CN101352120B - 一种植物种子表面消毒方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种植物种子表面消毒方法。本发明方法包括如下步骤：用消毒液浸泡所述种子，过滤去除所述消毒液；再用无菌水清洗所述种子，过滤去除残留的所述消毒液和所述无菌水，得到消过毒的种子。本发明消毒方法克服了植物种子因体积小而表面消毒难的困难，实现了对粉尘状植物种子进行直接的表面消毒，摆脱了现有技术中必须消毒果荚的束缚。实验结果表明，本发明消毒方法的效果好，消毒后的种子因污染而萌发失败的比率极低。本发明方法还有操作简单、成本低廉、省时省力的特点。因此，本发明消毒方法具有重要的应用推广价值。

Description

一种植物种子表面消毒方法
技术领域
本发明涉及一种植物种子表面消毒方法，特别是涉及一种粉尘状植物种子的表面消毒方法。
背景技术
兰科植物约有775属，19500种，广布于热带、亚热带和温带，主产南美和亚洲热带。我国有166属1000多种，主要分布在江南各省，以广东、海南、云南和台湾居多。兰科植物是一个特殊的植物类群，是被子植物中最为进化的科之一。其中白芨、天麻等可药用；少数可作香料植物，如香子兰等；而大多数种类色彩艳丽、花期长，可作为名贵的观赏植物，具有很高的商业价值。
在我国列入重点保护的1300种濒危植物中，兰科植物占了1200余种，达90％以上，主要因为自然条件下兰科植物种子萌发困难，萌发率比较低，一般不超过5％。为了满足日益增长的兰花市场需求，人们开始大量的人工栽培兰花。
在兰花的栽培技术中，一个必不可少的步骤就是兰花种子的消毒。兰科植物的种子非常小，一个蒴果中有几万到上百万粒种子，呈粉尘状。目前，一般采取先消毒果荚，再剖开果皮取种子的办法；但是当完全成熟的果荚开裂后，种子暴露在外面，对其进行直接表面消毒就变得非常困难，因种子小且轻，很难操作。如果不进行种子表面消毒，则容易被污染，严重影响种子的萌发率。
发明内容
本发明的目的是提供一种植物种子表面消毒方法，特别是一种粉尘状植物种子的表面消毒方法。
本发明所提供的植物种子表面消毒方法，包括如下步骤：用消毒液浸泡种子，过滤去除所述消毒液；再用无菌水清洗所述种子，过滤去除残留的所述消毒液和所述无菌水，得到消过毒的种子。
消毒液为一般现有的用于植物种子消毒的消毒液均可，如次氯酸钠和次氯酸钙溶液等。
所述过滤中可以使用滤膜。
所述滤膜可以为市面上的多种滤膜，只要满足其孔径大小小于所述植物种子的大小即可，具体可以为棉花。
所述方法中可以使用离心管，具体是将种子置于所述离心管内，然后进行上述消毒操作。
所述方法还可以包括如下步骤：用灭菌溶液或水将所述消过毒的种子混匀，得到种子悬浮液，再用移液器将所述种子悬浮液从所述离心管中移出。
所述溶液具体可以为琼脂溶液。
本发明方法一般适合于粉尘状植物种子的消毒，如兰科植物种子的表面消毒。另外，如苦苣苔科等的一些粉尘植物种子也可以利用本发明的方法进行消毒。
本发明消毒方法克服了植物种子因体积小而表面消毒难的困难，实现了对粉尘状植物种子进行直接的表面消毒，摆脱了现有技术中必须消毒果荚的束缚。实验结果表明，本发明消毒方法的效果好，消毒后的种子因污染而萌发失败的比率极低。本发明方法还有操作简单、成本低廉、省时省力的特点。因此，本发明消毒方法具有重要的应用推广价值。
具体实施方式
实施例1、兰花种子消毒
本实施例中以五唇兰(Doritis pulcherrima Lindl.)的种子为例，说明本发明方法。
一、消毒处理
本实验中用到的实验器皿(如离心管、小块棉花、枪头等)均经过高压灭菌。
本消毒方法包括消毒液处理和无菌水洗涤步骤，均在超净工作台上进行。
(1)消毒液处理：取完全成熟的果荚，剖开果皮取出种子，将种子置于10.0ml离心管中，再向离心管中加入消毒液(消毒液为5％(质量百分含量)的次氯酸钙溶液，用蒸馏水定容)，使消毒液液面没过种子，盖上离心管的盖子，放置20-40min，期间摇动混匀3-5次；用在火焰中烧过的镊子将小块无菌棉花块推入离心管中，慢慢推至离心管中下部，将离心管的底部向上倾斜，使消毒液流出棉花块。
(2)洗涤：向步骤(1)的离心管中加入无菌水，用镊子将棉花块向上拉，无菌水随即流入离心管底部并浸没种子，用手转动数次；再将离心管的底部向上倾斜，并将棉花块朝管底方向推入，使残留的消毒液和无菌水流出棉花块。如此重复洗涤4-5次。得到消毒的种子。
二、消毒效果的验证
用1-2ml0.1％琼脂溶液(0.1g琼脂溶于100ml水中，并高压灭菌)冲洗步骤一中所述棉花块，然后取出棉花块，并将上述1-2ml0.1％琼脂溶液与种子混匀，得到种子悬浮液；然后用移液枪将种子悬浮液吸取至培养基表面，将培养皿(或培养瓶)封口，并水平方向旋转数次，使种子均匀地分布在培养基表面，在温度为25±1℃、相对湿度为50±1％、光强为24±1μmol·m-2·s-1、光暗周期为12h光照/12h黑暗下进行培养。
所述培养基的组成如表1所示：
表1、培养基的组成
Figure G2008101184346D00031
其中，土豆泥的制备方法如下：将土豆洗净后削皮，用刀切成小块，然后放入组织捣碎机中捣碎，得到的匀浆即为土豆泥。
实验设三次重复。结果表明，所有种子都正常萌发，均没有染菌现象。

Claims (4)

1.一种植物种子表面消毒方法，包括如下步骤：用消毒液浸泡种子，过滤去除所述消毒液；再用无菌水清洗所述种子，过滤去除残留的所述消毒液和所述无菌水，得到消过毒的种子；
所述方法中使用离心管，所述种子位于所述离心管内；
所述方法还包括如下步骤：用灭菌溶液或水将所述消过毒的种子混匀，得到种子悬浮液，再用移液器将所述种子悬浮液从所述离心管中移出；
所述溶液为琼脂溶液；
所述植物种子为粉尘状植物种子。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述过滤中使用滤膜。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述滤膜为棉花。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述植物为兰科植物。
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