CN101342229B

CN101342229B - 一种鸡骨草提取物的组合物、其制备方法和药物用途

Info

Publication number: CN101342229B
Application number: CN2008100416863A
Authority: CN
Inventors: 秦继红
Original assignee: HAITIAN MEDICINE SCIENCE AND TECHNOLOGY DEVELOPMENT Co Ltd SHANGHAI
Current assignee: HAITIAN MEDICINE SCIENCE AND TECHNOLOGY DEVELOPMENT Co Ltd SHANGHAI
Priority date: 2008-08-14
Filing date: 2008-08-14
Publication date: 2011-07-13
Anticipated expiration: 2028-08-14
Also published as: CN101342229A

Abstract

本发明涉及一种鸡骨草提取物的组合物、其制备方法和药物用途。该组合物中的活性成分由总黄酮苷和总三萜皂苷构成。在总黄酮苷提取物中，总黄酮苷含量为50.0～98.0wt％。在总三萜皂苷提取物中，总三萜皂苷含量为50.0～98.0wt％。

Description

一种鸡骨草提取物的组合物、其制备方法和药物用途

技术领域

本发明涉及从植物中提取含有活性成分的提取物和该提取物的制备方法以及该提取物在药物中的新用途。尤其涉及从鸡骨草中提取含有活性成分的提取物的组合物。本发明还涉及该提取物的组合物的制备方法以及它们的药物用途。

背景技术

鸡骨草为华南常用草药。主要来源于豆科相思子属植物鸡骨草(Abrus cantoniensis Hance)和毛鸡骨草(Abrus mollis Hance)，以全株入药。味微苦，性凉。清热解毒，舒肝止痛。用于黄疸，胁肋不舒，胃脘胀痛；急、慢性肝炎，乳腺炎。

鸡骨草全草含相思子碱(Abrine，即N-甲基色氨酸)、胆碱(Choline)、腺苷类、甾醇类、三萜皂苷类、黄酮类、氨基酸、糖类。种子含相思子毒蛋白、相思子酸、尿酸。根中含大黄酚(chrysophanol)和大黄素甲醚(physcion)。从鸡骨草粗皂苷的水解物中得到多种三萜皂苷元，有相思子皂醇(abrisapogenol)A、B、C、D、E、F、G，大豆皂醇(soyasapogenol)A、B，葛根皂醇(kudzusapogenol)A，槐花二醇(sophoradiol)，广东相思子三醇(cantoniensistriol)，甘草次酸(glycyrrhetinic acid)，光果甘草内酯(glabrolide)。三萜皂苷以相思子皂苷(abrisaponin)系列和大豆皂苷(soyasaponin)系列为主。

药理实验表明鸡骨草有显著的护肝作用。鸡骨草和毛鸡骨草水煎液均可降低CCl₄及卡介苗和脂多糖诱导免疫性肝损伤小鼠血清ALT活性，对免疫性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶的升高有明显的降低作用。鸡骨草根部用甲醇、正丁醇提取的醚不溶物，在三种动物模型上实验：a.患遗传性高血清胆红素的Gunn大鼠；b.胆道结扎的SD大鼠；c.α-萘基异硫氰酸盐化学中毒的SD大鼠。对照组和实验组动物的胆红素、SGOP和SGPT之间有明显差异。鸡骨草粗皂苷对四氯化碳所致大鼠肝损伤有显著保护作用，以原代肝细胞进行活性测定，研究表明鸡骨草三萜糖苷的主要皂苷大豆皂苷I，槐花皂苷III有明显的抗肝细胞损害活性。100μg/ml剂量以及以上甘草皂苷可以有效降低GOT和GPT并表现出剂量依赖关系，大豆皂苷I作用与之相似，只是在500μg/ml剂量下作用较次。槐花皂苷III在低浓度(50μg/ml100μg/ml)下作用最强。大豆皂苷I和槐花皂苷III在高浓度下活性下降可能与它们的毒性有关。

鸡骨草临床用于治疗肝炎，胆囊炎，肝硬化腹水，黄疸，胃痛，乳腺炎等。鸡骨草应用于护肝退黄和乳腺炎虽然历史较长，但其药理作用的物质基础即哪些化学部位和哪些药理作用相关联却并不十分清楚。国内也未见其有效部位的开发。本发明力图从中药现代化的思路出发，弄清鸡骨草中的主要化学部位和相应药效的关系，使其符合现代药品开发“安全、有效、质量可控”的要求。

发明内容

本发明所要解决的技术问题第一方面是提供一种鸡骨草提取物的组合物，上述组合物的化学成分明确，质量可控，易于进行系统深入的药理、药学研究，符合中药现代化“安全、有效、质量可控”的要求。

本发明所要解决的技术问题第二方面是针对现有技术的不足，提出了上述鸡骨草提取物的组合物的制备方法，提高了提取物中可测定化学成分的含量，使其更适合用于药物用途。

本发明所要解决的技术问题第三方面是提供上述鸡骨草提取物的组合物的药物用途。

作为本发明第一方面的鸡骨草提取物的组合物，其活性成分由总黄酮苷提取物和总三萜皂苷提取物构成。

本发明中所述的总黄酮苷提取物和总三萜皂苷提取物之间的重量比为1∶100～100∶1。其中优选的重量比为5∶1。

在本发明中，所述总黄酮苷提取物中，总黄酮苷含量为50.0～98.0wt％。所述总三萜皂苷提取物中，总三萜皂苷含量为50.0～98.0wt％。

作为本发明第二方面的鸡骨草提取物的制备方法，包含如下步骤：

(1)取鸡骨草全草，用乙醇提取，收集每次醇提液，过滤后合并；

(2)合并的醇提液回收乙醇，用低极性有机溶剂萃取脱脂；

(3)水层用非极性或弱极性大孔吸附树脂装柱吸附，水洗脱除杂；先用浓度为A的乙

醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，干燥，得总黄酮苷提取物；再用浓度为B的乙

醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，干燥，得总三萜皂苷提取物；

(4)将总三萜皂苷提取物与总黄酮苷提取物按重量比为1∶100～100∶1的比例混合。

在上述步骤(1)中，用乙醇提取时，采用的乙醇的百分比浓度为40～100％。在本发明的优选实例中，乙醇的百分比浓度为70％。

在上述步骤(1)中，每次用乙醇提取时，提取次数为1～4次，每次提取时间为1～3小时，每次用量为生药量的2～10倍体积。优选为提取次数为3次，每次提取时间依次为2、1.5、1小时，每次用量依次为生药量的8、7、6倍体积。

在上述步骤(2)中，萃取脱脂所用的低极性有机溶剂是指常用低级醚、低级烷烃之中的一种或其混合。优选为石油醚。

在上述步骤(3)中，非极性或弱极性大孔吸附树脂是指D101、AB-8、HZ-801型树脂，用量为体积为生药量的0.5～3倍。优选为D101型树脂，用量为体积为生药量的1倍。

在上述步骤(3)中，浓度为A的乙醇是指浓度为10～50％的乙醇。优选为浓度为40％的乙醇。

在上述步骤(3)中，浓度为B的乙醇是指浓度为60～90％的乙醇。优选为浓度为70％的乙醇。

在上述步骤(3)中，树脂洗脱方式为，3倍树脂体积的水洗脱除杂；然后用浓度为A的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集1倍树脂体积的洗脱液，回收溶剂，干燥，得总黄酮苷提取物；然后用浓度为B的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集1倍树脂体积的洗脱液，回收溶剂，干燥，得总三萜皂苷提取物。

在上述步骤(4)中，总黄酮苷提取物与总三萜皂苷提取物之间重量比为5∶1。

作为本发明第三方面的上述鸡骨草提取物的组合物药物用途是以所述的鸡骨草提取物中的总黄酮苷提取物与总三萜皂苷提取物作为活性成分，加入药学上可接受的辅料，制成的任何一种剂型的药物。优选的剂型为口服给药的片剂或胶囊剂。

上述鸡骨草提取物的组合物作为活性成分的具体药物用途如下，但不限于下述药物用途：

1、以鸡骨草提取物的组合物作为活性成分可以在制备预防和治疗肝炎药物中的应用。

2、以鸡骨草提取物的组合物作为活性成分可以在制备预防和治疗黄疸药物中的应用。

3、以鸡骨草提取物的组合物作为活性成分可以在制备预防和治疗乳腺炎药物中的应用。

本发明的鸡骨草提取物含有活性成分总黄酮苷和总三萜皂苷，文献和药效实验表明总黄酮苷和总三萜皂苷在治疗肝炎、黄疸、乳腺炎等疾病方面的都有良好的效果，而且两者按适当的比例混合对上述疾病治疗有显著的协同作用。

本发明的制备方法首先采用乙醇对鸡骨草中的总黄酮苷和总三萜皂苷进行提取，提取液脱脂后用大孔吸附树脂进行纯化处理，收集不同浓度乙醇的洗脱物，分别获得总黄酮苷提取物和总三萜皂苷提取物，具有工艺步骤简单，得率高，环境友好的优点。

具体实施方式

本发明的鸡骨草提取物含有活性成分总黄酮苷提取物和总三萜皂苷提取物，且两者以重量比为5∶1的比例混合，充分利用了鸡骨草中有效成分，适应症更加广泛。该鸡骨草提取物按照制药工业已知的方法可以制成片剂、胶囊剂、丸剂、粉末剂、栓剂以及溶液剂和悬浮剂，其中优选的适合胃肠给药的胶囊剂和片剂。在制备适合口服给药的胶囊剂、片剂、丸剂和粉末剂时，可以使用蔗糖、乳糖、半乳糖、玉米淀粉、明胶、微晶纤维素、羧甲基纤维素等作为载体或赋形剂。

另外，也可以使用制药工业中已知的方法和辅助成分将本发明的药物制成适于口服给药的溶液剂和悬浮剂。为了制备适于胃肠道外途径给药的溶液剂和悬浮剂，可以使用蒸馏水、注射用水、等渗氯化钠溶液或葡萄糖溶液，或者低浓度(例如1～100mM)磷酸缓冲液(PBS)作为载体或稀释剂。可以在这些胃肠道外给药的制剂中加入一种或多种其他辅助成分或添加剂，例如可使用抗坏血酸作为抗氧化剂，使用苯甲酸钠等作为防腐剂。在这些剂型的制剂中还可以含有其他的增溶剂、崩解剂、润滑剂、着色剂、分散剂或表面活性剂。

下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1

鸡骨草提取物的组合物的制备方法：

(1)取鸡骨草全草300g，用70％乙醇提取三次，每次提取时间依次为2、1.5、1小时，每次用量依次为2400ml、2100ml、1800ml。收集每次醇提液，过滤后合并；

(2)合并的醇提液回收乙醇，浓缩至约300ml，用石油醚萃取脱脂，萃取三次，每次石油醚用量为300ml；

(3)水层用D101大孔吸附树脂300ml装柱吸附，水900ml洗脱除杂；用浓度为40％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液300ml，回收溶剂，干燥，得总黄酮苷提取物4.1g；然后用浓度为70％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液300ml，回收溶剂，干燥，得总三萜皂苷提取物0.88g。

(4)将总黄酮苷提取物与总三萜皂苷提取物按重量比为5∶1的比例混合。

实施例2

鸡骨草提取物的组合物的制备方法：

(1)取鸡骨草全草300g，用40％乙醇提取三次，每次提取时间依次为2小时，每次用量为1800ml。收集每次醇提液，过滤后合并；

(3)水层用AB-8大孔吸附树脂300ml装柱吸附，水900ml洗脱除杂；用浓度为50％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液300ml，回收溶剂，干燥，得总黄酮苷提取物4.4g；然后用浓度为90％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液300ml，回收溶剂，干燥，得总三萜皂苷提取物0.69g。

实施例3

鸡骨草提取物的组合物的制备方法：

(1)取鸡骨草全草300g，用90％乙醇提取三次，每次提取时间依次为依次为2、1.5、1小时，每次用量依次为2700ml、2400ml、2100ml。收集每次醇提液，过滤后合并；

(3)水层用HZ-801大孔吸附树脂300ml装柱吸附，水900ml洗脱除杂；用浓度为10％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液300ml，回收溶剂，干燥，得总黄酮苷提取物3.8g；然后用浓度为60％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液300ml，回收溶剂，干燥，得总三萜皂苷提取物0.95g。

实施例4

鸡骨草提取物的组合物的制备方法：

(2)合并的醇提液回收乙醇，浓缩至约300ml，用乙醚萃取脱脂，萃取三次，每次乙醚用量为300ml；

(3)水层用D101大孔吸附树脂900ml装柱吸附，水2700ml洗脱除杂；用浓度为40％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液900ml，回收溶剂，干燥，得总黄酮苷提取物3.8g；然后用浓度为70％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液900ml，回收溶剂，干燥，得总三萜皂苷提取物0.94g。

(4)将总黄酮苷提取物与总三萜皂苷提取物按重量比为100∶1的比例混合。

实施例5

鸡骨草提取物的组合物的制备方法：

(3)水层用D101大孔吸附树脂150ml装柱吸附，水450ml洗脱除杂；用浓度为40％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液150ml，回收溶剂，干燥，得总黄酮苷提取物4.4g；然后用浓度为70％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液150ml，回收溶剂，干燥，得总三萜皂苷提取物0.79g。

(4)将总黄酮苷提取物与总三萜皂苷提取物按重量比为1∶100的比例混合。

实施例6

鸡骨草提取物的组合物的制备方法：

(1)取鸡骨草全草10kg，用70％乙醇提取三次，每次提取时间依次为2、1.5、1小时，每次用量依次为80L、70L、60L。收集每次醇提液，过滤后合并；

(2)合并的醇提液回收乙醇，浓缩至约10L，用石油醚萃取脱脂，萃取三次，每次石油醚用量为10L；

(3)水层用D101大孔吸附树脂10L装柱吸附，水30L洗脱除杂；用浓度为40％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液10L，回收溶剂，干燥，得总黄酮苷提取物129g；然后用浓度为70％的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集洗脱液10L，回收溶剂，干燥，得总三萜皂苷提取物25g。

实施例7

一种鸡骨草总黄酮苷提取物含量测定：

实验仪器：756MC紫外可见分光光度计，上海精密科学仪器有限公司对照品液制备：

称取芦丁对照品(含量98％，中国药品生物制品检定所)10.12mg于10ml量瓶中，加甲醇溶解，甲醇定容至刻度，摇匀，取1ml至10ml量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，即得。

供试品液制备：

称取自制鸡骨草总黄酮提取物25.11mg于25ml量瓶中，加甲醇溶解，甲醇定容至刻度，摇匀，取1ml至10ml量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，即得。

实验方法与结果：

分别移取甲醇(空白)、对照品液和供试品液各2ml，至锥形瓶中，各加5％亚硝酸钠溶液0.5ml，放置5min，加10％硝酸铝溶液0.5ml，放置5min，再加1N氢氧化钠溶液5ml，摇匀，放置15min，在500nm波长处测定吸收度。

测得鸡骨草总黄酮提取物中总黄酮苷含量以芦丁计为75％。

实施例8

称取大豆皂苷I对照品(含量98％，中国药品生物制品检定所)10.28mg于10ml量瓶中，加甲醇溶解，甲醇定容至刻度，摇匀，取1ml至10ml量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，即得。

供试品液制备：

称取自制鸡骨草总三萜皂苷提取物24.44mg于25ml量瓶中，加甲醇溶解，甲醇定容至刻度，摇匀，取1ml至10ml量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，即得。

实验方法与结果：

分别移取甲醇(空白)、对照品液和供试品液各0.6ml，至具塞试管中，挥干溶剂，各加10％硫酸香草醛试剂0.4ml，高氯酸1ml，闭塞60℃水浴15min，立即冰浴2min，加冰乙酸5ml，摇匀，在546nm波长处测定吸收度。

测得鸡骨草总三萜皂苷提取物中总三萜皂苷含量以大豆皂苷I计为84％。

实施例9

一种鸡骨草提取物的组合物的胶囊的制备

取鸡骨草总黄酮苷提取物100g，总三萜皂苷提取物20g，形成由鸡骨草总黄酮苷和鸡骨草总三萜皂苷组成的提取物组合。再与微晶纤维素130g混匀，喷乙醇40ml，搅拌均匀，制成颗粒，干燥，装入胶囊，制成1000粒，即得。

每粒胶囊装量250mg。含总黄酮苷不低于50mg，总三萜皂苷不低于10mg。

实施例10

一种鸡骨草提取物的组合物的片剂的制备

取鸡骨草总黄酮苷提取物100g，总三萜皂苷提取物20g，形成由鸡骨草总黄酮苷和鸡骨草总三萜皂苷组成的提取物组合。再与微晶纤维素100g、淀粉20g、硬脂酸镁10g混匀，喷乙醇40ml，混匀，制粒，压成1000片，即得。

每片重250mg。含总黄酮苷不低于50mg，总三萜皂苷不低于10mg。

实施例11

鸡骨草提取物的组合物对小鼠的保肝退黄的药理作用

鸡骨草总黄酮苷提取物(简称A)，总三萜皂苷提取物(简称B)，鸡骨草总黄酮苷和总三萜皂苷提取物按不同比例混合组成的提取物组合(简称JGC)。

动物：

ICR小鼠，体重18～22g，70只，雌雄各半，购自南京医科大学实验动物中心。

测定试剂盒：

ALT、AST和总胆红素测定盒均购自南京建成生物工程公司。

实验过程：

上述动物在实验室适应一天后，按性别体重随机分成7组，每组10只，雌雄各半，分别为正常对照组、模型组、A组、B组、JGC(A:B＝1:1)组、JGC(A:B＝1:50)组、JGC(A:B＝5:1)组，正常对照和模型组每日ig给予0.5％的CMC-Na溶液20ml/kg；各给药组的ig给药剂量均为200mg/kg，用0.5％的CMC-Na混悬后给药，给药体积也为20ml/kg。每日给药一次。第4天给药后2小时再ig给予异硫氰酸萘酯70mg/kg造模，第5天ig给药后2小时处死动物，采血，进行ALT、AST和总胆红素的测定。

表1.鸡骨草提取物的组合物对小鼠的保肝退黄作用(x±s，n＝10)

注：与模型对照组相比，^*P<0.05，^**P<0.01。

实施例12

鸡骨草提取物的组合物对乳腺炎大鼠的药理作用

动物：

SD大鼠，雌鼠70只，体重240～290g，均未孕；雄鼠35只，体重290～340g，购自南京医科大学实验动物中心。饲喂市售饲料，自由饮水。适应性饲养1周后，将雌鼠与雄鼠按2:1比例同笼饲养，使之交配受孕。

实验过程：

将怀孕雌鼠随机分为7组，每组10只，即正常对照组、模型组、A组、B组、JGC(A:B＝1:1)组、JGC(A:B＝1:50)组、JGC(A:B＝5:1)组。给药组大鼠按100mg/kg体重灌喂供试样品，直至处死。对照组大鼠灌喂相应体积的生理盐水。阳性对照组、试验组大鼠分别于产后72h经乳头管注入内毒素0.05mL(50μg)。正常对照组于产后72h经乳头管注入灭菌生理盐水0.05ml。灌注后24h，将雌鼠颈静脉放血处死。收集颈静脉血，6000r/min离心20min，上清液-20℃保存待测。雌鼠颈静脉放血处死后，快速打开腹腔，分离第4对乳腺，取适量乳腺组织，按1:6(W/V)加入生理盐水，冰浴匀浆后，6000r/min离心30min，上清液-20℃保存待测。进行乳腺组织及血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NA Gase)及碱性磷酸酶(AKP)活性测定。

表2.鸡骨草提取物的组合物对乳腺炎大鼠血清中细胞因子和酶的影响(x±s，n＝10)

注：同列均值有共同上标字母者差异不显著，P>0.05

表3.鸡骨草提取物的组合物对乳腺炎大鼠乳腺组织中细胞因子和酶的影响(x±s，n＝10)

注：同列均值有共同上标字母者差异不显著，P>0.05

Claims

1.鸡骨草提取物的组合物，其特征在于：活性成分由总黄酮苷提取物和总三萜皂苷提取物构成；

所述的鸡骨草提取物的组合物的制备方法，包含如下步骤：

(2)合并的醇提液回收乙醇，用低极性有机溶剂萃取脱脂；

(3)水层用非极性或弱极性大孔吸附树脂装柱吸附，水洗脱除杂；先用浓度为A的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，干燥，得总黄酮苷提取物；再用浓度为B的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，干燥，得总三萜皂苷提取物；浓度为A的乙醇是指浓度为10～50％的乙醇；浓度为B的乙醇是指浓度为60～90％的乙醇；

2.根据权利要求1所述的鸡骨草提取物的组合物，其特征在于：所述的总黄酮苷提取物和总三萜皂苷提取物之间的重量比优选为5∶1。

3.根据权利要求1所述的鸡骨草提取物的组合物，其特征在于：所述总黄酮苷提取物中，总黄酮苷含量为50.0～98.0wt％。

4.根据权利要求1所述的鸡骨草提取物的组合物，其特征在于：所述总三萜皂苷提取物中，总三萜皂苷含量为50.0～98.0wt％。

5.一种制备权利要求1所述的鸡骨草提取物的组合物的方法，其特征在于：包含如下步骤：

(2)合并的醇提液回收乙醇，用低极性有机溶剂萃取脱脂；

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(1)中，用乙醇提取时，采用的乙醇的百分比浓度为40～100％。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(1)中，用乙醇提取时，采用的乙醇的百分比浓度为70％。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(1)中，用乙醇提取时，提取次数为1～4次，每次提取时间为1～3小时，每次用量为生药量的2～10倍体积。

9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(1)中，用乙醇提取时，提取次数为3次，每次提取时间依次为2、1.5、1小时，每次用量依次为生药量的8、7、6倍体积。

10.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(2)中，萃取脱脂所用的低极性有机溶剂是指常用低级醚、低级烷烃之中的一种或其混合。

11.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(2)中，萃取脱脂所用的低极性有机溶剂是指石油醚。

12.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(3)中，非极性或弱极性大孔吸附树脂是指D101、AB-8、HZ-801型树脂，用量为体积为生药量的0.5～3倍。

13.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(3)中，非极性或弱极性大孔吸附树脂是指D101型树脂，用量为体积为生药量的1倍。

14.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(3)中，浓度为A的乙醇是指浓度为40％的乙醇。

15.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(3)中，浓度为B的乙醇是指浓度为70％的乙醇。

16.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(3)中，树脂洗脱方式为，3倍树脂体积的水洗脱除杂；然后用浓度为A的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集1倍树脂体积的洗脱液，回收溶剂，干燥，得总黄酮苷提取物；然后用浓度为B的乙醇洗脱，颜色变深后开始收集，收集1倍树脂体积的洗脱液，回收溶剂，干燥，得总三萜皂苷提取物；浓度为A的乙醇是指浓度为10～50％的乙醇；浓度为B的乙醇是指浓度为60～90％的乙醇。

17.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在所述的步骤(4)中，总黄酮苷提取物与总三萜皂苷提取物的重量比为5∶1。