CN101348754B - 一种螺旋藻提取液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种螺旋藻提取液和制备方法，提取液中的营养成分主要包括螺旋藻叶绿素、螺旋藻藻蓝蛋白、螺旋藻多糖等，其中螺旋藻叶绿含量超过8％。其制备方法主要包括提取叶绿素、藻蓝蛋白的提取、游离氨基酸、寡肽、寡糖的提取、螺旋藻多糖的提取等过程，尤其是在提取螺旋藻叶绿素的过程中经过糊精包埋。该制备方法提取充分，并保留了螺旋藻叶绿素成分，可用于饮料尤其是啤酒添加，且不污染环境，操作方便，易用于工业化生产。
Description
技术领域
本发明属于海洋生物加工技术领域，更明确地说是涉及一种螺旋藻中提取螺旋藻叶绿素、螺旋藻藻蓝蛋白、螺旋藻多糖的提取液及其制备方法。
背景技术
螺旋藻是一种含有丰富的蛋白质、多糖矿物质、维生素以及多种微量元素等的海洋绿色生物，多年来被应用于药品、保健品和饮料等。但是，以螺旋藻干粉制成的片剂和胶囊居多，即将螺旋藻干粉直接添加到食品中，导致口感不好，也不利用消化和吸收，尤其是在饮料中产生沉淀和悬浮物。而且，由螺旋藻提取的主要成分多为藻蓝蛋白和多糖，而缺乏螺旋藻叶绿素成分。同时，螺旋藻叶绿素为碱性物质，在酸性饮料中会析出而使营养成分受到破坏，难以溶解在饮料中，所以为了保留该成分必须进行特殊处理。
而现有技术中对于螺旋藻中叶绿素成分的保留的提取液及制备方法和添加到饮料中的应用，都没有相关技术。
发明内容
本发明的目的，就在于克服上述缺点和不足，提供一种螺旋藻中提取螺旋藻叶绿素、螺旋藻藻蓝蛋白、螺旋藻多糖的提取液及其制备方法。
本发明所述的螺旋藻提取液，主要含有螺旋藻叶绿素、螺旋藻藻蓝蛋白、螺旋藻多糖。
本发明所述的螺旋藻提取液的制备方法，提取方法主要包括提取叶绿素、藻蓝蛋白的提取、组合酶解、热水提取等过程，即包括(1)螺旋藻叶绿素的提取及其铁钠盐的制备：取螺旋藻粉在无水或30～100w/w(重量比)水的食用酒精中浸泡，藻和酒精混合比例最好为1∶2，室温下，5～48小时，反复提取，离心取上清液，获叶绿素；叶绿素经皂化和铁盐取代，得稳定的螺旋藻叶绿素铁钠盐，再经过糊精包埋，包埋率达到95％以上；
(2)藻蓝蛋白的提取：取提取过叶绿素的螺旋藻粉，用蒸馏水或去离子水浸泡，藻和水混合比例最好为1∶2，w/w(重量比)，室温下搅拌过夜，超声波反复提取，离心取上清液，获藻蓝蛋白，喷雾干燥得水溶性藻蓝蛋白产物；
(3)游离氨基酸、寡肽、寡糖的提取：提取藻蓝蛋白后的藻渣加蒸馏水或去离子水2-5倍，加溶菌酶和果胶酶或其它纤维素酶水解最好1-2小时，再分别加胃蛋自酶、木瓜蛋自酶、淀粉酶、胰蛋白酶各水解最好0.5-1小时，离心，取上清液，获游离氨基酸、寡肽、寡糖；
(4)螺旋藻多糖的提取：酶解后的藻渣加蒸馏水或去离子水2-5倍，在80℃以上热水中搅拌提取，酶解蛋白质成分，离心合并上清液，获螺旋藻多糖。
该发明还可以包括(5)饮料用尤其啤酒专用螺旋藻提取液制备。将螺旋藻叶绿素、螺旋藻藻蓝蛋白和螺旋藻多糖等成分适当组合得到专门用于饮料特别是啤酒生产的螺旋藻提取液产品。
上述螺旋藻制备方法提取充分，所得营养液包括螺旋藻叶绿素、螺旋藻藻蓝蛋白、螺旋藻多糖等成分，其中螺旋藻叶绿素含量达到8％以上。
本发明所述的螺旋藻提取液及其制备方法，提取过程中保留了螺旋藻叶绿素成分，并可用于饮料尤其是啤酒添加，且不污染环境，操作方便，易用于工业化生产。
附图说明
图1为螺旋藻叶绿素的提取及其铁钠盐的制备工艺流程。
具体实施方式
实施例1。参照图1说明本发明所述的螺旋藻提取液的制备方法。
第一步，螺旋藻叶绿素的提取及其铁钠盐的制备。
用食用无水酒精提取螺旋藻中的叶绿素，取螺旋藻粉5g在无水食用酒精中浸泡，其中藻∶酒精为1∶2，w/w，室温下过夜，反复提取2-4次，离心取上清液，获叶绿素；再用5％NaOH溶液皂化，石油醚萃取，在酸性条件下用11％FeSO4溶液实现铁镁置换，沉淀物经丙酮溶解后，加2％NaOH的乙醇溶液成盐，过滤，水洗，真空干燥，制成螺旋藻叶绿素铁钠盐，经过β-环状糊精包埋，包埋率达到95％，则叶绿素提取率达到66.1％，制品得率占藻粉的1.2％。
第二步，藻蓝蛋白的提取。
取提取过叶绿素的螺旋藻粉5g，用蒸馏水浸泡，藻∶水为1∶2，w/w(重量比)，室温下搅拌过夜，加入复合酶1.5％，该复合酶∶藻为1.5∶100，w/w为纤维素酶组合物，用以破坏细胞壁。超声波反复提取2-3次，超声波功率为900W，超声每次提取时间25min。离心取上清液，获藻蓝蛋白水溶液；
工艺流程为：称量螺旋藻藻粉→浸泡、搅拌→超声波反复破碎细胞→离心取上清液→藻蓝蛋白产物。
第三步，游离氨基酸、寡肽、寡糖的提取。
提取藻蓝蛋白后的藻渣加蒸馏水或去离子水2-5倍，加溶菌酶和果胶酶或其它纤维素酶水解最好1-2小时，再分别加胃蛋自酶、木瓜蛋自酶、淀粉酶、胰蛋白酶各水解最好0.5-1小时，离心，取上清液，获游离氨基酸、寡肽、寡糖。
第四步，螺旋藻多糖的提取。
酶解后的藻渣加蒸馏水2-5倍，在80℃搅拌，将提取液经3000r·min-1离心20min，留上清液，将残渣进行2次提取，将提取液经3000r·min-1离心20min。将两次离心所得上清液合并，加入中性蛋白酶，蛋白酶∶藻为1.0∶100，w/w，以酶解蛋白。在45℃反应3小时，经透析后得到螺旋藻活性多糖溶液。
第五步，饮料尤其是啤酒专用螺旋藻提取液制备。
将前述四步获得的螺旋藻叶绿素、螺旋藻藻蓝蛋白和螺旋藻多糖等成分根据需要适当组合，得到专门用于饮料尤其是啤酒生产的螺旋藻提取液产品。其中螺旋藻叶绿素的含量超过8％。
本发明所述的螺旋藻提取液及其制备方法，提取过程中保留了螺旋藻叶绿素成分，并可用于饮料尤其是啤酒添加，且不污染环境，操作方便，易用于工业化生产。
本发明参照实施例进行说明，但保护范围不限于此，在本发明技术范围内具有普通技术人员可以经过简单的变换，而获得本发明同样的技术效果，同样在本发明的保护范围内。
Claims (5)
1.螺旋藻提取液的制备方法，所述螺旋藻提取液含有螺旋藻藻蓝蛋白、螺旋藻多糖、螺旋藻叶绿素，其中螺旋藻叶绿素含量超过8％，其特征是包括下述步骤：(1)螺旋藻叶绿素的提取：为取螺旋藻粉在无水或30～100，w/w水的食用酒精中浸泡，反复提取，离心取上清液，获叶绿素；叶绿素经皂化和铁盐取代，再经过糊精包埋，得稳定的螺旋藻叶绿素铁钠盐；(2)藻蓝蛋白的提取：为取提取过叶绿素的螺旋藻粉，用蒸馏水或去离子水浸泡，搅拌，超声波反复提取，离心取上清液，获藻蓝蛋白，喷雾干燥得水溶性藻蓝蛋白产物；(3)游离氨基酸、寡肽、寡糖的提取：为提取藻蓝蛋白后的藻渣加蒸馏水或去离子水2-5倍，加溶菌酶和果胶酶或其它纤维素酶水解1小时以上，再分别加胃蛋自酶、木瓜蛋自酶、淀粉酶、胰蛋白酶各水解0.5小时以上，离心，取上清液，获游离氨基酸、寡肽、寡糖；(4)螺旋藻多糖的提取：为酶解后的藻渣加蒸馏水或去离子水2-5倍，在80℃以上热水中搅拌提取，离心合并上清液，经蛋白酶酶解，获活性多糖。
2.如权利要求1所述的一种螺旋藻提取液的制备方法，其特征是所述的步骤(1)中的糊精的包埋率为95％以上。
3.如权利要求1所述的一种螺旋藻提取液的制备方法，其特征是所述的步骤(1)中的糊精为β-环状糊精。
4.如权利要求1所述的一种螺旋藻提取液的制备方法，其特征是步骤(3)中加溶菌酶和果胶酶或其它纤维素酶水解1-2小时，加胃蛋自酶、木瓜蛋自酶、淀粉酶、胰蛋白酶各水解0.5-1小时。
5.如权利要求1至4任一所述的一种螺旋藻提取液的制备方法，其特征是还包括步骤(5)饮料专用螺旋藻提取液制备：将螺旋藻叶绿素、螺旋藻藻蓝蛋白和螺旋藻多糖成分根据需要组合，其中螺旋藻叶绿素的含量超过8％，得用于饮料生产的螺旋藻提取液产品。
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