CN101348494A

CN101348494A - 高纯度盐酸头孢甲肟及其制备方法

Info

Publication number: CN101348494A
Application number: CNA2008101396265A
Authority: CN
Inventors: 陶灵刚
Original assignee: HAINAN SHU ER PHARMACEUTICAL RESEARCH Co Ltd
Current assignee: HAINAN SHU ER PHARMACEUTICAL RESEARCH Co Ltd
Priority date: 2008-09-02
Filing date: 2008-09-02
Publication date: 2009-01-21

Abstract

本发明提供一种制备高纯度盐酸头孢甲肟的方法、制备高纯度盐酸头孢甲肟粉针剂的方法，和按照所述方法制备得到的高纯度高纯度盐酸头孢甲肟和相应的粉针剂。

Description

高纯度盐酸头孢甲肟及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种制备高纯度盐酸头孢甲肟的方法，一种制备高纯度盐酸头孢甲肟粉针剂的方法，以及根据所述方法制备得到的高纯度盐酸头孢甲肟及其粉针剂，属于医药技术领域。

背景技术：

头孢甲肟，英文名为：Cefmenoxime，分子式为：C₁₆H₁₇N₉O₅S₂，化学名称为：：(6R，7R)-7-[2-(2-氨基-4-噻唑基)(甲氧亚氨基)乙酰氨基]-3-[[1-甲基-1H-四唑-5-基]]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸，属于第三代头孢菌素为第三代半合成的头孢菌素类广谱抗生素，通过抑制细菌细胞壁的生物合成而达到杀菌作用。体外试验表明，本品对革兰氏阳性菌和阴性菌均有作用。本品对革兰氏阴性菌具有强抗菌作用是由于其对细胞外膜的通透性良好和对β-内酰胺酶稳定，且对青霉素在大鼠、兔及猴的器官形成期给药试验结果显示，家兔各给药组均出现雌兔死亡或流产，但各种动物均未见致畸作用。大鼠一般生殖毒性试验、围产期生殖毒性试验均未见明显异常。其结合蛋白(PBPs)1A、1B和3的亲和力强，从而对细胞壁粘肽交联形成具有较强的阻碍作用。

目前使用的主要是其盐酸盐形式，即盐酸头孢甲肟(CefmenoximeHemihydrochloride，缩写CMX)，但临床应用的盐酸头孢甲肟的纯度不高，致使其稳定性较差，副作用相对较大，从而严重影响其应用。

本申请人经过长期认真地研究发现，将通常用于物质分析与分离技术的大孔树脂吸附与凝胶柱层析法结合，出人意料地可获得高纯度的盐酸头孢甲肟，从而完成了本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备高纯度盐酸头孢甲肟的方法、制备高纯度盐酸头孢甲肟的粉针剂的方法。按照本发明的方法得到的产品纯度显著提高，产品稳定性显著提高。

为实现上述发明目的，本发明提出如下技术方案：

在本发明的一个方案中，提供一种制备高纯度盐酸头孢甲肟的方法，其包括步骤：

(1)将盐酸头孢甲肟粗品用大孔树脂吸附分离，收集洗脱液，并任选地浓缩得到浓缩物；

(2)将步骤(1)所得产物用凝胶柱纯化，收集盐酸头孢甲肟含量不低于99％的组分，得到高纯度盐酸头孢甲肟。

在本发明的另一个方案中，提供一种制备高纯度盐酸头孢甲肟粉针剂的方法，其包括步骤：

(2)将步骤(1)所得产物用凝胶柱纯化，收集盐酸头孢甲肟含量不低于99％的组分，得到高纯度盐酸头孢甲肟；

(3)步骤(2)所得盐酸头孢甲肟精制品经活性炭脱色，用微孔滤膜过滤后，冷冻干燥，粉碎成细粉，然后在无菌室内100级条件下分装。

在本发明的一个方案中，提供按照上述方法制备得到的高纯度盐酸头孢甲肟或包含其的组合物。按照本发明的方法，可以制备得到纯度不低于99％，甚至达99.3％，更甚至达99.5％或更高比如99.8％的高纯度盐酸头孢甲肟。

在本发明的还一个方案中，提供按照上述方法制备得到的高纯度盐酸头孢甲肟的粉针剂，所述粉针剂可以分装成每瓶含盐酸头孢甲肟按头孢甲肟计算0.25～2.0g。

在本文中，步骤(1)中的盐酸头孢甲肟粗品是通过市售获得的，或着通过向头孢甲肟粗品中加入盐酸形成的。

在本文中，步骤(1)中的大孔树脂优选地选用D1300大孔树脂，用纯化水或者蒸馏水作为洗脱剂进行洗脱；步骤(2)中的凝胶柱选用交联葡聚糖凝胶柱，优选地选自SephadexC系列的凝胶柱，例如选自SephadexC₁₅、SephadexC₂₅或SephadexC₅₀凝胶柱，用0.1～0.2mol/L浓度的盐溶液作为洗脱剂。

上述所述的洗脱用盐溶液选自甲酸铵溶液、乙酸铵溶液、丙酸铵溶液和乳酸铵溶液。

在本发明的另一个优选的实施方案中，提供一种高纯度盐酸头孢甲肟粉针制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)购买市售的盐酸头孢甲肟粗品，或头孢甲肟粗品中加入盐酸，形成盐酸头孢甲肟粗品；

(2)步骤(1)的盐酸头孢甲肟粗品用D1300大孔树脂吸附分离，用蒸馏水或纯化水进行洗脱，收集盐酸头孢甲肟洗脱液，并任选地浓缩得到浓缩物；

(3)步骤(2)所得浓缩物进行凝胶柱层析，柱填料选用Sephadex C系凝胶，用0.1～0.2mol/L浓度的甲酸铵溶液、乙酸铵溶液、丙酸铵溶液或者乳酸铵溶液洗脱，洗脱温度20～25℃，收集盐酸头孢甲肟含量不低于99％的组分，得到盐酸头孢甲肟精制品；

(4)步骤(3)所得的盐酸头孢甲肟精制品经活性炭脱色，用0.22μm微孔滤膜过滤后，冷冻干燥，粉碎至50～200目，优选60-100目的细粉，然后在无菌室内100级条件下分装，制得盐酸头孢甲肟粉针剂，每瓶含盐酸头孢甲肟按头孢甲肟计算0.25～2.0g。

对凝胶柱而言，提高温度有利于快速建立液固相平衡，加快分离纯化速度，但是，温度过高会造成溶质在液体中扩散过快，导致分离效率降低，因此需要选择适宜的洗脱温度。在本文中，凝胶柱的洗脱温度为5℃～30℃，优选20℃～25℃。

在本文中，步骤(3)中的粉碎为粉碎成50-200目、优选60-100目的细粉；其中所用的微孔滤膜为0.22μm微孔滤膜。

在本发明的技术方案中，中请人通过反复多次试验发现，当采用大孔树脂时，能起到吸附盐酸头孢甲肟的作用，而其它杂质将会直接流出大孔树脂，从而实现盐酸头孢甲肟的初步纯化。并且，大孔树脂还具有脱色作用，能去除溶液中的色素杂质，也增强了纯化作用。

在本发明中，用盐酸将头孢甲肟转化成盐酸头孢甲肟中，用纯化水进行洗脱时，对纯化水用量优选地应满足将大孔树脂上至少95％的盐酸头孢甲肟洗脱下来，同时不会造成洗脱液体积过大，增加后续纯化步骤的处理负荷。因而，所述洗脱用的纯化水的体积优选为进样样品体积的5-30倍，更优选为10-20倍。

在本发明中，可以对步骤(1)中所得洗脱液进行浓缩，得到相对密度不小于1.05的浓缩液。本发明所用的浓缩方法为本领域常用的浓缩方法，可以选用薄膜蒸发浓缩、减压蒸发浓缩、常压蒸发浓缩和多效浓缩中的任意一种或其中任意两种或多种方法的组合。所得浓缩液的相对密度为1.05-1.50，这样可以有效减少洗脱液的体积，减轻后续纯化步骤的负担。

在本发明中，为了缩短纯化周期、提高纯化能力和减少很少拖尾，采用梯度洗脱进行洗脱。本发明采用甲酸铵、乙酸铵、丙酸铵和乳酸铵这四种盐的溶液作为洗脱剂，优选溶液浓度为0.1～0.2mol/L。

对于本发明的盐酸头孢甲肟粉针剂而言，根据按本发明的方法制备的高纯度盐酸头孢甲肟制备粉针剂的工艺可以是本领域用于制备粉针剂的任何常用技术。可以将得到的盐酸头孢甲肟过50-200目筛粉碎，优选过60-100目筛，然后在无菌室内百级条件下分装即得盐酸头孢甲肟粉针剂。根据需要，每瓶分装的盐酸头孢甲肟，按头孢甲肟计，优选为0.25g～2.0g。

在本说明书中，如果没有特别地说明，所采用的装置、设备、仪器、技术、工艺、原料、方法、步骤等都是本领域技术已知的，或者本领域技术人员按照公知技术可以获得的。

与现有技术相比，本发明所提供的制备高纯度盐酸头孢甲肟的方法、制备高纯度盐酸头孢甲肟粉针剂的方法具有下述优点：

1、本发明采用层析柱纯化方法，使盐酸头孢甲肟的纯度得到很大的提高，达到99％以上，甚至高达99.3％，更甚至达99.5％或更高比如99.8％。

2、纯化过程无污染，便于工业连续化生产。

3、去除了很多水不溶性杂质，提高了盐酸头孢甲肟水溶液的澄明度。

4、提高了盐酸头孢甲肟及其水溶液的稳定性。

具体实施方式

下面将参照具体实施例进一步阐述本发明，应当理解，这些实施例仅仅是对本发明优选方案的说明，而并不以任何方式限制本发明的保护范围。

实施例1

取头孢甲肟500g搅拌溶解于2000ml纯化水中，加入2mol/L盐酸溶液调节溶液pH至2.8后，用D1300大孔树脂吸附，用蒸馏水进行洗脱至洗脱液中几乎无盐酸头孢甲肟。收集洗脱液，采用减压蒸发浓缩洗脱液后，采用以SephadexC₁₅为填料的交联葡聚糖凝胶柱进行柱层析，用0.1mol/L的甲酸铵水溶液洗脱，洗脱温度为20℃，收集HPLC检测积分面积比99％以上部分，加入溶液体积0.2％(g/ml)的活性炭，室温条件下脱色30分钟，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌后，冷冻干燥，得盐酸头孢甲肟441.2g，纯度为99.3％，收率为85.2％。

将上述盐酸头孢甲肟纯品冷冻干燥后，粉碎过60目筛，在无菌室内100级条件下分装，每瓶中含盐酸头孢甲肟按头孢甲肟计算0.25g，得到盐酸头孢甲肟粉针剂。

实施例2

取由苏州中联化学制药有限公司生产的盐酸头孢甲肟1000g搅拌溶解于4000ml纯化水中，加入3mol/L盐酸溶液调节溶液pH至3.1后，用D1300大孔树脂吸附，用蒸馏水进行洗脱至洗脱液中几乎无盐酸头孢甲肟。收集洗脱液，采用减压蒸发浓缩洗脱液后，采用以SephadexC₂₅为填料的交联葡聚糖凝胶柱进行柱层析，用0.2mol/L的乙酸铵水溶液洗脱，洗脱温度为25℃，收集HPLC检测积分面积比99％以上部分，加入溶液体积0.2％(g/ml)活性炭，室温条件下脱色30分钟，用0.22um微孔滤膜过滤除菌后，冷冻干燥，得盐酸头孢甲肟844.0g，纯度为99.5％，得率为84.4％。

将上述盐酸头孢甲肟纯品冷冻干燥后，粉碎过100目筛，在无菌室内100级条件下分装，每瓶中含盐酸头孢甲肟按头孢甲肟计算2.0g，得到盐酸头孢甲肟粉针剂。

实施例3

取头孢甲肟800g搅拌溶解于3000ml纯化水中，加入1mol/L盐酸溶液调节溶液pH至2.5后，用D1300大孔树脂吸附，用蒸馏水进行洗脱至洗脱液中几乎无盐酸头孢甲肟。收集洗脱液，采用减压蒸发浓缩洗脱液后，采用以SephadexC₅₀为填料的交联葡聚糖凝胶柱进行柱层析，用0.2mol/L的丙酸铵水溶液洗脱，洗脱温度为23℃，收集HPLC检测积分面积比99％以上部分，加入溶液体积0.2％(g/ml)的活性炭，室温条件下脱色30分钟，用0.22um微孔滤膜过滤除菌后，冷冻干燥，得盐酸头孢甲肟672.77g，纯度为99.2％，得率为81.2％。

将上述盐酸头孢甲肟纯品冷冻干燥后，粉碎过80目筛，在无菌室内100级条件下分装，每瓶中含盐酸头孢甲肟按头孢甲肟计算1.0g，得到盐酸头孢甲肟粉针剂。

稳定性试验

将实施例1-实施例3所制备的盐酸头孢甲肟粉针剂进行质量检测。分别将制得的盐酸头孢甲肟粉针剂在高温60℃、光照4500Lx条件下放置10天进行影响因素试验考察；在高温40℃、相对湿度75％±5％条件下6个月，进行加速试验考察；在高温25℃、相对湿度60％±10％条件下18个月，进行长期试验考察，检测各项质量指标的变化，所得数据如表1-3所示：

表1影响因素结果

表2高温40℃、相对湿度75％±5％条件下加速试验6个月

表3高温25℃、相对湿度60％±10％条件下长期试验18个月

由以上数据结果可以看出，本发明制得的盐酸头孢甲肟粉针剂质量优于标准要求，且经过影响因素10天、加速6月和长期18月等实验后，各项质量指标尤其是纯度无明显变化，均优于质量标准，说明了本发明的制备的样品质量稳定性非常好。

上述根据优选实施例对本发明作了描述。应当理解，在不偏离本发明的精神和范围的前提下，本领域技术人员可以设计出本发明的多种替换方案和改进方案，其均应被理解为在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种制备高纯度盐酸头孢甲肟的方法，其包括步骤：

2.权利要求1的方法，其中步骤(1)中的盐酸头孢甲肟粗品是通过市售获得的，或着通过向头孢甲肟粗品中加入盐酸形成的。

3.权利要求1或2的方法，其中步骤(1)中的大孔树脂选用D1300大孔树脂；步骤(2)中的凝胶柱选用交联葡聚糖凝胶柱。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中步骤(1)中大孔树脂分离用纯化水或者蒸馏水作为洗脱剂进行洗脱。

5.权利要求1-3中任一项的方法，其中步骤(2)中的交联葡聚糖凝胶柱选自SephadexC系列的凝胶柱，更优选为SephadexC₁₅、SephadexC₂₅或SephadexC₅₀凝胶柱，用0.1～0.2mol/L浓度的盐溶液作为洗脱剂。

6.权利要求5的方法，其中所述盐溶液选自甲酸铵溶液、乙酸铵溶液、丙酸铵溶液和乳酸铵溶液；其中凝胶柱的洗脱温度为5℃～30℃，优选20℃～25℃。

7.一种制备高纯度盐酸头孢甲肟粉针剂的方法，其中将按照上述权利要求1-6中任一项的方法制备的高纯度盐酸头孢甲肟经活性炭脱色，用微孔滤膜过滤后，冷冻干燥，粉碎至50-200目、优选60-100目的细粉，然后在无菌室内100级条件下分装，制得高纯度盐酸头孢甲肟粉针剂。

8.权利要求7的方法，其中所用的微孔滤膜为0.22μm微孔滤膜。

9.根据权利要求1-6中任一项的方法制备得到的高纯度盐酸头孢甲肟或包含其的组合物。

10.根据权利要求7-8中任一项的方法制备得到的高纯度盐酸头孢甲肟的粉针剂。