936A (zh) | 2008-10-14 | 2008-10-14 | 普陀鹅耳枥芽体培养基及组培快繁方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101402936A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102845303A (zh) * | 2011-06-29 | 2013-01-02 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 一种扩大普陀鹅耳枥种群数量的方法 |
| CN102845304A (zh) * | 2011-06-29 | 2013-01-02 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 普陀鹅耳枥种子的萌发方法 |
| CN103181325A (zh) * | 2013-04-01 | 2013-07-03 | 南京林业大学 | 欧洲鹅耳枥的组培快繁方法 |
-
2008
- 2008-10-14 CN CNA200810121614XA patent/CN101402936A/zh active Pending
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102845303A (zh) * | 2011-06-29 | 2013-01-02 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 一种扩大普陀鹅耳枥种群数量的方法 |
| CN102845304A (zh) * | 2011-06-29 | 2013-01-02 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 普陀鹅耳枥种子的萌发方法 |
| CN102845304B (zh) * | 2011-06-29 | 2014-04-09 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 普陀鹅耳枥种子的萌发方法 |
| CN102845303B (zh) * | 2011-06-29 | 2014-07-16 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 一种扩大普陀鹅耳枥种群数量的方法 |
| CN103181325A (zh) * | 2013-04-01 | 2013-07-03 | 南京林业大学 | 欧洲鹅耳枥的组培快繁方法 |
| CN103181325B (zh) * | 2013-04-01 | 2014-02-12 | 南京林业大学 | 欧洲鹅耳枥的组培快繁方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103598098B (zh) | 粉葛组织培养快速育苗方法 | |
| CN102422816A (zh) | 草莓的茎尖离体快速培养方法 | |
| CN103931492A (zh) | 苹果砧木m9的组培快速育苗方法 | |
| CN101347099B (zh) | 落羽杉离体快速繁殖方法 | |
| CN103380730A (zh) | 一种杜梨组培快繁方法 | |
| CN113100060B (zh) | 一种高山杜鹃组培繁殖方法 | |
| CN107155898A (zh) | 一种铁皮石斛利用茎段薄片进行扩繁的方法 | |
| CN102511398A (zh) | 蕲山药组培育苗方法 | |
| Abbaszadeh et al. | An effective nutrient media for asymbiotic seed germination and in vitro seedling development of phalaenopsis ‘Bahia Blanca’ | |
| CN106069755A (zh) | 一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法 | |
| CN101773069B (zh) | 一种广东金线莲的组培快繁方法 | |
| CN103039363B (zh) | 油茶组培苗繁殖用生根培养基及其繁殖方法 | |
| CN103155868A (zh) | 樱桃砧木zy-1组培快速育苗方法 | |
| CN103039362B (zh) | 油茶组培苗繁殖用继代培养基及其繁殖方法 | |
| CN103155869A (zh) | 甜樱桃砧木Colt组织培养方法 | |
| CN101402936A (zh) | 普陀鹅耳枥芽体培养基及组培快繁方法 | |
| CN101402937A (zh) | 普陀鹅耳枥种胚培养基及组培快繁方法 | |
| CN108811835B (zh) | 一种柑橘脱毒及微芽嫁接的快速繁殖方法 | |
| CN103155866B (zh) | 珠美海棠组培快繁育苗方法 | |
| CN101766086B (zh) | 大戟快速扦插繁殖方法 | |
| CN101411300A (zh) | 一种带基质移栽和具拮抗作用的棉花无土旱育苗技术 | |
| CN111165354B (zh) | 文冠果的一种组织培养繁殖方法 | |
| CN101375670B (zh) | 五唇兰的无菌播种和组织培养方法 | |
| CN103155858B (zh) | 一种百脉根的快速繁殖方法 | |
| CN105638479A (zh) | 一种大樱桃快繁方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20090408 |