CN101401785B - 氨基酸注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明氨基酸注射液，俗称普洛氨，涉及一种含有18种氨基酸的医药用配制品。所述的氨基酸注射液，其每1000ml注射液中含有：异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、脯氨酸、丝氨酸、胱氨酸、赖氨酸盐酸盐或赖氨酸醋酸盐、精氨酸盐酸盐或精氨酸、组氨酸盐酸盐或组氨酸、酪氨酸或乙酰酪氨酸、亚硫酸氢钠或焦亚硫酸钠。其渗透压比低于1.8，有效地减弱了输液者的疼痛感；抗氧剂加入量少，可减少临床不良反应；输液瓶体大，可方便临床使用时混液。

Description

氨基酸注射液及其制备方法

【技术领域】

本发明属于一种含18种氨基酸和抗氧剂组成的氨基酸注射液—俗称普洛氨及其制造方法。

【背景技术】

蛋白质是形成细胞结构的主要成份，是生物化学催化剂，并且是基因表达的重要调控者。蛋白质结构的基本单元是氨基酸。人体每天需要摄入一定量的蛋白质以满足生命活动的需要，当因某种原因无法从肠胃道摄入足够量时，应必须从静脉输入氨基酸溶液予以补充。

蛋白质营养对疾病的防治具有重要意义，特别是在外科创伤或术后，病人机体中蛋白质分解或代谢急剧增加，很快出现氮负平衡，使病情进一步恶化。据报道称，住院病人死亡中有10～30％死亡的直接原因或主要原因是营养不良。由于静脉高营养剂的使用，使许多重危病人转危为安。目前，临床上使用的静脉高营养剂主要有水解蛋白和复合氨基酸输液，氨基酸是组成蛋白质的基本单位。组成人体蛋白质的氨基酸仅有20种。人体内有8种氨基酸不能合成。这些体内需要而又不能自身合成，必须由食物供应的氨基酸，称为营养必需氨基酸。它们是缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。其余12种氨基酸体内可以合成，不一定需要由食物供应，在营养上称为非必需氨基酸。

目前氨基酸输液产品存在以下三个问题：

(1)不良反应：氨基酸在溶液中很不稳定，极易被氧化而产生一系列复杂的对人体有害的物质。为了保证产品的稳定性，必须在生产中加入抗氧化剂，如亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠。目前生产企业为保证产品的稳定性，通常不限制的加入抗氧化剂，造成临床上最常见的有关副反应，症状为支气管痉挛，喘鸣，呼吸困难，恶心、喉部水肿，低血压，休克、基至死亡。如市场常见的复方氨基酸注射液(18AA)，抗氧化剂均大于0.5g/L，大大增加了临床使用的不良反应。

(2)滴注疼痛感：目前常用的复方氨基酸注射液(18AA)在《卫生部药品标准》二部六册生化药品第一分册标准中处方中无氢氧化钠作为pH值调节剂不能更有效的控制产品的质量，并且渗透压过高，在临床输注时出现疼痛感。

(3)临床使用不方便：氨基酸输液为了提高体内氨基酸利用度，处方在常加有山梨醇或木糖醇作为热量，必免氨基酸被当作热量给肖耗了，但由于山梨醇及木糖醇的热量远远低于葡萄糖及果糖，对于严重创伤病人产用山梨醇及木糖醇是不够的，同时葡萄糖及果糖无法与氨基酸同时灭菌，故需在临床使用时加入。又由于，目前市场上的氨基酸输液规格与容器均采用同一规格(如250ml，采用250ml标准规格输液瓶装)，所以无法再往药液里面加入其它的热量增加剂或其它的营养输液。

【发明内容】

本发明旨在提供一种渗透压小，渗透压比低于1.8，输液者疼痛感弱的氨基酸注射液。

本发明还提供了一种装有所述的氨基酸注射液的输液瓶。

本发明还提供了一种制备上述氨基酸注射液的方法。

本发明所述的氨基酸注射液，其每1000ml注射液中含有：

异亮氨酸           2.11～5.63g        甘氨酸        4.56～12.16g

亮氨酸             2.94～7.84g        丙氨酸        1.20～3.20g

甲硫氨酸           1.35～3.60g        谷氨酸        0.45～1.20g

苯丙氨酸           3.20～8.53g        门冬氨酸      1.50～4.00g

苏氨酸             1.49～3.97g        脯氨酸        0.60～1.60g

色氨酸             0.54～1.44g        丝氨酸        0.60～1.60g

缬氨酸             2.16～5.76g        胱氨酸        0.06～0.16g

赖氨酸盐酸盐       2.58～6.88g   或   赖氨酸醋酸盐  2.91～7.77g

精氨酸盐酸盐       3.00～8.00g   或   精氨酸        2.48～6.61g

组氨酸盐酸盐       1.50～4.00g   或   组氨酸        1.11～2.96g

酪氨酸             0.15～0.40g   或   乙酰酪氨酸    0.186～0.496g

亚硫酸氢钠          0.02～0.40g        或焦亚硫酸钠           0.02～0.40g

优选为每1000ml氨基酸注射液中含有：

异亮氨酸            3.52g              甘氨酸                 7.60g

亮氨酸              4.90g              丙氨酸                 2.00g

甲硫氨酸            2.25g              谷氨酸                 0.75g

苯丙氨酸            5.33g              门冬氨酸               2.50g

苏氨酸              2.50g              脯氨酸                 1.00g

色氨酸              0.90g              丝氨酸                 1.00g

缬氨酸              3.60g              胱氨酸                 0.10g

赖氨酸盐酸盐        4.30g   或         赖氨酸醋酸盐           4.86g

精氨酸盐酸盐        5.00g   或         精氨酸                 4.13g

组氨酸盐酸盐        2.50g   或         组氨酸                 1.85g

酪氨酸              0.25g   或         乙酰酪氨酸             0.31g

亚硫酸氢钠          0.40g   或         焦亚硫酸钠             0.40g

本发明更进一步优选的氨基酸注射液，其每1000ml注射液中的其它组分为pH值调节剂和注射用水。

其中所述的pH值调节剂优选为氢氧化钠、冰醋酸、盐酸或磷酸。

本发明所述的一种装有上述的氨基酸注射液的输液瓶，输液瓶标准规格为600ml，其中装有500ml所述的氨基酸注射液，还有约180ml空间。

本发明所述的另一种装有上述的氨基酸注射液的输液瓶，输液瓶标准规格为300ml，其中装有250ml所述的氨基酸注射液，还有约180ml空间。

本发明所述的一种制备上述氨基酸注射液的方法，包括以下步骤：

(1)按上述每1000ml处方称取符合质量标准的各种组分；

(2)在氮气的保护下使用注射用水溶解，然后调节pH值至5.0～6.5，并加注射用水使溶液至全量1000ml，搅拌均匀后加入活性炭；

(3)上述溶液脱炭后，先后经0.45μm和0.22μm微孔过滤器过滤后分装；

(4)在105℃～121℃下灭菌8～40分钟即可。

其中，步骤(2)中使用的注射用水优选为40～95℃，使溶解更充分、更迅速。

本发明所述的氨基酸注射液，渗透压比低于1.8，有效地减弱了输液者的疼痛感；其次使用亚硫酸氢钠量较少可减少临床不良反应。

本发明所述的输液瓶，由于分别采用了标准600ml及300ml规格输液瓶，并分别灌装了500ml及250ml所述的氨基酸注射液，有多余足够的空间加入其它的药液，如能量增加剂等，便于临床使用。同时输液瓶体积大在生产过程中有足够的空间存放氮气，使氧气排出，减少因抗氧剂加入量较少，易被氧化，并保证产品质量。

【具体实施方式】

实施例一

(1)称取

异亮氨酸                  3.52g             甘氨酸               7.60g

亮氨酸                    4.90g             丙氨酸               2.00g

赖氨酸盐酸盐              4.30g             谷氨酸               0.75g

甲硫氨酸                  2.25g             门冬氨酸             2.50g

苯丙氨酸                  5.33g             脯氨酸               1.00g

苏氨酸                    2.50g             丝氨酸               1.00g

色氨酸                    0.90g             酪氨酸               0.25g

缬氨酸                    3.60g             胱氨酸               0.10g

精氨酸盐酸盐              5.00g             亚硫酸氢钠           0.4g

组氨酸盐酸盐              2.50g

(2)在氮气的保护下将上述组成加入到约700ml注射用水中，同时加热至45～95℃，搅拌使溶解，然后使用适量的氢氧化钠溶液将pH值调节至5.0～6.5，并再加注射用水使溶液至1000ml，搅拌均匀后加入0.5g活性炭；

(3)上述溶液脱炭后，先后经0.45μm和0.22μm微孔过滤器过滤后分装；

(4)在121℃下灭菌12分钟即可。

(5)测渗透压比为1.7。

实施例二

(1)称取

异亮氨酸                  3.52g          甘氨酸              7.60g

亮氨酸                    4.90g          丙氨酸              2.00g

赖氨酸醋酸盐              4.86g          谷氨酸              0.75g

甲硫氨酸                  2.25g          门冬氨酸            2.50g

苯丙氨酸                  5.33g          脯氨酸              1.00g

苏氨酸                    2.50g          丝氨酸              1.00g

色氨酸                    0.90g          乙酰酪氨酸          0.31g

缬氨酸                    3.60g          胱氨酸              0.10g

精氨酸                    4.13g          焦亚硫酸钠          0.4g

组氨酸                    1.85g

(2)在氮气的保护下将上述组成加入到约700ml注射用水中，同时加热至45～95℃，搅拌使溶解，然后使用适量的冰醋酸将pH值调节至5.0～6.5，并再加注射用水使溶液至1000ml，搅拌均匀后加入0.5g活性炭；

(3)上述溶液脱炭后，先后经0.45μm和0.22μm微孔过滤器过滤后分装；

(4)在121℃下灭菌12分钟即可。

(5)测渗透压比小于1.8。

实施例三

(1)称取

异亮氨酸              2.11g      甘氨酸             4.56g

亮氨酸                2.94g      丙氨酸             1.20g

甲硫氨酸              1.35g      谷氨酸             0.45g

苯丙氨酸              3.20g      门冬氨酸           1.50g

苏氨酸                1.50g      脯氨酸             0.60g

色氨酸                0.54g      丝氨酸             0.60g

缬氨酸                2.16g      胱氨酸             0.06g

赖氨酸盐酸盐         2.58g      酪氨酸             0.15g

精氨酸盐酸盐         3.00g      亚硫酸氢钠         0.02g

组氨酸盐酸盐         1.50g

(2)在氮气的保护下将上述组成加入到约700ml注射用水中，同时加热至45～95℃，搅拌使溶解，然后使用适量的氢氧化钠将pH值调节至5.0～6.5，并再加注射用水使溶液至1000ml，搅拌均匀后加入0.5g活性炭；

(3)上述溶液脱炭后，先后经0.45μm和0.22μm微孔过滤器过滤后分装；

(4)在121℃下灭菌12分钟即可。

(5)测渗透压比小于1.8。

实施例四

(1)称取

异亮氨酸               5.63g      甘氨酸             12.16g

亮氨酸                 7.84g      丙氨酸             3.20g

甲硫氨酸               3.60g      谷氨酸             1.20g

苯丙氨酸               8.53g      门冬氨酸           4.00g

苏氨酸                 3.97g      脯氨酸             1.60g

色氨酸                 1.44g      丝氨酸             1.60g

缬氨酸                 5.76g      胱氨酸             0.16g

赖氨酸醋酸盐           7.77g      乙酰酪氨酸         0.496g

精氨酸                 6.61g      焦亚硫酸钠         0.40g

组氨酸                 2.96g

(2)在氮气的保护下将上述组成加入到约700ml注射用水中，同时加热至45～95℃，搅拌使溶解，然后使用适量的氢氧化钠将pH值调节至5.0～6.5，并再加注射用水使溶液至1000ml，搅拌均匀后加入0.5g活性炭；

(3)上述溶液脱炭后，先后经0.45μm和0.22μm微孔过滤器过滤后分装；

(4)在121℃下灭菌12分钟即可。

(5)测渗透压比小于1.8。

实施例五

(1)血管刺激性试验

方法：取健康家兔8只，雌雄各半，随机分为2组，每组4只，第一组耳缘静脉注射实施例一制备的氨基酸注射液1ml/只，第二组耳缘静脉注射等容量生理盐水，注射时间2分钟，每天一次，连续5天。末次注射后48小时，先肉眼观察注射部位的血管及周围组织的变化，然后每组取2只家兔，以注射部位为中心，剪下兔耳(含血管)3～5cm于10％甲醛溶液中固定，进行病理组织学检查。另2只家兔于末次注射给药后第5天，肉眼观察注射部位的变化，按上述方法操作，并按下表判断结果。

1.肉眼观察标准

观察注射部位兔耳静脉有无充血、水肿、变性、硬结及坏死现象。血管充血程度和水肿程度分别分为0、I、II、III度，0度为无变化、I度为轻微变化、II度为明显变化、III度为严重变化，以2只或2只以上评定结果的平均值为准。

2.病理组织学检查标准

如表1所示取下注射部位的兔耳(含血管)长约4cm，分别在1、2段取标本，横断血包埋切片，H-E染色，光镜观察。

表1 标本血流方向

 

0

1

2

注：0注射点   1-2近心端(取标本)

观察注射部位兔耳静脉血管扩张充血、血栓形成、水肿和炎性细胞浸润等改变。每项内容按病变程度分正常、轻、中、重三级，以(-)、(+)、(++)、(+++)表示。

结果：

1.肉眼观察结果实验结果表明，兔耳末次静脉注射后，48h未见明显的静脉充血、水肿等反应。5d后观察也未见有明显的反应，见表2。

2.病理组织学检查结果氨基酸注射液耳静脉末次给药后48h，见轻度水肿、充血、少量炎症细胞浸润，并伴少量血栓形成及出血。5天后充血有改善，血栓、水肿、出血等指标未见明显改善，与生理盐水组相似，但无明显病变。见表3。

表明本发明所述的氨基酸注射液对耳静脉给药有轻度刺激性。

表2 氨基酸注射液末次给药后肉眼观察结果

 

组别	观察时间	无明显反应	充血	水肿	变性	硬结	坏死
								生理盐水	48h	4/4	0/4	0/4	0/4	0/4	0/4
氨基酸	48h	3/4	1/2	0/4	0/4	0/4	0/4
								生理盐水	5d	2/2	0/2	0/2	0/2	0/2	0/2
氨基酸	5d	2/2	0/2	0/2	0/2	0/2	0/2

(2)溶血试验

方法：取家兔1只，自颈动脉取血约20ml，置三角瓶中，用竹签搅拌去除纤维蛋白，然后将血移入刻度离心管内，加入生理盐水5-10ml，混合后离心10分钟(2000-2500r/分)，去除上清液，再加生理盐水混合离心，反复洗3-4次，至上清液呈无色透明方可用于试验。将所得红细胞按其容积，用生理盐水稀释成2％的混悬液。取试管7支，编号排列于试管架上，按下表加入各种溶液：

 

编号	1	2	3	4	5	6	7
								氨基酸(ml)	0.1	0.2	0.3	0.4	0.5
生理盐水(ml)	2.4	2.3	2.2	2.1	2.0	2.5	2.5
								2％红细胞混悬液(ml)	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5

第1-5管为供试品管，第6管为不溶血对照管(阴性)，第7管为完全溶血对照管(阳性)。轻轻摇匀后，置37℃恒温水浴中观察，1小时内每隔15分钟观察一次，1小时后，每隔1小时观察一次，连续观察3小时。

结果观察：

1.肉眼判断标准

①全溶血：溶液澄明红色，管底无细胞残留。

②部分溶血：溶液澄明红色或棕色，管底有少量红细胞残留。

③无溶血：红细胞全部下沉，上层液体无色澄明。

④凝集：虽不溶血，但出现红细胞凝集，振摇后不能分散或出现药物性沉淀。

2.分光光度法：将各管的溶液置入干燥离心管中离心，取上清液置分光光度计上，545nm处，以蒸馏水为空白读取各管OD值。各试管溶血率(％)＝(OD₁-OD_nc)/(OD_pc-OD_nc)×100％，溶血率小于5％为合格。

结果：第1-6号试管均无常务和凝集现象，振摇后均匀分散，第7管全溶血。分光光度法测定各试管的溶血率(％)均小于5％。见下表：

 

	1	2	3	4	5	6	7
								光密度	0.035	0.004	0.015	0.006	0.014	空白对照	1.6

 

	1	2	3	4	5	6	7
								溶血率(％)	2.19	0.25	0.94	0.38	0.88

表明本发明所述的氨基酸注射液对家兔红细胞无溶血和凝集现象。

(3)过敏试验

方法；取健康豚鼠12只，分成三组，每组4只，分别为实施例一制备的氨基酸注射液组、阴性对照组、阳性对照组(蛋清)。按无菌操作，氨基酸注射液组隔日每只豚鼠腹腔注射氨基酸注射液0.5ml，共5次。于末次注射后的第14日静脉注射氨基酸注射液1ml一次激发。阴性对照组和阳性对照组，按无菌操作分别隔日每只豚鼠腹腔注射氯化钠注射液、10％鸡蛋清溶液0.5ml，共5次，并于末次注射后的第14日，分别由静脉注射氯化钠注射液、10％鸡蛋清溶液1ml一次激发。观察注射后各动物有无下表所列过敏反应症状。按全身致敏性评价标准评价，判定其是否合格。

豚鼠过敏反应症状

 

0正常	7呼吸急促	14步态不稳
			1不安宁	8排尿	15跳跃
2立毛	9排粪	16喘息

 

3发抖	10流泪	17痉挛
			4搔鼻	11呼吸困难	18横转
5喷嚏	12罗音	19潮式呼吸
			6咳嗽	13紫癜	20死亡

全身致敏性评价标准

 

0		过敏反应阴性
			1-4症状	+	过敏反应弱阳性
1-10症状	++	过敏反应阳性
			1-19症状	+++	过敏反应强阳性
20	++++	过敏反应极强阳性

结果：第14天激发后，氨基酸注射液组和阴性对照组豚鼠均未出现抓鼻、喷嚏、竖毛、呼吸困难、痉挛、休克和死亡等过敏反应，评分为0分；体重平均增加30g。阳性对照组豚鼠于注射后4分钟均出现连续咳嗽、呼吸困难，1小时内休克死亡，过敏反应级数达4级。见表6。

结果表明本发明所述的氨基酸注射液对豚鼠过敏反应呈阴性。

表6 氨基酸注射液对豚鼠过敏反应(n＝4)

Claims (4)

1.氨基酸注射液，其特征在于每1000ml注射液中含有：

异亮氨酸        2.11～5.63g      甘氨酸          4.56～12.16g

亮氨酸          2.94～7.84g      丙氨酸          1.20～3.20g

甲硫氨酸        1.35～3.60g      谷氨酸          0.45～1.20g

苯丙氨酸        3.20～8.53g      门冬氨酸        1.50～4.00g

苏氨酸          1.49～3.97g      脯氨酸          0.60～1.60g

色氨酸          0.54～1.44g      丝氨酸          0.60～1.60g

缬氨酸          2.16～5.76g      胱氨酸          0.06～0.16g

赖氨酸盐酸盐    2.58～6.88g  或  赖氨酸醋酸盐    2.91～7.77g

精氨酸盐酸盐    3.00～8.00g  或  精氨酸          2.48～6.61g

组氨酸盐酸盐    1.50～4.00g  或  组氨酸          1.11～2.96g

酪氨酸          0.15～0.40g  或  乙酰酪氨酸      0.186～0.496g

亚硫酸氢钠      0.02～0.40g  或  焦亚硫酸钠      0.02～0.40g。

2.如权利要求1所述的氨基酸注射液，其特征在于每1000ml注射液中含有：

异亮氨酸        3.52g        甘氨酸          7.60g

亮氨酸          4.90g        丙氨酸          2.00g

甲硫氨酸        2.25g        谷氨酸          0.75g

苯丙氨酸        5.33g        门冬氨酸        2.50g

苏氨酸          2.50g        脯氨酸          1.00g

色氨酸          0.90g        丝氨酸          1.00g

缬氨酸          3.60g        胱氨酸          0.10g

赖氨酸盐酸盐    4.30g    或  赖氨酸醋酸盐    4.86g

精氨酸盐酸盐    5.00g    或  精氨酸          4.13g

组氨酸盐酸盐    2.50g    或  组氨酸          1.85g

酪氨酸          0.25g    或  乙酰酪氨酸      0.31g

亚硫酸氢钠      0.40g    或  焦亚硫酸钠      0.40g。

3.一种制备如权利要求1或2所述的氨基酸注射液的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)按上述每1000ml处方称取符合质量标准的各种组分；

(2)在氮气的保护下使用注射用水溶解，然后调节pH值至5.0～6.5，并加注射用水使溶液至全量1000ml，搅拌均匀后加入活性炭；

(3)上述溶液脱炭后，先后经0.45μm和0.22μm微孔过滤器过滤后分装；

(4)在105℃～121℃下灭菌8～40分钟即可。

4.如权利要求3所述的氨基酸注射液的方法，其特征在于步骤(2)中使用的注射用水为40～95℃。