CN101301023A - 一种鹿茸鹿鞭胶原多肽、其制备方法及其制成的口服制剂 - Google Patents
一种鹿茸鹿鞭胶原多肽、其制备方法及其制成的口服制剂 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种鹿茸鹿鞭胶原多肽、其制备方法及其制成的口服制剂。采用现代生物酶解技术,对传统的中药材鹿茸、鹿鞭进行水解、提纯,得到的一种小分子多肽制剂。该多肽制剂在利于人体吸收的同时又不会破坏鹿茸、鹿鞭中的天然营养成分,有着良好的补肾健体、强筋壮骨功效,是一种天然的保健产品。而且,本发明方法可控性强,适用于大规模生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种鹿茸鹿鞭胶原多肽、其制备方法及其制成的口服制剂。
背景技术
鹿产品自古以来就是疗疾养生的珍品,是中药之中的上品。而鹿产品中尤以鹿茸,鹿鞭的营养成分最高。鹿茸为鹿科的动物梅花鹿或马鹿的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角。《本草纲目》中记载:“此物生精补髓,养血益阳,强筋健骨,治一切虚损,耳聋,目暗,眩晕,虚痢。”。鹿鞭是鹿科动物梅花鹿或马鹿干燥带睾丸的阴茎,其味甘、咸、性温,归肝、肾经。具有补肾阳、益精血的功能,属补益类中药。
现代科学研究表明,鹿茸、鹿鞭中含有多种有效成分,如不饱和脂肪酸、磷脂类、蛋白质、生物胺和多种对人体有益的微量元素,具有生精补髓、益肾助阳、强筋壮骨、延龄益寿等功效。鹿产品的应用开发,在中国古代典籍中就多有记述,但传统的鹿产品服用多需经过长时间的煎煮,为了更好的适应市场和改善药物的适口度,人们已将现代中药技术应用于鹿产品中,相继开发出鲜鹿茸冻干粉(CN1839884)、鹿茸咀嚼片(CN1270039)、鹿茸鹿鞭鞭酒等新剂型。但是这种将鹿茸和鹿鞭直接粉碎或是直接切片制得的产品,其中的鹿茸、鹿鞭大分子蛋白进入体内后大部分还没来得及被吸收即被排出体外,严重影响其功效。
专利申请《一种制备鹿茸药用成分的水解提取方法》(CN1425387)中介绍了利用复合的生物催化剂对鹿茸进行水解的方法,但是其对生物催化剂(生物酶)的酶活单位、酶解条件以及所得产物等都没有实质性的说明,无法应用于工业化生产。
为了解决上述问题,本发明提供了一种易于被人体吸收利用的鹿茸鹿鞭胶原多肽产品,并提供一种生产该产品的方法,为其应用于工业生产提供依据。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鹿茸鹿鞭胶原多肽、其制备方法及其制成的口服制剂。
本发明提供的一种鹿茸鹿鞭胶原多肽,它是以鹿茸,鹿鞭为原料,经生物酶制剂处理得到鹿茸鹿鞭胶原多肽,其特征在于所述鹿茸鹿鞭胶原多肽通过凝胶过滤法进行测定时,其数均分子量小于或等于3000Da。该种鹿茸鹿鞭胶原多肽总氮含量大于或等于12%,氨基酸总量大于80%,钙、磷、锌、铁、锰等元素丰富。其中所述生物酶制剂为木瓜酶、中性蛋白酶、菠萝酶、胰蛋白酶中的一种酶或两种以上的酶组合鹿茸鹿鞭胶原多肽。优选地所述生物酶制剂是胰蛋白酶或比例1∶2的木瓜酶和菠萝酶的组合或比例为1∶1的中性蛋白酶和木瓜酶的组合。生物酶制剂的加入量为鹿茸鹿鞭材料干重(本发明中也称为底物)的0.5~2%,,底物水料比约为1∶9,适宜反应的温度为40-60℃,适宜的pH值为5-8,反应2~5小时。
本发明还提供了制备这种鹿茸鹿鞭胶原多肽的方法,它包括下述步骤:
a)用生物酶制剂处理鹿茸、鹿鞭。所述的生物酶制剂是木瓜酶、中性蛋白酶、菠萝酶、胰蛋白酶中的一种酶或两种以上的酶组合;
b)酶解后的产品经板框过滤机过滤得到滤液;
c)将滤液干燥得干粉。优选上述干燥方法为喷雾干燥,并且优选喷雾干燥的条件为:进口温度140~190℃;出口温度60~90℃,获得的干粉即为本发明的鹿茸鹿鞭胶原多肽;
另外,本发明还提供了一种鹿茸鹿鞭胶原多肽口服制剂。其是将上述鹿茸鹿鞭胶原多肽配以辅助性成分(即中医理论允许的药材或可药用辅料)制成相应的鹿茸鹿鞭胶原多肽口服制剂,如颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液或丸剂。例如和枸杞、肉苁蓉等补肾产品一起制成片剂或胶囊,用于制作补肾强身的保健食品。
和以往的鹿茸鹿鞭产品相比,本产品既不破坏其天然有效成分,又将不利于人体吸收的大分子分解成小分子的多肽,这就使得鹿茸鹿鞭中的有效成分都能被充分的吸收和利用。本发明采用了喷雾干燥,得到的干粉保质期长,食用方便,属纯天然绿色保健食品,可以和中医理论指导下的其它药材或可药用辅料组合使用,制成保健品、药品,用途广泛。本发明制得鹿茸鹿鞭胶原多肽产品以及相关口服制剂营养价值高,保健效果好。同时本发明提供的生产鹿茸鹿鞭胶原多肽以及相关口服产品生产周期短,要求设备及成本低,产率高(在60%左右),便于实施大规模生产。
附图说明
图1是鹿茸鹿鞭胶原多肽制备过程的工业流程图;
图2是鹿茸鹿鞭胶原多肽的凝胶色谱图(分子量测定);
图3是鹿茸鹿鞭胶原多肽的氨基酸及微量元素检测结果。
具体实施方式
本发明的鹿茸鹿鞭胶原多肽是以鹿茸、鹿鞭为原料,先将其洗净,粉碎,然后采用酶解工艺,在温和的环境中将原有的大分子鹿茸和鹿鞭蛋白水解成小分子的多肽,这个过程能在不破坏其天然成分的情况下将原料中的大分子物质分解,变成利于吸收和利用的小分子的多肽,随后将酶解后获得的溶液过滤,喷雾干燥成粉,即得。还可和枸杞、肉苁蓉等补肾产品或可药用辅料一起制成片剂或胶囊,用于制作补肾强身的保健食品。
1、原料的选择:鹿茸鹿鞭主要来源于马鹿或梅花鹿。药材市场上马鹿数量更多,价格要比梅花鹿便宜,而马鹿茸和梅花鹿茸的蛋白成分基本相似,两者功效差异不大,虽然梅花鹿的产率比马鹿的稍高,但从性价比综合考虑,本发明中采用马鹿茸和马鹿鞭为主要原料。
表1、马鹿与梅花鹿茸的水解后的产率
马鹿茸 | 梅花鹿茸 | |
氨基酸含量 | 68.5% | 74.3% |
产率 | 50.4% | 55.2% |
表2、马鹿与梅花鹿鞭的水解后的产率
马鹿鞭 | 梅花鹿鞭 | |
氨基酸含量 | 83.2% | 85.8% |
产率 | 69.4% | 70.2% |
2、酶的选择:
各种蛋白酶的使用条件
序号 | 酶的名称 | 使用说明 |
1 | 木瓜蛋白酶 | 内切酶。是从木瓜果实中提炼而得的纯天然生物酶,对动植物蛋白、酯、酰胺等有非常强的水解能力,是一种广谱酶制剂,反应适宜温度40~60℃,pH值6~7。 |
2 | 中性蛋白酶 | 内切酶。由枯草芽孢杆菌经发酵提取而得的,是一种广谱酶制剂,水解适宜温度35~55℃,pH值:6.0~7.5。 |
3 | 胰蛋白酶 | 内切酶,对精氨酸和赖氨酸肽链具有选择性水解作用,适温度为37℃,pH值为8.0~9.0。 |
4 | 菠萝蛋白酶 | 内切酶。是从菠萝水果皮、芯等部分提炼而得的一种纯天然植物蛋白酶,其活性中心为疏基(-SH),反应适宜温度30~45℃,pH值为6~7 |
生物酶制剂具有底物专一性,即不同的酶只对特异的肽键起作用,如胰蛋白酶只对精氨酸和赖氨酸肽链具有水解作用。由于鹿茸鹿鞭胶原结构十分复杂,发明人通过大量实验,对各种酶及其组合进行筛选,发现木瓜酶、中性蛋白酶、菠萝酶、胰蛋白酶中的一种酶或两种以上的酶组合能使原料中不同的蛋白肽链得到最大程度的水解,其中木瓜酶、菠萝酶的酶活力应在40万单位以上,中性蛋白酶、胰蛋白酶的酶活力应在4万单位以上。为了提高产率,得到高度水解的产物,发明人还通过多因素试验确定了本发明中使用生物酶的酶解条件以及筛选获得的生物酶制剂的用量。
下面通过实施例详细地说明本发明,但是本发明不应该被解释为仅限于此。
实施例1
将鹿茸、鹿鞭按质量比1∶1洗净,粉碎(过80目筛),按1∶9的水料比将碎末放于水中,加入中性蛋白酶和木瓜酶(中性蛋白酶∶木瓜酶的比例为1∶1),加入量为物料干重的1%,然后加热到50℃,调节pH到7,恒温4小时,将温度迅速升至100℃煮沸15分钟,冷却至30℃,然后经板框过滤机滤出,对滤液进行喷雾干燥,得黄色粉末,测定产物的分子量分布、氨基酸总量及其他理化指标,结果见表3。
实施例2
将鹿茸、鹿鞭按质量比4∶1洗净,粉碎(过80目筛),按1∶9的水料比将碎末放于水中,加入木瓜酶和菠萝酶(比例1∶2),酶的添加量为物料干重的1%,然后加热到50℃,调节pH到6.5,恒温3小时,将温度迅速升至100℃煮沸15分钟,冷却至30℃,然后经板框过滤机滤出,对滤液进行喷雾干燥,得黄色粉末,测定产物的分子量分布、氨基酸总量及其他理化指标,结果见表3。
实施例3
将鹿茸、鹿鞭按质量比1∶4洗净,粉碎(过80目筛),按1∶9的水料比将碎末放于水中,加入胰蛋白酶,酶的加入量为物料干重的2%,然后加热到40℃,调节pH到8.0,恒温5小时,将温度迅速升至100℃煮沸10分钟,冷却至30℃,然后经板框过滤机滤出,对滤液进行喷雾干燥,得黄色粉末,测定产物的分子量分布、氨基酸总量及其他理化指标,结果见表3。
表3、产物检测结果
数据分析及说明:
1、从分子量上可以看出,分子量的分布较窄,分子量大约在2600左右,这主要是由于采用的生物酶制剂对底物作用较彻底,使得活性成分集中在分子量较小的部分,易于人体吸收。
2、从氨基酸的检测中可以看出,各种氨基酸的总和可达80%,即本发明的方法得到的多肽纯度较高,这是因为在水解过程中,可被水解的蛋白均分解成可溶于水的多肽,而另外一些不能被水解的杂质及不溶性非蛋白成分则被滤出,使蛋白成分得到纯化。
3、由各元素的成分的测定可知,在本产品中,产品的钙、磷、锰的成分显著,这主要是鹿茸的主要成分,说明在本发明中,对人体有益的微量元素得以保存。而且本产品中的铁,锰,锌的含量较高,铁是血红蛋白的必不可少的成分,而锰和锌含量是肾和精液中的所含的元素,因此可以看出本产品可以补肾、补血,并在微量元素的补充方面有着很大的作用。
本发明方法上还有着以下几点优点
1、本产品的制备是将鹿茸与鹿鞭同时进行处理,将两种原料同时处理,这样既节省了操作工序,又能将产品中的有益成分完全提取。其中鹿茸的主要成分为蛋白质和骨质,其中的蛋白质占总量的50%以上,骨质主要由一部分的骨质胶原和钙、磷、锰等。鹿鞭的主要成份为蛋白质及脂类,其中蛋白质类成分占80%,而本产品最后得到的蛋白质含量80%左右,基本将原料中的全部蛋白质提取出来。而且钙、磷、锰的含量很高,证明原料中的大部分微量元素在水解过程中得到保留,最大程度地保证了其功效成分的利用。
2、本产品在生产中,适易反应的温度为40-60℃,适宜的pH值为5-8,在这个环境中,酶活力最大,而最后产品的pH值接近中性也符合应用要求,因此无须使用大量酸碱进行pH值的调节,避免了杂质的引入。生产该产品所需的设备也为常用的食品加工设备,工艺简单,工艺可控性强,适合大规模生产。
3、本产品得到的溶液采用喷雾干燥的方法,这极大地简化了生产工艺,使得本产品利于操作,产品便与携带,便于储藏。
本发明中所用的%单位,除另有说明外,均为质量百分比。
工业实用性
本产品主要是鹿茸、鹿鞭的多肽提取物,有着鹿茸、鹿鞭的主要功效成分,而且分子量小,易溶解,易吸收。因此,主要应用于保健品或药品中,可直接与可药用辅料制成口服制剂,也可在中医药理论指导下配以补肾功效枸杞、肉苁蓉的提取物,制成胶囊或片剂,获得功效显著的保健食品。
此外,为了更好地理解和说明本发明,下文中给出了本发明中采用的有关测试方法,尽管这些测试方法为本领域的技术人员所熟知。
1.分子量及其分布的测定
照多糖的分子量与分子量分布测定法(中国药典2005版二部附录VH分子排阻色谱法)测定。
具体测定方法如下:
色谱条件与系统适应性试验用Waters Ultrohydrogel 1000,500,250串联的凝胶色谱柱,取磷酸氢二钠323.11g,磷酸二氢钾140.8g和叠氮钠16g,加水至2000ml做储备液。取储备液50ml加水至2000ml为流动相,流速为每分钟0.8ml;运行时间50分钟;柱温为30℃;采用示差折光检测器,理论板数按葡聚糖峰计算,应不小于1500。
样品测定称取已知数均分子量(1010~332800)的葡聚糖对照品,分别加流动相支撑每1ml含6mg的溶液;另取供试样品0.6g,至100ml容量瓶中,加流动相稀释至刻度,作为供试溶液,振摇,分别取100μl注入液相色谱仪,记录色谱图。数据采用专用GPC软件处理。
2.常规理化指标的测定
氨基酸成分检测方法按GB/T5009.124-2003食品中氨基酸的操作.;
水分的测定按GB/T5009.3-2003食品中水分的操作;
灰分测定按GB/T5009.4-2003食品中灰分的操作;
蛋白质测定按GB/T5009.5-2003食品中蛋白质的操作;
微量元素的测定按B/T5009.14-2003、GB/T5009.13-2003、GB/T5009.90-2003测定(原子吸收法)。
3.蛋白回收率=滤液总蛋白/原料总蛋白×100%。
Claims (9)
1、一种鹿茸鹿鞭胶原多肽,它是以鹿茸,鹿鞭为原料,经生物酶制剂处理得到鹿茸鹿鞭胶原多肽,其特征在于所述鹿茸鹿鞭胶原多肽通过凝胶过滤法进行测定时,其数均分子量小于或等于3000Da。
2、权利要求1所述的鹿茸鹿鞭胶原多肽,其特征在于,其中所述生物酶制剂为木瓜酶、中性蛋白酶、菠萝酶、胰蛋白酶中的一种酶或两种以上的酶的组合。
3、权利要求2所述的鹿茸鹿鞭胶原多肽,其特征在于其中所述生物酶制剂为胰蛋白酶或比例为1∶2的木瓜酶和菠萝酶的组合或比例为1∶1的中性蛋白酶和木瓜酶的组合。
4、权利要求1-3任一项所述鹿茸鹿鞭胶原多肽的制备方法,其特征在于,该方法包括下列步骤:
a)用生物酶制剂处理鹿茸、鹿鞭;
b)酶解后的产品鹿茸鹿鞭胶原多肽经板框过滤机过滤得到滤液;
c)喷雾干燥滤液得干粉,即为鹿茸鹿鞭胶原多肽。
5、权利要求4所述的方法,其中步骤a)所述的生物酶制剂为木瓜酶、中性蛋白酶、菠萝酶、胰蛋白酶中的一种酶或两种以上的酶组合;优选为比例为1∶2的木瓜酶、菠萝酶组合或比例为1∶1的中性蛋白酶和木瓜酶的组合;生物酶制剂的添加量为底物量0.5~2%,酶解条件是pH5~8,温度为40~60℃,底物水料比为1∶9。
6、权利要求4所述的方法,鹿茸、鹿鞭可分别进行生物酶制剂处理,也可两者同时进行。
7、权利要求4所述的方法,其中步骤a)中的鹿茸、鹿鞭来源于马鹿或梅花鹿。
8、一种鹿茸鹿鞭胶原多肽口服制剂,其以权利要求1-3任一项的鹿茸鹿鞭胶原多肽为主要原料,配以辅助性成分即中医理论允许的药材或可药用辅料,制成相应的鹿茸鹿鞭胶原多肽口服制剂。
9、如权利要求8的鹿茸鹿鞭胶原多肽口服制剂,其中该口服制剂是颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液或丸剂。
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