CN102221527A - 一种乳澄清剂的制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种乳澄清剂的制备方法及其应用，该方法是：将重量份数为40-50份的0.1当量氢氧化钠、40-50份的亲脂性溶剂、80-100份的溶解剂、40-50份的表面活性剂放入搅拌机中均匀混合，制得乳澄清剂，取试管加入苯酚标准溶液或牛奶制品，其次在试管中加入4-6ml的碳酸盐缓冲液，然后在试管中加入0.05-0.2ml的2，6-二氯醌氯亚胺溶液和1-3滴的CuSO4溶液，再在试管中加入4-6ml制备好的澄清剂，在36-38℃的水浴锅中加热4-6min，最后在655nm的强光下检测乳制品的吸光度，完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。本发明方便快捷，简单，工作效率极高。
Description
技术领域
本发明涉及一种澄清剂的制备方法，特别涉及一种乳澄清剂的制备方法及其应用。
背景技术
在乳制品碱性磷酸酶的检测中，由于牛奶等乳制品成分复杂，含有乳蛋白、乳脂肪与乳糖等物质，因此具有很高的黏度与密度，呈现一种乳白色的悬浊液，国标法检测碱性磷酸酶(生鲜牛乳及其制品中碱性磷酸酶活度的测定方法NY/T 801-2004)，采用碱性磷酸酶催化生成苯酚与2，6-二氯醌氯亚胺溶液反应生成蓝色物质，在655nm有强烈光吸收，而要对其进行吸光度检测，就需要加入正丁醇萃取，还有离心分层、过滤等过程，然后在655nm的强烈光下进行比色，这种方法虽有正丁醇萃取，但在检测过程中，由于易与乳脂肪反应发生乳化，所以需要离心分层、过滤等步骤才能把上清液分离出来，同时需要离心机等设备，离心与过滤等步骤，这种方法反应速度慢，条件高，时间长。
发明内容
为了克服上述现有技术存在的缺陷，本发明提供一种乳澄清剂的制备方法及其应用，本发明方法特别是采用亲脂性溶剂和表面活性剂来溶解乳制品胶体的成分，降低牛奶等乳制品黏度，使其变得澄清透明，去除了乳制品中蛋白与脂肪的影响，减小了在可见光区的吸收值，可以直接进行分光光度计检测，本发明方法简单，能直接从乳制品中检测碱性磷酸酶。
本发明方法首先制备乳澄清剂，其次利用制备的乳澄清剂对乳制品的碱性磷酸酶活性进行检测。
制备乳澄清剂的具体方法是：将重量份数为40-50份的0.1当量氢氧化钠、40-50份的亲脂性溶剂、80-100份的溶解剂、40-50份的表面活性剂放入搅拌机中慢慢搅拌，使其均匀混合，稳定后，即制得乳澄清剂。
所述亲脂性溶剂为2-丁酮，稳定，易溶于水。
所述溶解剂为聚乙二醇辛基苯基醚(TritonX-100)，有活性作用。
所述表面活性剂为1％十二烷基硫酸钠溶液(SDS)。
检测乳制品碱性磷酸酶活性的具体方法是：(1)首先取试管加入苯酚标准溶液或牛奶制品；(2)其次在试管中加入4-6ml的碳酸盐缓冲液；(3)然后在试管中加入0.05-0.2ml的2，6-二氯醌氯亚胺溶液和1-3滴的CuSO4溶液，混合均匀；(4)再在试管中加入4-6ml制备好的澄清剂，混合均匀，在36-38℃的水浴锅中加热4-6min；(5)最后在655nm的强光下检测乳制品的吸光度，即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。
本发明方法能够降低乳制品的黏度与稳定性，快速使其颜色澄清透明，从而实现乳制品中碱性磷酸酶的快速检测，本发明制备的乳澄清剂还可以在其他类似牛奶物质的检测中发挥作用。
本发明的有益效果是：采用本发明的乳澄清剂，可以直接破坏乳制品中的蛋白质胶粒，溶解乳脂肪，使乳制品溶液澄清透明，与国标法相比，采用本发明方法检测乳制品的碱性磷酸酶含量，方便快捷，简单，不用采用离心机等设备，不用过滤等步骤，节约时间约20-30分钟，极大提高了工作效率。
具体实施方式：
为了使本发明的技术手段、创作特征与达成目的易于明白理解，以下结合具体实施例进一步阐述本发明
实施例1.
将40KG的0.1当量氢氧化钠、40KG的2-丁酮、80KG的TritonX-100、40KG的1％十二烷基硫酸钠溶液(SDS)放入搅拌机中慢慢搅拌，使其均匀混合，稳定后，即制得乳澄清剂。
(1)首先取试管加入苯酚标准溶液；(2)其次在试管中加入4ml的碳酸盐缓冲液；(3)然后在试管中加入0.05ml的2，6-二氯醌氯亚胺溶液和1滴的CuSO4溶液，混合均匀；(4)再在试管中加入4ml制备好的澄清剂，混合均匀，在36℃的水浴锅中加热4min；(5)最后在655nm的强光下检测乳制品的吸光度，即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。
实施例2.
将50KG的0.1当量氢氧化钠、50KG的2-丁酮、100KG的TritonX-100、50KG的1％十二烷基硫酸钠溶液(SDS)放入搅拌机中慢慢搅拌，使其均匀混合，稳定后，即制得乳澄清剂。
(1)首先取试管加入苯酚标准溶液；(2)其次在试管中加入5ml的碳酸盐缓冲液；(3)然后在试管中加入0.1ml的2，6-二氯醌氯亚胺溶液和2滴的CuSO4溶液，混合均匀；(4)再在试管中加入5ml制备好的澄清剂，混合均匀，在37℃的水浴锅中加热5min；(5)最后在655nm的强光下检测乳制品的吸光度，即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。
实施例3.
将45KG的0.1当量氢氧化钠、45KG的2-丁酮、90KG的TritonX-100、45KG的1％十二烷基硫酸钠溶液(SDS)放入搅拌机中慢慢搅拌，使其均匀混合，稳定后，即制得乳澄清剂。
(1)首先取试管加入苯酚标准溶液；(2)其次在试管中加入6ml的碳酸盐缓冲液；(3)然后在试管中加入0.2ml的2，6-二氯醌氯亚胺溶液和3滴的CuSO4溶液，混合均匀；(4)再在试管中加入6ml制备好的澄清剂，混合均匀，在38℃的水浴锅中加热6min；(5)最后在655nm的强光下检测乳制品的吸光度，即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。
实施例4.
将42KG的0.1当量氢氧化钠、42KG的2-丁酮、84KG的TritonX-100、42KG的1％十二烷基硫酸钠溶液(SDS)放入搅拌机中慢慢搅拌，使其均匀混合，稳定后，即制得乳澄清剂。
(1)首先取试管加入苯酚标准溶液；(2)其次在试管中加入4.5ml的碳酸盐缓冲液；(3)然后在试管中加入0.08ml的2，6-二氯醌氯亚胺溶液和2滴的CuSO4溶液，混合均匀；(4)再在试管中加入4.5ml制备好的澄清剂，混合均匀，在36℃的水浴锅中加热5min；(5)最后在655nm的强光下检测乳制品的吸光度，即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。
实施例5.
将46KG的0.1当量氢氧化钠、46KG的2-丁酮、92KG的TritonX-100、46KG的1％十二烷基硫酸钠溶液(SDS)放入搅拌机中慢慢搅拌，使其均匀混合，稳定后，即制得乳澄清剂。
(1)首先取试管加入苯酚标准溶液；(2)其次在试管中加入5.5ml的碳酸盐缓冲液；(3)然后在试管中加入0.15ml的2，6-二氯醌氯亚胺溶液和3滴的CuSO4溶液，混合均匀；(4)再在试管中加入5.5ml制备好的澄清剂，混合均匀，在37℃的水浴锅中加热6min；(5)最后在655nm的强光下检测乳制品的吸光度，即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。
实施例6.
将48KG的0.1当量氢氧化钠、48KG的2-丁酮、96KG的TritonX-100、48KG的1％十二烷基硫酸钠溶液(SDS)放入搅拌机中慢慢搅拌，使其均匀混合，稳定后，即制得乳澄清剂。
(1)首先取试管加入苯酚标准溶液；(2)其次在试管中加入6ml的碳酸盐缓冲液；(3)然后在试管中加入0.2ml的2，6-二氯醌氯亚胺溶液和2滴的CuSO4溶液，混合均匀；(4)再在试管中加入5.5ml制备好的澄清剂，混合均匀，在37℃的水浴锅中加热6min；(5)最后在655nm的强光下检测乳制品的吸光度，即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。
Claims (4)
1.一种乳澄清剂的制备方法及其应用，其特征在于，该方法首先制备乳澄清剂，其次利用制备的乳澄清剂对乳制品的碱性磷酸酶活性进行检测，具体方法是：
首先，将重量份数为40-50份的0.1当量氢氧化钠、40-50份的亲脂性溶剂、80-100份的溶解剂、40-50份的表面活性剂放入搅拌机中慢慢搅拌，使其均匀混合，稳定后，即制得乳澄清剂；
然后，(1)首先取试管加入苯酚标准溶液或牛奶制品；(2)其次在试管中加入4-6ml的碳酸盐缓冲液；(3)然后在试管中加入0.05-0.2ml的2，6-二氯醌氯亚胺溶液和1-3滴的CuSO4溶液，混合均匀；(4)再在试管中加入4-6ml制备好的澄清剂，混合均匀，在36-38℃的水浴锅中加热4-6min；(5)最后在655nm的强光下检测乳制品的吸光度，即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。
2.如权利要求1所述的一种乳澄清剂的制备方法及其应用，其特征在于：所述亲脂性溶剂为2-丁酮。
3.如权利要求1所述的一种乳澄清剂的制备方法及其应用，其特征在于：所述溶解剂为聚乙二醇辛基苯基醚。
4.如权利要求1所述的一种乳澄清剂的制备方法及其应用，其特征在于：所述表面活性剂为1％十二烷基硫酸钠溶液。
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| WO2005077201A1 (en) * | 2004-02-17 | 2005-08-25 | Burcon Nutrascience (Mb) Corp. | Preparation of canola protein isolate and use in aquaculture |
| CN101363783A (zh) * | 2008-09-10 | 2009-02-11 | 东北农业大学 | 乳浊液预处理澄清剂及其制备方法 |
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2011
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Patent Citations (3)
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|---|
| 《中国畜牧兽医》 20071231 惠永华 等 国标法对乳碱性磷酸酶的检测及其在巴氏消毒上的研究 68-69 1-4 第34卷, 第9期 * |
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