CN101357936A - 固相多肽合成曲普瑞林的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种固相多肽合成曲普瑞林的制备方法，包括如下步骤：以.RinkAmide AM树脂或.Rink Amide MBHA树脂起始原料，按照固相合成的方法依次连接具有保护基团的氨基酸，获得保护十肽树脂，其间依次脱去Fmoc－保护基团，同步进行脱侧链保护基团及切肽，获得粗品，粗品经C18(或C8)柱分离纯化，冻干后，制得曲普瑞林精品。本发明的方法，工艺稳定，原辅材料来源方便，生产周期短，收率高，质量稳定，生产成本低，接肽收率高，避免使用氟化氢等剧毒试剂，三废污染少，纯化收率高达25％以上，每步接肽收率均在98％以上；切肽后收率为：78.8％，总收率为：25.4％。

Description

固相多肽合成曲普瑞林的制备方法
技术领域
本发明涉及曲普瑞林的制备方法，尤其涉及固相多肽合成曲普瑞林的制备方法。
背景技术
中文名：曲普瑞林，醋酸曲普瑞林，英文名：Triptorelin，Triptorelin Acetate
结构式：pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2，分子式：C64H82N18O13分子量：1311.5
曲普瑞林临床用于治疗相关性激素病症，包括晚期前列腺癌、子宫内膜异位、中枢性性早熟症等。
曲普瑞林是一种促性腺激素释放激素类似物，主要作用于垂体前叶，大剂量应用初期可以引起一过性黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)释放增多，后期则导致垂体敏感性降低，使LH、FSH和性激素分泌减少。醋酸曲普瑞林用于治疗相关性激素病症，包括：晚期前列腺癌、子宫内膜异位、中枢性性早熟症。
1974年日本武田化工的Fujino Masahiko等人首先发明促黄体激素释放激素的十肽酰胺类似物的合成工艺。并在日本、德国、美国等国家申请专利，专利号分别为：JP19740027442、DE2446005、US4008209(液相法)。
目前的方法均存在着一定的缺陷，每一轮脱帽须用三氟醋酸，故接肽收率低，导致生产成本较高；三废污染多，并使用三氟醋酸进行纯化，污染环境，纯化收率一般在25％以下。因此目前的方法限制了醋酸曲普瑞林的大规模生产和使用。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是公开一种固相多肽合成曲普瑞林的制备方法，以克服现有技术存在的上述缺陷。
本发明的方法包括如下步骤：
(1)以.Rink Amide AM树脂或.Rink Amide MBHA树脂起始原料，按照固相合成的方法依次连接具有保护基团的氨基酸，获得保护十肽树脂，其间依次脱去Fmoc-保护基团，同步进行脱侧链保护基团；
(2)切肽，获得粗品；
(3)粗品经C18(或C8)柱分离纯化，冻干后，制得曲普瑞林精品。
按照本发明，所说的依次连接具有保护基团的氨基酸，获得保护十肽树脂，其间依次脱去Fmoc-保护基团的方法，包括如下步骤：
(1)制备Fmoc-Gly-树脂：
取所说的树脂用DMF浸泡0.5～2小时，使树脂充分溶胀，抽干，然后加入溶解于接肽试剂的Fmoc-Gly-OH(FW：297.3)、TBTU/HBTU(FW：321)和HOBt(FW：153，)的混合物，10～60℃反应0.5～4小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Gly-树脂；加入脱帽试剂，10～60℃反应5～60分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干。
所说的树脂取代量为：0.5-1.1mmol/g；
所说的接肽试剂为：NMM∶DMF＝1∶5～15，体积比，下同；
所说的脱帽试剂为：PIP∶DMF＝1∶2～5，体积比，下同；
混合物中：
树脂的重量体积浓度为5～20ml/g；
TBTU/HBTU的摩尔数为树脂的2～6倍；
HOBt的摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-Gly-OH的摩尔数为树脂的2～6倍。
树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g；
(2)制备Fmoc-Pro-Gly-树脂：
在步骤(1)的Fmoc-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，10～60℃反应5～60分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，然后加入溶解于接肽试剂的Fmoc-Pro-OH(FW：337.4)、TBTU/HBTU(FW：321)、HOBT(FW：153，)的混合物，10～60℃反应0.5～1.5小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Pro-Gly-树脂；加入脱帽试剂，10～60℃反应5～60分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干。
所说的树脂取代量为：0.5-1.1mmol/g；
所说的接肽试剂为：NMM∶DMF＝1∶5～15，体积比，下同；
所说的脱帽试剂为：PIP∶DMF＝1∶2～5，体积比，下同；
混合物中：
树脂的重量体积浓度为5～20ml/g；
TBTU/HBTU的摩尔数为树脂的2～6倍；
HOBT＝的摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-Pro-OH的摩尔数为树脂的2～6倍。
树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g；
(3)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(2)的Fmoc-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，10～60℃反应5～60分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Arg(Pbf)-OH(FW：648.8)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，10～60℃反应0.5～4小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Pro-Gly-树脂的重量体积浓度为5～20ml/g；
TBTU/HBTU的摩尔数为树脂的2～6倍。
HOBT摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为树脂的2～6倍。
Fmoc-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
(4)制备Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂
在步骤(3)的Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，10～60℃反应5～60分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Leu-OH(FW：321)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，10～60℃反应0.5～4小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-Leu-OH的摩尔数为树脂的2～6倍。
Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(5)制备Fmoc-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(4)的Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，10～60℃反应5～60分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-D-Trp-OH(FW：354)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，10～60℃反应0.5～4小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-D-Trp-OH的摩尔数为树脂的2～6倍。
Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(6)制备Fmoc-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(5)的Fmoc-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，10～60℃反应5～60分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Tyr(tBu)-OH(FW：459.5)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，10～60℃反应0.5～4小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-Tyr(tBu)-OH的摩尔数为树脂的2～6倍。
Fmoc-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(7)制备Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(6)的Fmoc-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，10～60℃反应5～60分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Ser(tBu)-OH(FW：383.4)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，10～60℃反应0.5～1.5小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-Ser(tBu)-OH的摩尔数为树脂的2～6倍。
Fmoc-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(8)制备Fmoc-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(7)的Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，10～60℃反应5～60分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Trp-OH(FW：426.5)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，10～60℃反应0.5～4小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-Trp-OH的摩尔数为树脂的2～6倍。
Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(9)制备Fmoc-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(8)的Fmoc-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，10～60℃反应5～60分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-His(Trt)-OH(FW：619.7)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，10～60℃反应0.5～4小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-His(Trt)-OH的摩尔数为树脂的2～6倍。
Fmoc-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(10)制备pGlu-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(9)的Fmoc-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，10～60℃反应5～60分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的pGlu-OH(FW：129)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，10～60℃反应0.5～4小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得pGlu-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂重量体积浓度为5～20ml/g；
pGlu-OH的摩尔数为树脂的2～6倍。
Fmoc-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上。
按照本发明，所说的切肽包括如下步骤：
将上述步骤(10)所获得的pGlu-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂加入预冷至0～10℃的切肽试剂中，20～30℃反应1～3小时，减压蒸除溶剂，加入乙醚沉淀，收集沉淀物，用乙醚洗，真空干燥，获得切肽后的粗品；
所说的切肽试剂为：
TFA/EDT/H2O/TIS＝800～680ml/35～18ml/35～18ml/10～3.6ml；
按照本发明，粗品经C18(或C8)柱分离纯化分离纯化的方法包括如下步骤：
将曲普瑞林粗品溶于乙酸中，过滤，滤液经C18(或C8)柱纯化，流速为100-650ml/min；检测波长为：280nm；用液相色谱仪跟踪收集所需要的流出液，样品峰合并后去盐，冻干，获得成品，总收率25.4(以树脂的60mmol计)。
乙酸的重量浓度为0.5～10％，乙酸中曲普瑞林粗品的重量浓度为1～50％；
流动相为：0.1～1M醋酸盐或磷酸盐或三氟乙酸∶乙腈＝9～6∶1～4；
本发明的曲普瑞林工艺路线有下列特点，具备规模化生产能力，工艺稳定，原辅材料来源方便，生产周期短，生产成本低，三废少，收率高，质量稳定，生产成本低，极具市场竞争力，接肽收率高(每步接肽收率为≥98％)，降低了成本，采用切肽试剂(TFA/EDT/H2O/TIS)进行切肽，加入乙醚沉淀粗品的方法，避免使用氟化氢等剧毒试剂，三废污染少，且提高收率，采用C18(或C8)柱进行分离纯化，避免使用TFA(三氟醋酸)进行纯化，减少三废，纯化收率高达25％以上，每步接肽收率均在98％以上；切肽后收率为：78.8％，总收率为：25.4％。
具体实施方式
                       实施例1
实施例和前述过程中所采用的原料列表如下：
  No   品名   生产厂商
  1   树脂   天津和成科技有限公司
  2   Fmoc-Gly-OH   苏州天马医药集团
  3   Fmoc-Pro-OH   苏州天马医药集团
  4   Fmoc-Arg(Pbf)-OH   苏州天马医药集团
  5   Fmoc-Leu-OH   苏州天马医药集团
  6   Fmoc-D-Trp-OH   苏州天马医药集团
  7   Fmoc-D-Trp(Boc)-OH   苏州天马医药集团
  8   Fmoc-Tyr(tBu)-OH   苏州天马医药集团
  9   Fmoc-Ser(tBu)-OH   苏州天马医药集团
  10   Fmoc-Trp-OH   苏州天马医药集团
  11   Fmoc-Trp(Boc)-OH   苏州天马医药集团
  12   Fmoc-His(Trt)-OH   苏州天马医药集团
  13   p-Glu-OH   苏州天马医药集团
  14   1-羟基苯并三氮唑(HOBt)   苏州天马医药集团
  15   苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯(TBTU)   苏州天马医药集团
  16   苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)   苏州天马医药集团
  17   三氟乙酸(TFA)   Merck公司
  18   N-甲基吗啡啉(NMM)   Merck公司
  19   二甲基甲酰胺(DMF)   上海化学试剂公司
  20   无水乙醇   上海振兴化工一厂
  21   六氢吡啶(PIP)   上海化学试剂公司
  22   乙二硫醇(EDT)   Merck公司
  23   三异丙基硅烷(TIS)   Merck公司
实施例中：
接肽试剂为：NMM∶DMF＝1∶10，体积比；
脱帽试剂为：PIP∶DMF＝1∶3.5，体积比；
合成肽链
制备Fmoc-Gly-树脂：
1)取75g树脂(0.8mmol/g树脂，60mmol)，用1000mlDMF浸泡1小时，使树脂充分溶胀，抽干。
2)取71g(FW：297.3240mmol)Fmoc-Gly-OH、77.1g(FW：321，240mmol)TBTU/HBTU、36.6g(FW：153，240mmol)HOBT，用750ml接肽试剂溶解，加入反应容器，25℃反应l小时。
3)抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。
制备Fmoc-Pro-Gly-树脂：
1)加1000ml脱帽试剂，25℃反应15分钟，抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。
2)取81g(FW：337.4，240mmol)Fmoc-Pro-OH、77.1g(FW：321，240mmol)TBTU/HBTU、36.6g(FW：153，240mmol)HOBT，用750ml接肽试剂溶解，加入反应容器，25℃反应1小时。
3)抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。
制备Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
1)加1000ml脱帽试剂，25℃反应15分钟，抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。
2)加入155.7g(FW：648.8，240mmol)Fmoc-Arg(Pbf)-OH、77.1g(FW：321，240mmol)TBTU/HBTU、36.6g(FW：153，240mmol)HOBT，用750ml接肽试剂溶解，加入反应容器，25℃反应1小时。
3)抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。
制备Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
加1000ml脱帽试剂，25℃反应15分钟，抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。加84.9g(FW：354，240mmol)Fmoc-Leu-OH、77.1g(FW：321，240mmol)TBTU/HBTU、36.6g(FW：153，240mmol)HOBT，用750ml接肽试剂溶解，加入反应容器，25℃反应1小时。其余操作同上。
制备Fmoc-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
加1000ml脱帽试剂，25℃反应15分钟，抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。加84.9g(FW：354，240mmol)Fmoc-D-Trp-OH、77.1g(FW：426.5，240mmol)TBTU/HBTU、36.6g(FW：153，240mmol)HOBT，用750ml接肽试剂溶解，加入反应容器，25℃反应1小时。其余操作同上。
制备Fmoc-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
加1000ml脱帽试剂，25℃反应15分钟，抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。加110.4g(FW：459.5，240mmol)Fmoc-Tyr(tBu)-OH、77.1g(FW：321，240mmol)TBTU/HBTU、36.6g(FW：153，240mmol)HOBT，用750ml接肽试剂溶解，加入反应容器，25℃反应1小时。其余操作同上。
制备Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
加1000ml脱帽试剂，25℃反应15分钟，抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。加92.1g(FW：383.4，240mmol)Fmoc-Ser(tBu)-OH、77.1g(FW：321，240mmol)TBTU/HBTU、36.6g(FW：153，240mmol)HOBT，用750ml接肽试剂溶解，加入反应容器，25℃反应1小时。
制备Fmoc-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
加1000ml脱帽试剂，25℃反应15分钟，抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。加126.3g(FW：426.5，240mmol)Fmoc-Trp-OH、77.1g(FW：321，240mmol)TBTU/HBTU、36.6g(FW：153，240mmol)HOBT，用750ml接肽试剂溶解，加入反应容器，25℃反应1小时。其余操作同上。
制备Fmoc-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
加1000ml脱帽试剂，25℃反应15分钟，抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。加148.7g(FW：619.7，240mmol)Fmoc-His(Trt)-OH、77.1g(FW：321，240mmol)TBTU/HBTU、36.6g(FW：153，240mmol)HOBT，用750ml接肽试剂溶解，加入反应容器，25℃反应1小时。加入1000ml脱帽试剂，25℃反应10分钟。
制备pGlu-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂
加1000ml脱帽试剂，25℃反应15分钟，抽干，分别用DMF、无水乙醇和DMF各洗涤三次，抽干。加30.9g(FW：129，240mmol)pGlu-OH、77.1g(FW：321，240mmol)TBTU/HBTU、36.6g(FW：153，240mmol)HOBT，用750ml接肽试剂溶解，加入反应容器，25℃反应1小时。
切肽：
将保护十肽转移至1000ml反应器中，加入事先配制好并预冷至约5℃的试剂(TFA/EDT/H2O/TIS＝680ml/18ml/18ml/3.6ml)，25℃搅拌2小时。减压除溶剂至小体积，加入1000ml冷乙醚沉淀，离心收集，用无水乙醚洗后，真空干燥。得曲普瑞林粗品62g(47.3mmol)，收率78.8％。
分离纯化：
将曲普瑞林粗品溶于5％乙酸中，过滤，滤液经C18柱纯化，流动相：0.1MNH4Ac∶乙腈(7.5∶2.5，体积比)；流速为500ml/min；检测波长为：280nm；用液相色谱仪跟踪收集所需要的流出液，样品峰合并后去盐，冻干，约得20g白色块状物成品(MW：1311.5，15.25mmol)，总收率25.4％(以树脂的60mmol计)。

Claims (8)

1.固相多肽合成曲普瑞林的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)以.Rink Amide AM树脂或.Rink Amide MBHA树脂起始原料，按照固相合成的方法依次连接具有保护基团的氨基酸，获得保护十肽树脂，其间依次脱去Fmoc-保护基团，同步进行脱侧链保护基团；
(2)切肽，获得粗品；
(3)粗品经C18(或C8)柱分离纯化，冻干后，制得曲普瑞林精品。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所说的依次连接具有保护基团的氨基酸，获得保护十肽树脂，其间依次脱去Fmoc-保护基团的方法，包括如下步骤：
(1)制备Fmoc-Gly-树脂：
取所说的树脂用DMF浸泡，使树脂溶胀，抽干，然后加入溶解于接肽试剂的Fmoc-Gly-OH(FW：297.3)、TBTU/HBTU(FW：321)和HOBt(FW：153，)的混合物，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Gly-树脂；加入脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干；
所说的接肽试剂为：NMM∶DMF＝1∶5～15，体积比，下同；
所说的脱帽试剂为：PIP∶DMF＝1∶2～5，体积比，下同；
混合物中：
树脂的重量体积浓度为5～20ml/g；
TBTU/HBTU的摩尔数为树脂的2～6倍；
HOBt的摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-Gly-OH的摩尔数为树脂的2～6倍；
树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g；
(2)制备Fmoc-Pro-Gly-树脂：
在步骤(1)的Fmoc-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，然后加入溶解于接肽试剂的Fmoc-Pro-OH(FW：337.4)、TBTU/HBTU(FW：321)、HOBT(FW：153，)的混合物，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Pro-Gly-树脂；加入脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干。
所说的接肽试剂为：NMM∶DMF＝1∶5～15，体积比；
所说的脱帽试剂为：PIP∶DMF＝1∶2～5，体积比；
混合物中：
树脂的重量体积浓度为5～20ml/g；
TBTU/HBTU的摩尔数为树脂的2～6倍；
HOBT＝的摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-Pro-OH的摩尔数为树脂的2～6倍；
树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g；
(3)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(2)的Fmoc-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Arg(Pbf)-OH(FW：648.8)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Pro-Gly-树脂的重量体积浓度为5～20ml/g；
TBTU/HBTU的摩尔数为树脂的2～6倍。
HOBT摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
(4)制备Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂
在步骤(3)的Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，20～30℃反应5～30分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Leu-OH(FW：321)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，20～30℃反应0.5～1.5小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-Leu-OH的摩尔数为树脂的2～6倍。
Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(5)制备Fmoc-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(4)的Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，20～30℃反应5～30分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-D-Trp-OH(FW：354)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，20～30℃反应0.5～1.5小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-D-Trp-OH的摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(6)制备Fmoc-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(5)的Fmoc-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，20～30℃反应5～30分钟，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Tyr(tBu)-OH(FW：459.5)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，20～30℃反应0.5～1.5小时，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-Tyr(tBu)-OH的摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(7)制备Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(6)的Fmoc-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Ser(tBu)-OH(FW：383.4)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-Ser(tBu)-OH的摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(8)制备Fmoc-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(7)的Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Trp-OH(FW：426.5)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-Trp-OH的摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(9)制备Fmoc-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(8)的Fmoc-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的Fmoc-His(Trt)-OH(FW：619.7)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得Fmoc-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂重量体积浓度为5～20ml/g；
Fmoc-His(Trt)-OH的摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上；
(10)制备pGlu-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂：
在步骤(9)的Fmoc-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂中，加入脱帽试剂，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，加入用接肽试剂溶解的pGlu-OH(FW：129)、TBTU/HBTU和HOBT的混合物，反应，抽干，分别用DMF和乙醇洗涤，抽干，获得pGlu-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂；
混合物中：
Fmoc-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂重量体积浓度为5～20ml/g；
pGlu-OH的摩尔数为树脂的2～6倍；
Fmoc-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂的重量与脱帽试剂的加入量的比例为5～20ml/g脱帽试剂；
其余操作以及工艺条件同上。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所说的切肽包括如下步骤：将权利要求2步骤(10)所获得的pGlu-His(Trt)-Trp-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-树脂加入预冷至0～10℃的切肽试剂中，反应，收集切肽后的粗品；
所说的切肽试剂为：
TFA/EDT/H2O/TIS＝800～680ml/35～18ml/35～18ml/10～3.6ml。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，粗品经C18(或C8)柱分离纯化分离纯化的方法包括如下步骤：
将曲普瑞林粗品溶于乙酸中，过滤，滤液经C18(或C8)柱纯化，流速为100-650ml/min；检测波长为：280nm；用液相色谱仪跟踪收集所需要的流出液，样品峰合并后去盐，冻干，获得成品，总收率25.4(以树脂的60mmol计)；
流动相为：0.1～1M醋酸盐或磷酸盐或三氟乙酸∶乙腈＝9～6∶1～4。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，乙酸的重量浓度为0.5～10％，乙酸中曲普瑞林粗品的重量浓度为1～50％。
6.根据权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，脱帽反应温度为10～60℃，反应时间为5～30分钟。
7.根据权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，接肽反应温度为10～60℃，反应时间为0.5～1.5小时。
8.根据权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，切肽温度为10～60℃，时间为1～6小时。
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Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102260326A (zh) * 2011-06-08 2011-11-30 成都圣诺科技发展有限公司 卡贝缩宫素的制备方法
CN103012564A (zh) * 2013-01-15 2013-04-03 成都天台山制药有限公司 高纯度的曲普瑞林及其纯化方法
CN103012565A (zh) * 2013-01-15 2013-04-03 成都天台山制药有限公司 一种曲普瑞林及其固相合成制备方法
CN103122023A (zh) * 2013-03-08 2013-05-29 深圳翰宇药业股份有限公司 一种曲普瑞林的纯化方法
CN103163258A (zh) * 2011-12-09 2013-06-19 山东绿叶制药有限公司 一种测定痕量曲普瑞林的方法
CN104086626A (zh) * 2014-07-14 2014-10-08 上海苏豪逸明制药有限公司 一种固相多肽合成抗炎十肽的制备方法
CN104387454A (zh) * 2014-12-08 2015-03-04 兰州大学 一种片段缩合制备曲普瑞林的方法
CN104761620A (zh) * 2015-01-06 2015-07-08 苏州天马医药集团天吉生物制药有限公司 曲普瑞林的纯化制备方法
CN106397542A (zh) * 2016-10-24 2017-02-15 合肥国肽生物科技有限公司 特异性微波合成制备醋酸曲普瑞林的方法
CN107176975A (zh) * 2017-06-12 2017-09-19 丹东中科润华生物科技有限公司 一种固相合成戈那瑞林的方法
CN114685616A (zh) * 2020-12-31 2022-07-01 哈尔滨三联药业股份有限公司 醋酸曲普瑞林的合成方法
CN114685615A (zh) * 2020-12-31 2022-07-01 哈尔滨三联药业股份有限公司 醋酸曲普瑞林多肽粗品的纯化方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1254484C (zh) * 2004-04-30 2006-05-03 吉林省一心制药有限公司 醋酸奥曲肽的固相合成方法
CN1865282B (zh) * 2005-05-18 2010-09-29 周达明 固相多肽合成特利加压素的制备方法
CN1865280B (zh) * 2005-05-20 2012-03-21 上海苏豪逸明制药有限公司 固相多肽合成亮丙瑞林的制备方法

Cited By (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102260326A (zh) * 2011-06-08 2011-11-30 成都圣诺科技发展有限公司 卡贝缩宫素的制备方法
CN103163258A (zh) * 2011-12-09 2013-06-19 山东绿叶制药有限公司 一种测定痕量曲普瑞林的方法
CN103012564A (zh) * 2013-01-15 2013-04-03 成都天台山制药有限公司 高纯度的曲普瑞林及其纯化方法
CN103012565A (zh) * 2013-01-15 2013-04-03 成都天台山制药有限公司 一种曲普瑞林及其固相合成制备方法
CN103012564B (zh) * 2013-01-15 2013-11-13 成都天台山制药有限公司 高纯度的曲普瑞林及其纯化方法
CN103012565B (zh) * 2013-01-15 2014-07-16 成都天台山制药有限公司 一种曲普瑞林及其固相合成制备方法
CN103122023B (zh) * 2013-03-08 2016-03-30 深圳翰宇药业股份有限公司 一种曲普瑞林的纯化方法
CN103122023A (zh) * 2013-03-08 2013-05-29 深圳翰宇药业股份有限公司 一种曲普瑞林的纯化方法
CN104086626A (zh) * 2014-07-14 2014-10-08 上海苏豪逸明制药有限公司 一种固相多肽合成抗炎十肽的制备方法
CN104086626B (zh) * 2014-07-14 2016-10-19 上海苏豪逸明制药有限公司 一种固相多肽合成抗炎十肽的制备方法
CN104387454A (zh) * 2014-12-08 2015-03-04 兰州大学 一种片段缩合制备曲普瑞林的方法
CN104387454B (zh) * 2014-12-08 2017-07-21 兰州大学 一种片段缩合制备曲普瑞林的方法
CN104761620A (zh) * 2015-01-06 2015-07-08 苏州天马医药集团天吉生物制药有限公司 曲普瑞林的纯化制备方法
CN106397542A (zh) * 2016-10-24 2017-02-15 合肥国肽生物科技有限公司 特异性微波合成制备醋酸曲普瑞林的方法
CN107176975A (zh) * 2017-06-12 2017-09-19 丹东中科润华生物科技有限公司 一种固相合成戈那瑞林的方法
CN114685616A (zh) * 2020-12-31 2022-07-01 哈尔滨三联药业股份有限公司 醋酸曲普瑞林的合成方法
CN114685615A (zh) * 2020-12-31 2022-07-01 哈尔滨三联药业股份有限公司 醋酸曲普瑞林多肽粗品的纯化方法
CN114685616B (zh) * 2020-12-31 2024-03-29 哈尔滨三联药业股份有限公司 醋酸曲普瑞林的合成方法

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