CN101307347B - 一种从畜牧动物生殖器组织中萃取活性肌肽的方法 - Google Patents

Abstract

一种从畜牧动物生殖器组织中萃取活性肌肽的方法，动物生殖器获取，生物蛋白酶解，脂肪分离，超微膜分离，低温浓缩，微胶囊化，喷雾干燥，软胶囊成品。本发明采用生物科学技术，从动物生殖器中萃取具有调节生理功能，逆转老年细胞衰老形态、延长细胞寿命、增加体内能量，促进平滑肌与海绵体弹性、抗衰老、抗疲劳、抗免疫作用的活性肌肽。本发明为畜产品向高科技、高附加值、高利用率生物工程产业发展提供了广阔的空间。

Description

一种从畜牧动物生殖器组织中萃取活性肌肽的方法

技术领域

本发明涉及动物活性肌肽，具体地说是一种从畜牧动物生殖器组织中萃取活性肌肽的方法。

背景技术

动物生殖器的药用生理健保价值很高。自古被视为滋补强身珍品，其滋补壮阳，强身健体的作用在历代医学著作中有记载。研究表明：动物生殖器有效生理活性肌肽，储存于白肌纤维和红肌纤维内，是生物体内一种重要天然抗氧化剂，它可以直接捕获活性氧成份，清除自由基，增强细胞活力。具有调节生理功能，逆转老年细胞衰老形态，延长细胞寿命，增加体内能量，促进平滑肌与海绵体弹性，抗衰老、抗疲劳、抗免疫作用。利用科学的生物技术，从动物生殖器中萃取活性肌肽，这为畜产品向高科技、高附加值，高利用率生物工程产业发展提供了广阔的空间。

发明内容

本发明的目的是提供一种从畜牧动物生殖器组织中萃取活性肌肽的方法。

本发明的目的是这样实现的：1.一种从畜牧动物生殖器组织中萃取活性肌肽的方法，其特征在于：

1.动物生殖器的获取

1.1剔生殖器：从宰杀后的畜牧动物体剔出外生殖器、睾丸、输精管和肾脏；

2.动物生殖器预处理：

2.1清洗消毒：配制消毒液，取液态或固态的二氧化氯加入不锈钢或塑料容器内，加入蒸馏水水或纯净水，搅拌溶解后配制成100-300ppm的消毒液，再加入消毒液体积3-10％的柠檬酸或盐酸活化消毒液；再将动物生殖器投入到消毒液内浸泡10-60min，取出投放在纯净水槽内进行清洗2-3次后再淋干；

2.2剪切：将消毒清洗后的动物生殖器，用不锈钢绞肉机进行1-3次绞切剪切成碎沫备用；

3.生物酶解

3.1定向内剪切活性肌肽：首先将剪切成碎沫的动物生殖器投放在真空酶反应釜内，加入动物生殖器重量1-3倍的蒸馏水或纯净水搅拌，调整PH值为6-8，加入动物生殖器质量的2-8‰AS1398中性蛋白酶，加热至30℃-60℃，真空度维持在60-180Pa，搅拌，酶反应3-8小时，将动物生殖器中蛋白质从分子内部将肽键催化，分解成大分子多肽，使动物生殖器从固态酶解成液态，升温60-90℃，10-30min灭酶处理；

3.2脂肪分离：

采用蝶式分离器在6000-10000r/min的高速分离下，将动物生殖器酶解液进行分离，上液为含脂肪的液体，中液和下液为酶解液。将中液和下液合并在压力空气下输送到复合蛋白酶反应釜内；

3.3定向端剪切活性肌肽：将分离脂肪后的定向内剪切的动物生殖器酶解液，即中液和下液在真空酶反应釜内，调整PH值为6-8，加入丹麦诺维信功能食品工业生产的Protamex复合蛋白酶和Flarourzyme复合风味蛋白酶；两种酶的比例为1∶0.2-0.6，添加量为中液和下液重量的0.1-0.6％；保温40℃-60℃，真空度为60-180Pa，搅拌酶解2-8小时；将被1398中性蛋白酶从分子内部剪切的动物生殖器酶解液分子链末端剪切下活性小分子肽，直至彻底被催化分解小分子肌肽；

3.4灭酶采用超高温在120℃-150℃瞬间灭酶，出料温度控在30℃-60℃，得动物生殖器生物酶解活性肌肽液；

4.活性肌肽分离

4.1稀释：将彻底酶解的活性肌肽液，用循环泵输入稀释罐内，按1∶1-3的重量比例加入去离子水或蒸馏水，在真空60-100Pa的条件下，搅拌稀释成活性肌肽稀释液；

4.2钛棒分离：将活性肌肽稀释液用循环泵经2μm-5μm的钛棒式分离器进行分离，操作压力为100-100Pa，温度为30-60℃；将大于50000分子量的大分子分离出去；余液被输送平衡罐内备用；

4.3超微膜分离：将钛棒分离液从平衡罐内用供料泵输入0.2-1.0μm的保险过滤器中，然后用循环泵再将滤液在0.5-1.5MPa的压力下通过分子量300-10000道尔顿的超微膜分离器进行小分子活性肌肽的分离，得分子活性肌肽液；

5.低温浓缩

5.1采用热隔膜真空低温浓缩设备，将小分子活性肌肽液采用循环泵，在温度40-70℃，真空度0.4-0.8MPa的循环浓缩成原小分子活性肌肽液体积30-50％的活性肌肽浓缩液，并输送至复配罐内备用；

6.活性肌肽粉：

6.1微胶囊包裹：

采用β环糊精、改性淀粉或蛋白粉做包裹壁材，活性肌肽浓缩液为芯材，其芯材与壁材的重量比例为1∶1-3，包埋温度为30-60℃，包埋时间为20-80min；经高剪切乳化复配罐的均质乳化，形成分子稳定、抗氧化的微胶囊包裹活性肌肽悬浮液体；

6.2喷雾干燥

将高剪切乳化的微胶囊活性肌肽液，用浓浆泵经100-600r/min的流速输入在170℃-260℃的离心喷雾干燥塔内，干燥成粉沫得动物生殖器活性肌肽粉，密封装袋保存。

所述剔出的动物生殖器的贮存：将新鲜的动物生殖器采用速冻保鲜法，将生殖器按外生殖器、睾丸、输精管和肾脏分类后沾入纯净水，然后摆放在速冻盘内，或均匀的摆放在速冻机平板带上；在-10℃至-35℃的冷冻下，冷冻10-160min，冻实后取出装入洁净的包装箱内贮存于-18℃以下的冷藏库内备用。

所述动物生殖器的预处理前对冷冻的动物生殖器解冻，于解冻槽中(加入相对于动物生殖器1-3倍重量纯净水或食用水)用水浸没冷冻的动物生殖器，缓解30-80min，去除冰壳；然后捞出动物生殖器投放在20-40℃的温水中解冻20-60min，获得解冻后新鲜的动物生殖器备用。

活性肌肽成品：取动物生殖器活性肌肽粉，经复配乳化或造粒，充软胶囊或硬胶囊，泡罩、包装成活性肌肽软胶囊或硬胶囊成品。复配重量比例为活性肌肽粉57-80％、VA0.1-1％、卵磷脂5-10％、VC0.2-2％、小麦胚芽油20-30％。

本发明的积极效果：

1、采用生物科学技术从动物生殖器中萃取具有调节生理功能，逆转老年细胞衰老形态，延长细胞寿命，增加体内能量，促进平滑肌与海绵体弹性、抗衰老、抗疲劳、抗免疫作用于的活性肌肽。这为畜产品向高科技、高附加值、高利用率生物工程产业发展提供了广阔的空间。

2、采用本发明萃取的肌肽分离纯度和活性成份高，在分离中不接触高温度，保持了肌肽分子的稳定性。

3、采用本发明技术使被纯化的肌肽微胶囊化。

具体实施方式

下向结合实例对本发明做进一步详细说明。

实施例1

取健康宰杀后猪的猪鞭、睾丸、输精管、肾脏，每头猪平均生殖系统的重量为300g。50kg猪生殖器分别沾入纯净水，然后均匀的摆放在速冻盘内，送入-30℃的速冻仓内，进行冷冻50min，冻实后取出装入冻贮包装箱内，每箱5kg，贮存在-18℃的冷库内。使用时将冷贮的猪生殖器50kg倒入不锈钢解冻槽内，加入100kg食用水，缓解60min除去冰壳，然后捞出投放在温水30℃的解冻槽内解冻30min，捞出淋干。配制200升消毒液，先取90％的液态二氧化氯500ml加入200升的蒸馏水中，加入50mg的柠檬酸，搅拌活化成二氧化氯消毒液。将淋干的猪生殖器倒入消毒液体中浸泡30min，捞出投入纯净水槽内漂洗二次后捞出淋干。将淋干后的猪生殖器，用不锈钢绞肉机剪切成碎沫。再将剪切成碎沫的猪生殖器，投放在500L真空酶反应釜内，加入150kg的蒸馏水搅拌，调整PH值为7，加热至50℃，将150gAS1398中性蛋白酶，抽真空至120Pa维持真空度100Pa，酶反应6小时使猪生殖器中蛋白质从分子内部催化和剪切肽键，分解成大分子肽液体。然后升温80℃维持15min灭酶处理。将灭酶后的分解液趁热用供料泵加入蝶式高速分离器内，分离出脂肪上层液10kg，将中层和下层液190kg合并，利用反应釜真空抽入反应釜内，调节PH值为7，温度55℃，加入150g1∶0.6的丹麦诺维信功能食品工业生产的Proeamex复合蛋白酶60g和Flarourzyme复合风味蛋白酶90g，抽真空180Pa，维持真空度160Pa，搅拌酶解6小时，使液体中大分子肽链末端剪切下活性小分子，直至彻底被催化分解成小分子肌肽。采用超高温瞬间灭酶器。在140℃/1.0MPa压力下灭酶，出料温度冷却至50℃，得酶解活性肌肽液190kg。

用循环泵将灭酶后的活性肌肽液输入1000L真空稀释罐内加300kg蒸馏水，抽真空120Pa搅拌稀释。再启动循环泵将50℃稀释液490kg通过2.0μm的钛棒分离器，给料压力为300Pa，使50000道尔顿的大分子被子分离出去，小于50000分子量的液体被输入平衡罐内。将平衡罐内的分离液用供料泵，通过0.2μm的保安过滤器，然后用循环泵将滤液在1.0MPa压力下通过板式超微膜分离器分离出300-500道尔顿的小分子活性肌肽液480kg。采用热隔膜真空低温浓缩器，在真空度0.6MPa，浓缩温度为60℃循环浓缩成40％192kg干基在2％-3％的活性肌肽浓缩液。浓缩后用供料泵输送到高剪切乳化复配罐内。取4kg大豆蛋白粉做包裹材加入10kg的蒸馏水调合均匀后加入复配罐内启动高剪切乳化器对复配液进行包裹均质乳化，形成较稳定的活性肌肽包裹悬浮液。然后用浓浆泵以200r/min的流速将包裹液输送到240℃的恒温的离心喷雾干燥塔内干燥成粉沫，得7kg50％活性肌肽粉。再取7kg50％活性肌肽粉复配1kg卵磷脂、2kg小麦胚芽油、100gVA、200gVC形成乳化剂，充软胶囊，每粒胶丸300mg，得34000粒活性肌肽软胶囊，在用泡罩机泡罩成每板10粒软胶囊，然后每2板一盒装盒制成活性肌肽软胶囊1700盒成品。

实施例2

按实例1技术工艺，取牛生殖器50kg，经速冻贮存、解冻、消毒、剪切、生物酶解、超微膜分离、真空低温浓缩、微胶囊包裹、喷雾干燥成8kg活性肌肽粉、复配、乳化、充软胶囊、经泡罩、包装成活性肌肽软胶囊1850盒成品。

实施例3

按实例1技术工艺，取羊生殖器50kg经速冻贮存、解冻、消毒、剪切、生物酶解、超微膜分离、真空低温浓缩、微胶囊化、喷雾干燥成7kg活性肌肽粉，再经复配1kg卵磷脂，2kg小麦胚芽油、100gVA、200gVC形成乳化剂、充软胶囊每粒300mg，得34000粒活性肌肽软胶囊，然后每盒20粒包装制成活性肌肽软胶囊1700盒成品。

实施例4

按实例1技术工艺，取驴生殖器50kg，经速冻贮存、解冻、消毒、剪切、生物酶解、超微膜分离、真空低温浓缩、微胶囊化、喷雾干燥成80kg50％的活性肌肽粉，再经复配1kg卵磷脂、2kg小麦胚芽油200gVA、200gVC形成乳化剂，充软胶囊每粒300mg，得3700粒，经泡罩每板10粒，包装成每盒2板20粒制成活性肌肽软胶囊1850粒成品。

实施例5

1.1剔生殖器：从宰杀后的动物体马剔出外生殖器、睾丸、输精管和肾脏；

1.2所述剔出的动物生殖器的贮存：将新鲜的动物生殖器采用速冻保鲜法，将生殖器按外生殖器、睾丸、输精管和肾脏分类后沾入纯净水，然后摆放在速冻盘内，或均匀的摆放在速冻机平板带上；在-10℃至-35℃的冷冻下，冷冻10-160min，冻实后取出装入洁净的包装箱内贮存于-18℃以下的冷藏库内备用。

1.3动物生殖器的预处理前对冷冻的动物生殖器解冻，于解冻槽中用水浸没冷冻的动物生殖器，缓解30-80min，去除冰壳；然后捞出动物生殖器投放在20-40℃的温水中解冻20-60min，获得解冻后新鲜的动物生殖器备用。

2.动物生殖器预处理：

2.1清洗消毒：配制消毒液，取液态或固态的二氧化氯加入不锈钢或塑料容器内，加入蒸馏水水或纯净水，搅拌溶解后配制成300ppm的消毒液，再加入消毒液体积10％的柠檬酸或盐酸活化消毒液；再将动物生殖器投入到消毒液内浸泡40min，取出投放在纯净水槽内进行清洗3次后再淋干；

2.2剪切：将消毒清洗后的动物生殖器，用不锈钢绞肉机进行3次绞切剪切成碎沫备用；

3.生物酶解

3.1定向内剪切活性肌肽：首先将剪切成碎沫的动物生殖器投放在真空酶反应釜内，加入动物生殖器重量3倍的蒸馏水或纯净水搅拌，调整PH值为7，加入动物生殖器质量的6‰AS1398中性蛋白酶，加热至50℃，真空度维持在160Pa，搅拌，酶反应5小时，升温80℃，20min灭酶处理；

3.2脂肪分离：

采用蝶式分离器在10000r/min的高速分离下，将动物生殖器酶解液进行分离，上液为含脂肪的液体，中液和下液为酶解液。将中液和下液合并在压力空气下输送到复合蛋白酶反应釜内；

3.3定向端剪切活性肌肽：将分离脂肪后的定向内剪切的动物生殖器酶解液，即中液和下液在真空酶反应釜内，调整PH值为7，加入丹麦诺维信功能食品工业生产的Protamex复合蛋白酶和Flarourzyme复合风味蛋白酶；两种酶的比例为1∶0.4，添加量为中液和下液重量的0.4％；保温50℃，真空度为1 60Pa，搅拌酶解5小时；

3.4灭酶采用超高温在120℃-150℃瞬间灭酶，出料温度控在50℃，得动物生殖器生物酶解活性肌肽液；

4.活性肌肽分离

4.1稀释：将彻底酶解的活性肌肽液，用循环泵输入稀释罐内，按1∶3的重量比例加入去离子水或蒸馏水，在真空100Pa的条件下，搅拌稀释成活性肌肽稀释液；

4.2钛棒分离：将活性肌肽稀释液用循环泵经2μm-5μm的钛棒式分离器进行分离，操作压力为100Pa，温度为50℃；将大于50000分子量的大分子分离出去；余液被输送平衡罐内备用；

4.3超微膜分离：将钛棒分离液从平衡罐内用供料泵输入0.8μm的保险过滤器中，然后用循环泵再将滤液在1.5MPa的压力下通过分子量300-10000道尔顿的超微膜分离器进行小分子活性肌肽的分离，得分子活性肌肽液；

5.低温浓缩

5.1采用热隔膜真空低温浓缩设备，将小分子活性肌肽液采用循环泵，在温度70℃，真空度0.8MPa的循环浓缩成原小分子活性肌肽液体积30-50％的活性肌肽浓缩液，并输送至复配罐内备用；

6.活性肌肽粉：

6.1微胶囊包裹：

采用β环糊精、改性淀粉或蛋白粉做包裹壁材，活性肌肽浓缩液为芯材，其芯材与壁材的重量比例为1∶3，包埋温度为50℃，包埋时间为60min；经高剪切乳化复配罐的均质乳化，形成分子稳定、抗氧化的微胶囊包裹活性肌肽悬浮液体；

6.2喷雾干燥

将高剪切乳化的微胶囊活性肌肽液，用浓浆泵经600r/min的流速输入在240℃的离心喷雾干燥塔内，干燥成粉沫得动物生殖器活性肌肽粉，密封装袋保存。

7.活性肌肽成品：取动物生殖器活性肌肽粉，经复配乳化或选粒，充软胶囊或硬胶囊，泡罩、包装成活性肌肽软胶囊或硬胶囊成品。复配重量比例为活性肌肽粉57-80％、VA0.1-1％、卵磷脂5-10％、VC0.2-2％、小麦胚芽油20-30％。

Claims (3)

1.一种从畜牧动物生殖器组织中萃取活性肌肽的方法，其特征在于：

I.动物生殖器的获取

1.1剔生殖器：从宰杀后的畜牧动物体剔出外生殖器、睾丸、输精管和肾脏；

II.动物生殖器预处理：

2.1清洗消毒：配制消毒液，取液态或固态的二氧化氯加入不锈钢或塑料容器内，加入蒸馏水或纯净水，搅拌溶解后配制成100-300ppm的消毒液，再加入消毒液体积3-10％的柠檬酸或盐酸活化消毒液；再将动物生殖器投入到消毒液内浸泡10-60min，取出投放在纯净水槽内进行清洗2-3次后再淋干；

2.2剪切：将消毒清洗后的动物生殖器，用不锈钢绞肉机进行1-3次绞切剪切成碎沫备用；

III.生物酶解

3.1定向内剪切活性肌肽：首先将剪切成碎沫的动物生殖器投放在真空酶反应釜内，加入动物生殖器重量1-3倍的蒸馏水或纯净水搅拌，调整PH值为6-8，加入动物生殖器质量的2-8‰AS1398中性蛋白酶，加热至30℃-60℃，真空度维持在60-180Pa，搅拌，酶反应3-8小时，升温60-90℃，10-30min灭酶处理；

3.2脂肪分离：

采用蝶式分离器在6000-10000r/min的高速分离下，将动物生殖器酶解液进行分离，上液为含脂肪的液体，中液和下液为酶解液，将中液和下液合并在压力空气下输送到复合蛋白酶反应釜内；

3.3定向端剪切活性肌肽：将分离脂肪后的定向内剪切的动物生殖器酶解液，即中液和下液在真空酶反应釜内，调整PH值为6-8，加入丹麦诺维信功能食品工业生产的Protamex复合蛋白酶和Flarourzyme复合风味蛋白酶；两种酶的比例为1∶0.2-0.6，添加量为中液和下液重量的0.1-0.6％；保温40℃-60℃，真空度为60-180Pa，搅拌酶解2-8小时；

3.4灭酶采用超高温在120℃-150℃瞬间灭酶，出料温度控在30℃-60℃，得动物生殖器生物酶解活性肌肽液；

IV.活性肌肽分离

4.1稀释：将彻底酶解的活性肌肽液，用循环泵输入稀释罐内，按1∶1-3的重量比例加入去离子水或蒸馏水，在真空60-100Pa的条件下，搅拌稀释成活性肌肽稀释液；

4.2钛棒分离：将活性肌肽稀释液用循环泵经2μm-5μm的钛棒式分离器进行分离，操作压力为100Pa，温度为30-60℃；将大于50000分子量的大分子分离出去；余液被输送平衡罐内备用；

4.3超微膜分离：将钛棒分离液从平衡罐内用供料泵输入0.2-1.0μm的保险过滤器中，然后用循环泵再将滤液在0.5-1.5MPa的压力下通过分子量300-10000道尔顿的超微膜分离器进行小分子活性肌肽的分离，得分子活性肌肽液；

V.低温浓缩

5.1采用热隔膜真空低温浓缩设备，将小分子活性肌肽液采用循环泵，在温度40-70℃，真空度0.4-0.8MPa的循环浓缩成原小分子活性肌肽液体积30-50％的活性肌肽浓缩液，并输送至复配罐内备用；

VI.活性肌肽粉：

6.1微胶囊包裹：

采用β环糊精、改性淀粉或蛋白粉做包裹壁材，活性肌肽浓缩液为芯材，其芯材与壁材的重量比例为1∶1-3，包埋温度为30-60℃，包埋时间为20-80min；经高剪切乳化复配罐的均质乳化，形成分子稳定、抗氧化的微胶囊包裹活性肌肽悬浮液体；

6.2喷雾干燥

将高剪切乳化的微胶囊活性肌肽液，用浓浆泵经100-600r/min的流速输入在170℃-260℃的离心喷雾干燥塔内，干燥成粉末得动物生殖器活性肌肽粉，密封装袋保存。

2.按照权利要求1所述制备方法，其特征在于：所述剔出的动物生殖器的贮存：将新鲜的动物生殖器采用速冻保鲜法，将生殖器按外生殖器、睾丸、输精管和肾脏分类后沾入纯净水，然后摆放在速冻盘内，或均匀的摆放在速冻机平板带上；在-10℃至-35℃的冷冻下，冷冻10-160min，冻实后取出装入洁净的包装箱内贮存于-18℃以下的冷藏库内备用。

3.按照权利要求2所述制备方法，其特征在于：所述动物生殖器的预处理前对冷冻的动物生殖器解冻，于解冻槽中用水浸没冷冻的动物生殖器，缓解30-80min，去除冰壳；然后捞出动物生殖器投放在20-40℃的温水中解冻20-60min，获得解冻后新鲜的动物生殖器备用。