CN101363783B

CN101363783B - 乳浊液预处理澄清剂及其制备方法

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Publication number: CN101363783B
Application number: CN2008101370886A
Authority: CN
Inventors: 郑冬梅; 孔保华; 王玉堂; 张宏伟
Original assignee: Northeast Agricultural University
Current assignee: Northeast Agricultural University
Priority date: 2008-09-10
Filing date: 2008-09-10
Publication date: 2010-12-15
Anticipated expiration: 2028-09-10
Also published as: CN101363783A

Abstract

乳浊液预处理澄清剂及其制备方法，它涉及一种澄清剂及其制备方法。为了解决光度法分析乳浊液时没有专用澄清剂，澄清时间长、操作繁琐、澄清效果不理想等问题，本发明公开了一种乳浊液预处理澄清剂及其制备方法。以乳浊液预处理澄清剂的体积为总体积，将占总体积5％～30％的质量浓度1％的十二烷基磺酸盐水溶液和强碱混合成A液，再将占总体积20％～50％的短链脂肪族酮、占总体积20％～50％的非离子型去垢剂混合成B液；然后将A液与B液混合，即制得乳浊液预处理澄清剂，其中乳浊液预处理澄清剂中强碱的浓度为0.02～0.06mol/L。本发明可广泛应用在乳制品、乳清、发酵剂、油水乳化液或部分化妆品等的分析预处理中。

Description

乳浊液预处理澄清剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种澄清剂及其制备方法，特别是用于乳浊液预处理的澄清剂及其制备方法。

背景技术

分光光度法由于方法简单，性能稳定，误差小，在物质的分析检测中应用十分广泛。但乳浊液因为呈现天然的乳白色，光线无法透射，不能直接用分光光度法进行分析检测，需要对乳浊液进行澄清预处理。目前，还没有一种专门针对乳浊液光度分析法澄清预处理的澄清剂。乳浊液澄清预处理的方法主要有离心分离法、酸沉法等。离心分离法、酸沉法存在澄清时间长、操作繁琐、效果不理想等缺点，如：离心分离法是利用高速离心机使乳浊液中的蛋白或脂与水分离，由于乳浊液溶质的粒度小，所以需要的离心时间长，而且对离心速度要求高；酸沉法是用化学方法使蛋白变性发生沉降，从而使溶液透明，但由于乳浊液一般是直径在10^-7m～10^-5m之间的小液滴(分散质)均匀分散在水相中，这些小液滴变性絮凝后自身沉降能力差，难与溶液完全分层，需要再进行离心分离或过滤才能得到透明溶液。

发明内容

本发明公开了一种乳浊液预处理澄清剂及其制备方法，解决了目前光度法分析乳浊液时没有专用的澄清剂的问题，使得乳浊液分析时澄清预处理时间变短、操作简单、澄清效果更理想。

乳浊液预处理澄清剂包括短链脂肪族酮、非离子型去垢剂、十二烷基磺酸盐水溶液和强碱；其中十二烷基磺酸盐水溶液的质量浓度为1％；短链脂肪族酮占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％，非离子型去垢剂占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％，十二烷基磺酸盐水溶液占乳浊液预处理澄清剂总体积的5％～30％，乳浊液预处理澄清剂中强碱的浓度为0.02～0.06mol/L。

乳浊液预处理澄清剂按以下方法制备：先将质量浓度为1％的十二烷基磺酸盐水溶液和强碱混合成A液；再将短链脂肪族酮和非离子型去垢剂混合成B 液；然后将A液与B液混合，即制得乳浊液预处理澄清剂；其中短链脂肪族酮占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％，非离子型去垢剂占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％、十二烷基磺酸盐水溶液占乳浊液预处理澄清剂总体积的5％～30％，乳浊液预处理澄清剂中强碱的浓度为0.02～0.06mol/L。

本发明中，短链脂肪族酮为亲脂物质，它与水相有很好的结合能力，易溶于水，能有效使脂肪与水融合；非离子型去垢剂能提高水相对蛋白和脂类的溶解性，加快溶液澄清速度；表面活性剂为十二烷基磺酸盐，它能加速乳浊液里的蛋白胶束的分解，中和蛋白质的电荷，使蛋白质的相互作用减弱，并使蛋白质变性，利于澄清；所用的强碱是氢氧化钠或氢氧化钾，它能提供氢氧根(OH ^-)，调节pH值，加速脂肪酯化，形成透明水溶液。乳浊液在强碱环境下不稳定，可往乳浊液澄清剂中加入金属离子螯合剂，它能降低乳浊液的pH值，同时螯合钙离子，使蛋白更容易变性，有利于澄清。

本发明所述的澄清剂与其他澄清方法和试剂比较，有以下优点：澄清迅速，只需要3～5分钟就能使乳浊液变澄清，而离心分离需要10000转/min的转速离心0.5小时以上；澄清处理后不需要其他的处理过程，如：离心、过滤等，避免了澄清过程带来的样品损失和繁琐的操作步骤；澄清效果好，乳浊液澄清后在300～800nm波段吸收很小、吸收值小于0.1；澄清剂性质在室温下稳定，4℃条件下可以长期储存，使用方便。本发明所述的澄清剂不含-SH、-HN₂等基团，可用于含有这些基团的乳浊液分析；不含钙离子、铁离子、镁离子、氯离子或者硝酸根等常见离子，可以用来处理含有的上述矿物质的乳制品、乳清、发酵剂、油水乳化液或化妆品等。在对含有蛋白和脂类的乳浊液进行测定的时候，根据乳浊液中脂肪含量的增大可以适当增加澄清剂中B液的含量，或者提高非离子型去垢剂的含量。

附图说明

图1是具体实施方式十七和其它澄清方法处理后的乳制品的紫外-可见光谱扫描谱图；

图2是具体实施方式十七对一些常见乳制品澄清后的紫外-可见光谱扫描谱图。

具体实施方式

具体实施方式一：本具体实施方式中乳浊液预处理澄清剂包括短链脂肪族酮、非离子型去垢剂、表面活性剂水溶液和强碱；其中表面活性剂水溶液的质量浓度为1％；短链脂肪族酮占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％，非离子型去垢剂占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％，表面活性剂水溶液占乳浊液预处理澄清剂总体积的5％～30％，乳浊液预处理澄清剂中强碱的浓度为0.02～0.06mol/L。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：短链脂肪族酮和非离子型去垢剂都为分析纯级。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一不同的是：短链脂肪族酮为丁酮。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一不同的是：短链脂肪族酮为戊二酮。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一不同的是：非离子型去垢剂为OP乳化剂。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一不同的是：非离子型去垢剂为司盘。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式一不同的是：非离子型去垢剂为吐温。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式一不同的是，表面活性剂为十二烷基磺酸盐。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式七不同的是：十二烷基磺酸盐为十二烷基磺酸钠。其它与具体实施方式七相同。

具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式七不同的是：十二烷基磺酸盐为十二烷基磺酸锂。其它与具体实施方式七相同。

具体实施方式十一：本实施方式与具体实施方式一不同的是：乳浊液预处理澄清剂中还包括金属离子螯合剂；金属离子螯合剂在乳浊液预处理澄清剂中的浓度为0.01～0.3mol/L。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式十二：本实施方式与具体实施方式十一不同的是：金属离子螯合剂为EDTA。其它与具体实施方式十一相同。

具体实施方式十三：本实施方式与具体实施方式一不同的是：强碱为氢氧化钠。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式十四：本实施方式与具体实施方式一不同的是：强碱为氢氧化钾。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式十五：本具体实施方式中乳浊液预处理澄清剂按以下方法制备：先将质量浓度为1％的表面活性剂水溶液和强碱混合成A液；再将短链脂肪族酮和非离子型去垢剂混合成B液；然后将A液与B液混合，即制得澄清剂；其中短链脂肪族酮占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％，非离子型去垢剂占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％、表面活性剂水溶液占乳浊液预处理澄清剂总体积的5％～30％，乳浊液预处理澄清剂中强碱的浓度为0.02～0.06mol/L。

具体实施方式十六：本具体实施方式中乳浊液预处理澄清剂按以下方法制备：将质量浓度为1％的表面活性剂水溶液、金属离子螯合剂和强碱混合成A液；再将短链脂肪族酮和非离子型去垢剂混合成B液；然后将A液与B液混合，即制得澄清剂；其中短链脂肪族酮占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％，非离子型去垢剂占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％、表面活性剂水溶液占乳浊液预处理澄清剂总体积的5％～30％，乳浊液预处理澄清剂中金属离子螯合剂的浓度为0.01～0.3mol/L；乳浊液预处理澄清剂中强碱的浓度为0.02～0.06mol/L。

本实施方式制备的乳浊液澄清剂适用于pH值在8～13范围内稳定的乳浊液。

具体实施方式十七：本具体实施方式中乳浊液预处理澄清剂由以下物质组成：体积百分数为40％的分析纯级丁酮、体积百分数为35％的分析纯级非离子型去垢剂OP乳化剂、体积百分数为25％的质量浓度1％的十二烷基磺酸钠水溶液、EDTA和氢氧化钠；其中，EDTA和氢氧化钠为固体，加入量以物质的量计：乳浊液预处理澄清剂中EDTA的浓度为0.2mol/L，乳浊液预处理澄清剂中氢氧化钠的浓度为0.025mol/L。

乳浊液预处理澄清剂按以下方法制备：将质量浓度为1％的十二烷基磺酸钠水溶液、EDTA和氢氧化钠混合成A液；再将丁酮和OP-乳化剂混合成B 液；然后将A液与B液混合，即制得澄清剂；其中丁酮占乳浊液预处理澄清剂总体积的40％，OP乳化剂占乳浊液预处理澄清剂总体积的35％、十二烷基磺酸钠水溶液占乳浊液预处理澄清剂总体积的25％，乳浊液预处理澄清剂中EDTA的浓度为0.2mol/L；乳浊液预处理澄清剂中氢氧化钠的浓度为0.025mol/L。

本实施方式制备的乳浊液预处理澄清剂黏度为15mPa.s，37℃，pH＝8～13。图1是本具体实施方式制备的乳浊液预处理澄清剂和其他澄清方法处理后的全脂超高温灭菌牛奶的的紫外-可见光谱特征扫描图，图1中曲线1为使用澄清剂澄清后的全脂超高温灭菌牛奶的波长扫描光谱特征曲线；图1中曲线2为使用5％三氯乙酸溶液澄清后的全脂超高温灭菌牛奶的波长扫描光谱特征曲线；图1中曲线3为使用卡瑞(Carrez)试剂澄清后的全脂超高温灭菌牛奶的波长扫描光谱特征曲线。由图1可以看出，本发明所述的澄清剂澄清效果与传统方法相近，全脂超高温灭菌牛奶经其澄清后，其波长扫描光谱图与传统澄清方法获得的澄清液的波长扫描光谱图相似，吸光值小于0.1，但本发明所述的澄清剂使用起来更简单、快捷：既不需要象离心澄清法那样使用高速离心设备，也无需象卡瑞试剂法澄清静置1个多小时，更不需要象酸沉法那样过滤，给待测样品带来损失。用本实施方式制备的澄清剂澄清各种乳制品溶液，澄清后在300～800nm区域进行光谱扫描，光谱特征如图2所示，其中，图2中曲线1为澄清剂的波长扫描光谱特征曲线，图2中曲线2为使用澄清剂澄清后的全脂超高温灭菌牛奶的波长扫描光谱特征曲线，图2中曲线3为使用澄清剂澄清后的脱脂超高温灭菌牛奶的波长扫描光谱特征曲线，图2中曲线4为使用澄清剂澄清后的50％酸奶乳浊液的波长扫描光谱特征曲线，曲线5为使用澄清剂澄清后的10％的契达干酪乳浊液的波长扫描光谱特征曲线。从图2可以看出，澄清剂及其处理后的样品具有较低的吸光率，在323nm处才有吸收峰。

本实施方式制备的乳浊液预处理澄清剂可以用于牛乳中总巯基含量的测定，也可以用于NH₂基含量的测定，还可以用于乳中脂肪酶活性的测定。

Claims

1.乳浊液预处理澄清剂，其特征在于乳浊液预处理澄清剂包括短链脂肪族酮、非离子型去垢剂、十二烷基磺酸盐水溶液和强碱；其中十二烷基磺酸盐水溶液的质量浓度为1％；短链脂肪族酮占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％，非离子型去垢剂占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％，十二烷基磺酸盐水溶液占乳浊液预处理澄清剂总体积的5％～30％，乳浊液预处理澄清剂中强碱的浓度为0.02～0.06mol/L。

2.根据权利要求1所述的乳浊液预处理澄清剂，其特征在于短链脂肪族酮和非离子型去垢剂都为分析纯级。

3.根据权利要求1所述的乳浊液预处理澄清剂，其特征在于短链脂肪族酮为丁酮或戊二酮。

4.根据权利要求1所述的乳浊液预处理澄清剂，其特征在于非离子型去垢剂为OP乳化剂、司盘或吐温。

5.根据权利要求1所述的乳浊液预处理澄清剂，其特征在于十二烷基磺酸盐为十二烷基磺酸钠或十二烷基磺酸锂。

6.根据权利要求1所述的乳浊液预处理澄清剂，其特征在于强碱为氢氧化钠或氢氧化钾。

7.根据权利要求1所述的乳浊液预处理澄清剂，其特征在于乳浊液预处理澄清剂中还包括金属离子螯合剂；金属离子螯合剂在乳浊液预处理澄清剂中的浓度为0.01～0.3mol/L。

8.根据权利要求7所述的乳浊液预处理澄清剂，其特征在于金属离子螯合剂为EDTA。

9.如权利要求1所述的乳浊液预处理澄清剂的制备方法，其特征在于乳浊液预处理澄清剂按以下方法制备：先将质量浓度为1％的十二烷基磺酸盐水溶液和强碱混合成A液；再将短链脂肪族酮和非离子型去垢剂混合成B液；然后将A液与B液混合，即制得乳浊液预处理澄清剂；其中短链脂肪族酮占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％，非离子型去垢剂占乳浊液预处理澄清剂总体积的20％～50％、十二烷基磺酸盐水溶液占乳浊液预处理澄清剂总体积的5％～30％，乳浊液预处理澄清剂中强碱的浓度为0.02～0.06mol/L。