本发明在由National Institutes of Health授予的授权号U01CA099168-01、U01CA62505和NIH/NCCR/GCRC 5M01RR 00056下得到了政府的完全或部分支持。政府可具有本发明的一些权利。
发明详述
已经出乎意料地发现,联合治疗操作的组合可以提供改善的疗效,所述联合治疗操作包括给药如本文所述的HDAC抑制剂例如SAHA,与一种或多种如本文所述的抗癌药例如卡铂和紫杉醇。每一治疗(施用HDAC抑制剂和施用抗癌药)被用于提供治疗有效治疗。
本发明涉及在有此需要的个体中治疗癌症或其他疾病的方法,所述方法包括在治疗操作中给有此需要的个体施用一定量的HDAC抑制剂例如SAHA或其可药用盐或水合物,和在另一个治疗操作中施用一定量的一种或多种抗癌药(例如烷化剂如卡铂,和植物来源药例如紫杉醇)或其任何盐或水合物,以及在任选另外的治疗操作中施用任选一定量另外的抗癌药(例如另一种HDAC抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、另一种烷化剂、抗生素、抗代谢药、另一种植物来源药和辅助药物)或其任何盐或水合物,其中所述量和在一起构成治疗有效量。HDAC抑制剂与一种或多种抗癌药的作用可以是叠加的或协同的。
在一个方面,所述方法包括在一个治疗操作中给有此需要的患者施用一定量的组蛋白脱乙酰化酶抑制剂例如SAHA或其可药用盐或水合物,与另一量的一种或多种抗癌药例如卡铂和紫杉醇或其任何可药用盐或水合物。该方法还任选包括施用一定量另外的抗癌药或其任何可药用盐或水合物。
本发明还涉及用于治疗癌症或其他疾病的药物组合。在一个方面,所述药物组合包括一定量的HDAC抑制剂例如SAHA或其可药用盐或水合物和另一量的一种或多种抗癌药例如卡铂和紫杉醇或其任何可药用盐或水合物。该方法可任选包括施用一定量另外的抗癌药或其任何可药用盐或水合物。所述量和在一起可构成治疗有效量。
本发明还涉及一定量的HDAC抑制剂与一定量的一种或多种抗癌药在制备用于治疗癌症或其他疾病的药物中的应用。在一个方面,所述药物包含一定量的HDAC抑制剂例如SAHA或其可药用盐或水合物和另一量的一种或多种抗癌药例如卡铂和紫杉醇或其任何可药用盐或水合物,以及任选一定量另外的抗癌药或其任何可药用盐或水合物。定义
在本发明中,各种语法形式的术语“治疗”是指预防(例如化学预防)、治愈、逆转、减弱、减轻、最小化、抑制或停止疾病状态、疾病进程、疾病病原体(例如细菌或病毒)或其他异常状态的有害作用。例如,治疗可涉及减轻疾病的症状(即不是必须所有症状)或减弱疾病的进程。由于某些本发明方法涉及物理除去病原体,本领域技术人员将认识到在下述情况下同样有效:本发明化合物在暴露于病原体之前或暴露于病原体的同时施用本发明化合物(预防治疗),以及在暴露于病原体之后(甚至是好了之后)施用本发明化合物。
如本文所用,治疗癌症是指在哺乳动物例如人中,部分或完全抑制、延迟或预防癌症,包括癌症转移的进程;或者预防癌症的发作或发展(例如化学预防)。此外,本发明方法是用于治疗(例如化学治疗)人癌症患者。然而,本发明方法在其他哺乳动物的治疗中也可能有效。
本发明的“抗癌药”包括本文描述的那些,包括这样的抗癌药的任何可药用盐,或者任何游离酸、游离碱或其他游离形式的这样的抗癌药,以及下列非限制性实例:A)极性化合物(Marks等人(1987);Friend,C.,Scher,W.,Holland,J.W.,和Sato,T.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)68:378-382;Tanaka,M.,Levy,J.,Terada,M.,Breslow,R.,Rifkind,R.A.,和Marks,P.A.(1975)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)72:1003-1006;Reuben,R.C.,Wife,R.L.,Breslow,R.,Rifkind,R.A.,和Marks,P.A.(1976)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)73:862-866);B)维生素D和视黄酸(Abe,E.,Miyaura,C.,Sakagami,H.,Takeda,M.,Konno,K.,Yamazaki,T.,Yoshika,S.,和Suda,T.(1981)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)78:4990-4994;Schwartz,E.L.,Snoddy,J.R.,Kreutter,D.,Rasmussen,H.,和Sartorelli,A.C.(1983)Proc.Am.Assoc.Cancer Res.24:18;Tanenaga,K.,Hozumi,M.,和Sakagami,Y.(1980)Cancer Res.40:914-919);C)甾族激素(Lotem,J.和Sachs,L.(1975)Int.J.Cancer15:731-740);D)生长因子(Sachs,L.(1978)Nature(Lond.)274:535,Metcalf,D.(1985)Science,229:16-22);E)蛋白酶(Scher,W.,Scher,B.M.,和Waxman,S.(1983)Exp.Hematol.11:490-498;Scher,W.,Scher,B.M.,和Waxman,S.(1982)Biochem.& Biophys.Res.Comm.109:348-354);F)肿瘤促进剂(Huberman,E.和Callaham,M.F.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)76:1293-1297;Lottem,J.和Sachs,L.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)76:5158-5162);和G) Inhibitors of DNA orRNA合成抑制剂(Schwartz,E.L.和Sartorelli,A.C.(1982)Cancer Res.42:2651-2655,Terada,M.,Epner,E.,Nudel,U.,Salmon,J.,Fibach,E.,Rifkind,R.A.,和Marks,P.A.(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)75:2795-2799;Morin,M.J.和Sartorelli,A.C.(1984)CancerRes.44:2807-2812;Schwartz,E.L.,Brown,B.J.,Nierenberg,M.,Marsh,J.C.,和Sartorelli,A.C.(1983)Cancer Res.43:2725-2730;Sugano,H.,Furusawa,M.,Kawaguchi,T.,和Ikawa,Y.(1973)Bibl.Hematol.39:943-954;Ebert,P.S.,Wars,I.,和Buell,D.N.(1976)Cancer Res.36:1809-1813;Hayashi,M.,Okabe,J.,和Hozumi,M.(1979)Gann70:235-238)。
本文所用术语“治疗有效量”是用于指联合治疗中治疗剂的合并的量。该合并的量将实现所需的生物反应。在本发明中,所需生物反应是在哺乳动物例如人中部分或完全抑制、延迟或预防癌症,包括癌症转移的进程;或者预防癌症的发作或发展(例如化学预防)。
本文所用术语“联合治疗”、“组合治疗”、“合并治疗”或“联合的治疗”可交替使用,并且是指用至少两种不同治疗剂来治疗个体。根据本发明的一个方面,用治疗剂例如SAHA或如本文所述的另一种HDAC抑制剂治疗个体。另一种治疗剂可以是另一种HDAC抑制剂,或如本文描述的任何其他临床上确立的抗癌药(例如烷化剂、抗生素、抗代谢药、激素药物、植物来源药、抗血管生成剂、分化诱导剂、细胞生长阻抑诱导剂、细胞程序死亡诱导剂、细胞毒害剂、生物药、基因治疗剂、类视色素剂(retinoid agent)、酪氨酸激酶抑制剂或辅助药物)。联合治疗可包括第三种、第四种、第五种或甚至更多的治疗剂。联合治疗可以连续或并行进行。
本文使用的“类视色素剂”或“类视色素”(例如3-甲基TTNEB)包括任何合成、重组或天然化合物,所述化合物结合一种或多种类视色素受体(retinoid receptor),包括这样的活性剂的任何可药用盐或水合物,以及这样的活性剂的任何游离酸、游离碱或其他游离形式。
“酪氨酸激酶抑制剂”(例如Erlotinib)包括任何合成、重组或天然活性剂,所述活性剂结合一种或多种酪氨酸激酶(例如受体酪氨酸激酶)或者降低一种或多种酪氨酸激酶的活性或水平,包括这样的抑制剂的任何可药用盐或水合物,以及这样的抑制剂的任何游离酸、游离碱或其他游离形式。包括作用于EGFR(ErbB-1;HER-1)的酪氨酸激酶抑制剂。还包括特异性地作用于EGFR的酪氨酸激酶抑制剂。本文中提供了酪氨酸激酶抑制剂的非限制性实例。
“辅助药物”是指用于提高抗癌药有效性或者用于预防或治疗与抗癌药有关的病症的任何化合物,所述与抗癌药有关的病症是例如低血细胞计数、中性白细胞减少、贫血、过敏反应、血小板减少、高钙血、粘膜炎、硬伤、出血、中毒、疲劳、疼痛、恶心和呕吐。
本文所用的“HDAC抑制剂”(例如SAHA)包括任何合成、重组或天然抑制剂,包括这样的抑制剂的任何可药用盐,或者任何游离酸、游离碱或其他游离形式的这样的抑制剂。本文所用的“异羟肟酸衍生物”是指作为异羟肟酸衍生物的组蛋白脱乙酰化酶抑制剂类别。本文提供了抑制剂的具体实例。
本文所用术语“患者”或“个体”是指治疗的接受者。包括哺乳动物和非哺乳动物患者。在一个具体实施方案中,患者是哺乳动物例如人、犬、鼠、猫、牛、羊、猪或山羊。在一个特定实施方案中,患者是人。
本文所用术语“间断”或“间断地”是指以规则或不规则间隔停止和开始。
术语“水合物”包括半水合物、单水合物、二水合物、三水合物等。组蛋白脱乙酰化酶和组蛋白脱乙酰化酶抑制剂
组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)催化从核小体核心组蛋白的氨基末端的赖氨酸残基脱去乙酰基的酶。这样,HDAC与组蛋白乙酰基转移酶(HAT)一起调节组蛋白的乙酰化状况。组蛋白乙酰化影响HDAC的基因表达,并且HADC的抑制剂,例如基于异羟肟酸的杂化极性化合物N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)在体外诱导转化细胞的生长抑止、分化和/或细胞程序死亡,并且在体内抑制肿瘤生长。
根据结构同源性,HDAC可以分为三类。第I类HDAC(HDAC 1、2、3和8)与酵母RPD3蛋白具有相似性,它们位于核中并存在于与转录辅阻抑物有关的复合物中。第II类HDAC(HDAC 4、5、6、7和9)类似于酵母HDA1蛋白,它们位于细胞核和细胞质亚细胞部位。第I和第II类HDAC都被基于异羟肟酸的HDAC抑制剂例如SAHA抑制。第III类HDAC形成结构关系较远的NAD依赖性酶类,它们与酵母SIR2蛋白有关,但不被基于异羟肟酸的HDAC抑制剂抑制。
组蛋白脱乙酰化酶抑制剂还称为HDAC抑制剂,是在体内、体外或者体内和体外都能抑制组蛋白脱乙酰化的化合物。这样,HDAC抑制剂抑制至少一种组蛋白脱乙酰化酶的活性。作为抑制至少一种阻蛋白的脱乙酰化作用的结果,乙酰化组蛋白增加。乙酰化组蛋白的累积是评价HDAC抑制剂活性的适合的生物学标志。因此,可检测乙酰化组蛋白累积的方法可用于测定所关注化合物的HDAC抑制活性。应该清楚,可以抑制组蛋白脱乙酰化酶活性的化合物还可以与其他底物结合,因此可以抑制其他生物活性分子例如酶。还应清楚,本发明化合物能够抑制任何前述的组蛋白脱乙酰化酶或者任何其他的组蛋白脱乙酰化酶。
例如,在接受HDAC抑制剂的患者中,可以相对于合适的对照,测定用HDAC抑制剂治疗的外周单核细胞中以及组织中乙酰化组蛋白的累积。
可以使用例如显示抑制至少一种组蛋白脱乙酰化酶抑制的酶分析法来在体外测定特定化合物的HDAC抑制活性。此外,测定用特定组合物处理的细胞中乙酰化组蛋白的累积可以确定化合物的HDAC抑制活性。
乙酰化组蛋白的累积的测定是文献公知的。参见,例如Marks,P.A.等人,J.Natl.Cancer Inst.,92:1210-1215,2000;Butler,L.M.等人,Cancer Res.60:5165-5170,2000;Richon,V.M.等人,Proc.Natl.Acad.Sci.,USA,95:3003-3007,1998;和Yoshida,M.等人,J.Biol.Chem.,265:17174-17179,1990。
例如,测定HDAC抑制剂化合物活性的酶分析法可以如下进行。概括地说,HDAC抑制剂化合物对纯化的人抗原表位标记的(例如Flag)HDAC1的亲和作用可在没有底物的存在下在冰中将酶制品与所示量的抑制剂化合物培养约20分钟来进行测定。加入底物(例如[3H]乙酰基-标记的得自鼠红白血病细胞的组蛋白),并将总体积为30μl的样品在37℃培养20分钟。而后可以使该反应停止,提取释放的乙酸盐或酯并通过闪烁计数测定放射性释放量。另一种用于测定HDAC抑制剂化合物活性的方法是“HDAC Fluorescent Activity Assay;Drug DiscoveryKit-AK-500”,得自 Research Laboratories,Inc.,PlymouthMeeting,PA。
如下进行体内研究。可对动物例如小鼠腹膜内注射HDAC抑制剂化合物。可在给药后的预定时间分离选定的组织,如脑、脾脏、肝脏等。基本按照Yoshida等在J.Biol.Chem.265:17174-17179,1990中的描述方法分离组蛋白。可基本上按照文献中描述的方法(参见例如Yoshida等人,J.Biol.Chem.265:17174-17179,1990)来分离组蛋白。使等量的组蛋白(约1μg)在15% SDS-聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳并将其转移到Hybond-P过滤器(得自Amersham)上。过滤器可用3%乳阻滞并用兔纯化的多克隆抗乙酰化组蛋白H4抗体探针(aAc-H4)和抗乙酰化组蛋白H3抗体(aAc-H3)(Upstate Biotechnology,Inc.)探测。用辣根过氧化酶轭合的山羊抗兔抗体(1:5000)和SuperSignal化学发光底物(Pierce)显现乙酰化组蛋白水平。可以平行使用相同的凝胶进行并用考马斯蓝(CB)染色,作为组蛋白的负载对照。
基于异羟肟酸的HDAC抑制剂也已显示出上调p21WAF1基因的表达。采用标准方法,在各种转化细胞中在与HDAC抑制剂培养2小时内诱导p21WAF1蛋白。p21WAF1基因的诱导与该基因染色质区域的乙酰化组蛋白的累积有关。因此,可认为p21WAF1的诱导与由转化细胞中HDAC抑制剂引起的G1细胞周期静止有关。
授予某些本发明者们的U.S.专利5,369,108、5,932,616、5,700,811、6,087,367和6,511,990公开了可用于选择性地诱导瘤形成细胞的末期分化,所述化合物具有两个极性末端基团,所述两个极性末端基团被柔性亚甲基链或者被刚性苯基分隔开,其中一个或两个极性末端基团是大的疏水性基团。某些化合物在与第一个疏水性基团相同的分子末端具有另外的大疏水性基团,所述基团在酶测定中将分化活性进一步提高了约100倍,在细胞分化测定中,将分化活性进一步提高了约50倍。上述专利中充分描述了合成本发明方法和药物组合物中使用的化合物的方法,这些专利全文引入本文以供参考。
因此,本发明在其宽范围组合物中包括HDAC抑制剂,所述HDAC抑制剂是1)异羟肟酸衍生物;2)短链脂肪酸(SCFA);3)环状四肽;4)苯甲酰胺类;5)亲电性酮类;和/或任何其他类的能抑制组蛋白脱乙酰化酶的化合物,所述组合物用于抑制组蛋白脱乙酰化酶,包括诱导瘤形成细胞的末期分化、细胞生长抑止和/或细胞程序死亡,和/或诱导肿瘤中肿瘤细胞的末期分化、细胞生长抑止和/或细胞程序死亡。
下面描述了这样的HDAC抑制剂的非限制性实例。应该理解,本发明包括本文所述的HDAC抑制剂的任何盐、晶体结构、非晶结构、水合物、衍生物、代谢物、立体异构体、结构异构体和前药,以及任何游离酸、游离碱或其他游离形式。
A.异羟肟酸衍生物,例如N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)(Richon等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95,3003-3007(1998));间羧基肉桂酸双羟肟酰胺(CBHA)(Richon等人,上文);Pyroxamide;曲古抑菌素类似物,例如曲古抑菌素A(TSA)和曲古抑菌素C(Koghe等人.1998.Biochem.Pharmacol.56:1359-1364);水杨基双异羟肟酸(Andrews等人,International J.Parasitology 30,761-768(2000));辛二酰双异羟肟酸(SBHA)(U.S.专利5,608,108);壬二酸双异羟肟酸(ABHA)(Andrews等人,上文);壬二酸-1-异羟肟酸-9-酰替苯胺(AAHA)(Qiu等人,Mol.Biol.Cell 11,2069-2083(2000));6-(3-氯苯基脲基)己酸异羟肟酸(3Cl-UCHA);Oxamflatin[(2E)-5-[3-[(苯基磺酰基)氨基]苯基]-戊-2-烯-4-炔基异羟肟酸](Kim等人.Oncogene,18:2461 2470(1999));A-161906,Scriptaid(Su等人.2000 Cancer Research,60:3137-3142);PXD-101(Prolifix);LAQ-824;CHAP;MW2796(Andrews等人,上文);MW2996(Andrews等人,上文);或U.S.专利5,369,108、5,932,616、5,700,811、6,087,367和6,511,990中描述的任何异羟肟酸化合物。
B.环状四肽,例如Trapoxin A(TPX)-环四肽(环-(L-苯基丙氨酰基-L-苯基丙氨酰基-D-2-甲基哌啶基-L-2-氨基-8-氧代-9,10-环氧癸酰基))(Kijima等人,J.Biol.Chem.268,22429-22435(1993));FR901228(FK228,缩肽)(Nakajima等人,Ex.Cell Res.241,126-133(1998));FR225497环四肽(H.Mori等人,PCT申请WO 00/08048(17 February 2000));Apicidin环四肽[环(N-O-甲基-L-色氨酰基-L-异亮氨酰基-D-2-甲基哌啶基-L-2-氨基-8-氧代癸酰基)](Darkin-Rattray等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93,13143-13147(1996));Apicidin Ia,Apicidin Ib,Apicidin Ic,Apicidin IIa和Apicidin IIb(P.Dulski等人,PCT申请WO 97/11366);CHAP,HC-毒素环四肽(Bosch等人,Plant Cell 7,1941-1950(1995));WF27082环四肽(PCT申请WO 98/48825);和Chlamydocin(Bosch等人,上文)。
C.短链脂肪酸(SCFA)衍生物,例如:丁酸钠(Cousens等人,J.Biol.Chem.254,1716-1723(1979));异戊酸盐或酯(McBain等人,Biochem.Pharm.53:1357-1368(1997));戊酸盐或酯(McBain等人,上文);4-苯基丁酸盐或酯(4-PBA)(Lea和Tulsyan,Anticancer Research,15,879-873(1995));苯基丁酸盐或酯(PB)(Wang等人,Cancer Research,59,2766-2799(1999));丙酸盐或酯(McBain等人,上文);丁酰胺(Lea和Tulsyan,上文);异丁酰胺(Lea和Tulsyan,上文);苯基乙酸盐或酯(Lea和Tulsyan,上文);3-溴丙酸盐或酯(Lea和Tulsyan,上文);Tributyrin(Guan等人,Cancer Research,60,749-755(2000));丙戊酸、丙戊酸盐和PivanexTM。
D.苯甲酰胺衍生物,例如CI-994;MS-275[N-(2-氨基苯基)-4-[N-(吡啶-3-基甲氧基羰基)氨基甲基]苯甲酰胺](Saito等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 96,4592-4597(1999));和MS-275的3′-氨基衍生物(Saito等人,上文)。
E.亲电性酮衍生物,例如三氟甲基酮类(Frey等人,Bioorganic & Med.Chem.Lett.(2002),12,3443-3447;U.S.6,511,990)和α-酮基酰胺类,例如N-甲基-α-酮基酰胺类。
F.其他HDAC抑制剂,例如突然产物、psammaplins和Depudecin(Kwon等人.1998.PNAS 95:3356-3361)。
基于异羟肟酸的HDAC抑制剂包括N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)、间羧基肉桂酸双羟肟酰胺(CBHA)和pyroxamide。据显示,SAHA直接结合于组蛋白脱乙酰化酶的催化袋。SAHA诱导培养的转化细胞的细胞周期抑止、分化和/或细胞程序死亡,以及抑制啮齿类动物中的肿瘤生长。SAHA在实体瘤和血液学癌症中都有效诱导这些作用。已经显示,SAHA有效抑制动物中的肿瘤生长但对动物没有毒性。SAHA诱导的肿瘤抑制作用与肿瘤中乙酰化组蛋白的累积有关。SAHA有效抑制大鼠中致癌物(N-甲基亚硝基脲)诱发的乳腺癌的发展和持续生长。将SAHA加入食物中给大鼠施用的研究进行了130天以上。因此,SAHA是无毒的口服活性抗肿瘤剂,其作用机制与组蛋白脱乙酰化酶活性的抑制有关。
HDAC抑制剂包括在授予某些本发明者们的U.S.专利5,369,108、5,932,616、5,700,811、6,087,367和6,511,990中公开的那些,这些专利全文引入本文以供参考,下面列出其非限制性实例:
具体的HDAC抑制剂包括N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA;N-羟基-N′-苯基辛二酰胺),其由下面的结构式代表:
这样的化合物的其他实例和其他HDAC抑制剂可参见下列文献:1994年11月29日公布的U.S.专利5,369,108,1997年12月23日公布的U.S.专利5,700,811,1998年6月30日公布的U.S.专利5,773,474,1999年8月3日公布的U.S.专利5,932,616,和2003年1月28日公布的U.S.专利6,511,990,所有这些专利都授予Breslow等人;1991年10月8日公布的U.S.专利5,055,608,1992年12月29日公布的U.S.专利5,175,191,和1997年3月4日公布的U.S.专利5,608,108,所有这些专利都授予Marks等人;以及Yoshida,M.,等人,Bioassays 17,423-430(1995);Saito,A.,等人,PNAS USA 96,4592-4597,(1999);FuramaiR.等人,PNAS USA 98(1),87-92(2001);Komatsu,Y.,等人,CancerRes.61(11),4459-4466(2001);Su,G.H.,等人,Cancer Res.60,3137-3142(2000);Lee,B.I.等人,Cancer Res.61(3),931-934;Suzuki,T.,等人,J.Med.Chem.42(15),3001-3003(1999);于2001年3月15日公开的PCT申请WO 01/18171,其授予Sloan-Kettering Institute for CancerResearch和The Trustees of Columbia University;公开的PCT申请WO02/246144,授予Hoffmann-La Roche;公开的PCT申请WO 02/22577,授予Novartis;公开的PCT申请WO 02/30879,授予Prolifix;公开的PCT申请WO 01/38322(2001年5月31日公开)、WO 01/70675(2001年9月27日公开)和WO 00/71703(2000年11月30日公开),这些都授予Methylgene,Inc.;1999年10月8日公开的PCT申请WO 00/21979,其授予Fuiisawa Pharmaceutical Co.,Ltd.;1998年3月11日公开的PCT申请WO 98/40080,其授予Beacon Laboratories,L.L.C.;和Curtin M.(HDAC抑制剂的目前法律状态Expert Opin.Ther.Patents(2002)12(9):1375-1384以及其中所引用的文献)。
SAHA或任何其他HDAC可以根据实验详述章节中显示的方法来合成,或者根据U.S.专利5,369,108、5,700,811,5,932,616和6,511,990中提出的方法来合成,所述专利的内容引入本文以供参考,或者根据本领域技术人员已知的任何其他方法来合成。
下表中提供了HDAC抑制剂的非限制性具体实例。应当注意,本发明包括在结构上与下面显示的化合物类似,并且能够抑制组蛋白脱乙酰化酶的任何化合物。
立体化学
许多有机化合物存在光学活性形式,其能够使平面的平面偏振光旋转。在描述光学活性化合物时,前缀D和L或者R和S用于表示围绕其手性中心的分子的绝对构型。前缀d和l或者(+)和(-)用于指示化合物的平面偏振光的旋转标记,(-)表示该化合物是左旋的。前缀为(+)或d的化合物则是右旋的。对于给定的化学结构,除它们是彼此的不可叠加的镜像以外,被称为立体异构体的这些化合物是相同的。具体立体异构体还可以称为对映体,并且这样的异构体的混合物经常被称为对映体混合物。50:50的对映体混合物被称为外消旋混合物。
本文描述的许多化合物具有一个或多个手性中心,因此可以以不同的对映体形式存在。如果需要,手性碳可以用星号(*)标示。在本发明的结构式中,当与手性碳键合的键被描述为直线形式时,应理解为该手性碳是(R)和(S)构型的,因此该结构式包括其两种对映体及其混合物。如本领域中使用的那样,当需要说明手性碳的绝对构型时,与手性碳键合的一个键被描述为楔式(与平面上的原子键合),并且与手性碳键合的另一个键被描述为虚线方式或者短平行楔形式(与平面下的原子键合)。可使用Cahn-Inglod-Prelog系统命名手性碳的(R)或(S)构型。
当本发明的HDAC抑制剂包含一个手性中心时,化合物以两种对映体形式存在,因此本发明包括这两种对映体以及对映体混合物,如特定的被称为外消旋混合物的50:50混合物。对映体可以通过本领域技术人员已知的方法拆分,例如可以下方法来拆分:形成的非对映体盐,其可例如通过结晶来分离(参见CRC Handbook of Optical Resolutionsvia Diastereomeric Salt Formation by David Kozma(CRC Press,2001));形成非对映体衍生物或复合物,其可通过,例如结晶、气-液或液相色谱分离;一种对映体与对映体特异性试剂的选择性反应,例如酶促酯化;或者手性环境下的气-液或液相色谱,例如在结合了手性配体的手性载体,如硅石上或者在手性溶剂的存在下进行色谱。应该清楚,在将所需对映体通过上述一种分离方法转化为另一种化学实体时,进一步需要释放所需对映体形式的步骤。或者,可使用光学活性试剂、底物、催化剂或溶剂通过不对称合成方法来合成特定的对映体,或者通过不对称转化反应将一种对映体转化为另一种对映体。
本发明化合物的手性碳的特定绝对构型的标示应理解为是指所标示的对映体形式化合物是对映体过量(ee)的,或者换句话说,其基本上不含另一种对映体。例如,(R)构型的化合物基本不含(S)构型的化合物,因此相对于(S)构型是对映体过量的。相反,(S)构型的化合物基本不含(R)构型的化合物,因此相对于(R)构型是对映体过量的。本文使用的对映体过量是特定对映体以超过50%的量存在。例如对映体过量可以为约60%或更高,如约70%或更高,例如约80%或更高,如约90%或更高。在一个特定的实施方案中,当标示一种特定的绝对构型时,所述化合物的对映体过量至少为约90%。在更优选的实施方案中,化合物的对映体过量为至少约95%,如至少约97.5%,例如至少99%对映体过量。
当本发明化合物具有两个或多个手性碳时,它可以具有两种以上的光学异构体,因此可以以非对映体形式存在。例如当具有两个手性碳时,化合物可以具有最多达4种光学异构体和2对对映体((S,S)/(R,R)和(R,S)/(S,R))。成对的对映体(例如(S,S)/(R,R))彼此是镜像立体异构体。非镜像的立体异构体(例如(S,S)和(R,S))则是非对映体。非对映体对可通过本领域专业技术人员已知的方法,例如色谱或者结晶方法分离,并且可如上所述分离每对中的对映体单体。本发明包括这样的化合物的每一种非对映体及其混合物。
本文使用的不定冠词和定冠词“一种”、“一个”和“该”包括单数和复数指示物,除非本文另有清楚的指示。因此,例如“一种活性剂”或“一种药理学活性剂”包括单一的活性物质以及组合的两种或多种不同的活性物质,提及的“一种载体”包括两种或多种载体的混合物以及单一载体等。
本发明还包括所公开的HDAC抑制剂的前药。任何化合物的前药可以采用公知的药学技术制备。
除上面列出的化合物外,本发明包括这样的化合物的同系物和类似物。在本文中,同系物是基本结构与上述化合物相似的分子,类似物是基本生物学作用类似的分子,而不论其结构是否相似。
烷化剂
烷化剂的实例包括但不限于双氯乙胺类(氮芥例如苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、氮芥、美法仑、乌拉莫司汀)、吖丙啶类(例如塞替派)、烷基酮磺酸酯类(例如白消安)、亚硝基脲类(例如卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星)、非典型烷化剂(六甲蜜胺、达卡巴嗪和丙卡巴肼)、铂化合物(卡铂和顺铂)。这些化合物与磷酸酯、氨基、羟基、巯基(sulfihydryl)、羧基和咪唑基反应。其他铂化合物包括在U.S.6,894,049、U.S.5,244,919和U.S.5,072,011中公开的那些,所述专利引入本文以供参考。
顺铂(例如Bristol-Myers Squibb Co.,Princeton,NJ)是一种重金属络合物,其中含有铂中心原子,该铂中心原子被两个氯原子和两个氨分子以顺式位置环绕。顺铂的化学名称是顺式-二氨合二氯化铂(例如顺式-二氨合二氯化铂(II))。
环磷酰胺(例如
Baxter Healthcare Corp.,Deerfield,IL)与氮芥化学相关。作为
获得的环磷酰胺一水合物是2-[二(2-氯乙基)氨基]四氢-2H-1,3,2-氧氮磷杂环己二烯(oxazaphosphorine)2-氧化物一水合物。
奥沙利铂(例如EloxatinTM,Sanofi-Synthelabo,Inc.,New York,NY)是一种有机铂络合物。奥沙利铂的化学名称是顺式-[(1R,2R)-1,2-环己烷二胺-N,N′][草酸根合(oxalate)(2-)-O,O′]铂。
卡铂(例如
Bristol-Myers Squibb Co.,Princeton,NJ)是一种铂配位化合物,描述在例如U.S.专利4,657,927中,该专利引入本文以供参考。卡铂的化学名称是铂,二胺[1,1-环丁烷-二甲酸根合(2-)-0,0′]-,(SP-4-2),由以下结构代表:
沙铂(JM-216;Spectrum Pharmaceuticals,Inc.,Irvine,CA)是一种口服有效的铂类似物。沙铂的化学名称是二-(乙酸根合(acetate))-胺二氯-(环己基胺)铂IV,由以下结构代表:
在生理条件下,这些药物离子化,产生与敏感核酸和蛋白质连接的带正电荷的离子,导致细胞周期抑止和/或细胞死亡。烷化剂是细胞周期阶段非特异性药物,因为他们独立于细胞周期的具体期而发挥它们的活性。氮芥类和烷基酮磺酸酯类对G1或M期细胞最有效。亚硝基脲类、氮芥类和吖丙啶类影响由G1和S期到M期的发展。Chabner和Collins编辑(1990)“Cancer Chemotherapy:Principles and Practice”,Philadelphia:JB Lippincott。
烷化剂对多种瘤性疾病有活性,治疗白血病和淋巴瘤以及实体瘤具有显著的活性。在临床上,此类药物通常用于治疗急性和慢性白血病;霍奇金病;非霍奇金淋巴瘤;多发性骨髓瘤;原发性脑瘤;乳腺、卵巢、睾丸、肺、膀胱、子宫颈、头颈的癌和恶性黑素瘤。
抗生素
抗生素(例如细胞毒性抗生素)通过直接抑制DNA或RNA合成起作用,因而在整个细胞周期中有效。抗生素药物的实例包括蒽环霉素类(例如多柔比星、柔红霉素、表柔比星、伊达比星和蒽二酮)、丝裂霉素C、博来霉素、放线菌素D和普卡霉素(plicatomycin)。这些抗生素通过靶向不同的细胞成分而干扰细胞生长。例如,通常认为蒽环类霉素在转录活性DNA的区域中干扰DNA拓扑异构酶II的作用,导致DNA解链。
伊达比星(例如Idamycin Pharmacia & Upjohn Co.,Kalamazoo,MI)是一种DNA插入性类似物,5,12-并四苯二酮,9-乙酰基-7-[(3-氨基-2,3,6-三去氧-α-L-来苏-吡喃己糖基)氧基]-7,8,9,10-四氢-6,9,11-三羟基盐酸盐,(7S-顺式)。
多柔比星(例如
Ben Venue Laboratories,Inc.,Bedford,OH)是一种细胞毒性蒽环类抗生素。多柔比星盐酸盐是(8S,10S)-10-[(3-氨基-2,3,6-三去氧-α-L-来苏-吡喃己糖基)-氧基]-8-羟乙酰基-7,8,9,10-四氢-6,8,11-三羟基-1-甲氧基-5,12-并四苯二酮盐酸盐。
通常认为博来霉素螯合铁,且形成活化络合物,然后它与DNA的碱基结合,导致解链和细胞死亡。
抗生素药物已用作多种瘤性疾病的治疗药物,包括乳腺、肺、胃和甲状腺的癌、淋巴瘤、骨髓性白血病、骨髓瘤和肉瘤。
抗代谢药
抗代谢药(即抗代谢物)是一类干扰对癌细胞的生理机能和增殖至关重要的代谢过程的药物。增殖活跃的癌细胞需要不断合成大量核酸、蛋白质、脂质和其他重要的细胞成分。
许多抗代谢物抑制嘌呤或嘧啶核苷合成或抑制DNA复制的酶。某些抗代谢物还干扰核糖核苷和RNA合成和/或氨基酸代谢和蛋白质合成。通过干扰重要的细胞成分合成,抗代谢物可延迟或抑制癌细胞生长。抗有丝分裂剂包括在这类中。抗代谢药物的实例包括但不限于氟尿嘧啶(5-FU)、氟尿苷(5-FUdR)、甲氨蝶呤、亚叶酸、羟基脲、硫鸟嘌呤(6-TG)、巯嘌呤(6-MP)、阿糖胞苷、喷司他丁、磷酸氟达拉滨、克拉曲滨(2-CDA)、天冬酰胺酶、吉西他滨和培美曲塞。
吉西他滨(例如
HCl,Eli Lilly and Co.,Indianapolis,IN)是一种核苷类似物。盐酸吉西他滨是2′-去氧-2′,2′-二氟胞苷一盐酸盐(β-异构体)。
Bortezomib(例如
Millennium Pharmaceuticals,Inc.,Cambridge,MA)是修饰的二肽基硼酸。Bortezomib,单体硼酸,是[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]propyl]氨基]丁基]硼酸。
培美曲塞(例如Eli Lilly and Co.,Indianapolis,IN)是一种抗叶酸剂。培美曲塞二钠七水合物具有化学名称L-谷氨酸,N-[4-[2-(2-氨基-4,7-二氢-4-氧代-1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基]-,二钠盐,七水合物。
阿扎胞苷(例如VidazaTM,Pharmion Corp.,Boulder,CO)是一种胞苷的嘧啶核苷类似物。阿扎胞苷的化学名称是4-氨基-1β-D-呋喃核糖基-s-trianzin-2(1H)-酮。
Flavopiridol(例如L86-8275;Alvocidib;Aventis Pharmaceuticals,Inc.,Bridgewater,NJ)是一种合成黄酮。在Alvocidib中发现的Flavopiridol的化学名称是(-)-2-(2-氯苯基)-5,7-二羟基-8-[(3R,4S)-3-羟基-1-甲基-4-哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮盐酸盐。
氟尿嘧啶(例如Fluorouracil Injection,Gensia Sicor Pharmaceuticals,Inc.,Irvine,CA;
SP Pharmaceuticals Albuquerque,NM;5FU)是一种氟代嘧啶。氟尿嘧啶的化学名称是5-氟-2,4(1H,3H)-嘧啶二酮。
抗代谢药物已广泛用于治疗若干常见种类的癌症,包括结肠、直肠、乳腺、肝、胃和胰腺的癌、恶性黑素瘤、急性和慢性白血病、毛细胞性白血病。
激素药物
激素药物是调节其靶器官生长和发育的一类药物。大多数激素药物是性类固醇及其前药和类似物,例如雌激素、孕激素、抗雌激素药、雄激素、抗雄激素药和孕酮。这些激素药物可作为性类固醇受体的拮抗剂,下调受体表达和重要基因转录。此类激素药物的实例有合成雌激素(例如己烯雌酚)、抗雌激素药(例如他莫昔芬、托瑞米芬、fluoxymesterol和雷洛昔芬)、抗雄激素药(比卡鲁胺、尼鲁米特和氟他胺)、芳化酶抑制剂(例如氨鲁米特、阿那曲唑和四唑)、促黄体激素释放激素(LHRH)类似物(例如酮康唑、醋酸戈舍瑞林、亮丙立德、醋酸甲地孕酮和米非司酮)。
强的松(例如
,Pharmacia & Upjohn Co.,Kalamazoo,MI)是一种肾上腺皮质甾族药物,并且也是一种合成糖皮质激素。强的松的化学名称是孕-1,4-二烯-3,11,20-三酮,17,21-二羟基-(以及1,4-孕二烯-17α,21-二醇-3,11,20-三酮;1-皮质酮;17α,21-二羟基-1,4-孕二烯-3,11,20-三酮;和脱氢可的松)。
激素药物用于治疗乳腺癌、前列腺癌、黑素瘤和脑膜瘤。因为激素的主要作用通过类固醇受体介导,所以60%受体-阳性乳腺癌对一线激素治疗产生反应;且小于10%受体-阴性肿瘤产生反应。激素药物所带来的主要副作用是潮红。频繁的表现是骨疼痛突然增加、皮肤损伤周围的红斑以及引起高钙血。
孕激素尤其用于治疗子宫内膜癌,因为这些癌症发生在暴露于孕激素不能拮抗的高水平雌激素的妇女中。
抗雄激素药主要用于治疗前列腺癌,它是激素依赖性的。他们用于降低睾酮水平,因而抑制肿瘤生长。
激素治疗乳腺癌涉及在乳腺瘤性细胞中降低依赖激活雌激素受体的雌激素水平。抗雌激素药通过与雌激素受体结合并防止募集辅激活物因而抑制雌激素信号起作用。
LHRH类似物用于治疗前列腺癌,降低睾酮水平从而使肿瘤生长减少。
芳化酶抑制剂通过抑制合成激素所需的酶起作用。在绝经后的妇女中,雌激素的主要来源是通过芳化酶转化雄烯二酮。
植物来源药物
植物来源药物是来源于植物的药物或在这些药物的分子结构基础上修饰的一类药物。他们通过阻止对细胞分裂至关重要的细胞成分装配来抑制细胞复制。
植物来源药物的实例包括长春花生物碱(例如长春新碱、长春碱、长春酰胺、长春利定和长春瑞滨)、鬼臼毒素(例如依托泊苷(VP-16)和替尼泊苷(VM-26))和紫杉烷类(例如紫杉醇和多西他赛)。这些植物来源药物通常与抗有丝分裂药物的作用相同,他们与微管蛋白结合而抑制有丝分裂。认为鬼臼毒素例如依托泊苷通过与拓扑异构酶II相互作用,导致DNA解链而干扰DNA合成。
长春新碱(例如长春新碱sulfate,Gensia Sicor Pharmaceuticals,Irvine,CA)是一种从常见花类中药,长春花植物(Vinca rosea Linn)中获得的生物碱。硫酸长春新碱是长春花碱,22-氧代-,硫酸盐(1:1)(盐)。依托泊苷(例如
Bristol-Myers Squibb Co.,Princeton,NJ,还常称为VP-16)是一种鬼臼毒素的半合成衍生物。磷酸依托泊苷的化学名称是4’-去甲基表鬼臼毒素9-[4,6-O-(R)-亚乙基-b-D-吡喃葡萄糖苷],4’-(磷酸二氢盐)。依托泊苷的化学名称是4’-去甲基表鬼臼毒素9-[4,6-0-(R)-亚乙基-b-D-吡喃葡萄糖苷]。
紫杉醇(例如
Bristol-Myers Squibb Company,Princeton,NJ)是从Taxus baccata获得的半合成产物。紫杉醇的化学名称是具有(2R,3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸的 5-β,20-环氧-1,2-α,4,7-β,10-β,13-α-六羟基紫杉-11-烯-9-酮4,10-二乙酸酯2-苯甲酸酯13-酯,由以下结构式代表:
紫杉醇颗粒(例如
ABRAXIS Oncology,Schaumburg,IL)包括白蛋白结合的紫杉醇形式。化学名称是具有(2R,3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸的5-β,20-环氧-1,2-α,4,7-β,10-β,13-α-六羟基紫杉-11-烯-9-酮4,10-二乙酸酯2-苯甲酸酯13-酯,由以下结构式代表:
植物来源药可用于治疗多种癌症。例如,长春新碱用于治疗白血病、霍奇金和非霍奇金淋巴瘤和儿童肿瘤成神经细胞瘤、横纹肌肉瘤和维尔姆斯瘤。长春碱用于抗淋巴瘤、睾丸癌、肾细胞癌、蕈样真菌病和卡波西肉瘤。已证实多西他赛有望具有抗晚期乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和卵巢癌的活性。
依托泊苷具有抗多种瘤的活性,其中小细胞肺癌、睾丸癌和NSCLC最敏感。
生物药
生物药是单独使用或与化疗和/或放疗联合使用时引起癌症/肿瘤消退的一类生物分子。生物药的实例包括免疫调节蛋白,例如细胞因子、抗肿瘤抗原的单克隆抗体、肿瘤抑制基因和癌疫苗。
细胞因子具有极强的免疫调节活性。某些细胞因子例如白介素-2(IL-2,阿地白介素)和α-干扰素(IFN-α)证实抗肿瘤活性,已批准用于治疗患有转移性肾细胞癌和转移性恶性黑素瘤的患者。IL-2是对T细胞介导的免疫反应很重要的T细胞生长因子。认为IL-2对某些患者的选择性抗肿瘤作用是细胞介导的自我和非自我之间有区别免疫反应的结果。
α-干扰素包括具有叠加活性的大于23个的有关亚型。IFN-α证实具有抗多种实体瘤和血液恶性肿瘤的活性,后者似乎尤其敏感。
干扰素的实例包括α-干扰素、β-干扰素(成纤维细胞干扰素)和γ-干扰素(成纤维细胞干扰素)。其他细胞因子的实例包括红细胞生成素(Epoietin-α,EPO)、粒细胞-CSF(非格司亭)和粒细胞、巨噬细胞-CSF(沙格司亭)。其他非细胞因子免疫调节剂包括卡介苗、左旋咪唑和奥曲肽,作用类似天然产生的激素生长抑素的长效八肽。
此外,抗癌治疗可包括使用抗体和肿瘤接种疫苗方法使用的试剂的免疫疗法的治疗。此类疗法中的主要药物是单独或携带例如毒素或化疗药物/对癌细胞产生细胞毒的化合物的抗体。抗肿瘤抗原的单克隆抗体是引起抗肿瘤表达抗原,特别是肿瘤特异性抗原的抗体。例如,提出用单克隆抗体(曲妥单抗)抗在某些乳腺肿瘤中过度表达的人表皮生长因子受体2(HER2),包括转移性乳腺癌。HER2蛋白过度表达与更具攻击性疾病和临床预后较差有关。单独用于治疗患有肿瘤过度表达HER2蛋白的转移性乳腺癌患者。
抗肿瘤抗原的单克隆抗体的另一个实例为(利妥昔单抗),提出其抗淋巴瘤性细胞上的CD20和选择性减少正常和恶性CD20+前B细胞和成熟B细胞。
RITUXAN单独用于治疗患有复发或顽固性低级别或滤泡性、CD20+B细胞非霍奇金淋巴瘤的患者。
(吉姆单抗奥佐米星)和
(阿仑单抗)是可使用的抗肿瘤抗原的单克隆抗体的又一个实例。
内皮生长抑素是用于目标血管生成的纤维溶酶原的裂解产物。
肿瘤抑制基因是作用为抑制细胞生长和分裂周期的基因,因而阻止瘤发展。肿瘤抑制基因突变导致细胞忽略一种或多种抑制信号网络成分,克服细胞周期关卡,且导致控制细胞更高速度的生长-癌。肿瘤抑制基因的实例包括DPC4、NF-1、NF-2、RB、p53、WT1、BRCA1和BRCA2。
DPC4涉及胰腺癌,并参与抑制细胞分裂的胞质途径。NF-1编码抑制Ras的蛋白,它是胞质抑制蛋白。NF-1涉及神经系统的神经纤维瘤和嗜铬细胞瘤和骨髓性白血病。NF-2编码涉及神经系统的脑膜瘤、神经鞘瘤和室管膜细胞瘤的核蛋白。RB编码pRB蛋白,它是细胞周期的主要抑制剂核蛋白。RB涉及成视网膜细胞瘤和骨、膀胱、小细胞肺和乳腺癌。P53编码调节细胞分裂的p53蛋白,并可诱导调亡。发现在多种癌中p53突变和/或失活。WTI涉及肾维尔姆斯瘤。BRCA1涉及乳腺和卵巢癌,BRCA2涉及乳腺癌。肿瘤抑制基因可转移到其中可发挥其肿瘤抑制功能的肿瘤细胞中。
癌疫苗是诱导身体对肿瘤产生特异性免疫反应的一类药物。处于研究、开发和临床试验中的大多数癌疫苗是肿瘤相关抗原(TAA)。TAA是存在于肿瘤细胞上,且在正常细胞上相对不存在或减少的结构(即蛋白、酶或碳水化合物)。由于对肿瘤细胞相当独特,TAA为免疫系统识别提供靶,并导致它们的破坏。TAA的实例包括神经节苷脂(GM2)、前列腺特异性抗原(PSA)、甲胎球蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)(由结肠癌和其他腺癌例如乳腺、肺、胃和胰腺癌产生)、黑素瘤有关的抗原(MART-1、gap100、MAGE 1,3酪氨酸酶)、乳头瘤病毒E6和E7片断、自体肿瘤细胞和异源肿瘤细胞的全细胞或部分/溶胞产物。
类视色素剂
用于本发明的类视色素或类视色素剂包括维生素A的所有天然、重组与合成衍生物或模拟物,例如棕榈酸视黄酯、视黄基(retinoyl)-β-葡糖苷酸(维生素A1 β-葡糖苷酸)、磷酸视黄酯(维生素A1磷酸酯)、视黄基酯、4-氧代视黄醇、4-氧代视黄醛、3-去氢视黄醇(维生素A2)、11-顺式-视黄醛(11-顺式-视黄醛、11-顺式或新b维生素A1醛)、5,6-环氧视黄醇(5,6-环氧维生素A1醇)、脱水视黄醇(脱水维生素A1)和4-酮基视黄醇(4-酮基-维生素A1醇)、所有反式视黄酸(ATRA;Tretinoin;维生素A酸;3,7-二甲基-9-(2,6,6,-三甲基-1-cyclohenen-1-基)-2,4,6,8-壬四烯酸[CAS No.302-79-4])、全-反式视黄酸的脂质制剂(例如ATRA-IV),9-顺式视黄酸(9-顺式-RA;Alitretinoin;
LGD1057),(e)-4-[2-(5,6,7,8-四氢-2-萘基)-1-丙烯基]-苯甲酸、 3-甲基-(E)-4-[2-(5,6,7,8-四氢-2-萘基)-1-丙烯基]-苯甲酸、芬维A胺(N-(4-羟基苯基)视黄酰胺;4-HPR)、阿维A酯(2,4,6,8-壬四烯酸)、阿维A(Ro10-1670)、他扎罗汀(6-[2-(4,4-二甲基二氢苯并噻喃-6-基)-乙炔基]烟酸乙酯)、Tocoretinate(9-顺式-托可维A酸)、阿达帕林(6-[3-(1-金刚烷基)-4-甲氧基苯基]-2-萘甲酸)、莫维A胺(三甲基甲氧基苯基-N-乙基视黄酰胺)和视黄醛。
类视色素还包括类视色素相关分子例如CD437(还称为6-[3-(1-金刚烷基)-4-羟基苯基]-2-萘甲酸和AHPN)、CD2325、ST1926([E-3-(4′-羟基-3′-金刚烷基联苯-4-基)丙烯酸)、ST1878(2-[3-[2-[3-(2-甲氧基-1,1-二甲基-2-氧代乙氧基)苯氧基]乙氧基]苯氧基]异丁酸甲酯)、ST2307、ST1898、ST2306、ST2474、MM11453、MM002(3-C1-AHPC)、MX2870-1、MX3350-1、MX84和MX90-1(Garattini等人,2004,Curr.Pharmaceut.Design 10:433-448;Garattini和Terao,2004,J.Chemother.16:70-73)。对于用于本发明,还包括与一种或多种RXR结合的类视色素剂。还包括与一种或多种RXR结合,但是不与一种或多种RAR的类视色素剂(即选择性结合RXR;rexinoids),例如二十二碳六酸(DHA)、植烷酸、甲氧普烯酸(methoprene acid)、LG100268(LG268)、LG100324、LGD1057、SR11203、SR11217、SR11234、SR11236、SR11246、AGN194204(参见例如Simeone和Tari,2004,Cell Mol.Life Sci.61:1475-1484;Rigas和Dragnev,2005,The Oncologist 10:22-33;Ahuja等人,2001,Mol.Pharmacol.59:765-773;Gorgun and Foss,2002,Blood 100:1399-1403;Bischoff等人,1999,J.Natl.Cancer Inst.91:2118-2123;Sun等人,1999,Clin.Cancer Res. 5:431-437;Crow和Chandraratna,2004,Breast Cancer Res.6:R546-R555)。还包括9-顺式-RA的衍生物。特别包括3-甲基TTNEB和相关物质,例如
Bexarotene;LGD1069;4-[1-(5,6,7,8-四氢-3,5,5,8,8-五甲基-2-萘基)乙炔基]苯甲酸或其可药用盐或水合物。
酪氨酸激酶抑制剂
用于本发明的酪氨酸激酶抑制剂包括能够降低一种或多种酪氨酸激酶(例如受体酪氨酸激酶)的活性或水平的所有天然、重组和合成物质,所述酪氨酸激酶是例如EGFR(ErbB-1;HER-1)、HER-2/neu(ErbB-2)、HER-3(ErbB-3)、HER-4(ErbB-4)、discoidin域受体(DDR)、ephrin受体(EPHR)、成纤维细胞生长因子受体(FGFR)、肝细胞生长因子受体(HGFR)、胰岛素受体(INSR)、白细胞酪氨酸激酶(Ltk/Alk)、肌肉特异性激酶(Musk)、转化生长因子受体(例如TGF-β-RI和TGF-β-RII)、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)和血管内皮生长因子受体(VEGFR)。对于受体酪氨酸激酶,抑制剂包括内源性或修饰配体,例如表皮生长因子(例如EGF)、神经生长因子(例如NGF-α、NGF-β、NGF-γ)、heregulins(例如HRG-α、HRG-β)、转化生长因子(例如TGF-α、TGF-β)、epiregulins(例如EP)、amphiregulins(例如AR)、betacellulins(例如BTC)、肝素结合EGF-样生长因子(例如HB-EGF)、neuregulins(例如NRG-1、NRG-2、NRG-4、NRG-4,还称为神经胶质生长因子)、乙酰胆碱受体诱导活性(ARIA)和感觉运动神经元衍生的生长因子(SMDGF)。
EGFR的抑制剂的实例有例如西妥昔单抗(Erbitux;IMC-C225;MoAb C225)和Gefitinib(IRESSA
TM;ZD1839;ZD1839;4-(3-氯-4-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉)、ZD6474(AZD6474)和EMD-72000(Matuzumab)、Panitumab(ABX-EGF;MoAb ABX-EGF),ICR-62(MoAb ICR-62),CI-1033(PD183805;N-[-4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-6-喹唑啉基]-2-丙烯酰胺)、Lapatinib(GW572016),AEE788(吡咯并嘧啶;Novartis)、EKB-569(Wyeth-Ayerst)和EXEL 7647/EXEL 09999(EXELIS)。还包括Erlotinib和衍生物,例如
NSC 718781,CP-358774,OSI-774,R1415;N-(3-乙炔基苯基)-6,7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺或其可药用盐或水合物(例如甲磺酸盐、一盐酸盐)。
另外的抗癌药
除用传统的细胞毒性和激素疗法治疗癌症外,还引入新近发展的治疗癌症的其他疗法。例如,多种形式的基因疗法正在进行临床前或临床试验。此外,目前在开发基于肿瘤血管形成(血管生成)抑制的方法。这些方法的目的是切断由新形成的肿瘤血管系统提供的肿瘤营养和氧供给。此外,还尝试通过诱导瘤性细胞终末分化的癌疗法。合适的分化剂包括在以下任何一篇或多篇参考文献中公开的化合物,这些文献的内容通过引用结合到本文中。
A)极性化合物(Marks等人(1987);,Friend,C.,Scher,W.,Holland,J.W.,和Sato,T.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)68:378-382;Tanaka,M.,Levy,J.,Terada,M.,Breslow,R.,Rifkind,R.A.,和Marks,P.A.(1975)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)72:1003-1006;Reuben,R.C.,Wife,R.L.,Breslow,R.,Rifkind,R.A.,和Marks,P.A.(1976)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)73:862-866);
B)维生素D和视黄酸的衍生物(Abe,E.,Miyaura,C.,Sakagami,H.,Takeda,M.,Konno,K.,Yamazaki,T.,Yoshika,S.,和Suda,T.(1981)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)78:4990-4994;Schwartz,E.L.,Snoddy,J.R.,Kreutter,D.,Rasmussen,H.,和Sartorelli,A.C.(1983)Proc.Am.Assoc.Cancer Res.24: 18;Tanenaga,K.,Hozumi,M.,和Sakagami,Y.(1980)Cancer Res.40:914-919);
C)甾族激素(Lotem,J.and Sachs,L.(1975)Int.J.Cancer 15:731-740);
D)生长因子(Sachs,L.(1978)Nature(Lond.)274:535,Metcalf,D.(1985)Science,229:16-22);
E)蛋白酶(Scher,W.,Scher,B.M.,and Waxman,S.(1983)Exp.Hematol.11:490-498;Scher,W.,Scher,B.M.,和Waxman,S.(1982)Biochem.& Biophys.Res.Comm.109: 348-354);
F)肿瘤启动子(Huberman,E.and Callaham,M.F.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)76:1293-1297;Lottem,J.和Sachs,L.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)76:5158-5162);和
G)DNA和RNA合成的抑制剂(Schwartz,E.L.和Sartorelli,A.C.(1982)Cancer Res.42:2651-2655,Terada,M.,Epner,E.,Nudel,U.,Salmon,J.,Fibach,E.,Rifkind,R.A.,和Marks,P.A.(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)75:2795-2799;Morin,M.J.和Sartorelli,A.C.(1984)CancerRes.44:2807-2812;Schwartz,E.L.,Brown,B.J.,Nierenberg,M.,Marsh,J.C.,和Sartorelli,A.C.(1983)Cancer Res.43:2725-2730;Sugano,H.,Furusawa,M.,Kawaguchi,T.,和Ikawa,Y.(1973)Bibl.Hematol.39:943-954;Ebert,P.S.,Wars,I.,和Buell,D.N.(1976)Cancer Res.36:1809-1813;Hayashi,M.,Okabe,J.,和Hozumi,M.(1979)Gann 70:235-238)。
其他抑制剂包括DMPQ(5,7-二甲氧基-3-(4-吡啶基)喹啉二盐酸盐)、氨基金雀异黄素(4′-氨基-6-羟基黄酮)、Erbstatin类似物(2,5-二羟基甲基肉桂酸酯,2,5-二羟基肉桂酸甲酯)、伊马替尼(GleevecTM GlivecTM;STI-571;4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-N-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]-苯基]苯甲酰胺甲磺酸盐)、LFM-A13(2-氰基-N-(2,5-二溴苯基)-3-羟基-2-丁烯酰胺)、PD153035(ZM 252868;4-[(3-溴苯基)氨基]-6,7-二甲氧基喹唑啉盐酸盐)、Piceatannol(反式-3,3′,4,5′-四羟基均二苯代乙烯、4-[(1E)-2-(3,5-二羟基苯基)乙烯基]-1,2-苯二酚)、PP1(4-氨基-5-(4-甲基苯基)-7-(叔丁基)吡唑并[3,4-d]嘧啶)、PP2(4-氨基-5-(4-氯苯基)-7-(叔丁基)吡唑并[3,4,d]嘧啶)、Pertuzumab(OmnitargTM;rhuMAb2C4),SU4312(3-[[4-(二甲基氨基)苯基]亚甲基]-1,3-二氢-2H-吲哚-2-酮)、SU6656(2,3-二氢-N,N-二甲基-2-氧代-3-[(4,5,6,7-四氢-1H-吲哚-2-基)亚甲基]-1H-吲哚-5-磺酰胺)、贝伐单抗(rhuMAbVEGF)、Semaxanib(SU5416),SU6668(Sugen,Inc.)和ZD6126(Angiogene Pharmaceuticals)。
用于治疗肺癌(例如NSCLC)药物包括上述抑制剂,以及培美曲塞
Bortezomib
Tipifarnib、Lonafarnib、BMS214662、Prinomastat、BMS275291、Neovasta、ISIS3521(Affinitak
TM;LY900003)、ISIS 5132、Oblimersen(
G3139)和Carboxyamidotriazole(CAI)(参见例如Isobe T,等人,Semin.Oncol.32:315-328,2005)。
所有这些方法与HDAC抑制剂例如SAHA联合的应用都在本发明范围内。
其他药物
其他药物也可用于本发明,例如用于辅助治疗。合适的辅助药物可用于提高抗癌药有效性或者用于预防或治疗与抗癌药有关的病症,例如低血细胞计数、中性白细胞减少、贫血、过敏反应、血小板减少、高钙血、粘膜炎、硬伤、出血、中毒(例如亚叶酸)、疲劳、疼痛、恶心和呕吐。止吐剂(例如5-HT受体阻断剂或苯并二氮杂
类)、抗炎剂(例如肾上腺皮质甾族药物或抗组胺药物)以及降酸剂(例如H
2受体阻断剂)可用于提高患者对于癌症治疗的耐受性。H
2受体阻断剂的实例包括雷尼替丁、法莫替丁和西咪替丁。抗组胺药物的实例包括苯海拉明、氯马斯汀、氯苯那敏、马来酸二甲茚和异丙嗪。甾族药物的实例包括地塞米松、氢化可的松和泼尼松。其他药物包括生长因子例如用于刺激血红细胞生成的依泊汀α(例如
),用于刺激嗜中性白细胞生成的G-CSF(粒细胞集落刺激因子;filgrastim,例如
),用于刺激几种白细胞,包括巨噬细胞生成的GM-CSF(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子),以及用于刺激血小板生成的IL-11(白介素-11例如
)。
亚叶酸(例如亚叶酸钙,Roxane Laboratories,Inc.,Columbus,OH;也称为甲酰四氢叶酸,甲酰四氢叶酸钙,柠胶因子)可以用作叶酸拮抗剂的解毒药,并且还可以增强一些药物例如氟尿嘧啶的活性。亚叶酸钙是N-[4-[[(2-氨基-5-甲酰基-1,4,5,6,7,8-六氢-4-氧代-6-蝶啶基)甲基]氨基]苯甲酰基]-L-谷氨酸的钙盐。
地塞米松(例如
Merck & Co.,Inc.,Whitehouse Station,NJ)是一种合成的肾上腺皮质甾族药物,其可用作抗炎药物来控制过敏反应,例如药物过敏。用于口服给药的地塞米松片剂包含9-氟-11-β,17,21-三羟基-16-α-甲基孕-1,4-二烯-3,20-二酮,其由以下结构式代表:
用于静脉内给药的磷酸地塞米松包含9-氟-11β,17-二羟基-16α-甲基-21-(膦酰基氧基)孕-1,4-二烯-3,20-二酮二钠盐,其由以下结构式代表:
苯海拉明(例如
Parkedale Pharmaceuticals,Inc.,Rochester,MI)是一种用于减轻过敏反应的抗组胺药物。盐酸苯海拉明(例如注射用苯海拉明HCl)是2-(二苯基甲氧基)-N,N-二甲基乙胺盐酸盐,其由以下结构式代表:
雷尼替丁(例如GlaxoSmithKline,Research Triangle Park,NC)是一种在组胺H2-受体上的组胺的竞争性抑制剂,并且可用于减少胃酸。盐酸雷尼替丁(例如片剂或注射剂)是N[2-[[[5-[(二甲基氨基)甲基]-2-呋喃基]甲基]硫基]乙基]-N′-甲基-2-硝基-1,1-乙烯二胺,其由以下结构式代表:
西咪替丁(例如
GlaxoSmithKline,Research TrianglePark,NC)也是一种在组胺H
2-受体上的组胺的竞争性抑制剂,并且可用于减少胃酸。西咪替丁是N″-氰基-N-甲基-N′-[2-[[(5-甲基-1H-咪唑-4-基)甲基]硫基]-乙基]-胍,其由以下结构式代表:
Aprepitant(例如
Merck & Co.,Inc.)是P物质/神经激肽1(NK1)受体拮抗剂和止吐剂。Aprepitant是5-[[(2R,3S)-2-[(1R)-1-[3,5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)-4-吗啉基]甲基]-1,2-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮,其由以下结构式代表:
昂丹司琼(例如
GlaxoSmithKline,Research Triangle Park,NC)是一种5-HT3血清素受体的选择性阻断剂和止吐剂。盐酸昂丹司琼(例如用于注射)是(±)1,2,3,9-四氢-9-甲基-3-[(2-甲基-1H-咪唑-1-基)甲基]-4H-咔唑-4-酮,一盐酸盐,二水合物,其由以下结构式代表:
劳拉西泮(例如劳拉西泮Injection;Baxter Healthcare Corp.,Deerfield,IL)是具有抗惊厥作用的苯并二氮杂
化合物。劳拉西泮是7-氯-5(2-氯苯基)-1,3-二氢-3-羟基-2H-1,4-苯并二氮杂
-2-酮,其由以下结构式代表:
HDAC抑制剂的给药
给药途径
可通过任何本领域技术人员已知的给药方法给予HDAC抑制剂(例如SAHA)。给药途径的实例包括但不限于口服、肠胃外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、局部、舌下、肌内、直肠、经颊、鼻内、脂质体;通过吸入、阴道、眼内;通过导管或支架(stent)局部释放、皮下、脂肪内、关节腔内、鞘内或缓释(例如持续释放)剂型。SAHA或任一种HDAC抑制剂可以依据任何剂量和能够与抗癌药的作用一起实现有效治疗疾病的剂量的给药方案给药。
当然,SAHA或其他HDAC抑制剂中任何一种的给药途径可以独立于一种或多种抗癌药的给药途径。特别优选的SAHA的给药途径为口服给药。因此,按照该实施方案,经口给予SAHA,并且可经口、胃肠外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、舌下、肌内、直肠、经颊、鼻内、脂质体;通过吸入、阴道、眼内;通过导管或支架局部释放、皮下、脂肪内、关节腔内、鞘内或以缓释剂型(例如持续释放)给予一种或多种抗癌药。
作为实例,本发明HDAC抑制剂可以在口服剂型中给药,所述口服剂型是例如片剂、胶囊(每粒胶囊包含持续释放或按时释放制剂)、丸剂、粉剂、粒剂、酏剂、酊剂、悬浮液、糖浆剂和乳剂。同样,HDAC抑制剂可以静脉内给药(例如快速浓注或输注)、腹膜内给药、皮下给药、肌内给药或使用药物领域技术人员众所周知的剂型经由其他途径给药。HDAC抑制剂的一个具体给药途径是口服给药。
HDAC抑制剂还可以以贮库注射剂或植入制剂的形式给药,所述制剂可以配制成容许持续释放活性组分的形式。可以将活性组分压制成小丸或小圆柱体,并且作为贮库注射剂或植入物皮下或肌内植入。植入物可以采用惰性材料例如生物可降解或合成硅酮,例如Silastic,硅酮橡胶或由Dow-Corning Corporation生产的其他聚合物。
HDAC抑制剂还可以以脂质体递送系统,例如小单层囊、大的单层囊和多层囊的形式给药。可用各种磷脂例如胆固醇、硬脂胺或卵磷脂形成脂质体。一种或多种抗癌药物的脂质体制剂还可以在本发明方法中使用。可以使用一种或多种抗癌药物的脂质体来提高对药物的耐受性。
也可用与化合物分子偶联的单克隆抗体作独立载体来递送HDAC抑制剂。
HDAC抑制剂也可用可溶性聚合物作为靶向药物载体制备。此类聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基-丙基-甲基丙烯酰胺-酚、聚羟乙基-天冬酰胺-酚或被棕榈酰残基取代的聚环氧乙烷-多熔素。此外,可用可生物降解的聚合物制备HDAC抑制剂,用于实现控制释放药物,例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚ε-己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。
在一个具体实施方案中,用明胶胶囊经口给予HDAC抑制剂例如SAHA,该明胶胶囊可含有赋形剂例如微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁。另一个优选的实施方案是含有200mg固体SAHA和89.5mg微晶纤维素、9mg交联羧甲基纤维素钠和1.5mg硬脂酸镁的明胶胶囊。
剂量和剂量方案
使用HDAC抑制剂的剂量方案可根据多种因素选择,包括种类、物种、年龄、体重、性别和所治疗疾病类型;所治疗疾病的严重程度(即期);给药途径;患者的肾和肝功能;和使用的具体化合物或其盐。可以使用剂量方案来例如预防、抑制(完全或部分)或使该疾病发展停止。
根据本发明,HDAC抑制剂(例如SAHA或其可药用盐或水合物)可以通过连续或间断剂量来给药。例如,HDAC抑制剂的间断给药可以每周给药1-6天,或者其可以指在周期中给药(例如在2-8周连续期间内,每天给药,然后是不给药的停药期,最长达1周),或者其可以是指在交替的天给药。组合物可以在周期中给药,给药周期之间是停药期(例如治疗2-8周,治疗之间是最长达1周的停药期)。在本发明的某些实施方案中,HDAC抑制剂可以根据本文中描述的剂量和给药方案,作为药物组合物,与一种或多种抗癌药物(任选与另一种抗癌药物)一起或单独给药。
例如,SAHA或任一种HDAC抑制剂可以以最高达800mg的总日剂量给药。作为其他实例,SAHA可以在至少一个21天周期当中的7-14天给药期,以最高达600mg(例如200-400mg或约200-400mg、200-600mg或约200-600mg或者400-600mg或约400-600mg)的总日剂量给药。HDAC抑制剂可以每天给药一次(QD),或者分成多个日剂量例如每日给药两次(BID)和每次给药三次(TID)。HDAC抑制剂可以以最高达800mg,例如最高达200mg、300mg、400mg、500mg、600mg或800mg的总日剂量给药,其可以以一个日剂量给药,或者可以如上所述分成多个日剂量给药。在具体方面,给药是口服给药。
HDAC抑制剂以200-600mg或约200-600mg的剂量每日给药一次。HDAC抑制剂还可以以200-400mg或约200-400mg的剂量每日给药两次。HDAC抑制剂可以以200-400mg或约200-400mg的剂量每日给药两次,其是间断地给药,例如每周给药3、4或5天。在本发明的某些方面,日剂量是200mg、300mg或400mg,其可以每日给药一次、每日给药两次或每日给药三次。
SAHA或任一种HDAC抑制剂可以依据任何剂量和能够与抗癌药的作用一起实现有效治疗癌症的剂量的给药方案给药。HDAC抑制剂可以以总日剂量给药,所述总日剂量在患者与患者之间可以改变,并且可以以不同剂量方案给药。例如,SAHA或任一种HDAC抑制剂可以以25-4000mg/m2的总日剂量对患者给药。特别是,SAHA或任一种HDAC抑制剂可以以最高达800mg的总日剂量给药,尤其是口服给药,每日给药一次、两次或三次,连续(每天)或间断地(例如每周3-5天)给药。此外,给药可以是连续的,即每天给药,或者间断地给药。
一个治疗方案可以包括以200mg或约200mg-600mg或约600mg的总日剂量连续给药(即每天给药),其中每天给药一次、两次或三次。另一个治疗方案包括以200mg或约200mg-600mg或约600mg的总日剂量间断地给药,每周给药3-5天,其中每天给药一次、两次或三次。
HDAC抑制剂可以连续给药,以400mg的剂量每日给药一次,或者以200mg的剂量每日给药两次。或者,HDAC抑制剂可以间断地给药,每周给药3天,以400mg的剂量每日给药一次,或者以200mg的剂量每日给药两次。HDAC抑制剂还可以间断地给药,每周给药4天,以400mg的剂量每日给药一次,或者以200mg的剂量每日给药两次。HDAC抑制剂还可以间断地给药,每周给药5天,以400mg的剂量每日给药一次,或者以200mg的剂量每日给药两次。
例如,HDAC抑制剂可以连续给药,以600mg的剂量每日给药一次,以300mg的剂量每日给药两次,或者以200mg的剂量每日给药三次。在一个实施方案中,HDAC抑制剂可以间断地给药,每周给药3天,以600mg的剂量每日给药一次,以300mg的剂量每日给药两次,或者以200mg的剂量每日给药三次。或者,HDAC抑制剂可以间断地给药,每周给药4天,以600mg的剂量每日给药一次,以300mg的剂量每日给药两次,或者以200mg的剂量每日给药三次。HDAC抑制剂还可以间断地给药,每周给药5天,以600mg的剂量每日给药一次,以300mg的剂量每日给药两次,或者以200mg的剂量每日给药三次。
此外,HDAC抑制剂可以根据上述任何方案,连续给药几周,然后是停药期。例如,HDAC抑制剂可以根据上述任一任何方案给药2-8周,然后是1周的停药期,例如以300mg的剂量每日给药两次,每周给药3-5天。HDAC抑制剂还可以每日给药三次,连续给药两周,然后是1周的停药期。
HDAC抑制剂可以连续给药(即每日给药)或间断地给药(例如每周给药至少3天),其中以300mg或约300mg、400mg或约400mg、500mg或约500mg、600mg或约600mg、700mg或约700mg或者800mg或约800mg的剂量每日给药1次。
HDAC抑制剂在至少一个21天当中的7天给药期(例如21天周期当中的连续7天或者第1-7天),以300mg或约300mg、400mg或约400mg、500mg或约500mg、600mg或约600mg、700mg或约700mg或者800mg或约800mg的剂量每日给药1次。
HDAC抑制剂在至少一个21天当中的14天给药期(例如21天周期当中的连续14天或者第1-14天),以200mg或约200mg、300mg或约300mg、400mg或约400mg、500mg或约500mg、600mg或约600mg的剂量每日给药1次。优选地,HDAC抑制剂在至少一个21天当中的14天给药期(例如21天周期当中的连续14天或者第1-14天),以300mg或约300mg或者400mg或约400mg的剂量每日给药1次。
在其他实施方案中,HDAC抑制剂在至少一个28天当中的14天给药期(例如28天周期当中的连续14天或者第1-14天)或者在至少一个28天当中的21天给药期(例如28天周期当中的连续21天或者第1-21天),以300mg或约300mg或者400mg或约400mg的剂量每日给药1次。
在某些实施方案中,HDAC抑制剂可以连续给药(即每日给药)或间断地给药(例如每周给药至少3天),其中以200mg或约200mg、250mg或约250mg、300mg或约300mg或者400mg或约400mg的剂量(每次给药)每日给药两次。
例如,HDAC抑制剂可以在至少一个7天当中的3天给药期(例如连续给药3天,然后是连续4天的停药期),或者在至少一个7天当中的4天给药期(例如连续给药4天,然后是连续3天的停药期),或者在至少一个7天当中的5天给药期(例如连续给药5天,然后是连续2天的停药期),以200mg或约200mg、250mg或约250mg或者300mg或约300mg的剂量(每次给药)每日给药两次。
HDAC抑制剂还可以在至少一个21天周期中的7天当中的3天给药期(例如在21天周期中,连续3天或在第1-3天给药,给药最长达3周),或者在至少一个21天周期中的7天当中的4天给药期(例如在21天周期中,连续4天或在第1-4天给药,给药最长达3周),或者在至少一个21天周期中的7天当中的5天给药期(例如在21天周期中,连续5天或在第1-5天给药,给药最长达3周),以200mg或约200mg、250mg或约250mg或者300mg或约300mg的剂量(每次给药)每日给药两次。
或者,HDAC抑制剂还可以在至少一个28天周期中的7天当中的3天给药期(例如在28天周期中,连续3天或在第1-3天给药,给药最长达4周),以200mg或约200mg、250mg或约250mg或者300mg或约300mg的剂量(每次给药)每日给药两次。
在另一个实施方案中,HDAC抑制剂例如在至少一个21天周期中的7天当中的3天给药期(例如在21天周期中,连续3天或在第1-3天给药),或者在至少两个21天周期中的7天当中的3天给药期(例如在21天周期的第1周和第2周,连续3天或在第1-3天以及第8-10天给药),或者在至少三个21天周期中的7天当中的3天给药期(例如在21天周期的第1周、第2周和第3周,连续3天或在第1-3天、第8-10天以及第15-17天给药),以200mg或约200mg、250mg或约250mg或者300mg或约300mg的剂量(每次给药)每日给药两次。
HDAC抑制剂可以在至少四个28天周期中的7天当中的3天给药期(例如在28天周期的第1周、第2周、第3周和第4周,连续3天或在第1-3天、第8-10天、第15-17天和第22-24天给药),以200mg或约200mg、250mg或约250mg或者300mg或约300mg的剂量(每次给药)每日给药两次。
HDAC抑制剂可以例如在至少一个14天当中的7天给药期(例如在14天周期中,连续给药7天或者在第1-7天给药),以100mg或约100mg、200mg或约200mg、300mg或约300mg或者400mg或约400mg的剂量(每次给药)每日给药两次。
或者,HDAC抑制剂可以例如在至少一个21天当中的7天给药期(例如在21天周期中,连续给药7天或者在第1-7天给药),以100mg或约100mg、200mg或约200mg、300mg或约300mg或者400mg或约400mg的剂量(每次给药)每日给药两次。
在一个实施方案中,HDAC抑制剂可以例如在至少一个21天当中的11天给药期(例如在21天周期中,连续给药11天或者在第1-11天给药),以200mg或约200mg、300mg或约300mg或者400mg或约400mg的剂量(每次给药)每日给药两次。
在另一个实施方案中,HDAC抑制剂可以例如在至少一个21天当中的10天给药期(例如在21天周期中,连续给药10天或者在第1-10天给药),以200mg或约200mg、300mg或约300mg或者400mg或约400mg的剂量(每次给药)每日给药一次或两次。
在其他实施方案中,HDAC抑制剂可以例如在至少一个21天当中的14天给药期(例如在21天周期中,连续给药14天或者在第1-14天给药),以200mg或约200mg、300mg或约300mg或者400mg或约400mg的剂量(每次给药)每日给药两次。
患者可以以足以递送(约)3-1500mg/m2/天,例如(约)3、30、60、90、180、300、600、900、1200或1500mg/m2/天的量静脉内或皮下接受HDAC抑制剂。这样的量可以以多种合适的途径给药,例如将大体积的低浓度HDAC抑制剂在一个延长时间内给予,或者每天给药几次。该量可以每周(7天时间)一天或连续多天给药,在间断的天给药,或者其组合。或者,在短期内例如每周(7天时间)连续、间断或其组合的一天或多天,一日一次给予小体积高浓度的HDAC抑制剂。例如,对于每次治疗总共1500mg/m2的剂量,以每天300mg/m2的剂量连续给药5天。在另一个给药方案中,对于3000mg/m2和4500mg/m2的总治疗,连续天数也可以是5天,治疗持续连续2或3周。
典型地,可以制备静脉内给药制剂,使其含有浓度为(约)1.0mg/mL-(约)10mg/mL,例如2.0mg/mL、3.0mg/mL、4.0mg/mL、5.0mg/mL、6.0mg/mL、7.0mg/mL、8.0mg/mL、9.0mg/mL和10mg/mL的HDAC抑制剂,并且以达到上述剂量的量给药。在一个实例中,一天给予患者足量体积的静脉内给药制剂,使得该天的总剂量为(约)300-(约)1500mg/m2。
可按本领域中熟知的方法,在pH约5至约12制备皮下给药制剂,皮下给药制剂还包括合适的下述缓冲剂和等渗剂。可将它们配制成通过每日一次或多次例如每日一次、两次或三次皮下给药,递送日剂量的HDAC抑制剂。
也可通过局部使用合适的鼻内载体或通过透皮途径,用本领域普通技术人员熟知的透皮贴剂给予HDAC抑制剂。为按透皮释放系统的形式给药,在整个剂量方案中,给药剂量自然是连续的而非间断的。
对本领域技术人员而言是显而易见的是,HDAC抑制剂的一个或多个具体剂量和剂量方案也适用于联合治疗中使用的任何一种或多种抗癌药。此外,抗癌药的具体剂量和剂量方案可以进一步改变,并且最佳剂量、给药方案和给药途径可以基于所使用的具体抗癌药来确定。另外,本文中所述的各种给药模式、剂量和给药方案仅描述具体的实施方案,无意限定本发明的广义范围。剂量和给药方案的任何排列、变化和组合均包括在本发明的范围内。
抗癌药的给药
HDAC抑制剂的任一个或多个具体剂量和剂量方案也适用于联合治疗中使用的任何一种或多种抗癌药。
此外,抗癌药的具体剂量和剂量方案可以进一步改变,并且最佳剂量、给药方案和给药途径可以基于所使用的具体抗癌药来确定。
当然,SAHA或其他HDAC抑制剂中任何一种的给药途径可以独立于一种或多种抗癌药的给药途径。特别优选的SAHA的给药途径为口服给药。因此,按照该实施方案,经口给予SAHA,并且可经口、胃肠外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、舌下、肌内、直肠、经颊、鼻内、脂质体;通过吸入、阴道、眼内;通过导管或支架局部释放、皮下、脂肪内、关节腔内、鞘内或以缓释剂型(例如持续释放)给予其他抗癌药。
此外,可通过相同的给药模式给予HDAC抑制剂和一种或多种抗癌药,即例如口服、IV给予两种药物。但是,通过一种给药模式例如口服给予HDAC抑制剂,且通过另一种给药模式例如IV或上述任何一种或多种其他给药模式给予一种或多种抗癌药也在本发明范围内。
通常给予的常用抗癌药和日剂量包括但不限于:
抗代谢药: 甲氨蝶呤 20-40mg/m2i.v.
甲氨蝶呤 4-6mg/m2p.o.
甲氨蝶呤 12000mg/m2大剂量疗法
6-巯基嘌呤 100mg/m2
6-硫鸟嘌呤 1-2 x 80mg/m2p.o.
喷司他丁 4mg/m2i.v.
磷酸氟达拉滨 25mg/m2i.v.
克拉曲滨 0.14mg/kg BWi.v.
5-氟尿嘧啶 500-2600mg/m2i.v.
卡培他滨 1250mg/m2p.o.
阿糖胞苷 200mg/m2i.v.
阿糖胞苷 3000mg/m2i.v.大剂量疗法
吉西他滨 800-1250mg/m2i.v.
羟基脲 800-4000mg/m2p.o.
培美曲塞 250-500mg/m2i.v.
抗有丝分裂药 长春新碱 1.5-2mg/m2i.v.
和
植物来源药: 长春碱 4-8mg/m2i.v.
长春酰胺 2-3mg/m2i.v.
依托泊苷(VP16) 100-200mg/m2i.v.
依托泊苷(VP16) 100mg p.o.
替尼泊苷(VM26) 20-30mg/m2i.v.
紫杉醇(Taxol) 175-250mg/m2i.v.
多西他赛 100-150mg/m2i.v.
(Taxotere)
抗生素: 放线菌素D 0.6mg/m2i.v.
柔红霉素 45-6.0mg/m2i.v.
多柔比星 45-60mg/m2i.v.
表柔比星 60-80mg/m2i.v.
伊达比星 10-12mg/m2i.v.
伊达比星 35-50mg/m2p.o.
米托蒽醌 10-12mg/m2i.v.
博来霉素 10-15mg/m2i.v.,i.m.,s.c.
丝裂霉素C 10-20mg/2i.v.
伊 立 替 康 350mg/m2i.v.
(CPT-11)
托泊替康 1.5mg/m2i.v.
烷化剂: 氮芥 6mg/m2i.v.
磷酸雌莫司汀 150-200mg/m2i.v.
磷酸雌莫司汀 480-550mg/m2p.o.
美法仑 8-10mg/m2i.v.
美法仑 15mg/m2i.v.
苯丁酸氮芥 3-6mg/m2i.v.
泼尼莫司汀 40-100mg/m2p.o.
环磷酰胺 750-1200mg/m2i.v.
环磷酰胺 50-100mg/m2p.o.
异环磷酰胺 1500-2000mg/m2i.v.
曲磷胺 25-200mg/m2p.o.
白消安 2-6mg/m2p.o.
曲奥舒凡 5000-8000mg/m2i.v.
曲奥舒凡 750-1500mg/m2p.o.
塞替派 12-16mg/m2i.v.
卡莫司汀(BCNU) 100mg/m2i.v.
洛莫司汀(CCNU) 100-130mg/m2p.o.
尼莫司汀(ACNU) 90-100mg/m2i.v.
达卡巴嗪(OTIC) 100-375mg/m2i.v.
丙卡巴肼 100mg/m2p.o.
顺铂 20-120mg/m2i.v.
卡铂 300-400mg/m2i.v.
激素、细胞因子 干扰素-α 2-10 x 106IU/m2
和维生素 泼尼松 40-100mg/m2p.o.
地塞米松 8-24mg p.o.
G-CSF 5-20μg/kg BW s.c.
所有反式视黄酸 45mg/m2
白介素-2 18 x 106IU/m2
GM-CSF 250mg/m2
红细胞生成素 150IU/kg tiw
使用本文描述的抗癌药(或这样的抗癌药的任何可药用盐或水合物,或者任何游离酸、游离碱或其他游离形式的这样的抗癌药)的剂量方案可以按照本文的示例性剂量,包括对于HDAC抑制剂所提供的剂量。剂量可根据多种因素选择,包括种类、物种、年龄、体重、性别和所治疗疾病类型;所治疗疾病的严重程度(即期);给药途径;患者的肾和肝功能;和使用的具体化合物或其盐。可以使用剂量方案来例如预防、抑制(完全或部分)或使该疾病发展停止。
在一个具体实施方案中,将植物来源药(例如紫杉醇;
)与SAHA联合给药。例如,紫杉醇可以以最高达225或250mg/m
2(例如(约)150-225mg/m
2、(约)150-250mg/m
2、(约)175-200mg/m
2或者(约)175-250mg/m
2)的剂量给药。特别是,紫杉醇可以以(约)135mg/m
2、(约)150mg/m
2、(约)170mg/m
2、(约)175mg/m
2、(约)190mg/m
2、(约)200mg/m
2、(约)225mg/m
2或者(约)250mg/m
2的剂量给药,例如通过输注给药。输注可以进行例如至少3小时或至少24小时。紫杉醇可以在至少一个7天、14天、21天或28天周期当中的给药期给药(例如在21天周期中在第1天给药)。紫杉醇可以给药至少1、3、6、9或12个周期。作为实例,SAHA(例如Vorinostat)可以以最高达400mg或600mg的总日剂量给药,并且紫杉醇可以以最高达175mg/m
2或200mg/m
2的总日剂量给药。在一个具体组合中,SAHA在至少一个21天周期中的14天给药期(例如21天周期中的第1-14天)以400mg的剂量每天一次口服给药,并且紫杉醇在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以175-200mg/m
2的剂量通过输注3小时来给药。在另一个组合中,SAHA在至少一个21天周期中的7天给药期(例如21天周期中的第1-7天)以300mg的剂量每天两次口服给药,并且紫杉醇在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以175-200mg/m
2的剂量通过输注3小时来给药。在另一个组合中,SAHA在至少一个21天周期中的14天给药期(例如21天周期中的第1-14天)以300mg的剂量每天一次口服给药,并且紫杉醇在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以175mg/m
2的剂量通过输注3小时来给药。
在另一个具体实施方案中,将烷化剂(例如卡铂;
)与SAHA联合给药。例如,卡铂可以以最高达400mg/m
2(例如(约)250-400mg/m
2或(约)300-400mg/m
2)的剂量给药。特别是,卡铂可以以(约)250mg/m
2、(约)300mg/m
2、(约)360mg/m
2、(约)380mg/m
2、(约)400mg/m
2或(约)250-400mg/m
2的剂量给药。作为进一步的实例,卡铂可以以产生最高达6mg/min/ml的浓度/时间曲线下面积(AUC)的剂量给药(例如以(约)AUC 4-6或(约)AUC 5-6),所述浓度/时间曲线下面积(AUC)是用Calvert公式计算的。特别是,卡铂可以以足以产生(约)AUC 4、(约)AUC5、(约)AUC 6或(约)AUC 7的AUC的剂量给药,例如静脉内给药。卡铂可以在至少一个7天、14天、21天或28天周期当中的给药期(例如在21天周期中在第1天)给药。紫杉醇可以给药至少1、3、6、9或12个周期。在一个具体组合中,SAHA在至少一个21天周期中的14天给药期(例如21天周期中的第1-14天)以400mg的剂量每天一次口服给药,并且卡铂在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以足以产生(约)AUC 6的AUC的剂量给药。在另一个组合中,SAHA在至少一个21天周期中的7天给药期(例如21天周期中的第1-17天)以300mg的剂量每天两次口服给药,并且卡铂在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以足以产生(约)AUC 6的AUC的剂量给药。在另一个组合中,SAHA在至少一个21天周期中的14天给药期(例如21天周期中的第1-14天)以300mg的剂量每天一次口服给药,并且卡铂在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以足以产生(约)AUC 6的AUC的剂量给药。
在一个具体组合中,SAHA在至少一个21天周期中的14天给药期(例如21天周期中的第1-14天)以200mg的剂量每天一次口服给药;紫杉醇在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以175mg/m2或200mg/m2的剂量通过输注3小时来给药;并且卡铂在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以足以产生(约)AUC 5或6的AUC的剂量给药。在另一个组合中,SAHA在至少一个21天周期中的14天给药期(例如21天周期中的第1-14天)以400mg的剂量每天一次口服给药;紫杉醇在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以175mg/m2或200mg/m2的剂量通过输注3小时来给药;并且卡铂在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以足以产生(约)AUC 5或6的AUC的剂量给药。在另一个组合中,SAHA在至少一个21天周期中的7天给药期(例如21天周期中的第1-7天)以300mg的剂量每天两次口服给药;紫杉醇在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以175mg/m2或200mg/m2的剂量通过输注3小时来给药;并且卡铂在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以足以产生(约)AUC 5或AUC 6的AUC的剂量给药。在另一个具体组合中,SAHA在至少一个21天周期中的14天给药期(例如21天周期中的第1-14天)以300mg的剂量每天一次口服给药;紫杉醇在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以175mg/m2或200mg/m2的剂量通过输注3小时来给药;并且卡铂在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以足以产生(约)AUC 5或6的AUC的剂量给药。
在另一个具体组合中,SAHA在至少一个21天周期中的14天给药期(例如21天周期中的第1-14天)以200mg的剂量每天一次口服给药;紫杉醇在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以175-250mg/m2的剂量通过输注3小时来给药;并且卡铂在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以300-400mg/m2的剂量通过输注30分钟来给药。在一个具体组合中,SAHA在至少一个21天周期中的14天给药期(例如21天周期中的第1-14天)以400mg的剂量每天一次口服给药;紫杉醇在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以175-250mg/m2的剂量通过输注3小时来给药;并且卡铂在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以300-400mg/m2的剂量通过输注30分钟来给药。在另一个具体组合中,SAHA在至少一个21天周期中的7天给药期(例如21天周期中的第1-7天)以300mg的剂量每天两次口服给药;紫杉醇在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以175-250mg/m2的剂量通过输注3小时来给药;并且卡铂在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以300-400mg/m2的剂量通过输注30分钟来给药。在另一个具体组合中,SAHA在至少一个21天周期中的14天给药期(例如21天周期中的第1-14天)以300mg的剂量每天一次口服给药;紫杉醇在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以175-250mg/m2的剂量通过输注3小时来给药;并且卡铂在至少一个21天周期中的给药期(例如21天周期中的第1天)以300-400mg/m2的剂量通过输注30分钟来给药。
在另一个组合中,将一种或多种辅助药物(例如甾族药物、抗组胺药物、H2受体拮抗剂和止吐剂)在一个或多个剂量的SAHA、卡铂和/或紫杉醇剂量之前,作为预先治疗(即预治疗)部分给药。在一个实施方案中,给患者用能够减轻或消除紫杉醇/卡铂给药前或给药后的过敏反应的药物来进行预治疗。这些药物包括但不限于甾族药物(例如地塞米松)、抗组胺药物(例如苯海拉明)、H2受体拮抗剂(例如雷尼替丁、西咪替丁)。在一个实施方案中,在给药紫杉醇之前或之后,用一种或多种甾族药物、抗组胺药物、H2受体拮抗剂对患者给药。在另一个实施方案中,在给药紫杉醇之前或之后,用一种或多种皮质甾族药物、苯海拉明、H2受体拮抗剂对患者给药。对于辅助药物,示例性给药方案公开在例如U.S.5,670,537、U.S.5,641,803和U.S.5,496,804中,其引入本文以供参考。
作为一个实例,地塞米松(例如)可以以(约)2-25mg的剂量给药(例如口服给药)。特别是,地塞米松可以在给药紫杉醇之前,以(约)4mg、(约)8mg、(约)10mg、(约)15mg、(约)20mg或(约)25mg的剂量给药。在特别的方面,地塞米松在给药紫杉醇之前约6小时和/或约12小时(或约6-12小时)给药。地塞米松可以在给药紫杉醇之前约24、18、12和6小时之前,以(约)8mg静脉内给药。地塞米松可以在给药紫杉醇之前约12和6小时,以(约)20mg口服给药。地塞米松在给药紫杉醇之前30分钟,通过单次静脉内剂量,例如以(约)8mg、(约)10mg、(约)15mg、(约)20mg或(约)25mg的静脉内剂量给药。作为另一个实例,可以在给药紫杉醇之前,将苯海拉明(例如)以(约)10-50mg的剂量,以(约)10mg、(约)15mg、(约)20mg、(约)25mg或(约)50mg的剂量给药(例如静脉内给药)。在一个特别方面,苯海拉明可以在给药紫杉醇之前约30分钟或约1小时给药。苯海拉明可以在给药紫杉醇之前约30分钟,以(约)50mg的剂量给药。苯海拉明(或其等同物)可以在给药紫杉醇之前约30-60分钟以(约)50mg的剂量静脉内给药。
作为一个实例,H
2阻断剂例如雷尼替丁(例如
)可以在给药紫杉醇之前,以(约)25mg、(约)50mg、(约)75mg或(约)25-75mg的剂量给药(例如静脉内给药)。在特别的方面,雷尼替丁可以在给药紫杉醇之前约30分钟或约1小时(例如约30-60分钟)给药。雷尼替丁可以在给药紫杉醇之前约30分钟以(约)50mg的剂量静脉内给药。作为另一个实例,H
2阻断剂例如西咪替丁(例如
)可以在给药紫杉醇之前,以(约)150mg、(约)200mg、(约)250mg、(约)300mg、(约)400mg或(约)150-400mg的剂量给药(例如静脉内给药)。在特别的方面,西咪替丁可以在给药紫杉醇之前约30分钟或约1小时(例如约30-60分钟)给药。可以在给药紫杉醇之前约30-60分钟,将西咪替丁以(约)300mg的剂量静脉内给药,或者将雷尼替丁以(约)50mg的剂量静脉内给药。
在一个实施方案中,在给药紫杉醇之前6-12小时,给患者口服2-25mg地塞米松来预治疗,在给药紫杉醇之前30-60分钟,给患者静脉内给药20-55mg苯海拉明来预治疗,以及在给药紫杉醇之前30-60分钟,给患者静脉内给药50mg雷尼替丁或300mg西咪替丁来预治疗。
作为加入的实例,Aprepitant(例如
)可以在卡铂/紫杉醇输注之前,以(约)80mg、(约)100mg、(约)125mg或(约)160mg的剂量给药(例如口服给药)。在具体的方面,Aprepitant在给药卡铂/紫杉醇之前约1小时给药,并且以每天(约)40mg、(约)80mg、(约)125mg或(约)160mg继续至少2天。作为另一个实例,昂丹司琼(例如
)可以以(约)4mg、(约)8mg、(约)32mg或(约)40mg的剂量,或者以(约)0.15mg/kg的剂量给药(例如静脉内给药)。在一些方面,昂丹司琼在卡铂/紫杉醇输注之前30分钟给药。昂丹司琼可以通过输注15分钟来给药。在具体的预治疗中,将Aprepitant在卡铂/紫杉醇输注之前1小时以125mg口服给药,并且在接下来的两天以每天80mg给药;将地塞米松在卡铂/紫杉醇输注之前30分钟以12mg口服给药,并且在接下来3天以每天8mg给药;以及在卡铂/紫杉醇输注之前30分钟将昂丹司琼以32mg静脉内给药一次。
在另外的组合中,将一种或多种辅助药物(例如甾族药物、抗组胺药物、H2受体拮抗剂、止吐剂和集落刺激因子)在一个或多个剂量的SAHA、卡铂和/或紫杉醇之后给药。对于治疗后治疗(即后治疗),可以将辅助药物以任何上述剂量给药。在一个特定方面,将地塞米松在给药紫杉醇之后,每12小时给药一次,给药6次。作为另外的方面,将集落刺激因子例如G-CSF以(约)5mg/kg/天、(约)10-20mg/kg/天或(约)15-20mg/kg/天的剂量与紫杉醇联合给药。在具体方面,将G-CSF给药至少7天(例如在21天周期中的连续7天或第1-7天)。在另外的组合中,将一种或多种辅助剂(例如甾族药物、抗组胺药物、H2受体拮抗剂、止吐剂和集落刺激因子)与一个或多个剂量的SAHA、卡铂和/或紫杉醇联合给药。
联合给药
依据本发明,HDAC抑制剂与一种或多种抗癌剂可用于治疗实体瘤(例如头颈、肺、乳腺、结肠、结肠/直肠、前列腺、膀胱、直肠、脑、胃组织、骨、卵巢、甲状腺、神经内分泌或子宫内膜的肿瘤)、血液恶性肿瘤(例如白血病、淋巴瘤、骨髓瘤)、腺癌(例如严重或转移性腺癌)、癌(例如膀胱癌、肾癌、乳腺癌、结肠直肠癌)、成神经细胞瘤或黑素瘤。这些癌症的非限定性实例包括弥散性大B-细胞淋巴瘤(DLBCL),T-细胞淋巴瘤或白血病,例如皮肤T-细胞淋巴瘤(CTCL)、非皮肤周围T-细胞淋巴瘤、与人嗜T-淋巴细胞病毒(HTLV)有关的淋巴瘤、成人T-细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)以及急性淋巴细胞白血病、急性非淋巴细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性淋巴细胞白血病、慢性骨髓性白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、间皮瘤、儿童实体瘤、脑成神经细胞瘤、成视网膜细胞瘤、神经胶质瘤、维尔姆斯瘤、骨癌和软组织肉瘤,成人普通实体瘤例如头颈癌(例如口、喉和食管癌)、泌尿生殖癌(例如前列腺、膀胱、肾、子宫、卵巢、睾丸、直肠和结肠癌)、肺癌(例如小细胞癌和非小细胞癌,包括鳞状细胞癌、大细胞癌和腺癌)、乳腺癌、胰腺癌、黑素瘤和其它皮肤癌,基底细胞癌、转移性皮肤癌、溃疡性和乳头状鳞状细胞癌、胃癌、脑癌、肝癌、肾上腺癌、肾癌、甲状腺癌、髓样癌、骨样肉瘤、软组织肉瘤、尤因氏肉瘤、veticulum细胞肉瘤和卡波西肉瘤。还包括儿童形式的任何本文所述癌症。
在美国,肺癌仍然是癌症相关死亡的头号病因,并且新诊断的非小细胞肺癌患者当中有30%-40%表现出局部晚期和不可切除的III期疾病(Jemal A等人CA Cancer J.Clin.2004;54:8-29;Dubey和Schiller The Oncologist 2005;10:282-291;Socinski MA Semin Oncol.2005 32(2 Suppl 3):S114-8)。用标准化疗方案治疗的IV期疾病患者的中值存活时间大约为8-11个月(Schiller JH等人N.Engl.J.Med.2002;346:92-98;Fossella F等人 J.Clin.Oncol.2003;21:3016-3024)。在复发病症中,用单药治疗的中值存活时间大约为5-7个月,并且进展的时间仅为8-10周(Shepherd FA等人J.Clin.Oncol.2000;18:2095-2103;Fossella FV等人 J.Clin.Oncol.2000;18:2354-2362)。
非小细胞肺癌(NSCLC)占所有肺癌病例的大约85%。大部分NSCLC患者呈现出晚期疾病,并且该侵袭性肿瘤与不良预后有关。患有严重(IIIB/IV期)NSCLC的患者的5年存活率<5%(Ginsberg RJ等人In:Cancer:Principles and Practice of Oncology,De Vita VT Jr,HellmanS,Rosenberg SA,eds.,6th Edition,Philadelphia:Lippincott Williamsand Wilkins,2001:925-983)。对于NSCLC的治疗是治标性的,目的是改善症状和延长存活。目前,基于铂的方案是患有晚期NSCLC的患者的标准养护(在Stewart DJ Oncologist 2004;9 Suppl 6:43-52中综述)。这些方案会带来严重且经常积聚的血液和非血液毒性,限制了剂量强度。因此,需要新的治疗和联合方案来改善这些患者的结果。
依据National Cancer Institute,在美国,头颈癌占所有癌症的3%。大部分头颈癌起源于在头颈中发现的鳞状细胞衬里结构,并且经常称为头颈鳞状细胞癌(SCCHN)。某些头颈癌起源于其他类型细胞例如腺细胞。起源于腺细胞的头颈癌称为腺癌。头颈癌进一步由他们所开始的区域限定,所述区域是例如口腔、鼻腔、喉、咽、唾液腺和颈上部的淋巴结。据估计,2002年在美国有38,000人发展成了头颈癌。大约60%的患者呈现出局部晚期疾病。在用手术和/或放射治疗之后,这些患者当中只有30%达到了长期缓解。对于复发和/或转移疾病的患者,中值存活期大约是6个月。
适用于本发明的烷化剂包括但不限于二氯乙胺类(氮芥类例如苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、氮芥、美法仑、乌拉莫司汀)、吖丙啶(例如塞替派)、烷基酮磺酸酯类(例如白消安)、亚硝基脲类(例如卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星)、非经典烷化剂(例如六甲蜜胺、达卡巴嗪和丙卡巴肼)、铂化合物(卡铂和顺铂)。在一个具体实施方案中,烷化剂是卡铂。
适用于本发明的抗生素为蒽环霉素类(例如多柔比星、柔红霉素、表柔比星、伊达比星和蒽二酮)、丝裂霉素C、博来霉素、放线菌素D和普卡霉素(plicatomycin)。
适用于本发明的抗代谢药包括但不限于氟尿苷、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、亚叶酸、羟基脲、硫鸟嘌呤、巯嘌呤、阿糖胞苷、喷司他丁、磷酸氟达拉滨、克拉曲滨、天冬酰胺酶、吉西他滨和培美曲塞。
适用于本发明的激素药包括但不限于雌激素、孕激素、抗雌激素药、雄激素、抗雄激素药、LHRH类似物、芳化酶抑制剂、己烯雌酚、他莫昔芬、托瑞米芬、fluoxymesterol、雷洛昔芬、比卡鲁胺、尼鲁米特、氟他胺、氨鲁米特、四唑、酮康唑、醋酸戈舍瑞林、亮丙立德、醋酸甲地孕酮和米非司酮。
适用于本发明的植物来源药物包括但不限于长春新碱、长春碱、长春酰胺、长春利定、长春瑞滨、依托泊苷、替尼泊苷、紫杉醇和多西他赛。在一个具体实施方案中,植物来源药物是紫杉醇。
适用于本发明的生物药包括但不限于免疫调节蛋白、抗肿瘤抗原的单克隆抗体、肿瘤抑制基因和癌疫苗。例如,免疫调节蛋白可以为白介素2、白介素4、白介素12、干扰素E1、干扰素D、α干扰素、红细胞生成素、粒细胞-CSF;粒细胞、 巨噬细胞-CSF; 芽孢杆菌Cahnette-Guerin、左旋咪唑或奥曲肽。此外,肿瘤抑制基因可以为DPC-4、NF-1、NF-2、RB、p53、WT1、BRCA或BRCA2。抗体包括西妥昔单抗(例如ErbituxTM)和贝伐单抗(例如AvastinTM)。
在本发明的各个方面,治疗操作以任何顺序先后进行、同时进行或其任何组合。例如,一个治疗操作,例如给药HDAC抑制剂,可以在其他治疗操作例如一种或多种抗癌药之前进行,或者可以在用一种或多种抗癌药治疗之后进行,与用一种或多种抗癌药治疗同时进行,或其任何组合。例如,依据本文详细的方法,紫杉醇和卡铂可以在给药SAHA的第一天给药。作为另一个方面,SAHA可以首先给药,并且紫杉醇可以在卡铂之前给药。作为另一个方面,紫杉醇和卡铂可以在给药SAHA的第一天之后给药最长达4天(例如在21天周期中,给药SAHA的第一天是在第-4、-3、-2或-1或1天,并且紫杉醇和卡铂是在第1天给药)。作为另一个方面,紫杉醇和卡铂可以在给药SAHA的第一天之后约24小时给药(例如在21天周期中,给药SAHA的第一天是在第-1天,并且紫杉醇和卡铂是在第1天给药)。作为另一个方面,卡铂可以作为30分钟输注来给药,并且紫杉醇可以作为3小时输注来给药。
在本发明的一个方面,可决定HDAC抑制剂的总疗程。可在开始用HDAC抑制剂治疗前或用HDAC抑制剂治疗之后给予一种或多种抗癌药。另外,在给予HDAC抑制剂期间,可给予一种或多种抗癌药,但不需要在整个HDAC抑制剂治疗期间发生。同样,HDAC抑制剂可以在用一种或多种抗癌药治疗之前或者在用一种或多种抗癌药治疗之后给药。此外,可以在给予抗癌药期间,给予HDAC抑制剂,但不需要在整个抗癌药治疗期间发生。或者,治疗方案包括用HDAC抑制剂或一种或多种抗癌药进行预治疗,随后在治疗期间加入其他药物。
在一个具体实施方案中,HDAC抑制剂和抗癌药的组合是加和性的,即联合治疗方案产生各个成分单独给药时的加和效应结果。根据该实施方案,HDAC抑制剂的量和一种或多种抗癌药(例如卡铂和紫杉醇以及任选另外的抗癌药)的量一起构成治疗癌症的有效量。
在另一个实施方案中,据认为,当联合治疗方案产生的抗癌结果(例如细胞生长停止、细胞持续死亡、诱导分化、细胞死亡)比各个成分单独以治疗剂量给药时的加和效应明显更好时,HDAC抑制剂和一种或多种抗癌药的组合是治疗协同性的。当结果明显更好时,可用标准统计分析测定。例如,可采用Mann-Whitney检验或某些其他一般公认的统计分析。
在本发明的一个具体实施方案中,可将HDAC抑制剂例如SAHA和一种或多种抗癌剂例如卡铂和紫杉醇与一种或多种另外的HDAC抑制剂、一种或多种另外的烷化剂、一种或多种抗生素、一种或多种抗代谢药、一种或多种激素药、一种或多种植物来源药、一种或多种抗血管形成药、一种或多种分化诱导剂、一种或多种细胞生长停止诱导剂、一种或多种细胞调亡诱导剂、一种或多种细胞毒性药物、一种或多种酪氨酸激酶抑制剂、一种或多种辅助药物或者一种或多种生物药联合给药。
药物组合物
如上所述,可将含HDAC抑制剂例如SAHA和一种或多种抗癌药例如卡铂和紫杉醇(以及任选另外的抗癌剂)的组合物配制成适用于以下途径给药的任何剂型:口服、胃肠外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、舌下、肌内、直肠、经颊、鼻内、脂质体;通过吸入、阴道或眼内给药;通过导管或支架局部释放给药,或用于皮下、脂肪内、关节腔内、鞘内给药,或以缓释剂型给药。
可将HDAC抑制剂和一种或多种抗癌药配制在用于同时给药的同一个剂型中,或可将他们配制成两个独立的剂型,可按上述同时或序贯给药。
本发明还包括含有HDAC抑制剂和/或一种或多种抗癌药的可药用盐的药物组合物。
本文中所述化合物的合适和适用于本发明方法的可药用盐可包括碱或酸加成盐例如与无机碱形成的盐的盐,例如碱金属盐(例如锂盐、钠盐、钾盐等)、碱土金属盐(例如钙盐、镁盐等)、铵盐;与有机碱形成的盐,例如有机胺盐(例如三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、乙醇胺盐、三乙醇胺盐、二环己基胺盐、N,N′-二苄基乙二胺盐等)等;无机酸加成盐(例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐等);有机羧酸或磺酸加成盐(例如甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐等);碱性或酸性氨基酸(例如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等)的盐等。
本发明还包括含有HDAC抑制剂和/或一种或多种抗癌药的水合物的药物组合物。
此外,本发明还包括含有任何固体或液体物理形式的SAHA或任何其他HDAC抑制剂的药物组合物。例如,HDAC抑制剂可以是晶体形式、无定形并具有任何粒度。HDAC抑制剂颗粒可为微粉化或可为成团、粉碎颗粒、粉末、油、油悬浮液或固体或液体物理形式的任何其他形式。
对于口服给药,药物组合物可以是液体或固体。合适的固体口服制剂包括片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、微丸等。合适的液体口服制剂包括溶液、悬浮液、分散体、乳液、油等。
常用作载体或稀释剂的任何惰性赋形剂,例如树胶、淀粉、糖、纤维素物质、丙烯酸酯或其混合物可用于本发明制剂。组合物还可含有崩解剂和润滑剂,此外,可含一种或多种选自以下的添加剂:粘合剂、缓冲剂、蛋白酶抑制剂、表面活性剂、增溶剂、增塑剂、乳化剂、稳定剂、增粘剂、甜味剂、成膜剂或其任何组合。此外,本发明组合物可以是控释或即释制剂形式。
HDAC抑制剂作为活性成分可与根据预定给药形式适当选择的合适药用稀释剂、赋形剂或载体(本文中统称为“载体”物质或“可药用载体”)混合在一起给药。本文中使用的“药学上可接受的载体”包括与药物给药相容的任何和所有溶剂、分散介质、包衣剂、抗细菌和抗真菌剂、等渗剂和延迟吸收剂等。合适的载体在本领域中的标准参考教材最新版Remington’s Pharmaceutical Sciences中有描述,其通过引用结合到本文中。
对于液体制剂,可药用载体可以是水或非水溶液、悬浮液、乳液或油。非水溶剂的实例有丙二醇、聚乙二醇和注射有机酯例如油酸乙酯。水性载体包括水、醇/水溶液、乳液或悬浮液,包括盐水和缓冲介质。油的实例有石油、动物、植物或合成来源的那些油,例如花生油、大豆油、矿物油、橄榄油、葵花油和鱼肝油。溶液或悬浮液还可包括以下组分:无菌稀释剂例如注射用水、盐水溶液、不挥发油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他合成溶剂;抗细菌剂例如苯甲醇或尼泊金甲酯;抗氧化剂例如抗坏血酸或亚硫酸氢钠;螯合剂例如乙二胺四乙酸(EDTA);缓冲剂例如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐和调节张力的试剂例如氯化钠或葡萄糖。可用酸或碱例如盐酸或氢氧化钠调节pH。
也可使用脂质体和非水溶媒例如不挥发油。本领域中熟知用于药物活性物质的此类介质和试剂的用途。除与活性化合物不配伍的任何常用介质或试剂外,其在组合物中的用途是可期的。还可将辅助活性化合物加入组合物中。
固体载体/稀释剂包括但不限于树胶、淀粉(例如玉米淀粉、预胶化淀粉)、糖(例如乳糖、甘露醇、蔗糖、葡萄糖)、纤维素物质(例如微晶纤维素)、丙烯酸酯(例如聚甲基丙烯酸酯)、碳酸钙、氧化镁、滑石粉或其混合物。
此外,组合物还可含粘合剂(例如阿拉伯胶、玉米淀粉、明胶、卡波姆、乙基纤维素、瓜尔胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮)、崩解剂(例如玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸、二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、瓜尔胶、淀粉羟乙酸钠、羧甲基淀粉钠(Primogel)),各种pH和离子强度的缓冲剂(例如tris-HCl、乙酸盐、磷酸盐)、阻止表面吸附的添加剂例如白蛋白或明胶、清洁剂(例如吐温20、吐温80、泊洛沙姆F68、胆酸盐)、蛋白酶抑制剂、表面活性剂(例如十二烷基硫酸钠)、渗透促进剂、增溶剂(例如甘油、聚乙二醇)、助流剂(例如胶体二氧化硅)、抗氧化剂(例如抗坏血酸、焦亚硫酸钠、丁基化羟基苯甲醚)、稳定剂(例如羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素)、增粘剂(例如卡波姆、胶体二氧化硅、乙基纤维素、瓜尔胶)、甜味剂(例如蔗糖、阿司帕坦、柠檬酸)、矫味剂(例如薄荷、水杨酸甲酯或橙味香精)、防腐剂(例如硫柳汞、苯甲醇、尼泊金酯)、润滑剂(例如硬脂酸、硬脂酸镁、聚乙二醇、十二烷基硫酸钠)、助流剂(例如胶体二氧化硅)、增塑剂(例如邻苯二甲酸二乙酯、柠檬酸三乙酯)、乳化剂(例如卡波姆、羟丙基纤维素、十二烷基硫酸钠)、聚合物包衣剂(例如泊洛沙姆或其乙二胺衍生物(poloxamines))、包衣剂和成膜剂(例如乙基纤维素、丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯)和/或助剂。
在一个实施方案中,使活性化合物和防止化合物从体内快速消除的载体一起制备,例如控释制剂包括植入物和微囊释药系统。可使用生物降解、生物相容聚合物,例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。制备此类制剂的方法对本领域技术人员而言显而易见。也可从Alza Corporation和Nova Pharmaceuticals,Inc购买原料。也可用脂质体悬浮液(包括用病毒抗原的单克隆抗体靶向感染细胞的脂质体)作药学上可接受的载体。这些可按本领域技术人员已知的方法例如按U.S.专利4,522,811中所述方法制备。
配制便于给药和剂量均匀的剂量单位形式的口服组合物尤其最好。本文中所用的剂量单位形式是指适用于治疗患者的单位剂量的物理不连续单位;每单位含有计算产生需要所需疗效的预定量活性化合物和所需药用载体。本发明剂量单位形式的规格由活性化合物的独特特征、欲达到的具体疗效和用于治疗个体的组合此类活性化合物技术的内在限制所决定并直接取决于这些因素。
可将药物组合物和用药说明书一起包括在容器、包装或分配器中。
在本领域中容易理解含活性成分的药物组合物的制备,例如通过混合、制粒或片剂形成方法。活性治疗成分通常与可药用且与活性成分配伍的赋形剂混合。用于口服给药的活性药物与通常用于该目的的添加剂例如溶载体、稳定剂或惰性稀释剂混合,通过常用方法转化为合适的给药形式,例如以上详述的片剂、包衣片剂、硬或软明胶胶囊剂;水、醇或油溶液等。
给予患者的化合物量小于患者中毒量。在某些实施方案中,给予患者的化合物量小于导致患者血浆中化合物浓度等于或超过该化合物毒性水平的量。优选,使患者血浆中化合物的浓度保持在约10nM。在另一个实施方案中,使患者血浆中化合物的浓度保持在约25nM。在另一个实施方案中,使患者血浆中化合物的浓度保持在约50nM。在另一个实施方案中,使患者血浆中化合物的浓度保持在约100nM。在另一个实施方案中,使患者血浆中化合物的浓度保持在约500nM。在另一个实施方案中,使患者血浆中化合物的浓度保持在约1000nM。在另一个实施方案中,使患者血浆中化合物的浓度保持在约2500nM。在另一个实施方案中,使患者血浆中化合物的浓度保持在约5000nM。在实施本发明中,应给予患者的最佳化合物量取决于具体使用的化合物和所治疗癌症的类型。
制剂中活性成分和各种赋形剂的百分比可以改变。例如,组合物可含20-90%,优选50-70%重量的活性药物。
对于IV给药,可用葡萄糖醛酸、L-乳酸、乙酸、柠檬酸或在静脉内给药可接受的pH范围内的具有适度缓冲能力的任何可药用酸/共轭碱作为缓冲剂。也可使用其中已用酸或碱例如盐酸或氢氧化钠将pH调至所需范围内的氯化钠溶液。通常,静脉内给药制剂的pH范围可为约5至约12。含有HDAC抑制剂(其中HDAC抑制剂具有异羟肟酸部分)的静脉内给药制剂的优选pH范围可为约9至约12。
优选按本领域中熟知的方法,在pH约5至约12的范围内制备皮下制剂,该制剂也含有合适的缓冲剂和等渗剂。可将他们配制成每日一次或多次皮下给药释放日剂量的活性药物。选择制剂的合适缓冲剂和pH取决于给予HDAC抑制剂的溶解性,本领域普通技术人员容易作出选择。在皮下制剂中也可使用其中已用酸或碱例如盐酸或氢氧化钠将pH调至需要范围内的氯化钠溶液。通常,皮下制剂的pH范围可为约5至约12。具有异羟肟酸部分的HDAC抑制剂的皮下制剂的优选pH范围可为约9至约12。
也可通过局部使用合适的鼻内载体,以鼻内形式给予本发明组合物,或通过透皮途径,用该领域普通技术人员熟知的透皮贴剂的那些形式给药。为以透皮释放系统形式给药,在整个给药方案中,给药剂量自然是连续而非间断。
本发明在下述实施例中进一步说明。该部分的作用有助于理解本发明,而不是并且不应当认为是以任何方式限制如下面的权利要求中所提出的本发明。
实施例
本发明在下述实施例中进一步更充分说明。这些实施例不应当认为是以任何方式限制如下面的权利要求中所提出的本发明。
实施例1:合成SAHA
SAHA可以根据下面的方法,或者根据US专利5,369,108中描述的方法合成,该专利的内容全文引入本文以供参考,或者根据然后其他方法合成。
合成SAHA
步骤1-合成辛二酸单酰苯胺酸(Suberanilic acid)
在22L烧瓶中,加入3,500g(20.09mol)辛二酸,将该酸加热融化。升温至175℃,然后加入2,040g(21.92mol)苯胺。升温至190℃,在该温度下保持20分钟。将融化物倾入含有4,017g氢氧化钾50L水溶液的Nalgene罐中。将混合物搅拌20分钟,随后加入熔化物。按相同规模重复进行该反应,将第二批熔化物倾入相同氢氧化钾溶液中。将混合物充分搅拌后,关闭搅拌器,使混合物沉降。
然后使混合物通过硅藻土垫(4,200g)过滤。过滤产物除去中性副产物(由苯胺在辛二酸的两端发生化学反应产生)。滤液含有产物的盐和未反应辛二酸的盐。使混合物沉降,因为过滤非常缓慢,需要几天。将滤液用5L浓盐酸酸化;将混合物搅拌1小时,然后使其沉降过夜。将产物过滤,收集,在漏斗上用去离子水洗涤(4×5L)。将湿滤饼放入含有44L去离子水的72L烧瓶中,将混合物加热至50℃,将固体通过趁热过滤分离(需要的产物混杂有在热水中溶解度大的多的辛二酸。热研磨几次,除去辛二酸。用NMR[D6DMSO]检查产物,以监控辛二酸的除去)。在50℃下,用44L水重复进行热研磨。将产物再次通过过滤分离,用4L热水冲洗。在真空干燥箱中,用Nash泵作为真空源(Nash泵是液体(水)环泵,抽真空度达约29英寸汞柱。间断充入氩气,以用于帮助输送水),在65℃下干燥过周末;得到4,182.8g辛二酸单酰苯胺酸。
产物仍含少量辛二酸;因此,在65℃下,一次用约300g产物分批进行热研磨。将每一部分过滤,再用热水(总共约6L)彻底冲洗。重复该过程以纯化整批产物。这样就完全除去产物中的辛二酸。在烧瓶中合并固体产物,与6L甲醇/水(1:2)一起搅拌,然后过滤分离,在滤器上晾干过周末。将其置于盘中,在用Nash泵和氩气流的真空干燥箱中,在65℃下干燥45小时。终产物的重量为3,278.4g(32.7%收率)。步骤2-合成辛二酸单酰苯胺酸甲酯(Methyl Suberanilate)
向装有机械搅拌器和冷凝器的50L烧瓶中加入3,229g来自前步的辛二酸单酰苯胺酸、20L甲醇和398.7g Dowex 50WX2-400树脂。将混合物加热至回流,保持回流18小时。将混合物过滤,除去树脂珠,在旋转蒸发仪上,将滤液蒸发至残余物。
将旋转蒸发仪中的残余物转移至装有机械搅拌器和冷凝器的50L烧瓶中。向该烧瓶中加入6L甲醇,将混合物加热,得到溶液。然后加入2L去离子水,停止加热。搅拌下,使混合物冷却,然后将烧瓶置于冰浴中,使混合物冷却。将固体产物过滤分离,滤饼用4L冷甲醇/水(1:1)冲洗。在使用Nash泵的真空干燥箱中,在45℃下,将产物干燥总共64小时,得到2,850.2g(84%收率)辛二酸单酰苯胺酸甲酯。
步骤3-合成粗SAHA
向配有机械搅拌器、热电偶和惰性气体插管的50L烧瓶中加入1,451.9g盐酸羟胺、19L无水甲醇和3.93L 30%甲醇钠的甲醇溶液。然后向烧瓶中加入2,748.0g辛二酸单酰苯胺酸甲酯,随后加入1.9L30%甲醇钠的甲醇溶液。将混合物搅拌16小时又10分钟。将反应烧瓶(烧瓶1)中的约一半反应混合物转移至装有机械搅拌器的50L烧瓶(烧瓶2)中。然后将27L去离子水加入烧瓶1中,将混合物搅拌10分钟。用pH计测定pH;pH为11.56。通过加入100ml 30%甲醇钠的甲醇溶液将混合物的pH调节至12.02;得到澄清溶液(此时反应混合物含有少量固体。调节pH,得到澄清溶液,从中沉淀出产物)。按相同方法将烧瓶2中的反应混合物稀释;加入27L去离子水,向混合物中加入100ml30%甲醇钠溶液调节pH,得到pH12.01(澄清溶液)。
通过加入冰醋酸将各烧瓶中的反应混合物酸化,沉淀产物。烧瓶1的终pH为8.98,且烧瓶2的终pH为8.70。将两个烧瓶中的产物用布氏漏斗和滤布过滤分离。用15L去离子水洗涤滤饼,掩盖漏斗,在真空下,将漏斗上的产物部分干燥15.5小时。移去产物,将产物置于5只玻璃盘中。将这些盘放入真空干燥箱中,将产物干燥至恒重。第一干燥期为22小时,在60℃下,用Nash泵作真空源和用氩气流。从真空干燥箱中取出盘,称重。将盘放回干燥箱,再用油泵作真空源不用氩气流,干燥产物4小时又10分钟。将该物质包装在双层4-mill聚乙烯袋中,放入塑料外壳容器中。取样后,终重量为2633.4g(95.6%)。
步骤4-重结晶粗SAHA
使粗SAHA在甲醇/水中重结晶。向配有机械搅拌器、热电偶、冷凝器和惰性气体插管的50L烧瓶中加入待结晶的粗SAHA(2,525.7g),随后加入2,625ml去离子水和15,755ml甲醇。将物料加热至回流,得到溶液。然后将5,250ml去离子水加入反应混合物中。停止加热,使混合物冷却。当混合物足够冷(28℃)以致可安全处理烧瓶时,从加热套移去烧瓶,放入用作冷浴的浴盆中。将冰/水加入该浴盆,使混合物冷却至-5℃。将混合物在该温度以下保持2小时。将产物过滤分离,滤饼用1.5L冷甲醇/水(2:1)洗涤。掩盖漏斗,在真空下,将产物部分干燥1.75小时。从漏斗上移去产物,并置于6只玻璃盘中。将这些盘放入真空干燥箱中,在60℃下,用Nash泵作真空源和用氩气流,将产物干燥64.75小时。取出盘,称重,然后放回干燥箱,再在60℃下干燥4小时,得到恒重。第二干燥期的真空源是油泵,不使用氩气流。将物质包装在双层4-mill聚乙烯袋中,放入塑料外壳容器中。取样后,终重量为2,540.9g(92.5%)。
在其他实验中,使用下列条件将粗SAHA结晶:
表1:SAHA结晶条件
溶剂 | 水 | 搅拌 | 时间(小时) |
甲醇 | - | 不打开 | 2 |
甲醇 | - | 打开 | 72 |
乙醇 | - | 打开 | 72 |
异丙醇 | - | 不打开 | 72 |
乙醇 | 15% | 打开 | 2 |
甲醇 | 15% | 不打开 | 72 |
乙醇 | 15% | 不打开 | 72 |
乙醇 | 15% | 打开 | 72 |
甲醇 | 15% | 打开 | 72 |
所有这些反应条件都生成SAHA多晶型I。
实施例2:在1:1乙醇/水中产生湿研磨小颗粒
以50mg/g-150mg/g(晶体/溶剂混合物)的浆液浓度,把SAHA多晶型I晶体悬浮在1:1(体积比)EtOH/水溶剂混合物中。将该浆液用配有超精细刀片的IKA-Works Rotor-Stator高剪切均化器型号T50,以20-30m/s速率湿研磨,直到SAHA的平均粒径小于50μm并且95%小于100μm为止,同时把温度保持在室温。将湿研磨的浆液于室温过滤,并用1:1 EtOH/水溶剂混合物洗涤。然后把湿的滤饼于40℃干燥。如通过下面的Microtrac方法测定,该湿研磨材料的最终平均粒径小于50μm。
粒径是用Microtrac Inc制造的SRA-150激光衍射粒径分析仪进行分析的。该分析仪配有ASVR(Automatic Small Volume Recirculator)。将0.25wt%卵磷脂在ISOPAR G中的混合物用作分散液体。对于每一样本,记录3次测定,并且计算平均分布。将粒径分布(PSD)作为体积分布进行分析。报告平均粒径和95%<值(按体积计)。
实施例2A:在1:1乙醇/水中大规模产生湿研磨小颗粒
于20-25℃把56.4kg SAHA多晶型I晶体加到610kg(10.8kg溶剂/kg SAHA)50% vol/vol 200精密检验乙醇与水(50/50乙醇/水)的溶液中。将该浆液(~700L)通过配有超精细发电机的IKA Works湿研磨设备进行再循环,直到达到稳态粒径分布为止。条件是:DR3-6,23m/s转子末端速度,30-35Lpm,3gen,~96流通量(流通量是通过一个gen的一批的体积),~12小时。
将湿滤饼过滤,用水洗涤两次(总共6kg/kg,~340kg),并于40-45℃真空干燥。然后将干的滤饼过筛(595μm筛),并包装为FineAPI。
实施例3:平均粒径150μm的大晶体在1:1乙醇/水中的生长
把25g SAHA多晶型I晶体和388g 1:1乙醇/水溶剂混合物加到配有玻璃搅拌器的500ml夹套树脂锅中。按照实施例2的步骤,将浆液于室温湿研磨为粒径小于50μm。把湿研磨的浆液加热至65℃以溶解~85%的固体。将加热的浆液于65℃老化1-3小时以建立~15%的晶种床。在20psig压力下,并在400-700rpm的搅拌器速度下,将浆液在树脂锅中混合。然后将该批浆液冷却至5℃:在10小时内从65℃冷却至55℃,在10小时内从55℃冷却至45℃,在8小时内从45℃冷却至5℃。将冷却的该批浆液在5℃老化1小时以达到小于5mg/g、尤其是3mg/g的目标上清液浓度。将该批浆液于5℃过滤并用1:1EtOH/水溶剂混合物洗涤。将湿的滤饼于40℃在真空下干燥。按照Microtrac方法,干的滤饼具有~150μm的最终粒径,其中95%粒径<300μm。
实施例4:具有140um平均粒径的大晶体在1:1乙醇/水中的生长
把7.5g SAHA多晶型I晶体和70.7g 1:1 EtOH/水溶剂混合物加到晶种制备容器(500-ml夹套树脂锅)中。按照上面的实施例2的步骤,于室温把晶种浆液湿研磨为小于50μm的粒径。将晶种浆液加热至63-67℃,并且老化30分钟至2小时。
在单独的结晶器(1升夹套树脂锅)中,进入17.5g SAHA多晶型I晶体和317.3g 1:1 EtOH/水溶剂混合物。首先将结晶器加热至67-70℃以溶解所有的固体SAHA晶体,然后冷却至60-65℃以保持略微过度饱和的溶液。
把晶种制备容器中的晶种浆液转移到结晶器中。在20psig压力下,并且在以与实施例3中类似的搅拌器速度,将该浆液在树脂锅中混合。按照实施例3中的冷却梯度过程把该批浆液缓慢冷却至5℃。将该批浆液于5℃过滤,并用1:1 EtOH/水溶剂混合物洗涤。将湿的滤饼在40℃真空下干燥。干的滤饼具有约140μm的最终粒径,并且95%粒径<280μm。
实施例4A:在1:1乙醇/水中大规模生长大晶体
把得自实施例2A的21.9kg Fine API干滤饼(全部的30%)和201kg50/50 EtOH/水溶液(2.75kg溶剂/kg总SAHA)加到容器#1-晶种制备罐中。把51.1kg SAHA多晶型I晶体(全部的70%)和932kg 50/50 EtOH/水(12.77kg溶剂/kg总SAHA)加到容器#2-结晶器中。将结晶器加压至20-25psig,并将内容物加热至67-70℃,同时保持压力以便将SAHA晶体全部溶解。然后将内容物冷却至61-63℃以便使溶液过度饱和。在结晶器的老化过程中,把晶种制备罐加压至20-25psig,把晶种浆液加热至64℃(范围:62-66℃),老化30分钟,同时保持压力以溶解~1/2的晶种固体,然后冷却至61-63℃。
迅速把热的晶种浆液从晶种制备罐转移到结晶器(无冲洗)中,同时保持两个容器的温度。把结晶器中的氮气压力再设置在20-25psig,并将该批浆液于61-63℃老化2小时。将该批浆液在三个线性步骤中用26小时冷却至5℃:(1)用10小时从62℃冷却至55℃;(2)用6小时从55℃冷却至45℃;以及(3)用10小时从45℃冷却至5℃。在40-45℃,将该批浆液老化1小时,然后将湿的滤饼过滤并用水洗涤两次(总共6kg/kg,~440kg),并在40-45℃真空干燥。将得自所述结晶过程的干的滤饼作为粗API包装。把粗API和精细API以70/30比例混合。
实施例5:产生湿研磨的小颗粒批次288
以50mg/g-150mg/g的浆液浓度(晶体/溶剂混合物),把SAHA多晶型I晶体悬浮在乙醇水溶液(按体积计100%乙醇-50%乙醇在水中的溶液)中。用配有超精细刀片的IKA-Works Rotor-Stator高剪切均化器型号T50,以20-35m/s的速度,将浆液进行湿研磨直到SAHA的平均粒径小于50μm并且95%小于100μm为止,同时将温度保持在室温。将湿研磨的浆液于室温过滤,并用EtOH/水溶剂混合物洗涤。将湿的滤饼于40℃干燥。如通过前面描述的Microtrac方法测定,湿研磨的材料的最终平均粒径小于50μm。
实施例6:大晶体批次283的生长
把24g SAHA多晶型I晶体和205ml 9:1乙醇/水溶剂混合物加到配有玻璃搅拌器的500ml夹套树脂锅中。按照实施例1的步骤,于室温将浆液湿磨为粒径小于50μm。把湿研磨的浆液加热至65℃以溶解~85%的固体。把加热的浆液于64-65℃熟化1-3小时以建立~15%的晶种床。将浆液在100-300rpm的搅拌器速度下混合。
然后用一个加热-冷却循环将该批浆液冷却至20℃:在2小时内从65℃冷却至55℃,55℃保持1小时,用~30分钟从55℃加热至65℃,在65℃熟化1小时,在5小时内从65℃冷却至40℃,在4小时内从40℃冷却至30℃,用6小时从30℃冷却至20℃。把冷却的该批浆液在20℃老化1小时。在20℃把该批浆液过滤,并用9:1 EtOH/水溶剂混合物洗涤。将湿的滤饼于40℃在真空下干燥。通过Microtrac方法测定,干的滤饼具有~150μm的最终粒径,其中95%粒径<300μm。
将30%的批次288晶体与70%的批次283晶体混合以产生含有约100mg N-辛二酰苯胺异羟肟酸;约44.3mg微晶纤维素;约4.5mg交联羧甲基纤维素钠;和约1.2mg硬脂酸镁的胶囊。
实施例7:SAHA与卡铂和紫杉醇的组合对于晚期恶性实体瘤的I期试
验
试验目的:设计该试验来确定,当联合给药用于晚期恶性实体瘤患者的II期试验中时,SAHA、卡铂和紫杉醇的推荐剂量。试验的目的是确定与所述组合有关的剂量限制和非剂量限制毒性,并且获得抗肿瘤活性的证据。本试验评价当与卡铂和紫杉醇联合给药时SAHA的药动学参数和潜在的药物与药物之间的相互作用。本试验包括机制相关科学分析以评估SAHA与卡铂和紫杉醇的组合的体内效果。
患者选择:患者表现出1)具有组织学/细胞学确诊的晚期恶性实体瘤;2)≤2个在前化疗;3)年龄≥18岁;4)Eastern Cooperative OncologyGroup性能状态(ECOG PS)<2(Karnofsky≥60%);5)预期寿命>12周;6)足够的器官和骨髓功能,包括白细胞≥3000/mcL,绝对中性白细胞数≥1500/mcL,血小板≥100,000/mcL,总胆红素在正常规定限度之内,AST(SGOT)/ALT(SGPT)≤2.5倍正常规定上限,肌酸酐在正常规定限度之内,或者对于肌酸酐水平超过规定正常值的患者来说肌酸酐≥60mL/min/173m2;7)没有用紫杉醇预先治疗;8)能够口服药物。
排除标准:在进入试验之前的3周(对于亚硝基脲或丝裂霉素C是6周内)内使用化疗或放疗的患者,或者尚未从由4周前给予药物而引起的有害事件中恢复的患者。患者不可以接受任何其它试验药物。具有未曾治疗过的脑转移的患者从试验中排除。然而,完成适当治疗至少4周后的患有稳定的脑病(应当没有接受皮质甾族药物)的患者是合格的。其他排除标准包括登记前至少4周使用丙戊酸,一种HDAC抑制剂,和并发症,包括但不限于进行的或活性感染、症状性充血性心力衰竭、不稳定型心绞痛、心率不齐或将会限制依从试验要求的精神病/社会情境。
治疗方案:治疗是在门诊患者基础上进行的。下面描述了SAHA、卡铂和紫杉醇的广泛的不利事件和潜在风险。下面还描述了SAHA、卡铂和紫杉醇的适宜剂量改动。剂量逐渐增加进度表显示如下:
表2:剂量逐渐增加进度表
*在治疗的第-4天开始SAHA。**对于该剂量水平,每一周期的前7天给药SAHA。QD=每日一次;BID=每日两次;PO=口服;AUC=曲线下面积。
在每一剂量水平上包括3-6名患者。将用于II期(RP2D)试验的推荐剂量的最后一批患者扩展至包括6-12名另外的患者以获得更多的安全、药动学和药效学数据。卡铂和紫杉醇给药最多6个周期。对于在完成6个治疗周期时具有稳定疾病的患者,在与主要研究人员讨论后,按照治疗医生的决定,可以将SAHA作为单一药剂给药。
在第1个周期的第-4天开始用SAHA治疗。对于全部的随后周期,在该周期的第1天开始SAHA治疗。对于21天当中的14天,每天口服给药SAHA(2周治疗,1周停药)。在每一治疗周期的第一天给予卡铂和紫杉醇。给予SAHA后,在输注卡铂前给药紫杉醇。每一治疗周期持续3周。指导患者填写SAHA的用药日记。对于在水平5参加的患者,在每一21天周期中的7天给药SAHA。因此,患者从第-4天到第一个周期的第3天接受SAHA。对于随后的周期,在每一周期的第1-7天给予SAHA。
紫杉醇给药:把紫杉醇在500mL 5%葡萄糖(或生理盐水)中稀释,并通过静脉内给药来过于。紫杉醇的浓度应当不超过1.2mg/mL。剂量是在每一次治疗随访时基于该患者的表面积,使用在该时间患者的实际体重计算的。把剂量四舍五入至最邻近的5mg。在计算表面积时,应当使用实际的身高和体重,即,不调整至“理想”体重。将计算剂量的紫杉醇通过作为3小时输注的自由流动静脉线给药。采取下面的预防措施来最小化与紫杉醇过敏性反应的机会。对于预治疗,向所有患者给药以下药物:
药物 | 剂量 | 途径 | 期间 |
地塞米松 | 20mg* | PO | 在紫杉醇**之前12和6小时 |
苯海拉明 | 50mg | IV | 在紫杉醇之前30分钟 |
H2阻断剂雷尼替丁或西咪替丁 | 50mg300mg | IVIV | 在紫杉醇之前30分钟 |
*20mg是每一次给药的剂量。
**或者,在紫杉醇(
)注射之前30分钟,20mg的单一静脉内剂量,只有按照研究人员的意见,患者可以不顺从预治疗(Zhang Y,Li N,Caron C,等人EMBO J.,2003;22:1168-79)。PO=口服;IV=静脉内。
在第1个周期中,预治疗是在紫杉醇输注之前30-60分钟进行。在紫杉醇的最初周期后,如果患者没有对紫杉醇产生过敏反应,那么研究人员按照其判断可以如下减少地塞米松和/或苯海拉明:地塞米松8mg或10mg i.v.;苯海拉明25mg i.v.;H2阻断剂雷尼替丁50mg或西咪替丁300mg i.v.。
在输注过程中,能够获得注射用苯海拉明用于紧急治疗过敏反应。可以将预治疗调节/改变以满足当地管理机构要求。对于后治疗,研究人员可以开这样的处方,地塞米松4mg,每12小时口服一次,6个剂量,在第1天下午开始。
卡铂给药:在完成紫杉醇输注后给药卡铂。以适宜的剂量静脉内给药卡铂,在100mL D5W(葡萄糖5%在水中的溶液)或NS(0.45%NaCl)中作为30分钟输注。卡铂剂量是基于患者在每一次治疗随访时的理想体重,以及按照下面提供的公式计算的AUC(曲线下面积)剂量。如果患者的体重大于“理想”体重,那么将实际体重用于计算。对于肾功能障碍,可以调节卡铂的剂量以达到如下面确定的计算的AUC。卡铂剂量是基于计算的GFR(肾小球滤过率),基于测量的肌酸酐清除率或计算的肌酸酐清除率。对于每一个治疗周期,剂量是如下所示使用6.0的AUC的Calvert公式计算的:卡铂剂量(mg)=6.0X(GFR+25),其中计算的总剂量是以mg为单位而不是mg/m2。
在Calvert公式中使用肌酸酐清除率(CrCl)替代GFR。对于每一治疗过程CrCl是使用以下公式计算的:
SAHA给药:对于21天当中的连续前14天,口服给药SAHA(2周治疗,1周停药)。要求患者保持日历以证明服用药物。要求患者有规律地服用药物,大约在每天的相同时间。漏服的剂量不弥补。药物与食物一起服用不改变生物利用度。
剂量限制毒性(DLT)的定义:毒性必须归因于试验药物以构成DLT。在第一个治疗周期期间,出现一个或多个以下情况构成DLT:1)除恶心、呕吐或脱发之外的3级或更高级非血液学毒性;2)恶心或呕吐(≥3级)持续48小时,尽管有最大药物治疗;3)绝对中性白细胞计数(ANC)<1000/μl,持续7天以上;4)4级血小板减少(血小板≤25,000/pL);5)与脓毒症或>38℃发烧有关的3或4级中性白细胞减少;6)由于毒性,在开始第2个周期中延迟2周以上;7)如果临床显著并且与药物有关,异常非血液学实验室标准(≥3级)视为DLT。如果在药物治疗之前基准值增加,则增加不视为DLT,除非增加了2个级别以上,并且是临床显著的。下面描述与上述不利事件有关的管理和剂量调整。
在每群组内根据下列方案进行剂量逐渐增加。剂量限制毒性(DLT)定义如上。剂量逐渐增加方案包括:
在给定剂量水平具有DLT的患者数目 | 剂量逐渐增加规则 |
3名患者中有0个患者 | 在下一个剂量水平进入3名患者。 |
≥2 | 停止剂量增加。宣告该剂量水平是最大给药剂量(最高给药剂量)。如果之前在下一个最低剂量仅治疗3名患者,则三(3)名另外的患者进入下一个最低剂量水平。 |
3名患者中有1名患者 | 在该剂量水平再进入至少3名患者。如果这3名患者当中没有人具有DLT,则进入下一个剂量水平。如果这组有1名或1名以上患者具有DLT,则停止剂量增加,并且宣告该剂量水平是最大给药剂量。如果之前在下一个最低剂量仅治疗3名患者,则三(3)名另外的患者进入下一个最低剂量水平。 |
在最大给药剂量以下的最高剂量水平,6名患者中有≥1名患者 | 这一般是推荐的2期剂量(RP2D**)。在推荐的2期剂量,必须进入至少6名患者。 |
**将最终的RP2D群组扩展以包括6-12名另外的患者。对于扩展群组中的患者,在RP2D进行药动学试验。
支持性养护措施:患者被允许接受治疗医生认为必要的适宜的支持性养护措施。预防性粒细胞生长因子的使用是不允许的。如果出现3或4级腹泻,就停止用SAHA的进一步治疗。对于接受已知影响或有可能影响SAHA的活性或药动学的任何药物或物质的患者,确定合格性。如果需要的话,将药物治疗改变为另一种不干扰SAHA的药物治疗。
治疗的持续时间:在不存在由于不利事件而治疗延期的情况下,治疗继续最长6个周期或者直至适用下列标准之一:1)疾病的进展;2)阻止进一步给予治疗的并发症;3)无法接受的不利事件;4)患者决定从试验中退出;或者5)研究人员判断的致使患者无法接受进一步治疗的患者条件中的一般或特殊变化。在退出试验后对患者进行观察4-6周或者直到死亡为止,无论何者首先发生。对因无法接受的不利事件而从试验中退出的患者进行跟踪直到不利事件消退或稳定为止。
给药延期和剂量调整:不使用患者内剂量逐渐增加。对于血液学和非血液学影响,必须降低化疗剂量。按照显示毒性的最高等级的系统来调整剂量。毒性是使用National Cancer Institute Common ToxicityCriteria(NCI CTC)有关不利事件(3.0版)来分级的。可以将治疗延期不超过两周以从毒性中恢复。针对毒性的剂量调节是根据下列指导原则进行的。
所有毒性,除非下面另外说明,在开始下一周期的治疗之前应当消退至1级。
剂量水平 | SAHA(mg) |
-1 | 100 QD |
1 | 200 QD |
2 | 300 QD |
3 | 400 QD |
剂量水平 | 卡铂(AUC) | 紫杉醇(mg/m2) |
-1 | 5 | 150 |
1 | 6 | 175 |
2 | 6 | 200 |
对于每名患者允许不超过两个的剂量减少(两种药物在相同时间的剂量减少计为一个剂量减少)。要求剂量减少两次以上的毒性将导致患者从试验中退出。
I期试验中提到的与SAHA的使用有关的普通毒性主要是非血液学毒性。因为预期使用卡铂和紫杉醇会带来髓抑制,所以对SAHA的剂量进行控制或调整以防止严重的髓抑制。下表中描述了有关3或4级中性白细胞减少、3或4级血小板减少以及伴有3/4级中性白细胞减少的发烧的指导原则:
表3:有关血液学毒性的SAHA剂量调整
第一次发生 | 控制直到恢复到≤2级,然后在相同剂量重新开始 |
第二次发生 | 控制直到恢复到≤2级,并且对于进一步的治疗降低1个剂量水平 |
第三次发生 | 患者从试验中退出 |
恶心、呕吐和腹泻用适宜的支持性养护措施治疗。如果尽管使用了适宜的治疗而症状依然持续,则使用下列指导原则。
对于脱发不对剂量进行调整。因为疲劳是癌症发展的症状,所以只有研究人员认为是与药物有关的情况下才对剂量进行减少。
表4:有关非血液学毒性的SAHA剂量调整
2级 | 控制直到恢复至≤1级 | 在相同剂量重新开始。 |
3级 | 控制直到恢复至≤1级 | 降低一个剂量水平 |
4级 | 停止进一步治疗 | |
以下剂量调整基于前述治疗过程的血液学最低点。
对于紫杉醇和卡铂,具有发热性中性白细胞减少的患者应当降低一个剂量水平。
在每一治疗周期的第1天,血液学参数必须满足上面说明的标准。将治疗延期至计数恢复到规定的合格水平为止。治疗延期超过2周导致患者从试验中退出。
对于感觉神经病,以下剂量调整基于任何前述治疗过程的最差感觉神经病等级经历。
神经-感觉 | 紫杉醇 | 卡铂 |
0-1级 | 无变化 | 无变化 |
2*级 | 降低一个剂量水平 | 无变化 |
3级 | 控制** | 无变化 |
*尽管减少了紫杉醇的剂量,如果2级神经病持续3周以上,那么患者必须退出试验。**尽管降低了两个剂量水平,如果3级感觉神经持续,那么患者必须退出试验。
以下剂量调整基于任何前述治疗过程的关节痛/肌痛的最差等级经历。
关节痛/肌痛 | 紫杉醇 | 卡铂 |
0-1级(正常-轻度) | 无变化 | 无变化 |
2级(运动能力降低) | 降低一个剂量水平 | 无变化 |
3级(残疾) | 控制** | 无变化 |
**如果在方案中引入治疗后地塞米松(4mg/BID,3-5天)。如果不使用地塞米松,在剂量水平降低之前必须向随后的疗程中进入治疗方案。
对于肝毒性,紫杉醇的以下剂量调整是基于血清谷草转氨酶(SGOT)和胆红素血清水平,并且应当在治疗的几天内获得。
*如果从毒性中的恢复超过2周,则停用紫杉醇。如果从毒性中的恢复在2周内实现,则如上所示将剂量降低一个水平。
用充分的抗呕治吐疗控制恶心和/或呕吐。可以在治疗医生的决定下采用预防性抗呕吐治疗。鼓励患者口服大量流体,特别是在每一周期的前3天。
测定效果:通过标准的标准评估患有可测定疾病的患者。对于该试验的目的,每2个周期重复评估患者。除了基准检查之外,在最初证实目标反应之后6周,还获得证实性检查。在该试验中,使用新的国际标准来评估反应和进展,该国际标准由Response EvaluationCriteria in Solid Tumors(RECIST)Committee提出(JNCI 92(3):205-216,2000)。在该RECIST标准中仅使用肿瘤损伤的最长直径的改变(一维测定)。使用下面提供的标准,损伤是可测量的或者不可测量的。在提及可测量性水将不使用术语“可评估的”,因为其不能通过另外的含义或准确度。
可测量的损伤定义为这样的损伤,其可以在至少一个尺寸(欲记录的最长直径)上准确地测量,采用常规技术(CT,MRI,X-射线)≥20mm,采用螺旋CT扫描≥10mm。所有肿瘤测量都是以毫米或厘米的小数为单位记录。所有其他损伤(或疾病位点),包括小损伤(采用常规技术,最长直径<20mm,或者采用螺旋CT扫描,最长直径<10mm)都视为不可测量的疾病。骨损伤、软脑膜、腹水、胸膜/心包渗漏、皮肤淋巴管炎/肺炎、炎性乳腺病、腹部物质(之后不进行CT或MRI)和胆囊损伤都是不可测量的。
每个器官最多达5个以及所有测定器官总共最多达10个的所有可测量损伤被鉴定为靶损伤,并且在基准记录和测量。所有其他损伤(或疾病位点)都鉴定为非靶损伤,并且也在基准记录。非靶损伤包括超过每个器官或所有测定器官总共最大损伤数目的可测量损伤以及不可测量的损伤。这些损伤的测量不是必需的,但是在整个跟追期间记录每一损伤的存在或不存在。
如上所示评估靶损伤:1)完全反应(CR):所有靶损伤消失;2)部分反应(PR):靶损伤的最长直径(LD)的加和减小至少30%,以基准加和LD作为参照;3)进行性疾病(PD):靶损伤的LD的加和减小至少20%,以从开始治疗或一个或多个新损伤消失所记录的最小加和W作为参照;和4)稳定疾病(SD):没有足够收缩而符合PR,也没有足够增加而符合PD,以从开始治疗的最小加和LD作为参照。
如上所示评估非靶损伤:1)完全反应(CR):所有非靶损伤消失,并且肿瘤标记物水平正常化;2)不完全反应/稳定疾病(SD):持续一个或多个非靶损伤或/和肿瘤标记物水平保持在正常限度以上;3)进行性疾病(PD):一个或多个新损伤消失和/或现有非靶损伤的明确进展。
最佳全部反应是从治疗开始直至疾病进展/复发所记录的最佳反应(对于进行性疾病,以从治疗开始所记录的最小测量值作为参照)。患者最佳反应赋值取决于测量和验证标准的完成。
药动学试验:为了测定血浆中的SAHA浓度,进行两个分析中的一个。将样本通过HPLC方法(Kelly WK,Richon VM,O′Connor O,等人Clin.Cancer Res.2003;9:3578-88)或者通过LC/MS方法进行分析。LC/MS比HPLC方法更灵敏,并且更有特异性,还容许可能评估SAHA代谢物。紫杉醇和总铂浓度的定量测定是通过确认的方法进行的。
通过区室和非区室法分析关于SAHA的血浆浓度对时间数据。用计算机程序ADAPT II进行区室模型化。使用通过计算机程序Lagran执行的LaGrange函数来进行非区室模型化。紫杉醇AUC是使用有限抽样法,采用1.5和6小时样本计算的。采用24小时样本,使用有限抽样法确定紫杉醇浓度保持在0.05μM以上的时间。卡铂AUC是使用有限抽样法,基于24小时样本中存在的总铂来计算。有关紫杉醇和卡铂引起的髓抑制的PK/PD关系使用sigmoid Emax模型进行评估,并且与单一药剂紫杉醇和卡铂的历史数据,以及使用紫杉醇与卡铂的组合的试验的历史数据进行比较。
实施例8:SAHA与卡铂和紫杉醇的组合对于晚期恶性实体瘤患者的I
期试验的结果
背景:已经进行了I期试验来评估SAHA、卡铂和紫杉醇的组合对于晚期恶性实体瘤患者的作用。
方法:有资格的患者是患有晚期恶性实体瘤的患者,他们是与卡铂和紫杉醇进行联合治疗的候选者。SAHA(Vorinostat)在每一21天周期的第1-14天口服给药,除了在第1个周期,是在第-4天开始给药以帮助进行药动学试验。卡铂和紫杉醇在每一周期的第1天给药。SAHA及其两种主要代谢物的血浆浓度用新的LC-MS/MS(液相色谱质谱分析)分析进行定量测定。
结果:下面给出剂量逐渐增加方案以及应计患者:
剂量水平 | SAHA(mg/天) | 卡 铂(AUC) | 紫杉醇(mg/m2) | 患者数目 | 患者w/DLT |
1 | 200 | 6 | 175 | 4 | 0 |
2 | 300 | 6 | 175 | 3 | 0 |
3 | 400 | 6 | 175 | 3 | 0 |
4 | 400 | 6 | 200 | 3 | 0 |
AUC=曲线下面积;DLT=剂量限制毒性。
剂量水平4作为联合的推荐II期剂量(RP2D)进行测定,因为在该方案中,单药SAHA的RP2D是400mg。观察到的毒性包括恶心、呕吐、中性白细胞减少和血小板减少,其都没有剂量限制。在可评估反应的9名患者当中,有4名患者表现出部分反应(1名患有头颈癌,3名患有非小细胞肺癌),而有2名患者表现出稳定疾病。SAHA被快速吸收,而AUC随着剂量增加而增大。SAHA药动学参数包括Tmax(达到最大血浆或血清浓度的时间)0.5-2小时;t1/2(清除半衰期)1.6+0.5小时;和CL/F(清除率/生物利用度)5.8+1.71/min。卡铂和紫杉醇不改变SAHA药动学。4-苯胺基-4-氧代丁酸是主要的且长时间存在的SAHA代谢物,其中Cmax(最大血浆血清浓度)比SAHA Cmax大1.5-7倍。4-苯胺基-4-氧代丁酸的t1/2为大约6小时。SAHA葡糖苷酸的Cmax比SAHA Cmax大1-5倍。SAHA葡糖苷酸的t1/2是大约2小时。将RP2D群组扩展到12名患者以获得另外的临床和药动学数据。
结论:SAHA与卡铂和紫杉醇以其推荐的剂量成功地给药。卡铂和紫杉醇没有改变SAHA的药动学。据信这是SAHA代谢物药动学数据的第一次报道。在晚期NSCLC患者中注意到了有希望的抗癌活性。
实施例9:SAHA与卡铂和紫杉醇的组合对于晚期恶性实体瘤患者的I
期试验的进一步结果
背景:已经进行了I期试验来评估SAHA、卡铂和紫杉醇的组合对于晚期恶性实体瘤患者的作用。
结果:下面给出剂量逐渐增加方案以及应计患者:
剂量水平 | VorinostatPO QD(第1-14天) | 卡铂(AUC)(第1天) | 紫杉醇(mg/m2)(第1天) | 患者数目 |
1 | 200mg | 6 | 175 | 4 |
2 | 300mg | 6 | 175 | 3 |
3 | 400mg | 6 | 175 | 3 |
4 | 400mg | 6 | 200 | 7 |
5 | 300mg BID(仅7天) | 6 | 200 | 3 |
包括的患者:
患者数目 | 28 |
年龄 | 30-76岁 |
性别 | 男性:21女性:7 |
肿瘤类型NSCLC头颈癌膀胱癌间皮瘤神经内分泌癌未知的原发性位点肿瘤 | 1842111 |
该试验包括总共76个治疗周期,其中19/20名患者接受至少2个治疗周期。对于周期1的毒性,没有任何剂量延迟。前20名患者当中有8名患者接受≥4个治疗周期。20名患者接受超过6个周期的SAHA。有两个DLT发作:3级呕吐(剂量水平4)和4级发热性中性白细胞减少(剂量水平4)。
包括的血液学毒性:
毒性(n=19) | 患者数目(Gr 3/4) |
中性白细胞减少 | 6/9 |
发热性中性白细胞减少 | 2 |
贫血 | 4(2级) |
血小板减少 | 3/1 |
包括的非血液学毒性:
毒性 | 患者的# |
呕吐 | 2级:2;3级:1 |
恶心 | 2级:2 |
神经病 | 2/3级:1/1 |
疲劳 | 2级:3 |
从该试验中,19名患者有资格进行反应评估。7名患者表现出目标反应(证实了6名)。7名患者表现出稳定疾病。14名NSCLC患者有资格进行反应评估。在这些患者中,6名患者表现出部分反应,4名患者表现出稳定疾病。在头颈癌中也注意到目标反应。在复发的间皮瘤中注意到稳定疾病。治疗结果如图1-8所示。
对于药动学分析,SAHA分析符合FDA准则,并且是有力的。单独的SAHA的药动学数据与Memorial Sloan-Kettering Cancer Center的出版数据很好地符合。有关SAHA代谢物4-苯胺基-4-氧代丁酸的第一个已知临床数据表明了酸代谢物的长的t1/2(4.1±1.3小时)。这样,该代谢物可用于评估口服给药方案。新近的数据表明,与第-4天相比,在第1天的清除率可能降低。这意味着随着长期给药,SAHA药动学发生纵向改变的可能性。药动学分析的结果如图9-10所示。
结论:SAHA、卡铂和紫杉醇的方案被良好耐受,并且表现出有希望的抗癌活性。对于II期试验,推荐的剂量是:SAHA 400mg PO QD(第1-14天);卡铂AUC 6(第1天);和紫杉醇200mg/m2(第1天);重复3周周期。已经计划进行随后的试验来:1)完全自然增长至扩展的II期剂量群组;2)完全相关的科学试验,例如PBMC中组蛋白或非组蛋白的蛋白的乙酰化;3)进行临床前试验来了解效力的机制方面;和4)开始针对晚期NSCLC的II期试验。
尽管本发明用具体的实施方案进行了具体表示和描述,但是本领域技术人员应当理解的是,在不偏离本发明所述含义的情况下可进行各种形式和细节上的变化。而本发明的范围由以下的权利要求规定。