CN101278051B - 个人护理组合物及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了用于治疗各种疾病和症状的肽和支持的肽。在特别优选的实施方式中，本发明提供了用于个人护理的组合物和方法。在一些实施方式中，本发明提供了用在皮肤护理和/或毛发护理中的组合物，以及化妆品组合物。在可选的特别优选的实施方式中，本发明提供了治疗皮肤病例如红斑痤疮的肽和支持的肽。在一些特别优选的实施方式中，本发明支持的肽是抗-VEGF肽。在可选的特别优选的实施方式中，抗-VEGF肽在支架蛋白上表达。在一些最优选的实施方式中，支架蛋白包括BBI。
Description
发明领域
本发明提供了治疗各种疾病和症状的肽和支持肽(supported peptides)。在特别优选的实施方式中，本发明提供了用于个人护理的组合物和方法。在一些实施方式中，本发明提供了用在皮肤护理和/或毛发护理中的组合物，以及化妆品组合物。在可选的特别优选的实施方式中，本发明提供了治疗皮肤疾病例如红斑痤疮的肽和支持肽。在一些特别优选的实施方式中，本发明的支持肽是抗-VEGF肽。在可选的特别优选的实施方式中，抗-VEGF肽在支架蛋白上表达。在一些最优选的实施方式中，支架蛋白包括BBI。
发明背景
血管发生是特定组织区域的血液供给的发展。血管发生是正常的胚胎发育和创伤床的再血管化的一部分，以及由于炎性细胞或恶性细胞刺激血管生长所致。血管发生也是这样的过程，通过该过程肿瘤或炎性症状通过生成微血管而衍生出血液供给。
在正常组织和恶性癌组织中，通过平衡生血管刺激物和生血管抑制剂调节血管发生，所述生血管刺激物和生血管抑制剂在靶组织中以及在远距离部位产生(参见，Fidler et al.，[1998]；和McNamara et al。[1998])。血管内皮生长因子A(VEGF，也称为血管通透因子(vascular permeability factor)，“VPF”)是血管生成的主要刺激物。VEGF是多功能细胞因子，其由缺氧和致癌突变诱导，并由很多种组织产生(参见，Kerbel et al.，[1998]；和Mazure et al.，[1996])。
VEGF被确认为病理学条件中首要的血管发生刺激物，这已经产生了各种阻断VEGF活性的尝试。抑制性抗-VEGF受体抗体、可溶性受体构建物、反义策略、针对VEGF的RNA适体和低分子量VEGF受体酪氨酸激酶(RTK)抑制剂已经都被提出，用于干扰VEGF信号传导(参见，Siemeister et al.，[1998])。事实上，抗VEGF的单克隆抗体已经表现出抑制人肿瘤异种移植生长和小鼠中的腹水形成(参见Kim et al.，[1993]；Asano et al.，[1998]；Mesiano et al.，[1998]；Luo et al.，[1998a]和[1998b]；以及Borgstrom et al.，[1996]和[1998])。
RTK包括具有各种生物活性的多肽生长因子的跨膜受体的大家族。在配体结合后，RTK的内在功能被激活，这导致受体和多种细胞底物的磷酸化，从而引起多种细胞应答(参见，Ullrich&Schlessinger，Cell 61：203-212[1990])。
血管发生，涉及VEGF和RTK，其不仅仅参与癌症发展，因为许多影响不同生理系统的其它疾病或症状也是血管发生依赖性的，例如关节炎和动脉硬化斑块(骨和韧带)、糖尿病性视网膜病、新生血管性青光眼、黄斑变性、眼部疱疹、沙眼和角膜移植物新血管形成(眼部)、牛皮癣、硬皮病、红斑痤疮、血管瘤和肥大性瘢(皮肤)、血管黏附和血管纤维瘤(血液系统)。
VEGF对于皮肤血管化作用而言是较重要的血管发生因子(Detmar[2000])。VEGF表达在牛皮癣的增生表皮中(Detmar and Yeo et al.[1995])、在愈合伤口中以及在以增强的血管发生为特征的其它皮肤疾病(前述Detmar[2000])中被上调。据报道，在转基因小鼠的皮肤中的VEGF定向过表达导致增强的皮肤血管化作用，其伴随有相同数量的弯曲和渗漏的血管(参见，例如Brown et al.[1998])。此外，在小鼠皮肤中VEGF的慢性合成产生人牛皮癣的第一个组织学等同鼠模型(Xia et al.[2003])，其通过VEGF特异性结合试剂是可逆转的。
蛋白酶参与很多种生物学过程。蛋白酶和蛋白酶抑制剂之间平衡的破坏通常与病理学组织破坏相关。实际上，各种研究已经聚焦在蛋白酶在组织受损中的作用，并且据认为，蛋白酶和蛋白酶抑制剂之间的平衡是维持组织完整性的主要决定因素。来自炎性细胞——包括嗜中性粒细胞——的丝氨酸蛋白酶参与多种炎性疾病，例如肺气肿、关节炎、特应性皮炎和牛皮癣。
蛋白酶还似乎在某些癌症的扩散中起作用。正常细胞与复杂的蛋白质网络接触存在，该蛋白质网络称为细胞外基质(ECM)。ECM是细胞移动的屏障，因此为了转移，癌细胞必须设计出打破它们的粘附、降解并移动通过ECM的途径。蛋白酶是降解其它蛋白质的酶，并且，长期以来认为，蛋白酶通过破坏ECM帮助将肿瘤细胞从原始位置释放出来。近来的研究已经表明，通过激活肿瘤细胞膜中称为蛋白酶激活受体-2(Protease-Activated Receptor-2，PAR2)的蛋白，它们可以促进细胞形状改变和细胞运动性。这导致胞内级联反应，其激活了细胞的运动装置。因此，做一个假设：在肿瘤转移中首要步骤之一是细胞形状的再组织，使得它在朝向迁移方向的边缘形成独特的突出。然后，细胞迁移通过血管壁，并行进到远端位置，最终再黏附并形成转移瘤。例如，人前列腺上皮细胞组成型地分泌前列腺特异性抗原(prostate-specific antigen，PSA)——一种类似激肽释放酶的丝氨酸蛋白酶，其是精浆中的正常成分。该蛋白酶发挥降解胞外基质和促进癌细胞侵入的作用。
合成和天然的蛋白酶抑制剂已经表现出体内和体外抑制肿瘤发展。早先的研究已经表明，一些属于被归类为丝氨酸蛋白酶抑制剂或SERPINS的结构相关蛋白家族的蛋白酶抑制剂已知抑制几种蛋白酶，包括胰蛋白酶、组织蛋白酶G、凝血酶和组织激肽释放酶，以及嗜中性粒细胞弹性蛋白酶。SERPINS在阻止/抑制体外的致癌原诱导的转化和在动物模型系统中的癌发生方面是极其有效的。纯化的蛋白酶抑制剂的全身给药明显减少关节发炎以及软骨和骨破坏。
蛋白酶抑制剂的局部给药在这样的症状中有用，如特应性皮炎——皮肤发炎的一种常见形式，其可以局限于几个斑点或涉及大部分的身体。蛋白酶抑制剂的除色素活性和它们防止紫外诱导的色素形成的能力已经在体外和体内都予以证明(参见，例如Paine et al.，J.Invest.Dermato1.，116：587-595[2001])。也已经报道，蛋白酶抑制剂促进伤口愈合。例如，经证明，当局部应用时，分泌型淋巴细胞蛋白酶抑制剂逆转组织破坏并加快伤口愈合过程。此外，丝氨酸蛋白酶抑制剂还可以帮助减轻红斑狼疮患者的疼痛(参见，例如美国专利第6537968号)。
Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)是在大豆和各种其它种子——主要是豆科种子和植物材料——中发现的稳定的、低分子量胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶抑制剂家族的名称。BBI包括分子量为约8kD的含二硫键的蛋白家族(参见，例如Chou et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA71：1748-1752[1974]；Yavelow et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 82：5395-5399[1985]；以及Yavelow et al.，Cancer Res.(Suppl.)43：2454s-2459s[1983])。BBI具有含两个三环结构域的假对称结构，每一个三环结构域含有独立的天然结合环，该天然结合环含有胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的结合位点(参见，Liener，Summerfield and Bunting(eds)，Advances in Legume Science，Royal Bot.Gardens，Kew，England)。这些结合位点每一个都具有规范的环结构，其是在多种丝氨酸蛋白酶抑制剂中发现的基序(Bode and Huber，Eur.J.Biochem.，204：433-451[1992])。通常，当属于大豆抑制剂中一种时，天然环之一抑制胰蛋白酶，而另一个抑制胰凝乳蛋白酶(参见，Chen et al.，J.Biol.Chem.，267：1990-1994[1992]；Werner & Wemmer，Biochem.，31：999-1010[1992]；Lin et al.，Eur.J.Biochem.，212：549-555[1993]；以及Voss et al.，Eur.J.Biochem.，242：122-131[1996])，尽管在其它生物(例如，拟南芥)中，两个环对于胰蛋白酶都是特异的。
通过形成稳定的化学计量复合物，STI抑制胰蛋白酶的蛋白水解活性(例如，参见Liu，Chemistry and Nutritional Value of Soybean Components，In：Soybeans， Chemistry，Technology and Utilization，pp.32-35，Aspen Publishers，Inc.，Gaithersburg，Md.，[1999])。STI由181个氨基酸和两个二硫桥组成，并且其大体上呈球形(参见，例如Song et al.，J.Mol.Biol.，275：347-63[1998])。胰蛋白酶抑制环位于第一个二硫桥内。在蛋白酶的早期研究中，Kunitz型大豆胰蛋白酶抑制剂(Kunitz-typesoybean trypsin inhibitor，STI)起了关键的作用，其已经被用作生物化学和动力学作用的主要底物，这产生了对蛋白酶抑制剂标准作用机理的定义。
EglinC是小的单体蛋白质，其属于丝氨酸蛋白酶抑制剂的马铃薯胰凝乳蛋白酶抑制剂家族。属于该家族的蛋白通常是小的(长度为60-90个氨基酸残基)，并不含二硫键。然而，尽管缺乏二硫键来帮助稳定其三级结构，Eglin C对于酸化变性或热变性仍是高度耐受的。该蛋白天然存在于医用水蛭(Ieech Hirudomedicinalis)中。
如上所述，蛋白酶抑制剂干扰蛋白酶的作用。天然存在的蛋白酶抑制剂可以在许多食物中发现，例如谷物(燕麦、大麦和玉米)、抱子甘蓝、洋葱、甜菜根、小麦、小米和花生。一种感兴趣的来源是大豆。存在于大豆中的蛋白酶抑制剂的平均水平对于两种最重要的蛋白酶抑制剂Kunitz和Bowman-Birk分别是约1.4％和0.6％。显然，这些低水平使得分离天然蛋白酶抑制剂用于临床和其它应用变得不切实际。实际上，尽管在个人护理领域中有许多研究，但是，在本领域中仍然存在对于这样的个人护理组合物的需求，所述个人护理组合物具有期望的特性，而没有对蛋白质的不期望的化学修饰。在本领域中还存在对于这样的方法的需求：将蛋白输送入个人护理组合物中以便以可用形式有效输送所述蛋白质的方法。
发明概述
本发明提供了治疗各种疾病和症状的肽和支持肽(支持的肽，被支持的肽，supported peptide)。在特别优选的实施方式中，本发明提供了用于个人护理的组合物和方法。在一些实施方式中，本发明提供了用在皮肤护理和/或毛发护理中的组合物，以及化妆品组合物。在可选的特别优选的实施方式中，本发明提供了治疗皮肤疾病的肽和支持肽，例如红斑痤疮。在一些特别优选的实施方式中，本发明的支持肽是抗-VEGF肽。在可选的特别优选的实施方式中，抗-VEGF肽在支架蛋白上表达。在一些最优选的实施方式中，支架蛋白包括BBI。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了适于改善皮肤外观的化妆品和/或药物化合物。本发明进一步提供了阻断蛋白结合的肽。在一些优选的实施方式中，所述蛋白是VEGF。在一些特别优选的实施方式中，所述肽在耐蛋白酶的支架上表达。在一些尤其优选的实施方式中，所述支架是蛋白酶抑制剂(例如BBI、STI或Eglin胰凝乳蛋白酶抑制剂)。在一些最优选的实施方式中，所述蛋白酶抑制剂是BBI。
在一些实施方式中，本发明提供了个人护理组合物，其包括支架，其中所述支架包括至少一种蛋白酶抑制剂和至少一种选自SEQ ID NOS：1-17的肽。在可选的实施方式中，本文提供的其它肽序列的任何一种发现在本发明中有用。在进一步的实施方式中，另外的序列发现在本发明中有用，包括但不限于：SEQ IDNOS：20-25、31、32-34、43和238。在仍进一步的实施方式中，所述至少一种肽序列选自YNLYGWT(SEQ ID NO：1)、KYYLYWW(SEQ ID NO：239)、WYTLYKW(SEQ ID NO：240)、TYRLYWW(SEQ ID NO：241)、RYSLYYW (SEQ ID NO：242)、YYLYYWK(SEQ ID NO：243)、NYQLYGW(SEQ ID NO：244)、TLWKSYW(SEQ IDNO：245)、TKWPSYW(SEQ ID NO：246)、PLWPSYW(SEQ ID NO：247)、RLWPSYW(SEQ ID NO：248)、TLWPKYW(SEQ ID NO：249)、KYDLYWW (SEQ ID NO：33)、RYDLYWW(SEQ ID NO：250)、DYRLYWW(SEQ ID NO：251)、DYKLYWW(SEQID NO：34)、EYKLYWW(SEQ ID NO：252)和RYPLYWW(SEQ ID NO：253)。在一些特别优选的实施方式中，肽序列包括SEQ ID NO：31中阐述的基序。在还有进一步的实施方式中，支架包括选自SEQ ID NO：22-25的氨基酸序列。
在另外的实施方式中，所述蛋白酶抑制剂选自Bowman-Birk抑制剂、大豆胰蛋白酶抑制剂和Elgin胰凝乳蛋白酶抑制剂。在一些特别优选的实施方式中，Bowman-Birk抑制剂是经修饰的Bowman-Birk抑制剂。在进一步的实施方式中，所述支架占个人护理组合物的约0.001的重量百分比到约5的重量百分比，而在可选的实施方式中，所述支架占个人护理组合物的约0.01的重量百分比到约2.0的重量百分比，并且在另外的实施方式中，所述支架占个人护理组合物的约0.01的重量百分比到约1的重量百分比。
本发明还提供了包括皮肤护理组合物的个人护理组合物。在一些优选的实施方式中，皮肤护理组合物选自皮肤乳剂、洗液、喷雾剂、乳液、胶状悬液、泡沫剂、气溶胶、液体、凝胶、浆液(sera)和固体。在另外的实施方式中，皮肤护理组合物是保湿沐浴液、浴液、抗微生物清洁剂、皮肤防护霜、润肤露、面霜、润肤霜、洁面乳、面胶、脸部用浆液(facial sera)、基于表面活性剂的洁面奶、脸用去角质胶、抗痤疮修护用品、面部爽肤水、去角质霜、面膜、须后舒缓乳、须前舒缓乳、助晒组合物(tanning composition)、皮肤增亮组合物、去红肤组合物(skinredness reduction composition)、防晒霜、脱毛用品、毛发生长抑制剂和辐射防护剂。在另外的实施方式中，皮肤护理组合物包括局部施用的非处方组合物、抗真菌修护用品、抗痤疮修护用品、皮肤防护剂、防晒霜、防臭剂和止汗药。
在一些优选的实施方式中，皮肤护理组合物能够使皮色亮白，而在可选的实施方式中，皮肤护理组合物能够降低皮色中的红色。在仍进一步的实施方式中，皮肤护理组合物能够防止皮色暗化，而在另外的实施方式中，皮肤护理组合物能够防止肤色发生(skin color development)。在一些优选的实施方式中，皮肤护理组合物是辐射防护剂。在可选的实施方式中，皮肤护理组合物包括至少一种辐射防护剂。在一些特别优选的实施方式中，辐射防护剂选自防晒霜。在一些最优选的实施方式中，防晒霜选自非防水性防晒霜、极防水性防晒霜和硅氧烷包水防晒霜(water-in-silicone sunscreen)。
本发明还提供了可以防止毛发生长的个人护理组合物。在一些实施方式中，所述毛发选自脸部毛发、腿毛、臂毛和体毛。
本发明还提供了个人护理组合物，其是毛发护理组合物。在一些实施方式中，毛发护理组合物选自香波、护发素、头发定型组合物、染发剂、持久卷发制剂、乳膏、凝胶、摩丝、喷雾剂、乳液、胶状悬液、液体、泡沫和固体。在进一步的实施方式中，毛发护理组合物包括至少一种辐射防护剂。在一些优选的实施方式中，所述辐射防护剂选自非防水性防晒霜、极防水性防晒霜和硅氧烷包水防晒霜。在一些实施方式中，毛发护理组合物是辐射防护性的。
本发明进一步提供了个人护理组合物，其是口腔护理组合物。在一些优选的实施方式中，口腔护理组合物选自牙膏、牙用凝胶(toothgels)、嗽口液、嗽口水、防龋组合物、牙齿美白组合物、口香糖、义齿(假牙)粘附剂和口臭清新剂。
本发明还提供了个人护理组合物，其是化妆品组合物。在一些优选的实施方式中，化妆品组合物选自眼胶(eye gel)、眼影、高熔点唇膏、唇膏(lipstick)、唇彩、唇油(lip balm)、睫毛膏、眼线膏、粉饼制剂(pressed powder formulation)和粉底。在一些优选的实施方式中，化妆组合物(makeup composition)包括至少一种颜料。
在一些优选的实施方式中，包含至少一种颜料的化妆组合物是睫毛膏，其选自非防水性睫毛膏、防水性睫毛膏、增容睫毛膏(volumizing mascaras)、加长睫毛膏、卷曲睫毛膏、无水防水性睫毛膏、水基睫毛膏和睫毛或眉毛处理剂。
在另外的实施方式中，化妆组合物是粉饼制剂，其选自散粉、腮红、眼影和古铜粉。在仍进一步的实施方式中，化妆组合物是粉底，其选自油包水粉底、硅氧烷包水粉底、水包油粉底、无水化妆杆(anhydrous makeup sticks)和粉霜粉底(cream-to-powder foundation)。
本发明进一步提供了含有支架的个人护理组合物，其中所述支架包括SEQID NO：19描述的氨基酸序列。在另外的实施方式中，所述支架进一步包括SEQ IDNO：20和/或21描述的氨基酸序列。在可选的实施方式中，SEQ ID NO：20和/或21描述的氨基酸序列(一个或多个)被至少一种具有选自SEQ ID NOS：1-17的氨基酸序列的肽取代。在可选的实施方式中，本文所提供的任何肽序列发现可用于替换SEQ ID NO：20和/或21。在可选的实施方式中，本文所提供的另外的肽序列的任何一种发现在本发明中有用。在进一步的实施方式中，发现另外的序列在本发明中有用，包括但不限于SEQ SEQ ID NOS：20-25、31、32-34、43和238。在仍进一步的实施方式中，所述至少一种肽序列选自YNLYGWT(SEQ ID NO：1)、KYYLYWW(SEQ ID NO：239)、WYTLYKW(SEQ ID NO：240)、TYRLYWW(SEQID NO：241)、RYSLYYW(SEQ ID NO：242)、YYLYYWK(SEQ ID NO：243)、NYQLYGW(SEQ ID NO：244)、TLWKSYW(SEQ ID NO：245)、TKWPSYW(SEQ IDNO：246)、PLWPSYW(SEQ ID NO：247)、RLWPSYW(SEQ ID NO：248)、TLWPKYW(SEQ ID NO：249)、KYDLYWW(SEQ ID NO：33)、RYDLYWW(SEQ ID NO：250)、DYRLYWW(SEQ ID NO：251)、DYKLYWW(SEQ ID NO：34)、EYKLYWW(SEQ IDNO：252)和RYPLYWW(SEQ ID NO：253)。在一些特别优选的实施方式中，所述肽序列包括SEQ ID NO：31所描述的基序。在仍进一步的实施方式中，所述支架包括选自SEQ ID NO：22-25的氨基酸序列。
本发明还提供了制备本发明的个人护理组合物的方法，包括将有效量的所述支架和至少一种生理学上可接受的载体或赋形剂混合。
本发明进一步提供了调节对象的肤色的方法，包括步骤：提供至少一种包括本发明的个人护理组合物的组合物；ii)提供待治疗的对象；以及在患者肤色期望被调节的区域中将所述组合物应用到患者上。在一些实施方式中，所述肤色的调节包括所述使对象的肤色亮白。在一些可选的实施方式中，所述肤色的调节包括降低对象肤色中的红色。在另外的实施方式中，所述方法包括个人护理组合物，所述个人护理组合物包括SEQ ID NO：19所描述的氨基酸序列。在所述方法的可选实施方式中，所述个人护理组合物包括SEQ ID NO：20和21描述的氨基酸序列的至少一种。在仍进一步的实施方式中，SEQ ID NO：20和21描述的氨基酸序列的至少一种被至少一种具有选自SEQ ID NOS：1-17的氨基酸序列的肽取代。在可选的实施方式中，本文所提供的另外的肽序列的任何一种可用于替代SEQ ID NO：20和/或21。在进一步的实施方式中，另外的序列发现在本发明中有用，包括但不限于SEQ SEQ ID NOS：20-25、31、32-34、43和238。在仍进一步的实施方式中，所述至少一种肽序列选自YNLYGWT(SEQ ID NO：1)、KYYLYWW(SEQ IDNO：239)、WYTLYKW(SEQ ID NO：240)、TYRLYWW(SEQ ID NO：241)、RYSLYYW(SEQ ID NO：242)、YYLYYWK(SEQ ID NO：243)、NYQLYGW(SEQ ID NO：244)、TLWKSYW(SEQ ID NO：245)、TKWPSYW(SEQ ID NO：246)、PLWPSYW(SEQ IDNO：247)、RLWPSYW(SEQ ID NO：248)、TLWPKYW(SEQ ID NO：249)、KYDLYWW(SEQ ID NO：33)、RYDLYWW(SEQ ID NO：250)、DYRLYWW(SEQ ID NO：251)、DYKLYWW(SEQ ID NO：34)、EYKLYWW(SEQ ID NO：252)和RYPLYWW(SEQID NO：253)。在一些特别优选的实施方式中，所述肽序列包括SEQ ID NO：31所描述的基序。在仍进一步的实施方式中，所述支架包括选自SEQ ID NO：22-25的氨基酸序列。
本发明还提供了调节对象的毛发生长的方法，包括步骤：提供本发明的个人护理组合物；提供待治疗的对象；以及在患者毛发生长期望被调节的区域中将所述组合物应用到患者上。在一些实施方式中，所述毛发生长的调节包括抑制对象毛发的生长，其中待抑制的毛发选自面部毛发、腋毛、腿毛、体毛和臂毛以及头发。在还有另外的实施方式中，所述方法包括个人护理组合物，所述个人护理组合物包括SEQ ID NO：19所描述的氨基酸序列。在所述方法的可选实施方式中，所述个人护理组合物包括SEQ ID NO：20和21描述的氨基酸序列的至少一种。在仍进一步的实施方式中，SEQ ID NO：20和21描述的氨基酸序列的至少一种被至少一种具有选自SEQ ID NOS：1-17的氨基酸序列的肽取代。在一些可选的实施方式中，本文所提供的另外的肽序列的任何一种可用于替代SEQ ID NO：20和/或21。在进一步的实施方式中，另外的序列发现在本发明中有用，包括但不限于SEQ SEQID NOS：20-25、31、32-34、43和238。在仍进一步的实施方式中，所述至少一种肽序列选自YNLYGWT(SEQ ID NO：1)、KYYLYWW(SEQ ID NO：239)、WYTLYKW(SEQ ID NO：240)、TYRLYWW(SEQ ID NO：241)、RYSLYYW(SEQ IDNO：242)、YYLYYWK(SEQ ID NO：243)、NYQLYGW(SEQ ID NO：244)、TLWKSYW(SEQ ID NO：245)、TKWPSYW(SEQ ID NO：246)、PLWPSYW(SEQ ID NO：247)、RLWPSYW(SEQ ID NO：248)、TLWPKYW(SEQ ID NO：249)、KYDLYWW(SEQ IDNO：33)、RYDLYWW(SEQ ID NO：250)、DYRLYWW(SEQ ID NO：251)、DYKLYWW(SEQ ID NO：34)、EYKLYWW(SEQ ID NO：252)和RYPLYWW(SEQ ID NO：253)。在一些特别优选的实施方式中，所述肽序列包括SEQ IDNO：31所描述的基序。在仍进一步的实施方式中，所述支架包括选自SEQ ID NO：22-25的氨基酸序列。
在一些实施方式中，本发明提供了用于改善皮肤外观的化妆品和/或药物化合物，其包括至少一种多肽或肽。在一些优选的实施方式中，所述多肽或肽结合VEGF。在可选的实施方式中，多肽或肽与VEGF的结合阻断VEGF的下游活性。在一些实施方式中，所述化合物包括至少一种肽，而在其它实施方式中，所述化合物包括至少一种多肽。在一些优选的实施方式中，所述肽具有选自SEQ ID NO：1-17的氨基酸序列。在仍进一步的实施方式中，所述肽具有选自KYDLYWW(SEQ ID NO：33)和DYKLYWW(SEQ ID NO：34)的氨基酸序列。在另外优选的实施方式中，所述肽具有保守的结合序列，该序列是XXLWPXWC(SEQ ID NO：15)。在一些优选的实施方式中，所述序列包括SEQ ID NO：15。在进一步的实施方式中，所述序列包括选自SEQ ID NOS：1-17的氨基酸序列。在进一步的实施方式中，所述序列包括选自SEQ ID NOS：22-25的氨基酸序列。在可选的优选实施方式中，所述化合物具有序列，所述序列与本文所描述的序列具有至少70％、优选80％、更优选90％和最优选95％的同源性。在一些优选的实施方式中，所述多肽具有优选500道尔顿至30,000道尔顿之间的分子量，更优选1000道尔顿至10,000道尔顿之间的分子量，以及最优选1500道尔顿至8,000道尔顿的分子量。
在一些优选的实施方式中，所述化合物可用于改善患有皮肤疾病的生物体(即，对象)的皮肤。在一些优选的实施方式中，所述皮肤疾病是血管生成性皮肤疾病。在另外的优选实施方式中，所述皮肤疾病是至少一种选自牛皮癣、静脉曲张性溃疡、痤疮、红斑痤疮、疣、湿疹、血管瘤和淋巴管生成等等的疾病。在一些特别优选的实施方式中，所述皮肤疾病是红斑痤疮。
在其它优选的实施方式中，本发明提供了改善皮肤外观的化妆品和/或药物组合物。在这些优选的实施方式中，所述化合物包括至少一种肽或多肽和至少一种支架，所述肽或多肽在所述支架中表达。在一些特别优选的实施方式中，所述至少一种肽或多肽是环(loop)。在其它特别优选的实施方式中，所述环由二硫键闭合。在一些优选的实施方式中，所述多肽或肽结合到VEGF。在可选的实施方式中，所述多肽或肽与VEGF的结合阻断了VEGF的下游活性。在一些特别优选的实施方式中，所述多肽在耐蛋白酶的支架中表达。在一些尤其优选的实施方式中，所述支架是蛋白酶抑制剂(例如，BBI、STI或Eglin胰凝乳蛋白酶抑制剂)。在一些最优选的实施方式中，所述蛋白酶抑制剂是BBI。
在一些优选的实施方式中，所述化合物进一步包括至少一种肽。优选地，所述肽具有选自SEQ ID NOS：1-17的氨基酸序列。最优选地，所述化合物包括选自SEQ ID NOS：22-25的氨基酸序列。在一些优选的实施方式中，所述肽具有保守的结合序列，该序列是XXLWPXWC(SEQ ID NO：15)。在一些优选的实施方式中，所述化合物具有序列，所述序列与本文所描述的序列具有至少70％、优选80％、更优选90％和最优选95％的同一性。所述肽分子量优选在500道尔顿至45,000道尔顿之间，更优选在1000道尔顿至12,000道尔顿之间，以及最优选在1500道尔顿至10,000道尔顿。在一些优选的实施方式中，所述化合物包括至少一种多肽。
本发明提供了包含至少一种选自SEQ ID NOS：1-17的肽的组合物，其中所述肽结合血管内皮生长因子。在一些优选的实施方式中，所述肽在耐蛋白酶的支架中表达。在可选的优选实施方式中，所述支架包括蛋白酶抑制剂。在一些更优选的实施方式中，所述蛋白酶抑制剂选自Bowman-Birk抑制剂、大豆胰蛋白酶抑制剂和Elgin胰凝乳蛋白酶抑制剂。在一些最优选的实施方式中，所述支架是Bowman-Birk抑制剂。在仍进一步的实施方式中，所述耐蛋白酶支架和所述肽包括融合蛋白。在一些特别优选的实施方式中，所述组合物包括选自SEQ IDNOS：22-25的氨基酸序列。在另外的实施方式中，所述支架包括在SEQ ID NO：19中描述的氨基酸序列。在仍进一步的实施方式中，所述支架包括SEQ ID NOS：20和21中描述的氨基酸序列的至少一种。在还有另外的实施方式中，SEQ ID NOS：20和21中描述的氨基酸序列的至少一种被至少一种具有选自SEQ ID NOS：1-17的氨基酸序列的肽取代。
本发明还提供了化妆品和/或药物组合物，其包括所述至少一种结合血管内皮生长因子的肽。在一些实施方式中，所述组合物能够调节血管发生。在另外的实施方式中，所述组合物进一步包括包含蛋白酶抑制剂的支架。在一些优选的实施方式中，所述蛋白酶抑制剂选自Bowman-Birk抑制剂、大豆胰蛋白酶抑制剂和Elgin胰凝乳蛋白酶抑制剂。在一些优选的实施方式中，所述支架是Bowman-Birk抑制剂。在一些特别优选的实施方式中，所述支架包括SEQ ID NO：19中描述的氨基酸序列。在一些可选的实施方式中，所述支架包括SEQ ID NOS：20和21中描述的氨基酸序列的至少一种。在进一步优选的实施方式中，SEQ ID NOS：20和21中描述的氨基酸序列的至少一种被至少一种具有选自SEQ ID NOS：1-17的氨基酸序列的肽取代。
本发明还提供了调节血管发生的方法，包括：i)提供包括肽的组合物，所述肽包含在支架内；ii)提供待治疗的对象；和iii)在期望调节血管发生的区域将所述组合物应用到所述对象。在一些实施方式中，所述肽结合血管内皮生长因子(VEGF)。在一些优选的实施方式中，所述血管内皮生长因子(VEGF)是VEGF-A。在进一步优选的实施方式中，所述支架选自Bowman-Birk抑制剂、大豆胰蛋白酶抑制剂和Elgin胰凝乳蛋白酶抑制剂。在一些特别优选的实施方式中，所述支架是Bowman-Birk抑制剂。在一些进一步的实施方式中，所述支架包括SEQ ID NO：19中描述的氨基酸序列。在仍进一步的实施方式中，所述支架包括SEQ ID NOS：20和21中描述的氨基酸序列的至少一种。在一些特别优选的实施方式中，SEQ IDNOS：20和21中描述的氨基酸序列的至少一种被至少一种具有选自SEQ IDNOS：1-17的氨基酸序列的肽取代。在仍进一步特别优选的实施方式中，所述支架和所述肽由选自SEQ ID NOS：22-25的氨基酸序列编码。
本发明还提供了降低血管内皮生长因子活性的方法，包括步骤：i)提供对象；和ii)向对象施用包括至少一种肽的组合物，所述至少一种肽结合血管内皮生长因子，在所述血管内皮生长因子的活性被降低的条件下进行。在一些实施方式中，所述血管内皮生长因子(VEGF)是VEGF-A。在一些特别优选的实施方式中，所述组合物包括选自SEQ ID NOS：22-25的氨基酸序列。
在一些另外的优选实施方式中，所述化合物被用于改善患有皮肤疾病的生物体(即对象)的皮肤。在另外的优选实施方式中，所述皮肤疾病是至少一种选自牛皮癣、静脉曲张性溃疡、痤疮、红斑痤疮、疣、湿疹、血管瘤和淋巴管生成等等的疾病。在一些特别优选的实施方式中，所述皮肤疾病是红斑痤疮。
在仍进一步的实施方式中，本发明提供了化妆品和/或药物组合物，其包括至少一种本文所描述的多肽或肽以及生理学上可接受的载体或赋形剂。优选地，所述化合物存在的量为按重量计基于所述组合物总重量的约0.0001％到约5％的量。同样优选地，所述化合物存在的量为按重量计基于所述组合物总重量的约0.001％到约0.5％。所述组合物可以是乳化载体的形式，例如营养膏或营养液、稳定化的凝胶或分散体系、护理浆液、脂质体输送体系、局部包裹或面膜、表面活性剂基清洁体系例如香波或沐浴露、烟雾化或喷雾的分散体或乳液、头发或皮肤调节剂、定型助剂、或彩色产品例如美容产品、以及其它合适的美容和化妆品制品。在一些实施方式中，所述载体优选是至少一种选自水、丙二醇、乙醇、丙醇、丙三醇、丁二醇和聚乙二醇的载体。
在仍进一步的实施方式中，本发明提供降低VEGF活性和/或水平的方法。在一些优选的实施方式中，在表皮中，所述VEGF活性和/或水平被降低。在一些实施方式中，所述方法包括将有效量的本文所描述的化合物的至少一种施用给需要它的生物体。
在另外的实施方式中，本发明提供了毛发和/或皮肤治疗的应用，以及伤口愈合应用、增生疾病治疗等等。因此，本发明提供了适合应用于人和其它动物中/上的组合物和方法。
附图说明
图1提供了VEGF结合噬菌体克隆的序列概述(SEQ ID NOS：1-12)。在3轮淘选之后，二十四个噬菌体克隆被测序。序列对比树显示出了高度保守的序列基序ACXLWPXXWC(SEQ ID NO：14)。括号中的数字表示在3轮淘选之后在所述测序的24个克隆中该序列的频率。
图2提供了噬菌体ELISA的结果，以证明独特的克隆结合VEGF而不结合BSA。评价等量的噬菌体，以确定它们与hVEGF165的相对结合亲和性。克隆编号和随机序列(SEQ ID NOS：1-7和13)表示在每一个记号下。用抗M13-HRP检测结合靶的噬菌体。在30分钟后，在A405nm下，用ABTS底物监测HRP(n＝3)。
图3提供了VEGF结合肽的BIACORE结合分析的结果。如在实施例中所述，获得结合曲线。数据被拟合为具有构象变化的二态反应模型：分析物(A)结合配体(B)，形成复合物AB。复合物AB变成AB*，其不能直接解离成A+B。图A提供了生物素化肽CK37281的结果。ka1＝2.84e3 M-1s-1，kd1＝0.0122s-1，ka2＝1.5e-3s-1 kd2＝3.36e-3s-1 KD＝1.92e-6M。图B提供了CK37283的结果(6000RUVEGF，3500 RU TNFα无缓冲液，仅扣除(subtraction))；ka1＝1.24e4 M-1s-1，kd1＝0.318s-1，ka2＝6.34e-3s-1，kd2＝1.23e-3s-1 KD＝4.90e-6M。图C提供了v114对照肽的结果(1000RU VEGF，850RU TNFα。数据被拟合成1∶1 Langmuir结合，ka1＝7.51e5M-1s-1kd1＝0.167s-1 KD＝2.23e-7M)。
图4提供了在实施例中使用的质粒图谱。图A提供了pCB04WT表达噬菌粒的图谱，该噬菌粒用于C端His6X标记的β-内酰胺酶的表达。图B提供了pME22N端填充噬菌粒(stuffer phagemid)的图谱，该噬菌粒用于使用Bbs1限制性位点进行克隆。图C提供了pCM01 N端aVEGF-BLA融合表达噬菌粒的图谱。
图5提供了使用Bbs1克隆位点的N端融合蛋白克隆策略的概述(SEQ IDNOS：227-237)。
图6提供了His标签纯化的β-内酰胺酶和肽的融合物的SDS-PAGE凝胶。IMAC纯化的BLA形式和不同的肽被浓缩，并上样到SDS-PAGE凝胶(4-12％)上。泳道1和10：分子量(MW)标记；泳道2：pCB04(带6Xhis标签的野生型(WT))；泳道3、4、5：pCM01 aVEGF-BLAN端融合蛋白支架；以及泳道7、8：pCM02类胰凝乳蛋白酶-BLAN端融合蛋白。
图7提供了曲线图，其示出aVEGF肽-BLA融合体特异性结合VEGF。增加浓度的pCM01(aVEGF肽-BLA融合体)和pCB04(野生型)被加入微量滴定板的VEGF包被孔。在用头孢硝噻吩测定缓冲液(0.125％正辛基-β-D-吡喃型葡萄糖苷的PBS溶液)洗涤5次后，测量结合的头孢硝噻吩的残留活性。
图8提供了曲线图，其示出了抗VEGF肽(实心圆)对VEGF诱导的HUVEC增殖的抑制作用。通过3H胸苷的放射性掺入，监测增殖(n＝3)。抗VEGF抗体(空心圆)被用作阳性对照，如实施例所描述。
图9提供了设计用于有效克隆的BBI基因和氨基酸序列(分别为SEQ IDNOS：18和19)。该序列包括在大肠杆菌(E.coli)中使用的表达盒。它编码含C端His标签的BBI前肽，并在5’和3’端具有额外的序列，用于克隆进大肠杆菌表达载体。蛋白质信号序列以斜体表示，而胰蛋白酶环(CTKSNPPQC；SEQ IDNO：20)和胰凝乳蛋白酶环(CALSYPAQC；SEQ ID NO：21)以粗体和加框予以突出表示。
图10提供了SDS-PAGE凝胶，其示出了重折叠抗-VEGF BBI的结果。抗-VEGF BBI在枯草蛋白酶BPN’Y217L存在或不存在下重折叠。泳道如下：泳道1：Hampton Foldit11重折叠缓冲液，-枯草蛋白酶；泳道2：Hampton Foldit11重折叠缓冲液，+枯草蛋白酶；泳道3：Hampton Foldit13重折叠缓冲液，-枯草蛋白酶；泳道4：Hampton Foldit13重折叠缓冲液，+枯草蛋白酶；以及泳道5：分子量标记物。
图11提供了曲线图，其示出了特异结合VEGF的BBI-VEGF1(SEQ IDNO：22)。
图12提供了曲线图，其示出了指定肽的HUVEC结果。
图13提供了3种BBI-VEGF融合体——BBI-VEGF1(SEQ ID NO：22)、BBI-VEGF2(SEQ ID NO：23)和BBI-VEGF12(SEQ ID NO：24)——的序列。融合体BBI-VEGF1和BBI-VEGF2仅有其中一个结合环被取代；融合体BBI-VEGF12的两个结合环都被取代。
图14提供了克隆入pJM103整合载体的aprE-BCE103-BBI-His标签表达盒(EcoRI-HindIII)的DNA和氨基酸序列(SEQ ID NOS：35和36)。
图15提供了pJM103BBIhis表达载体的示意图谱。
图16提供了12BBIck81的从BCE103融合位点(在BamHI处)到该基因的末端的DNA和氨基酸序列(SEQ ID NOS：37和38)。CK37281肽序列(ACYNLYGWTC(SEQ ID NO：43))被插入胰蛋白酶抑制环和胰凝乳蛋白酶抑制环中。
图17提供了图，其示出了活性2BBIck81对无活性2BBIck81的滴度(通过胰蛋白酶抑制)以及BCE103纤维素酶与2BBck81的活性比，其中在培养生长期间加入各种硫醇还原剂。在该图中，BME＝2-巯基乙醇，Cyt＝半胱氨酸，Glut＝还原的谷胱甘肽，DTT＝二硫苏糖醇。
图18提供了图，其表示在通过离子交换层析部分纯化之后，用2-巯基乙醇(bME)活化BCE-lnk2-2BBIck81。
图19提供了图，其示出了2BBIck81和抗VegF抗体与VegF结合的竞争分析的结果。
图20提供了携带H.insolens PDI(hiPDI)的合成DNA片段的序列，其被插入枯草芽孢杆菌(B.subtilis)BBI表达载体，以及氨基酸序列(SEQ ID NOS：39和40)。
图21提供了aprE-角质酶表达盒的DNA和氨基酸序列，所述表达盒被连接入p2JM103-lnk2-2BBIck81的EcoRI-BamHI位点(SEQ ID NOS：41和42)。
发明描述
本发明提供了治疗各种疾病和症状的肽和支持肽。在特别优选的实施方式中，本发明提供了用于个人护理的组合物和方法。在一些实施方式中，本发明提供了用在皮肤护理和/或毛发护理中的组合物，以及化妆品组合物。在可选的特别优选的实施方式中，本发明提供了治疗皮肤疾病的肽和支持肽，例如红斑痤疮。在一些特别优选的实施方式中，本发明的支持肽是抗-VEGF肽。在可选的特别优选的实施方式中，抗-VEGF肽在支架蛋白上表达。在一些最优选的实施方式中，支架蛋白包括BBI。
如在本文中更详细描述地，本发明提供了用于个人护理的许多方面的组合物，包括但不限于，毛发和皮肤护理，以及化妆品(例如，美容用品(makeup))。例如，本发明提供了组合物，其发现可用于日常个人护理、皮肤护理、防晒护理(例如防晒霜以及使皮肤呈褐色乳膏(tanner))、护发(例如，香波、免洗和/或漂洗类护发剂、头发营养补充剂、头发喷雾剂、凝胶、泡沫、摩丝、定型产品、染发剂、卷发制剂、其它定型和清洁产品等等)、晒后护肤、头发和嘴唇、口腔护理(例如牙膏和凝胶、漱口水、漱口液等等)、沐浴(洗液、淋浴皂、沐浴皂、浴盐、珍珠粉等等)、皮肤亮白霜、皮肤症状的清洁处理(例如青春痘、粉刺、皮肤调色剂)、脱毛药、卸妆湿巾、除臭剂、止汗药、面膜、剃须(剃须膏、剃须胶等等)、须后用品、皮肤剥离(例如去角质膏)、贴身护理产品(例如女性卫生用品)、个人清新剂、和足部护理中发现有用。本发明还提供了组合物，其在化妆品(例如粉底、睫毛膏、眼影、眼线膏、唇膏、唇彩、腮红等等)有用。可以预期，本发明的组合物将可以使用各种形式，包括但不限于固体、液体、胶状悬液、乳液、油、凝胶、气溶胶、泡沫、粉、喷雾剂等等，以及与物品例如湿巾一起使用。实际上，可以期望，本发明将可以使用适于目标用途(一种或多种)的任何形式。
除非另外说明，本发明的实践将包括在分子生物学、微生物学、和重组DNA中通常使用的常规技术，其在本领域的技能范围之内。这样的技术对于本领域普通技术人员而言是已知的，并且被描述在许多教材和参考书中(参见，例如Sambrook et al.，“Molecular Cloning：A Laboratory Manual”，Second Edition(ColdSpring Harbor)，[1989]；和Ausubel et al.，“Current Protocols in Molecular Biology”[1987])。在本文中提及的所有专利、专利申请、文章和出版物，无论上文还是下文中提及，都由此明确并入本文作为参考。
除非本文中另外定义，本文中所使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员所理解的含义相同的含义。例如，Singleton和Sainsbury，Dictionary of Microbiology and Molecular Biology，2d Ed.，John Wiley and Sons，NY(1994)；以及Hale和Marham，The Harper Collins Dictionary of Biology，HarperPerennial，NY(1991)为本领域普通技术人员提供了在本发明中使用的许多术语的一般性诠释。尽管和本文中描述的那些相似或等同的任何方法和材料在本发明的实践中可以使用，但是优选的方法和材料仍在本文中被描述。因此，通过整体参考说明书，下面即将被定义的术语被更全面地描述。同样，如本文所使用，单数形式的“一(a)”、“一(an)”和“该(所述，the)”包括复数含义，除非上下文明确指出不同。数字范围包括限定该范围的数字。除非另外指出，分别地，核酸以5′到3′的方向从左到右书写；氨基酸序列以氨基到羧基的方向从左到右书写。可以理解，本发明并不限于所述的具体方法、步骤和试剂，因为根据本领域技术人员使用它们的背景(上下文)，它们可以进行变化。
而且，本文所提供的标题并非是对本发明的各个方面或各种实施方式的限制，其可以通过整体参考说明书而被拥有。因此，通过整体参考说明书，下面即将被定义的术语被更加充分地定义。但是，为了帮助理解本发明，下面定义了许多术语。
定义
如本文所使用，术语“支架(scaffold)”指蛋白酶抑制剂，其具有掺入其中的异源和/或修饰的肽序列。在优选的实施方式中，术语“支架”是指野生型肽序列，其中引入了变体序列。在一些实施方式中，所属支架具有部分(portions)(例如，一个或两个环的部分(parts)或全部)，其用异源序列(一个或多个)代替。例如，如本文所提供的掺入抗VEGF(AV)序列的BBI序列可以用作支架。实际上，本发明包括基于BBI的序列，但该序列与野生型BBI具有结构和功能差异。
如本文所使用，术语“血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)”是指能够刺激血管生长的蛋白质，包括本领域技术人员已知的称为“VEGF-A”的那些。
如本文所使用，术语“抗-VEGF(anti-VEGF)”(“aVEGF”和“AV”)是指识别(即结合)VEGF的肽或其它组合物。在优选的实施方式中，这些肽/组合物调节VEGF活性。
术语“血管发生(angiogenesis)”是指这样的生物过程，其导致血管发育和/或增加生物体组织的血管分布。在本文的具体实施方式中，所述术语是指这样的过程：经过该过程，肿瘤或其它快速增殖的组织通过微血管的产生而衍生出血液供应。
术语“血管发生性疾病(angiogenic disease)”、“血管发生性紊乱(angiogemc disorder)”和“血管发生性皮肤紊乱(angiogenic skin disorder)”被用于指疾病，通常是皮肤疾病或相关疾病，其作为组织中血管化增加的结果发生或者其导致组织中血管化增加。时常地，血管发生性疾病的病因是未知的。然而，血管发生是病态的真正原因还是仅仅是病态的症状，并不重要，但在治疗或逆转病态或症状中抑制血管发生才是本发明的重要方面。因此，本发明不意图被限制于任何具体的作用机理。适于使用本发明的化合物治疗的血管发生性皮肤紊乱的例子包括但不限于牛皮癣、痤疮、红斑痤疮、疣、湿疹、血管瘤和淋巴管生成、Sturge-Weber综合症、神经纤维瘤、结节性硬化症、慢性炎性疾病和关节炎。具有初级和二级特征、增加的血管化的任何皮肤疾病，在本文中被认为是血管发生性皮肤疾病。因此，本发明所提供的化合物可用于治疗广泛的多种疾病和/或症状。
术语“红斑痤疮(rosacea)”被用于描述痤疮、红斑痤疮或红斑皮炎，其特征在于通常涉及鼻子、和脸颊的连续部分的血管和滤泡肿胀。红斑痤疮可以从极轻微但持续红斑变化到带有深层丘疹和脓疱的广泛皮脂腺增生，并在感染的红斑部位伴随有毛细管扩张。根据症状的严重程度，该症状还被称为“肥大性红斑痤疮(hypertrophic rosacea)”或“肥大性酒渣鼻(rhinophyma)”。该术语意图包括所有各种形式的症状。
术语“疣(wart)”被用于描述在皮肤上小的、通常为硬的生长物。也被称为“赘肉(verruca)”，疣是皮肤的肉色生长物，其特征在于真皮乳头的外周肥大，伴有表皮的马尔皮基皮层、粒层和角质层的增厚。寻常疣--疣或赘肉的一种亚型--特征在于人乳头瘤病毒感染角质化细胞。
术语“牛皮癣(psoriasis)”被用于描述特征在于长出外周的、离散和汇合的、带红色的、银屑斑丘疹的皮肤症状。尽管本发明不意图被限制在任何具体的身体区域，但是牛皮癣损伤通常发生在肘、膝、头皮和躯干上。在显微镜下，这些损伤显示出特有的角化不全和网脊(rete ridge)的延长。
术语“痤疮(acne)”被用于描述这样的皮肤症状，其特征在于涉及皮脂器官(apparatus)的炎性滤泡、丘疹和脓疱出疹。尽管存在许多形式的痤疮，最常见的形式已知为单纯痤疮(acne simplex)或寻常痤疮，其特征在于脸、上背和胸的出疹，并且主要由基于炎性的黑头粉刺、囊肿、丘疹和脓疱组成。该症状主要在青春期和成年期中发生，原因在于被认为受激活活性影响的皮脂器官的活性过大。
术语“湿疹(eczema)”是一般性术语，用于描述皮肤的急性或慢性炎症，通常为红斑性、水肿性、丘疹性、起泡和/或形成痂(crusting)。这些症状之后通常是苔藓化、结垢并偶尔有红斑发暗以及经常发生着色过多现象。湿疹通常伴随着搔痒和灼痛的感觉。表皮内棘细胞层水肿导致湿疹泡形成。湿疹有时被通俗地称为“皮疹(tetter)”、“干性湿疹(dry tetter)”和“牛皮癣(scaly tetter)”。存在许多湿疹亚类，它们都用一种或多种本发明的化合物加以治疗。
如本文所使用，跟随有整数的“CK”指的是具体的肽。可用于本发明的各种肽序列在本文中被提供(参见，例如图1)。作为例子，CK37281是指肽序列YNLYGWT(SEQ ID NO：1)，其也被包括于各种其它序列(例如“ACYNLYGWTCGGG”(SEQ ID NO：238))中。
如本文所使用，在一些实施方式中，“化合物”包括“完整的”蛋白(即，具有其天然存在时(或突变时)的全长)，而在其它实施方式中，它包括蛋白质的截短形式。因此，在一些实施方式中，本发明的化合物或者是截短的或者是“全长的”。此外，在一些实施方式中，截短发生在N末端，而在其它实施方式中，截短发生在所述蛋白质的C末端。在进一步的实施方式中，化合物缺乏一个或更多个部分(例如亚序列、信号序列、结构域或部分(moieties))，无论是活性的还是无活性的。
贯穿本说明书，术语“生物体(organism)”被用于描述动物，优选为人，其中，向所述动物提供使用本发明的化合物的治疗，包括预防性治疗。对于治疗具体的动物例如人患者所特有的那些感染、症状或病态，术语生物体指该具体的动物。
在本发明中使用的“宿主细胞”通常是原核宿主或真核宿主，其含有表达载体和/或目标基因。用采用重组DNA技术构建的载体转化或转染宿主细胞。这样转化的宿主细胞能够复制编码蛋白突变体的载体或表达期望的蛋白突变体。在编码蛋白突变体的前形式或前原形式的载体的情况中，此类突变体--当表达时--通常从宿主细胞分泌到宿主细胞培养基中。
贯穿本说明书，术语“有效量(effective amount)”被用于描述本发明的化合物的浓度或量，该浓度或量可用于产生所治疗的疾病或症状的有利变化，无论该变化是毛发生长或阻止毛发生长。
如本文所使用，术语“活性物(活性的，active)”(和“活性物(actives)”)是指赋予治疗对象益处的组合物。例如，在优选的实施方式中，本发明提供包含BBI-AV的个人护理组合物，BBI-AV是发挥向其施用的区域提供益处的作用“主要活性物(primary acitve)”。因此，在一些实施方式中，BBI-AV存在于护肤制剂中并用于调节其施用对象的肤色。该术语不意图被局限于BBI-AV，因为还有在本发明的个人护理组合物中存在并赋予益处的另外的成分。在一些优选的实施方式中，这些另外的成分包含在名称“次要活性物(secondary actives)”中。在本文中，主要和次要活性物被统称为“活性物”。
如本文所使用，“维生素B3化合物”是指具有下式的化合物：
其中R是-CONH2(即烟酰胺)、-COOH(即烟酸)或-CH2OH(即烟醇)；其衍生物；以及前述任何一个的盐。
如此处所使用，“非血管舒张(non-vasodilating)”意思是在标题组合物中，在施用到皮肤之后，酯通常不产生可见的发红反应。可以预期，大部分的普通群体将不出现可见的发红反应，尽管这类化合物可能导致肉眼不可见的血管舒张。
如本文所使用，术语“类视黄醇(retinoid)”包括所有自然的和/或合成的维生素A类似物和/或类似视黄醇的化合物--其在皮肤中/上具有维生素A的室生物活性，以及这些化合物的几何异构体和立体异构体。然而，该术语不意图被限制于这些化合物，因为该术语包括维生素A醇(视黄醇)和其衍生物，例如维生素A醛(视黄醛)、维生素A酸(视黄酸)和维生素A酯(例如乙酸视黄酯、丙酸视黄酯和棕榈酸视黄酯)等等。该术语还意图包括全反式-视黄酸和13-顺式-视黄酸。该术语也意图包括胶囊化的组合物，以及提供用于各种形式的组合物。术语“视黄醇(retinol)”和“视黄醛(retinal)”优选包括全反式化合物。优选用于本发明的制剂的类视黄醇是全反式-视黄醇，其在本文中通常称为“视黄醇(retinol)”。
如在本文中所使用，“类胡萝卜素(carotenoid)”被用于指β-胡萝卜素、番茄红素、叶黄素、虾青素、玉米黄质、隐黄素、桔黄素、角黄素、红木素、β-阿朴-4-胡萝卜素醛(β-apo-4-carotenal)、β-阿朴-8-胡萝卜素醛、β-阿朴-8-胡萝卜素酯，单独或组合。优选使用的类胡萝卜素是β-胡萝卜素、番茄红素、叶黄素、虾青素、玉米黄质、桔黄素和角黄素。在一些实施反式中，类胡萝卜素以结晶的形式使用，以及配成制剂使用，包括但不限于干粉(参见例如在EP0065193中描述的干粉；由此引入作为参考)。
在一些实施反式中，在番茄红素、虾青素和角黄素的情况下优选的用途是含番茄红素、虾青素和角黄素的干粉，例如LYCOVIT
、LUCANTINPink和LUCANTIN
Red(分别含有占干粉10％的番茄红素、虾青素和角黄素，从BASF AG，Ludwigshafen，Germany商购可得)。
如本文所使用，术语“生物活性(bioactivity)”是指在组合物和生物系统之间的因果关系。因此，该术语被生物技术和生物科学领域的技术人员用作描述分子组合物和活生物物质(例如，组织、细胞等等)之间的因果关系的词语。
如在本文中用作名词，术语“生物活性物(bioactive)”是指在施用到活生物物质(例如，组织、细胞等等)之后表现出生物活性的物质。该术语与“生物活性化合物(bioactive compound)”同义使用。
如本文所使用，“硅橡胶胶料(silicone gum)”指的是平均分子量超过约200,000的高分子量硅氧烷，优选从约200,000到4,000,000。该定义旨在包括非挥发性多烷基硅橡胶胶料和多芳基硅橡胶胶料。
如本文所使用，术语“多肽”是指由通过肽键连接的单链氨基酸残基组成的化合物。本文中的术语“蛋白质”可以与术语“多肽”同义或者可以另外指两个或更多个多肽的复合物。确切的含义是本领域技术人员知道的含义。
如本文所使用，术语“表达盒”和“表达载体”是指重组或合成产生的核酸构建物，其带有允许特定核酸在靶细胞中转录的一系列特定核酸元件。重组表达盒可以被整合入质粒、染色体、线粒体DNA、质体DNA、病毒、或核酸片段中。通常，除了其他序列以外，表达载体的重组表达盒部分包括待转录的核酸序列和启动子。术语“表达盒”在本文中可以与“DNA构建物”和其语法等同成分互换使用。
如本文所使用，术语“载体”和“克隆载体”是指设计用于将核酸序列转移入细胞的核酸构建物。
如本文所使用，术语“表达载体”是指能够在外源细胞中整合和表达异源DNA片段的载体。许多原核和真核表达载体是商业可得的。选择合适的表达载体在本领域的普通技术人员的知识范围之内。
如本文所使用，术语“质粒”是指用作克隆载体的环形双链(ds)DNA构建物，并且其在一些真核生物中形成染色体外自我复制遗传元件或者整合入该宿主染色体中。
如本文所使用，术语“表达”是指基于基因的核酸序列或化学合成肽产生多肽的过程。该过程包括基因的转录和翻译，以产生多肽/蛋白质。
如本文所使用，术语“基因”是指参与产生多肽链的DNA片段，其可以包括或可以不包括编码区之前或之后的区域。
如本文所使用，术语“核酸分子”和“核酸序列”包括任何形式的核酸的序列，包括但不限于RNA、DNA和cDNA分子。可以理解，作为遗传密码子简并性的结果，除了突变蛋白质外，大量编码给定蛋白质的核苷酸序列可以被产生。
如本文所使用，“密码子”是指在DNA或mRNA中三个核苷酸的序列，其代表特定氨基酸参入多肽链的指示。
如本文所使用，术语“二硫桥”或“二硫键”是指在多肽或蛋白质中半胱氨酸的硫原子之间形成的键。在本发明中，二硫桥或二硫键可以是非天然存在的并通过点突变的方式引入。
如本文所使用，术语“盐桥”是指在多肽或蛋白质中带异性电荷的残基氨基酸之间形成的键。在本发明中，盐桥可以是非天然存在的并通过点突变的方式引入。
如本文所使用，“酶”是指催化至少一种化学反应的蛋白质或多肽。
如本文所使用，术语“活性”是指与特定蛋白质相关的任何活性，例如与蛋白酶相关的酶促活性。在一些实施方式中，活性是生物活性。在进一步的实施方式中，活性包括蛋白质与受体的结合，其导致可测量的下游效应(例如，VEGF结合其相应受体)。“生物活性”是指通常将被本领域技术人员归因于该蛋白的任何活性。
如本文所使用，术语“蛋白酶”是指降解肽键的酶。
如本文所使用，“肽键”是指在一个氨基酸的羧基和另一个氨基酸的氨基之间形成的化学键。
如本文所使用，“野生型”是指天然的或天然存在的序列或蛋白质。
如本文所使用，“点突变”是指DNA的单个核苷酸的改变，特别是在该改变导致蛋白质的序列变化的地方。
如本文所使用，“突变体”是指生物体或蛋白质的一种形式(version)，其中该形式不是野生型。通过本领域技术人员熟知的方法，可以实现改变，例如，通过点突变，其中得到的蛋白质可被称为突变体。
如本文所使用，“诱变”是指将成分(例如蛋白质)从野生型成分(例如蛋白质)改变成突变体或变体成分(例如蛋白质)的过程。
如本文所使用，“置换的”和“置换”是指在母序列中氨基酸残基或核酸碱基的置换(一个或多个)。在一些实施方式中，置换包括天然存在的残基或碱基的替代。
如本文所使用，“修饰(modification)”和“修饰(modify)”是指氨基酸或核酸序列中的任何改变(一种或多种)，包括但不限于缺失、插入、中断和置换。在一些实施方式中，修饰包括天然存在的残基或碱基的替代。
如本文所使用，“分泌型多肽的功能性部分(functional portion of asecreated polypeptide)”和其语法等同物是指截短的分泌型多肽，其保持折叠成虽然截短但正常的结构的能力。在一些实施方式中，可以预期，天然分泌型多肽的结构域必须存在足够的残基，以允许它独立于其附着的期望蛋白而折叠成正常的结构。然而，在大多数情况下，分泌型多肽的部分既正确折叠又导致相比于它不存在时增加的分泌。类似地，在大多数情况下，分泌型多肽的截短意味着功能性部分保留生物功能。在优选的实施方式中，分泌型多肽的催化域被使用，尽管其它功能域可以被使用，例如底物结合域。另外优选的实施方式采用催化域和全部或部分连接区。
如本文所使用，“环(loop)”是指氨基酸的序列，例如3-20个氨基酸，更优选5-15个氨基酸，甚至更优选5-10个氨基酸，以及最优选7-9个氨基酸，其连接蛋白质的结构元件。此类元件包括但不限于，β-折叠和螺旋元件以及β-发夹的连接环。在一些实施方式中，所述环通过使用共价键被进一步稳定。在一些优选的实施方式中，共价键包括二硫键，特别是如本文所提供的那些。在可选的实施方式中，利用其它方式，包括但不限于酰胺键、氢键和/或盐桥，稳定所述环。在大多数实施方式中，环位于蛋白质的表面上，并可以如本文所提供进行改变，以赋予必需蛋白质另外的(例如，期望的)性能。
如本文所使用，“寡核苷酸”是指短的核苷酸序列，其可以被用作例如用于产生突变蛋白的反应的引物。
如本文所使用，术语“具有编码基因的核苷酸序列的寡核苷酸(oligonucleotide having a nucleotide sequence encoding a gene)”和“具有编码基因的核苷酸序列的多核苷酸(polynucleotide having a nucleotide sequence encoding agene)”是指核酸序列，其包括基因的编码区，或者换言之，是指编码基因产物的核酸序列。编码区可以以cDNA、基因组DNA或RNA的形式存在。当以DNA形式存在时，所述寡核苷酸或多核苷酸可以是单链的(即有义链)或双链的。如果需要允许正常的转录起始和/或初级RNA转录物的正确加工，合适的调控元件例如增强子/启动子、剪接接点(splice junction)、多腺苷酸化信号等等可以放置在紧邻基因克隆区的地方。可选地，在本发明的表达载体中使用的编码区可以含有内源性增强子/启动子、剪接接点、间插序列、多腺苷酸化信号等等或者内源性和外源性的调控元件的组合。
如本文所使用，术语“引物”是指如在纯化的限制性消化中天然存在或合成产生的寡核苷酸，当置于其中与核酸链互补的引物延伸产物的合成被诱导的条件下时(即，在核苷酸和诱导剂例如DNA聚合酶存在以及在合适的温度和pH条件下)，所述寡核苷酸能够作为合成的起始点起作用。为了获得最大的扩增效率，引物优选是单链的，但可选地，可以是双链的。如果是双链，在用于制备延伸产物之前，首先处理引物，以将它的链分开。优选地，引物是脱氧核糖核苷酸。引物必须足够长，以在诱导剂存在的情况下启动延伸产物的合成。引物的确切长度将取决于许多因素，包括温度、引物来源和方法的使用。
如本文所使用，术语“探针”是指在纯化的限制性消化中天然存在或合成产生--重组或通过PCR扩增--的寡核苷酸(即，核苷酸的序列)，其能够与另一目标寡核苷酸杂交。探针可以是单链的或双链的。探针可用于特定基因序列的检测、鉴定和分离。可以预期，在本发明中使用的任何探针将用任何“报告分子”标记，以便在任何检测系统中是可检测的，包括但不限于酶系统(例如ELISA，以及基于酶的组织化学测定)、荧光系统、放射性系统和发光系统。本发明不意图被限制于任何特定的检测系统或标记。
如本文所使用，当提及聚合酶链式反应而使用时，术语“靶(target)”是指被用于聚合酶链式反应的引物结合的核酸区域。因此，“靶”被寻找，以从其它核酸序列中分捡出来。“片段(segment)”被定义为靶序列中的核酸区。
如本文所使用，术语“聚合酶链式反应”(“PCR”)是指在本领域中熟知的方法(参见，例如美国专利第4,683,195、4,683,202和4,965,188号，由此并入作为参考)，其用于增加基因组DNA混合物中靶序列的片段的浓度而不进行克隆或纯化。该扩增靶序列的过程由下列组成：向含有需要的靶序列的DNA混合物中引入大量过量的两种寡核苷酸引物，随后在DNA聚合酶存在下进行顺序精确的热循环。两种引物与双链靶序列中它们各自的链互补。为实现扩增，该混合物被变性，然后，将引物与靶分子内它们的互补序列退火。退火之后，用聚合酶延伸引物，以形成一对新的互补链。变性、引物退火和聚合酶延伸的步骤可以被重复许多次(即，变性、退火和延伸构成一个循环；可以有无数个循环)，以获得高浓度的期望靶序列的扩增片段。期望靶序列的扩增片段的长度由引物之间的相对位置决定，因此，该长度是可控的参数。由于该过程的重复方面，本方法被称为“聚合酶链式反应”(下文称为“PCR”)。因为靶序列的期望扩增片段在混合物中变成主要的序列(在浓度方面)，它们被描述为“PCR扩增的”。
如本文所使用，“PCR产物”、“PCR片段”和“扩增产物”是指在完成变性、退火和延伸的PCR步骤的两个或更多个循环之后所得到的化合物混合物。这些术语包括这样的情况，即其中一个或多个靶序列的一个或多个片段已经被扩增。
如本文所使用，术语“扩增试剂”是指除了引物、核酸模板和扩增酶之外扩增所需的那些试剂(脱氧核糖核苷三磷酸、缓冲液等等)。典型地，扩增试剂和其它反应成分一起被放在和包含在反应容器(试管、微孔等等)内。
如本文所使用，术语“RT-PCR”是指RNA序列的复制和扩增。在该方法中，反转录与PCR联用，最通常地使用一个采用热温定聚合酶的酶程序进行，如美国专利第5,322,770号中所描述，该专利并入本文作为参考。在RT-PCR中，由于聚合酶的反转录酶活性，RNA模板被转化成cDNA，然后利用聚合酶的聚合活性进行扩增(即，如在其它PCR方法中)。
如本文所使用，术语“杂交”是指核酸链通过碱基配对与互补链结合的过程，如本领域所知。
如本文所使用，“最大的严紧性”是指典型地在大约Tm-5℃(低于探针的Tm 5℃)下发生的杂交水平；“高严紧性”在低于Tm大约5℃到10℃下发生的杂交水平；“中间严紧性”在低于Tm大约10℃到20℃下发生的杂交水平；而“低严紧性”在低于Tm大约20℃到25℃下发生的杂交水平。如本领域普通技术人员将能理解，最大严紧性杂交可以被用来鉴定或检测相同的多核苷酸序列，而中间或低严紧性杂交可用来鉴定或检测多核苷酸序列同源物。
在两种核酸或多肽的背景下，短语“基本上相似的(substantially similar)”和“基本上同一的(substantially identical)”通常是指，多核苷酸或多肽包括这样的序列，该序列与参比(即野生型)序列相比，具有至少75％的序列同一性，优选至少80％，更优选至少90％，仍更优选95％，最优选97％，有时高达98％和99％的序列同一性。使用已知的程序例如BLAST、ALIGN和CLUSTAL，采用标准参数，可以确定序列同一性(参考，例如Altschul，et al.，J.Mol.Biol.215：403-410
；Henikoff et al.，Proc.Natl.Acad Sci.USA 89：10915[1989]；Karin et al.，Proc.Natl Acad.Sci USA90：5873[1993]；以及Higgins et al.，Gene 73：237-244[1988])。进行BLAST分析的软件通过国家生物技术信息中心(National Center forBiotechnology Information)是公众可得的。同样，使用FASTA，可以检索数据库(Pearson et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：2444-2448[1988])。
如本文所使用，“等价残基(equivalent residues)”是指共享特定氨基酸残基的蛋白质。例如，通过确定蛋白质(例如VEGF)三级结构水平上的同源性，等价残基可以被鉴定，所述蛋白质的三级结构已经通过X射线晶体学予以确定。等价残基被定义为这样的残基，对于它们来说，在联配(alignment)之后，具有推定的等价残基的蛋白和目标蛋白的特定氨基酸残基的2个或者更多个主链原子的原子坐标(N对N，CA对CA，C对C和O对O)在0.13nm内，优选地在0.1nm内。联配是在最佳模型已经被定向和定位从而得到所分析的蛋白的非氢蛋白原子的原子坐标的最大重叠之后实现的。优选的模型是在可利用的最高分辨率下给出衍射实验数据的最低R因子的晶体学模型，使用晶体学和蛋白质表征/分析领域的技术人员已知的方法进行确定。
在一些实施方式中，优选对编码前体酶的氨基酸序列的“前体DNA序列”进行修饰，但该修饰可以通过操纵前体蛋白进行。在非保守性残基的情况下，一个或更多个残基的替代被限制为这样的置换，其产生具有与自然中发现的序列不对应的氨基酸序列的变体。在保守序列的情况下，此类替代应当不导致天然存在的序列。本发明提供的衍生物进一步包括改变蛋白特性的化学修饰(一种或多种)。
在一些优选的实施方式中，蛋白质基因被连接入合适的表达质粒中。然后，克隆的蛋白质基因被用于转化或转染宿主细胞，以表达该蛋白质基因。在一些实施方式中，该质粒在宿主中复制，在某种意义上说，该质粒含有广为人知的质粒复制所需的元件或者该质粒可以被设计整合入宿主染色体中。为了有效的基因表达，提供该必需的元件(例如，与目标基因可操纵性连接的启动子)。在一些实施方式中，这些必需的元件被提供作为该基因自身的同源启动子--如果该启动子被识别的话(即，由宿主转录)，作为转录终止子(真核宿主细胞的多腺苷酸化区)，其是外源的或由该蛋白质基因的内源终止子区提供。在一些实施方式中，选择基因也被包括在内，例如抗生素抗性基因，通过在含抗生素的培养基中生长，抗生素抗性基因使得质粒感染的宿主细胞能够连续培养维持。
如本文所使用，术语“限制性内切酶”和“限制性酶”是指细菌酶，其每一个在特异的核苷酸序列处或附近切割双链DNA。
如本文所使用，术语“重组DNA分子”是指DNA分子，其由利用分子生物学技术连接在一起的DNA片段组成。
如本文所使用，术语“重组蛋白质”或“重组多肽”是指蛋白质分子，其由重组DNA分子表达。
术语“天然蛋白质”在本文中被用来表示：蛋白质不含有由载体序列编码的氨基酸残基；天然蛋白质仅含有当它天然存在时在该蛋白质中发现的那些氨基酸。天然蛋白质可以通过重组方式产生或可以从天然存在的来源分离。
如本文所使用，当提及蛋白质时，术语“部分(portion)”(如在“给定蛋白质的部分(a portion of a given protein)”中)是指该蛋白质的片段。所述片段的大小范围可以在四个氨基酸残基到少一个氨基酸的全部氨基酸序列。
如本文所使用，术语“融合蛋白”是指含有连接到外源蛋白质片段(由非VEGF蛋白质组成的融合伴侣)的目标蛋白(即VEGF和其片段)的嵌合蛋白。在一些实施方式中，当在宿主细胞中表达时，该融合伴侣增强VEGF蛋白质的溶解性，可以提供亲合标签，以允许从宿主细胞或培养液上清或者从两者中纯化重组融合蛋白。如果需要，该融合蛋白可以通过多种本领域已知的酶手段或化学手段从目标蛋白(即VEGF和/或其片段)除去。
如本文所使用，术语“以可操纵的组合(in operable combination)”、“以可操纵的顺序(in operable order)”和“可操纵地连接(operably linked)”是指以这样的方式的核酸序列连接：产生能够引导给定基因的转录和/或期望蛋白质分子的合成的核酸分子。该术语还指以产生功能蛋白的方式的氨基酸序列连接。
如本文所使用，当提及结构基因而使用时，术语“编码区”是指编码新生多肽中发现的氨基酸的核苷酸序列，新生多肽是mRNA分子翻译的结果。在真核生物中，编码区的5’端以编码起始子甲硫氨酸的核苷酸三联体“ATG”为界，3’端以确定终止密码子的三个三联体(即，TAA、TAG、TGA)中的一个为界。
如本文所使用，术语“结构基因”是指编码RNA或蛋白质的DNA序列。相比之下，“调节基因”是编码调控其它基因表达的产物(例如转录因子)的结构基因。
如本文所使用，术语“纯化的”或“纯化”是指从样品除去污染物。例如，重组VEGF或aVEGF多肽在宿主细胞中表达并且多肽通过去除宿主细胞蛋白质加以纯化；重组VEGF或aVEGF多肽在样品中的百分比因此得以增加。
如本文所使用，当应用于本发明的蛋白质或其片段，术语“基本上纯的”指蛋白质基本上不含有其它物质，达到对于它们的目标用途是实用的和适宜的程度。具体而言，蛋白质是足够纯的且足够不含有宿主细胞的其它生物成分，以便用于例如蛋白质测序和/或生产药物学制剂。
如本文所使用，术语“靶蛋白”是指蛋白质(即，酶、激素等等)，其作用将通过本文所提供的变体抑制剂的结合而被阻断。
如本文所使用，术语“变体序列(variant sequence)”和“多个变体序列(variant sequences)”是指替代野生型蛋白酶抑制剂的结合环的短的多肽序列(一个或多个)。变体序列不需要具有与野生型蛋白酶抑制剂中它替代的结合环序列相同的长度。
当涉及核酸而使用时，如在“分离的寡核苷酸”或“分离的多核苷酸”中，术语“分离的”是指从至少一种核酸杂质中鉴定和分离的核酸序列，该核酸序列在其天然来源中通常与所述核酸杂质相联。分离的核酸以这样的形式或环境存在，该形式或环境不同于其在自然中被发现的形式或环境。相比之下，非分离的核酸是它们天然存在的状态中发现的核酸诸如DNA和RNA。例如，给定的DNA序列(例如基因)被发现在宿主细胞染色体上接近相临的基因；RNA序列，例如编码具体蛋白的具体mRNA序列，在细胞中作为与编码大量蛋白质的许多其它mRNA的混合物被发现。然而，作为例子，编码VEGF蛋白的分离的核酸包括在细胞中通常表达VEGF蛋白的核酸，其中所述核酸位于不同于天然细胞的染色体位置，或者另外地，其侧翼是与天然发现的核酸序列不同的核酸序列。分离的核酸、寡核苷酸或多核苷酸可以以单链形式或双链形式存在。当分离的核酸、寡核苷酸或多核苷酸将被用于表达蛋白质时，所述寡核苷酸或多核苷酸将至少含有有义链或编码链(即，寡核苷酸或多核苷酸可以是单链的)，但可以含有有义链和反义链(即，寡核苷酸或多核苷酸可以是双链的)。
如本文所使用，“包括给定多核苷酸序列的组合物(composition comprisinga given polynucleotide sequence)”广泛地指含有给定多核苷酸序列的任何组合物。该组合物可以是任何形式，特别是适于施用的形式。
如本文所使用，当化合物可以以任何期望的途径(例如，局部施用、口服等等)施用于人或其它动物时，该化合物被描述为“适于施用的形式”。
如本文所使用，“安全和有效量(safe and effective amount)”是指物质的足够的量，其显著诱导应用所述物质的区域的正修复(positive modification)，并且不导致严重副作用的产生(在合理的风险/获益比之下)。所述物质的安全和有效量可以随着所治疗的特定皮肤或其它身体部分、所治疗对象的年龄、所治疗症状的严重程度、治疗持续时间、并行治疗的特性、所使用的具体材料、所采用的具体载体等等而变化。本领域普通技术人员能够调节本文所提供的个人护理组合物的浓度，用于所述组合物的期望应用。
如本文所使用，术语“个人护理组合物”是指应用于皮肤、毛发、指甲、口腔和相关膜的产品，目的是为了改善、清洁、美化、治疗和/或护理这些表面和膜。
在一些实施方式中，个人护理组合物是乳化载体的形式，例如营养霜或营养露、稳定化的凝胶或分散系统例如皮肤柔润剂、营养乳液、营养霜、按摩膏、护理精华素、脂质体输送体系、局部面部包裹(facial pack)或面膜、表面活性剂基清洁体系例如香波或沐浴露、烟雾化或喷雾的分散体或乳液、毛发或皮肤调节剂、定型助剂、或彩色产品例如液体、膏、固体、无水或画笔形式的彩妆。然而，本发明不意图被限制于任何具体的形式，如在本发明中发现有用的各种形式。
个人护理产品可以被分类/描述为可用于个人护理应用(例如，化妆、护肤、口腔护理、护发、指甲护理)的化妆、非处方(“over-the-counter”，OTC)化合物。在一些实施方式中，重复序列蛋白质聚合物被加入个人护理组合物，例如护发组合物、护肤组合物、指甲护理组合物、化妆品组合物或它们的任何组合。
如本文所使用，“化妆品组合物”是指在化妆品中发现有用的组合物。食品药品和化妆品法(Food Drug and Cosmetic Act(FD&C Act))的定义被用在本文中。因此，化妆品由它们的目标用途进行定义，如意图被擦、倒、洒、或喷在、引入、或另外施用于人体的制品，用于清洁、美化、提升吸引力、或改变外表。这些组合物提供非治疗性的益处，并不像药物一样被调节。然而，在一些情况下，化妆品组合物被掺入药物组合物中，以提供美容益处(例如，治疗皮肤或毛发疾病的产品，但还含有用于它们的色彩或其它益处的化妆组合物)。同样，本发明旨在包括化妆品在除了人以外的动物上的用途。
如本文所使用，术语“药物组合物”和“治疗组合物”是指组合物，例如提供医疗益处而不是仅仅提供美容益处的药物。在美国，药物和治疗组合物由食品药品管理局(Food and Drug Administration)批准用于治疗和/或预防特定症状。
如本文所使用，术语“药物”如同其在FD&C Act的定义中一样被定义。因此，药物被定义为意图用在疾病的诊断、治愈、缓解、治疗或预防中的制品，以及意图影响人或其它动物的身体的结构或任何功能的制品(除了食品)。
如本文所使用，“免洗(leave-on)”是指这样的组合物，其被应用到对象上且在暴露于所述组合物的区域被清洗之前不被除去(例如通过洗涤、漂洗等进行清洗)通常至少几小时(例如4-12小时)的一段时间。
如本文所使用，“漂洗(rinse-off)”组合物是这样的组合物，其被施用并且在施用之后不久(通常在施用后约30分钟内)就被清洗(例如，通过洗涤、漂洗等等)。在一些优选的实施方式中，漂洗组合物被配制成在治疗区域上沉积有效量的活性物(一种或多种)。
如本文所使用，术语“美容益处(cosmetic benefit)”是指由施用个人护理组合物产生的期望的美容变化。美容益处包括但不限于皮肤、毛发、指甲和口腔状况的改善。在优选的实施方式中，至少一种美容益处由本发明的皮肤护理、护发、指甲护理和美容组合物提供。
如本文所使用，“美容上可接受的(cosmetically acceptable)”是指适合与人和/或其它动物的组织接触使用且无不适宜的毒性、不相容性、不稳定性、刺激、过敏反应等等的材料，其与合理的益处/风险比相称。
如本文所使用，“皮肤护理组合物(skin care composition)”是指为了提供有益性能而施用到皮肤上的组合物，包括但不限于皱纹最少化、去皱、去色、着色、皮肤柔润、皮肤变光滑、脱毛、清洁等等。在一些特别优选的实施方式中，本发明提供改善肤色的皮肤护理组合物。在这些实施方式中，所述改善包括减少皱纹、使皮肤质地光滑、改变肤色和其它期望的美容益处。在进一步的实施方式中，皮肤护理组合物选自下面的形式：浴液、保湿沐浴液、除臭沐浴液、抗微生物清洁剂、皮肤防护处理剂、花露水、面霜、润肤霜、洁面乳、基于表面活性剂的洁面奶、脸部用脱落凝胶、面部爽肤水、去角质霜、面膜、须后舒缓乳、香膏和/或辐射防护剂(例如防晒霜)。
如本文所使用，“改善皮肤可视外观(improving the visual appearance ofskin)”是指通过使用本发明的个人护理组合物达到的任何益处。各种益处的例子包括但不限于减少可视的毛孔外观(通过降低毛孔大小)、减少肤色中的缺陷和/或瑕疵包括增亮皮肤的色素沉着区和/或使皮肤着色均匀一致、减轻干燥、消除粗糙的干斑、改善皮肤保湿和/或保护皮肤不受环境应激影响的能力、减少细线和皱纹的外观、改善外观和肤色、增加皮肤紧致性和/或柔软性、降低皮肤松弛、增加皮肤亮度和明净度、增加皮肤更新过程、和/或除去毫毛。改善皮肤可视外观还包括调节皱纹、萎缩、皮肤增亮、皮肤变暗、皮肤光滑、和/或减少可视毛孔外观。
如本文所使用，“改变肤色(modifying skintone)”是指肤色的变换，皮肤的颜色变暗或增亮。然而，在其它上下文中，该术语也被用于指皮肤的肌肉和结缔组织健康的调节(即，它与皮肤颜色无关，但与皮肤紧致性有关)。
如本文所使用，术语“增亮肤色(lightening skin tone)”和“增亮皮肤(lightening skin)”是指肉眼和/或机械手段可见的皮肤暗度的降低。该术语意图包括任何范围的可观察到的肤色增亮(即“变白”)。在一些实施方式中，该术语包括降低皮肤中存在的黑色素的浓度，所述皮肤包括这样的皮肤区域，该皮肤区域具有老年斑、黑斑病、褐黄斑、雀斑、炎症后色素沉着、和/或皮肤诱导的高色素沉着所引起的高色素沉着现象。
如本文所使用，“高色素沉着区(hyperpigmented region)”是指相对于特定个体的基础肤色更暗的皮肤局部区域。例如，在优选的实施方式中，高色素沉着区是黑色素局部增加的区域。
如本文所使用，“预防皮肤暗化(preventing skin darkening)”、“预防肤色的暗化(preventing darkening of skin tone)”、“预防肤色暗化(preventing skin tonedarkening)”、“预防皮肤颜色发展(preventing skin color development)”和其它等同的短语是指这样的肤色，其在UV照射和/或阳光暴露之后相比于未治疗的皮肤观察到减少的皮肤色素沉着或暗化。因此，在一些特别优选的实施方式中，本发明的组合物通过预防与阳光暴露和/或UV照射相关的皮肤暗化效应而提供益处。该术语旨在包括防止变暗的阳光暴露皮肤和未防止变暗的阳光暴露皮肤之间任何范围的可观察到的差异。
如本文所使用，“使肤色均匀一致(evening skin tone)”是指使应用区域内的肤色均匀一致。在优选的实施方式中，该短语是指使用本发明的组合物，以在一个或多个皮肤区域内使肤色相同或者提供较小的肤色对比度。
如本文所使用，“降低肤色中的红色(reducing redness in the skin color)”是指皮肤中红颜色的减少，如肉眼或其它方式所观察到的。
如本文所使用，“抑制毛发生长(inhibiting hair growth)”和“毛发生长的抑制(inhibition of hair growth)”是指观察到的毛发长度和/或厚度的降低。因此，在一些优选实施方式中，相比于本发明的个人护理组合物未被施用的区域，本发明的个人护理组合物的应用提供了减小毛发长度和/或厚度的益处。在一些实施方式中，相比于未处理区，观察到的毛发长度和/或厚度的降低在1％以下到99％以上的范围内，而在其它实施方式中，观察到的降低从约100％到约90％、从约90％到约80％、从约80％到约70％、从约70％到约60％、从约60％到约50％、从约50％到约40％、从约40％到约30％、从约30％到约20％、从约20％到约10％、从约10％到约1％。实际上，该术语不意图被限制于任何具体的降低百分数，只要该降低是视觉(即，通过肉眼)或其它方式可观察到的即可。该术语也旨在包括“预防毛发生长”至任何程度，如上所述。该术语不意图被限制于毛发生长被完全抑制(即，观察不到毛发生长)。
如本文所使用，“毛发护理组合物(hair care composition)”是指应用到毛发以提供有益性能的组合物，例如变厚、变稀、染色、脱色、清洁、调节、软化、定型等等。在一些实施方式中，毛发护理组合物是选自下面的形式：香波、护发素、去头屑治疗剂、定型助剂、定型调理剂、头发修复或治疗精华素、洗液、膏剂、润发油以及化学处理剂。在其它实施方式中，定型助剂选自喷雾剂、摩丝、染发剂、凝胶、泡沫和它们的组合。在进一步的实施方式中，化学处理剂选自长效卷发剂、松发剂和持久、半持久、暂时颜色处理剂以及它们的组合。
如本文所使用，“化妆品组合物(makeup composition)”是指用于美化、护理、保持、或加强人或其它动物外表的美容制品。“化妆品组合物”包括但不限于彩妆，例如睫毛油、唇膏、唇线笔、眼影、眼线笔、胭脂、搽脸粉、粉底、腮红和指甲上光剂。在一些实施方式中，本发明的化妆品组合物是选自下面的形式：眼胶、眼影、高熔点唇膏、唇膏、唇彩、唇油、睫毛膏、眉笔、眼线笔、粉饼制剂、粉底、蛋白涂覆颜料、和它们的组合。在进一步的实施方式中，化妆品组合物包括美容组合物。在又一个实施方式中，指甲护理组合物是选自下面的形式：指甲油、表皮处理剂、指甲上光剂、指甲处理剂和上光剂的去除剂。
如本文所使用，“口腔护理组合物”是指适于用在嘴中的个人护理组合物，包括但不限于选自下面的形式：牙膏、牙用凝胶、漱口水、口气清新剂、增白处理剂和惰性载体基质。
如本文所使用，术语“分散相(dispersed phase)”被乳化技术领域中的技术人员用作这样的相，其以悬浮在连续相中并被连续相包围的小颗粒或小液滴存在。分散相也称为“内部”相或“不连续”相。
如本文所使用，“渗透增强剂”是指促进渗透通过上层角质层屏障到达深层皮肤层的组合物。渗透增强剂的例子包括但不限于丙二醇、偶氮酮(azone)、乙氧基二甘醇、二甲基异山梨醇、脲、乙醇、二甲亚砜、微乳液、脂质体、和纳米乳液。
如本文所使用，术语“乳化剂”和“表面活性剂”是指在连续相的材料中分散并悬浮分散相的化合物。经发现，表面活性剂在旨在用于皮肤和/或毛发清洁的产品中特别有用。在具体的实施方式中，术语“表面活性剂(一致或多种)”被用于指具有表面活性的试剂(surface-active agents)，无论是用作乳化剂或用于其它表面活性剂目的，例如皮肤清洗。
在各种实施方式中，本发明还包括“防护剂(protectant)”例如UV吸收剂(例如，甲氧基肉桂酸辛酯、二苯酮-3、二氧化钛、和水杨酸辛酯)；膜形成剂(例如，VP/二十碳烯共聚物)；药妆剂(cosmeceutical agents)(例如，肽和蛋白质、α-羟基酸、以及视黄醇和视黄酸衍生物)；抗氧化剂(例如，生育酚及其衍生物和抗坏血酸及其衍生物)；维生素(例如B、D、K和它们的衍生物)；止汗剂(例如，氢氧化铝和氢氧化锆)；脱毛剂(例如，巯基乙酸盐)；抗痤疮剂(例如，水杨酸和过氧化苯甲酰)；研磨剂和剥落剂(例如，硅酸盐、浮石和聚乙烯)；以及植物、水果、蔬菜和/或海产来源的抽提物。
因此，在一些实施方式中，本发明提供了包含任何有机UV-A和UV-B过滤物的组合物，例如但不限于下列：
| Nr. | 化合物 | CAS-Nr.(＝酸) |
| 25 | 二甲氧基苯甲酰甲醛酸(Dimethoxyphenylglyoxalsure)或者：3，4-二甲氧基-苯基-乙二醛-酸钠 | 4732-70-1 |
| 26 | 3-(4’-磺基亚苄基)-硼-2-酮及其盐 | 56039-58-8 |
| 27 | 4-叔丁基-4’-甲氧基-二苯甲酰甲烷 | 70356-09-1 |
| 28 | 2，2’，4，4’-四羟基二苯甲酮 | 131-55-5 |
| 29 | 2，2’-亚甲基-双-[6-(2H-苯并三唑2-基)-4-(1，1，3，3，-四甲丁基)苯酚] | 103597-45-1 |
| 30 | 2，2’-(1，4-亚苯基)-双-1H-苯并咪唑-4，6-二磺酸，钠盐 | 180898-37-7 |
| 31 | 2，4-双-[4-(2-乙基己氧基)-2-羟基]苯基-6-(4-甲氧基苯基)-(1，3，5)-三嗪 | 187393-00-6 |
| 32 | 3-(4-甲基亚苄基)-campher | 36861-47-9 |
| 33 | 4-双(聚乙氧基)对氨基苯甲酸聚乙氧基乙基酯 | 113010-52-9 |
| 34 | 2，4-二羟基二苯甲酮 | 131-56-6 |
| 35 | 2，2’-二羟基-4，4’-二甲氧基二苯甲酮-5，5’-二磺酸钠 | 3121-60-6 |
| 36 | 苯甲酸，2-[4-(二乙氨基)-2-羟基苯甲酰]-，己基酯 | 302776-68-7 |
| 37 | 2-(2H-苯并三唑2-基)-4-甲基-6-[2-甲基-3-[1，3，3，3-四甲基-1-[(三甲代甲硅烷基)氧基]甲硅醚基]丙基]苯酚 | 155633-54-8 |
| 38 | 1，1-[(2，2′-二甲基丙氧基)羰基]-4，4-二苯基-1，3-丁二烯 | 363602-15-7 |
在一些实施方式中，本发明提供包含颜料的组合物，包括但不限于无机颜料，其基于金属氧化物和/或其它轻微水溶性或不溶的金属化合物例如氧化锌(ZnO)、钛(TiO2)、铁(例如Fe2O3)、锆(ZrO2)、二氧化硅(SiO2)、锰(例如MnO)、铝(Al2O3)、铈(例如Ce2O3)和这些氧化物的混合组合物、以及它们的掺合物。在一些优选的实施方式中，金属氧化物是超细的，而在可选的优选实施方式中，金属氧化物是颜料级的。在仍另外的实施方式中，颜料是“涂覆的”，使得它们被表面处理。在一些优选的实施方式中，涂层包括薄的疏水膜层，而在其它实施方式中，涂层包括薄的亲水膜层。
如本文所使用，提及本发明的组合物而使用的术语“颜料”、“彩色颜料”和“染料”包括为组合物提供颜色和/或赋予所述组合物施用的表面(即皮肤和/或毛发)颜色的任何化合物。在一些实施方式中，染料和颜料从由Cosmetics Directive或EC提供的化妆用着色剂清单中选择。在大多数情况下，这些染料和颜料与被批准用于食品的染料是相同的。优选的颜料/染料包括例如二氧化钛、云母、氧化铁(例如Fe2O3、Fe3O4、FeO(OH))和/或氧化锡。有利的颜料/染料包括例如胭脂红、柏林蓝、氧化铬绿、群青色和/或锰紫。在一些优选的实施方式中，颜料/染料包括但不限于下表中的那些。本领域中已知的那些染料索引号(Colour Index Numbers(CIN))(见，Society of Dyers and Colourists，Rowe Colour Index，3rd Edition，Bradford，England，[1971])。
| 化学品和其他名称 | CIN | 颜色 |
| 颜料绿酸性绿12，4-二硝基羟基萘-7-磺酸颜料黄1颜料黄3颜料橙12，4-二羟基偶氮苯溶剂红31-(2’-氯-4’-硝基-1’-苯偶氮基)-2-羟基萘颜料红3油溶红(Ceres red)；苏丹红；脂肪红(Fat red)G颜料红112颜料红7颜料棕14-(2’-甲氧基-5’-磺基二乙氨基-1’-苯偶氮基)-3-羟基-5”-氯-2”，4”-二甲氧基-2-萘甲酰苯胺分散黄(Disperse Yellow)161-(4-磺基-1-苯偶氮基)-4-氨基苯-5-磺酸2，4-二羟基偶氮苯-4’-磺酸2-(2，4-二甲基苯偶氮基-5-磺基)-1-羟基萘-4-磺酸2-(4-磺基-1-萘偶氮基)-1-萘酚-4-磺酸2-(6-磺基-2，4-偶氮二甲苯基)-1-萘酚-5-磺酸1-(4’-磺基苯偶氮基)-2-羟基萘1-(2-磺基-4-氯-5-羧基-1-苯偶氮基)-2-羟基萘1-(3-甲基苯偶氮基-4-磺基)-2-羟基萘1-(4’，(8’)-磺基萘偶氮基)-2-羟基萘2-羟基-1，2’-偶氮萘-1’-磺酸3-羟基-4-苯偶氮基-2-萘基羧酸1-(2-磺基-4-甲基-1-苯偶氮基)-2-萘基-羧酸1-(2-磺基-4-甲基-5-氯-1-苯偶氮基)-2-羟基萘-3-羧酸1-(2-磺基-1-萘偶氮基)-2-羟基萘-3-羧酸1-(3-磺基-1-苯偶氮基)-2-萘酚-6-磺酸1-(4-磺基-1-苯偶氮基)-2-萘酚-6-磺酸诱惑红(Allura Red)1-(4-磺基-1-萘偶氮基)-2-萘酚-3，6-二磺酸酸性橙101-(4-磺基-1-萘偶氮基)-2-萘酚-6，8-二磺酸 | 100061002010316116801171011725119201201012085121201215012370124201248012490127001301514270147001472014815155101552515580156201563015800158501586515880159801598516035161851623016255 | 绿绿黄黄黄橙橙红红红红红红棕红黄黄橙红红红橙红红红红红红红红橙黄红红橙红 |
| 化学品和其他名称 | CIN | 颜色 |
| 1-(4-磺基-1-萘偶氮基)-2-萘酚-3，6，8-三磺酸8-氨基-2-苯偶氮基-1-萘酚-3，6-二磺酸酸性红1酸性红155酸性黄121酸性红180酸性黄11酸性黄174-(4-磺基-1-苯偶氮基)-1-(4-磺苯基)-5-羟基-吡唑啉酮-3-羧酸颜料黄162，6-(4’-磺基-2”，4”-二甲基)二苯偶氮基)-1，3-二羟基苯酸性黑1颜料黄13颜料黄83溶剂黄酸性红163酸性红732-[4’-(4”-磺基-1”-苯偶氮基)-7’-磺基-1’-萘偶氮基]-1-羟基-7-氨基萘-3，6-二-磺酸4’-[(4”-磺基-1”-苯偶氮基)-7’-磺基-1’-萘偶氮基]-1-羟基-8-乙酰氨基萘-3，5-二磺酸直接橙(Direct Orange)34、39、44、46、60食品黄反式-1β-阿朴-8’-胡萝卜素醛(C30)反式-阿朴-8’-胡萝卜素酸(C30)-乙基酯角黄素(Canthaxanthin)酸性蓝12，4-二磺基-5-羟基-4’-4”-双(二乙氨基)三苯基甲醇4-[(4-N-乙基-对-磺代苄氨基)苯基(4-羟基-2-磺苯基)(亚甲基)-1-(N-乙基-N-对-磺苄基)-2，5-环己二亚胺]酸性蓝7(N-乙基-对-磺代苄氨基)苯基(2-磺苯基)亚甲基-(N-乙基-N-对-磺苄基)D2，5-环己二亚胺酸性绿9二乙基二磺基苄基二-4-氨基-2-氯-二-2-甲基-fuchsonimmonium碱性紫14碱性紫22’-甲基-4’-(N-乙基-N-间-磺苄基)氨基-4”-(N-二乙基)氨基-2-甲基-N-乙基-N-间-磺苄基fuchsonimmonium4’-(N-二甲基)氨基-4”-(N-苯基)氨基萘并-N-二甲基-fuchsonimmonium2-羟基-3，6-二磺基-4，4’-双二甲基氨基萘并-fuchsonimmonium | 162901720018050181301869018736188201896519140200402017020470211002110821230247902729027755284404021540800408204082540850420454205142053420804209042100421704251042520427354404544090 | 红红红红黄红黄黄黄黄橙黑黄黄黄红红黑黑橙橙橙橙橙蓝蓝绿蓝蓝绿绿紫紫蓝蓝绿 |
| 化学品和其他名称 | CIN | 颜色 |
酸性红523-(2’-甲基苯氨基)-6-(2’-甲基-4’-磺代苯氨基)-9-(2”-羧苯基)呫吨 |
451004519045220453504537045380453964540545410454254543047000470055032550420513195800059040607246072560730615656157061585620456980069825711057300073015733607338573900739157410074160741807426075100751207512575130 | 红紫红黄橙红橙红红红红黄黄紫黑紫红绿紫紫紫绿绿蓝蓝蓝蓝橙蓝蓝红紫紫红蓝蓝蓝绿黄橙黄橙 |
| 化学品和其他名称 | CIN | 颜色 |
| 胡萝卜素的酮基-和/或羟基衍生物鸟嘌呤或珠光剂1，7-双(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1，6-庚二烯-3，5-二酮胭脂红酸的复合盐(Na、Al、Ca)叶绿素a和b；叶绿素和叶绿酸的酮化合物铝水合氧化铝水化硅酸铝群青颜料红101和102硫酸钡氯氧化铋及其与云母的混合物碳酸钙硫酸钙碳颜料黑9碳药用植物(Carbo medicinalis vegetabilis)氧化铬水合氧化铬颜料蓝28，颜料绿14颜料金属2金铁氧化物和氢氧化物氧化铁氧化铁，水合氧化铁铁(II)和铁(III)的六氰合铁酸的混合物颜料白18二磷酸锰铵磷酸锰；Mn3(PO4)2·7H2O银二氧化钛及其与云母的混合物氧化锌6，7-二甲基-9-(1’-D-核糖醇基)-异咯嗪，核黄素糖色剂(Sugar coloring)辣椒红，辣椒玉红素甜菜苷苯并吡喃盐，花色素硬脂酸铝、锌、镁和钙溴百里酚蓝溴百里酚绿酸性红195 | 751357517075300754707581077000770027700477007770157712077163772207723177266772677726877288772897734677400774807748977491774927749977510777137774277745778207789177947 | 黄白黄红绿白白白蓝红白白白白黑黑黑绿绿绿棕棕橙红黄黑蓝白紫红白白白黄棕橙红红白蓝绿红 |
在仍进一步的实施方式中，本发明的组合物进一步包括来自下面的组的一种或更多种物质：2，4-二羟基偶氮苯、1-(2’-氯-4’硝基-1’-苯偶氮基)-2-羟基萘、油溶红、2-(4-磺基-1-萘偶氮基)-1-萘酚-4-磺酸、2-羟基-1，2’-偶氮萘-1’-磺酸的钙盐、1-(2-磺基-4-甲基-1-苯偶氮基)-2-萘基羧酸的钙盐和钡盐、1-(2-磺基-1-萘偶氮基)-2-羟基萘-3-羧酸的钙盐、1-(4-磺基-1-苯偶氮基)-2-萘酚-6-磺酸的铝盐、1-(4-磺基-1-萘偶氮基)-2-萘酚-3，6-二磺酸的铝盐、1-(4-磺基-1-萘偶氮基)-2-萘酚-6，8-二磺酸的铝盐、4-(4-磺基-1-苯偶氮基)-1-(4-磺苯基)-5-羟基吡唑啉酮-3-羧酸的铝盐、4，5-二溴荧光素的铝盐和锆盐、2，4，5，7-四溴荧光素的铝盐和锆盐、3’，4’，5’，6’-四氯-2，4，5，7-四溴荧光素及其铝盐、2，4，5，7-四碘荧光素的铝盐、喹酞酮二磺酸的铝盐、靛蓝二磺酸的铝盐、氧化铁红和氧化铁黑(CIN：77 491(红)和77 499(黑))、氧化铁水合物(CIN：77 492)、二磷酸锰铵以及二氧化钛。
在仍进一步的实施方式中，油溶的天然染料例如诸如辣椒粉抽提物、β-胡萝卜素或胭脂红在本发明中有用。
在另外的实施方式中，本发明的凝胶膏组合物包括珠光颜料。在一些优选的实施方式中，各种珠光颜料在本发明中有用，包括但不限于“天然珠光颜料”(例如“珠光粉(pearl essence)”[来自鱼鳞的鸟嘌呤/次黄嘌呤的混合晶体]、“珍珠母(mother of pearl)”[碾碎的贻贝壳(ground mussel shells)])、和“单晶珠光颜料(monocrystalline pearlescent pigment)”(例如氯氧化铋[BiOCl])；以及“层基底颜料(1ayer substrate pigment)”(例如，云母/金属氧化物)。
珠光颜料的底基包括但不限于粉状颜料、氯氧化铋和/或二氧化肽的蓖麻油分散体、云母上的氯氧化铋和/或二氧化肽。例如，以CIN77163列出的闪光颜料是特别有利的。
在本发明中特别有用的另外一组基于云母/金属氧化物的珠光颜料被提供如下：
| 组别 | 涂层/层厚度 | 颜色 |
| 银白色珠光颜料 | TiO2：40-60nm | 银色 |
| 干涉颜料 | TiO2：60-80nm | 黄 |
| TiO2：80-100nm | 红 | |
| TiO2：100-140nm | 蓝 | |
| TiO2：120-160nm | 绿 | |
| 彩色闪光颜料 | Fe2O3 | 青铜色 |
| Fe2O3 | 红铜色 | |
| Fe2O3 | 红 | |
| Fe2O3 | 红-紫 |
| Fe2O3 | 红-绿 | |
| Fe2O3 | 黑 | |
| 组合颜料 | TiO2/Fe2O3 | 多种金色色度 |
| TiO2/Cr2O3 | 绿 | |
| TiO2/柏林蓝 | 深蓝 | |
| 组别 | 涂层/层厚度 | 颜色 |
| TiO2/洋红 | 红 |
在一些优选的实施方式中，以商品名Timiron、Colorona或Dichrona从Merck获得的珠光颜料可用于本发明。然而，本发明不意图限制于本文所列的具体颜料。实际上，在本发明中发现有用的珠光颜料可以从许多来源获得。例如，除了云母之外的其它底材可以用另外的金属氧化物涂覆，例如诸如二氧化硅或类似物。用例如TiO2和Fe2O3(“ronasphere”)涂覆的SiO2颗粒--其由Merck出售并特别适于细线的光学降低(optical reduction of fine lines)--在本发明中发现有用。[0183]在可选的实施方式中，底材(例如，云母)不被包括在内。在一些优选的实施方式中，用SiO2制备的珠光颜料是特别优选的。这种颜料--还可以另外具有角等色效应--是可得的，例如以商品名Sicopearl Fantastico从BASF获得。
在另外的实施方式中，从Engelhard/Mearl获得的基于硼硅酸钙钠的颜料--其已经用二氧化钛涂覆--也是有用的。这些通常以商品名Reflcks获得。除了颜色之外，作为它们从40nm到180nm的粒径的结果，它们具有闪光效应。
在仍进一步的实施方式中，可从Flora Tech以商品名MetasomesStandard/Glitter获得的各种颜色(黄、红、绿、蓝)的效应颜料发现在本发明的组合物中有用。闪光颗粒在这里存在于与各种辅助剂和染料(例如，诸如染料索引(CI)号为19140、77007、77289、77491的染料)的混合物中。
在一些实施方式中，染料和颜料单独存在或或以混合物存在。在可选的实施方式中，它们互相涂覆，不同的涂层厚度一般产生不同的颜色效应。在一些实施方式中，染料和给予色彩的颜料的总量选自一定的浓度范围(例如，从按重量计从约0.1％到按重量计约10％；优选按重量计从约0.5％到约15％；以及最优选按重量计从约1.0％到约10％，每种情况都基于制剂的总重量)。
在仍进一步的实施方式中，本发明提供制备本发明的组合物的方法。在一些实施方式中，这些方法包括分别混合并加热油相和/或水相的多个组分，然后在搅拌下将它们合并在一起。在一些优选的实施方式中，所述相被均质化。在一些特别优选的实施方式中，在适中或高的能量输入下，搅拌该组合物，有利地使用齿轮辋分散仪(gear rim dispersing machine)，旋转数最高可达10000 rpm(优选在约2500到约7700 rpm的范围内)。
包含本发明的化妆品配方
可以预期，本发明将可以用在许多个人护理组合物中。本发明不意图被限制于任何特定形式或类型的组合物。下面的描述提供了包含下列发明的示例性的、非限制性的组合物。
乳液包括一组通常的、常用的化妆品。术语“乳液”一般被用于指不混溶的或仅仅以有限程度互相混溶的两种液体的异质体系，其通常被称为“相(phases)”。一个相通常是小滴的形式(即，“分散”相、“不连续”相或“内部”相)，而其它液体形成连续(即，“内聚的(coherent)”或“外部的”)相。较不常见的应用形式包括多种乳液(即其中分散[或不连续]相的小滴构成进一步分散相的部分小滴的那些多种乳液，例如水/油/水[W/O/W])乳液和油/水/油[O/W/O]乳液)。如果油相被细微地分布在水相中，则这是水包油乳液(O/W乳液，例如牛奶)。O/W乳液的基本特征由水确定。比起W/O乳液(油包水乳液)，这些乳液在皮肤上通常较不油滑，是相当无光泽的，并且更快地吸收入皮肤。
本领域技术人员熟悉配制用于化妆品和/或皮肤病用途的稳定W/O制剂的大量选择，包括例如乳剂和油膏的配方--其在室温到皮肤温度的范围内是可涂敷的，以及洗液和乳--其在该温度范围内流动性更强。
乳液的稳定性取决于它们的粘度，特别是外相的粘度。当精细分散的颗粒聚集在-起形成相对大的聚集体以及接触的小滴聚结时，乳液变得不稳定。该过程被称为“聚结(coalescence)”。乳液的外相粘性越高，聚结的过程越缓慢。具有“液体”(＝可流动的)稠性的乳液被用在各种化妆品中(例如护肤洗液、清洁洗液、洗脸液、洗手液等等)。这些组合物通常具有从约2000mPa·s到约10,000mPa·s的粘度。可流动乳液的稳定性是值得特别关注的，因为明显更大的颗粒流动性促进更快的聚结。
已知当前通常被使用的液态乳液-般包括增稠剂，并且在相对高的电解质浓度下是不稳定的。这在组合物的相分离中得到证明。然而，在一些实施方式中，使用某些电解质(例如水溶性的UV过滤剂)是有利的，以便能够利用它的其它物理、化学或生理学性能。尽管在很多情况下，适宜选择的乳化剂系统可以提供-定程度的治疗，但是，然后，正如通常那样，产生其它不利之处。
例如，由于这样的事实--乳化剂像基本上任何化学物质一样可能引发过敏反应或基于使用者的过敏性(即超敏性)的反应，因此产生一些不利之处。常见的化妆品乳化剂的使用通常是完全无风险的，尽管对于一些个体，“低变应原的”组合物是必要的和/或优选的。实际上，在一些特别敏感的个体中，通过暴露于某些乳化剂和同时暴露于阳光，一些皮肤病被引发。因此，如本领域技术人员所知，在一些组合物中，特定乳化剂是较不优选的和/或被避免的。
制备无乳化剂的制剂是可能的。例如，一些制剂具有含分散的小水滴的油相(即，其类似于W/O乳液)。此类体系有时被称为“水分散体(hydrodispersions)”或“油分散体(oleodispersions)”，者取决于哪一个是分散相和哪一个是连续相。
然而对于化妆品技术，用乳化剂完全分散既不必要也不可能，特别是因为存在某些特别温和的乳化剂选择。然而，目前使用的乳化剂缺乏令人满意的宽范围的选择。因此，皮肤耐受的相应温和的化妆品制剂的应用范围受到限制。
除了一些乳化剂的有害效应之外，也已知暴露于其它因素损害皮肤和毛发。例如，太阳辐射的紫外部分对皮肤的有害效应是广为人知的。尽管波长在290nm以下的射线(即，UVC区)被地球大气的臭氧层吸收，但是在290nm和320nm范围之间的射线(即，UVB区)导致程度各异的红斑、单纯晒黑或甚至灼伤。阳光的最大红斑活性为在308nm附近相对窄的区域。
已知许多化合物提供防有害UVB照射的保护。最常见地，这些化合物是3-亚苄基-樟脑的衍生物、4-氨基苯甲酸的衍生物、肉桂酸的衍生物、水杨酸的衍生物、二苯酮的衍生物、和2-苯基-苯并咪唑的衍生物。
对于在约320nm至约400nm之间的范围--UVA区，具有可利用的滤光物质也是重要的，因为UVA区的射线也可以导致损伤。长期以来，波长在320nm至400nm之间的长波UV-A辐射被错误地认为仅具有可忽略的生物学作用，以及，因此，认为UV-B射线是对人类皮肤造成大多数日光性损伤的原因。然而，近来的许多研究已经表明，对于在发皮肤中引发光动力学的，尤其是光毒性的反应和慢性变化方面，UV-A辐射比UV-B辐射有害得多。此外，通过暴露于UV-A辐射，UV-B辐射的有害效应可以被进一步增强。
已经表明，UV-A辐射本身以及在非常正常的每日条件下的UV-A辐射，足以在短期内损伤胶原和弹性蛋白纤维，这对于皮肤的结构和强度是十分重要的。这导致皮肤中慢性的光诱导的变化，使得皮肤过早“老化”。由光线导致的皮肤老化的临床表现通常包括增加的皱纹和线条、以及异常的有皱纹的轮廓。此外，受光诱导的皮肤老化影响的皮肤区域通常表现出异常的色素沉着。在一些情况下，产生褐斑、角质物、癌或恶性黑素瘤。由每日UV暴露导致的皮肤过早老化的特征还可以是具有降低的朗格罕细胞活性和轻微的慢性炎症。
到达地球的紫外辐射的大约90％是由UV-A射线组成的。尽管取决于许多因素(例如，年和日的时间和/或纬度)，到达地球的UV-B辐射的量广泛变化，但是，无论年日时间因素还是地理因素如何，每日到达地球的UV-A辐射水平保持相对恒定。此外，大部分UV-A辐射穿透活表皮，而约70％的UV-B射线被角质层截留。针对UV-A射线的预防性保护，例如，通过对皮肤施用化妆品或皮肤病学配方形式的光防护过滤物质，因此是相当重要的。
一般而言，光防护过滤物质的光吸收行为是广为人知的并且被文件记载，主要原因在于如下事实：大多数工业国对于使用这类物质具有肯定清单(positivelist)，其导致对含有这些物质的每一产品附带的文件具有非常严格的标准。对于所述物质在成品配方中的浓度，吸收值提供了指导，因为与皮肤中的物质或皮肤表面本身的相互作用经常呈现出变数，该变数可能影响组合物对于每个个体执行得如何好。然而，通常难以预先评估该过滤物质在皮肤角质层内和皮肤角质层上分布的均匀性和厚度。
为测试UV-A防护性能，通常使用本领域技术人员已知的IPD法(IPD5立即晒黑(IPD 5 immediate pigment darkening))。该方法类似于阳光防护因素的确定，并提供这样的方法，该方法指示：在发生的色素沉着与未保护的皮肤所产生的色素沉着相同之前，用光线防护组合物保护的皮肤用UV-A照射的时间能够多多久。
已经在全欧洲建立的另一种测试方法是澳大利亚标准AS/NZS2604：1997。在该方法中，制品在UV-A区中的吸收被测量。为了满足该标准，所述制品必须吸收在320-360nm区中的UV-A照射的至少90％。
对防晒组合物配方所关心的是，已知的在UV-A区中也表现出高过滤作用的光线防护过滤物质的使用浓度通常被这样的极真实的事实所限制，即它们与固定形式的其它物质混合。因此，存在某些与达到相对高的阳光防护因素和UV-A防护性能相关的配制困难。然而，在本领域中的技术人员通常知道克服和/或弥补这些困难的方式。
由于光线防护过滤物质通常是昂贵的并且一些光线防护过滤物质额外难以以相对高的浓度掺入化妆品和/或皮肤病学制剂，所以本发明的一些实施方式被设计用来提供简易且成本有效的制剂，其尽管具有异常低浓度的常规UV-A光防护过滤物质，但是可以实现可接受的或者甚至高的UV-A防护性能。
然而，如本领域所知，UV照射还可以导致光化学反应，其产生干扰皮肤代谢的产物。这些光化学反应产物主要是自由基化合物(例如，羟基自由基)。由于它们的高反应性，在皮肤本身中形成的未限定自由基光化产物还可以表现出不受控制的次级反应。然而，单态氧--氧分子的非自由基激发态，也可以在UV照射期间产生，如同短期环氧化物和许多其它物质一样。例如，由于其增加的反应性，单态氧不同于正常的三态氧(自由基基态)。然而，氧分子的激发的、反应性“自由基”三重态也存在。因此，为了防止这些反应，抗氧化剂和/或自由基清除剂可用于化妆品和/或皮肤病学配方。
通常用作化妆品和/或皮肤病学光防护配方中的光防护剂的化合物的特征通常在于提供良好的光防护。然而，它们具有劣势：有时难以将它们以令人满意的方式掺入期望的配方中。
如上所述，防晒系数(sun protection factor，SPF)表明：在出现的红斑反应与未保护的皮肤所出现的红斑反应相同之前，用光线防护组合物保护的皮肤能够用UV-A照射的时间多多久(即，对于SPF＝10，与未保护的皮肤相比，时间长十倍)。消费者很清楚“SPF”的含义并基于产品上示出的SPF值选择皮肤和/或毛发护理组合物。消费者期望从制造商得到关于防晒系数的可靠信息，原因主要在于公众越来越意识到过度的日晒与皮肤癌以及过早老化之间的关联。此外，在世界的一些地区，臭氧层的分解成为主要的关注点。根据皮肤类型和期望的阳光暴露，消费者选择具有较低或较高SPF的产品。然而，消费者似乎存在选择相对高的SPF系数的倾向，特别是将被用于儿童和皮肤白皙的那些人的产品。在一些实施方式中，本发明提供具有相对低浓度的常规光防护过滤物质但仍具有消费者可接受的SPF值的组合物。
在一些优选的实施方式中，本发明提供的防晒制剂的基本成分包括：水溶液或含水溶液；含水乙醇溶液；天然油和/或化学改性的天然油和/或合成油；脂肪、蜡、和其它天然和合成脂肪物，优选脂肪酸与低碳数醇的酯(例如与异丙醇、丙二醇或丙三醇的酯)、或脂肪醇与低碳数的链烷酸的酯或与脂肪酸的酯；醇、二醇或低碳数的多元醇、和它们的醚，优选乙醇、异丙醇、丙二醇、丙三醇、乙二醇、乙二醇一乙基醚或一丁基醚、丙二醇一甲基醚、一乙基醚或一丁基醚、二甘醇一甲基醚或一乙基醚和类似产品。在可选的优选实施方式中，这些组分中的两种或更多种的混合物可用于本发明。
术语“脂”被经常用作一般性术语，其指脂肪、油、蜡和类似物。此外，术语“油相”和“脂相”也可以同义使用。然而，油和脂肪相互之间在它们的极性上不同，这难以定限定。已经提议，采用对水的界面张力作为油或油相的极性指数的量度。因此，可以预期，界面张力可作为给定油成分的极性的合适量度。“界面张力”是作用于在两相间的界面中一米长的虚拟线上的力。在这种测量中，油相和水制剂的界面张力越小，被分析的油相的极性越大。该界面张力的物理单位通过力/长度关系进行常规计算，并通常以mN/m(毫牛顿/米)表示。如果它努力减少界面，则它具有正号。在相反的情况下，它具有负号。如本文所使用，如果它们对水的界面张力在30mN/m以下，则脂类被认为是“极性的”。
“极性油”包括来自卵磷脂组和甘油三脂肪酸酯组的那些，即链长度为从8到24个--特别是12到18个--碳原子的饱和和/或不饱和的、支化和/或未支化的链烷羧酸的甘油三酯。在一些实施方式中，甘油三脂肪酸酯选自合成的、半合成的和天然的油(例如，橄榄油、葵花油、大豆油、花生油、菜子油、杏仁油、棕榈油、椰子油、蓖麻油、小麦油、葡萄子油、蓟子油、月见草油、夏威夷果油和类似物)。然而，本发明不意图限制于含有特定极性油的组合物。可用于本发明的极性油的另外的例子包括链长度为3到30个碳原子的饱和和/或不饱和的、支化和/或未支化的链烷羧酸与链长度为3到30个碳原子的饱和和/或不饱和的、支化和/或未支化的醇的酯组，以及芳族羧酸和3到30个碳原子的饱和和/或不饱和的、支化和/或未支化的醇的酯组。在一些实施方式中，此类酯油选自十四烷酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸异丙酯、油酸异丙酯、硬脂酸正丁酯、月桂酸正己基、油酸癸酯、硬脂酸异辛酯、硬脂酸异壬酯、异壬酸异壬酯、棕榈酸2-乙基己基酯、月桂酸2-乙基己基酯、硬脂酸2-乙基己基酯、棕榈酸2-辛基十二烷基酯、油酸油基酯、芥酸油基酯、油酸芥基酯、芥酸芥基酯和此类酯的合成、半合成和天然混合物(例如，霍霍巴油)。
此外，在一些实施方式中，油相选自二烷基醚，以及饱和或不饱和的和支化或未支化的醇。在一些特别优选的实施方式中，优选的实施方式的组合物的油相还包含苯甲酸C12-15-烷基酯，而在可选的实施方式中，优选的实施方式仅含有后者。在还有另外的实施方式中，油相选自格尔伯特醇组(Guerbet alcohols)(即Marcel Guerbet命名的醇组，Marcel Guerbet首先描述该它们的制备)。根据下面的方程式，通过将醇氧化成醛、通过该醛的羟醛缩聚、从羟醛消去水以及丙烯醛的氢化作用，这些醇得以形成：
格尔伯特醇甚至在低温下都是液态，并实质上不导致皮肤刺激。因此，它们可用作皮肤护理和毛发护理组合物中的加脂(fatting)组分、富脂(superfatting)组分以及再加脂(refatting)组分。实际上，格尔伯特醇在化妆品领域中是已知的。在这些应用中，该种类得特征一般在于具有下面的结构：
在该结构中，R1和R2通常是未支化的烷基自由基。在本发明的一些优选实施方式中，这样的格尔伯特醇可用于本发明中，其中R1是丙基、丁基、戊基、己基、庚基或辛基和/或R2是己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基或十四烷基。在另外的实施方式中，优选的格尔伯特醇包括具有下列化学结构的2-丁基辛醇：
其例如以商品名ISOFOL
12(Condea Chemie GmbH)是商业可得的，以及包括具有下面的化学结构的2-己基癸醇：
其例如以商品名ISOFOL
16(CondeaChemie GmbH)是商业可得的。
在另外的实施方式中，格尔伯特醇的混合物可用于本发明的组合物。例如，2-丁基辛醇和2-己基癸醇的混合物在本发明中有用。在成品化妆品或皮肤病学制剂中的格尔伯特醇的总量选自这样的范围：基于该制剂的总重量可达按重量计约25.0％，优选按重量计约0.5％到约15.0％。然而，本发明不意图被限制于任何具体的浓度，也不限制于浓度范围，如本领域的技术人员知道如何制备具有合适浓度的组合物，以便获得期望的组合物的以及它们的用途(一种或多种)。此外，可以预期，油和/或蜡组分的任何混合物可用于本发明。例如，在一些实施方式中，蜡(例如棕榈酸十六烷基酯)可用作油相的唯一脂类成分。在另外的实施方式中，非极性油(例如，选自支化和未支化的烃和烃类蜡的那些油)，特别是VASELINE[即，矿脂]、石蜡油、角鲨烷和角鲨烯、聚烯烃和氢化聚异丁烯可用于本发明。在一些含聚烯烃的实施方式中，聚癸烯是优选的物质。
可用于本发明的实施方式中的脂肪组分和/或蜡组分包括但不限于植物蜡、动物蜡、矿和石油化学蜡。特别被优选的蜡的例子包括小烛树蜡、巴西棕榈蜡、野漆树蜡(日本蜡)、西班牙草蜡、软木蜡(cork wax)、guaruma wax、玉米子油蜡(rice germ oil wax)、甘蔗蜡、草莓蜡、小冠巴西棕蜡、褐煤蜡、霍霍巴木蜡、牛油树脂、蜂蜡、紫胶蜡、鲸蜡、羊毛脂(羊毛蜡)、尾脂(uropygial grease)、纯地蜡、地蜡(ozokerite)(地蜡(earth wax))、石蜡和微晶蜡。
可用于本发明的实施方式中的另外的脂肪组分和/或蜡组分包括化学改性的蜡和/或合成蜡(例如以商品名SYNCROWAX
HRC[甘油三山嵛酸酯]和SYNSCROWAX
AW 1C[C18-C36脂肪酸]商业可得的那些，它们可以从CRODAGmbH获得)，以及褐煤酯蜡、Sasol蜡、氢化霍霍巴蜡、合成或改性蜂蜡(例如，聚二甲基硅氧烷共聚醇蜂蜡和/或C30-C50烷基蜂蜡)、聚亚烷基蜡、聚乙二醇蜡、以及化学改性脂肪(例如，氢化植物油，例如氢化蓖麻油和/或氢化椰子脂肪酸甘油酯)、甘油三酸酯(例如，三羟基硬脂精、脂肪酸、脂肪酸酯和乙二醇酯，例如硬脂酸C20-C40-烷基酯、硬脂酸C20-C40-烷基羟基硬酯酰酯和/或乙二醇褐煤酸酯)。在进一步的实施方式中，本发明包括某些有机硅氧烷化合物，其具有与已列举的脂肪组分和/或蜡组分(例如，硬脂氧基三甲基硅烷(stearoxytrimethylsilane))相似的物理性质。在另外的实施方式中，脂肪组分和/或蜡组分被单独提供，而在仍进一步的实施方式中，它们作为混合物被提供。实际上，意图是这类油和/或蜡组分的任何期望的混合物将可用于本发明的各种实施方式中。
在一些实施方式中，油相选自2-乙基己基异硬脂酸酯、辛基十二烷醇、异十三烷基异壬酸酯、异二十烷、2-乙基己基可可酯、C12-C15-安息香烷基酯、甘油三辛酸酯和二辛醚。在可选的实施方式中，各种油相的混合物被提供，包括但不限于包括辛基十二烷醇、甘油三辛酸酯、二辛醚、C12-C15-安息香烷基酯、2-乙基己基异硬脂酸酯、异十三烷基异壬酸酯的一种或多种的混合物。下表提供了在本发明的各种实施方式中可单独使用或与其它脂类结合使用的脂类清单。在最后一栏里给出了相应的对水的界面张力。然而，本发明不意图被限于这些具体的组分，因为其它组分可用于本发明的各种实施方式中，包括极性更大或更小的成分的混合物或类似物。
| 脂类 | ||
| 商品名 | INCI名 | (m/Nm) |
| ISOFOL14T | 丁基癸醇+己基癸醇+己基辛醇+丁基辛醇 | 27.6 |
ISOFOL |
己基癸醇 | 24.3 |
EUTANOL |
辛基十二烷醇 | 24.8 |
CETIOL |
二辛醚 | 22.1 |
MIGLYOL |
甘油三辛酸酯 | 21.3 |
CEGESOFT |
棕榈酸辛酯 | 23.1 |
| 硬脂酸异丙酯 | 硬脂酸异丙酯 | 21.9 |
ESTOL |
辛酸辛酯 | 30.0 |
FINSOLV |
C12-C15安息香烷基酯 | 21.8 |
CETIOL |
鲸蜡硬脂醇异壬酸酯 | 28.6 |
DERMOFEEL |
丁烯乙二醇二辛酸酯 | 21.5 |
TRIVENT |
三辛酸甘油酯 | 20.2 |
| MOD | 辛基十二烷基十四烷酸酯 | 22.1 |
COSMACOL |
双-C12-C13烷基酒石酸酯 | 29.4 |
MIGLYCOL |
辛酸二甘油基琥珀酸酯 | 29.5 |
PRISORINE |
异硬脂酸辛酯 | 29.7 |
TEGOSOFT |
硬酯酰庚酸酯 | 28.7 |
ABIL |
十六烷基二甲基硅氧烷 | 25.1 |
CETIOL |
椰子-辛酸酯(Coco-Caprylate/Caprate) | 24.8 |
| IPP | 棕榈酸异丙酯 | 22.5 |
| LUVITOLEHO | Cetearyl Octanoate | 28.6 |
CETIOL |
硬脂酸辛酯 | 28.4 |
在一些实施方式中，一些或所有所述制剂的油相选自通常称为“硅氧烷油”的环状和/或线性硅氧烷。在一些实施方式中，这些硅氧烷或硅氧烷油以单体存在，其通常由如下的结构元素表征：
在本发明的一些实施方式中发现有用的具有两个或更多个甲硅烷氧基单元的硅氧烷通常由如下的结构元素表征：
其中，硅原子可以由相同或不同的烷基基团和/或芳基基团取代，其用基团R1到R4以一般性术语表示，其中不同基团的数不必要限制于4并且可以具有2到200,000的值。
根据本发明将被有利使用的环状硅氧烷通常由如下的结构元素表征：
其中硅原子可以由相同或不同的烷基基团和/或芳基基团取代，其在这里用基团R1到R4以一般性术语表示，其中不同基团的数不必要限制于4。n可以具有3/2到20的值。“n”的分数值考虑到奇数个甲硅烷氧基基团可能在环中存在。
在一些实施方式中，苯基三甲基硅氧烷(phenyltrimethicone)被选作硅氧烷油。其它适于在本发明的各种实施方式中使用的硅氧烷油包括但不限于二甲基硅氧烷、苯基二甲基硅氧烷、环甲基硅酮(八甲基环四硅氧烷)、六甲基环三硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、聚(甲基苯基硅氧烷)、十六烷基二甲基硅氧烷、和山嵛氧二甲基硅氧烷。在可选的实施方式中，这些化合物的混合物发现在本发明中有用，包括但不限于环甲基硅酮和异壬酸异三癸酯的混合物，以及环甲基硅酮和2-乙基己基异硬脂酸酯的混合物。在另外的实施方式中，构成相似的硅氧烷油，例如上述有机侧链已经被衍生化(例如，聚乙氧基化和/或聚丙氧基化)的那些化合物，在本发明中发现有用。这些包括但不限于这样的化合物，如聚硅氧烷-聚烷基-聚醚共聚物诸如鲸蜡醇二甲基硅氧烷共聚醇(cetyldimethicone copolyol)(即，鲸蜡醇二甲基硅氧烷共聚醇(和)聚异硬脂酸甘油-4酯(和)月桂酸己酯)。实际上，本发明不意图受限于任何具体的硅氧烷油，也不意图受限于硅氧烷油的混合物，因为各种油可用于本发明的各种实施方式中。
在另外的实施方式中，油包水(W/O)乳液可用于本发明中。在一些实施方式中，W/O乳液在存在或不存在另外的共乳化剂的情况下被使用。在仍进一步的实施方式中，本发明的W/O乳液进一步包括一种或多种乳化剂，包括但不限于下列化合物的一种或多种：卵磷脂、羊毛脂、微晶蜡(Cera microcristallina)与石蜡油(矿脂)的混合物、地蜡、氢化蓖麻油、聚油酸甘油-3酯、羊毛蜡酸混合物、羊毛蜡醇混合物、异硬脂酸季戊四醇酯(pentaerythrithyl isostearate)、聚二异硬脂酸甘油-3酯、蜂蜡(白蜂蜡)和硬脂酸、二羟基十六烷基磷酸钠与异丙基羟基十六烷基醚和甲基葡萄糖二油酸酯的混合物、甲基葡萄糖二油酸酯与羟基硬脂酸酯和蜂蜡的混合物、矿物油与矿脂和地蜡以及油酸甘油酯和羊毛脂醇的混合物、矿脂与下列物质的混合物：地蜡和氢化蓖麻油以及异硬脂酸甘油酯和聚油酸甘油-3酯、PEG-7氢化蓖麻油、地蜡和氢化蓖麻油、聚硬脂酸甘油-4酯、聚异硬脂酸甘油-4酯与下列物质的混合物：鲸蜡醇二甲基硅氧烷共聚醇和月桂酸己酯、月桂醇甲基硅氧烷共聚醇、鲸蜡醇二甲基硅氧烷共聚醇、丙烯酸酯/C10-C30-丙酸酸烷基酯交联聚合物、Poloxamer101、聚二聚羟基硬脂酸甘油-2酯、聚二异硬脂酸甘油-3酯、聚二聚羟基硬脂酸甘油-4酯、PEG-30二聚羟基硬脂酸酯、二异硬脂酰聚甘油-3二异硬脂酸酯、聚二聚羟基硬脂酸甘油-2酯、聚二聚羟基硬脂酸甘油-3酯、聚二聚羟基硬脂酸甘油-4酯、聚二油酸甘油-3酯。
在本发明的另外的实施方式中，本发明的W/O乳液包括一种或多种共乳化剂，包括但不限于下列：硬脂酸甘油酯与鲸蜡硬脂醇聚醚(ceteareth)-20、鲸蜡硬脂醇聚醚-25的混合物、鲸蜡硬脂醇聚醚-6与十八烷醇的混合物、鲸蜡基硬脂醇与下列物质的混合物：PEG-40蓖麻油和鲸蜡基硬脂基硫酸钠(sodium cetylstearyl sulfate)、三鲸蜡硬脂醇聚醚-4磷酸酯、鲸蜡基硬脂基硫酸钠、卵磷脂三月桂醇聚醚-4磷酸酯、月桂醇聚醚-4磷酸酯、硬脂酸、丙二醇硬脂酸酯SE、PEG-25氢化蓖麻油、PEG-54氢化蓖麻油、PEG-6辛酸甘油酯、油酸甘油酯与下列物质的混合物：丙二醇、十六烷基聚氧乙烯醚(ceteth)-2、十六烷基聚氧乙烯醚-20、聚山梨醇酯60、硬脂酸甘油酯与下列物质的混合物：PEG-100硬脂酸酯、月桂醇聚醚-4、鲸蜡硬脂醇聚醚-3、异硬脂基甘油醚、鲸蜡硬脂醇与下列物质的混合物：鲸蜡基硬脂基硫酸钠、月桂醇聚醚(laureth)-23、硬脂醇聚醚(steareth)-2、硬脂酸甘油酯与下列物质的混合物：PEG-30硬脂酸酯、PEG-40硬脂酸酯、二硬脂酸乙二醇酯、PEG-22十二烷基乙二醇共聚物、聚PEG-4硬脂酸甘油-2酯、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯、硬脂醇聚醚-10、PEG-20硬脂酸酯、硬脂醇聚醚-2与下列物质的混合物：PEG-8二硬脂酸酯、硬脂醇聚醚-21、硬脂醇聚醚-20、异硬脂醇聚醚-20、PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物、甲氧基-PEG-22/十二烷基乙二醇共聚物、PEG-20硬脂酸甘油酯、PEG-8蜂蜡、聚月桂酸甘油-2酯、异硬脂基二甘油基琥珀酸酯、硬脂酰胺丙基PG二甲基氯化铵磷酸酯、硬脂酸甘油酯SE、鲸蜡醇聚醚-20、柠檬酸三乙酯、PEG-20甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇聚醚-12、甘油基硬脂酸酯柠檬酸酯(glyceryl stearate citrate)、鲸蜡醇磷酸酯、三鲸蜡硬脂醇聚醚-4磷酸酯、三月桂醇聚醚-4磷酸酯、聚甘油甲基葡萄糖二硬脂酸酯(polyglyceryl methylglucosedistearate)、鲸蜡醇磷酸钾、异硬脂醇聚醚-10、聚倍半硬脂酸甘油-2酯、鲸蜡醇聚醚-10、油醇聚醚-20、异鲸蜡醇聚醚-20、硬脂酸甘油酯与下列物质的混合物：鲸蜡醇聚醚-20、鲸蜡醇聚醚-12、鲸蜡硬脂醇和棕榈酸鲸蜡酯、鲸蜡硬脂醇与下列物质的混合物：PEG-20硬脂酸酯、PEG-30硬脂酸酯、PEG-40硬脂酸酯和PEG-100硬脂酸酯。
在另外的实施方式中——其中制剂的油相至少部分由硅氧烷油组成，硅氧烷乳化剂发现有用。在一些实施方式中，硅氧烷乳化剂选自界面活性物质，烷基甲基硅氧烷共聚醇和/或烷基二甲基硅氧烷共聚醇，特别选自由下面的化学结构表征的化合物：
其中X和Y相互独立地选自H和具有1到24个碳原子的支化和未支化的烷基基团、酰基基团和烷氧基基团，p是从0到200的数，q是从1到40的数，而r是1到100的数。在本发明中有用的硅氧烷乳化剂的一些例子包括但不限于二甲基硅氧烷共聚醇(例如，ABIL
B8842、ABIL
B8843、ABILB8847、ABIL
B8851、ABILB8852、ABIL
B8863、ABILB8873和ABIL
B88183，所有这些可以从Th.Goldschmidt AG商业获得)。在本发明中有用的界面活性物质的另外的例子包括鲸蜡二甲基硅氧烷共聚醇(ABIL
EM90)、以及环甲基硅酮二甲基硅氧烷共聚醇(ABIL
EM97)，两者都可以从Th.Goldschmidt AG商业获得。已经证明可用于在本发明中实施方式中有用的各种组合物的另外的乳化剂是月桂醇甲基硅氧烷共聚醇(Dow Corning
5200 Formulation Aid)，其可从Dow Corning Ltd.商购获得。
在本发明优选的实施方式中，用在个人护理组合物(例如，化妆品或护肤制剂)中的乳化剂的总量以如下范围存在：基于制剂的总重量，按重量计从约0.1％到按重量计约10.0％，优选按重量计从约0.5％到约5.0％。然而，本发明不意图被限制于乳化剂和/或共乳化剂的任何具体浓度，因为本发明的各种实施方式具有不同的优选浓度和/或浓度范围。
在一些实施方式中，本发明提够各种形式的乳液，包括皮肤防护霜、皮肤洗液、化妆乳、防晒霜和阳光防护乳。在一些优选的实施方式中，这些组合物包括脂肪、油、蜡和/或其它脂肪物质以及水，和常用于此类配方的一种或多种乳化剂。
除了本发明的化妆清洁洗液和/或清洁霜的液体和稍微更固态的乳液之外，本发明还提供了可喷洒的清洁制剂(“清洁喷雾剂”)，其可用于例如卸妆或用作温和的洗液。此外，这些清洁喷雾剂可用于处理皮肤污点的应用。这些清洁制剂还可用作“漂洗制剂”(即在应用之后从皮肤漂洗掉的产品)。
除了上述成分之外，本发明的各种实施方式包括另外的成分，例如助剂和添加剂，包括但不限于增稠剂、填料、香料、染料、乳化剂、另外的活性成分(例如，维生素和蛋白质)、光防护剂、稳定剂、驱虫剂、醇、自美黑物质、水、盐、抗微生物剂、蛋白酶和/或角质酶等等。实际上，本发明不意图限制于任何具体的成分，只要包含支架和肽的活性成分都被包括在内。可以进一步预期，本发明将可用于许多和各种医疗制剂中。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了适于用作皮肤防护霜、清洁乳、防晒洗剂、营养霜、日霜、晚霜等的化妆品和/或局部皮肤病学制剂。在一些实施方式中，本发明可用作药物(即，药学上的)组合物的成分。在另外的实施方式中，本发明可用于装饰化妆品(例如，彩妆配方)。
在一些特别优选的实施方式中，本发明提供可用于化妆品和/或护肤制品的防晒霜。除了根据本发明的实施方式使用的活性组分之外，在一些实施方式中，这些制剂优选另外包括至少一种宽带滤光剂(broadband filter)和/或至少一种UVA过滤物质和/或至少一种UVB过滤物质和/或至少一种无机颜料。
在仍进一步的实施方式中，本发明提供了个人护理组合物，其具有UV防护成分，但其主要不是防晒剂。例如，在一些实施方式中，UV-A和UV-B过滤物被掺入日霜和/或护发组合物中。
在另外的实施方式中，本发明的个人护理组合物包括化妆活性成分、助剂和/或添加剂，正如通常用于这样的制剂(例如，抗氧化剂、防腐剂、杀菌剂、香料、消泡剂、染料、具有增色作用的颜料、增稠剂、表面活性物、乳化剂、润肤剂、保湿剂和/或湿润剂、脂肪、油、蜡或化妆品或皮肤病学配方的其它常用组分，例如醇、多元醇、聚合物、泡沫稳定剂、电解质、有机溶剂或硅氧烷衍生物)。实际上，可以预期，当适于产品和使用者时，各种化合物将可用于本发明的各种实施方式中。
在仍进一步的实施方式中，防腐剂，例如在食品和饲料应用中的那些，可用于本发明的各种组合物中。下表提供了这类化合物的清单，以及每个化合物的E数。然而，本发明不意图被限于这些具体的防腐剂，因为可以预期，另外的防腐剂将在本发明的各种实施方式中发现有用。
| 在本发明的实施方式中发现有用的食品级防腐剂的例子 | |||
| 200 | 山梨酸 | 227 | 亚硫酸氢钙 |
| 在本发明的实施方式中发现有用的食品级防腐剂的例子 | |||
| 201 | 山梨酸钠 | 228 | 亚硫酸氢钾 |
| 202 | 山梨酸钾 | 230 | 联苯(二苯) |
| 203 | 山梨酸钙 | 231 | 邻苯基苯酚 |
| 210 | 苯甲酸 | 232 | 邻苯基苯酚钠(Sodiumorthophenylphenoxide) |
| 211 | 苯甲酸钠 | 233 | 噻苯咪唑 |
| 212 | 苯甲酸钾 | 235 | 游霉素 |
| 213 | 苯甲酸钙 | 236 | 蚁酸 |
| 214 | 对-羟基苯甲酸乙酯 | 237 | 甲酸钠 |
| 215 | 对-羟基苯甲酸乙酯Na盐 | 238 | 甲酸钙 |
| 216 | 对-羟基苯甲酸正丙酯 | 239 | 六亚甲基四胺 |
| 217 | 对-羟基苯甲酸正丙酯Na盐 | 249 | 亚硝酸钾 |
| 218 | 对-羟基苯甲酸甲酯 | 250 | 亚硝酸钠 |
| 219 | 对-羟基苯甲酸甲酯Na盐 | 251 | 硝酸钠 |
| 220 | 二氧化硫 | 252 | 硝酸钾 |
| 221 | 亚硫酸钠 | 280 | 丙酸 |
| 222 | 亚硫酸氢钠 | 281 | 丙酸钠 |
| 223 | 焦亚硫酸钠 | 282 | 丙酸钙 |
| 224 | 焦亚硫酸钾 | 283 | 丙酸钾 |
| 226 | 亚硫酸钙 | 290 | 二氧化碳 |
可用于各种实施方式的另外的防腐剂包括但不限于二溴二氰基丁烷(2-溴-2-溴甲基戊二腈)、3-碘-2-丙炔基丁基氨基甲酸酯、2-溴-2-硝基丙烷-1，3-二醇、咪唑烷基脲、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、2-氯乙酰胺、氯化苄烷铵、苄醇、以及甲醛供体。可用于本发明的各种实施方式中的进一步的防腐剂包括苯基·羟基烷基醚，特别是被称为“苯氧基乙醇”的化合物，原因在于它们对许多微生物具有杀菌和杀真菌效应。
另外的其它抗微生物剂同样适于本发明的各种实施方式中，包括但不限于2，4，4’-三氯-2’-羟基二苯醚(即IRGASAN
)、1，6-二(4-氯苯基二胍基)己烷(即，CHLORHEXIDIN)、3，4，4’-三氯N-碳酰苯胺、季铵化合物、丁香油、薄荷油、百里香油、柠檬酸三乙酯、FARNESOL
(3，7，11-三甲基-2，6，10-十二烷三烯-1-醇)以及在DE-3740186、DE-3938140、DE-4204321、DE-4229707、DE-4309372、DE-4411664、DE-19541967、DE-19543695、DE-19543696、DE-19547160、DE-19602108、DE-19602110、DE-19602111、DE-19631003、DE-19631004、DE-19634019、DE-4229737、DE-4237081、DE-4324219、DE-4429467、DE-4423410、和DE-19516705--这些都被由此并入作为参考--中描述的活性成分和/或活性成分组合。在仍进-步的实施方式中，碳酸氢钠也被包括在本发明的-些组合物中。然而，本发明不意图受限于任何具体的抗微生物剂以及抗微生物剂的组合，因为具有这种效应的各种化合物可用于本发明的各种实施方式中。
在本发明的个人护理组合物的另外的实施方式中，化合物例如抗刺激剂和/或抗炎性活性物被包括在内。在-些实施方式中，鲨肝醇(a-十八烷基甘油醚)、鲨油醇(a-9-十八烯基甘油醚)、鲛肝醇(a-十六烷基甘油醚)、红没药醇和/或泛酰醇被包括在内。然而，本发明不意图被限制于掺入任何具体的抗刺激剂(-种或多种)和/或抗炎性活性物(-种或多种)，因为适于这类应用的各种化合物可用于本发明。
在本发明更进-步的实施方式中，抗氧化剂被掺入个人护理组合物中。可以预期，任何合适的抗氧化剂将可用于本发明的个人护理组合物中。合适的抗氧化剂包括但不限于氨基酸(例如，甘氨酸、组氨酸、酪氨酸和色氨酸)及其衍生物、咪唑(例如，咪唑丙烯酸)及其衍生物、肽(例如，D，L-肌肽、D-肌肽和L-肌肽)及其衍生物(例如，鹅肌肽)、类胡罗卜素、胡罗卜素(例如，α-胡罗卜素、β-胡罗卜素和γ-番茄红素)及其衍生物、绿原酸及其衍生物、金硫葡糖、丙基硫尿嘧啶和其它硫醇(例如，硫氧还蛋白、谷胱甘肽、半胱氨酸、胱氨酸、胱胺以及它们的糖基酯、N-乙酰酯、甲酯、乙酯、丙酯、戊酯、丁基和十二烷基酯、棕榈酰酯、油基酯、g-亚麻酰酯、胆甾烯基酯和甘油酯)及其盐、硫代二丙酸二月桂酯、硫代二丙酸双硬脂基酯、硫代二丙酸及其衍生物(例如，酯、醚、肽、脂、核苷酸、核苷和盐)、以及非常小的耐受剂量(例如，通常为pmol/kg到mmol/kg)的亚砜胺化合物(sulfoximine compounds)(例如丁胱亚磺酰亚胺、同型半胱氨酸亚磺酰亚胺、丁胱砜、戊胱、己胱和庚胱亚磺酰亚胺)、螯合剂(例如，α-羟基脂肪酸、棕榈酸、肌醇六磷酸和乳铁蛋白)、α-羟基酸(例如，柠檬酸、乳酸、和马来酸)、腐殖酸、胆汁酸、胆汁抽提物、胆红素、胆绿素、EDTA、EGTA及其衍生物、不饱和脂肪酸及其衍生物(例如，亚麻酸、亚油酸、油酸)、叶酸及其衍生物、亚糠基山梨醇及其衍生物、泛醌和泛醌醇及其衍生物、维生素C及其衍生物(例如，抗坏血酸磷酸钠(sodium ascorbyl phosphate)、棕榈酸抗坏血酸酯、抗坏血酸磷酸镁、和乙酸抗坏血酸酯)、生育酚和衍生物(例如，维生素E乙酸酯)、安息香树脂的松柏基苯甲酸酯、阿魏酸、亚糠基葡萄糖醇、肌肽、丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚、去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiacic acid)、去甲二氢愈创木酸、三羟基苯丁酮、尿酸及其衍生物、甘露糖及其衍生物、锌及其衍生物(例如，ZnO、ZnSO4)、硒及其衍生物(例如，硒代甲硫氨酸)、芪及其衍生物(例如，氧化芪、反式-氧化芪)以及它们的具有所述活性成分的衍生物(例如，盐、酯、醚、糖、核苷酸、核苷、肽和脂类)，所述活性成分适于本发明的特定实施方式(一种或多种)的目标用途。
在-些实施方式中，本发明的组合物中的一种或多种抗氧化剂的浓度优选为基于制剂的总重量按重量计从约0.001％到约30％，特别优选按重量计从约0.05％到约20％，以及更优选按重量计从约1％到约10％。在另外的实施方式中--其中维生素E和/或其衍生物被用作抗氧化剂，优选的范围为按重量计从约0.001至约10％，基于配方的总重量。然而，本发明不意图受限于任何具体的抗氧化剂浓度，因为各种浓度将可用于本发明的各种实施方式中。
在仍另外的实施方式中，本发明提供适于用作除臭剂和/或止汗药的制剂。可以预期，在这类制剂中通常有用的任何活性成分也将可用于本发明的各种实施方式。在这类制剂中通常使用的另外的成分也可用于本发明的各种实施方式。此类活性剂和非活性化合物的例子包括但不限于气味掩蔽剂(例如，香料)、气味吸收剂(例如，在DE-P4009347中描述的页硅酸盐)；以及蒙脱石、高岭石、伊利石、贝得石、绿脱石、皂石、锂蒙脱石、膨润土、绿土和蓖麻油酸的锌盐。在本发明的一些实施方式中，在这类制剂中的活性成分(即一种或多种化合物)的范围优选为基于所述制剂的总重量按重量计从约0.001％到约30％，更优选按重量计从约0.05％到约20％，以及最特别按重量计从约1％到约10％。
在本发明的一些实施方式中，水相具有凝胶特征，其除了有效浓度的化合物和溶剂(合适即可)之外，优选包括水，进一步的有机和/或无机增稠剂、和/或水胶体。
在一些实施方式中，无机增稠剂选自改性的、未改性的、天然存在的和合成的页硅酸盐。尽管通常优选使用纯组分，但在一些实施方式中，不同的改性和/或未改性的页硅酸盐的混合物可用于本发明的各种实施方式中。如本领域通常所知，页硅酸盐是硅酸盐和硅铝酸盐，其中硅酸盐或硅铝酸盐单元通过三个Si-O或Al-O键连接在一起，并形成波状薄片或层状结构。第四个Si-O或Al-O化合价被阳离子饱和。相对弱的静电相互作用(例如氢桥键)存在于各个层之间。该层状结构主要由强的共价键限定。片状硅酸盐的化学计量对于纯的硅酸盐结构是(Si2O5 2-)而对于硅铝酸盐是(AlmSi2- mO5 (2+m)-)，其中“m”是零以上2以下的数。在一些实施方式中--其中在不存在纯硅酸盐的情况下存在硅铝酸盐，被Al3+取代的每一个Si4+基团需要另一个单独带正电的氧离子来中和电荷。电荷平衡优选由H+、碱金属离子或碱土金属离子平衡。在可选的实施方式中，铝被用作相反离子。相比于硅铝酸盐，这些化合物被称为“硅酸铝”。“硅铝酸铝(Aluminum alumosilicate)”——其中铝以硅酸盐网络和作为相反离子存在，也可用于本发明的实施方式中。
页硅酸盐在本领域中是熟知的(例如，参见Hollemann et al.，Lehrbuch der Anorganischen Chemie[Textbook of Inorganic Chemistry]，91st-100th Ed.，Walter deGruyter-Verlag[1985]；Remy，Lehrbuch der Anorganischen Chemie，12th Ed.，Akademische Verlagsgesellschaft，Leipzig[1965])。蒙脱石的层状结构也是已知的(见，Rmpps Chemie-Lexikon，Franckh’sche Verlagshandlung，W.Keller & Co.，Stuttgart，8th Ed.，[1985]，p.2668 f)。页硅酸盐的例子包括下列(蒙脱石是包含天然存在的膨润土的主要矿物)；
蒙脱石 Na0.33((Al1.67Mg0.33)(OH)2(Si4O10))
经常简化为： Al2O3 *4SiO2 *H2O*nH2O or
Al2[(OH)2/Si4O10]·n H2O
高岭石 Al2(OH)4(Si2O5)
伊利石 (K，H3O)y(Mg3(OH)2(Si4-yAlyO10))或
(K，H3O)y(Al2(OH)2(Si4-yAlyO10))
其中y＝0.7-0.9
贝得石 (Ca，Na)0.3(Al2(OH)2(Al0.5Si3.5O10))
绿脱石 Na0.33(Fe2(OH)2(Al0.33Si3.67O10))
皂石 (Ca，Na)0.33((Mg，Fe)3(OH)2(Al0.33Si3.67O10))
锂蒙脱石 Na0.33((Mg，Li)3(OH，F)2(Si4O10))
在一些优选的实施方式中，无机凝胶形成剂(gel former)可用于本发明中，包括但不限于硅酸铝，例如蒙脱石(膨润土、锂蒙脱石和它们的衍生物，例如季铵盐-18膨润土、季铵盐-18锂蒙脱石、stearalkonium膨润土和stearalkonium锂蒙脱石)，以及硅酸镁铝(VEEGUM
级)，和硅酸钠镁(LAPONITE
级)。
蒙脱石表示一类双八面体的绿土粘土矿物，并且是在水中膨胀但不变成塑性的团块。由于水(以2-7倍的量)和其它物质例如诸如醇、乙二醇、吡啶、甲基吡啶、铵化合物、羟基-铝硅酸盐离子等等的可逆掺入，在蒙脱石的三层结构中的层包(layer packet)可以膨胀。上面给出的化学式仅提供了该化学式的近似化学式，因为蒙脱石具有巨大的离子交换能力。例如，Al可以被Mg、Fe2+、Fe3+、Zn、Pb(例如，来自废水中的有害物质)、Cr、Cu和其它元素取代。所得到的八面体层的负电荷通过层间位置中存在的阳离子而被补偿，阳离子具体而言是Na+(即，蒙脱石钠)和Ca2 +(即蒙脱石钙，仅以非常小的程度膨胀的化合物)。
在可选的实施方式中，合成的硅酸镁和/或镁基膨润土可用于本发明中，包括但不限于商业可得的化合物，例如OPTIGEL
(Süd-Chemie)。如上所述，在一些实施方式中，硅酸铝，例如商业可得的VEEGUM
(R.T.Vanderbilt Comp.，Inc)，可用于本发明中。各种在本发明的各种实施方式中有用的VEEGUM
等级被提供如下。
VEEGUM
等级
| 常规等级 | HV | K | HS | S-728 |
| SiO2MgOAl2O3Fe2O3CaONa2OK2O灰化损失 | 55.513.08.91.02.02.11.311.1 | 56.913.010.30.82.02.81.312.6 | 64.75.414.81.51.12.21.97.6 | 69.02.914.71.81.32.20.45.5 | 65.33.317.00.71.33.80.27.5 |
上述产品在水中膨胀，形成粘性凝胶，其具有碱性反应。蒙脱石或膨润土的亲有机化(organophilization)(层间阳离子与季烷基铵离子的交换)产生产物(皂土)，其优选用于有机溶剂分散体、油、脂肪、油膏、油墨、表面涂层和用在清洁剂中。
BENTONE
是各种中性和化学惰性的胶凝剂的商品名，其由长链有机铵盐和特异类型的蒙脱石构建而得。BENTONE胶凝剂在有机介质中溶胀，这导致该介质也溶胀。所述凝胶对稀酸和稀碱具有耐性，尽管它们在与强酸和强碱长时间接触后部分失去胶凝性能。因为它们的亲有机特性，BENTONE
胶凝剂用水仅仅润湿都是有困难的。存在各种商业可得的BENTONE
胶凝剂等级，包括由Kronos Titan以下述名称出售的那些：BENTONE
27，一种有机改性的蒙脱石；BENTONE
34(二甲基二辛基铵膨润土；根据美国专利2,531,427制备，该专利被引入于此作为参考，因为它的亲脂基团，其在亲脂介质中比在水中更容易膨胀)；BENTONE
38，一种有机改性的蒙脱石，可以奶油色到白色的粉末获得；BENTONE
LT，纯化的粘土矿物质；BENTONE
Gel MIO，一种有机改性的蒙脱石，其以在矿物油(SUS-71)(10％膨润土、86.7％矿物油和3.3％的湿润剂)中的极细悬液供应；BENTONEGel IPM，一种有机改性的蒙脱石，其悬浮在十四烷酸异丙酯中(10％膨润土、86.7％十四烷酸异丙酯、3.3％湿润剂)；BENTONE
Gel CAO，一种有机改性的蒙脱石，其在蓖麻油中被吸收(10％膨润土、86.7％蓖麻油和3.3％湿润剂)；BENTONEC Gel Lantrol，一种有机改性的蒙脱石，其意图以膏的形式用于进一步的加工，特别是用于化妆品组合物的制备；10％膨润土、64.9 LANTROL
(羊毛蜡油)、22.0十四烷酸异丙酯、3.0湿润剂和0.1对羟基苯甲酸丙酯；BENTONE
Gel Lan I，一种在羊毛蜡USP和棕榈酸异丙酯的混合物中的10％强度的BENTONE
27膏；BENTONE
Gel Lan II，一种在纯液体羊毛蜡中的膨润土膏；BENTONE
Gel NV，一种在邻苯二甲酸二丁酯中的15％强度的BENTONE
27膏；BENTONEGel OMS，一种在Shellsol T.中的膨润土膏；BENTONE
Gel OMS25，一种在异链烷烃(IDOPAR
H)中的膨润土膏；以及BENTONE
Gel IPP，一种在棕榈酸异丙酯中的膨润土膏。
“水胶体(hydrocolloid)”是更准确的名称“亲水胶体(hydrophillic colloid)”的技术缩写。水胶体是大分子，其具有大的线性结构和分子间的相互作用力，该相互作用力允许在单独分子之间的次价键和主价键形成网状结构。一些水胶体是水溶性的天然或合成的聚合物，其在含水体系中形成凝胶或粘性溶液。通过结合水分子(水合)或通过将水吸收和包裹入它们的交织的大分子中，同时限制水的运动，这些化合物增加水的粘度。这些可溶于水的聚合物代表一大类天然和合成的聚合物，其在化学上非常不同，但在它们在水或含水溶液中的溶解性上具有共同的特征。其先决条件是这些聚合物具有足以在水中溶解的许多亲水基团，并且这些聚合物不大量交联。这些亲水基团可以本质上是非离子的、阴离子的或阳离子，例如下列：
在一些优选的实施方式中，化妆品和皮肤病学相关水胶体的组被分成下列几组：有机天然化合物(例如，琼脂、角叉菜、黄蓍胶、阿拉伯胶、藻酸盐、果胶、多糖类、瓜耳粉(guar flour)、角豆粉(carob bean flour)、淀粉、糊精、明胶和酪蛋白)；改性的有机天然物(例如，羧甲基纤维素和其它纤维素醚、羟乙基纤维素和羟丙基纤维素和微晶纤维素)；完全合成的有机化合物(例如，聚丙烯酸和聚甲基丙烯酸化合物、乙烯聚合物、聚羧酸、聚醚、聚酰亚胺(polyimine)、聚酰胺和聚氨酯)；以及无机化合物(例如，聚硅酸，粘土矿物质，例如蒙脱石、沸石和硅石)。
在可选的实施方式中，乙基纤维素在本发明的组合物中可用作稳定剂。乙基纤维素由下面的结构表征。在该结构中，R是乙基基团或氢原子。
在一些优选的实施方式中，乙基纤维素中的乙基化程度从约2.0到约3.0，相应于约40％到约50％，并且更优选约48.0％到约49.5％的乙基化。平均分子量被优选选择，使得在25℃下在80份甲苯和20份乙醇的混合物中大约5％强度的溶液的粘度为3到110mPas，并且更优选9到11mPas。在一些特别优选的实施方式中，平均摩尔质量为从约100,000g/mol到约400,000g/mol。在一些优选的实施方式中，在本发明的组合物中乙基纤维素的浓度为基于制剂的总重量按重量计从约0.1％到约10％。各种乙基纤维素可用于本发明中，包括但不限于商购可得的那些(例如，ETHOCEL
Standard 10 Premium；Dow Chemicals)。
在另外的实施方式中，微晶纤维素可用作本发明组合物中的水胶体。各种微晶纤维素制剂可用于本发明中，包括但不限于商购可得的那些(例如，AVICEL
，例如AVICELRC-591，以及AVICELRC/CL；AVICEL
CE-15；和AVICEL
500；FMC Corporation Food and Pharmaceutical Products)。在一些特别优选的实施方式中，AVICEL
RC-591(一种改性的微晶纤维素，其由89％微晶纤维素和11％的羧甲基纤维素纳制成)可用于本发明中。
可用于本发明中的另外的水胶体包括甲基纤维素(即纤维素的甲基酯)。这些化合物由下面的结构式表征，其中R可以是氢或甲基基团。
纤维素混合醚(cellulose mixed ether)(通常称为甲基纤维素，其除了占主要量的甲基基团之外，还含有2-羟乙基、2-羟丙基或2-羟丁基基团)也可用于本发明的一些实施方式中。在一些优选的实施方式中，羟丙基甲基-纤维素(例如，METHOCEL
E4M；Dow Chemical Co.)可用于本发明中。
在又进一步的实施方式中，羧甲基纤维素钠(即，纤维素的乙二醇醚的钠盐，对于该钠盐，上面的结构式中的R可以是氢和/或CH2-COONa)可用于本发明中。在一些优选的实施方式中，羧甲基纤维素钠，有时也称为“纤维素胶”(例如，NATROSOL
Plus 330 CS；Aqualon)，发现可用于本发明中。
在另外的实施方式中，黄原胶(xanthan)(CAS No.11138-66-2)，(即黄原胶(xanthan gum))可用于本发明中，黄原胶是阴离子杂多糖，其通常由玉米糖发酵形成并作为钾盐进行分离。它在需氧条件下由野油菜黄单孢菌(Xanthomonascampestris)和一些其它物种产生，并具有2×106到24×106的分子量。黄原胶由具有含侧链的纤维素的链形成。该亚组的结构由葡萄糖、甘露糖、葡糖醛酸、乙酸酯和丙酮酸酯组成。丙酮酸酯单元的数目决定黄原胶的粘度。
在仍进一步的实施方式中，角叉菜被用作本发明的组合物中的凝胶形成剂。该化合物是来自北大西洋红藻(真红藻纲(Florideae)；皱波角叉菜(Chondruscrispus)和星芒杉藻(Gigartina stellata))的抽提物，其具有类似琼脂结构的结构。术语“角叉菜(carrageen)”被频繁用于指干燥的藻类产品，而“角叉菜聚糖(carrageenan)”被用于指其抽提物。从藻类的热水抽提物中沉淀的角叉菜是无色到沙色的粉末，其分子量范围为从约100,000到约800,000，且硫酸盐含量为约25％。非常容易在温水中溶解的角叉菜，在冷却后形成触变胶体，即使水含量为95-98％亦是如此。该胶体的硬度受角叉菜的双螺旋结构影响。
在角叉菜聚糖的情况下，三种主要成分是不同的。形成凝胶的“κ部分”由D-半乳糖-4-硫酸盐和3，6-无水-α-D-半乳糖组成，其在1，3-和1，4位置具有可选的糖苷键(相比之下，琼酯含有3，6-无水-α-L-半乳糖)。非胶凝“λ部分”由1，3-糖苷键连接的D-半乳糖-2-硫酸盐和1，4-键合的D-半乳糖-2，6-二硫酸盐基团组成，并且其在冷水中是容易溶解的。最后，由在1，3键中的D-半乳糖-4-硫酸盐和在1，4键中的3，6-无水-α-D-半乳糖-2-硫酸盐组成的“ι-角叉菜胶”不但可溶于水并且还形成凝胶。存在的任何阳离子(K+、NH4 +、Na+、Mg2+、Ca2+)的性质也影响角叉菜的溶解度。
在仍另外的实施方式中，脱乙酰壳多糖(即，部分脱乙酰化的壳多糖)可用于本发明的各种组合物中。脱乙酰壳多糖具有成膜性质，并且特征在于在皮肤上具有柔滑感。对于一些使用的一个缺点是其在施用期间在皮肤上临时(通常)出现严重的发粘现象。由于该发粘现象，一些制剂不被消费者所接受。然而，脱乙酰壳多糖可用于一些制剂中，包括护发组合物，因为它在增稠和/或稳定以及改善聚合膜的粘着性和防水性方面比壳多糖更好。脱乙酰壳多糖的使用对于个人护理领域的技术人员而言是熟知的(参见，例如，Fiedler，Lexikon der Hilfsstoffe für Pharmazie，Kosmetik und angrenzende Gebiete，[Lexikon of auxiliaries for pharmacy，cosmetics and related fields]，3rd edition，Editio Cantor，Aulendorf，[1989]，p.293)。脱乙酰壳多糖由下面的结构式表征：
其中n取可达约10000的值，而X是乙酰基或氢。通过壳多糖的脱乙酰化和部分解聚(水解)，形成脱乙酰壳多糖，壳多糖由下面的结构式表征：
壳多糖是节肢动物(例如，昆虫、螃蟹和蜘蛛)的必要成分，并且还在其它生物体(例如软体动物、藻类、和真菌)的结缔和/或支持组织中发现。在约pH＜6的区域，脱乙酰壳多糖带正电，并且在该范围中在含水体系中也是可溶的。它与阴离子原材料不相容。由于该原因，为了制备含脱乙酰壳多糖的水包油乳液，非离子型乳化剂的使用是合适的(参见，例如EP776657)。在一些优选的实施方式中，本发明的组合物含有至少一种脱乙酰化程度至少约＞25％的脱乙酰壳多糖，并且更优选地，从约55％到约99％的范围(如通过1H-NMR所测定)。在一些实施方式中，分子量在约10,000至约1,000,000之间的脱乙酰壳多糖，特别是分子量在100,000至1,000,000之间(利用凝胶渗透层析测定)的脱乙酰壳多糖,可用于本发明。
在仍进一步的实施方式中，聚丙烯酸酯可用作本发明的组合物中的胶凝剂。合适的聚丙烯酸酯包括但不限于丙烯酸酯-丙烯酸烷酯共聚物，特别是选自卡波姆或CARBOPOL
共聚物(B.F.Goodrich Co.)的那些。具体而言，可用于本发明的一些实施方式的丙烯酸酯-丙烯酸烷酯共聚物具有下面的结构：
其中，R’是长链的烷基基团，而x和y表示代表每一种共聚单体各自的化学计量比例的数目。
在一些实施方式中，丙烯酸酯共聚物和/或丙烯酸酯-丙烯酸烷酯共聚物，包括但不限于商业可得的那些(例如，CARBOPOL
1382、CARBOPOL
981、和CARBOPOL
5984；B.F.Goodrich Co.，以及具体而言，来自CARBOPOL grades980、981、1382、2984、5984和Carbomer2001的聚丙烯酸酯)。在另外的实施方式中，丙烯酸C10-30-烷酯和丙烯酸的一种或多种单体的共聚物、甲基丙烯酸或其酯的共聚物可用于本发明的一些实施方式中，甲基丙烯酸或其酯与蔗糖的烯丙醚或季戊四醇的烯丙醚交联。
INCI名为“丙烯酸酯类/丙烯酸C10-30-烷酯交聚物”的化合物也可用于本发明的一些实施方式中。在一些实施方式中，商购可得的聚合物(例如，PEMULEN
TR1和PEMULEN
TR2；B.F.Goodrich Co.)可用于本发明的一些实施方式中，尽管本发明不意图限制于任何含具体的丙烯酸酯的组合物。
在另外的实施方式中，INCI名为“丙烯酰二甲基牛磺酸铵/乙烯基吡咯烷酮共聚物(ammonium acryloyldimethyltaurates/vinylpyrrolidone copolymers)”的化合物可用于本发明中。这些丙烯酰二甲基牛磺酸铵/乙烯基吡咯烷酮共聚物具有经验式[C7H16N2SO4]n[C6H9NO]m，其与下面的结构相对应：
该化合物的优选种类以注册号(Registry numbers)58374-69-9、13162-05-5和88-12-0列在化学文摘(Chemical Abstracts)中，并且是商购可得的(例如，ARISTOFLEX
；Clariant GmbH)。然而，本发明不意图限制于任何特定的种类。在本发明的另外的实施方式中，含有丙烯酰二甲基牛磺酸盐(或酯)的共聚物/交聚物(例如，SIMUGEL
EG和SIMUGEL
EG；Seppic S.A.)可用于本方面的一些组合物中。
可用于本发明的另外的完全合成的水胶体包括但不限于阴离子聚氨酯，其在水中是可溶的或可分散的，并且其从下列物质可有利地获得：
Aa)至少一种化合物，该化合物的每个分子含有两个或多个活性氢原子，
Ab)至少一种含有酸或盐基团的二醇，和
Ac)至少一种二异氰酸酯。
在一些优选的实施方式中，具体而言，成分Aa)是二醇、氨基醇、二胺、聚酯醇(polyesterol)、聚醚醇(polyetherol)——每种情况下都具有可达3000的数均分子量，或它们的混合物，其中高达3mol％的所述化合物可以被三醇或三胺替换。优选二醇和聚酯二醇。具体而言，成分Aa)包括基于成分Aa)的总重量按重量计至少50％的聚酯二醇。合适的聚酯二醇是所有通常用于制备聚氨酯的那些，具体而言是下列物质的反应产物：苯二甲酸和二甘醇、间苯二甲酸和1，4-丁二醇、间苯二甲酸/己二酸和1，6-己二醇、以及己二酸和乙二醇或者5-NaSO3-间苯二甲酸、苯二甲酸、己二酸和1，6-己二醇的反应产物。
可用于本发明的一些实施方式中的二醇的例子包括但不限于乙二醇、丙二醇、丁二醇、新戊二醇、聚醚醇(例如，分子量可达3000的聚乙二醇)、环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物--平均分子量可达3000、以及环氧乙烷、环氧丙烷和环氧丁烷的嵌段共聚物--其含有随机分布方式或嵌段形式的共聚化环氧烷单元。优选乙二醇、新戊二醇、二甘醇、三甘醇、四甘醇、五甘醇或六甘醇。有用的其它二醇包括聚(α-羟基羧酸)二醇。
可用于本发明的一些实施方式中的合适的氨基醇包括但不限于2-氨基乙醇、2-(N-甲氨基)乙醇、3-氨基丙醇和4-氨基丁醇。
在一些实施方式中，二胺例如乙二胺、丙二胺、1，4-二氨基丁烷、1，-二氨基己烷以及α，ω-二胺——可以通过用氨对聚环氧烷烃进行氨化加以制备的，可用于本发明的一些组合物中。
具体而言，成分Ab)是二羟甲基丙酸或具有下式的化合物：
其中RR在每种情况下是C2-C18-亚烷基基团，而Me是Na或K。
具体而言，成分Ac)是六亚甲基二异氰酸酯、异佛尔酮二异氰酸酯、甲基二苯基异氰酸酯(MDI)和/或甲苯二异氰酸酯。
在一些实施方式中，通过在70到130℃的温度下，在惰性溶剂中，在惰性气体气氛下，使组Aa)和Ab)的化合物与组Ac)的化合物反应，获得聚氨酯。为了制备具有相对高的分子量的聚氨酯，在合适的情况下，该反应可以在增链剂存在下进行。如在聚氨酯的制备中所常见的，以0.8至1.1∶1的摩尔比有利地使用成分[(Aa)+(Ab)]∶Ac。聚氨酯的酸值由成分(Aa)和(Ab)的混合物中的成分(Ab)的化合物的组成和浓度决定。
在一些实施方式中，根据H.Fikentscher，聚氨酯的K值(在25℃和pH7下，在按重量计0.1％浓度的N-甲基吡咯烷酮溶液中测定)为从约15到约100，并优选约25到约50。K值(即，“特性粘度”)是易于利用聚合物溶液的粘度测量而确定的参数，并从而经常用在工业部分中，以表征聚合物。可用于本方面的一些实施方式中的含酸性基团的聚氨酯，包括但不限于，在部分或完全中和之后、在没有乳化剂帮助的情况下可溶于水或可分散的聚氨酯。在水中，聚氨酯的盐通常比未中和的聚氨酯具有更好的溶解度或可分散性。可用于中和聚氨酯的碱包括的碱金属的碱(例如，氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、苏打水、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸氢钾)和碱土金属的碱(例如，氢氧化钙、氧化钙、氢氧化镁或碳酸镁、以及氨水和胺)。在一些实施方式中，2-氨基-2-甲基丙醇、二乙氨基丙胺和三异丙醇胺发现在含酸性基团的聚氨酯的中和中特别有用。在另外的实施方式中，使用两种或多种碱的混合物(例如，氢氧化钠溶液和三异丙醇胺的混合物)，进行含酸性基团的聚氨酯的中和。根据目标用途，中和是部分的(例如，约20％到约40％)或完全的(即，100％)。这些聚合物和它们的制备更详细地描述于DE-A-4225045，其被引入于此作为参考。
B.下列物质的水溶性或可分散的阳离子聚氨酯和聚脲：
Ba)至少一种二异氰酸酯，其可以已经预先与一种或多种化合物反应，所述化合物的每一分子含有两个或更多个活性氢原子；和
Bb)至少一种二醇、伯氨基醇或仲氨基醇、伯二胺或仲二胺或者伯三胺或仲三胺，其具有一个或多个叔氨基氮原子、季氨基氮原子或质子化的叔氨基氮原子。
优选的二异氰酸酯如上在A)下给出。具有两个或更多个活性氢原子的化合物是二醇、氨基醇、二胺、聚酯醇、聚酰胺二胺和聚醚醇。该类型合适的化合物如上在A)下给出。
如上在A)下所述，制备聚氨酯。通过质子化(例如，用羧酸质子化，如乳酸)，或通过季铵化作用(例如，用烷化剂，如C1-C4-烷基卤化物)或硫酸盐，带电的阳离子基团可以在聚脲中从存在的叔氨基氮原子产生。此类烷化剂的例子包括但不限于乙基氯、乙基溴、甲基氯、甲基溴、硫酸二甲酯和硫酸二乙酯。这些聚合物和它们的制备在DE-A-4241118中更详细地加以描述，其被引入于此作为参考。
C.含下列物质的羧酸酯基团的线性聚氨酯：
Ca)下式的2，2-羟甲基取代的羧酸：
其中，RR’是氢原子或C1-C20-烷基基团，其以这样的量使用，该量满足在聚氨酯中，每g聚氨酯存在约0.35到约2.25毫当量的羧基基团，
Cb)基于聚氨酯的重量，按重量计约10％到约90％的一种或多种具有不超过两个活性氢原子的有机化合物，和
Cc)一种或更多种有机异二氰酸酯。
在一些优选的实施方式中，在聚氨酯中存在的羧基基团最终用合适的碱至少部分中和。这些聚合物和它们的制备在EP-A-619111中更详细地加以描述，其被引入于此作为参考。
D.三羧酸或四羧酸的酸酐和二醇、二胺或氨基醇的含羧基缩聚产物(聚酯、聚酰胺或聚酯酰胺)。这些聚合物和它们的制备在DE-A-4224761中更详细地加以描述，其被引入于此作为参考。
E.聚丙烯酸酯和聚甲基丙烯酸酯，如在DE-A-4314305、3627970和2917504中更详细地加以描述，其都被引入于此作为参考。
在本发明的一些实施方式中使用的聚合物具有从约15到约100的K值，并且更优选从约25到约50。该聚合物在组合物中通常以基于组合物的总重量按重量计从约0.2％到约20％的量存在。盐以有效改善所述聚合物的可交换性的量被使用。盐通常以基于所述组合物的总重量按重量计从约0.02％到约10％的量存在，更优选按重量计从约0.05％到约5％，以及特别地，按重量计从约0.1％到约3％。
在本发明的个人护理组合物的一些实施方式中的一种或更多种水胶体的总量为按重量计在约5％以下，优选按重量计在约0.05％到约3％之间，并且更优选按重量计在约0.1％到约1.0％之间，基于制剂的总量。
在一些另外的实施方式中，界面和/或表面活性剂被包括在本发明的一些个人护理组合物中，包括但不限于阳离子乳化剂(例如季铵表面活性剂)。
季铵表面活性剂含有至少一个共价连接到4-烷基或芳基基团的N原子。无论pH如何，这都导致正电荷。烷基甜菜碱、烷基氨基丙基甜菜碱和烷基氨基丙基羟基磺基甜菜碱(alkylamidopropylhydroxysultaine)是可用于本发明的一些实施方式的季铵表面活性剂的例子。
在本发明的一些实施方式中提供的阳离子表面活性剂还包括但不限于季铵化合物，具体而言，苄基三烷基氯化铵或溴化铵(例如，苄基二甲基硬酯酰氯化铵)、烷基三烷基铵盐(例如，鲸蜡基三甲基氯化铵或溴化铵)、烷基二甲基羟乙基氯化铵或溴化铵、二烷基二甲基氯化铵或溴化铵、烷基氨基乙基三甲基铵醚硫酸盐、烷基吡啶盐(例如，十二烷基或十六烷基吡啶氯化物)、咪唑啉衍生物、和含阳离子特性的化合物，例如氧化胺(如烷基二甲胺氧化物或烷基氨基乙基二甲胺氧化物)。在一些优选的实施方式中，鲸蜡基三甲基铵盐可用于本发明的一些个人护理组合物中。
在另外的实施方式中，阳离子聚合物(例如，JAGUARC162[羟丙基瓜耳胶羟丙基三甲基氯化铵(hydroxypropyl guar hydroxypropyltrimonium chloride)])、改性的硅酸镁铝(例如，季铵盐(quaternium)-18-锂蒙脱石)--其是商购可得的(例如，BENTONE
38；Rheox)、和/或stearalkonium锂蒙脱石--其是商购可得的(例如，SOFTISAN
gel；Hüls AG)可用于本发明的一些个人护理组合物中。然而，本发明不意图限制于任何特定的阳离子聚合物。
在一些仍进一步的实施方式中，本发明的一些组合物包括油增稠剂，以改善乳液的触觉性能。优选的油增稠剂包括但不限于其它固体(例如，AEROSIL型的疏水性氧化硅，其可从Degussa AG获得)。有利的AEROSIL
氧化物级的例子包括AEROSIL
OX50、AEROSIL
130、AEROSIL
150、AEROSIL
200、AEROSIL
300、AEROSIL
380、AEROSIL
MOX80、AEROSIL
MOX170、AEROSIL
COK84、AEROSIL
R202、AEROSIL
R805、AEROSIL
R812、AEROSIL
R972、AEROSILR974和AEROSIL
R976。
在一些另外的实施方式中，本发明的一些个人护理组合物包括至少一种“金属皂”(即，高级脂肪酸的盐，除了碱金属的盐之外)，其作为油增稠剂起作用。此类金属皂的例子包括但不限于硬脂酸铝、硬脂酸锌和/或硬脂酸镁。
在一些进一步的实施方式中，一些个人护理组合物包括至少一种两性和/或两性离子表面活性剂(例如，罗马甘菊提取物(cocamidopropylbetain))和/或保湿剂(例如，甜菜碱)。在本发明的这类实施方式中发现有用的两性表面活性剂包括但不限于酰基/二烷基乙二胺(例如，酰基两性乙酸钠(sodium acylamphoacetate))、酰基两性二丙酸二钠(disodium acylamphodipropionate)、烷基两性二乙酸二钠(disodium alkylamphodiacetate)、酰基两性羟丙基磺酸钠(sodiumacylamphohydroxypropylsulfonate)、酰基两性二乙酸二钠(disodiumacylamphodiacetate)、酰基两性丙酸钠(sodium acylamphopropionate)、N-烷基氨基酸例如氨基丙基烷基谷氨酰胺、烷氨基丙酸、烷基酰亚胺二丙酸钠(sodiumalkylimidodipropionate)，以及两性羧基氨基乙酸月桂酯(lauroamphocarboxyglycinate)。
在一些实施方式中，表面或界面活性物(一种或多种化合物)在制剂中的量优选按重量计在约0.001％至约30％之间，并且更优选按重量计在约0.05％至约20％之间，最优选按重量计在约1％至约10％之间，基于制剂的总量。
在一些另外的实施方式中，活性成分(一种或多种化合物)包括至少一种亲脂活性成分。在一些实施方式中，这些亲脂活性成分选自乙酰基水杨酸、阿托品、薁、氢化可的松及其衍生物(例如，氢化可的松-17-戊酸酯)、维生素B、维生素D、维生素B1、维生素B12、维生素D1、类视黄醇、没药醇、不饱和脂肪酸(例如，必需脂肪酸，也经常称为“维生素F”)、γ-亚麻酸、油酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸及其衍生物、氯霉素、咖啡因、前列腺素、百里酚、樟脑、植物或动物来源的抽提物或其它产品(例如，月见草油、琉璃苣油、或红醋栗子油(currantseed oil)、鱼油、鳕鱼肝油)、和神经酰胺和类神经酰胺化合物等等。在一些实施方式中，活性成分(一种或多种)是再加脂物质(例如，purcellin oil、EUCERIT
和/或NEROCERIT
)。
在一些又进一步的实施方式中，活性成分(一种或多种)包括NO合酶抑制剂。这些实施方式在与内在或外在的皮肤老化相关的预兆和症状的治疗和/或预防中，以及在与紫外照射对皮肤的有害影响相关的治疗和/或预防中特别有用。在一些特别优选的实施方式中，NO合酶抑制剂是硝基精氨酸。
在又一些实施方式中，活性成分(一种或多种)是儿茶素、儿茶素的胆汁酯、和/或来自植物或具有儿茶素或儿茶素的胆汁酯内含物的植物部分(例如，山茶(Theaceae)植物科的叶子，特别是中国茶(Camellia sinensis)种[绿茶]的叶子)的含水或有机抽提物。它们的典型成分(例如，多酚或儿茶素、咖啡因、维生素、糖类、矿物质、氨基酸、脂类)在本发明的一些实施方式中特别有用。
在一些实施方式中，儿茶素可用于本发明中。儿茶素是一组被认为是氢化的黄酮或花色素的化合物，并且是“儿茶素”的衍生物(儿茶酚、3，3’，4’，5，7-黄戊醇(flavanpentol)、2-(3，4-二羟基苯基)苯并二氢吡喃-3，5，7-三醇)。表儿茶素((2R，3R)-3，3’，4’，5，7-黄戊醇)也是可用于本发明的一些实施方式的活性成分。
在仍另外的实施方式中，含有儿茶素内含物的植物抽提物，特别是绿茶的抽提物(例如，来自茶属(Camellia)的植物叶子的抽提物，尤其是用作茶的那些，例如中国茶(C.sinenis)、普洱茶(C.assamica)、大理茶(C.taliensis.)和滇缅茶(C.irrawadiensis)以及这些物种与其它物种的杂种，例如山茶(C.japonica))可用于本发明的一些个人护理组合物中。
在一些进一步的实施方式中，优选的活性成分包括多酚和来自下列组的儿茶素：(-)-儿茶素、(+)-儿茶素、(-)-儿茶素没食子酸酯(catechin gallate)、(-)-没食子儿茶素没食子酸酯(gallocatechin gallate)、(+)-表儿茶素、(-)-表儿茶素、(-)-表儿茶素没食子酸酯、(-)-表没食子酸儿茶素(epigallocatechin)、以及(-)-表没食子酸儿茶素没食子酸酯。
在本发明组合物的一些另外的实施方式中，黄酮和其衍生物(也经常统称为“黄酮”)发现有用。这些化合物具有下列的基本结构(取代位置被示出)：
可用于本发明的一些个人护理组合物中的一些更重要的黄酮被提供如下。然而，本发明不意图限制于任何特定的黄酮。
| 黄酮 | ||||||||
| OH取代位置 | ||||||||
| 3 | 5 | 7 | 8 | 2’ | 3’ | 4’ | 5’ | |
| 黄酮 | - | - | - | - | - | - | - | - |
| 黄烷醇 | + | - | - | - | - | - | - | - |
| 5，7-二羟黄酮 | - | + | + | - | - | - | - | - |
| 高良姜精 | + | + | + | - | - | - | - | - |
| 芹黄素 | - | + | + | - | - | - | + | - |
| 非瑟酮 | + | - | + | - | - | + | + | - |
| 3’，4’，5，7-四羟基黄酮 | - | + | + | - | - | + | + | - |
| 4’，5，7-三羟黄酮醇 | + | + | + | - | - | - | + | - |
| 五羟黄酮 | + | + | + | - | - | + | + | - |
| 桑色素 | + | + | + | - | + | - | + | - |
| 3，3’，4’，5’，7-五羟基黄酮 | + | - | + | - | - | + | + | + |
| 棉子皮亭 | + | + | + | + | - | + | + | - |
| 杨梅黄酮 | + | + | + | - | - | + | + | + |
在自然界，黄酮通常以糖基化的形式存在。
在一些进一步的实施方式中，本发明的个人护理组合物包括至少一种具有下列结构通式的类黄酮：
其中Z1到Z7，相互独立地选自H、OH、烷氧基和羟基烷氧基，其中烷氧基和羟基烷氧基可以是支化的或未支化的，并具有1到18个碳原子，并且其中Gly选自单糖苷和寡糖苷基团。
在一些可选的实施方式中，本发明的个人护理组合物包括至少一种具有下列结构通式的类黄酮：
其中Z1到Z6，相互独立地选自H、OH、烷氧基和羟基烷氧基，其中烷氧基和羟基烷氧基可以是支化的或未支化的，并具有1到18个碳原子，并且其中Gly选自单糖苷和寡糖苷基团。
在一些优选的实施方式中，所述组合物具有下面的结构通式：
其中，Gly1、Gly2和Gly3相互独立地是单糖苷基团。Gly2和Gly3还可以相互独立或一起被氢原子饱和。在一些优选的实施方式中，Gly1、Gly2和Gly3相互独立地选自己糖基，特别是鼠李糖基和葡糖基。然而，己糖基，例如阿洛糖基、阿卓糖基、半乳糖基、艾杜糖基、甘露糖基和塔罗糖基，也可用于本发明的一些实施方式中。在另外的实施方式中，戊糖基也可用于本发明的一些个人护理组合物中。
在一些实施方式中，Z1到Z5--相互独立地--有利地选自H、OH、甲氧基、乙氧基和2-羟基乙氧基，而黄酮糖苷具有下面的结构：
在一些实施方式中，在本发明的一些实施方式中提供的黄酮糖苷具有下面的结构：
其中，Gly1、Gly2和Gly3相互独立地是单糖苷基团。Gly2和Gly3还可以相互独立或一起表示利用氢原子的饱和。在可选的实施方式中，Gly1、Gly2和Gly3相互独立地选自己糖基，特别是鼠李糖基和葡糖基。然而，其它己糖基，例如阿洛糖基、阿卓糖基、半乳糖基、古洛糖基、艾杜糖基、甘露糖基和塔罗糖基，也可用于本发明的一些实施方式中。此外，在一些实施方式中，戊糖基可用于本发明中。在一些优选的实施方式中，本发明的个人护理组合物包括一种或多种黄酮糖苷，其选自α-葡糖基芸香苷、α-葡糖基杨梅黄酮、α-葡糖基异栎素、α-葡糖基异栎精和α-葡糖基栎素。在一些特别优选的实施方式中，黄酮糖苷是α-葡糖基芸香苷。
在又一些另外的实施方式中，本发明的个人护理组合物包括至少一种柚苷(柑橘苷，naringin)(例如，柚苷(橙花苷，aurantin)、柚苷配基-7-鼠李-葡萄糖苷)、橙皮苷3’，5，7-三羟基-4’-甲氧基黄烷酮-7-芸香糖苷、橙皮糖苷、橙皮苷-7-O-芸香糖苷)、芸香苷(3，3’，4’，5，7-五羟基黄酮-3-芸香糖苷、栎精-3-芸香糖苷、槐苷、芦丁、rutabion、taurutin、芸香素(phytomelin)、芸香素(melin))、三羟乙基芦丁(3，5-二羟基-3’，4’，7-三(2-羟基乙氧基)黄酮-3-(6-O-(6-脱氧-a-L-吡喃甘露糖基)-β-D-吡喃葡糖苷))、monoxerutin(3，3’，4’，5-四羟基-7-(2-羟基乙氧基)黄酮-3-(6-O-(6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基)-β-D-吡喃葡糖苷))、二氢刺槐亭(3，3’，4’，5’，7-五羟基黄烷酮)、紫杉叶素(3，3’，4’，5，7-五羟基黄烷酮)、圣草酚-7-葡糖苷(3’，4’，5，7-四羟基黄烷酮-7-葡糖苷)、flavanomarein(3’，4’，7，8-四羟基黄烷酮-7-葡糖苷)、和/或异栎精(3，3’，4’，5，7-五羟基黄烷酮-3-(b-D-吡喃葡糖苷)。在一些仍进一步的实施方式中，活性成分选自泛醌和叶绿醌。泛醌由下面的结构式表征：
泛醌是分布最广泛的和研究最多的生物醌。根据侧链中连接的异戊二烯单元的数量，泛醌被称作Q-1、Q-2、Q-3等等，或者根据碳原子数，被称作U-5、U-10、U-15等等。它们优选产生具有一定的链长度(例如，在一些微生物和酵母中，其中n＝6)。在大部分哺乳动物中，包括人类，Q10占优势。辅酶Q10在本发明的一些实施方式中特别有用。其结构式如下：
叶绿醌具有下面的结构通式：
叶绿醌在异戊二烯基的数目n上各不相同，并由此被命名(例如，PQ-9[n＝9])。此外，在醌环上具有不同取代基的其它叶绿醌存在于一些实施方式中。
在一些仍进一步的实施方式中，本发明包括至少一种肌酸和/或肌酸衍生物。肌酸具有下面的结构：
在本发明的个人护理组合物的一些优选实施方式中，磷酸肌酸、硫酸肌酸、乙酸肌酸、抗坏血酸肌酸、和/或在羧基基团上与单官能团或多官能团醇酯化的衍生物发现有用。
在一些另外的实施方式中，本发明的个人护理组合物含有L-肉碱[3-羟基-4-(三甲铵基)丁内盐]。酰基肉碱具有下面的通式：
其中R选自可达10个碳原子的支化和未支化烷基，并可用于本发明的一些实施方式中。在一些优选的实施方式中，丙酰基肉碱和/或乙酰基肉碱发现有用。两种对映体(D和L型)，以及D-和L-型的混合物和外消旋物可用于本发明的一些个人护理组合物中。
在一些进一步的实施方式中，本发明的活性成分包括但不限于sericoside、吡哆醇、维生素K、生物素、和芳香物质。此外，在本发明的个人护理组合物中存在的活性成分不意图限制于活性物质的任何特定组分和/或混合物(一种或多种)。实际上，各种活性物和活性物的混合物意图将可用于本发明的各种实施方式中。此类活性物的浓度同样不意图受限于任何特定的水平。在一些实施方式中，浓度基于制剂的总重量为按重量计从约0.001％到约30％，而在其它实施方式中，它为按重量计从约0.05％到约20％，以及在又进一步的实施方式中，它为按重量计从约0.1％到约10％。可以进一步预期，本领域普通技术人员将以适合本发明的个人护理组合物的活性物浓度配制所述组合物。
发明详述
本发明提供了治疗各种疾病和症状的肽和支持肽。在特别优选的实施方式中，本发明提供了用于个人护理的组合物和方法。在一些实施方式中，本发明提供了用在皮肤护理和/或毛发护理中的组合物，以及化妆品组合物。在可选的特别优选的实施方式中，本发明提供了治疗皮肤疾病例如红斑痤疮的肽和支持肽。在一些特别优选的实施方式中，本发明的支持肽是抗-VEGF肽。在可选的特别优选的实施方式中，抗-VEGF肽在支架蛋白上表达。在一些最优选的实施方式中，支架蛋白包括BBI。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了适于改善皮肤外观的化妆品和/或药物化合物。本发明进一步提供了阻断蛋白结合的肽。在一些优选的实施方式中，所述蛋白是VEGF。在一些特别优选的实施方式中，所述肽在耐蛋白酶的支架上表达。在一些尤其优选的实施方式中，所述支架是蛋白酶抑制剂(例如BBI、STI或Eglin胰凝乳蛋白酶抑制剂)。在一些最优选的实施方式中，所述蛋白酶抑制剂是已经进行功能上和/或结构上修饰的BBI。
如上所述，两种蛋白酶抑制剂已经从大豆中分离，即Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(大豆胰蛋白酶抑制剂，STI)和Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)(参见，例如Birk，Int.J.Pept.Protein Res.，25：113-131[1985]；和Kennedy，Am.J.Clin.Neutr.，68：1406S-1412S[1998])。这些抑制剂作为本文所提供的变体序列的起始支架(beginning scaffold)，以产生序列中的至少一个肽序列已经被修饰和/或被取代的蛋白酶抑制剂(例如，BBI-AV或STI-AV)。除了在含有变体序列的支架中进行改变之外，在本文中使用的其它期望的蛋白质包括在C端添加六个组氨酸残基(参见图1和2)。
大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)
通过形成稳定的化学计量复合物，STI抑制胰蛋白酶的蛋白水解活性(例如，参见Liu，Chemistry and Nutritional Value of Soybean Components，In：Soybeans， Chemistry，Technology and Utilization.pp.32-35，Aspen Publishers，Inc.，Gaithersburg，Md.，[1999])。STI由181个氨基酸残基和两个二硫桥组成，并且其大体上呈球形(参见，例如Song et al.，J.Mol.Biol.，275：347-63[1998])。胰蛋白酶抑制环位于第一个二硫桥内。在蛋白酶的早期研究中，Kunitz型大豆胰蛋白酶抑制剂(soybeantrypsin inhibitor，STI)起了关键的作用，其已经被用作生物化学和动力学研究工作的主要底物，这引出了对蛋白酶抑制剂作用的标准机理的定义。
Bowman-Birk抑制剂(BBI)
Bowman-Birk抑制剂蛋白是在动力学上和结构上都充分表征的小蛋白(60-90个残基)家族，该小蛋白分离自豆科种子以及其它植物，包括各种草。它们通常具有两个三环结构域的对称结构，每一个三环结构域含有独立的结合环，尽管一些具有一个结构域而一些具有两个以上的结构域。分离自大豆的主要的～8kD Bowman-Birk抑制剂(BBI)具有两个分开的反应部位环，环I抑制具有类胰蛋白酶特异性的蛋白酶，而环II抑制具有类胰凝乳蛋白酶特异性的蛋白酶(参见，例如Chen et al.，J.Biol.Chem.，267：1990-1994[1992]；Wemer and Wemmer，Biochem.，31：999-1010[1992]；Lin et al.，Eur.J.Biochem.，212：549-555[1993]；Voss et al.，Eur.J.Biochem.，242：122-131[1996]；以及Billings et al.，Pro.Natl.Acad.Sci.，89：3120-3124[1992])。这些结合区每一个都含有“规范环”结构，其是在多种丝氨酸蛋白酶抑制剂中发现的基序(Bode and Huber，Eur.J.Biochem.，204：433-451[1992])。STI和BBI仅在大豆种子中发现，而在该植物的任何其它部分中未发现(参见，例如Birk，Int.J.Pept.Protein Res.，25：113-131[1985])。
尽管BBI的许多同种型已经被表征，但是SEQ ID NO：47示出了在本文中描述的一些试验中使用的BBI骨架的氨基酸序列，包括大约71个氨基酸残基(参见实施例16)。
在大豆中，BBI以含有长度为19个氨基酸的N端前肽的蛋白原产生。因此，在一些实施方式中，产生具有所述前肽的全部或至少一部分的BBI。在一些实施方式中，BBI是截短的，多至10个氨基酸残基被从N-或C-端除去。例如，在种子脱水后，一些BBI分子C端的9或10个氨基酸残基被除去。因此，在起始二硫键之前和紧接最终二硫键之后，蛋白质水解通常是高度耐受的，该结果通常对结合目标蛋白没有害处。然而，应当理解，同种型或截短型的任何一种可用于本发明的各种实施方式中。
蛋白酶抑制剂变体
如上所述，STI和BBI蛋白酶抑制剂具有抑制蛋白酶的结合环。本发明提供在一个或多个反应位点(例如，BBI的环I和/或环II)具有改变的蛋白酶抑制剂变体。在一些优选的实施方式中，用与靶蛋白相互作用的序列取代所述环。
例如，在一些实施方式中，用衍生自VEGF结合蛋白、补体通路的抑制剂例如C2抑制剂、C3抑制剂、C4抑制剂或C5抑制剂、Compstatin、细胞因子、其它感兴趣的蛋白等等的序列取代所述环。实际上，本发明不意图限制于取代入这些环的任一个的任何特定序列，因为任何合适的序列都可用于本发明。
在一些实施方式中，通过本领域中已知的各种方法，选择变体序列，包括但不限于噬菌体展示和其它合适的筛选方法。例如，随机的肽基因文库与噬菌体PIII基因融合，以便所述肽文库将展示在噬菌体的表面上。之后，噬菌体展示文库被暴露于靶蛋白并用缓冲液洗涤，以除去非特异结合(该过程有时被称为淘选)。最后，分离结合噬菌体，并PCR扩增编码多肽的DNA序列。
在大多数实施方式中，其中一个环被变体序列(即肽；通常长3到14个氨基酸，优选5到10个氨基酸)替换。更长的序列可用于本发明中，只要它们提供期望的结合和/或抑制。此外，适于用来置换结合环(一个或多个)的肽当包含在限制环(constrained loop)(即，通过在两个半胱氨酸残基之间存在二硫键而形成的环)中时优选采用功能性构象。在一些具体的实施方式中，肽长度在7至9个氨基酸之间。这些置换序列也提供蛋白酶抑制作用或结合靶蛋白。在一些实施方式中，改变单个氨基酸是有利的。
融合蛋白
在优选的实施方式中，每一种蛋白酶抑制剂或其变体由宿主细菌细胞作为融合蛋白表达。尽管切割融合多肽以释放需要的蛋白通常是有用的，但其并不是必须的。令人惊奇地，以融合蛋白表达和分泌的蛋白酶抑制剂及其变体保持它们的功能。
上面定义的编码相应氨基酸序列的DNA序列被结合，以形成“融合DNA序列”。此类融合DNA序列按第一、第二、第三和第四DNA序列的顺序从5’端到3’端以正确的阅读框装配。当如此装配时，该DNA序列编码“融合多肽”，该融合多肽从其氨基端编码：细菌物种中起分泌序列作用的信号肽、通常从细菌物种分泌的分泌多肽或其部分、可切割接头肽和期望的多肽(例如蛋白酶抑制剂及其变体)。产生融合蛋白的各种方法对于本领域普通技术人员是已知的(参见，例如美国专利5,411,873、5,429,950和5,679,543，所有专利都被引入于此作为参考)。因此，意图是任何合适的方法都将可用于本发明。
重组蛋白酶抑制剂的表达
就本发明依靠融合蛋白的产生而言，本发明依赖于重组遗传学领域中的常规技术。公开本发明中使用的一般方法的基础教材包括Sambrook et al.，MolecularCloning，A Laboratory Manual((2nd ed.)[1989])；Kriegler，Gene Transfer andExpression：A Laboratory Manual(1990)；以及Ausubel et al.，(eds.)，Current Protocolsin Molecular Biology(1994)。
本发明提供了已经用含有编码蛋白酶抑制剂的核酸序列的表达转体转导、转化或转染的细菌宿主细胞。培养条件例如温度、pH和类似条件，是在转导、转化或转染之前用于亲代宿主细胞先前的那些条件，且对于本领域普通技术人员是显而易见的。
基本上，编码融合蛋白的核苷酸序列被可操纵地连接到在宿主细胞中发挥作用的启动子上。然后，在转化入宿主细胞中以复制和/或表达之前，该启动子基因单元通常被克隆到中间载体内。这些中间载体通常是原核载体(例如，质粒或穿梭载体)。然而，本发明不意图限制于中间载体的使用，因为在一些优选的实施方式中，该步骤可以被省略。
在一种方法中，细菌培养物用表达载体转化，该表达载体具有在宿主细胞中起作用的启动子或生物活性启动子片段或一个或多个(例如，一系列)增强子，它们被可操纵性地连接到编码蛋白酶抑制剂的核酸序列，从而使得蛋白酶在该细胞中表达。在一些优选的实施方式中，DNA序列编码蛋白酶抑制剂或其变体。在另一个优选的实施方式中，启动子是可调控的启动子。
核酸构建物/表达载体
[032g]编码蛋白酶抑制剂的天然的或合成的多核苷酸片段(即，“编码PI(proteaseinhibitor)的核酸序列”)可以被整合入异源核酸构建物或载体中，其能够被导入细菌细胞中并在细菌细胞中复制。本文中公开的载体和方法适合用在表达蛋白酶抑制剂及其变体的各种宿主细胞中。可以使用任何载体，只要它在被导入的细胞中是可复制并可存活的。大量的合适载体和启动子对于本领域技术人员是已知的，并是商业可得的。适宜的克隆和表达载体被描述于本领域技术人员已知的各种参考文献中(参见，例如Sambrook et al.，见上和Ausubel et al.，见上，其被明确引入于此作为参考)。通过任何合适的方法，合适的DNA序列被插入质粒或载体(在本文中统称为“载体”)。一般而言，通过本领域已知的标准方法，DNA序列被插入适宜的限制性内切核酸酶位点(一个或多个)。
合适的载体通常装备有编码选择性标记的核酸序列、插入位点和合适的调控元件，例如终止序列。在一些实施方式中，载体包括调节序列，包括例如操纵性地连接到编码序列的调控元件(即，启动子和终止子元件或5’和/或3’非翻译区)，其有效用于编码序列在宿主细胞中(和/或在其中修饰的可溶蛋白编码序列不被正常表达的载体或宿主细胞环境中)的表达。大量合适的载体和启动子对于本领域技术人员是已知的，其中的许多是商购可得的，并且是本领域技术人员已知的。
示例性启动子包括组成型启动子和诱导型启动子。此类启动子是本领域技术人员熟知的。本领域技术人员还知道天然启动子可以通过一个或多个核苷酸的置换、取代、添加或消除来加以修饰，而不改变其功能。本发明的实践包括并且不限制于对启动子的这类改变。对用于遗传构建物中的启动子的选择在本领域技术人员的知识之内。
适当的选择性标记的选择将取决于宿主细胞。不同细菌宿主的合适的标记在本领域中是熟知的。典型的选择性标记基因编码这样的蛋白质：(a)赋予对抗生素或其它毒素(例如，氨苄青霉素、甲氨蝶呤、四环素、新霉素、霉酚酸、嘌呤霉素、zeomycin或潮霉素)抗性；(b)补充宿主菌株中的营养缺陷型突变或天然发生的营养缺陷。
在一些实施方式中，根据熟知的重组技术，选择的PI编码序列被插入合适的载体并用于转化能够表达PI的细胞系。由于遗传密码子固有的简并性，编码基本上相同或功能上等价的氨基酸的其它核酸序列可用于克隆和表达具体的蛋白酶抑制剂，如上所详细描述。因此，可以理解，在编码区的此类替代落入本发明覆盖的序列变体范围之内。可以用与本文所述的亲代PI编码核酸序列相同的方式，利用任何和所有这些序列变体。本领域技术人员将认识到，不同的PI将由不同的核酸序列编码。
在一些实施方式中，一旦获得期望形式的蛋白酶抑制剂核酸序列、同源物、变体或其片段，则其可以通过任何数目的方式加以修饰。如果序列包括非编码侧翼区，则侧翼区可以被切除、诱变等等。因此，可以对天然存在的序列进行转换、颠换、缺失和插入。
在一些优选的实施方式中，异源核酸构建物包括至少一种蛋白酶抑制剂、或其变体(一种或多种)、片段(一种或多种)或剪接变体(一种或多种)的编码序列：该编码序列是(i)隔离形式的；(ii)与其它编码序列组合的形式；例如，融合蛋白或信号肽编码序列，其中PI编码序列是占优势的编码序列；(iii)与非编码序列结合，例如调控元件，例如启动子和终止子元件或5′和/或3′非翻译区，其对于编码序列在合适的宿主中表达是有效的；和/或(iv)在载体或宿主环境中，其中PI编码序列是异源基因。
在一些实施方式中，含有合适的核酸编码序列的异源核酸，与合适的启动子和调控序列一起，被用于引入细菌宿主细胞，以允许细胞表达至少一种蛋白酶抑制剂或其变体。
在本发明的一些实施方式中，异源核酸构建物被用于将PI编码核酸序列体外转移到细胞中。在一些优选的实施方式中，宿主细胞稳定整合本发明的核酸序列。因此，有效产生稳定转化子的任何合适的方法可用于本发明中。
在本发明的另外的实施方式中，第一和第二表达盒存在于单个载体上，而在其它实施方式中，表达盒存在于分开的载体上。
在一些优选的实施方式中，除了启动子序列之外，表达盒还含有结构基因下游的转录终止区，以提供有效的终止作用。在一些实施方式中，终止区与启动子序列从相同的基因获得，而在其它实施方式中，终止区从另一个基因获得。对合适的转录终止信号的选择是本领域技术人员所熟知的。
此外，可以预期，任何合适的表达载体将可用于本发明中。实际上，可以预期，用于在真核或原核细胞中表达的各种常规载体将适合并可用于本发明。标准的细菌表达载体包括噬菌体λ和M13，以及质粒例如基于pBP322的质粒、pSKF、pET23D、和融合表达系统例如MBP、GST和LacZ。在进一步的实施方式中，表位标签被加入到重组蛋白中，以提供方便的分离方法(例如，c-myc)。
通常包括在表达载体中的另外的元件是复制子，编码抗生素抗性以允许选择包含重组质粒的细菌的基因、以及质粒非必需区中允许插入异源序列的独特的限制性位点。所选择的特定抗生素抗性基因不是关键的，本领域已知的许多抗性基因的任何一个都是适合的。
将编码蛋白酶抑制剂的核酸序列引入宿主细胞
在一些优选的实施方式中，本发明的方法提供含有稳定整合的目标序列(即，PI-编码核酸)的宿主细胞。然而，在可选的实施方式中，本发明的方法提供自我复制的染色体外转化载体的维持。
本发明进一步提供已被遗传修饰的细胞和细胞成分，遗传修饰是为了包括外源提供的PI编码核酸序列。在一些实施方式中，亲代宿主细胞通过表达载体进行遗传修饰。在一些实施方式中，载体是质粒，而在其它实施方式中，载体是病毒颗粒、噬菌体、裸DNA等等。因此，载体的形式不意图受限于任何特定类型的载体，因为各种载体都将可用于本发明中。
各种方法可被用于将表达载体体外输入细胞。将核酸引入细胞以表达异源核酸序列的方法也是普通技术人员所已知的，包括但不限于，电穿孔；与完整细胞的原生质体融合；转导；用DNA-包被的微粒高速轰击；用修饰的病毒(例如噬菌体)核酸感染；化学介导的转化、感受态等等。此外，在一些实施方式中，包含PI编码核酸序列的异源核酸构建物被体外转录，并且得到的RNA通过本领域已知的任何合适的方法导入宿主细胞。
在将含有蛋白酶抑制剂的编码序列的异源核酸构建物导入之后，在常规营养培养基中培养该遗传修饰的细胞，所述常规营养培养基被改变成适于激活启动子、选择转化子和/或PI-编码核酸序列的扩增表达。培养条件，例如温度、pH和类似条件，是先前用于宿主细胞——其被选择用来表达——的那些条件，且对于本领域普通技术人员是明显的。
已导入了此类异源核酸构建物的细胞子代通常被认为含有在异源核酸构建物中发现的PI-编码核酸序列。
细菌宿主和表达
适宜的宿主细胞包括任何合适的细菌种类。在一些实施方式中，细菌宿主既作为表达宿主又作为第一和第二核酸的来源。使用本发明方法和宿主细胞，获得令人惊奇的表达水平。本文所利用的系统已经取得0.5g/l蛋白酶抑制剂以上的表达和分泌水平。
在表达载体被引入宿主细胞之后，在有利于表达编码期望蛋白的基因的条件下培养转染的宿主细胞。大批转化的细胞可以如上所述培养。最后，使用本领域已知的技术，从培养物回收产物。
辅助蛋白例如巯基-二硫键氧化还原酶或陪伴分子可用于一些实施方式中，因为它们可能有益于帮助将分泌蛋白折叠成其活性构象。巯基-二硫键氧化还原酶和蛋白质二硫键异构酶在蛋白质中催化形成正确的二硫键。在枯草杆菌(B.subtilis)中bdbDC操纵子的过表达已经显示出有益于含二硫键蛋白的产生(参见，例如Meima et al.，J.Bio1.Chem.，277：6994-7001，[2002])。陪伴分子通过结合未折叠态的暴露的疏水区并防止不利的相互作用，帮助分泌蛋白折叠，而脯氨酰-肽基顺反异构酶帮助脯氨酸残基附近的肽链形成正确的构象。
在本发明的一些实施反式中，用编码至少一种巯基-二硫键氧化还原酶或陪伴分子的表达载体转化宿主细胞。本发明不意图受限于任何特定的巯基-二硫键氧化还原酶或陪伴分子，因为本领域技术人员已知的任何合适的巯基-二硫键氧化还原酶或陪伴分子都可用于本发明中。
在本发明的一些实施方式中，通过向生长培养基加入还原/氧化二硫键、和/或改变总氧化还原电势的化学品，和/或改变溶剂性能从而影响蛋白构象和聚集的化学品，正确折叠的分泌蛋白的比例被增加。在特别优选的实施方式中，还原二硫键的试剂，例如2-巯基乙醇，被优选用来增加正确折叠的蛋白质的比例。然而，在其它实施方式中并取决于所使用的培养基，其它二硫键还原或氧化剂(例如，DTT、TCEP、还原型和氧化型谷胱甘肽、半胱氨酸、胱氨酸、半胱胺、巯基乙酸盐(或酯)、S2O3 2-、S2O4 2-、S2O5 2-、SO3 2-、S2O7 2-、Cu+等等)，或单独或结合使用，发现在本发明中有用。可以预期，其它改变溶剂性能的佐剂(例如，脲、DMSO、TWEEN
-80等等)--或单独加入生长培养基中或优选与二硫键还原/氧化剂例如βME结合--也将增加正确折叠的分泌蛋白的比例并在本发明的各种实施方式中发现有用。在一些优选的实施方式中，βME在0.5到4mM的浓度范围下使用，而在其它实施方式中，该浓度范围为0.1mM到10mM。实际上，本领域技术人员知道如何选择最佳的生长培养基和生长条件，以优化添加的硫醇还原/氧化剂和/或其它佐剂的效应，以及添加的硫醇还原/氧化剂和/或其它佐剂的使用浓度。本发明不意图限制于任何特定的二硫键还原/氧化剂或佐剂，因为本领域技术人员已知的任何合适的试剂都可用于本发明中。
发酵参数
本发明依赖于培养细菌菌种的发酵工艺。由细菌菌种产生异源蛋白的发酵工艺在本领域中是熟知的。在生长培养基中完成培养，所述生长培养基包括含水矿盐介质、有机生长因子、碳源和能源物质、分子氧(用于需氧和兼性细菌)以及当然包括一种或多种待利用的特定微生物种类的起始接种物。
除了碳源和能源、氧、可同化氮、和微生物的接种物之外，必须供应合适量的适当比例的矿质营养物，以确保适当的微生物生长、使在微生物转化过程细胞对碳源和能源的同化最大化、以及获得在发酵培养基中具有最大细胞密度的最大细胞产量。
如本领域技术人员所知，各种培养基可用于本发明中。然而，标准的细菌培养基在本发明中发现有用。在一些优选的培养基配方中，除了氮之外，培养基包括合适的可溶解可同化离子和结合形式的适量磷、镁、钙、钾、硫和钠，以及还优选存在的将是某些痕量元素例如铜、锰、钼、锌、铁、硼和碘以及其它痕量元素，这些痕量元素同样是合适的可溶可同化的形式，所有这些都如本领域所已知的。
在一些实施方式中，发酵反应涉及好氧过程，其中所需的分子氧通过含分子氧的气体例如空气、富氧空气或甚至基本上纯的分子氧进行供应，其被提供以维持发酵容器的内含物具有合适的氧分压，以便有效地帮助微生物种类旺盛生长。实际上，通过使用氧化的烃类物质，微生物生长的氧需求被降低。然而，对于好氧微生物的生长，分子氧必须被供应，而对于兼性生物，以较小的程度供应。
尽管通气速率可以在相当大的范围内变化，但是通气通常以这样速率下进行，该速率为发酵罐中每分钟每液体体积约0.5到10体积(在使用的压力下以及在25℃下)的含氧气体的范围，优选约0.5到7体积的含氧气体的范围。这个量基于被供应到反应器的含正常氧含量的空气，而就纯氧而言，各自的范围将为发酵罐中每分钟每液体体积约0.1到1.7体积，或优选约0.1到1.3体积(在使用的压力下以及在25℃下)的氧。
微生物转化过程所使用的压力可以广泛变化。作为设备和操作成本与所达到的氧溶解度之间的平衡，压力通常在约0到50psig范围内，目前优选约0到30psig，更优选至少稍微高于大气压。高于大气压是有利的，因为这样的压力确实易于增加含水发酵液中溶解氧的浓度，这转而可以帮助增加细胞生长速率。同时，这由这样的事实所平衡：高的气压确实增加设备和操作成本。
发酵温度可以细微变化，但对于本发明所使用的大多数细菌菌种，该温度通常在约20℃到40℃的范围内，通常优选在约28℃到37℃的范围内，这取决于所选择的微生物菌株，如本领域技术人员所已知。
微生物也需要可同化的氮源。可同化氮源可以是任何含氮化合物或能够释放适于被微生物代谢利用的形式的氮的化合物。尽管各种有机氮源化合物例如蛋白质水解产物可以被使用，但是通常可以使用廉价的含氮化合物，例如氨、氢氧化铵、脲、和各种铵盐，例如磷酸铵、硫酸铵、焦磷酸铵、氯化铵、或各种其它铵化合物。氨气本身对于大规模操作是方便的，并且可以通过以合适量鼓泡经过含水发酵液(发酵培养基)而被使用。同时，这样的氨也可被用于帮助调节pH。
含水微生物发酵液(发酵混合物)的pH范围应该在约2.0到8.0的示例性范围中。然而，对于某些微生物的最优pH范围在一定程度上取决于所使用的培养基，以及特定的微生物，因此，如本领域技术人员所知，随着培养基的变化稍微改变。
同时，如本领域所已知，在发酵罐中发酵混合物的平均停留时间可以相当大地变化，这部分取决于所采用的发酵温度和培养。
在一些实施方式中，发酵可以以这样的方式优选进行：含碳底物可以作为限制性因素被控制，从而对细胞提供含碳底物的良好转化，并避免实质量的未转化底物对细胞的污染。如果后者是水溶性底物则没有问题，因为任何残留的痕量物质都可被方便地除去。然而，在非水溶性底物的情况下，这可能是一个问题，并需要增加产物处理步骤，例如合适的洗涤步骤。取得该限制性底物水平所需的时间并不关键，并且可以随特定的微生物和正进行的发酵过程而变化。然而，如何确定发酵培养基中的碳源浓度以及是否已经达到期望的碳源水平在本领域中熟知的。
尽管在一些实施方式中，发酵以分批或连续操作进行，但是对于容易控制、一致的产物产生量、以及所有设备的最经济使用而言，补料分批操作通常被优选。
如果需要，可以在将含水矿质培养基加入发酵罐之前，将部分或全部碳源和能源物质和/或部分可同化氮源例如氨加入含水矿质培养基中。实际上，被引入反应器的每一流(stream)优选被控制在预定的速率下，或根据需要进行控制，所述需要通过监测例如碳源和能源底物的浓度、pH、溶解氧、发酵罐废气中的氧或二氧化碳、由透光率测量的细胞密度或类似因素而确定。各种物质的进料速率可以变化，以便可能获得快速的细胞生长--这与碳源和能源的有效利用相一致，以获得相对于底物载荷尽可能高的微生物细胞产量，但更重要的是每单位体积获得最高的期望蛋白产率。
在分批操作或优选的补料分批操作中，所有的设备、反应器或发酵工具、器皿或容器、管道、附带的循环或冷却设备和类似设备最初都进行灭菌，通常通过使用蒸汽例如在约121℃下进行至少约15分钟。然后，在所有必需营养素存在下，包括氧和含碳底物，用选择的微生物的培养物对灭菌的反应器进行接种。所使用的发酵罐的类型并不关键，尽管在一些实施方式中，15L Biolafitte(Saint-Germain-en-Laye，France)被优选。
蛋白质分离
在一些特别优选的实施方式中，一旦期望的蛋白被表达，则分泌的蛋白被回收。本发明提供了从其融合类似物分离期望的蛋白质的方法。可以特别预期，本文所描述的方法将可用于从融合类似物分离蛋白酶抑制剂和变体。
使用本领域技术人员已知的方法，也可以实现从发酵肉汤收集和纯化期望的蛋白。发酵肉汤通常将含有细胞碎片--包括细胞、各种悬浮固体和其它生物量污染物，以及期望的蛋白质产物，其优选通过本领域已知方法从发酵肉汤移出。用于此类移出的合适方法包括常规的固液分离技术(例如，离心、过滤、透析、微滤、旋转真空过滤、或其它已知方法)，以产生无细胞的滤液。在一些实施方式中，优选的是，在使用技术例如超滤、蒸发和/或沉淀进行纯化和/或结晶工艺之前，进一步浓缩发酵肉汤或无细胞滤液。
利用盐(例如硫酸铵)或低pH(通常在3以下)，可以沉淀上清或滤液的蛋白质组分，随后通过多种层析方法(例如，离子交换层析、亲合层析、疏水作用层析、疏水电荷诱导层析等等)或类似的本领域公认的方法进行纯化。本发明不意图受限于任何特定的分离方法，因为可以预期任何方法都将可用于本发明。
在某些优选的实施方式中，当表达的期望蛋白从细菌细胞分泌出时，从生长培养基纯化多肽。在优选的实施方式中，在多肽纯化之前，从培养基除去表达宿主细胞(例如，通过离心)。
当表达的重组期望多肽未从宿主细胞分泌出时，宿主细胞优选被破碎并且多肽释被放入含水“提取液”中，这是纯化的第一阶段。优选地，在细胞破碎之前从培养基收集表达宿主细胞(例如，通过离心)。使用本领域已知的任何合适的方法，例如通过溶菌酶或β-葡聚糖酶消化或通过使细胞经过高压，可以进行细胞破碎(参见，例如Scobes，Protein Purification，Second edition，Springer-Verlag)。
在一些实施方式中，向C端添加六组氨酸残基(即，“His标签”)被用作纯化期望蛋白及其融合类似物的辅助物。His标签用作纯化辅助物在本领域中是熟知的(参见，例如Hengen，TIBS 20：285-286[1995])。如本领域技术人员所已知，使用固定化金属离子亲合层析(Immobilized Metal ion Affinity Chromatography，IMAC)，带6x his标签的蛋白质可容易地进行纯化。
纯度
对于一些应用，很重要的是，使用本发明产生的蛋白酶抑制剂应当是极其纯的(例如，具有99％以上的纯度)。当期望的蛋白被用作治疗剂时这是特别真实的，但对于其它应用也是必需的。本发明所描述的方法提供了产生实质上纯的期望蛋白的方法。本发明所描述的期望蛋白可用于药物和个人护理组合物。然而，可以预期，使用本发明的方法，将产生不同纯度水平的蛋白质，并且使用本发明产生的蛋白质不意图受限于任何特定的纯度水平。
纯化期间BBI的活化
在本发明的一些实施方式中，在纯化过程期间生长之后，通过加入还原/氧化二硫键和/或改变总的氧化还原电势的化学品、和/或改变溶剂性能从而影响蛋白构象和聚集的化学品，蛋白质的活性被增加。在一些特别优选的实施方式中，还原二硫键的试剂，例如2-巯基乙醇的加入，被用来增加蛋白质的活性。然而，如本领域普通技术人员所理解，取决于纯度和缓冲液组成，其它二硫键还原或氧化剂(例如，DTT、TCEP、还原型和氧化型谷胱甘肽、半胱氨酸、胱氨酸、半胱胺、巯基乙酸盐(或酯)、S2O3 2-、S2O4 2-、S2O5 2-、SO3 2-、S2O7 2-、Cu+、蛋白质二硫键异构酶、蛋白质巯基-二硫键氧化还原酶等等)，单独或结合使用，在本发明中发现有用。其它改变溶剂性能的佐剂(例如，乙醇胺、DMSO、TWEEN
-80、精氨酸、脲等等)--在纯化过程期间单独加入或优选与二硫键还原/氧化剂例如βME结合加入--也将通过增加蛋白质的活性而可用于本发明中。在某些优选的实施方式中，部分纯化的蛋白质被稀释在缓冲液(在一些特别优选的实施方式中，为碱性pH下含TWEEN
-80的两性离子缓冲液)中，并用bME和二硫基氧化剂(在可选的优选实施方式中，为氧化型谷胱甘肽或亚硫酸钠)活化。
此外，可以预期，如果需要，为了确定该蛋白的最佳活化，条件将被筛选。例如，为了确定所使用的表达系统的最优条件，测试了各种βME浓度(0.1-10mM)、氧化剂浓度(βME浓度的0到1/20到20倍)、pH(7.5-9.5)、温度(15-40℃)、稀释(1-20倍)、温育时间(12-72小时)、通气(在惰性气体下温育到在含氧气体下剧烈混合)、缓冲液类型(Tris、CHES、CAPS、Tricine、TAPS、其它两性离子缓冲液等等)、缓冲液浓度(0.1-1M)、以及添加各种已知用来改变溶剂性能从而影响蛋白构建和聚集的佐剂(例如，乙醇胺、DMSO、TWEEN
-80、精氨酸、脲等等)。本发明不意图受限于任何特定的二硫键还原/氧化剂、稀释、温度、pH、缓冲液类型和组成、或佐剂，因为任何本领域技术人员已知的试剂可用于本发明。
个人护理组合物
在特别优选的实施方式中，本发明提供用于改善皮肤外观的化妆品和/或药物化合物，包括至少一种多肽或肽。在一些优选的实施方式中，多肽或肽结合VEGF。在可选的实施方式中，多肽或肽与VEGF的结合阻断VEGF的下游活性。在一些实施方式中，所述化合物包括至少一种肽，而在其它实施方式中，所述化合物包括至少一种多肽。在一些优选的实施方式中，肽包括选自SEQ ID NOS：1-7、16和17的氨基酸序列。在另外的优选实施方式中，所述肽具有保守的结合序列，该序列是XXLWPXWC(SEQ ID NO：15)。在一些优选的实施方式中，所述肽包括选自SEQ ID NOS：22-24的氨基酸序列。在可选的优选实施方式中，所述化合物具有序列，所述序列与本文所描述的序列具有至少70％、优选80％、更优选90％和最优选95％的同源性。在一些优选的实施方式中，所述肽的分子量优选在500道尔顿至30,000道尔顿之间，更优选在1000道尔顿至10,000道尔顿之间，以及最优选1500道尔顿至8,000道尔顿。
在一些优选的实施方式中，所述化合物可用于改善患有皮肤疾病的生物体(即，对象)的皮肤。在一些优选的实施方式中，皮肤疾病是生血管皮肤疾病。在另外的优选实施方式中，所述皮肤疾病是选自牛皮癣、静脉曲张性溃疡、痤疮、红斑痤疮、疣、湿疹、血管瘤和淋巴管生成等等的至少一种。在一些特别优选的实施方式中，所述皮肤疾病是红斑痤疮。
本发明不意图受限于任何特定的皮肤治疗或症状。例如，多年来，皮肤着色已经成为人类的关注点。具体而言，存在除去与老年斑相关的过度着色、皱纹和其它由于老化或其它因素导致的暗化区域的需求。许多个体更喜欢均匀着色的肤色(即，无红色、黑暗或白色区域)。此外，在一些区域中，皮肤的增白是期望的效果，而在其它区域，美黑皮肤是优选的。各种化合物已经被用于实现去着色，包括曲酸、羟基醌和类视黄醇。许多研究已经致力于在不使用照射的情况下产生美黑皮肤，以避免光损伤。然而，用这些产品获得的结果通常不是最优的，因为为了实现期望的结果，要求恰当的和精确的应用。此外，这些化合物的许多是皮肤刺激原。
黑素生成的化学和酶促基础是熟知的。黑素细胞从胚胎神经嵴迁移进入皮肤，以产生称为色素体的分泌颗粒，其通过黑素生成产生黑色素。然后，通过这些细胞产生的黑色素经由黑素细胞树突分布到角质化细胞。黑素生成中的关键酶是酪氨酸酶，其起始将酪氨酸转化成黑色素的级联反应，黑色素是一种聚合物。两种酪氨酸酶相关蛋白(tyrosinase-related proteins，TRP)是已知的，其与酪氨酸酶共有约40％的同源性。这些蛋白(TRP-1和TRP-2)在黑素生成中具有催化活性以及调节功能。据报道，TRP-1是黑素细胞中最丰富的糖蛋白。
尽管黑素生成的化学和酶促基础被充分描述，其在细胞水平上的调节仅仅被部分理解。酪氨酸酶和TRP与溶酶体相关膜蛋白(lysosomal-associated membraneprotein，LAMP)基因家族具有共同的结构和生物学性能。因此，已经预期，它们对黑素体膜的靶向作用可能诱导它们的活化。也可以预期，在这些蛋白的胞质尾处发生的磷酸化/去磷酸化反应可能参与黑素生成的调节。蛋白激酶C(PKC)家族的β同种型已经表现出通过酪氨酸酶活化调节人黑素生成。酪氨酸酶、TRP-1和TRP-2的基因表达是协同的。此外，所有三种酶都在人表皮中表达。
蛋白酶激活受体-2(PAR-2)是七次跨膜的G蛋白偶联受体，其在序列上与凝血酶受体(TR，也称为PAR-1，以及PAR-3)相关但不相同。在胞外结构域，两种受体通过精氨酸-丝氨酸切割以蛋白水解的方式被激活。然后，新产生的N末端作为束缚配体激活这些受体。两种受体都可以通过胰蛋白酶被激活，但只有TR可以被凝血酶激活。此外，只有PAR-2被肥大细胞类胰蛋白酶激活。两种受体还可以被相应于它们的新N末端的肽激活--独立于受体切割。此外，具有序列SLIGRL(SEQ ID NO：32)的肽--已知为小鼠PAR-2激活肽--在人受体的激活中是等效的。尽管TR的功能被充分描述，但是PAR-2系统的生物学仍未被充分确定。然而，PAR-2激活在抑制角质化细胞生长和分化的作用近来已经被描述(Derian et al.，Cell Growth Different.，8：743-749[1997])。
在其它优选的实施方式中，本发明提供了用于改善皮肤外观的化妆品和/或药物化合物。在这些优选的实施方式中，所述化合物包括在至少一种支架内的至少一种肽或多肽，所述肽或多肽在所述支架中表达。在一些特别优选的实施方式中，所述至少一种肽或多肽是环。在其它特别优选的实施方式中，该环通过二硫键闭合。在一些优选的实施方式中，所述肽或多肽结合VEGF。在可选的实施方式中，所述多肽或肽与VEGF的结合阻断了VEGF的下游活性。在一些特别优选的实施方式中，所述多肽在耐蛋白酶的支架中表达。在一些尤其优选的实施方式中，所述支架是蛋白酶抑制剂(例如，BBI、STI或Eglin胰凝乳蛋白酶抑制剂)。在一些最优选的实施方式中，所述蛋白酶抑制剂是BBI。
在一些优选的实施方式中，所述化合物进一步包括至少一种肽。优选地，所述肽包括选自SEQ ID NOS：1-7、16和17的氨基酸序列。在一些选择中，所述肽包括选自SEQ ID NO：14的氨基酸序列。在一些实施方式中，所述化合物包括选自SEQ ID NOS：22-24的氨基酸序列。最优选地，所述化合物包括SEQ ID NO：22。在一些优选的实施方式中，所述肽具有保守的结合序列，该序列是XXLWPXWC(SEQ ID NO：15)。在一些优选的实施方式中，所述化合物具有序列，所述序列与本文所描述的序列具有至少70％、优选80％、更优选90％和最优选95％的同一性。所述肽分子量优选在500道尔顿至45,000道尔顿之间，更优选在1000道尔顿至12,000道尔顿之间，以及最优选1500道尔顿至10,000道尔顿。在一些优选的实施方式中，所述化合物包括至少一种多肽。
在一些优选的实施方式中，所述化合物可用于改善患有皮肤疾病的生物体(即，对象)的皮肤。在另外的优选实施方式中，所述皮肤疾病是至少一种选自牛皮癣、静脉曲张性溃疡、痤疮、红斑痤疮、疣、湿疹、血管瘤和淋巴管生成等等的皮肤疾病。在一些特别优选的实施方式中，所述皮肤疾病是红斑痤疮。
在仍进一步的实施方式中，本发明提供了化妆品和/或药物组合物，其包括至少一种本文所描述的多肽或肽以及生理学上可接受的载体或赋形剂。优选地，所述化合物以按重量计约0.0001％到约5％的量存在，基于所述组合物的总重量。同样优选地，所述化合物以按重量计约0.001％到约0.5％的量存在，基于所述组合物的总重量。所述组合物可以是乳化载体的形式，例如营养膏或营养洗液、稳定化的凝胶或分散体系、护理精华素、脂质体输送体系、局部包裹或面膜、表面活性剂基清洁体系例如香波或沐浴露、烟雾化或喷雾的分散体或乳液、毛发或皮肤调节剂、定型助剂、或彩色产品例如美容产品、以及其它合适的美容和化妆品配制品。在一些实施方式中，所述载体优选是至少一种选自水、丙二醇、乙醇、丙醇、丙三醇、丁二醇和聚乙二醇。
在另外的实施方式中，本发明提供了化妆品和/或药物化合物，其包括至少一种多肽或肽，该多肽或肽适于调节毛发生长。在一些优选的实施方式中，所述化合物包括至少一种多肽。
在一些优选的实施方式中，调节包括至少一种涉及脱发的疾病或症状的治疗。在一些优选的实施方式中，疾病或症状是选自炎性脱发、假斑秃、硬皮病、蜱叮咬(tick bites)、扁平苔藓、牛皮癣、狼疮、脂溢性皮炎、头发稀松综合症(loosehair syndrome)、血色素沉着、雄激素源性脱发病、局限性脱发、癌症、影响缺陷型头发纤维产生的症状、以及影响毛发生长的环境因素的至少一种。在一些优选的实施方式中，疾病是雄激素源性脱发病或局部性脱发。
在一些优选的实施方式中，调节包括毛发生长抑制和/或毛发去除，用于治疗至少一种疾病或症状，对于该疾病或症状，减少毛发生长是期望的。在一些优选的实施方式中，抑制和/或去除包括脱毛。
在一些优选的实施方式中，本发明提供用于调节毛发生长的化妆品和/或药物化合物，包括至少一种肽或多肽和至少一种支架，所述肽或多肽被包含在所述支架之内，优选地，所述肽或多肽是环，并且最优选地，所述环被二硫键闭合。在一些优选的实施方式中，所述支架包括STI、Eglin或BBI。在特别优选的实施方式中，所述支架包括BBI。在进一步优选的实施方式中，所述肽或多肽包括多肽。
在仍进一步的实施方式中，本发明提供降低VEGF活性和/或水平的方法。在一些优选的实施方式中，VEGF活性和/或水平在表皮中被降低。在一些实施方式中，所述方法包括将有效量的本文所描述的至少一种化合物的应用到需要其的生物体。
在另外的实施方式中，本发明提供了毛发和/或皮肤治疗的应用，以及伤口愈合应用、增生疾病的治疗等等。因此，本发明提供了适于在人和其它动物中/上应用的组合物和方法。
在另外的优选实施方式中，本发明涉及至少一种耐蛋白酶支架，其包括至少一种肽或多肽和至少一种环。柔性天然环被发现于大多数蛋白模件的表面上，并且以连接限定的二级结构区的一段氨基酸短序列存在。尽管晶体学和NMR(核磁共振)研究表明，天然环通常不如α-螺旋和β折叠那样被完全限定，但是相比于自由肽，它们的构象自由度通常被基本上被限制。因此，在蛋白质中天然环的结合活性通常明显不同于相应线性氨基酸序列的活性。然而，本发明不意图被限制于任何具体的机理。
本发明所提供的环结合蛋白质例如VEGF(例如，VEGF-A)。环与蛋白质的结合阻止了蛋白质结合到它的靶标。因此，结合相互作用被认为通过将环与蛋白质的结合而被破坏。结果，生物活性可以根据需要进行改变。然而，本发明不意图限制于任何特定的机理。
本发明进一步提供了蛋白酶抑制剂，以稳定所述环。STI、BBI和Eglin C具有结合并抑制蛋白酶的天然环。在一些实施方式中，用本发明的多肽和/或肽替换STI和BBI天然环。在一些实施方式中，这些序列用任何VEGF的抑制剂或增强剂替换，而在其它实施方式中，所述序列用VEGF-A的抑制剂或增强剂替换。在可选的实施方式中，所述序列用FGF-5、TGFB-1和TGFB-2的抑制剂、以及补体通路的抑制剂例如C2抑制剂、C3抑制剂、C4抑制剂或C5抑制剂和Compstatin等等替换。在另外的实施方式中，STI和BBI天然环用使用本领域已知的各种技术(例如，噬菌体展示)分离的序列替换，例如本文描述的VEGF结合蛋白。
在一些实施方式中，天然环用长为3到20个氨基酸，优选长5到15个氨基酸，并且更优选长5到10个氨基酸的环替换。在可选的实施方式中，更长的序列发现有用，只要它们提供结合和/或抑制作用。此外，适于用来替换天然环(一个或多个)的肽可以形成限制环(即，通过在两个半胱氨酸残基之间存在二硫键而形成的环)。在一些特别优选的实施方式中，肽长度为在7至9个氨基酸之间。
使用支架来稳定肽序列具有若干优势。在一些优选的实施方式中，作为限制肽的柔性并降低将多肽序列固定在生物活性构象中的熵消耗的结果，所述肽的生物学活性更高和/或有效调节生物学功能。此外，通过X-射线晶体学获得的结构信息可用于指导亲和力的形成。而且，在一些实施方式中，在不同的生物学应用中，在结构支架上存在的序列对于蛋白水解降解更加耐受。在仍进一步的实施方式中，在适于工业应用的低成本生物表达系统中大量获得嵌合结构。
BBI代表一类其与蛋白酶的结合由暴露的天然环调节的蛋白支架，该天然环以特征规范构象固定，并且其以据认为类似于底物的方式适配到活性部位中(Laskowski and Kato，Ann.Rev.Biochem.，49：593-626[1980]；以及Bode & Huber，supra)。用来将结构锁定为正确的规范结构的二硫桥和/或广泛的氢键网络的存在经常限制所述天然环。该环的序列决定了抑制的特异性，这反映了蛋白酶对它们的底物的特异性。例如，大多数胰蛋白酶抑制剂具有Arg或Lys作为它们的P1残基。BBI家族的抑制剂具有帮助形成对称结构的两个三环结构域的保守二硫桥网络(Chen et al.，supra；Werner and Wemmer，supra；和Liu et al.，supra)，每一个三环结构域含有独立的丝氨酸蛋白酶结合位点。天然结合环被包含在由二硫桥连接的区内，该二硫桥在半胱氨酸残基之间形成。在每一个结构域上、在P1位置处的氨基酸残基的身份是被抑制的丝氨酸蛋白酶的主要决定因素。天然结构域对于胰蛋白酶具有赖氨酸或精氨酸，对于胰凝乳蛋白酶具有亮氨酸或酪氨酸，而对于弹性蛋白酶具有丙氨酸(Tsunogae et al.，J.Biochem.(Tokyo)100：243-246[1986])。此外，在P’1位置，丝氨酸是高度保守的，而在P’3位置，脯氨酸是高度保守的。BBI的各个天然环区非常适于先前鉴定的半胱氨酸限制肽的蛋白质环嫁接，该半胱氨酸限制肽选择性结合靶，如本文所述。
许多BBI的同种型已经被表征。例如，序列DDESSKPCCDQCACTKSNPPQCRCSDMRLNSCHSACKSCICALSYPAQCFCVDITDFCYEPCKPSEDDKEN(SEQ ID NO：25)提供了本文描述的BBI骨架的氨基酸序列。此外，在一些实施方式中，BBI被截短，其多至10个氨基酸残基从N-或C-端除去。本文所描述的同种型的任何一种，以及本领域已知的那些另外的同种型，在本发明中可用作支架。
本发明提供了相对于产生例如嵌合蛋白的若干优势。当例如目标蛋白结构域含有一种以上的重要生物活性时，转移完整的蛋白可能是困难的。维持一种活性(例如，功能上重要的结构域-结构域相互作用)而改变另一种活性(例如，与辅因子或受体的高亲和性结合)可能是有问题的。如本文所示，本发明克服了该局限，如在优选的实施方式中，环被转移，而不是完整的结构域。
此外，在一些实施方式中，除了上面列出的那些之外，本发明的化合物还包括至少一种突变。在一个或多个其它位置的其它突变例如缺失、插入、置换、颠换、转换和倒位，也可用于本发明。
在一些实施方式中，本发明的化合物还包括可以作为相似置换(like-for-likesubstitution)(例如，碱性置换碱性、酸性置换酸性、极性置换极性等等)发生的保守置换。在另外的实施方式中，非保守置换被提供(即，从一类残基置换为另一类残基，或可选地，涉及非天然氨基酸例如鸟氨酸、二氨基丁酸鸟氨酸、正亮氨酸鸟氨酸、吡啶丙氨酸、噻吩丙氨酸、萘丙氨酸和苯甘氨酸的纳入)。
在一些实施方式中，所述序列还具有氨基酸残基的缺失、插入和/或置换，其产生沉默改变并导致功能上等价的物质。
在一些实施方式中，基于氨基酸性质的相似性(例如，极性、电荷、溶解度、疏水性和/或残基的两性特征)，进行有目的的氨基酸置换，并且因此，按官能团将氨基酸分在一起是有用的。氨基酸残基可以仅仅基于它们的侧链的性质被分在一起。然而，更有用的是还包括突变数据。由于结构上的原因，这样衍生得到的氨基酸组可能是保守的。这些氨基酸组以维恩图解的形式加以描述(例如，参见Livingstone and Barton，Comput.Appl.Biosci..，9：745-756[1993]；和(Taylor，J.Theor.Biol.，119：205-218[1986])。在一些实施方式中，进行保守取代，例如根据下表进行，该表描述了被广泛接受的氨基酸的维恩图解分组。
| 组 | 亚组 | ||
| 疏水的 | FWYHKMILVAGC | 芳族的 | FWYH |
| 脂族的 | ILV | ||
| 极性的 | WYHKREDCSTNQ | 带电的 | HKRED |
| 带正电的 | HKR | ||
| 带负电的 | ED | ||
| 小的 | VCAGSPTND | 微小的 | AGS |
在一些实施方式中，除了氨基酸间隔子例如甘氨酸或β-丙氨酸之外，本发明的变体氨基酸序列还包括插入该序列的任何两个氨基酸残基之间的合适的间隔基团，包含烷基基团例如甲基、乙基或丙基基团。突变的进一步的形式包括以拟肽形式存在的一个或多个氨基酸残基。
在一些实施方式中，同源性比较可用于鉴定可用于本发明中的同源序列。同源性比较可以通过肉眼，或更通常地，在容易得到的序列比较程序的辅助下进行。可获得的计算机程序可以计算两个或多个序列之间的同源性百分比。此外，可以相对于连续序列计算同源性百分比(即，一个序列与其它序列联配，并且在一个序列中的每一个氨基酸序列每次直接与另一个序列中的相应氨基酸进行比较)。这称为“无空位(ungapped)”联配。通常，这样的无空位联配仅对相对短数目的残基进行。
尽管这是非常简单和一致的方法，但是它并未考虑到：例如，在其另外相同的一对序列中，一个插入或缺失将导致后面的氨基酸残基退出联配，从而当进行整体联配时，可能导致同源性百分比大幅下降。因此，大多数序列比较法都被设计成产生最优联配，其考虑了可能的插入和缺失而没有不当地对总同源性分值进行罚分。这通过在序列联配中插入“空位”来进行，以尽量最大化局部同源性。
然而，这些更复杂的方法对每一个在联配中出现的空位赋予“空位罚分”，使得对于相同氨基酸的数目相同的情况下，空位尽可能少的序列联配(即，反映两个比较的序列间更高的相关性)将获得比具有许多空位的联配更高的值。通常使用“仿射空位罚分(affine gap costs)”，其对于空位的存在承担相对高的罚分(costs)，而对于该空位中的每一个后续残基承担较小的罚分(penalty)。这是最常用的空位记分系统的一种。高空位罚分当然将产生优化的具有较少空位的联配。大多数联配程序允许修改空位罚分。然而，当使用这类序列比较软件时，优选使用默认值。例如，当使用GCG Wisconsin Bestfit软件包时，氨基酸序列的默认空位罚分对于空位是-12而对于每一个延伸是-4。
因此，最大同源性％的计算首先要求产生最优的联配，其中考虑了空位罚分。进行这样的联配的合适的计算机程序是GCG Wisconsin Bestfit软件包(例如，参见，Devereux et al.，Nuc.Acids Res.，12：387[1984])。可以进行序列比较的其它软件包的例子包括但不限于BLAST包、FASTA和比较工具的GENEWORKS程序组，所有这些都是本领域技术人员熟知的。BLAST和FASTA对于离线和在线检索都是可得的。然而，对于一些应用，优选使用GCG Bestfit程序。对于比较蛋白质和核酸序列，BLAST 2 Sequence包也是可得的。
尽管就同一性而言，最终的同源性百分比可以被测量，但是联配过程本身通常不基于全成对或不成对的比较(an all-or-nothing pair comparison)。实际上，成比例的相似性得分矩阵(scaled similarity score matrix)通常被使用，其基于化学相似性或进化距离赋予每一个配对比较分值。通常使用的这样的矩阵的一个例子是BLOSUM62矩阵--BLAST程序组的默认矩阵。GCG Wisconsin程序通常使用公用的默认值或者使用定制符号比较表(custom symbol comparisontable)，如果提供的话。对于一些应用，对于GCG包，优选使用公用默认值，或在其它软件的情况下，使用默认矩阵，例如BLOSUM62。
可选地，基于类似于CLUSTAL的算法，使用DNASISTM(Hitachi Software)中的多重联配特点，可以计算出同源性百分比(参见，例如Higgins and Sharp，Gene73：237-244[1988])。
一旦软件已经得到最优的联配，则计算同源性百分比是可能的，且更优选地，计算序列同一性的百分比。软件通常这样做，作为序列比较的一部分，并产生数字结果。
在一些实施方式中，本发明提供了编码任何本文所描述化合物的核酸，以及它们的互补核酸。在另外的优选实施方式中，本发明提供了如本文所述包含化合物的载体，包含该化合物的细胞和表达该化合物的方法。
本领域技术人员理解核酸序列和多肽序列之间的关系，特别是当涉及遗传密码和该密码的简并性时，并且将能够毫无困难地构建这样的核酸。例如，本领域技术人员知道，对于序列中的每一种氨基酸取代，存在一种或多种编码该取代氨基酸的密码子。因此，显然，对于该特定的氨基酸残基，取决于遗传密码的简并性，可以产生相应于该多肽序列的一种或多种核酸序列。
如本领域所知，通过许多技术的任何一种，可以进行氨基酸序列和核酸序列中的突变。在特别优选的实施方式中，使用合适的引物，通过PCR(聚合酶链式反应)，突变被引入亲代序列。在一些实施方式中，亲代酶在氨基酸水平上被修饰，而在其它实施方式中，该酶在核酸水平上被修饰，以产生本文所描述的序列。在一些优选的实施方式中，通过在编码化合物的核苷酸序列中引入一个或多个相应的密码子改变，本发明提供了化合物的产生。将被理解的，上述的密码子改变将可用于本发明的各种核酸序列。例如，在一些实施方式中，对本文所描述的任何同源序列进行序列改变。
如上所述，在一些实施方式中，所述“化合物(compound)”包括“完整的”蛋白质(即，以其天然存在时(或突变时)的全长蛋白质)，而在其它实施方式中，它包括截短形式的蛋白质。因此，本发明的化合物或者被截短的或者是“全长”的。此外，在一些实施方式中，截短位于N末端，而在其它实施方式中，截短位于蛋白质的C末端。在进一步的实施方式中，化合物缺失一个或多个部分(例如，亚序列、信号序列、结构域或部分)--活性或无活性的。
在仍进一步可选的实施方式中，编码所述化合物的核苷酸序列通过已建立的标准方法进行合成制备(例如，Beucage et al.，Tetrahedr.Lett.，22：1859-1869[1981]描述的氨基磷酸盐法；或Matthes et al.，EMBO J.，3：801-805[1984]描述的方法)。在氨基磷酸盐法中，寡核苷酸被合成(例如，在自动DNA合成仪中)、纯化、退火、连接和克隆进合适的载体。
在本发明的一些实施方式中，核苷酸序列或者是混合的基因组和合成来源、混合的合成和cDNA来源或者混合的基因组和cDNA来源，其通过根据标准技术连接合成的、基因组的或cDNA来源的片段而制备。每一个连接的片段对应于整个核苷酸序列的各个部分。在一些实施方式中，使用具体的引物，通过聚合酶链式反应(PCR)，制备该DNA序列，如本领域所知。
在一些实施方式中，在本文所描述的并适用于本文所描述的方法和组合物中的核苷酸序列中，包括合成或修饰的核苷酸。对寡核苷酸的许多不同类型的修饰在本领域中是已知的。这些修饰包括但不限于甲基膦酸酯和硫代磷酸酯骨架和/或在该分子的3’和/或5’端添加吖啶或聚赖氨酸链。然而，本发明不意图限于任何特定方法，因为本领域技术人员已知用于修饰核苷酸序列的任何合适的方法可用于本发明中。在一些实施方式中，为了增强核苷酸序列的体内活性和/或寿命，进行这些修饰。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了核苷酸序列以及使用与本文所描述的序列互补的核苷酸序列以及这些序列的衍生物和/或片段的方法。
在一些实施方式中，本发明的多核苷酸可用于引物和/或探针的产生。因此，在一些实施方式中，多核苷酸序列被用于产生PCR引物、用于本领域已知的其它扩增方法的引物、标记的探针和/或用于克隆法。在优选的实施方式中，这些引物、探针和其它片段为至少15个核苷酸，优选至少20个核苷酸，而在一些更优选的实施方式中，至少25、30或40个核苷酸。此外，这些引物、探针和片段被包括在术语“多核苷酸”内。
在一些实施方式中，多核苷酸例如DNA多核苷酸和探针被重组产生，而在其它实施方式中，它们被合成产生。在另外的实施方式中，使用标准方法，克隆这些序列。一般而言，引物通过合成的手段产生，包括每次一个核苷酸逐步产生期望的核酸序列。使用自动化技术实现这一目的的技术是本领域可获得的。然而，本发明不意图受限于使用任何特定的方法产生多核苷酸，因为本领域技术人员已知的任何合适的方法都可用于本发明中。
在一些实施方式中，较长的多核苷酸通常使用重组方法产生，例如使用PCR克隆技术，如本领域所已知的。在这样的实施方式中，因为通常被设计成含有合适的限制酶识别位点，以便扩增的DNA可以被容易克隆到合适的克隆载体中。优选地，变体序列具有至少与本文所描述的序列相同的生物学活性。
在一些优选的实施方式中，所提供的序列互补于能够与所述化合物的核苷酸序列(包括本文所描述的那些的互补序列)杂交的化合物或序列，以及与可以杂交到所述化合物的核苷酸序列(包括本文所描述的那些的互补序列)的序列互补的核苷酸序列。在一些优选的实施方式中，提供了能够在中等到最大严紧条件下与本文所描述的多核苷酸序列杂交的多核苷酸序列。
在一些优选的实施方式中，提供了可以在严紧条件下(例如，50℃和0.2×SSC)与化合物核酸的核苷酸序列或其互补序列杂交的核苷酸序列。更优选地，该核苷酸序列可以在更高的严紧条件下(例如，65℃和0.1×SSC)与化合物的核苷酸序列或其互补序列杂交。
在一些实施方式中，为了制备化合物，突变所述序列是期望的。因此，在一些实施方式中，从本文提供的化合物制备突变体。在一些实施方式中，利用合成的寡核苷酸，引入突变。这些寡核苷酸含有在期望的突变位置侧翼的核苷酸序列。本领域已知的各种方法可用于本实施方式中(参见，例如Morinaga et al.，Biotechnol.，2：646-649[1984]；Nelson and Long，Anal.Biochem.，180：147-151[1989]；和Sarkar and Sommer，Biotechn.，8：404-407[1990])。然而，另外的方法可用于本发明中，并且本发明不意图限制于任何特定的方法。
在一些优选的实施方式中，在本文中描述的方法和组合物中使用的序列是重组序列(即，使用重组DNA技术制备的序列)，其使用本领域已知的任何合适的方法产生。
在另外的实施方式中，本发明提供了包括所述化合物的载体、包括所述化合物的细胞、和表达所述化合物的方法。在一些实施方式中，在本文所描述的方法和组合物中使用的核苷酸序列被整合入重组可复制载体。在一些实施方式中，所述载体被用于以酶的形式，在相容的宿主细胞中和/或从相容的宿主细胞，复制和表达核苷酸序列。在一些实施方式中，使用调控序列(例如，调节序列)调控表达。在一些实施方式中，由宿主细胞通过核苷酸序列的表达而产生的蛋白质被分泌(即，进入生长培养基中)，而在其它实施方式中，该蛋白被包含在宿主细胞的胞质中。在一些实施方式中，编码序列被设计成包括信号序列，该信号序列指导物质编码序列分泌通过特定的原核或真核细胞膜。在进一步的实施方式中，多核苷酸被整合入重组可复制载体中。在另外的实施方式中，载体被用于在相容的宿主细胞中复制核酸。在优选的实施方式中，包括该多核苷酸的载体被转化入合适的宿主细胞中。尽管任何合适的宿主可用于本发明中，但是在一些优选的实施方式中，宿主选自细菌、酵母、昆虫、真菌和哺乳动物细胞。
在一些实施方式中，通过下述步骤表达化合物和它们的多核苷酸：将多核苷酸导入可复制的载体中，将所述载体导入相容的宿主细胞中，并在导致所述载体复制的条件下培养所述宿主细胞。在一些实施方式中，所述载体从宿主细胞中回收。
在另外的实施方式中，化合物核酸被可操纵性地连接到在宿主细胞中具有活性的转录和翻译调节元件。在一些实施方式中，所述化合物核酸还编码含有至少一个信号序列的融合蛋白(例如，衍生于来自西方施旺酵母(Schwanniomycesoccidentalis)的葡糖淀粉酶基因、来自酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α-因子交配型基因和来自米曲霉(Aspergillus oryzae)的TAKA-淀粉酶的那些信号序列)。在进一步可选的实施方式中，所述化合物核酸编码含有膜结合域的融合蛋白。
在一些优选的实施方式中，使用表达载体，所述化合物在宿主生物体中以期望的水平表达。可以预期，任何含有化合物核酸的表达载体可用于本发明中，该表达载体能够在所选择的宿主生物体中表达编码所述化合物核酸的基因。载体的选择取决于其将被引入的宿主细胞。因此，在一些实施方式中，所述载体是自主复制载体(即，以附加型实体存在的载体，该载体的复制独立于染色体复制，例如，诸如质粒、噬菌体或附加型元件、微型染色体或人工染色体)。可选地，在一些实施方式中，载体整合入宿主细胞基因组中并与染色体一起复制。
在一些优选的实施方式中，表达载体包括克隆载体的成分，包括但不限于这样的成分，如允许载体在选择的宿主生物体中自主复制的元件以及一种或多种用于选择目的的表型可检测标记。在优选的实施方式中，表达载体进一步包括编码启动子、操纵子、核糖体结合位点、翻译起始信号、和任选的阻抑基因或一种或多种激活子基因的核苷酸调控序列。另外，在一些实施方式中，表达载体包括这样的序列，该序列编码能够使所述化合物靶向宿主细胞细胞器例如过氧化物酶体或靶向特定宿主细胞区室的氨基酸序列。这样的靶向序列包括但不限于序列SKL。对于在调控序列指导下的表达，编码所述化合物的核酸序列以对于表达适当的方式可操纵性地连接到所述调控序列。
在一些优选的实施方式中，载体中的多核苷酸被可操纵性地连接到调控序列，该调控序列能够提供由宿主细胞进行的编码序列的表达(即，载体是表达载体)。在一些实施方式中，调控序列被修饰(例如，通过添加进一步的转录调节元件)，以便由调控序列指导的转录水平对转录调节剂作出更大的响应。在一些优选的实施方式中，调控序列包括启动子。
在载体的一些优选实施方式中，编码所述化合物的核酸序列被可操纵性地与合适的启动子序列结合。该启动子可以是在所选择的宿主生物体中具有转录活性的任何DNA序列，并且可以衍生自与宿主生物体同源或异源的基因。指导修饰的核苷酸序列例如化合物核酸在细菌宿主中转录的合适的启动子例子包括但不限于大肠杆菌的lac操纵子的启动子、天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)琼脂糖酶基因dagA启动子、藓样芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)α-淀粉酶基因(amyL)的启动子、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的aprE启动子、嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)生麦芽糖淀粉酶基因(amyM)的启动子、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)α-淀粉酶基因(amyQ)的启动子、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)xylA和xylB基因的启动子以及衍生自乳球菌属某种(Lactococcus sp.)衍生启动子的启动子，包括P170启动子。当编码所述化合物的基因在细菌菌种例如大肠杆菌中表达时，合适的启动子选自，例如，噬菌体启动子，包括T7启动子和λ噬菌体启动子。对于在真菌菌种中的转录，有用的启动子的例子是衍生自编码米曲霉TAKA淀粉酶、米赫根毛霉(Rhizomucor miehei)天冬氨酸蛋白酶、黑曲霉(A.niger)中性α-淀粉酶、黑曲酶酸稳定α-淀粉酶、黑曲酶葡糖淀粉酶、米赫根毛霉脂肪酶、米曲霉碱性蛋白酶、米曲霉磷酸丙糖异构酶、和构巢曲霉(A.nidulans)乙酰胺酶的基因的那些启动子。在酵母菌种中表达的合适启动子的例子包括但不限于酿酒酵母的Gal 1和Gal 10启动子以及巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)AOX1或AOX2启动子。
合适的细菌宿主生物体的例子是格兰氏阳性菌种，包括但不限于芽孢杆菌科(Bacillaceae)(例如，枯草芽孢杆菌、藓样芽孢杆菌、缓慢芽孢杆菌(B.lentus)、短小芽胞杆菌(B.brevis)、嗜热脂肪芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌(B.alkalophilus)、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌(B.coagulans)、B.lautus、巨大芽孢杆菌(B.megaterium)、和结核芽孢杆菌(B.thuringiensis))、链霉菌属(Streptomyces)的种(例如，鼠乳链霉菌(S.murinus)和变铅青链霉菌(S.lividans))、乳酸细菌(lacticacid bacteria)(例如，乳球菌属某些种(Lactococcus spp.)例如乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)；乳杆菌属某些种(Lactobacillus spp.)包括罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)；明串珠菌属某些种(Leuconostoc spp.)；片球菌属某些种(Pediococcus spp.)；以及链球菌属某些种(Streptococcus spp.))的成员。可选地，属于肠杆菌科(Enterobacteriaceae)(例如大肠杆菌)或假单孢菌科(Pseudomonadaceae)成员的格兰氏阴性种的菌株可用于本发明中。
在一些实施方式中，合适的酵母宿主生物体选自各种生物技术上有用的酵母菌种，包括但不限于毕赤酵母属某种(Pichia sp)、汉森酵母属某种(Hansenulasp)或克鲁维酵母属(Kluyveromyces)、Yarrowinia、酵母属(例如酿酒酵母)、裂殖酵母属(Schizosaccharomyce)(例如，粟酒裂殖酵母(S.pombe)。在一些实施方式中，甲基营养酵母菌种巴斯德毕赤酵母的菌株被用作宿主生物体，而在其它实施方式中，宿主微生物是汉森酵母菌种。丝状真菌中合适的宿主微生物包括曲酶属菌株(例如，黑曲酶、米曲酶、A.tubigensis、泡盛曲霉(A.awamori)和构巢曲霉)。可选地，镰刀菌属(Fusarium)种(例如，尖孢镰刀菌(F.oxysporum))和根毛霉菌属(Rhizomucor)(例如，米赫根毛霉)的菌株可用作宿主生物体。另外的合适的菌株包括但不限于嗜热真菌属(Thermomyces)和毛霉菌属(Mucor)菌种。
在一些优选的实施方式中，含有多核苷酸的宿主细胞被用于表达多肽，例如本文公开的化合物、其片段、同源物、变体或衍生物。在允许该蛋白质表达的合适条件下培养宿主细胞。在一些实施方式中，多肽的表达是组成型的(即，肽被连续产生)，而在其它实施方式中，表达是诱导型的。在诱导型表达的情况下，当需要时通过向培养基加入诱导物(例如地塞米松或IPTG)，起始蛋白质产生。通过本领域已知的多种技术，可以从宿主细胞中提取多肽，包括酶裂解、化学裂解和/或渗透裂解和物理破碎。实际上，本发明不意图受限于任何特定的收获表达多肽的方法。
在可选的实施方式中，在任何合适的(包括商购可得的)体外无细胞系统例如TnTTM(Promega)兔网织红细胞系统中，重组产生多肽。
在另外的优选实施方式中，本发明提供了化妆品和/或药物组合物，其包括至少一种本文所描述的多肽或肽以及生理学上可接受的载体或赋形剂。优选地，所述化合物以按重量计基于所述组合物的总重量约0.0001％到约5％的量存在。同样优选地，所述化合物以按重量计基于所述组合物的总重量约0.001％到约0.5％的量存在。所述化合物可以是乳化载体的形式，例如营养膏或营养液、稳定化的凝胶或分散体系、护理精华素、脂质体输送体系、局部包裹或面膜、表面活性剂基清洁体系例如香波或沐浴露、烟雾化或喷雾的分散体或乳液、毛发或皮肤调节剂、定型助剂、或彩色产品例如美容产品。优选地，所述载体是至少一种选自水、丙二醇、乙醇、丙醇、丙三醇、丁二醇和聚乙二醇的化合物。
在一些脂质体实施方式中，脂质体包括水和一种或多种能够形成脂双层囊的成分，该脂双层囊能够保持住一种或更多种功能性或活性成分。能够形成脂双层囊的成分的非限制性例子包括：磷脂、氢化磷脂酰胆碱、卵磷脂、胆固醇和鞘脂。优选的脂质体非限制性地包括：a)类脂脂质体0003(由水与卵磷脂和甘油组成)；b)类脂脂质体0300(由水、和磷脂酰胆碱组成)；c)类脂脂质体0111(由水、银杏(Ginkgo biloba)叶提取物、变性醇、氢化卵磷脂和胆固醇组成)；d)抗刺激物脂质体(由水、可乐果提取物、红没药醇和磷脂组成)；e)维生素C和E脂质体(由水、磷脂、醋酸生育酚和抗坏血酸棕榈酸酯组成)；f)紧肤脂质体(firming liposomes)(由水丁二醇、苹果(pyrus malus)(苹果)果实提取物、磷脂、醋酸生育酚和卡波姆组成)；以及g)保湿脂质体(由水、PCA钠、醋酸生育酚(tocopheryl acetate)、黄原酸胶、精氨酸、赖氨酸、甘氨酸和脯氨酸组成)。
在其它实施方式中，除了本文所提供的支架外，本发明的个人护理组合物进一步包括至少一种活性成分。存在许多本领域技术人员已知的活性成分，它们可用于本发明的个人护理组合物。实际上，可以预期，任何合适的活性成分或合适的活性成分的组合将可用于本发明中(参见，例如McCutcheon’s Functional Materials，North American and International Editions，published by MC Publishing Co.[2003])。例如，在一些实施方式中，本文所描述的个人护理组合物包括在按组合物的重量计从约0.0001％到约20％的水平下的护肤活性成分。在另一个实施方式中，所述个人护理组合物包括在按组合物的重量计从约0.001％到约5％的水平下的护肤活性成分。在又一个实施方式中，所述个人护理组合物包括在按组合物的重量计从约0.01％到约2％的水平下的护肤活性成分。
可以通过脂质体输送的功能性或活性成分的非限制性例子包括：维生素和它们的衍生物、抗氧化剂、蛋白质和肽、角质分离剂、生物类黄酮、类萜、植物化学剂、以及植物、海洋或发酵来源的抽提物。在优选的实施方式中，所述组合物进一步包括护肤或护发活性物。活性成分可以包括很多种成分例如本领域已知的成分中的任何一种。(参见，例如McCutcheon’s Functional Materials，NorthAmerican and International Editions，(2003)，由MC Publishing Co.出版)。优选地，此类活性物包括但不限于抗氧化剂，例如生育酚和抗坏血酸衍生物；生物类黄酮；类萜；合成物和类似物；维生素和维生素衍生物；羟基和多羟基酸和它们的衍生物，例如AHA和BHA和它们的反应产物；肽和多肽及它们的衍生物，例如糖肽和亲脂化肽；热休克蛋白和细胞因子；酶和酶抑制剂及它们的衍生物，例如蛋白酶、MMP抑制剂、过氧化氢酶、葡萄糖氧化酶和过氧化物岐化酶；氨基酸和它们的衍生物；细菌、真菌和酵母发酵产物及它们的衍生物，包括蘑菇、藻类和海藻及它们的衍生物；植物甾醇类和植物和植物部分抽提物和它们的衍生物以及磷脂和它们的衍生物；去屑剂例如2-巯基吡啶氧化锌以及含有它们的输送系统，如本文所提供和/或本领域所已知。
在一些优选的实施方式中，护肤活性物选自维生素B3组分、泛醇、维生素E、维生素E乙酸盐、视黄醇、丙酸视黄酯、棕榈酸视黄酯、视黄酸、维生素C、可可碱、α-羟基酸、法呢醇、植三醇、水杨酸、棕榈基五肽-3以及它们的混合物。在一些优选的实施方式中，维生素B3组分是烟酰胺。在一些实施方式中，本文提供的组合物包括护肤活性物，其在按重量计约从0.0001％到约20％的水平下，优选从约0.001％到约5％，更优选从约0.01％到约2％。
前述的维生素B3化合物的示例性衍生物包括烟酸酯，包括烟酸的非血管舒张酯、烟酰氨基酸、羧酸的烟酰醇酯、烟酸N-氧化物和烟酰胺N-氧化物。合适的烟酸酯包括C1-C22醇，优选C1-C16醇，更优选C1-C6醇的烟酸酯。在这些实施方式中，醇适宜是直链或支链的、环状或非环状的、饱和或未饱和的(包括芳族的)、以及取代或非取代的。酯优选是非血管舒张性的。
非血管舒张性的烟酸的酯包括生育酚烟酸酯和六烟酸肌醇酯；生育酚烟酸酯是优选的。对维生素B3化合物的更完整的描述被提供在WO98/22085中。优选的维生素B3化合物包括烟酰胺和生育酚烟酸酯。
在另外的实施方式中，护肤活性物包括至少一种类视黄醇。类视黄醇优选是视黄醇、类视黄醇酯(例如，视黄醇的C2-C22烷基酯，包括棕榈酸视黄酯、乙酸视黄酯、丙酸视黄酯)、视黄醛和/或视黄酸(包括所有反式视黄酸和/或13-顺式视黄酸)，更优选除了视黄酸之外的类视黄醇。这些化合物在本领域是已知的，并且可从许多来源获得(例如Sigma和Boehringer Mannheim)。优选的类视黄醇包括视黄醇、棕榈酸视黄酯、乙酸视黄酯、丙酸视黄酯、视黄醛、视黄酸和它们的组合。更优选的是视黄醇、丙酸视黄酯、视黄酸和棕榈酸视黄酯。在一些实施方式中，类视黄醇作为基本上纯的物质被包括在内，而在其它实施方式中，其作为通过天然(例如，植物)来源的合适的物理和/或化学分离获得的提取物而被提供。当类视黄醇被包括在本文的组合物中时，它优选包括从约0.005％到约2％，优选从约0.01％到约1％的类视黄醇。视黄醇优选以从约0.01％到约0.15％的量使用；视黄醇酯优选以约0.01％到约2％(例如约1％)的量使用。
在一些实施方式中，本发明的组合物包括安全和有效量的皮肤病学上可接受的载体，其适于局部应用到皮肤或毛发，其中必需材料和任选的其它材料被掺入，以使得必需材料和任何的成分能够以合适的浓度被输送到皮肤或毛发中。因此，在一些实施方式中，载体作为必需组分的稀释剂、分散剂、溶剂或类似物起作用，确保这些组分可以以合适的浓度被均匀地应用和分散到所选择的靶上。
在进一步的实施方式中，有效量的一种或更多种本文描述的化合物也被包括在将被施用到角质化物质例如指甲或头发的组合物中，包括但不限于可用作头发喷雾组合物、头发定型组合物、头发香波和/或调理组合物、为了毛发生长调节的目的施用的组合物以及为了治疗皮脂溢、皮炎和/或头皮屑的目的而施用到头发和头皮的组合物的那些。
在另外的实施方式中，有效量的一种或更多种本文描述的化合物被包括在适于局部应用到皮肤或毛发的组合物中。这些组合物以任何合适的形式提供，包括但不限于霜、洗液、凝胶、悬浮分散体、微乳液、纳米分散体、微球体、水凝胶、乳液(例如，水包油和油包水，以及多重乳液)、多层凝胶和类似形式(参见，例如，Schlossman et al.，The Chemistry and Manufacture of Cosmetics，其并入本文作为参考)。在一些实施方式中，组合物被配制为含水或硅氧烷组合物，而在其它实施方式中，它们被配制成一个或多个油相在水连续相中的乳液(或水相在油相中)。
在本发明中使用的载体类型取决于组合物期望的产品形式的类型。载体可以是固体、半固体或液体。合适的载体包括液体、半固体(例如，霜、洗剂、凝胶、棒(sticks)、油膏和膏)、喷雾剂和摩丝。优选地，载体是洗剂、霜或凝胶的形式，更优选地，具有足够的稠度或屈服点以阻止颗粒沉积的形式。在一些实施方式中，载体是惰性的，而在其它实施方式中，它提供皮肤病学上的益处。在一些实施方式中，载体被直接应用到皮肤和/或毛发上，而在其它实施方式中，其通过织造或非织造的抹布(wipe)或布施用。在其它实施方式中，它是贴剂、面膜或包裹物的形式。在仍进一步的实施方式中，其被气溶胶化或另外喷雾或泵送到皮肤和/或毛发上。所选择的载体与本文所描述的必需成分在物理和化学上是相容的，并且应当不过度损害稳定性、效率或其它与本发明的组合物相关的使用益处。
优选的载体含有皮肤病学上可接受的亲水性稀释剂。合适的亲水稀释剂包括水、有机亲水稀释剂例如C2-C10一元醇、优选C2-C6一元醇、优选C3-C6一元醇以及低分子量的二元醇和多元醇，包括丙三醇、聚乙二醇、聚丙二醇、丙三醇、丁二醇、1，2，4-丁三醇、山梨醇酯、1，2，6-己三醇、戊二醇、己二醇、山梨醇酯、乙氧基化醚、丙氧基化醚、和它们的组合。稀释剂优选是液体。水是优选的稀释剂。组合物优选包括至少约20％的亲水稀释剂。
在一些实施方式中，合适的载体还包括乳液，其包含亲水相--特别是水相--以及疏水相(例如，脂类、油或含油物质)。如本领域技术人员已知的，亲水相被分散在疏水相中，或反之亦然，以分别形成亲水或疏水分散相和连续相，这取决于成分的组成。术语“分散相”是乳液技术领域的技术人员熟知的术语，其当涉及以小颗粒或小滴存在的相时被使用，所述小颗粒或小滴悬浮在连续相中并被连续相包围。分散相也被称为内部或不连续相。乳液可以是或包括(例如，以三相乳液或其它多相乳液的形式)水包油乳液或油包水乳液例如硅氧烷包水乳液。水包油乳液通常包括约1％到约60％(优选约1％到约30％)的分散的疏水相和约1％到约99％(优选约10％到约90％)的连续亲水相，而油包水乳液通常包括约1％到约98％(优选约40％到约90％)的分散的亲水相和约1％到约50％(优选约1％到约30％)的连续疏水相。
在进一步的实施方式中，载体还包括一种或多种促进渗透通过上层角质层屏障到达皮肤深层的组分。渗透增强剂的例子包括但不限于丙二醇、偶氮酮、乙氧基二甘醇、二甲基异山梨醇、脲、乙醇和二甲亚砜，以及微乳液、脂质体、和纳米乳液。
在一些另外的实施方式中，本发明的组合物包括湿润剂，其优选以从约0.01％到约20％的水平存在，优选从约0.1％到约15％以及优选从约0.5％到约10％的水平存在。优选的湿润剂包括但不限于选自多元醇、山梨醇、丙三醇、脲、甜菜碱、D-泛醇、DL-醇、泛酸钠、蜂王胶、panthetine、泛酰巯基乙胺、泛醇基乙基醚、潘氨酸、吡哆素、泛酰乳糖维生素B复合物、吡咯烷酮羧酸钠、己烷-1，2，6-三醇、胍或其衍生物、以及它们的混合物。
在本文中使用的合适的多元醇包括但不限于聚亚烷基二醇并优选亚烷基二醇和它们的衍生物，包括丙二醇、双丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇及其衍生物、山梨醇、羟基丙基山梨醇、赤藓醇、苏糖醇、季戊四醇、木糖醇、葡萄糖醇、甘露醇、戊二醇、己二醇、丁二醇(例如，1，3-丁二醇)、己三醇(例如，1，2，6-己三醇)、三甲醇丙烷、新戊二醇、丙三醇、乙氧基丙三醇、丙烷-1，3-二醇、丙氧基化丙三醇以及它们的混合物。任何上述多元醇的烷氧基化衍生物也适于在本文中使用。本发明优选的多元醇选自丙三醇、丁二醇、丙二醇、戊二醇、己二醇、双丙甘醇、聚乙二醇、己三醇、乙氧基化丙三醇和丙氧基化丙三醇以及它们的混合物。
本文中可用的合适的湿润剂是2-吡咯烷酮-5-羧酸钠(NaPCA)、胍；乙醇酸和乙醇酸盐(例如，铵和烷基季铵)；乳酸和乳酸盐(例如，铵和烷基季铵)；以其任何合适形式的芦荟(例如，芦荟胶)；透明质酸及其衍生物(例如，盐衍生物例如透明质酸钠)；乳酰胺单乙醇胺；乙酰胺单乙醇胺；脲；甜菜碱；泛醇及其衍生物；以及它们的混合物。
在一些实施方式中，至少部分(按组合物的重量计可达约5％)湿润剂以与微粒的交联疏水丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯共聚物的混合物的形式被掺入本发明的组合物中，微粒的交联疏水丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯共聚物本身优选以约0.1％到约10％的量存在，其可以被添加到水相或分散相中。该共聚物对于降低光泽和控制油同时帮助提供有效的湿润益处是特别有价值的，并且在WO96/03964被进一步详细描述，其并入本文作为参考。
在一些实施方式中，本发明的水包油和油包水组合物包括约0.05％到约20％，优选从约1％到约15％，优选从约2％到约10％，优选从约2％到约5％的皮肤病学可接受的润肤剂。润肤剂易于润滑皮肤、增加皮肤的平滑度和柔软度、防止或减轻皮肤干燥和/或保护皮肤。润肤剂通常是水不混溶的、油质或蜡质材料，并且润肤剂可以赋予局部组合物美感性能。很多种合适的润肤剂是已知的(参见，例如Sagarin，Cosmetics，Science and Technology，2nd Edition，Vol.1，pp.32-43[1972]；和WO00/24372)，并可用于本文中，含有许多适合作为润肤剂的材料的例子。另外的润肤剂包括但不限于下列：
i)具有约7个到约40个碳原子的支链和支链烃，例如矿物油、十二烷、角鲨烷、胆固醇、氢化聚异丁烯、异十六烷、异二十烷、异六十八烷(isooctahexacontane)、isohexapentacontahectane、以及C7-C40异链烷烃，其是C7-C40支化烃。可用于本文中的合适的支链烃选自isopentacontaoctactane、矿脂以及它们的混合物；
ii)C1-C30羧酸的C1-C30脂肪酸酯、C12-15烷基苯甲酸酯和C2-C30二羧酸的C1-C30脂肪酸酯，例如，异壬酸异壬酯、新戊酸异硬脂酰酯、丙酸异癸酯、异壬酸异癸酯、异壬酸三癸酯、辛酸十四酯、壬酸辛酯、异壬酸辛酯、十四酸十四酯、新戊酸十四酯、辛酸十四酯、十四酸异丙酯、丙酸十四酯、硬脂酸异丙酯、异硬脂酸异丙酯、异硬脂酸甲酯、山嵛酸山嵛酯、马来酸二辛酯、己二酸二异丙酯和二亚油酸二异丙酸酯以及它们的混合物也可用于本发明中；
iii)糖类和相关物质的C1-C30单酯和多酯。这些酯衍生自糖或多元醇部分以及一种或多种羧酸部分。取决于组成的酸和糖，这些酯在室温下可以是液体或固体形式。例子包括：四油酸葡萄糖酯(glucose tetraoleate)、油酸的半乳糖四酯、四油酸山梨醇酯、四油酸蔗糖酯、五油酸蔗糖酯、六油酸蔗糖酯、七油酸蔗糖酯、八油酸蔗糖酯、山梨醇六酯。其它材料包括蔗糖的棉子油或大豆油脂肪酸酯。这类材料的其它例子描述于WO96/16636，其并入本文作为参考；
iv)植物油和氢化植物油。植物油和氢化植物油的例子包括红花油、葡萄子油、椰油、棉子油、鲱油、棕榈仁油、棕榈油、花生油、大豆油、菜子油、亚麻子油、米糠油、松油、胡桃油、芝麻油、向日葵籽油、前述来源的部分和全部氢化油以及它们的混合物；
v)可溶的或胶状可溶的保湿剂。例子包括透明质酸和硫酸软骨素。
在一些实施方式中，本发明的组合物含有乳化剂和/或表面活性剂，通常为了在连续水相中帮助分散和悬浮分散相。如果产品计划用于皮肤或毛发清洁，表面活性剂也是有用的。为了在下文方便起见，“乳化剂”被包括在术语“表面活性剂”中。因此，如本文所使用，术语“表面活性剂(surfacant)”是指具有表面活性的试剂(surface active agent)，其或用作乳化剂或用于其它表面活性剂目的，例如皮肤清洁。已知的表面活性剂包括常规表面活性剂可用于本发明中，条件是所选择的制剂与所述组合物的必需组分在物理和化学上相容并提供期望的特性(参见，例如WO00/24372)。合适的表面活性剂包括非硅氧烷衍生材料、硅氧烷衍生材料、以及它们的混合物。
在进一步的实施方式中，本发明的组合物优选包括约0.05％到约30％，更优选从约0.5％到约15％，以及最优选从约1％到约10％的表面活性剂或表面活性剂的混合物。所选择的确切表面活性剂或表面活性剂混合物取决于组合物的pH、存在的其它组分以及期望的最终产物美感。
在本文中有用的非离子型表面活性剂是那些可以被宽广地定义成长链醇(例如，C8-C30醇)与糖或淀粉聚合物(例如，糖苷)的缩合产物的表面活性剂。其它有用的非离子型表面活性剂包括环氧烷与脂肪酸的缩合产物(即，脂肪酸的环氧烷酯)。这些材料具有通式RCO(X)nOH，其中R是C10-30烷基基团，X是-OCH2CH2-(即衍生自乙二醇或环氧乙烷)或-OCH2CHCH3-(即，衍生自丙二醇或环氧丙烷)，而n是从约6到约200的整数。其它非离子型表面活性剂是环氧烷与2摩尔脂肪酸的缩合产物(即，脂肪酸的环氧烷二酯)。这些材料具有通式RCO(X)nOOCR，其中R是C10-30烷基基团，X是-OCH2CH2-(即衍生自乙二醇或环氧乙烷)或-OCH2CHCH3-(即，衍生自丙二醇或环氧丙烷)，而n是从约6到约100的整数。在一些实施方式中，可用于本文的乳化剂优选是基于脱水山梨糖醇脂肪酸酯和蔗糖脂肪酸酯混合物的脂肪酸酯掺合物，特别是山梨糖醇硬脂酸酯和蔗糖可可酯的掺合物。进一步的合适的例子包括鲸腊醇(cetearyl alcohol)和鲸蜡基葡糖苷(cetearyl glucoside)的混合物。然而，本发明不意图受限于任何特定的乳化剂，因为各种合适的乳化剂是本领域已知的。
在另外的实施方式中，在本文中有用的亲水表面活性剂可选地或另外包括很多种阳离子、阴离子、两性离子和两性表面活性剂中的任何一种，例如本领域已知的表面活性剂(参见，例如McCutcheon′s，Emulsifiers and Detergents，NorthAmerican and International Editions，MC Publishing Co.[2003]；美国专利第5,011,681号、美国专利第4,421,769号；以及美国专利第3,755,560号)。
各种阴离子表面活性剂在本文中也是有用的(参见，例如美国专利第3,929,678号)。示例性的阴离子表面活性剂包括但不限于烷氧基羟乙基磺酸盐(例如，C12-C30)、烷基和烷基醚硫酸及其盐、烷基和烷基醚磷酸及其盐、烷基甲基牛磺酸酯(例如，C12-C30)以及脂肪酸的皂(例如，取代的烷基胺和碱金属盐，例如钠盐或钾盐)。
两性和两性离子型表面活性剂在本文中也是有用的。可用于本发明的组合物的优选的两性和两性离子型表面活性剂的例子是被广泛描述为脂肪族仲胺和叔胺的衍生物的那些，其中脂族基团可以是直链或支链，并且其中脂族取代基之一含有大约8至大约22个碳原子(优选C8-C18)，并且一种含有阴离子水溶解性基团(例如，羧基、磺酸盐、硫酸盐、磷酸盐或膦酸盐)。例子，包括但不限于烷基亚氨基乙酸盐和亚氨基二链烷酸盐以及氨基链烷酸盐、咪唑啉
盐和铵衍生物。其它合适的两性和两性离子型表面活性剂选自甜菜碱、磺基甜菜碱、羟基磺基甜菜碱、和支化和未支化的烷酰基肌氨酸盐(或酯)、以及它们的混合物。
在一些实施方式中，本发明的一些乳化剂包括含有硅氧烷的乳化剂或表面活性剂。各种硅氧烷乳化剂在本文中是有用的。这些硅氧烷乳化剂典型地为有机改性的有机聚硅氧烷，也被本领域技术人员已知为硅氧烷表面活性剂。有用的硅氧烷乳化剂包括但不限于二甲基硅氧烷共聚物。这些物质为聚二甲基硅氧烷，其已被改性从而包括聚醚侧链例如聚环氧乙烷链、聚环氧丙烷链、这些链的混合物以及含有从环氧乙烷和环氧丙烷衍生的部分的聚醚链。其它例子包括烷基改性的二甲基硅氧烷共聚醇(即，含有C2-C30侧链的化合物)。而其它有用的二甲基硅氧烷共聚醇包括含有各种阳离子、阴离子、两性离子的、和两性(兼性)离子的侧链部分的物质。
在一些实施方式中，本发明的组合物包括至少一种高分子增稠剂。本文中有用的高分子增稠剂优选具有在约20,000以上，更优选约50,000以上，以及最优选约100,000以上的数均分子量。在一些实施方式中，按组合物的重量计，本发明的组合物包括从约0.01％到约10％，优选从约0.1％到约8％以及更优选从约0.2％到约5％的高分子增稠剂或其混合物。
本文中可用的优选的高分子增稠剂包括但不限于非离子型增稠剂和阴离子型增稠剂或它们的混合物。合适的非离子型增稠剂包括但不限于聚丙烯酰胺聚合物、交联的聚(N-乙烯吡咯烷酮)、多糖、天然或合成树胶、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙烯醇。合适的阴离子增稠剂包括但不限于丙烯酸/丙烯酸乙酯共聚物、羧基乙烯基聚合物以及烷基乙烯基醚和马来酸酐的交联共聚物。商购可得的增稠剂(例如，Carbopol；Noveon)可用于本发明的一些实施方式中。合适的Carbopol树脂可以进行疏水性改性，而其它合适的树脂或其混合物在WO98/22085中进行描述。
在一些实施方式中，本组合物包括至少一种硅氧烷油相。硅氧烷油相通常占该组合物的约0.1％到约20％，优选从约0.5％到约10％，以及更优选从约0.5％到约5％。该硅氧烷油相优选包括一种或更多种硅氧烷组分。
在一些实施方式中，硅氧烷组分是流体，包括直链、支化和环状的硅氧烷。本文中合适的硅氧烷流体包括硅氧烷，其包含聚烷基硅氧烷流体、聚芳基硅氧烷流体、环状和线性聚硅烷基氧烷、聚烷氧基化的硅氧烷、氨基和季铵改性的硅氧烷、聚烷基芳基硅氧烷或聚醚硅氧烷共聚物以及它们的混合物。挥发性的以及非挥发性的硅氧烷流体在本文中有用。硅氧烷流体通常具有200,000以下的平均分子量。在优选的实施方式中，合适的硅氧烷流体具有约100,000或更小，优选约50,000或更小，以及更优选约10,000或更小的分子量。优选地，硅氧烷流体选自重均分子量在约100到约50,000，优选从约200到约40,000范围的硅氧烷流体。典型地，在25℃下，硅氧烷流体的粘度在约0.65到约600,000mm2S-1的范围内，优选从约0.65到约10,000mm2S-1。粘度可以通过玻璃毛细管粘度计进行测量，如DowCorning Corporate Test Method CTM0004于1970年7月29日所阐述。本文可以使用的合适的聚二甲基硅氧烷包括商业可得的化合物(例如，来自General ElectricCompany和Dow Corning)。同样有用的是基本上不挥发的聚烷基芳基硅氧烷，例如聚甲基苯基硅氧烷，其在25℃下具有约0.65到约30,000mm2S-1的粘度(GeneralElectric Company或来自Dow Corning)。适于此处使用的环状聚二甲基硅氧烷为具有结合约3到约7个--优选约5个或更多个--(CH3)2SiO部分的环结构的那些。
在另外的实施方式中，硅橡胶可用于本发明中。在一些优选的实施方式中，硅氧烷油相含有硅橡胶或包含硅橡胶的硅氧烷混合物。典型地，硅橡胶在25℃下具有超过约1,000,000mm2S-1的粘度。硅橡胶包括本领域已知的二甲基硅氧烷(参见，例如美国专利4,152,416；和Noll，Chemistry and Technology of Silicones，Academic Press，New York[1968])。硅橡胶例如在General Electric Silicone RubberProduct Data Sheets SE30、SE33、SE54和SE76中描述的那些，也可用于本发明中。硅橡胶的具体例子包括聚二甲基硅氧烷、(聚二甲基硅氧烷)(甲基乙烯基硅氧烷)共聚物、聚(二甲基硅氧烷)(二苯基)(甲基乙烯基硅氧烷)共聚物和它们的混合物。本文使用的优选的硅橡胶是分子量为约200,000到约4,000,000的硅橡胶，选自聚二甲基硅氧烷醇、二甲基硅氧烷共聚醇、二甲基硅氧烷和它们的混合物。
在一些实施方式中，此处的硅氧烷相优选包括掺入所述组合物作为硅橡胶-流体掺合物的一部分的硅橡胶。当硅橡胶被掺入作为硅橡胶-流体掺合物的一部分时，硅橡胶按重量计优选构成硅橡胶-流体掺合物的大约5％到约40％，特别是约10％到约20％。本文合适的硅橡胶-流体掺合物是基本上由下述组成的混合物：
(i)分子量为约200,000到约4,000,000的硅氧烷，其选自聚二甲基硅氧烷醇、氟硅氧烷和二甲基硅氧烷以及它们的混合物；和
(ii)载体，其是硅氧烷流体，该载体具有从约0.65mm2S-1到约100mm2S-1的粘度，
其中，i)与ii)的比率为大约10∶90到大约20∶80，并且其中所述硅橡胶基的组分具有从约100mm2S-1到约100,000mm2S-1，优选从500mm2S-1到约10,000mm2S-1的粘度。
进一步地，适于用在本文的硅氧烷油相中的硅氧烷组分包括交联的聚有机硅氧烷聚合物，其任选地分散在流体载体中。通常，当存在时，交联的聚有机硅氧烷聚合物和其载体(如果存在的话)一起构成所述组合物的约0.1％到约20％，优选从约0.5％到约10％，以及更优选从约0.5％到约5％。这类聚合物包括由交联剂交联的聚有机硅氧烷聚合物(参见，例如WO98/22085)。适于本文使用的聚有机硅氧烷聚合物包括但不限于甲基乙烯基二甲基硅氧烷、甲基乙烯基二苯基二甲基硅氧烷以及甲基乙烯基苯基甲基二苯基二甲基硅氧烷。
适于用在本文中的硅氧烷油相的另一类硅氧烷组分包括含有至少一种聚二有机硅氧烷片段和至少一种聚氧化烯片段的聚二有机硅氧烷-聚氧化烯共聚物(参见，例如WO98/22085)。合适的聚二有机硅氧烷-聚氧化烯共聚物可从Wacker-Chemie GmbH以商品名BELSIL
获得。本文使用的特别优选的共聚物流体掺合物包括Dow Corning DC3225C，其具有CTFA名称二甲基硅氧烷/聚二甲基硅氧烷共聚醇。
在进一步的实施方式中，本发明的组合物包括有机防晒剂。在一些实施方式中，合适的防晒剂具有UVA吸收特性，而其它防晒剂具有UVB吸收特性，并且其它防晒剂包括它们的混合特性。根据所期望的组合物防晒系数(即“SPF”)以及所需的UV防护水平，防晒活性物的确切量将变化。SPF是通常使用的防晒剂预防红斑的光防护的量度。SPF被定义为：在同一个体中，在受保护皮肤上产生最小红斑所需的紫外线能量与未受保护皮肤上产生相同的最小红斑所需的紫外线能量的比值。所使用的防晒剂的量优选为从约2％到约20％，并且更优选从约4％到约14％。合适的防晒剂包括但不限于在美国、日本、欧洲和澳大利亚中批准使用的那些。本发明的组合物优选包括约2到约30，优选从约4到约30，更优选从约4到约15的SPF。
在一些实施方式中，本发明的组合物包括一种或多种UVA吸收防晒活性物，其吸收波长从约320nm到约400nm的UV辐射。合适的UVA吸收防晒活性物包括但不限于二苯甲酰甲烷(参见，例如Lowe and Shaath (eds.)，Sunscreens： Development，Evaluation，and Regulatory Aspects，Marcel Dekker，Inc.)衍生物、邻氨基苯甲酸酯衍生物例如甲基邻氨基苯甲酸酯和同甲基(homomethyl)，1-N-乙酰基邻氨基苯甲酸酯、及其混合物。UVA吸收防晒活性物优选以这样的量存在，该量足以提供广谱UVA防护，或者单独提供或者与可以在所述组合物中存在的其它UV防护活性物结合提供。
合适的UVA防晒活性物包括二苯甲酰基甲烷类防晒活性物及其衍生物。它们包括但不限于那些活性物，其选自2-甲基二苯甲酰基甲烷、4-甲基二苯甲酰基甲烷、4-异丙基二苯甲酰基甲烷、4-叔丁基二苯甲酰基甲烷、2，4-二甲基二苯甲酰基甲烷、2，5-二甲基二苯甲酰基甲烷、4，4’-二异丙基二苯甲酰基甲烷、4-(1，1-二甲基乙基)-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷、2-甲基-5-异丙基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷、2-甲基-5-叔丁基-4’-甲氧基-二苯甲酰基甲烷、2，4-二甲基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷、2，6-二甲基-4’-叔丁基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷和它们的混合物。优选的二苯甲酰防晒活性物包括选自4-(1，1-二甲基乙基)4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷、4-异丙基二苯甲酰基甲烷、和它们的混合物的那些。优选的防晒活性物是4-(1，1-二甲基乙基)-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷。
防晒活性物4-(1，1-二甲基乙基)-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷，也被称为丁基甲氧基二苯甲酰甲烷或“阿伏苯宗”，是从Givaudan Roure(International)S.A.以名称Parsol
1789商购得到的，以及从Merck & Co.，Inc.以Eusolex
9020商购得到的。防晒剂4-异丙基二苯甲酰基甲烷，也被称为异丙基二苯甲酰基甲烷，是从Merck以名称Eusolex8020商购得到的。
在一些实施方式中，本发明的组合物进一步包括一种或多种UVB防晒活性物，其吸收波长从约290nm到约320nm的UV辐射。该组合物包括一定量的UVB防晒活性物，其安全有效地单独提供或与其它可以在该组合物中存在的UV防护活性物一起提供UVB防护。该组合物包括按重量计约0.1％到约20％、优选从约0.1％到约12％、以及更优选从约0.5％到约8％的每一种UVB吸收有机防晒剂，或者由相关管理机构规定。
多种UVB防晒活性物适于在本文中使用(例如，参见美国专利5,087,372；美国专利5,073,371；美国专利5,073,372；美国专利4,937,370；和美国专利4,999,186)。优选的UVB防晒活性物选自2-乙基己基-2-氰基-3，2-乙基己基N，N-二甲基-对-氨基苯甲酸酯、对氨基苯甲酸、氧苯酮、水杨酸三甲环己酯、水杨酸辛酯、4，4’-甲氧基-叔丁基二苯甲酰甲烷、4-异丙基二苯甲酰甲烷、3-苯亚甲基樟脑、3-(4-甲基苯亚甲基)樟脑、3-二苯基丙烯酸酯、2-苯基-苯并咪唑-5-磺酸(PBSA)、肉桂酸酯及其衍生物例如2-乙基己基-对甲氧基肉桂酸酯、水杨酸酯及其衍生物例如三乙醇胺水杨酸酯、乙基己基水杨酸酯、辛基二甲基对氨基苯甲酸、樟脑衍生物和它们的衍生物、以及它们的混合物。优选的有机防晒活性物包括2-乙基己基-2-氰基-3，3-二苯基丙烯酸酯、2-苯基-苯并咪唑-5-磺酸(PBSA)、辛基-对甲氧基肉桂酸酯、以及它们的混合物。酸性防晒剂的盐和酸中和形式在这里也是有用的。
在一些实施方式中，至少一种试剂被加入到在本发明中有用的任何组合物中，以使UVA防晒剂稳定，以便防止其暴露于UV辐射时光降解，并从而保持它的UVA保护功效。据报道，宽范围的化合物具有这些稳定特性，并应该从中选择，以从整体上补充UVA防晒剂和组合物(参见，例如美国专利5,972,316；5,968,485；5,935,556；5,827,508；和WO00/06110)。用于本发明的稳定剂的优选例子包括2-乙基己基-2-氰基-3，3-二苯基丙烯酸酯、乙基-2-氰基-3，3-二苯基丙烯酸酯、2-乙基己基-3，3-二苯基丙烯酸酯、乙基-3，3-双(4-甲氧基苯基)丙烯酸酯、二乙基己基2，6napthalate以及它们的混合物(Symrise Chemical Company)。
在一些实施方式中，至少一种试剂被加入到在本发明中有用的任何组合物中，以改善这些组合物的皮肤直接性(substantivity)，尤其是增强其抗水洗脱或抗擦拭的能力。例子包括但不限于丙烯酸酯/甲基丙烯酸C12-22烷酯共聚物、丙烯酸酯/丙烯酸酯共聚物、二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷醇、接枝共聚物(二甲基硅氧烷/甲基丙烯酸异丁酯)、十二烷基二甲基硅氧烷、PVP/十六烷共聚物、PVP/二十碳烯共聚物、三十烷基PVP和三甲氧基甲硅烷氧基硅酸酯。
除了有机防晒剂，在一些实施方式中，本发明的组合物另外包括无机物理防晒剂(sunblock)(参见，例如TFA International Cosmetic Ingredient Dictionary，6thEdition，pp.1026-28 and 1103[1995]；Sayre et al.，J.Soc.Cosmet.Chem.，41：103-109[1990]；和Lowe et al.，supra)。优选的无机物理防晒剂包括氧化锌和二氧化钛以及它们的混合物。
当在优选的实施方式中使用时，物理防晒剂以一定量存在，使得本组合物在皮肤上是透明的(即，非增白)，按重量计优选从约0.5％到约20％，优选从约0.5％到约10％，以及更优选从约0.5％到约5％。如果使用二氧化钛，它可以具有锐钛矿、金红石或无定形结构。用于防晒剂的微粉级二氧化钛和氧化锌的制造商包括但不限于Tayca Corporation、Uniqema、Shinetsu Chemical Corporation、Kerr-McGee、Nanophase、Nanosource、Sachtleben、Elementis、和BASF Corporation，以及它们的分销商和那些进一步加工该物质用于防晒剂用途的公司。物理防晒颗粒(例如二氧化钛和氧化锌)可以不涂覆或涂覆各种物质，包括但不限于氨基酸、铝化合物例如氧化铝、硬脂酸铝、月桂酸铝等等；羧酸及其盐(例如硬脂酸及其盐)；磷脂，例如卵磷脂；有机硅化合物；无机硅化合物例如二氧化硅和硅酸盐以及它们的混合物。在一些优选的实施方式中，本发明的组合物包括按重量计约0.1％到约15％，优选从约0.1％到约7％，以及更优选从约0.5％到约5％的无机防晒剂。
在一些优选的实施方式中，本发明的组合物还包括防腐剂。这类防腐剂包括但不限于戊二醇、乙二胺四乙酸(EDTA)及其盐、氯己定(及其二乙酸盐、二盐酸盐、二葡萄糖酸盐衍生物)、1，1，1-三氯-2-甲基-2-丙醇、对氯间二甲苯酚、聚六亚甲基双胍盐酸盐、脱氢乙酸、二偶氮利定脲、2，4-二氯苄醇、4，4-二甲基-1，3-
唑烷、甲醛(例如，37％水溶液，含10-15％甲醇，以避免聚合)、戊二醛、二甲基乙内酰脲(dimethylidantoin)、咪唑烷基脲、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、邻苯基苯酚、4-羟基苯甲酸酯(例如，“对羟基苯甲酸酯”(paraben))及其甲酯、乙酯、丙酯、异丙酯、丁酯和异丁酯、三氯生、2-苯氧基乙醇、苯基醋酸汞、硼酸盐、硝酸盐、季铵盐-15、水杨酸酯、水杨酸及其盐、钙、山梨酸钙、山梨酸及其盐、碘代丙烷基丁基氨基甲酸酯、2-巯基吡啶氧化锌、苄醇、5-溴-5-硝基-1，3-二
烷、2-溴-2-硝基丙烷-1，3-二醇、苯甲酸及其盐、亚硫酸盐、焦亚硫酸盐(bisulfite)、苯氧乙醇、氯二甲酚、二偶氮利定脲、羟苯甲酸甲酯、羟苯甲酸丙酯、羟苯甲酸异丙酯、羟苯甲酸异丁酯、羟苯甲酸丁酯、羟苯甲酸乙酯、苯氧乙醇PG和氯苄烷铵。
各种任选的成分例如中和剂、香味剂和香料增溶剂以及着色剂也可用于本文的一些组合物中。优选的是，任何添加的成分增强产品的皮肤柔顺性/平滑性益处。此外，优选的是，任何这类成分不负面影响产品的美观特性。
其它任选的物质包括角质软化剂、以及优选在约0.1％到约5％的水平下的水溶性和/或可溶性防腐剂(例如，Germall 115，羟基苯甲酸的甲酯、乙酯、丙酯和丁酯，苄醇，从Lonza以商品名Glydant Plus获得的DMDM乙内酰脲碘丙烷基丁基氨基甲酸酯；EDTA，EUXYL
K400，Bromopol(2-溴-2-硝基丙烷-1，3-二醇)和苯氧基丙醇)；抗菌剂(例如，IRGASAN
)和苯氧基乙醇(优选在约0.1％到约5％的水平)；以及可溶性或胶体可溶性的保湿剂，例如透明质酸、硫酸软骨素和淀粉接枝的聚丙烯酸钠(例如，SANWET
IM-1000、IM-1500和IM-2500，可从CelaneseSuperabsorbent Materials，Portsmith，VA获得，参见，例如美国专利4,076,663)；维生素例如维生素A、维生素C、维生素E及其衍生物和它们的结构单元如植三醇、以及维生素K和及其成分如脂肪醇如十二碳三烯甘油酯；α和β羟基酸；芦荟；鞘氨醇和植物鞘氨醇、胆固醇；皮肤增白剂；N-乙酰基半胱氨酸；着色剂；抗菌剂如TCC/TCS，也称为三氯生和三氯烃；香料和香料增溶剂。α羟基酸的例子包括羟基乙酸、乳酸、马来酸、柠檬酸、与羟基乙酸铵(ammonium glycolate)结合的羟基乙酸、α-羟基乙酸、α-羟基辛酸(alpha-hydroxyoctanoic acid)、α-羟基辛酸(alpha-hydroxycaprylic acid)、羟基辛酸、混合果酸、三α羟基果酸、三重果酸、甘蔗提取物、α羟基和植物组分(alpha hydroxy and botanicals)、1-α-羟基酸和交联脂肪酸(例如，α-nutrium)中的glycomer。α羟基酸的优选例子是羟基乙酸和乳酸。优选的是，α羟基酸以高达约10％的水平使用。本发明不意图受限于衍生自任何特定来源的任何特定化合物，因为任何合适的添加剂化合物--无论天然来源或通过实验室合成获得--都可用于本发明中。
其它任选的物质包括在约0.1％到约5％的水平下的水溶性或可溶性防腐剂，例如Germall 115，羟基苯甲酸的甲酯、乙酯、丙酯和丁酯，苄醇，从Lonza以商品名Glydant Plus获得的DMDM乙内酰脲碘丙烷基丁基氨基甲酸酯，EDTA，EUXYL
K400，Bromopol(2-溴-2-硝基丙烷-1，3-二醇)，戊二醇和苯氧基丙醇；抗菌剂如Irgasan(RTM)和苯氧基乙醇(优选在0.1％至约5％的水平)；抗菌剂如TCC/TCS，也称为三氯生和三氯烃，也可用于本发明的组合物中。
在本文中适用于中和含酸性基团的亲水性胶凝剂的中和剂，包括氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、单乙醇胺、二乙醇胺、氨基甲基丙醇、tris缓冲液和三乙醇胺。
可用于本发明的其它任选物质包括本领域技术人员已知的各种功能性和/或活性成分(参见，例如McCutcheon’s Functional Materials，North American andInternational Editions，MC Publishing Co.[2003])。如上所述，非限制性的例子包括：角质软化剂；可溶的或胶体可溶的保湿剂，例如透明质酸和硫酸软骨素；维生素例如维生素A、维生素C、维生素E、维生素K及其衍生物和它们的结构单元；植三醇；脂肪醇如十二碳三烯甘油酯；α和β羟基酸；芦荟；鞘氨醇和植物鞘氨醇、胆固醇；皮肤增白剂；N-乙酰基半胱氨酸；着色剂；α羟基酸的例子包括羟基乙酸、乳酸、马来酸和柠檬酸(无论合成得到或从天然来源得到，以及无论单独还是结合使用)和它们的酯或相关的缓冲组合。其它α-羟基酸的例子包括：α-羟基乙酸、α-羟基辛酸(alpha-hydroxyoctanoic acid)、α-羟基辛酸(alpha-hydroxycaprylic acid)和羟基辛酸。α羟基酸的优选例子是羟基乙酸和乳酸。优选的是，α羟基酸以高达约10％的水平使用。
任选的物质包括色素，当其是水不溶性时，构成油相成分总水平并被包括在油相成分总水平中。适于在本发明的组合物中使用的色素可以是有机和/或无机色素。术语“色素”还包括具有低色泽或光泽的物质，例如材料抛光剂、光散射剂、和剂型助剂如云母、seracites、和碳酸盐。合适的色素的进一步的例子包括二氧化钛、氧化铁、谷氨酸盐氧化铁(glutamate iron oxide)、氧化锌、氯氧化铋、群青蓝(所有这些都可以被预分散和/或预涂覆或不进行预分散和/或预涂覆)D&C染料和色淀、FD&C颜料、天然色素添加剂例如胭脂红、以及它们的混合物。根据组合物的类型，在本发明的优选实施方式中，通常使用色素的混合物。从保湿、皮肤感觉、皮肤外观和乳液相容性的观点来看，用在本文中的优选色素为处理过的色素。在一些实施方式中，该色素用化合物处理，包括但不限于氨基酸、硅氧烷、卵磷脂和酯油。
在优选的实施方式中，本文中的组合物的pH在约3.5到约10的范围内，优选从约4到约8，以及更优选从约5到约7，其中取决于剂型的组成以及所述化合物的pH要求，根据需要加入酸式盐、碱式盐或缓冲盐，调节最终组合物的pH。
通过本领域的技术人员熟知的标准方法，制备本发明的组合物。一般而言，水相和油相被分开制备，其中具有类似的相分离的物质以任意顺序加入。如果最终的产物是乳液，则如果需要，采用强烈的搅拌和/或均化作用混合两相，以减少内部相小滴的大小。制剂中的具有高挥发性、或易于水解或高温降解的任何成分可以在该方法的最后在轻微搅拌下加入，如果可行的话，可以在乳化后加入。剂量频率和数量将取决于所期望的性能标准。
在本发明的一些实施方式中，降低VEGF活性的方法被提供。在这些实施方式中，所述方法包括将有效量的本文所描述的化合物的任何一种施用给需要它的生物体。在另外的优选实施方式中，本发明提供了化合物，用于治疗需要它的生物体，包括人和其它动物。
实施例
下面的实施例用来阐述本发明的某些优选的实施方式和方面，并不被解释成对其范围的限制。
在后面的试验公开中，使用下列简写：PI(蛋白酶抑制剂)，BBI(Bowman-Birk抑制剂)，STI(Soybean Trypsin抑制剂)；ppm(每百万的份数)；VEGF和VegF(血管内皮生长因子)；M(体积摩尔浓度)；mM(毫体积摩尔浓度)；μM(微体积摩尔浓度)；nM(纳体积摩尔浓度)；mol(摩尔)；mmol(毫摩尔)；μmol(微摩尔)；nmol(纳摩尔)；gm(克)；mg(毫克)；μg(微克)；pg(皮克)；L(升)；ml和mL(毫升)；μl和μL(微升)；cm(厘米)；mm(毫米)；μm(微米)；nm(纳米)；U(单位(unit))；V(伏特)；MW(分子量)；sec(秒)；min(分钟)；hr(小时)；℃(摄氏度)；QS(足够量(quantity sufficient))；ND(未进行)；SA(see able)；NA(不适用)；rpm(每分钟转数)；H2O(水)；dH2O(去离子水)；HCl(盐酸)；aa(氨基酸)；bp(碱基对)；kb(千碱基对)；kD(千道尔顿)；cDNA(拷贝或互补DNA)；DNA(脱氧核糖核苷酸)；ssDNA(单链DNA)；dsDNA(双链DNA)；dNTP(脱氧核糖核苷三磷酸)；RNA(核糖核酸)；MgCl2(氯化镁)；NaCl(氯化钠)；w/v(重量体积比)；v/v(体积比)；g(重力)；OD(光密度)；A405(在405nm处的吸光度)；Vmax(酶催化反应的最大初速度)；FGFrI(IIIc)(FGF-5受体)；Dulbecco磷酸缓冲液(DPBS)；SOC(2％Bacto-Tryptone，0.5％Bacto Yeast Extract，10mM NaCl，2.5mM KCl)；Terrific Broth(TB；12g/l BactoTryptone，24g/l甘油，2.31g/l KH2PO4，和12.54g/l K2HPO4)；OD280(在280nm处的光密度)；OD600(在600nm处的光密度)；PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)；PBS(磷酸盐缓冲盐水[150mM NaCl，10mM磷酸钠缓冲液，pH7.2])；PBST(PBS+0.25％Tween
20)；PEG(聚乙二醇)；PCR(聚合酶链式反应)；RT-PCR(反转录PCR)；SDS(十二烷基硫酸钠)；bME、BME和βME(β-巯基乙醇或2-巯基乙醇)；Tris-HCl(三[羟甲基]氨基甲烷-盐酸)；Tricine(N-[三-(羟甲基)-甲基]-甘氨酸)；CHES(2-(N-环己氨基)乙醇-磺酸)；TAPS(3-{[三-(羟甲基)-甲基]-氨基}-丙烷磺酸)；CAPS(3-(环-己氨基)-丙烷-磺酸；DMSO(二甲亚砜)；DTT(1，4-二硫代-DL-苏糖醇)；Glut和GSH(还原型谷胱甘肽)；GSSG(氧化型谷胱甘肽)；TCEP(三[2-羧乙基]膦)；Tris(三(羟甲基)氨基甲烷)；HEPES(N-[2-羟乙基]哌嗪-N-[2-乙烷磺酸])；HBS(HEPES缓冲盐水)；SDS(十二烷基硫酸钠)；Tris-HCl(三[羟甲基]氨基甲烷-盐酸)；Ci(居里)；mCi(毫居里)；μCi(微居里)；TLC(薄层色谱)；O/W(水包油乳液)；W/O(油包水乳液)；W/S(硅氧烷包水乳液)；pickering乳液(用固体化合物稳定的乳液)；水分散体(无乳化剂配方)；PIT(用于制造特殊乳液的转相温度技术)；棒(sticks)(任何以棒的形式提供的产品，包括但不限于唇膏、止汉剂和除臭剂)；Ts(甲苯磺酰基)；Bn(苄基)；Ph(苯基)；Ms(甲磺酰基)；Et(乙基)，Me(甲基)；Klenow(DNA聚合酶1大(Klenow)片段)；rpm(每分钟转数)；EGTA(乙二醇-双(β-氨基乙基醚)N，N，N′，N′-四乙酸)；EDTA(乙二胺四乙酸)；bla(β-内酰胺酶或氨苄青霉素抗性基因)；PDS(血浆来源的牛血清，其已被透析，以除去生长因子；在搅拌下，在4℃下，相对DMEM进行去纤维蛋白牛血浆的透析约6小时，更换培养基，继续透析过夜；在24小时后，收集透析的PDS，并通过0.2μm过滤器进行过滤除菌两次)；FCS和FBS(胎牛血清)；GE Healthcare(GE Healthcare，Chalfont St.Giles，UnitedKingdom)；DNA2.0(DNA2.0，Menlo Park，CA)；OXOID(Oxoid，Basingstoke，Hampshire，UK)；Megazyme(Megazyme International Ireland Ltd.，Bray Business Park，Bray，Co.，Wicklow，Ireland)；Corning(Corning Life Sciences，Corning，NY)；(NEN(NEN Life Science Products，Boston，MA)；Pharma AS(Pharma AS，Oslo，Norway)；Dynal(Dynal，Oslo，Norway)；Bio-Synthesis(Bio-Synthesis，Lewisville，TX)；ATCC(American Type Culture Collection，Rockville，MD)；Gibco/BRL(Gibco/BRL，GrandIsland，NY)；Sigma(Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO)；Pharmacia(PharmaciaBiotech，Pisacataway，NJ)；NCBI(National Center for Biotechnology Information)；Applied Biosystems(Applied Biosystems，Foster City，CA)；Clontech(CLONTECHLaboratories，Palo Alto，CA)；Difco(Difco Laboratories，Detroit，MI)；Oxoid(OxoidInc.，Ogdensburg，NY)；GIBCO BRL或Gibco BRL(Life Technololgies，Inc.，Gaithersburg，MD)；Millipore(Millipore，Billerica，MA)；Bio-Rad(Bio-Rad，Hercules，CA)；Invitrogen(Invitrogen Corp.，San Diego，CA)；NEB(New England Biolabs，Beverly，MA)；Cambrex(Cambrex Bioproducts，East Rutherford，NJ)；Sigma(SigmaChemical Co.，St.Louis，MO)；Pierce(Pierce Biotechnology，Rockford，IL)；Takara(Takara Bio Inc.Otsu，Japan)；Roche(Hoffmann-La Roche，Basel，Switzerland)；EMScience(EM Science，Gibbstown，NJ)；Qiagen(Qiagen，Inc.，Valencia，CA)；Biodesign(Biodesign Intl.，Saco，Maine)；Biosource(Biosource，Inl.，Camarillo，CA)；Aptagen(Aptagen，Inc.，Herndon，VA)；Molecular Devices(Molecular Devices，Corp.，Sunnyvale，CA)；R&D Systems(R&D Systems，Minneapolis，MN)；Stratagene(Stratagene Cloning Systems，La Jolla，CA)；Marsh(Marsh Biosciences，Rochester，NY)；Bio-Tek(Bio-Tek Instruments，Winooski，VT)；(Biacore (Biacore，Inc.，Piscataway，NJ)；PeproTech(PeproTech，Rocky Hill，NJ)；SynPep(SynPep，Dublin，CA)；Chemicon(CHEMICON，Temecula，CA)；Clinical Research Laboratories，(Clinical Research Laboratories，Inc.，Piscataway，NJ)；和Microsoft(Microsoft，Inc.，Redmond，WA).
实施例1
个人护理组合物
在本实施例中，包括本发明的各种化合物的各种个人护理组合物被提供如下。在这些配方中，量按总组成的百分比给出，除非另外说明。同样，除非另外说明，在下列配方中，BBI-AV(下面也称为“化合物”)的浓度在约0.01％到约1.0％的范围内。在-些配方中，优选的浓度在约0.1％到约0.2％的范围内，而在其它配方中，优选的浓度在约0.05％到约0.1％的范围内(例如，对于-些毛发生长抑制实施方式)；从约0.02％到约0.1％(例如，对于一些皮肤增亮实施方式)；从约0.5％到约1.0％(例如，对于一些皮肤增亮实施方式)；或在约0.1％以上的浓度(例如，对于一些红斑痤疮治疗实施方式)。对于每一种产品，本领域的技术人员了解如何确定BBI-AV的合适(即，最优)浓度。
保湿沐浴露(MOISTURIZING BODYWASH)(pH7)
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 去离子水甘油PEG-6辛酸/癸酸甘油酯棕榈仁脂肪酸月桂醇聚醚-3硫酸钠(SodiumLaureth-3 Sulphate)椰油酰胺MEA(Cocamide MEA)月桂基两性基乙酸钠大豆油聚季铵盐(Polyquatemium)-10防腐剂、香料、颜料化合物 | QS4.04.03.045.03.025.010.00.70QS1000ppm |
沐浴露(BODY WASH)
| 原材料(INCI名称) | pH8 | pH6.5 | pH7 |
| 量 | 量 | 量 | |
| 去离子水月桂醇聚醚硫酸钠椰油酰胺丙基甜菜碱(Cocamidopropyl Betaine)癸基葡萄糖苷聚季铵盐-10聚季铵盐-7防腐剂、香料、颜料化合物 | QS12800.250QS250ppm | QS1510200QS500ppm | QS815100.7QS1000ppm |
爽身水(花露水，BODY pH7 pH7 pH7.5 pH7
LOTION)
| 原材料(INCI名称) | 量 | 量 | 量 | 量 |
| 去离子水甘油异十六烷烟酰胺异硬脂酸异丙酯(IsopropylIsostearate)聚丙烯酰胺(和)异链烷烃(和)月桂醇聚醚(Laureth)-7矿脂尼龙12聚二甲基硅氧烷(Dimethicone)蔗糖聚棉子油(SucrosePolycottonseed Oil)十八烷醇97％D泛醇DL-α生育酚乙酸酯(Tocopherol Acetate)鲸蜡醇95％二十二醇鲸蜡硬脂醇(CetearylAlcohol)(和)鲸蜡硬脂基葡糖苷(Cetearyl Glucoside)硬脂酸PEG-100-硬脂酸酯防腐剂、香料、颜料化合物 | QS830334221.51110.510.40.150.15QS250ppm | QS833334221.51110.510.40.150.15QS500ppm | QS0353342.52.51.51110.510.50.150.15QS750ppm | QS12663322.52.51.511110.50.50.150.15QS1000ppm |
超高保湿乳(ULTRA-HIGH pH7 pH7
MOISTURIZING EMULSION)
| 原材料(INCI名称) | 量 | 量 |
| 去离子水甘油PEG 400烟酰胺异十六烷聚二甲基硅氧烷聚丙烯酰胺(和)异链烷烃(和)月桂醇聚醚-7异硬脂酸异丙酯聚甲基硅倍半氧烷鲸蜡醇95％蔗糖聚棉子油D-泛醇生育酚乙酸酯十八烷醇95％鲸蜡硬脂基葡糖苷二氧化钛硬脂酸PEG-100-硬脂酸酯防腐剂、香料、颜料化合物 | QS12055332211110.50.50.30.150.15QS250ppm | QS51075232211110.50.50.30.150.15QS100ppm |
保湿霜(MOISTURIZING pH7 pH7 pH7.5
CREAM)
| 原材料(INCI名称) | 量 | 量 | 量 |
| 去离子水甘油矿脂鲸蜡醇95％聚二甲基硅氧烷共聚醇(Dimethicone Copolyol)棕榈酸异丙酯Carbopol 954(Noveon)聚二甲基硅氧烷(350cs)十八烷醇97％硬脂酸PEG-100-硬脂酸酯二氧化钛防腐剂、颜料、香料化合物 | QS331.5210.710.50.10.10.3QS50ppm | QS531.5210.710.50.10.10.3QS250ppm | QS100120.50.7110.10.10.3QS1000ppm |
| 洁面奶(FACIAL CLEANSING EMULSION) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 69.05 |
| EDTA二钠(Disodium EDTA) | 0.1 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(Glyceryl polymethacrylate)(和)丙二醇 | 1.0 |
| 甘油 | 2.0 |
| 黄原胶 | 0.5 |
| 羟乙基纤维素 | 0.5 |
| 新戊酸十三烷酯(Tridecyl neopentanoate) | 4.0 |
| 硬脂酸异鲸蜡酯 | 6.0 |
| 棕榈酸辛酯 | 8.0 |
| 二月桂酸甘油酯 | 4.0 |
| PEG-20硬脂酸酯 | 2.0 |
| 硬脂酸甘油酯(和)月桂醇聚醚-23 | 2.0 |
| 十二烷基吡咯烷酮 | 0.5 |
| 春黄菊提取物 | 0.2 |
| 芦荟(200x) | 0.05 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 基于表面活性剂的洁面奶(SURFACTANT-BASED FACIAL CLEANSER) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 62.55 |
| 丙烯酸酯/硬脂醇聚醚(Steareth)-20甲基丙烯酸酯共聚物 | 3.3 |
| EDTA二钠 | 0.05 |
| 甘油 | 2.0 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(和)丙二醇(和)PVM/MA共聚物 | 0.5 |
| 月桂醇聚醚硫酸钠(30％) | 17.5 |
| 鲸蜡硬脂醇 | 1.0 |
| 牛油果油 | 1.0 |
| 链酰胺PEG-2磺基琥珀酸二钠(Disodium oleamido PEG-2sulfosuccinate) | 5.0 |
| 椰油酰胺丙基甜菜碱 | 3.0 |
| 月桂酰肌氨酸钠 | 1.0 |
| PEG-7椰油酸甘油酯(glyceryl cocoate) | 1.0 |
| 油酸异癸酯 | 1.5 |
| 薄荷提取物 | 0.25 |
| 桉叶提取物 | 0.25 |
| 香料、防腐剂、颜料、pH调节 | QS |
| 化合物 | SA |
| 脸用脱落凝胶(FACIAL EXFOLIATING GEL) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 64.39 |
| EDTA二钠 | 0.05 |
| 芦荟(200x) | 0.01 |
| 二苯甲酮-4 | 0.25 |
| 丙二醇 | 1.0 |
| 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物(2％) | 20.0 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(和)丙二醇 | 10.0 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(和)丙二醇(和)PVM/MA共聚物 | 1.0 |
| 氢化霍霍巴油 | 1.5 |
| 香料、防腐剂、颜料、pH调节 | QS |
| 化合物 | SA |
| 面部调色剂(FACIAL TONER) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 93.99 |
| EDTA二钠 | 0.1 |
| 丁二醇 | 2.0 |
| 芦荟(200x) | 0.1 |
| 尿囊素 | 0.1 |
| 二苯甲酮-4 | 0.5 |
| 金缕梅提取物 | 0.3 |
| 丙二醇(和)小米草提取液(和)北美黄连根提取物(和)绿茶提取物 | 0.01 |
| PEG-40氢化蓖麻油 | 0.5 |
| 季铵盐-22 | 0.5 |
| 檀香油 | 0.02 |
| 香料、防腐剂、颜料、pH调节 | QS |
| 化合物 | SA |
| 脱落霜(EXFOLIATING CREAM) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 68.80 |
| EDTA二钠 | 0.1 |
| PVM/MA癸二烯交聚物 | 1.0 |
| 丁二醇 | 3.0 |
| PEG-20硬脂酸酯 | 1.0 |
| 硬脂酸甘油酯(和)月桂醇聚醚-23 | 2.0 |
| 己二酸二异丙酯 | 2.0 |
| 油酸异癸酯 | 2.0 |
| 异鲸蜡醇硬脂酰硬脂酸酯(Isocetyl stearoyl stearate) | 5.0 |
| 十四酸十四酯 | 1.0 |
| 二月桂酸甘油酯 | 2.0 |
| 氢氧化钠，10％ | 2.6 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(和)丙二醇 | 5.0 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(和)丙二醇(和)PVM/MA共聚物 | 0.5 |
| 氢化霍霍巴油 | 3.0 |
| 香料、防腐剂、颜料、pH调节 | QS |
| 化合物 | SA |
| 面膜 | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 76.4 |
| EDTA二钠 | 0.1 |
| 膨润土 | 12.5 |
| C12-13烷基磷酸钾 | 5.0 |
| 丙二醇 | 4.0 |
| 椰油酰PG-二甲基氯化铵磷酸钠(Sodium CocoPG-Dimonium Chloride Phosphate) | 1.0 |
| 香料、防腐剂、颜料、pH调节 | QS |
| 化合物 | SA |
| 须后舒缓乳(AFTER-SHAVE BALM) |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 82.12 |
| EDTA二钠 | 0.1 |
| 丙烯酸酯共聚物 | 2.0 |
| 丙烯酸酯/Stareth-20甲基丙烯酸酯共聚物 | 1.0 |
| 丙二醇 | 3.0 |
| 氢氧化钠(10％) | 1.28 |
| 硬脂酸甘油酯(和)鲸蜡醇(和)十八烷醇(和)二十二醇(和)棕榈酸(和)硬脂酸(和)羟乙基鲸蜡基芳族聚酰胺丙基二甲基氯化铵(Hydroxyethyl cetearamidopropyldimonium chloride) | 3.5 |
| 硬脂酸异鲸蜡酯 | 1.0 |
| 乳酸C12-15烷基酯 | 1.5 |
| 辛基硬脂酸十二烷酯(Octyldodecyl stearate) | 3.0 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(和)丙二醇(和)PVM/MA共聚物 | 1.0 |
| 聚季铵盐-11 | 0.5 |
| 香料、防腐剂、颜料、pH调节 | QS |
| 化合物 | SA |
| 眼胶(EYE GEL) |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 89.14 |
| VP/丙烯酸酯/月桂基甲基丙烯酸酯共聚物 | 0.5 |
| 甘油 | 5.0 |
| 氨基甲基丙醇 | 0.3 |
| 芦荟(200x) | 0.05 |
| 二苯甲酮-4 | 0.1 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(和)丙二醇(和)PVM/MA共聚物 | 0.2 |
| 丁二醇(和)水(和)金缕梅提取物 | 0.5 |
| 丁二醇(和)水(和)黄瓜提取物 | 0.3 |
| PEG-40氢化蓖麻油 | 0.01 |
| 丙烯酸酯/山嵛醇聚醚(Beheneth)-25 甲基丙烯酸酯共聚物 | 2.4 |
| 香料、防腐剂、颜料、pH调节 | QS |
| 化合物 | SA |
| 高熔点唇膏(HIGH MELTING POINT LIPSTICK) |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 地蜡 | 5.0 |
| 小烛树蜡 | 11.0 |
| 辛基十二醇 | 26.0 |
| C30-45烷基甲基硅酮(alkyl methicone) | 5.0 |
| 环二甲基硅酮(Cyclomethicone) | 4.8 |
| 矿脂 | 3.0 |
| 羊毛脂油 | 9.0 |
| 鳄梨油 | 2.0 |
| 油醇 | 8.0 |
| 颜料/环二甲基硅酮 | 25.0 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 唇膏 | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 小烛树蜡 | 9.1 |
| 十四酸异丙酯 | 9.6 |
| 羊毛脂 | 5.0 |
| 蜂蜡 | 4.0 |
| 石蜡(130/135) | 2.0 |
| 地蜡 | 2.5 |
| 蓖麻油 | 53.7 |
| 巴西棕榈蜡 | 1.5 |
| 颜料 | 7.5 |
| 矿物油 | 4.0 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 唇彩(LIP GLOSS) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 双-二甘油多脂酰己二酸酯-1(Bis-diglycerylpolyacyladipate-1) | 43.5 |
| 双-二甘油多脂酰己二酸酯-2 | 10 |
| 蓖麻油酸甘油酯 | 10 |
| 聚异丁烯1000 | 13 |
| 羊毛脂蜡 | 10 |
| 小烛树蜡 | 2.5 |
| 云母(和)二氧化钛 | 3 |
| d-泛醇 | 5 |
| 香料、防腐剂、颜料 | QS |
| 化合物 | SA |
| 含防晒剂的唇彩(LIP GLOSS WITH SUNSCREEN) |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 柠檬酸三异硬脂酰酯(Triisostearyl Citrate) | 58.4 |
| 小烛树蜡 | 8.0 |
| 乳酸十四酯 | 7.5 |
| 微晶蜡 | 5.0 |
| 巴西棕榈蜡 | 2.0 |
| 二聚亚油酸二异丙基酯(Diisopropyl dimmer dilinoleate) | 10.0 |
| 云母(和)氯氧化铋(和)胭脂红 | 6.0 |
| 氧化锌(微细) | 2.0 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 唇油(LIP BALM) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 矿脂 | 47.3 |
| 羊毛脂酸异丙酯(Isopropyl lanolate) | 6.0 |
| 地蜡 | 16.5 |
| 小烛树蜡 | 4.5 |
| 二亚油酸二异丙酯 | 25.0 |
| 棕榈酸视黄酯 | 0.5 |
| 生育酚乙酸酯 | 0.2 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 防水睫毛膏(WATERPROOF MASCARA) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 49.45 |
| 丙二醇 | 3.0 |
| 三乙醇胺(99％) | 3.1 |
| 丙烯酸酯/辛基丙烯酰胺共聚物 | 5.0 |
| 二异硬脂酰三甲氧基丙烷甲硅烷氧基硅酸酯(Diisostearoyltrimethylolpropane siloxy silicate) | 5.0 |
| 小烛树蜡 | 4.5 |
| 蜂蜡 | 5.5 |
| 地蜡 | 2.0 |
| 巴西棕榈蜡 | 1.0 |
| 鲸蜡醇 | 3.0 |
| 硬脂酸 | 5.0 |
| 氧化铁 | 11.0 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 无水防水睫毛膏(ANHYDROUS WATERPROOF MASCARA) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| C9-11异链烷烃 | 30.95 |
| 聚乙烯 | 11.0 |
| 小烛树蜡 | 4.5 |
| 氢化羊毛脂 | 0.25 |
| 松脂酸季戊四醇酯(Pentaerythrityl rosinate) | 2.0 |
| 硬脂酸锌 | 1.0 |
| 甲硅烷基化硅石(Silica silylate) | 1.0 |
| 石油馏出物(和)季铵盐-18锂蒙脱石(和)碳酸丙烯酯 | 35.0 |
| 氧化铁 | 12.0 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 水基睫毛膏 | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 43.32 |
| 聚乙烯吡咯烷酮(K30) | 2.0 |
| 羟乙基纤维素 | 1.0 |
| 三乙醇胺(99％) | 2.0 |
| EDTA二钠 | 0.1 |
| 氧化铁 | 10.0 |
| 硬脂酸 | 4.5 |
| 单硬脂酸甘油酯 | 2.0 |
| 蜂蜡 | 7.0 |
| 巴西棕榈蜡 | 4.5 |
| 氢化羊毛脂 | 1.0 |
| 丙烯酸酯共聚物 | 20.0 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 液体眼线膏(LIQUID EYELINER) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 50-70 |
| 胶凝剂 | 0.5-1.5 |
| 湿润剂(一种或多种) | 1-3 |
| 多元醇 | 4-8 |
| 着色剂 | 10-20 |
| 醇 | 5-10 |
| 成膜剂 | 3-8 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 指甲油(NAIL ENAMEL) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 溶剂(一种或多种) | 40-70 |
| 树脂(一种或多种) | 10-20 |
| 增塑剂 | 3-12 |
| 胶凝剂 | 0-2 |
| 着色剂 | 0-3 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 表皮处理剂(CUTICLE TREATMENT) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 矿脂 | 34.8 |
| 蜂蜡 | 7.2 |
| 地蜡 | 4.3 |
| 小烛树蜡 | 4.0 |
| 可可油 | 1.0 |
| 牛油果油 | 1.0 |
| 二月桂酸甘油酯 | 8.0 |
| 棕榈酸乙基己酯(Ethylhexyl palmitate) | 20.0 |
| 乳酸C12-15烷基酯 | 6.0 |
| PVP/二十碳烯共聚物 | 3.5 |
| 己二酸二异丙酯 | 2.0 |
| 甲氧基肉桂酸辛酯(Octinoxate) | 7.5 |
| 棕榈酸视黄酯 | 0.1 |
| 生育酚乙酸酯 | 0.1 |
| 香料、防腐剂、颜料、pH调节 | QS |
| 化合物 | SA |
| 粉饼制剂(PRESSED POWDER FORMULATIONS) | |||||
| 散粉 | 粉饼(PressedPowder) | 粉底 | 腮红(Blush) | 眼影 | |
| 填料(例如，滑石、云母、seracite) | 70-95 | 40-90 | 40-80 | 40-80 | 40-80 |
| 压缩助剂(例如，金属皂、蜡) | 0-2.5 | 3-5 | 2-5 | 2-7 | 2-10 |
| 质地增强剂 | 10-40 | 5-40 | 10-40 | 10-40 | 0-30 |
| 着色剂(例如，氧化铁、有机颜料) | 2-10 | 2-10 | 5-20 | 2-10 | 1-40 |
| 珍珠(例如，钛酸化云母、氯氧化铋) | 0-20 | 0-10 | 0-5 | 0-20 | 0-60 |
| 湿粘合剂(例如，辛基十二醇硬脂酰氧基硬脂酸酯(Octyldodecyl | 0-3 | 2-5 | 2-5 | 3-10 | 3-15 |
| stearoyl stearate)、二-PPG3肉豆蔻基醚己二酸酯(di-PPG3 myristyl etheradipate)、硬脂酸异鲸蜡酯(isocetyl stearate)、鲸蜡基聚二甲基硅氧烷(cetyldimethicone)) | |||||
| 干粘合剂(例如，硅酸钙、高岭土) | 0-2 | 2-5 | 2-5 | 3-8 | 3-8 |
| 香料、防腐剂 | QS | QS | QS | QS | QS |
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA |
| 油包水粉底(WATER-IN-OIL FOUNDATION) | |
| 原材料(1NCI名称) | 量 |
| 环二甲基硅酮 | 12.0 |
| 聚二甲基硅氧烷 | 5.0 |
| 环二甲基硅酮(和)聚二甲基硅氧烷共聚醇 | 20.0 |
| 月桂醇聚醚-7 | 0.5 |
| 着色剂(疏水处理的) | 2.2 |
| 二氧化钛(和)甲基硅酮(methicone) | 8.5 |
| 滑石(和)甲基硅酮 | 3.3 |
| 水 | 37.2 |
| 氯化钠 | 2.0 |
| 丙二醇 | 8.0 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 无水粉底膏(ANHYDROUS MAKEUP STICK) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 地蜡 | 5.6 |
| 聚乙烯 | 5.3 |
| 二月桂酸甘油酯 | 5.5 |
| 新戊酸异硬脂酯 | 13.0 |
| 辛基十二醇硬脂酰氧基硬脂酸酯 | 12.0 |
| 十四酸十四酯 | 11.0 |
| 甲氧基肉桂酸乙基己酯(Ethylhexyl methoxycinnamate) | 7.5 |
| PVP/二十碳烯共聚物 | 0.5 |
| 生育酚乙酸酯 | 0.1 |
| 聚二甲基硅氧烷(和)三甲基甲硅烷氧基硅酸酯(Trimethylsiloxysilicate) | 8.0 |
| 环戊硅氧烷 | 9.0 |
| 云母 | 10.0 |
| 滑石 | 1.7 |
| 二氧化钛(和)三异硬脂酸异丙氧酯钛(Isopropyl titaniumtriisostearate) | 8.86 |
| 氧化铁(和)三异硬脂酸异丙氧酯钛 | 1.94 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 硅氧烷包水粉底(IN-SILICONE FOUNDATION) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 鲸蜡基聚二甲基硅氧烷共聚醇(Cetyl dimethicone copolyol) | 0.45 |
| 聚甘油-4异硬脂酸酯(和)鲸蜡基聚二甲基硅氧烷共聚醇(和)月桂酸己酯 | 1.75 |
| 聚亚烷基聚硅氧烷共聚物(Polyalkylene polysiloxanecopolymer) | 0.9 |
| 鲸蜡基聚二甲基硅氧烷 | 0.9 |
| 蜂蜡 | 0.7 |
| 蓖麻蜡(和)氢化蓖麻油 | 0.35 |
| 棕榈酸辛酯 | 7.0 |
| 环二甲基硅酮 | 7.95 |
| 苯基三甲基硅酮(Phenyl trimethicone) | 2.2 |
| 二氧化钛(和)辛酰硅烷 | 7.5 |
| 氧化铁(和)辛酰硅烷 | 1.1 |
| 滑石(和)辛酰硅烷 | 3.8 |
| 环二甲基硅酮 | 7.95 |
| 聚二甲基硅氧烷 | 1.3 |
| 水 | 49.55 |
| 氯化钠 | 0.5 |
| 丙二醇 | 5.3 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 水包油粉底(OIL-IN-WATER FOUNDATION) | |
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 水 | 59.85 |
| 聚乙烯吡咯烷酮 | 5.0 |
| 硅酸铝镁 | 2.0 |
| 黄原胶 | 0.4 |
| EDTA三钠 | 0.05 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(和)丙二醇(和)PVM/MA共聚物 | 1.0 |
| 聚山梨醇酯20 | 1.0 |
| 高岭土 | 0.8 |
| 丁二醇 | 4.0 |
| 二氧化钛 | 6.05 |
| 氧化铁 | 1.15 |
| 聚二甲基硅氧烷 | 6.0 |
| 棕榈酸乙基己酯 | 2.0 |
| PEG/PPG-25/25聚二甲基硅氧烷 | 1.0 |
| 生育酚乙酸酯 | 0.1 |
| 棕榈酸视黄酯 | 0.1 |
| 硅石 | 3.0 |
| 环戊硅氧烷 | 5.0 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
| 防晒配方(SUNSCREEN FORMULAE) | ||
| 原材料(INCI名称) | 量 | |
| SPF～25 | SPF～5 | |
| 水 | 52.65 | 71.10 |
| PVM/MA癸二烯交聚物 | 0.5 | 0.5 |
| 丁二醇 | 3.0 | 3.0 |
| EDTA二钠 | 0.1 | 0.1 |
| PEG-20硬脂酸酯 | 1.5 | 1.5 |
| 硬脂酸甘油酯(和)月桂醇聚醚-23 | 2.0 | 2.0 |
| 新戊酸异硬脂酯 | 1.0 | 1.0 |
| 棕榈酸乙基己酯 | 2.0 | 2.0 |
| 二月桂酸甘油酯 | 0.5 | 0.5 |
| 甲氧基肉桂酸辛酯 | 7.5 | 7.5 |
| 羟苯甲酮 | 2.0 | 2.0 |
| 水杨酸乙基己酯 | 3.0 | 3.0 |
| 氢氧化钠(10％) | 1.3 | 1.3 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(和)丙二醇 | 3.0 | 3.0 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(和)丙二醇(和)PVM/MA共聚物 | 0.5 | 0.5 |
| 苯乙烯/丙烯酸酯共聚物(27％固体) | 18.45 | - |
| 香料、防腐剂 | QS | QS |
| 化合物 | SA | SA |
| 极防水性防晒配方(VERY WATER-RESISTANTSUNSCREEN FORMULAE) | 量 | |
| 原材料(INCI名称) | ||
| SPF～12 | SPF～22 | |
| 水 | 65.16 | 46.53 |
| 丙烯酸酯共聚物 | 3.0 | 3.0 |
| EDTA二钠 | 0.1 | 0.1 |
| 丁二醇 | 2.0 | 2.0 |
| 聚甲基丙烯酸甘油酯(和)丙二醇(和)PVM/MA共聚物 | 1.0 | 1.0 |
| 丁基化的PVP | 0.05 | 0.05 |
| 硬脂酸甘油酯(和)二十二醇(和)棕榈酸(和)硬脂酸(和)卵磷脂(和)月桂醇 | 4.5 | 4.5 |
| 三十烷基化PVP(Tricontanyl PVP) | 1.0 | 1.0 |
| 棕榈酸辛酯 | 2.0 | 2.0 |
| 甲氧基肉桂酸辛酯 | 7.5 | 7.5 |
| 羟苯甲酮 | 2.0 | 2.0 |
| 水杨酸乙基己酯 | 3.0 | 3.0 |
| 新戊酸十三烷酯 | 3.0 | 3.0 |
| 二月桂酸甘油酯 | 0.5 | 0.5 |
| 氢氧化钠(10％) | 1.89 | 1.89 |
| 环戊硅氧烷 | 2.0 | 2.0 |
| 丁二醇 | 1.0 | 1.0 |
| 苯乙烯/丙烯酸酯共聚物(27％固体) | 18.45 | - |
| 香料、防腐剂 | QS | QS |
| 化合物 | SA | SA |
| 硅氧烷包水防晒霜(WATER-IN-SILICONE SUNSCREEN) | 量 |
| 原材料(INCI名称) | |
| 鲸蜡PEG/PPG-15/15丁醚聚二甲基硅氧烷 | 2.0 |
| 矿物油 | 3.0 |
| 棕榈酸乙基己酯 | 1.0 |
| 水杨酸乙基己酯 | 5.0 |
| 氢化蓖麻油 | 0.5 |
| 蜂蜡 | 0.5 |
| 甲氧基肉桂酸辛酯 | 7.5 |
| 聚乙烯 | 1.0 |
| PEG-30二聚羟基硬脂酸酯 | 2.0 |
| 环戊硅氧烷 | 5.0 |
| 聚二甲基硅氧烷 | 5.0 |
| 氯化钠 | 0.6 |
| 丙烯酸酯/C12-22烷基甲基丙烯酸酯共聚物 | 0.5 |
| 水 | 66.4 |
| 香料、防腐剂 | QS |
| 化合物 | SA |
免洗护发剂(LEAVE-ON HAIR CONDITIONER)
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 去离子水 | QS |
| 异硬脂酰胺丙基吗啉乳酸酯(Isostearamidopropyl Morpholine Lactate) | 6.0 |
| 羟乙基纤维素 | 1.0 |
| 防腐剂、香料、颜料 | QS |
| 化合物 | 1000ppm |
清洗霜(CREAM RINSE)(pH4)
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 去离子水 | QS |
| 山嵛基三甲基氯化铵(BehentrimoniumChloride) | 2.0 |
| 三月桂醇聚醚-4磷酸盐(Trilaureth-4Phosphate) | 1.5 |
| 鲸蜡醇 | 2.0 |
| 柠檬酸 | QS |
| 防腐剂、香料、颜料 | QS |
| 化合物 | 1000ppm |
营养护发剂/处理剂(NOURISHING HAIR CONDITIONER/TREATMENT)(pH6)
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 去离子水 | QS |
| 山嵛基三甲基硫酸甲酯铵(BehentrimoniumMethosulfate)(和)鲸蜡醇 | 4.0 |
| 小麦胚芽油 | 1.0 |
| 鲸蜡醇 | 0.5 |
| 丙二醇 | 5.0 |
| PEG-60羊毛脂 | 1.0 |
| 泛醇 | 2.0 |
| 羽扇豆氨基酸 | 1.0 |
| 椰油基羟丙基水解小麦蛋白二甲基氯化铵(CocodimoniumHydroxypropyl Hydrolyzed Wheat Protein) | 1.0 |
| 香料、防腐剂、颜料 | QS |
| 化合物 | 1000ppm |
护理香波(CONDITIONING SHAMPOO)
| 原材料 | 量 |
| (INCI名称) | |
| 去离子水 | QS |
| 月桂醇聚醚硫酸钠(Sodium Laureth Sulfate)30％ | 27.0 |
| 椰油酰胺丙基甜菜碱 | 3.7 |
| 椰油基-葡糖苷(和)油酸甘油酯 | 5.0 |
| 椰油基-葡糖苷(和)二硬脂酸乙二醇酯(和)甘油 | 3.0 |
| 瓜儿胶羟丙基三甲基氯化铵(Guar HydroxypropylTrimonium Chloride) | 0.1 |
| 月桂醇聚醚-2 | 1.55 |
| 香料、防腐剂、颜料 | QS |
| 化合物 | 1000ppm |
去屑洗发水(ANTI-DANDRUFF SHAMPOO)
| 原材料(INCI名称) | 量 |
| 去离子水 | QS |
| 硅酸铝镁 | 1.0 |
| 羟丙基甲基纤维素 | 0.8 |
| 烯烃硫酸钠40％ | 35.0 |
| 月桂酰胺DEA(Lauramide DEA) | 4.0 |
| 大豆油脂酰胺DEA(Soyamide DEA) | 1.0 |
| 季铵盐-70水解胶原 | 2.0 |
| 2-巯基吡啶氧化锌(Zinc Pyrithione)40％ | 4.0 |
| 香料、防腐剂、颜料 | QS |
| 化合物 | 1000ppm |
透明香波(CLEAR 配方
SHAMPOO) (量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| TexaponN 70 | 13.00 | 15.00 | 10.50 | 12.50 | 10.00 |
| Dehyton PK 45 | 7.50 | 7.00 | 5.00 | 5.50 | 10.00 |
| Cetiol HE | 2.00 | 2.50 | 3.50 | 5.00 | 2.30 |
| 香料 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 |
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA |
| D-泛醇USP | 1.00 | 1.50 | 1.80 | 1.70 | 1.40 |
| 防腐剂 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 |
| 柠檬酸 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 |
| Luviquat Ultra Care | 1.50 | 1.00 | 1.50 | 1.20 | 1.10 |
| 氯化钠 | 1.50 | 1.40 | 1.40 | 1.30 | 1.50 |
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
香波(SHAMPOO) 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Texapon NSO | 35.00 | 40.00 | 30.00 | 45.00 | 27.00 |
| Plantacare 2000 | 5.00 | 5.50 | 4.90 | 3.50 | 7.00 |
| Tego Betain L7 | 10.00 | 5.00 | 12.50 | 7.50 | 15.00 |
| 香料 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 |
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA |
| D-泛醇USP | 0.50 | 1.00 | 0.80 | 1.50 | 0.50 |
| 防腐剂 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 |
| 柠檬酸 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 |
| Rewopal LA3 | 0.50 | 2.00 | 0.50 | 0.50 | 2.00 |
| 氯化钠 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 |
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
透明护理香波配方
(CLEAR (量)
CONDITIONING
SHAMPOO)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Amphotensid GB2009 | 10.00 | 15.00 | 20.00 | 12.00 | 17.00 |
| Plantacare 2000 | 5.00 | 6.00 | 7.00 | 8.00 | 4.00 |
| Tego Betain L7 | 15.00 | 12.00 | 10.00 | 18.00 | 20.00 |
| Luviquat FC 550 | 0.30 | 0.20 | 0.20 | 0.20 | 0.30 |
| 香料 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 |
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA |
| Cremophor PS 20 | 5.00 | 1.00 | 1.00 | 7.00 | 5.00 |
| 防腐剂 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 |
| Rewopal LA3 | 2.00 | 1.00 | 0.50 | 2.00 | 2.00 |
| 柠檬酸 | 0.20 | 0.20 | 0.20 | 0.20 | 0.20 |
| Stepan PEG 600 DS | 3.00 | 2.00 | 2.00 | 3.00 | 2.50 |
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
| 泡沫O/W-乳液(FOAMO/W-EMULSION) | 配方(量) | |
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 |
| 硬脂酸 | 5.00 | 1.00 |
| 鲸蜡醇 | 5.50 | |
| 鲸蜡硬脂醇 | 2.00 | |
| PEG-40硬脂酸酯 | 8.50 | |
| PEG-20硬脂酸酯 | 1.00 | |
辛酸/癸酸甘油三酯(Capryls  |
4.00 | 2.00 |
| 苯甲酸C12-15烷基酯 | 10.00 | 15.00 |
| 环二甲基硅酮 | 4.00 | |
| 聚二甲基硅氧烷 | 0.50 | |
| 化合物 | SA | SA |
| 辛基异硬脂酸酯 | 5.00 | |
| 十四酸十四酯 | 2.00 | |
| 纯地蜡 | 1.50 | |
| 甘油 | 3.00 | |
| 过滤物 | ||
羟丙基二淀粉磷酸盐(Hydroxypropyl dist |
1.00 | 3.50 |
| BHT | 0.02 | |
| EDTA二钠 | 0.50 | 0.10 |
| 香料、防腐剂(Konservierungsmittel) | QS | QS |
| 色料 | QS | QS |
| 氢氧化钾 | QS | QS |
| 水dem. | QS(100) | QS(100) |
| pH调节到6.5-7.5 | pH调节到5.0-6.0 | |
| 乳液1 | ||
| 乳液2 | ||
| 气体(Stickstoff) | ||
| 气体(氦) |
含珠光的调理香波(CONDITIONER 配方
SHAMPOO WITH PEARLESCENT) (量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 |
| 聚季铵盐-10 | 0.50 | 0.50 | 0.40 |
| 月桂醇聚醚硫酸钠(Sodiumlaurethsulfat) | 9.00 | 8.50 | 8.90 |
| 椰油酰胺丙基甜菜碱 | 2.50 | 2.60 | 3.00 |
| 二苯酮-4 | 1.50 | 0.50 | 1.00 |
| 化合物 | SA | SA | SA |
| 珠光化合物 | 2.00 | 2.50 | |
| EDTA二钠 | 0.10 | 0.15 | 0.05 |
| 防腐剂、香料、增稠剂 | QS | QS | QS |
| 水dem. | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
pH调节到6.0
透明调理香波(CLEAR CONDITIONING 配方
SHAMPOO) (量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 |
| 聚季铵盐-10 | 0.50 | 0.50 | 0.50 |
| 月桂醇聚醚硫酸钠 | 9.00 | 8.50 | 9.50 |
| 化合物 | SA | SA | SA |
| 二苯酮-3 | 1.00 | 1.50 | 0.50 |
| 亚氨基琥珀酸、Na | 0.20 | 0.20 | 0.80 |
| 防腐剂、香料、增稠剂 | QS | QS | QS |
| 水dem. | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
pH调节到6.0
具体积效应的透明护理香波(CLEAR 配方
CONDITIONING SHAMPOO WITH VOLUME (量)
EFFECT)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 |
| 月桂醇聚醚硫酸钠(Natriumlaurethsulfat) | 10.00 | 10.50 | 11.00 |
| 甲氧基肉桂酸乙基己基酯 | 2.00 | 1.50 | 2.30 |
| 化合物 | SA | SA | SA |
| 椰油酰胺丙基甜菜碱 | 2.50 | 2.60 | 2.20 |
| EDTA二钠 | 0.01 | 0.10 | 0.01 |
| 防腐剂、香料、增稠剂 | QS | QS | QS |
| 水dem. | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
pH调节到6.0
带珠光的护理香波(CONDITIONING 配方
SHAMPOO WITH PEARLESCENT) (量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 |
| 聚季铵盐-10 | 0.50 | 0.50 | 0.40 |
| 月桂醇聚醚硫酸钠 | 9.00 | 8.50 | 8.90 |
| 椰油酰胺丙基甜菜碱 | 2.50 | 2.60 | 3.00 |
| 二苯酮-4 | 1.50 | 0.50 | 1.00 |
| 化合物 | SA | SA | SA |
| 珠光化合物 | 2.00 | 2.50 | |
| EDTA二钠 | 0.10 | 0.15 | 0.05 |
| 防腐剂、香料、增稠剂 | QS | QS | QS |
| 水dem. | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
pH调节到6.0
透明护理香波 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 |
| 聚季铵盐-10 | 0.50 | 0.50 | 0.50 |
| 月桂醇聚醚硫酸钠 | 9.00 | 8.50 | 9.50 |
| 化合物 | SA | SA | SA |
| 二苯酮-3 | 1.00 | 1.50 | 0.50 |
| 亚氨基琥珀酸、Na | 0.20 | 0.20 | 0.80 |
| 防腐剂、香料、增稠剂 | QS | QS | QS |
| 水dem. | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
pH调节到6.0
具体积效应的透明护理香波(CLEAR 配方
CONDITIONING SHAMPOO WITH VOLUME (量)
EFFECT)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 |
| 月桂醇聚醚硫酸钠 | 10.00 | 10.50 | 11.00 |
| 甲氧基肉桂酸乙基己基酯 | 2.00 | 1.50 | 2.30 |
| 化合物 | SA | SA | SA |
| 椰油酰胺丙基甜菜碱 | 2.50 | 2.60 | 2.20 |
| EDTA二钠 | 0.01 | 0.10 | 0.01 |
| 防腐剂、香料、增稠剂 | QS | QS | QS |
| 水dem. | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
pH调节到6.0
凝胶膏(GEL CRgME) 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物 | 0.40 | 0.35 | 0.40 | 0.35 |
| 聚丙烯酸 | 0.20 | 0.22 | 0.20 | 0.22 |
| 黄原胶 | 0.10 | 0.13 | 0.10 | 0.13 |
| 鲸蜡硬脂醇(cetearylalkohol) | 3.00 | 2.50 | 3.00 | 2.50 |
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 4.00 | 4.50 | 4.00 | 4.50 |
| 辛酸/癸酸甘油三酯 | 3.00 | 3.50 | 3.00 | 3.50 |
| 氨基二苯酮(Aminobenzophenon)(例如，UVINUL A PLUSTM) | 2.00 | 1.50 | 0.75 | 1.00 |
| UVASorb K2A | 3.00 | |||
| 甲氧基肉桂酸乙基己基酯 | 3.00 | 1.00 | ||
| 双乙基己氧基苯酚甲氧基苯基三嗪(Bis-Ethylhexyloxyphenol methoxyphenylTriazin) | 1.50 | 2.00 | ||
| 丁基甲氧基二苯甲酰甲烷(ButylMethoxydibenzoylmethan) | 2.00 | |||
| 苯基双苯并咪唑四磺酸二钠(DisodiumPhenyl Dibenzimidazol Tetrasulfonat) | 2.50 | 0.50 | 2.00 | |
| 乙基己基三嗪酮(Ethyhexyl Triazon) | 4.00 | 3.00 | 4.00 | |
| 氰双苯丙烯酸辛酯(Octocrylen) | 4.00 | |||
| 二乙基己基丁酰胺基三嗪酮(DiethylhexylButamido Triazon) | 1.00 | 2.00 | ||
苯基苯并咪唑磺酸(PhenylbenzimidazolSulfons |
0.50 | 3.00 | ||
| 亚甲基双苯并三唑四甲基丁基苯酚(Methylen Bis-Benzotriazolyl) | 2.00 | 0.50 | 1.50 | |
| 水杨酸乙基己酯(Tetramethylbutylphenol) | 3.00 | |||
| 甲酚曲唑三硅氧烷(Ethylhexysalicylate) | 0.50 |
二苯并(c)呋喃酮亚基二樟脑磺酸(Terephthaliden Dicamphor Sulfons |
1.50 | 1.00 | ||
| 二乙基己基-2，6-萘二甲酸酯(Diethylhexyl-2，6-naphthalate) | 3.50 | 4.00 | 7.00 | 9.00 |
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 3.00 | ||
| 氧化锌-超细 | 0.25 | |||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA |
| Cyclisches二甲基聚硅氧烷 | 5.00 | 5.50 | 5.00 | 5.50 |
| 聚二甲基硅氧烷聚二甲基硅氧烷(Dimethicon Polydimethylsiloxane) | 1.00 | 0.60 | 1.00 | 0.60 |
| 甘油 | 1.00 | 1.20 | 1.00 | 1.20 |
| 氢氧化钠 | QS. | QS | QS | QS |
| 防腐剂 | 0.30 | 0.23 | 0.30 | 0.23 |
| 香料 | 0.20 | 0.20 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
| pH调节到6.0 | ||||
| 凝胶膏(GELCREME) | 配方(量) | |||
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物 | 0.40 | 0.35 | 0.40 | 0.35 |
| 聚丙烯酸 | 0.20 | 0.22 | 0.20 | 0.22 |
| 黄原胶 | 0.10 | 0.13 | 0.10 | 0.13 |
| 鲸蜡硬脂醇 | 3.00 | 2.50 | 3.00 | 2.50 |
| C12-15烷基苯甲酸 | 4.00 | 4.50 | 4.00 | 4.50 |
| 辛酸/癸酸甘油三酯 | 3.00 | 3.50 | 3.00 | 3.50 |
| 氨基二苯酮(例如，UVINUL A PLUSTM) | 2.00 | 1.50 | 0.75 | 1.00 |
| UVASorb K2A | 3.00 | |||
| 甲氧基肉桂酸乙基己基酯 | 3.00 | 1.00 | ||
| 双乙基己氧基苯酚甲氧基苯基三嗪 | 1.50 | 2.00 | ||
| 丁基甲氧基二苯甲酰甲烷 | 2.00 | |||
| 苯基双苯并咪唑四磺酸二钠 | 2.50 | 0.50 | 2.00 | |
| 乙基己基三嗪酮 | 4.00 | 3.00 | 4.00 | |
| 氰双苯丙烯酸辛酯 | 4.00 | |||
| 二乙基己基丁酰胺基三嗪酮 | 1.00 | 2.00 | ||
| 苯基苯并咪唑磺酸 | 0.50 | 3.00 | ||
| 亚甲基双苯并三唑四甲基丁基苯酚 | 2.00 | 0.50 | 1.50 | |
| 水杨酸乙基己酯 | 3.00 | |||
| 甲酚曲唑三硅氧烷 | 0.50 | |||
| 二苯并(c)呋喃酮亚基二樟脑磺酸 | 1.50 | 1.00 | ||
| 二乙基己基-2，6-萘二甲酸酯 | 3.50 | 4.00 | 7.00 | 9.00 |
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 3.00 | ||
| 氧化锌-超细 | 0.25 | |||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA |
| Cyclisches二甲基聚硅氧烷 | 5.00 | 5.50 | 5.00 | 5.50 |
| 聚二甲基硅氧烷聚二甲基硅氧烷 | 1.00 | 0.60 | 1.00 | 0.60 |
| 甘油 | 1.00 | 1.20 | 1.00 | 1.20 |
| 氢氧化钠 | QS | QS | QS | QS |
| 防腐剂 | 0.30 | 0.23 | 0.30 | 0.23 |
| 香料 | 0.20 | 0.20 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
| pH调节到6.0 |
O/W防晒配方 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
| 单硬脂酸甘油酯SE | 0.50 | 1.00 | 3.00 | 1.50 | |||
| 甘油硬脂酸酯柠檬酸酯(Glycerl Stearate Citrate) | 2.00 | 1.00 | 2.00 | 4.00 | |||
| 硬脂酸 | 3.00 | 2.00 | |||||
| PEG-40硬脂酸酯 | 0.50 | 2.00 | |||||
| 磷酸鲸蜡醇酯(CetylPhosphate) | 1.00 | ||||||
| 硫酸鲸蜡硬脂醇酯(CetearylSulfate) | 0.75 | ||||||
| 十八烷醇 | 3.00 | 2.00 | 0.60 | ||||
| 鲸蜡醇 | 2.50 | 1.10 | 1.50 | 0.60 | 2.00 | ||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA | SA | SA |
| 氨基二苯酮(例如，UVINUL A PLUSTM) | 2.00 | 1.50 | 0.75 | 1.00 | 2.10 | 4.50 | 5.00 |
| UVASorb K2A | |||||||
| 甲氧基肉桂酸乙基己酯 | 5.00 | 6.00 | 8.00 | ||||
| 双乙基己氧基苯酚甲氧基苯基三嗪 | 1.50 | 2.00 | 2.50 | 2.50 | |||
| 丁基甲氧基二苯甲酰甲烷 | 2.00 | 2.00 | 1.50 | ||||
| 苯基二苯并咪唑四磺酸酯二钠 | 2.50 | 0.50 | 2.00 | 0.30 | |||
| 乙基己基三嗪酮 | 4.00 | 3.00 | 4.00 | 2.00 | |||
| 氰双苯丙烯酸辛酯 | 4.00 | 7.50 |
O/W防晒配方 配方
(量)
| 二乙基己基丁酰胺基三嗪酮 | 1.00 | 2.00 | 1.00 | 1.00 | |||
| 苯基苯并咪唑磺酸 | 0.50 | 3.00 | |||||
| 亚甲基双苯并三唑四甲基丁基苯酚 | 2.00 | 0.50 | 1.50 | 2.50 | |||
| 水杨酸乙基己酯 | 3.00 | 5.00 | |||||
| 甲酚曲唑三硅氧烷 | 0.50 | 1.00 | |||||
| 二苯并(c)呋喃酮亚基二樟脑磺酸 | 1.50 | 1.00 | 1.00 | 0.50 | |||
| 二乙基己基-2，6-萘二甲酸酯 | 3.50 | 7.00 | 6.00 | 9.00 | |||
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 3.00 | 3.50 | 1.50 | |||
| 氧化锌-超细 | 0.25 | 2.00 | |||||
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 0.25 | 4.00 | 7.00 | ||||
| 辛醚 | 3.50 | 2.00 | |||||
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 5.00 | 6.00 | |||||
| 椰油脂酸甘油酯(Cocoglyceride) | 6.00 | 2.00 | |||||
| 聚二甲基硅氧烷 | 0.50 | 1.00 | 2.00 | ||||
| 环二甲基硅酮 | 2.00 | 0.50 | 0.50 | ||||
| 牛油果油 | 2.00 | ||||||
| PVP十六碳烯共聚物 | 0.20 | 0.50 | 1.00 | ||||
| 甘油 | 3.00 | 7.50 | 7.50 | 5.00 | 2.50 | ||
| 黄原胶 | 0.15 | 0.05 | 0.30 | ||||
| 卡波姆钠 | 0.20 | 0.15 | 0.25 |
| 维生素E乙酸酯 | 0.60 | 0.23 | 0.70 | 1.00 | |||
| Fucogel 1000 | 3.00 | 10.00 | |||||
| 野大豆(Glycin Soja) | 0.50 | 1.50 | 1.00 | ||||
| 乙基己氧基甘氨酸(Ethylhexyloxyglycin) | 0.30 | ||||||
| DMDM乙内酰脲 | 0.60 | 0.40 | 0.20 | ||||
| Glyacil-L | 0.18 | 0.20 | |||||
| 对羟基苯甲酸甲酯(Methylparaben) | 0.15 | 0.25 | 0.50 | ||||
| 苯氧基乙醇 | 1.00 | 0.40 | 0.40 | 0.50 | 0.40 | ||
| EDTA三钠 | 0.02 | 0.05 | |||||
| 亚氨基琥珀酸 | 0.25 | 1.00 | |||||
| 乙醇 | 2.00 | 1.50 | 3.00 | 1.20 | 5.00 | ||
| 香料 | 0.10 | 0.25 | 0.30 | 0.40 | 0.20 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
水分散体(HYDRODISPERSION) 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 鲸蜡硬脂醇聚醚(Ceteaereth)-20 | 1.00 | 0.50 | |||
| 鲸蜡醇 | 1.00 | ||||
| 卡波姆钠 | 0.20 | 0.30 | |||
| 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物 | 0.50 | 0.40 | 0.10 | 0.50 | |
| 黄原胶 | 0.30 | 0.15 | |||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA |
| 氨基二苯酮(例如，UVINUL APLUSTM) | 2.00 | 1.50 | 0.75 | 1.00 | 2.10 |
| UVASorb K2A | 3.50 | ||||
| 甲氧基肉桂酸乙基己基酯 | 5.00 | ||||
| 双乙基己氧基苯酚甲氧基苯基三嗪 | 1.50 | 2.00 | 2.50 | ||
| 丁基甲氧基二苯甲酰甲烷 | 2.00 | 2,00 | |||
| 苯基二苯并咪唑四磺酸酯二钠盐 | 2.50 | 0.50 | 2.00 | ||
| 乙基己基三嗪酮 | 4.00 | 3.00 | 4.00 | ||
| 氰双苯丙烯酸辛酯 | 4.00 | ||||
| 二乙基己基丁酰胺基三嗪酮 | 1.00 | 2.00 | 1.00 | ||
| 苯基苯并咪唑磺酸 | 0.50 | 3.00 | |||
| 亚甲基双苯并三唑四甲基丁基苯酚 | 2.00 | 0.50 | 1.50 | 2.50 | |
| 水杨酸乙基己酯 | 3.00 | ||||
| 甲酚曲唑三硅氧烷 | 0.50 |
| 二苯并(c)呋喃酮亚基二樟脑磺酸 | 1.50 | 1.00 | 1.00 | ||
| 二乙基己基-2，6-萘二甲酸酯 | 7.00 | 9.00 | |||
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 3.00 | 3.50 | ||
| 氧化锌-超细 | 0.25 | ||||
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 2.00 | 2.50 | |||
| 辛醚 | 4.00 | ||||
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 4.00 | 2.00 | 6.00 | ||
| 碳酸二辛酯 | 2.00 | 6.00 | |||
| 聚二甲基硅氧烷 | 0.50 | 1.00 | |||
| 苯基三甲基硅酮 | 2.00 | 0.50 | |||
| 牛油果油 | 2.00 | 5.00 | |||
| PVP十六碳烯共聚物 | 0.50 | 0.50 | 1.00 | ||
| 三十烷基PVP | 0.50 | 1.00 |
| 乙基己基甘油 | 1.00 | 0.80 | |||
| 甘油 | 3.00 | 7.50 | 7.50 | 8.50 | |
| 野大豆 | 1,50 | 1.00 |
水分散体(HYDRODISPERSION) 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 维生素E乙酸酯 | 0.50 | 0.25 | 1.00 | ||
| α-葡糖基芸香苷(Alpha-Glucosilrutin) | 0.60 | 0.25 | |||
| Fucogel 1000 | 2.50 | 0.50 | 2.00 | ||
| DMDM乙内酰脲 | 0.60 | 0.45 | 0.25 | ||
| Glyacil-S | 0.20 | ||||
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.50 | 0.25 | 0.15 | ||
| 苯氧基乙醇 | 0.50 | 0.40 | 1.00 | ||
| EDTA三钠 | 0.01 | 0.05 | 0.10 | ||
| 乙醇 | 3.00 | 2.00 | 1.50 | 7.00 | |
| 香料 | 0.20 | 0.05 | 0.40 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
W/O防晒乳(W/O SUNSCREEN 配方
EMULSION) (量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 鲸蜡基二甲基硅氧烷共聚醇 | 2.50 | 4.00 | |||
| 聚甘油-2-二聚羟基硬脂酸酯 | 5.00 | 4.50 | |||
| PEG-30-二聚羟基硬脂酸酯 | 5.00 | ||||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA |
| 氨基二苯酮(例如，UVINUL A PLUSTM) | 2.00 | 1.50 | 0.75 | 1.00 | 2.10 |
| UVASorb K2A | 2.00 | ||||
| 甲氧基肉桂酸乙基己基酯 | 5.00 | ||||
| 双乙基己氧基苯酚甲氧基苯基三嗪 | 1.50 | 2.00 | 2.50 | ||
| 丁基甲氧基二苯甲酰甲烷 | 2.00 | 2.00 | |||
| 苯基二苯并咪唑四磺酸酯二钠 | 2.50 | 0.50 | 2.00 | ||
| 乙基己基三嗪酮 | 4.00 | 3.00 | 4.00 | ||
| 氰双苯丙烯酸辛酯 | 4.00 | ||||
| 二乙基己基丁酰胺基三嗪酮 | 1.00 | 2.00 | 1.00 | ||
| 苯基苯并咪唑磺酸 | 0.50 | 3.00 | |||
| 亚甲基双苯并三唑四甲基丁基苯酚 | 2.00 | 0.50 | 1.50 | 2.50 | |
| 水杨酸乙基己酯 | 3.00 | ||||
| 甲酚曲唑三硅氧烷 | 0.50 | ||||
| 二苯并(c)呋喃酮亚基二樟脑磺酸 | 1.50 | 1.00 | 1.00 | ||
| 二乙基己基-2，6-萘二甲酸酯 | 7.00 | 4.00 | |||
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 3.00 | 3.50 | ||
| 氧化锌-超细 | 0,25 | ||||
| 矿物油 | 12.00 | 10.00 | 8.00 |
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 9.00 | ||||
| 二辛基醚 | 10.00 | 7.00 | |||
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 2.00 | 8.00 | 4.00 | ||
| 碳酸二辛酯 | 5.00 | 6.00 | |||
| 聚二甲基硅氧烷 | 4.00 | 1.00 | 5.00 | ||
| 环二甲基硅酮 | 2.00 | 2.50 | 2.00 | ||
| 牛油果油 | 3.00 | ||||
| 凡士林 | 4.50 | ||||
| PVP十六碳烯共聚物 | 0.50 | 0.50 | 1.00 | ||
| 乙基己基甘油 | 0.30 | 1.00 | 0.50 | ||
| 甘油 | 3.00 | 7.50 | 7.50 | 8.50 | |
| 野大豆 | 1.00 | 1.50 | 1.00 | ||
| MgSO4 | 1.00 | 0.50 | 0,50 | ||
| MgCl2 | 1.00 | 0.70 | |||
| 维生素E乙酸酯 | 0.50 | 0.25 | 1.00 | ||
| 棕榈酸抗坏血酸酯 | 0.50 | 2.00 | |||
| Fucogel 1000 | 3.50 | 1.00 | |||
| DMDM乙内酰脲 | 0.60 | 0.40 | 0.20 | ||
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.50 | 0.25 | 0.15 |
| 苯氧基乙醇 | 0.50 | 0.40 | 1.00 | ||
| EDTA三钠 | 0.12 | 0.05 | 0.30 | ||
| 乙醇 | 3.00 | 1.50 | 5.00 | ||
| 香料 | 0.20 | 0.40 | 0.35 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
棒(膏)(STICKS) 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| 辛酸/癸酸甘油三酯 | 12.00 | 10.00 | 6.00 | |
| 辛基十二醇(Octyldodecanol) | 7.00 | 14.00 | 8.00 | 3.00 |
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 12.00 | |||
| 四异硬脂酸季戊四醇酯(PentaerythritylTetraisostearat) | 10.00 | 6.00 | 8.00 | 7.00 |
| 聚甘油-3二异硬脂酸酯(Polyglyceryl-3Diisostearat) | 2.50 | |||
| 双-二甘油多脂酰己二酸酯-2(Bis-DiglycerylPolyacyladipate-2) | 9.00 | 8.00 | 10.00 | 8.00 |
| 鲸蜡硬脂醇 | 8.00 | 11.00 | 9.00 | 7.00 |
| 十四酸十四酯 | 3.50 | 3.00 | 4.00 | 3.00 |
| 蜂蜡 | 5.00 | 5.00 | 6.00 | 6.00 |
| 巴西棕榈蜡 | 1.50 | 2.00 | 2.00 | 1.50 |
| 白蜂蜡 | 0.50 | 0.50 | 0.50 | 0.40 |
| 硬脂酸C16-40烷基酯 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | |
| 化合物 | SA | SA | SA | SA |
| 氨基二苯酮(例如，UVINUL A PLUSTM) | 2.00 | 1.50 | 0.75 | 9.00 |
| UVASorb K2A | 2.00 | 4.00 | ||
| 甲氧基肉桂酸乙基己基酯 | 3.00 | |||
| 双乙基己氧基苯酚甲氧基苯基三嗪 | 1.50 | 2.00 | ||
| 丁基甲氧基二苯甲酰甲烷 | 2.00 | |||
| 苯基二苯并咪唑四磺酸酯二钠盐 | 2.50 | 0.50 | 2.00 | |
| 乙基己基三嗪酮 | 4.00 | 3.00 | 4.00 | |
| 氰双苯丙烯酸辛酯 | 4.00 | |||
| 二乙基己基丁酰胺基三嗪酮 | 1.00 | 2.00 | ||
| 苯基苯并咪唑磺酸 | 0.50 | 3.00 | ||
| 亚甲基双苯并三唑四甲基丁基苯酚 | 2.00 | 0.50 | 1.50 | |
| 水杨酸乙基己酯 | 3.00 | |||
| 甲酚曲唑三硅氧烷 | 0.50 | |||
| 二苯并(c)呋喃酮亚基二樟脑磺酸 | 1.50 | 1.00 | ||
| 二乙基己基-2，6-萘二甲酸酯 | 7.00 | |||
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 3.00 | ||
| 氧化锌-超细 | 0.25 | |||
| 维生素E乙酸酯 | 0.50 | 1.00 | ||
| 棕榈酸抗坏血酸酯 | 0.05 | 0.05 | ||
| Buxux Chinensis | 2.00 | 1.00 | 1,00 | |
| 香料、BHT | 0.10 | 0.25 | 0.35 | |
| 蓖麻油(Ricinus Communis) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
PIT-乳液 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
| 单硬脂酸甘油酯SE | 0.50 | 2.00 | 3.00 | 5.00 | 0.50 | 4.00 | ||
| 异硬脂酸甘油酯 | 3.50 | 4.00 | 2.00 | |||||
| 异鲸蜡醇聚醚(Isoceteth)-20 | 0.50 | 2.00 | ||||||
| 鲸蜡硬脂醇聚醚(Ceteareth)-12 | 5.00 | 1.00 | 3.50 | 5.00 | ||||
| 鲸蜡硬脂醇聚醚-20 | 5.00 | 1.00 | 3.50 | |||||
| PEG-100硬脂酸酯 | 2.80 | 2.30 | 3.30 | |||||
| 鲸蜡醇 | 5.20 | 1.20 | 1.00 | 1.30 | 0.50 | 0.30 | ||
| 棕榈酸鲸蜡酯 | 2.50 | 1.20 | 1.50 | 0.50 | 1.50 | |||
| 鲸蜡基二甲基硅氧烷共聚醇 | 0.50 | 1.00 | ||||||
| 聚甘油-2 | 0.75 | 0.30 | ||||||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA | SA | SA | SA |
| 氨基二苯酮(例如，UVINUL APLUSTM) | 2.00 | 1.50 | 0.75 | 1.00 | 2.10 | 4.50 | 5.00 | 2.10 |
| UVASorb K2A | 4.00 | 1.50 | ||||||
| 甲氧基肉桂酸乙基己基酯 | 5.00 | 6.00 | 8.00 | 5.00 | ||||
| 双乙基己氧基苯酚甲氧基苯基三嗪 | 1.50 | 2.00 | 2.50 | 2.50 | 2.50 | |||
| 丁基甲氧基二苯甲酰甲烷 | 2.00 | 2.00 | 1.50 | 2.00 | ||||
| 苯基二苯并咪唑四磺酸酯二钠 | 2.50 | 0.50 | 2.00 | 0.30 | ||||
| 乙基己基三嗪酮 | 4.00 | 3.00 | 4.00 | 2.00 | ||||
| 氰双苯丙烯酸辛酯 | 4.00 | 7.50 | ||||||
| 二乙基己基丁酰胺基三嗪酮 | 1.00 | 2.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | |||
| 苯基苯并咪唑磺酸 | 0.50 | 3.00 | ||||||
| 亚甲基双苯并三唑四甲基丁基苯酚 | 2.00 | 0.50 | 1.50 | 2.50 | 2.50 | |||
| 水杨酸乙基己酯 | 3.00 | 5.00 | ||||||
| 甲酚曲唑三硅氧烷 | 0.50 | 1.00 | ||||||
| 二苯并(c)呋喃酮亚基二樟脑磺酸 | 1.50 | 1.00 | 1.00 | 0.50 | 1.00 | |||
| 二乙基己基-2，6-萘二甲酸酯 | 7.00 | 10.00 | 7.50 | 8.00 | ||||
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 3.00 | 3.50 | 1.50 | 3.50 |
| 氧化锌-超细 | 0.25 | 2.00 | ||||||
| 苯甲酸C12-15烷基酯 | 3.50 | 6.35 | 0.10 | |||||
| 椰油脂酸甘油酯 | 3.00 | 3.00 | 1.00 | |||||
| 辛醚 | 4.50 | |||||||
| 碳酸二辛酯 | 4.30 | 3.00 | 7.00 | |||||
| 己二酸二丁酯 | 0.50 | 0.30 |
| 苯基三甲基硅酮 | 2.00 | 3.50 | 2.00 | |||||
| 环二甲基硅酮 | 3.00 | |||||||
| Ethyl Galaktomannan | 0.50 | 2.00 | ||||||
| 氢化椰油甘油混合酯(HydrierteCoco-Glyceride) | 3.00 | 4.00 | ||||||
| Abil Wax 2440 | 1.50 | 2.00 | ||||||
| PVP十六碳烯共聚物 | 1.00 | 1.20 | ||||||
| 甘油 | 4.00 | 6.00 | 5.00 | 8.00 | 10.00 | |||
| 维生素E乙酸酯 | 0.20 | 0.30 | 0.40 | 0.30 | ||||
| 牛油果油 | 2.00 | 3.60 | 2.00 | |||||
| 碘丙基丁基氨基甲酸酯(Iodopropyl Butylcarbamat) | 0.12 | 0.20 | ||||||
| Fucogel 1000 | 0.10 | |||||||
| DMDM乙内酰脲 | 0.10 | 0.12 | 0.13 | |||||
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.50 | 0.30 | 0.35 | |||||
| 苯氧基乙醇 | 0.50 | 0.40 | 1.00 |
| 辛氧基甘油 | 0.30 | 1.00 | 0.35 | |||||
| 乙醇 | 2.00 | 2.00 | 5.00 | |||||
| EDTA三钠 | 0.40 | 0.15 | 0.20 | |||||
| 香料 | 0.20 | 0.20 | 0.24 | 0.16 | 0.10 | 0.10 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
凝胶膏(GEL CREME) 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物 | 0.40 | 0.35 | 0.40 | 0.35 |
| 聚丙烯酸 | 0.20 | 0.22 | 0.20 | 0.22 |
| Luvigel EM | 1.50 | 2.50 | 2.80 | 3.50 |
| 黄原胶 | 0.10 | 0.13 | 0.10 | 0.13 |
| 鲸蜡硬脂醇 | 3.00 | 2.50 | 3.00 | 2.50 |
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 4.00 | 4.50 | 4.00 | 4.50 |
| 辛酸/癸酸甘油三酯 | 3.00 | 3.50 | 3.00 | 3.50 |
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 1.50 | ||
| 氧化锌-超细 | 2.00 | 0.25 | ||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA |
| 二羟基丙酮 | 3.00 | 5.00 | ||
| Cyclisches二甲基聚硅氧烷 | 5.00 | 5.50 | 5.00 | 5.50 |
| 聚二甲基硅氧烷聚二甲基硅氧烷 | 1.00 | 0.60 | 1.00 | 0.60 |
| 甘油 | 1.00 | 1.20 | 1.00 | 1.20 |
| 氢氧化钠 | QS | QS | QS | QS |
| 防腐剂 | 0.30 | 0.23 | 0.30 | 0.23 |
| 香料 | 0.20 | 0.20 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
| pH调节到6.0 |
O/W自美黑配方(SELF 配方
TANNER (量)
FORMULATION)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
| 单硬脂酸甘油酯SE | 0.50 | 1.00 | 3.00 | 1.50 | |||
| 甘油硬脂酸酯柠檬酯(Glycerlstearate citrate) | 2.00 | 1.00 | 2.00 | 4.00 | |||
| 硬脂酸 | 3.00 | 2.00 | |||||
| PEG-40硬脂酸酯 | 0.50 | 2.00 | |||||
| 磷酸鲸蜡醇酯 | 1.00 | ||||||
| 硫酸鲸蜡硬脂醇酯 | 0.75 |
| 十八烷醇 | 3.00 | 2.00 | 0.60 | ||||
| 鲸蜡醇 | 2.50 | 1.10 | 1.50 | 0.60 | 2.00 | ||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA | SA | SA |
| 二羟基丙酮 | 3.00 | 5.00 | 4 | ||||
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 1.50 | 1.50 | ||||
| 氧化锌-超细 | 0.25 | 2.00 | |||||
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 0.25 | 4.00 | 7.00 | ||||
| 辛醚 | 3.50 | 2.00 | |||||
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 5.00 | 6.00 | |||||
| 椰油脂酸甘油酯 | 6.00 | 2.00 | |||||
| 聚二甲基硅氧烷 | 0.50 | 1.00 | 2.00 | ||||
| 环二甲基硅酮 | 2.00 | 0.50 | 0.50 | ||||
| 牛油果油 | 2.00 | ||||||
| PVP十六碳烯共聚物 | 0.20 | 0.50 | 1.00 | ||||
| 甘油 | 3.00 | 7.50 | 7.50 | 5.00 | 2.50 | ||
| 黄原胶 | 0.15 | 0.05 | 0.30 | ||||
| 卡波姆钠 | 0.20 | 0.15 | 0.25 | ||||
| 维生素E乙酸酯 | 0.60 | 0.23 | 0.70 | 1.00 | |||
| Fucogel 1000 | 3.00 | 10.00 | |||||
| 野大豆 | 0.50 | 1.50 | 1.00 | ||||
| 乙基己氧基甘氨酸 | 0.30 | ||||||
| DMDM乙内酰脲 | 0.60 | 0.40 | 0.20 | ||||
| Glyacil-L | 0.18 | 0.20 |
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.15 | 0.25 | 0.50 | ||||
| 苯氧基乙醇 | 1.00 | 0.40 | 0.40 | 0.50 | 0.40 | ||
| EDTA三钠 | 0.02 | 0.05 | |||||
亚氨基琥珀酸(Iminobemsteins |
0.25 | 1.00 | |||||
| 乙醇 | 2.00 | 1.50 | 3.00 | 1.20 | 5.00 | ||
| 香料 | 0.10 | 0.25 | 0.30 | 0.40 | 0.20 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
O/W彩妆(MAKE UP) 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
| 单硬脂酸甘油酯SE | 0.50 | 1.00 | 3.00 | 1.50 | |||
| 甘油硬脂酸酯柠檬酯 | 2.00 | 1.00 | 2.00 | 4.00 | |||
| 硬脂酸 | 3.00 | 2.00 | |||||
| PEG-40硬脂酸酯 | 0.50 | 2.00 | |||||
| 磷酸鲸蜡醇酯 | 1.00 |
| 硫酸鲸蜡硬脂醇酯 | 0.75 | ||||||
| 硬脂醇 | 3.00 | 2.00 | 0.60 | ||||
| 鲸蜡醇 | 2.50 | 1.10 | 1.50 | 0.60 | 2.00 | ||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA | SA | SA |
| 氧化钛 | 10.00 | 12.00 | 9.00 | 8.50 | 11.00 | 9.50 | 10.00 |
| 氧化铁 | 2.00 | 4.00 | 3.00 | 5.00 | 3.40 | 6.00 | 4.40 |
| 氧化锌 | 4.00 | 2.00 | 3.00 | ||||
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 0.25 | 4.00 | 7.00 | ||||
| 辛醚 | 3.50 | 2.00 | |||||
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 5.00 | 6.00 | |||||
| 椰油脂酸甘油酯 | 6.00 | 2.00 | |||||
| 聚二甲基硅氧烷 | 0.50 | 1.00 | 2.00 | ||||
| 环二甲基硅酮 | 2.00 | 0.50 | 0.50 | ||||
| 牛油果油 | 2.00 | ||||||
| PVP十六碳烯共聚物 | 0.20 | 0.50 | 1.00 | ||||
| 甘油 | 3.00 | 7.50 | 7.50 | 5.00 | 2.50 | ||
| 黄原胶 | 0.15 | 0.05 | 0.30 | ||||
| 卡波姆钠 | 0.20 | 0.15 | 0.25 | ||||
| 维生素E乙酸酯 | 0.60 | 0.23 | 0.70 | 1.00 | |||
| 野大豆 | 0.50 | 1.50 | 1.00 | ||||
| 乙基己氧基甘氨酸 | 0.30 | ||||||
| DMDM乙内酰脲 | 0.60 | 0.40 | 0.20 | ||||
| Glyacil-L | 0.18 | 0.20 | |||||
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.15 | 0.25 | 0.50 |
| 苯氧基乙醇 | 1.00 | 0.40 | 0.40 | 0.50 | 0.40 | ||
| EDTA三钠 | 0.02 | 0.05 | |||||
| 亚氨基琥珀酸 | 0.25 | 1.00 | |||||
| 乙醇 | 2.00 | 1.50 | 3.00 | 1.20 | 5.00 | ||
| 香料 | 0.10 | 0.25 | 0.30 | 0.40 | 0.20 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
自美黑水分散体(SELF TANNER 配方
HYDRODISPERS ION) (量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 鲸蜡硬脂醇聚醚-20 | 1.00 | 0.50 | |||
| 鲸蜡醇 | 1.00 | ||||
| Luvigel EM | 2.00 | 2.50 | 2.00 | ||
| 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物 | 0.50 | 0.40 | 0.10 | 0.50 | |
| 黄原胶 | 0.30 | 0.15 |
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA |
| 二羟基丙酮 | 3.00 | 5.00 | |||
| 氨基二苯酮(例如，UVINUL APLUSTM) | 2.00 | 1.50 | 0.75 | 1.00 | 2.10 |
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | ||
| 氧化锌-超细 | 1.90 | 0.25 | |||
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 2.00 | 2.50 | |||
| 辛醚 | 4.00 | ||||
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 4.00 | 2.00 | 6.00 | ||
| 碳酸二辛酯 | 2.00 | 6.00 | |||
| 聚二甲基硅氧烷 | 0.50 | 1.00 | |||
| 苯基三甲基硅酮 | 2.00 | 0.50 | |||
| 牛油果油 | 2.00 | 5.00 | |||
| PVP十六碳烯共聚物 | 0.50 | 0.50 | 1.00 | ||
| 三十烷基PVP | 0.50 | 1.00 | |||
| 乙基己基甘油 | 1.00 | 0.80 | |||
| 甘油 | 3.00 | 7.50 | 7.50 | 8.50 | |
| 野大豆 | 1.50 | 1.00 | |||
| 维生素E乙酸酯 | 0.50 | 0.25 | 1.00 | ||
| α-葡糖基芸香苷 | 0.60 | 0.25 | |||
| DMDM乙内酰脲 | 0.60 | 0.45 | 0.25 | ||
| Glyacil-S | 0.20 | ||||
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.50 | 0.25 | 0.15 | ||
| 苯氧基乙醇 | 0.50 | 0.40 | 1.00 |
| EDTA三钠 | 0.01 | 0.05 | 0.10 | ||
| 乙醇 | 3.00 | 2.00 | 1.50 | 7.00 | |
| 香料 | 0.20 | 0.05 | 0.40 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
晒后水分散体(AFTER SUN 配方
HYDRODISPERSION) (量)
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |
| 鲸蜡硬脂醇聚醚-20 | 1.00 | 0.50 | |||
| 鲸蜡醇 | 1.00 | ||||
| Luvigel EM | 2.00 | 2.50 | 2.00 | ||
| 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物 | 0.50 | 0.30 | 0.40 | 0.10 | 0.50 |
| 黄原胶 | 0.30 | 0.15 | |||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA |
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 2.00 | 2.50 | |||
| 辛醚 | 4.00 | ||||
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 4.00 | 2.00 | 6.00 |
| 碳酸二辛酯 | 2.00 | 6.00 | |||
| 聚二甲基硅氧烷 | 0.50 | 1.00 | |||
| 苯基三甲基硅酮 | 2.00 | 0.50 | |||
| 三十烷基PVP | 0.50 | 1.00 | |||
| 乙基己基甘油 | 1.00 | 0.80 | |||
| 甘油 | 3.00 | 7.50 | 7.50 | 8.50 | |
| 野大豆 | 1.50 | 1.00 | |||
| 维生素E乙酸酯 | 0.50 | 0.25 | 1.00 | ||
| α-葡糖基芸香苷 | 0.60 | 0.25 | |||
| EDTA三钠 | 0.01 | 0.05 | 0.10 | ||
| 乙醇 | 1.00 | 10.00 | 8.00 | 12.00 | 9.00 |
| 香料 | 0.20 | 0.05 | 0.40 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
W/O乳液 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 鲸蜡基二甲基硅氧烷共聚醇 | 2.50 | 4.00 | |||
| 聚甘油-2-二聚羟基硬脂酸酯 | 5.00 | 4.50 | |||
| PEG-30-二聚羟基硬脂酸酯 | 5.00 | ||||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA |
| 氨基二苯酮(例如，UVINUL A PLUSTM) | 2.00 | 1.50 | 0.75 | 1.00 | 2.10 |
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 3.00 | 3.50 | ||
| 氧化锌-超细 | 0.90 | 0.25 |
| 矿物油 | 12.00 | 10.00 | 8.00 | ||
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 9.00 | ||||
| 二辛基醚 | 10.00 | 7.00 | |||
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 2.00 | 8.00 | 4.00 | ||
| 碳酸二辛酯 | 5.00 | 6.00 | |||
| 聚二甲基硅氧烷 | 4.00 | 1.00 | 5.00 | ||
| 环二甲基硅酮 | 2.00 | 25.00 | 2.00 | ||
| 牛油果油 | 3.00 | ||||
| 凡士林 | 4.50 | ||||
| PVP十六碳烯共聚物 | 0.50 | 0.50 | 1.00 | ||
| 乙基己基甘油 | 0.30 | 1.00 | 0.50 | ||
| 甘油 | 3.00 | 7.50 | 7.50 | 8.50 | |
| 野大豆 | 1.00 | 1.50 | 1.00 | ||
| MgSO4 | 1.00 | 0.50 | 0.50 | ||
| MgCl2 | 1.00 | 0.70 | |||
| 维生素E乙酸酯 | 0.50 | 0.25 | 1.00 | ||
| 棕榈酸抗坏血酸酯 | 0.50 | 2.00 |
| Fucogel 1000 | 3.50 | 7.00 | |||
| DMDM乙内酰脲 | 0.60 | 0.40 | 0.20 | ||
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.50 | 0.25 | 0.15 | ||
| 苯氧基乙醇 | 0.50 | 0.40 | 1.00 | ||
| EDTA三钠 | 0.12 | 0.05 | 0.30 | ||
| 乙醇 | 3.00 | 1.50 | 5.00 | ||
| 香料 | 0.20 | 0.40 | 0.35 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
固体稳定乳液 配方
(PICKERING乳液) (量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 矿物油 | 16.00 | 16.00 | |||
| 辛基十二醇 | 9.00 | 9.00 | 5.00 | ||
| 辛酸/癸酸甘油三酯 | 9.00 | 9.00 | 6.00 | ||
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 5.00 | 8.00 | |||
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 8.00 | ||||
| 二辛基醚 | 9.00 | 4.00 | |||
| 碳酸二辛酯 | 9.00 | ||||
| 羟基硬脂酸羟廿八烷醇酯(Hydroxyoctacosanyl Hydroxystearat) | 2.00 | 2.00 | 2.20 | 2.50 | 1.50 |
| 二硬脂基二甲基铵锂蒙脱石(Disteardimonium Hectorit) | 1.00 | 0.75 | 0.50 | 0.25 | |
| 微晶蜡+矿脂(Cera Microcristallina+Paraffinum Liquidum) | 0.35 | 5.00 | |||
| 羟丙基甲基纤维素 | 0.10 | 0.05 |
| 聚二甲基硅氧烷 | 3.00 | ||||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA |
| 二氧化钛+氧化铝+水合硅石二甲聚硅氧烷+水(Aqua) | 3,00 | ||||
| 二氧化钛+三甲氧基辛酰硅烷 | 2.00 | 4.00 | 2.00 | 4.00 | |
| 二甲基甲硅烷基化硅石(Silica DimethylSilylat) | 2.50 | 6.00 | 2.50 | ||
| 氮化硼 | 1.00 | ||||
淀粉(St |
2.00 | ||||
木薯粉(Tapioca St |
0.50 | ||||
| 氯化钠 | 5.00 | 7.00 | 8.50 | 3.00 | 4.50 |
| 甘油 | 1.00 | ||||
| EDTA三钠 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 维生素E乙酸酯 | 5.00 | 10.00 | 3.00 | 6.00 | 10.00 |
| 棕榈酸抗坏血酸酯 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | ||
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.60 | 0.20 | |||
| 对羟基苯甲酸丙酯 | 0.20 | ||||
| 苯氧基乙醇 | 0.20 | ||||
| 已脒定二羟乙基磺酸盐(HexamidinDiisethionat) | 0.40 | 0.50 | 0.40 | ||
| 二偶氮烷基脲(Diazolidinyl Harnstoff) | 0.08 | ||||
| 乙醇 | 0.23 | 0.20 | |||
| 香料 | 5.00 | 3.00 | 4.00 | ||
| 水 | 0.20 | 0.30 | 0.10 | ||
| QS | QS | QS | QS | QS |
| (100) | (100) | (100) | (100) | (100) |
棒(膏)(STICKS) 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| 辛酸/癸酸甘油三酯 | 12.00 | 10.00 | 6.00 | |
| 辛基十二醇 | 7.00 | 14.00 | 8.00 | 3.00 |
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 12.00 | |||
| 四异硬脂酸季戊四醇酯 | 10.00 | 6.00 | 8.00 | 7.00 |
| 聚甘油-3二异硬脂酸酯 | 2.50 | |||
| 双-二甘油多脂酰己二酸酯-2 | 9.00 | 8.00 | 10.00 | 8.00 |
| 鲸蜡硬脂醇 | 8.00 | 11.00 | 9.00 | 7.00 |
| 十四酸十四酯 | 3.50 | 3.00 | 4.00 | 3.00 |
| 蜂蜡 | 5.00 | 5.00 | 6.00 | 6.00 |
| 巴西棕榈蜡 | 1.50 | 2.00 | 2.00 | 1.50 |
| 白蜂蜡 | 0.50 | 0.50 | 0.50 | 0.40 |
| C16-40烷基硬脂酸酯 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | |
| 化合物 | SA | SA | SA | SA |
| 氨基二苯酮(例如，UVINUL A PLUSTM) | 2.00 | 1.50 | 0.75 | 9.00 |
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 3.00 | ||
| 氧化锌-超细 | 1.00 | 0.25 | ||
| 维生素E乙酸酯 | 0.50 | 1.00 | ||
| 棕榈酸抗坏血酸酯 | 0.05 | 0.05 | ||
| Buxux Chinensis | 2.00 | 1.00 | 1.00 | |
| 香料、BHT | 0.10 | 0.25 | 0.35 | |
| 蓖麻油 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
自美黑PIT-乳液 配方
(量)
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |
| 单硬脂酸甘油酯SE | 0.50 | 2.00 | 3.00 | 5.00 | 0.50 | 4.00 | ||
| 异硬脂酸甘油酯 | 3.50 | 4.00 | 2.00 | |||||
| 异鲸蜡醇聚醚-20 | 0.50 | 2.00 | ||||||
| 鲸蜡硬脂醇聚醚-12 | 5.00 | 1.00 | 3.50 | 5.00 | ||||
| 鲸蜡硬脂醇聚醚-20 | 5.00 | 1.00 | 3,50 | |||||
| PEG-100硬脂酸酯 | 2.80 | 2.30 | 3.30 | |||||
| 鲸蜡醇 | 5.20 | 1.20 | 1.00 | 1.30 | 0.50 | 0.30 | ||
| 棕榈酸鲸蜡酯 | 2.50 | 1.20 | 1.50 | 0.50 | 1.50 | |||
| 鲸蜡基二甲基硅氧烷共聚醇 | 0.50 | 1.00 | ||||||
| 聚甘油-2 | 0.75 | 0.30 | ||||||
| 化合物 | SA | SA | SA | SA | SA | SA | SA | SA |
自美黑PIT-乳液 配方
(量)
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |
| 二羟基丙酮 | 3.00 | 5.00 | 4.00 | |||||
| 氨基二苯酮(例如，UVINUL A PLUSTM) | 2.00 | 1.50 | 0.75 | 1.00 | 2.10 | 4.50 | 5.00 | 2.10 |
| 二氧化钛-超细 | 1.00 | 1.50 | 3.50 | 1.50 | 1.00 | |||
| 氧化锌-超细 | 1.00 | 0.25 | 2.00 | 1.50 | ||||
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 3.50 | 6.35 | 0.10 | |||||
| 椰油脂酸甘油酯 | 3.00 | 3.00 | 1.00 | |||||
| 辛醚 | 4.50 | |||||||
| 碳酸二辛酯 | 4.30 | 3.00 | 7.00 | |||||
| 己二酸二丁酯 | 0.50 | 0.30 | ||||||
| 苯基三甲基硅酮 | 2.00 | 3.50 | 2.00 | |||||
| 环二甲基硅酮 | 3.00 | |||||||
| Ethyl Galaktomannan | 0.50 | 2.00 | ||||||
| 氢化椰油甘油混合酯 | 3.00 | 4.00 | ||||||
| Abil Wax 2440 | 1.50 | 2.00 | ||||||
| PVP十六碳烯共聚物 | 1.00 | 1.20 | ||||||
| 甘油 | 4.00 | 6.00 | 5.00 | 8.00 | 10.00 | |||
| 维生素E乙酸酯 | 0.20 | 0.30 | 0.40 | 0.30 | ||||
| 牛油果油 | 2.00 | 3.60 | 2.00 | |||||
| 碘丙基丁基碳酸酯 | 0.12 | 0.20 | ||||||
| DMDM乙内酰脲 | 0.10 | 0.12 | 0.13 | |||||
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.50 | 0.30 | 0.35 | |||||
| 苯氧基乙醇 | 0.50 | 0.40 | 1.00 | |||||
| 辛氧基甘油 | 0.30 | 1.00 | 0.35 | |||||
| 乙醇 | 2.00 | 2.00 | 5.00 | |||||
| EDTA三钠 | 0.40 | 0.15 | 0.20 | |||||
| 香料 | 0.20 | 0.20 | 0.24 | 0.16 | 0.10 | 0.10 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
油剂胶(OILGELS) 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| 辛酸/癸酸甘油三酯 | 12.00 | 10.00 | 6.00 | |
| 辛基十二醇 | 7.00 | 14.00 | 8.00 | 3.00 |
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | 12.00 | |||
| 四异硬脂酸季戊四醇酯 | 10.00 | 6.00 | 8.00 | 7.00 |
| 聚甘油-3二异硬脂酸酯 | 2.50 | |||
| 双-二甘油多脂酰己二酸酯-2 | 9.00 | 8.00 | 10.00 | 8.00 |
油剂胶(OILGELS) 配方
(量)
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| 十四酸十四酯 | 3.50 | 3.00 | 4.00 | 3.00 |
| 有机皂土(Bentone)-34 | 5.00 | 5.00 | 6.00 | 6.00 |
| 碳酸丙烯酯(Propylencarbonat) | 15.00 | 20.00 | 18.00 | 19.50 |
| 化合物 | SA | SA | SA | SA |
| 维生素E乙酸酯 | 0.50 | 1.00 | ||
| 棕榈酸抗坏血酸酯 | 0.05 | 0.05 | ||
| Buxux Chinensis | 2.00 | 1.00 | 1.00 | |
| 香料、BHT | 0.10 | 0.25 | 0.35 | |
| 蓖麻油 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
在仍进一步的实施方式中，本发明包括至少一种无机颜料。在一些优选的实施方式中，这些无机颜料是基于金属氧化物和/或其它轻微溶于水的或不溶的金属化合物，包括但不限于化合物例如氧化锌(ZnO)、二氧化铁(TiO2)、氧化铁(例如，Fe2O3)、二氧化锆(ZrO2)、二氧化硅(SiO2)、氧化锰(例如，MnO)、氧化铝(Al2O3)、氧化铯(例如，Ce2O3)、和这些氧化物的混合氧化物、以及它们的掺合物。在一些实施方式中，金属氧化物是超细级的，而在其它实施方式中，金属氧化物是颜料级的。在进一步的实施方式中，金属氧化物是超细级和颜料级的混合物。
在另外的实施方式中，无机颜料被涂覆(即，它们在表面上加以处理)。在一些特别优选实施方式中，表面涂覆上薄的疏水膜。在一些其它特别优选的实施方式中，表面涂覆上薄的亲水膜。在另外的实施方式中，本发明提供了包括各种化妆品和化妆组分的组合物。例如，在一些实施方式中，本发明提供了各种染料和/或颜料。在一些实施方式中，有用的颜料包括但不限于二氧化钛、云母、氧化铁(例如，Fe2O3、Fe3O4、FeO(OH)等等)和/或锡的氧化物。本发明进一步提供了着色剂，包括但不限于胭脂红、蓝色、氧化铬(chromooxide)、群青色和/或锰紫(purplemanganese)。一些最优选的实施方式的着色剂和颜料对于本领域技术人员是已知的，且以前已提供(参见，例如，Colour Index Nummern(CIN)、Rowe Colour Index、3rd ed.、Society of Dyers and Colourists、Bradford、England[1971])。
在另外的实施方式中，基于云母/金属氧化物的珠光颜料发现有用，如上所述。然而，本发明不意图限于这些特定颜料，因为另外的珠光颜料可用于本发明的实施方式中。
下列配方提供了本发明的用途的另外的例子。
| 配方(量) | |||||
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 卡波姆钠 | 0.2 | ||||
| 丙烯酸酯/C10-C30烷基丙烯酸酯交聚物 | 0.3 | 0.2 | 0.6 | ||
| 羟丙基纤维素 | 1.0 | 1.50 | |||
| 黄原胶 | 0.6 | 0.2 | 1.0 | 1.0 | |
| 化合物 | 0.5 | 0.1 | 0.01 | 0.01 | 1.0 |
| 二辛基丁酰胺基三嗪酮 | 2.0 | 2.0 | 1,0 | ||
| 乙基己基三嗪酮 | 4.0 | 4.0 | 5.0 | ||
| Aniso三嗪 | 1.0 | 0.5 | 2.0 | 2.5 | |
| 二辛基三唑 | 6.0 | ||||
| 甲酚曲唑三硅氧烷 | |||||
| 苯基苯并咪唑磺酸 | 2.0 | 1.0 | |||
| 二咪唑磺酸酯(Bisimidazylate) | 1.0 | ||||
| 二苯并(c)呋喃酮亚基二樟脑磺酸 | 0.2 | ||||
| 甲氧基肉桂酸乙基己基酯 | 7.5 | 10.0 | 5.0 | ||
| 氰双苯丙烯酸辛酯 | 5.0 | ||||
| 聚二甲基硅氧烷-二乙基苯亚甲基丙二酸酯 | 4.0 | ||||
| 水杨酸乙基己酯 | |||||
| 胡莫柳酯 | |||||
| 丁基甲氧基二苯甲酰甲烷 | 1.0 | 1.0 | 4.0 | ||
| 二氧化钛 | 1.0 | 4.0 | |||
| 氧化锌 | 4.0 | ||||
| 辛酸/癸酸甘油三酯 | 2.0 | ||||
| 氢化椰油甘油混合酯 | 3.0 | ||||
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 2.0 | 2.5 | 3.0 | ||
| 二辛基醚 | 4.0 | ||||
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯(Butylenglycol Dica-prylat/Dicaprat) | 4.0 | 2.0 | 6.0 | ||
| 碳酸二辛酯 | 2.0 | ||||
| 鲸蜡基聚二甲基硅氧烷 | 2.0 | 0.5 | 1.0 | ||
| 牛油果油 | 2.0 | ||||
| PVP十六碳烯共聚物 | 0.5 | 0.05 | 0.5 | ||
| 甘油 | 3.0 | 7.5 | 7.5 | 2.5 | |
| 生育酚 | 0.5 | 0.75 | 0.2 | ||
| EDTA三钠 | 1.0 | 0.5 | 0.5 | 1.0 | 1.5 |
| 柠檬酸钠(Natriumcitrat) | 0.2 | ||||
柠檬酸(Zitronens |
0.1 | 0.1 | 0.1 |
| 配方(量) | |||||
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| DMDM乙内酰脲 | 0.6 | 0.2 | |||
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.5 | 0.3 | 0.15 | ||
| 苯氧基乙醇 | 0.5 | 0.4 | 0.4 | 1.0 | 0.60 |
| 乙醇 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 1.0 | |
| 香料 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | ||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
| 配方(量) | |||||
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 卡波姆钠 | 0.5 | 1.5 | |||
| 丙烯酸酯/C10-C30烷基丙烯酸酯交聚物 | 0.4 | 0.1 | 0.75 | ||
| 羟丙基纤维素 | 0.5 | 0.25 | |||
| 黄原胶 | 0.2 | 0.4 | |||
| 化合物 | 0.5 | 0.1 | 0.01 | 0.01 | 1.0 |
| 二辛基丁酰胺基三嗪酮 | 1.0 | 2.0 | |||
| 乙基己基三嗪酮 | 2.0 | 2.0 | |||
| Aniso三嗪 | 1.0 | 0.2 | 3.0 | 1.0 | |
| 二辛基三唑 | 8.0 | ||||
| 甲酚曲唑三硅氧烷 | 4.0 | ||||
| 苯基苯并咪唑磺酸 | 1.5 | ||||
| 二咪唑磺酸酯 | 1.5 | ||||
| 二苯并(c)呋喃酮亚基二樟脑磺酸 | 0.5 | ||||
| 甲氧基肉桂酸乙基己基酯 | 7.5 | 5.0 | 10.0 | ||
| 氰双苯丙烯酸辛酯 | 10.0 | 5.0 | 5.0 | ||
| 聚二甲基硅氧烷-二乙基苯亚甲基丙二酸酯 | 2.5 | ||||
| 水杨酸乙基己酯 | 3.5 | 5.0 | |||
| 胡莫柳酯 | 4.0 | ||||
| 丁基甲氧基二苯甲酰甲烷 | 0.5 | ||||
| 二氧化钛 | 1.5 | 2.0 | 1.0 | 2.5 | |
| 氧化锌 | 1.0 | 0.5 | |||
| 辛酸/癸酸甘油三酯 | |||||
| 椰油甘油混合酯 | |||||
| C12-15烷基苯甲酸酯 | 5.0 | ||||
| 二辛基醚 | 7.5 |
| 配方(量) | |||||
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 丁二醇二辛酸酯/二癸酸酯 | |||||
| 碳酸二辛酯 | 7.5 | ||||
| 鲸蜡基聚二甲基硅氧烷 | |||||
| 牛油果油 | 3.0 | ||||
| PVP十六碳烯共聚物 | 0.5 | 0.75 | 1.0 | ||
| 甘油 | 5.0 | 10.0 | |||
| 生育酚 | 0.3 | 1.5 | 1.0 | ||
| EDTA三钠 | 0.5 | 0.1 | 0.5 | ||
| 柠檬酸钠 | 0.3 | ||||
| 柠檬酸 | 0.15 | ||||
| DMDM乙内酰脲 | 0.3 | 0.15 | |||
| 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.4 | ||||
| 苯氧基乙醇 | 1.0 | ||||
| 乙醇 | 7.5 | 5.0 | 7.0 | ||
| 香料 | 0.25 | 0.2 | |||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
| 配方(量) | ||||||
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 卡波姆钠 | 0.5 | 1.5 | 1.0 | 0.5 | ||
| 丙烯酸酯/C10-C30烷基丙烯酸酯交聚物 | 1.0 | 0.75 | 1.0 | |||
| 羟丙基纤维素 | 0.4 | 1.0 | 1.0 | |||
| 黄原胶 | 0.6 | 0.2 | 1.0 | 1.0 | ||
| BBI | 4.0 | 0.5 | 3.0 | 2.0 | 4.0 | 1.5 |
| 二辛基丁酰胺基三嗪酮 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 1.0 | ||
| 乙基己基三嗪酮 | 4.0 | 5.0 | 4.0 | |||
| Aniso三嗪 | 1.0 | 1.0 | 2.5 | 1.0 | ||
| 二辛基三唑 | 4.0 | |||||
| 甲酚曲唑三硅氧烷 | 3.0 | |||||
| 苯基苯并咪唑磺酸 | 2.0 | 1.0 | ||||
| 二咪唑磺酸酯 | 1.5 | 3.5 | ||||
| 二苯并(c)呋喃酮亚基二樟脑磺酸 | 0.2 | 1.0 | ||||
| 甲氧基肉桂酸乙基己酯 | 10.0 | 5.0 | ||||
| 氰双苯丙烯酸辛酯 | 10.0 | 5.0 | ||||
| 配方(量) | ||||||
| 原材料(INCI名称) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 聚二甲基硅氧烷-二乙基苯亚甲基丙二酸酯 | 4.0 | |||||
| 水杨酸乙基己酯 | 5.0 | |||||
| 胡莫柳酯 | 5.0 | |||||
| 丁基甲氧基二苯甲酰甲烷 | 1.0 | 1.0 | 4.0 | 0.5 | ||
| 二氧化钛 | 1.0 | 4.0 | 1.5 | |||
| 氧化锌 | 4.0 | |||||
| 辛酸/癸酸甘油三酯 | 2.0 | |||||
| 石蜡油 | 1.0 | |||||
| C12-C15烷基苯甲酸酯 | 2.0 | 2.5 | 3.0 | |||
| 二辛基醚 | 4.0 | |||||
| 异十六碳烯 | 4.0 | 2.0 | 6.0 | |||
| 碳酸二辛酯 | 2.0 | |||||
| 己二酸二丁酯 | 2.0 | 0.5 | 1.0 | |||
| 环二甲基硅酮 | 3.0 | |||||
| 霍霍巴油 | 2.0 | |||||
| PVP十六碳烯共聚物 | 0.5 | 0.05 | 0.5 | 0.5 | ||
| 丁二醇 | 3.0 | 7.5 | 7.5 | 2.5 | 5.0 | |
| 棕榈酸抗坏血酸酯 | 0.5 | 0.75 | 0.2 | 0.3 | ||
| 辛氧基甘油 | 1.0 | 0.5 | 1.0 | |||
| 野大豆 | 2.0 | 1.5 | ||||
| EDTA三钠 | 1.0 | 0.5 | 0.5 | 1.5 | 0.5 | |
| 苛性酸 | 1.0 | 0.2 | 0.25 | |||
| 碘丙基丁基碳酸酯 | 0.6 | 0.2 | ||||
| 苯氧基乙醇 | 0.4 | 1.0 | ||||
| 乙醇 | 5.0 | 2.0 | 7.0 | |||
| 香料 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | |||
| 水 | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) | QS(100) |
下面的配方提供了含有本发明的BBI-AV的须后产品的例子。
须后洗液(after shave lotion)
％ 成分 INCI
A 10.0 Luvitol EHO 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
1.0 红没药醇 rac. 红没药醇
0.1 香料
0.3 Carbopol Ultrez 21 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物
B 15.0 乙醇 醇
1.0 D-泛醇USP 泛醇
3.0 甘油87％ 甘油
0.1 三乙醇胺护理(Triethanolamine Care) 三乙醇胺
SA 化合物
QS 水dem. 水dem.
生产：称量A相的组分并混合它们。溶解B相，将其搅拌入A相，并充分均化。测量值：
粘度：18500mPa s Brookfield RVD II+
pH值：5.8
下面的配方提供了含有本发明的BBI-AV的须前产品的例子。
须前(pre shave)
％ 成分 INCI
A 80 乙醇 醇
3.0 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
1.0 红没药醇rac. 红没药醇
0.2 香料
0.1 薄荷醇 薄荷醇
4.0 Luvitol EHO 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
2.0 Eutanol G 辛基十二醇
2.0 Miglyol 812 辛酸/癸酸甘油三酯
2.0 D-泛醇USP 泛醇
2.0 金缕梅馏出物 初馏金缕梅(金缕梅(Whitch Hazel))馏出物
2.0 霍霍巴油 希蒙得木(霍霍巴)子油
SA化合物
生产：称出A相的成分的重量并将它们完全溶解。
上面提供的须后和须前配方含有足以提供(一种或多种)期望效应的BBI-AV(化合物)。在一些实施方式中，BBI-AV的浓度在约1,000至约10,000ppm的范围内。在下面的配方中，所使用的典型BBI-AV浓度在约100ppm至约1,000ppm之间或从约1,000ppm至约10,000ppm。然而，本发明不意图受限于该具体浓度范围，因为其它浓度范围可用于本发明的其它实施方式中。
下面的配方提供了含有本发明的BBI-AV的晒后产品的例子。
晒后洗液(after sun lotion)
％ 成分 INCI
A 0.4 Carbopol 1342 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物
15.0 Luvitol EHO 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
0.2 红没药醇rac. 红没药醇
1.0 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
q.s. 香料
B 1.0 D-泛醇USP 泛醇
15.0 乙醇96％ 醇
3.0 甘油87％ 甘油
SA 化合物
64.2 水dem. 水dem.
C 0.2 三乙醇胺护理 三乙醇胺
生产：混合A相的成分。溶解B相，并将其搅拌到A相中，同时均化。用C相中和并再次均化。
测量值：
粘度：7500mPa s Haake Viscotester VT-02
pH值：6.0
下面的配方提供了含有本发明的BBI-AV的洁面奶(facial cleanser)产品的例子。
洁面奶
％ 成分 INCI
A 10.0 Luvitol EHO 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
10.0 Miglyol 812 辛酸/癸酸甘油三酯
1.5 Dow Coming 345 Fluid 环戊硅氧烷、环己硅氧烷
2.0 Cremophor CO40 PEG-40氢化蓖麻油
B 3.5 Luvigel EM 辛酸/癸酸甘油三酯、丙烯酸钠共聚物
C 1.0 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇rac. 红没药醇
QS 防腐剂
QS 香料
D 3.0 Luviquat Care 聚季铵盐-44
0.5 Luviquat Mono LS 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
0.5 Cremophor A25 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 D-泛醇50P 泛醇、丙二醇
4.0 1，2丙二醇护理 丙二醇
0.1 Edeta BD EDTA二钠
SA 化合物
QS 水dem. 水dem.
生产：溶解A相，然后在B相中搅拌。混入C相。溶解D相，并将其搅拌入混合的A+B+C相，均化并再次搅拌15分钟。
测量值：
粘度：7200mPa s Brookfield RVT
pH值：5.8
下面的配方提供了SPF为8的含有本发明的BBI-AV的日常护理身体喷剂(daily care body spray)产品的例子。
日常护理身体喷剂(DAILY CARE BODY SPRAY)-SPF8
％ 成分 INCI
A 3.0 Uvinul MC80 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 Uvinul APlusTM 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
1.0 Luviquat UltraCare 聚季铵盐-44
3.0 1，2 Propylenglycol Care 丙二醇
2.0 D-泛醇50P 泛醇、丙二醇
1.0 Dow Corning345 Fluid 环戊硅氧烷、环己硅氧烷
10.0 Eutanol G 辛基十二醇
0.5 Luviskol K30 PVP
10.0 Miglyol812 辛酸/癸酸甘油三酯
3.0 Finsolv TN C12-15烷基苯甲酸酯
3.0 甘油87％ 甘油
1.0 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
0.3 红没药醇rac. 红没药醇
化合物
QS 乙醇 醇
生产：对A相的组分称量并将它们完全溶解。
测量值：
SPF：8 Colipa Task Force“防晒测量(Sun Protection Measurement)”
下面的配方提供了SPF为27的含有本发明的BBI-AV的日常护理防晒液(daily care sun care lotion)产品的例子。
防晒液(SUN CARE LOTION)-SPF27
％ 成分 INCI
A 4.5 Uvinul MC 80 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 UvinulAPlusTM 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
3.0 Uvinul N 539 T 氰双苯丙烯酸辛酯
2.5 Cosmacol EMI 二-C12-13烷基苹果酸酯
0.5 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
4.0 Tego Care 450 聚甘油-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯
B 3.5 Cetiol SN Deo 异壬酸鲸蜡硬脂醇酯(Cetearyl Isononanoate)
1.0 Ganex V-220 VP/二十碳烯共聚物
5.0 异十六烷 异十六烷
2.5 Cosmacol EMI 二-C12-13烷基苹果酸酯
3.0 Uvinul TiO2 二氧化钛、三甲氧基辛酰硅烷
C 5.0 甘油87％ 甘油
1.0 Lanette E 鲸蜡硬脂醇酯硫酸钠(Sodium Cetearyl Sulfate)
0.5 Keltrol 黄原胶
60.7 水dem. 水dem.
D SA 化合物
1.0 Phenonip 苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、
0.3 红没药醇rac. 红没药醇
生产：分别将A相和B相加热到约80℃。将B相搅拌入A相，同时均化。将C相加热到约80℃，并将其搅拌入混合的A+B相，同时均化。冷却到约40℃，加入D相，并再次均化。
测量值：
粘度：3200mPa s Brookfield RVD II+
pH值：6.0
SPF： 27Colipa Task Force“防晒测量”
防晒液-SPF24
％ 成分 INCI
A 2.0 Cremophor A6 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
2.0 Cremophor A25 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
3.0 Syncrowax HRC 三山嵛精
2.0 Lanette O 鲸蜡硬脂醇
2.0 Luvitol EHO 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 Uvinul MC80 甲氧基肉桂酸乙基己酯
1.0 Uvinul T150 基己基三嗪酮
1.0 Ganex V-220 VP/二十碳烯共聚物
7.0 十四酸异丙酯 十四酸异丙酯
B 5.0 Z-Cote HP-1 氧化锌、三乙氧基辛酰硅烷
C 0.2 Keltrol 羟乙基丙烯酸酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物，
角鲨烷，聚山梨醇酯60
0.2 EdetaBD EDTA二钠
5.0 1，2丙二醇护理 丙二醇
0.5 D-泛醇USP 泛醇
61.9 水dem. 水dem.
D SA 化合物
0.5 Euxyl K300 苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、
对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯、
对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯
1.0 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇rac. 红没药醇
生产：将A相加热到80℃，加入B相并均化3分钟。加热C相至约80℃，并将其搅拌入混合的A+B相，同时均化。冷却到约40℃，加入D相，并均化。
测量值：
粘度：5000mPa s Brookfield RVD II+
pH值：7.5
SPF： 24Colipa Task Force“防晒测量”
下面的配方提供了SPF为28的含有本发明的BBI-AV的防晒乳液产品的例子。
防晒乳液(SUN SCREEN EMULSION)-SPF28
％ 成分 INCI
A 3.5 Cremophor A 6 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
1.5 Cremophor A 25 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
7.5 Uvinul MC 80 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 UvinulAPlusTM 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
2.0 Dow Corning 345 Fluid 环戊硅氧烷、环己硅氧烷
0.5 蜂蜡3044 PH 蜂蜡
3.0 Lanette O 鲸蜡硬脂醇
10.0 Miglyol 812 辛酸/癸酸甘油三酯
B 5.0 T-Lite SF-S 二氧化钛、硅石、聚甲基硅酮、氧化铝
C 3.0 甘油87％ 甘油
0.2 Edeta BD EDTA二钠
0.3 Keltrol T 黄原胶
1.0 Plantacare 2000 癸基葡萄糖苷
2.0 D-泛醇50P 泛醇、丙二醇
57.3 水dem. 水dem.
D SA 化合物
1.0 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇rac. 红没药醇
QS 香料
QS 防腐剂
生产：将A相加热到80℃，加入B相并均化3分钟。加热C相至约80℃，并将其搅拌入混合的A+B相，同时均化。冷却到约40℃，加入D相，并均化。
测量值：
粘度：7500mPa s Brookfield RVD II+
pH值：6.6
SPF： 28 Colipa Task Force“防晒测量”
下面的配方提供了含有本发明的BBI-AV的足膏(foot balm)产品的例子。足膏(FOOT BALM)
％ 成分 INCI
A 2.0 Cremophor A 6 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
2.0 Cremophor A 25 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
5.0 Luvitol EHO 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
4.0 Lanette 16 鲸蜡醇
4.0 Cutina Gms 硬脂酸甘油酯
5.0 石蜡油 矿物油
0.2 薄荷醇 薄荷醇
0.5 樟脑 樟脑
B 70.3 水dem. 水dem.
QS 防腐剂
C SA 化合物
1.0 红没药醇rac. 红没药醇
1.0 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
D 5.0 金缕梅提取物 金缕梅提取物
生产：分别加热A相和B相至约80℃。将B相搅拌入A相中，同时均化。冷却到约40℃，加入C和D相，并再次均化。冷却到室温。
测量值：
粘度：20500mPa s Brookfield RVD II+
pH值：6.0
下面的配方提供了含有本发明的BBI-AV的足部清新胶(refreshing footgel)产品的例子。
足部清新胶(REFRESHING FOOT GEL)
％ 成分 INCI
A 0.6 Carbopol Ultrez 21 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物
45.9 水dem. 水dem.
B 1.0 红没药醇rac. 红没药醇
0.5 法呢醇 法呢醇
q.s. 香料
4.5 Cremophor CO40 PEG-40氢化蓖麻油
1.0 Neutrol TE 四羟丙基乙二胺
1.5 薄荷醇 薄荷醇
SA 化合物
45.0 醇96％ 醇
QS FD&C Blue No.1 C.I.42 090、FD&C Blue No.1
生产：A相：散布Carbopol并使其沉淀在烧杯底部。溶解B相并将其搅拌入A相。
测量值：
粘度：14500mPa s Brookfield RVD II+
pH值：7.5
下面的配方提供了含有本发明的BBI-AV的皮肤调理胶(skin conditioninggel)产品的例子。
皮肤调理胶
％ 成分 INCI
A 3.6 Cremophor CO 40 PEG-40氢化蓖麻油
15.0 醇 醇
0.1 红没药醇rac. 红没药醇
0.5 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
QS 香料
B 3.0 D-泛醇USP 泛醇
0.6 Carbopol940 卡波姆
SA 化合物
76.4 水dem. 水dem.
C 0.8 三乙醇胺护理 三乙醇胺
生产：完全溶解A相。使B相溶胀，并用C相中和。将A相搅拌入中和的B相并均化。
测量值：
粘度：57600mPa s Brookfield RVD II+
pH值：7.7
下面的配方提供了含有本发明的BBI-AV的W/O乳液的例子。
W/O乳液
％ 成分 INCI
A 6.0 Cremophor WO 7 PEG-7氢化蓖麻油
8.0 Luvitol EHO 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 十四酸异丙酯 十四酸异丙酯
15.0 石蜡油 矿物油
0.3 硬脂酸镁 硬脂酸镁
0.3 硬脂酸铝 硬脂酸铝
2.0 Elfacos ST9 PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物
B 5.0 甘油87％ 甘油
0.7 硫酸镁-7-水合物 硫酸镁
56.6 水dem. 水dem.
C SA 化合物
0.5 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
0.6 红没药醇rac. 红没药醇
生产：分别加热A相和B相至约85℃。将B相搅拌入A相中，并均化。冷却到约40℃，同时搅拌，加入C相并再次均化。冷却到室温。
测量值：
粘度：37500mPa s Brookfield RVD II+
下面的配方提供了含有本发明的BBI-AV的O/W乳液的例子。
O/W乳液
％ 成分 INCI
A 1.7 Cremophor A 6 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
0.7 Cremophor A 25 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 UvinulAPlusTM 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
2.0 Abil B 8843 PEG-14聚二甲基硅氧烷
3.6 Lanette O 鲸蜡硬脂醇
6.0 Uvinul MC 80 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 Cetiol B 己二酸二丁酯
B 5.0 甘油87％ 甘油
0.2 EdetaBD EDTA二钠
1.0 D-泛醇75 W 泛醇
q.s. 防腐剂
68.8 水dem. 水dem.
C 4.0 Luvigel EM 辛酸/癸酸甘油三酯、丙烯酸钠共聚物
D 0.2 磷酸抗坏血酸酯钠 磷酸抗坏血酸酯钠(Sodium Ascorbyl
Phosphate)
1.0 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇rac. 红没药醇
E q.s. 氢氧化钠10％aq.w/w 氢氧化钠
F 1.0 RetiSTAR 辛酸/癸酸甘油三酯、抗坏血酸钠，
生育酚、视黄醇
SA化合物
生产：分别加热A相和B相至约80℃。将B相搅拌入A相中，并均化。将C相搅拌入混合的A+B相并均化。冷却到约40℃，加入D相，然后用E相调节pH值至6.5。加入F相并均化。冷却到室温。
测量值：
粘度：37500mPa s Brookfield RVD II+
pH值：6.3
下面的配方提供了含有本发明的BBI-AV的防护日霜(protective day cream)产品的例子。
防护日霜(PROTECTIVE DAY CREAM)
％ 成分 INCI
A 1.7 Cremophor A 6 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
0.7 Cremophor A 25 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 Uvinul A PlusTM 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
2.0 Abil B 8843 PEG-14聚二甲基硅氧烷
3.6 Lanette O 鲸蜡硬脂醇
6.0 Uvinul MC 80 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 Cetiol B 己二酸二丁酯
B 5.0 甘油87％ 甘油
0.2 EdetaBD EDTA二钠
1.0 D-泛醇75 W 泛醇
QS 防腐剂
69.6 水dem. 水dem.
C 4.0 Luvigel EM 辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸钠共聚物
D 1.0 磷酸抗坏血酸酯钠 磷酸抗坏血酸酯钠
1.0 维生素E乙酸酯 生育酚乙酸酯
SA 化合物
0.2 红没药醇rac. 红没药醇
E QS 氢氧化钠10％aq.w/w 氢氧化钠
生产：分别加热A相和B相至约80℃。将B相搅拌入A相中，并均化。将C相搅拌入混合的A+B相并均化。冷却到约40℃，加入D相，然后用E相调节pH值至6.5并均化。冷却到室温。
测量值：
粘度：24000mPa s Brookfield RVD II+
pH值：6.4
下面的配方提供了含有本发明的BBI-AV的护发产品(hair care product)的例子。
头发调理剂(HAIR CONDITIONERS)
％ 成分(INCI)
A 10.0 PVP/VA共聚物
0.2 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵(Hydroxyethyl Cetyldimonium Phosphate)
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
QS 香料
10.0 醇
SA 化合物
68.1 水dem.
B 10.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A 10.0 PVP/VA共聚物
0.2 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
QS 香料
10.0 醇
SA 化合物
64.1 水dem.
B 10.0 丙烷/丁烷
生产：将所有化合物加入A相并搅拌，以均化。装入合适的容器并用B相装载。泡沫调理剂(FOAM CONDITIONERS)
％ 成分(INCI)
A 1.0 聚季铵盐-4
0.5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
化合物
QS 香料
QS 防腐剂
91.5 水dem.
B 6.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A 1，0 聚季铵盐-4
0，5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
化合物
QS 香料
QS 防腐剂
87.5 水dem.
B 6.0 丙烷/丁烷
生产：将所有化合物加入A相并搅拌，以均化。装入合适的容器并用B相装满。泡沫调理剂
％ 成分(INCI)
A 1.0 聚季铵盐-11
0.5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
化合物
QS 香料
QS 防腐剂
91.5 水dem.
B 6.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A 1.0 聚季铵盐-11
0.5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
SA 化合物
QS 香料
QS 防腐剂
87.5 水dem.
B 6.0 丙烷/丁烷
生产：将所有化合物加入A相并搅拌，以均化。装入合适的容器并用B相装满。定型泡沫(STYLING FOAMS)
％ 成分(INCI)
A 0.5 月桂醇聚醚-4
QS 香料
B 77.3 水dem.
10.0 聚季铵盐-28
化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25PABA
0.2 羟乙基纤维素
C 10.0 HFC152 A
％ 成分(INCI)
A 0.5 月桂醇聚醚-4
QS 香料
B 73.3 水dem.
10.0 聚季铵盐-28
SA 化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25 PABA
0.2 羟乙基纤维素
C 10.0 HFC152 A
生产：称出A相的化合物的重量并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相中并均化。装入合适的容器中，并用C相装满。
％ 成分(INCI)
A 2.0 椰油基三甲基硫酸甲酯铵(Cocotrimonium Methosulfate)
Q S 香料
B 78.5 水dem.
6.7 丙烯酸酯共聚物
0.6 AMP
SA 化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25 PABA
0.2 羟乙基纤维素
C 10.0 HFC 152 A
％ 成分(INCI)
A 2.0 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 74.5 水dem.
6.7 丙烯酸酯共聚物
0.6 AMP
SA 化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25 PABA
0.2 羟乙基纤维素
C 10.0 HFC 152 A
生产：称出A相的化合物的重量并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相中并均化。装入合适的容器中，并用C相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A 2.0 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 7.70 聚季铵盐-44
SA 化合物
QS 防腐剂
79.3 水dem.
C 10.0 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用C相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A 2.00 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 72.32 水dem.
2.00 VP/丙烯酸酯/月桂基甲基丙烯酸酯共聚物
0.53 AMP
SA 化合物
0.20 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.50 泛醇
0.05 二苯甲酮-4
0.20 氨基聚二甲基硅氧烷、西曲铵氯化物、十三烷醇聚醚-12
15.00 醇
C 0.20 羟乙基纤维素
D 6.00 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A 2.00 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 68.32 水dem.
2.00 VP/丙烯酸酯/月桂基甲基丙烯酸酯共聚物
0.53 AMP
SA 化合物
0.20 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.50 泛醇
0.05 二苯甲酮-4
0.20 氨基聚二甲基硅氧烷、西曲铵氯化物、十三烷醇聚醚-12
15.00 醇
C 0.20 羟乙基纤维素
D 6.00 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。加入C相并再次均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用D相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A 2.00 西曲铵氯化物
QS 香料
B 67.85 水dem.
7.00 聚季铵盐-46
SA 化合物
0.20 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.50 泛醇
0.05 苯甲酮-4
0.20 氨基聚二甲基硅氧烷、西曲铵氯化物、十三烷醇聚醚-12
15.00 醇
C 0.20 羟乙基纤维素
D 6.00 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A 2.00 西曲铵氯化物
QS 香料
B 63.85 水dem.
7.00 聚季铵盐-46
SA 化合物
0.20 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.50 泛醇
0.05 二苯甲酮-4
0.20 氨基聚二甲基硅氧烷、西曲铵氯化物、十三烷醇聚醚-12
15.00 醇
C 0.20 羟乙基纤维素
D 6.00 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。加入C相并再次均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用D相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
85.5 水dem.
B 7.0 聚苯乙烯磺酸钠
SA 化合物
0.5 西曲铵溴化物
QS 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
81.5 水dem.
B 7.0 聚苯乙烯磺酸钠
SA 化合物
0.5 西曲铵溴化物
QS 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用C相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
92.0 水dem.
B 0.5 聚季铵盐-10
1.0 化合物
0.5 西曲铵溴化物
QS 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
88.0 水dem.
B 0.5 聚季铵盐-10
5.0 化合物
0.5 西曲铵溴化物
QS 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用C相装满。
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
82.5 水dem.
B 10.0 聚季铵盐-16
SA 化合物
0.5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
QS 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
78.5 水dem.
B 100 聚季铵盐-16
SA 化合物
0.5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
QS 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用C相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A 2.0 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 84.0 水dem.
2.0 脱乙酰壳多糖
SA 化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25 PABA
C 10.0 HFC 152 A
％ 成分(INCI)
A 2.0 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 80.0 水dem.
2.0 脱乙酰壳多糖
SA 化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25 PABA
C 10.0 HFC 152 A
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用C相装满。
香波(shampoo)
％ 成分(INCI)
A 30.0 月桂醇聚醚硫酸钠(Sodium Laureth Sulfate)
6.0 椰油酰两性基乙酸钠(Sodium Cocoamphoacetate)
6.0 椰油酰胺丙基甜菜碱
3.0 月桂醇聚醚硫酸钠、二硬脂酸乙二醇酯、椰油酰胺MEA、月桂醇聚醚-10
SA 化合物
7.7 聚季铵盐-44
2.0 氨基聚二甲基硅氧烷
QS 香料
QS 防腐剂
1.0 氯化钠
43.3 水dem.
B QS 柠檬酸
％ 成分(INCI)
A 30.0 月桂醇聚醚硫酸钠
6.0 椰油酰两性基乙酸钠
6.0 椰油酰胺丙基甜菜碱
3.0 月桂醇聚醚硫酸钠、二硬脂酸乙二醇酯、椰油酰胺MEA、月桂醇聚醚-10
化合物
7.7 聚季铵盐-44
2.0 氨基聚二甲基硅氧烷
QS 香料
QS 防腐剂
1.0 氯化钠
39.3 水dem.
B QS 柠檬酸
生产：称出A相的化合物的重量并将它们混合。用柠檬酸将pH调节至6-7。
沐浴露(SHOWER GELS)
％ 成分(INCI)
A 40.0 月桂醇聚醚硫酸钠
5.0 癸基葡萄糖苷
5.0 椰油酰胺丙基甜菜碱
SA 化合物
1.0 泛醇
QS 香料
QS 防腐剂
2.0 氯化钠
46.0 水dem.
B QS 柠檬酸
％ 成分(INCI)
A 40.0 月桂醇聚醚硫酸钠
5.0 癸基葡萄糖苷
5.0 椰油酰胺丙基甜菜碱
SA 化合物
1.0 泛醇
QS 香料
QS 防腐剂
2.0 氯化钠
42.0 水dem.
B QS 柠檬酸
生产：称出A相的化合物的重量并将它们混合。用柠檬酸将pH调节至6-7。
香波
％ 成分(INCI)
A 40.0 月桂醇聚醚硫酸钠
5.0 C12-15烷醇聚醚-15磺酸钠(Sodium C12-15 Pareth-15 Sulfonate)
5.0 癸基葡萄糖苷
QS 香料
0.1 植烷三醇
44.6 水dem.
SA 化合物
0.3 聚季铵盐-10
1.0 泛醇
QS 防腐剂
1.0 月桂醇聚醚-3
2.0 氯化钠
％ 成分(INCI)
A 40.0 月桂醇聚醚硫酸钠
5.0 C12-15烷醇聚醚-15磺酸钠
5.0 癸基葡萄糖苷
QS 香料
0.1 植烷三醇
40.6 水dem.
SA 化合物
0.3 聚季铵盐-10
1.0 泛醇
QS 防腐剂
1.0 月桂醇聚醚-3
2.0 氯化钠
生产：称出A相的化合物的重量并将它们混合。用柠檬酸将pH调节至6-7。
香波
％ 成分(INCI)
A 15.00 椰油酰胺丙基甜菜碱
10.00 椰油酰两性基二乙酸二钠
5.00 聚山梨醇酯20
5.00 癸基葡萄糖苷
QS 香料
QS 防腐剂
SA 化合物
0.15 瓜儿胶羟丙基三甲基氯化铵
2.00 月桂醇聚醚-3
58.00 水dem.
QS 柠檬酸
B 3.00 PEG-150二硬脂酸酯
％ 成分(INCI)
A 15.00 椰油酰胺丙基甜菜碱
10.00 椰油酰两性基二乙酸二钠
5.00 聚山梨醇酯20
5.00 癸基葡萄糖苷
QS 香料
QS 防腐剂
化合物
0.15 瓜儿胶羟丙基三甲基氯化铵
2.00 月桂醇聚醚-3
54.00 水dem.
QS 柠檬酸
B 3.00 PEG-150二硬脂酸酯
生产：称出A相的化合物的重量并将其混合。调节pH至6-7。加入B相并加热到最大值40℃。
润肤露(BODY LOTIONS)
％ 成分(INCI)
A 2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
3.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
1.0 聚二甲基硅氧烷
4.0 鲸蜡硬脂醇
3.0 硬脂酸甘油酯SE
5.0 矿物油
4.0 希蒙得木(霍霍巴)子油(Simmondsia Chinensis(Jojoba)Seed Oil)
3.0 矿物油、羊毛脂醇
B 5.0 丙二醇
SA 化合物
1.0 泛醇
0.5 硅酸铝镁
QS 防腐剂
65.5 水dem.
C QS 香料
D QS 柠檬酸
％ 成分(INCI)
A 2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
3.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
1.0 聚二甲基硅氧烷
4.0 鲸蜡硬脂醇
3.0 硬脂酸甘油酯SE
5.0 矿物油
4.0 希蒙得木(霍霍巴)子油
3.0 矿物油、羊毛脂醇
B 5.0 丙二醇
SA 化合物
1.0 泛醇
0.5 硅酸铝镁
QS 防腐剂
61.5 水dem.
C QS 香料
D QS 柠檬酸
生产：分别将A相和B相加热至约40℃。将B相加入A相并通过搅拌均化。将C相加入混合的A相和B相并再次均化。用D相将pH调节至6-7。通过搅拌均化，并冷却至室温。
润肤露(BODY LOTIONS)
％ 成分(INCI)
A 6.0 PEG-7氢化蓖麻油
10.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 十四酸异丙酯
7.0 矿物油
0.5 牛油果油(Butyrospermum Parkii)
0.5 硬脂酸铝
0.5 硬脂酸镁
0.2 红没药醇
0.7 季铵盐-18-锂蒙脱石
B 5.0 二丙甘醇
0.7 硫酸镁
QS 防腐剂
62.9 水dem.
C QS 香料
SA 化合物
％ 成分(INCI)
A 6.0 PEG-7氢化蓖麻油
10.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 十四酸异丙酯
7.0 矿物油
0.5 牛油果油(Butyrospermum Parkii)
0.5 硬脂酸铝
0.5 硬脂酸镁
0.2 红没药醇
0.7 季铵盐-18-锂蒙脱石
B 5.0 二丙甘醇
0.7 硫酸镁
QS 防腐剂
58.9 水dem.
C QS 香料
SA 化合物
生产：分别将A相和B相加热至约80℃。将B相加入A相并通过搅拌均化。冷却到40℃并加入C相。再次均化，并冷却至室温。
头发调理剂(HAIR CONDITIONERS)
％ 成分(INCI)
A 10.0 PVP/VA共聚物
0.2 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
QS 香料
10.0 醇
SA 化合物
68.1 水dem.
B 10.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A 10.0 PVP/VA共聚物
0.2 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
QS 香料
10.0 醇
SA 化合物
64.1 水dem.
B 10.0 丙烷/丁烷
生产：将所有化合物加入A相，并搅拌均化。装入合适的容器并用B相装满。泡沫调理剂(FOAM CONDITIONER)
％ 成分(INCI)
A 1.0 聚季铵盐-4
0.5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
SA 化合物
QS 香料
QS 防腐剂
91.5 水dem.
B 6.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A 1.0 聚季铵盐-4
0.5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
SA 化合物
QS 香料
QS 防腐剂
87.5 水dem.
B 6.0 丙烷/丁烷
生产：将所有化合物加入A相，并搅拌以均化。装入合适的容器并用B相装满。泡沫调理剂
％ 成分(INCI)
A 1.0 聚季铵盐-11
0.5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
化合物
QS 香料
QS 防腐剂
91.5 水dem.
B 6.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A 1.0 聚季铵盐-11
0.5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
SA 化合物
QS 香料
QS 防腐剂
87.5 水dem.
B 6.0 丙烷/丁烷
生产：将所有化合物加入A相，并搅拌以均化。装入合适的容器并用B相装满。定型泡沫
％ 成分(INCI)
A 0.5 月桂醇聚醚-4
QS 香料
B 77.3 水dem.
10.0 聚季铵盐-28
SA 化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25 PABA
0.2 羟乙基纤维素
C 10.0 HFC 152 A
％ 成分(INCI)
A 0.5 月桂醇聚醚-4
QS 香料
B 73.3 水dem.
10.0 聚季铵盐-28
SA 化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25 PABA
0.2 羟乙基纤维素
C 10.0 HFC 152 A
生产：称出A相的化合物的重量并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相中并均化。装入合适的容器中，并用C相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A 2.0 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 78.5 水dem.
6.7 丙烯酸酯共聚物
0.6 AMP
SA 化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25 PABA
0.2 羟乙基纤维素
C 10.0 HFC 152 A
％ 成分(INCI)
A 2.0 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 74.5 水dem.
6.7 丙烯酸酯共聚物
0.6 AMP
SA 化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25 PABA
0.2 羟乙基纤维素
C 10.0 HFC 152 A
生产：称出A相的化合物的重量并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相中并均化。装入合适的容器中，并用C相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A 2.0 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 7.70 聚季铵盐-44
SA 化合物
QS 防腐剂
79.3 水dem.
C 10.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A 2.0 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 7.70 聚季铵盐-44
SA 化合物
QS 防腐剂
75.3 水dem.
C 10.0 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用C相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A 2.00 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 72.32 水dem.
2.00 VP/丙烯酸酯/月桂基甲基丙烯酸酯共聚物
0.53 AMP
SA 化合物
0.20 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.50 泛醇
0.05 二苯甲酮-4
0.20 氨基聚二甲基硅氧烷、西曲铵氯化物、十三烷醇聚醚-12
15.00 醇
C 0.20 羟乙基纤维素
D 6.00 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A 2.00 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 68.32 水dem.
2.00 VP/丙烯酸酯/月桂基甲基丙烯酸酯共聚物
0.53 AMP
SA 化合物
0.20 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.50 泛醇
0.05 二苯甲酮-4
0.20 氨基聚二甲基硅氧烷、西曲铵氯化物、十三烷醇聚醚-12
15.00 醇
C 0.20 羟乙基纤维素
D 6.00 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。加入C相并再次均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用D相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A 2.00 西曲铵氯化物
QS 香料
B 67.85 水dem.
7.00 聚季铵盐-46
SA 化合物
0.20 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.50 泛醇
0.05 二苯甲酮-4
0.20 氨基聚二甲基硅氧烷、西曲铵氯化物、十三烷醇聚醚-12
15.00 醇
C 0.20 羟乙基纤维素
D 6.00 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A 2.00 西曲铵氯化物
QS 香料
B 63.85 水dem.
7.00 聚季铵盐-46
SA 化合物
0.20 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.50 泛醇
0.05 二苯甲酮-4
0.20 氨基聚二甲基硅氧烷、西曲铵氯化物、十三烷醇聚醚-12
15.00 醇
C 0.20 羟乙基纤维素
D 6.00 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。加入C相并再次均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用D相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
85.5 水dem.
B 7.0 聚苯乙烯磺酸钠
SA 化合物
0.5 西曲铵溴化物
QS 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
81.5 水dem.
B 7.0 聚苯乙烯磺酸钠
SA 化合物
0.5 西曲铵溴化物
QS 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用C相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
92.0 水dem.
B 0.5 聚季铵盐-10
1.0 化合物
0.5 西曲铵溴化物
QS 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
88.0 水dem.
B 0.5 聚季铵盐-10
5.0 化合物
0.5 西曲铵溴化物
QS 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量并将其混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。调节pH至6-7。装入合适的容器并用C相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
82.5 水dem.
B 10.0 聚季铵盐-16
SA 化合物
0.5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
QS. 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
％ 成分(INCI)
A QS PEG-40氢化蓖麻油
QS 香料
78.5 水dem.
B 10.0 聚季铵盐-16
SA 化合物
0.5 羟乙基鲸蜡基二甲基磷酸铵
QS 防腐剂
C 6.0 丙烷/丁烷
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用C相装满。
定型泡沫
％ 成分(INCI)
A 2.0 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 84.0 水dem.
2.0 脱乙酰壳多糖
SA 化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25 PABA
C 10.0 HFC 152 A
％ 成分(INCI)
A 2.0 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
QS 香料
B 80.0 水dem.
2.0 脱乙酰壳多糖
SA 化合物
0.5 聚二甲基硅氧烷共聚醇
0.2 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
0.2 泛醇
0.1 PEG-25 PABA
C 10.0 HFC 152 A
生产：称出A相的化合物的重量，并将它们混合。溶解B相，将其搅拌入A相并均化。调节pH至6-7。装入合适的容器中，并用C相装满。
香波
％ 成分(INCI)
A 30.0 月桂醇聚醚硫酸钠
6.0 椰油酰两性基乙酸钠
6.0 椰油酰胺丙基甜菜碱
3.0 月桂醇聚醚硫酸钠、二硬脂酸乙二醇酯、椰油酰胺MEA、月桂醇聚醚-10
SA 化合物
7.7 聚季铵盐-44
2.0 氨基聚二甲基硅氧烷
QS 香料
QS 防腐剂
1.0 氯化钠
43.3 水dem.
B QS 柠檬酸
％ 成分(INCI)
A 30.0 月桂醇聚醚硫酸钠
6.0 椰油酰两性基乙酸钠
6.0 椰油酰胺丙基甜菜碱
3.0 月桂醇聚醚硫酸钠、二硬脂酸乙二醇酯、椰油酰胺MEA、月桂醇聚醚-10
SA 化合物
7.7 聚季铵盐-44
2.0 氨基聚二甲基硅氧烷
SA 香料
SA. 防腐剂
1.0 氯化钠
39.3 水dem.
B QS 柠檬酸
生产：称出A相的化合物的重量并将它们混合。用柠檬酸将pH调节至6-7。沐浴露(SHOWER GELS)
％ 成分(INCI)
A 40.0 月桂醇聚醚硫酸钠
5.0 癸基葡萄糖苷
5.0 椰油酰胺丙基甜菜碱
SA 化合物
1.0 泛醇
QS 香料
QS 防腐剂
2.0 氯化钠
46.0 水dem.
B QS 柠檬酸
％ 成分(INCI)
A 40.0 月桂醇聚醚硫酸钠
5.0 癸基葡萄糖苷
5.0 椰油酰胺丙基甜菜碱
SA 化合物
1.0 泛醇
QS 香料
QS 防腐剂
2.0 氯化钠
42.0 水dem.
B QS 柠檬酸
生产：称出A相的化合物的重量并将它们混合。用柠檬酸将pH调节至6-7。香波
％ 成分(INCI)
A 40.0 月桂醇聚醚硫酸钠
5.0 C12-15烷醇聚醚-15磺酸钠(Sodium C12-15 Pareth-15 Sulfonate)
5.0 癸基葡萄糖苷
QS 香料
0.1 植烷三醇
44.6 水dem.
SA 化合物
0.3 聚季铵盐-10
1.0 泛醇
QS 防腐剂
1.0 月桂醇聚醚-3
2.0 氯化钠
％ 成分(INCI)
A 40.0 月桂醇聚醚硫酸钠
5.0 C12-15烷醇聚醚-15磺酸钠
5.0 癸基葡萄糖苷
QS 香料
0.1 植烷三醇
40.6 水dem.
SA 化合物
0.3 聚季铵盐-10
1.0 泛醇
QS 防腐剂
1.0 月桂醇聚醚-3
2.0 氯化钠
生产：称出A相的化合物的重量并混合它们。用柠檬酸调节pH至6-7。
香波
％ 成分(INCI)
A 15.00 椰油酰胺丙基甜菜碱
10.00 椰油酰两性基二乙酸二钠
5.00 聚山梨醇酯20
5.00 癸基葡萄糖苷
QS 香料
QS 防腐剂
SA 化合物
0.15 瓜儿胶羟丙基三甲基氯化铵
2.00 月桂醇聚醚-3
58.00 水dem.
QS 柠檬酸
B 3.00 PEG-150二硬脂酸酯
％ 成分(INCI)
A 15.00 椰油酰胺丙基甜菜碱
10.00 椰油酰两性基二乙酸二钠
5.00 聚山梨醇酯20
5.00 癸基葡萄糖苷
QS 香料
QS 防腐剂
SA 化合物
0.15 瓜儿胶羟丙基三甲基氯化铵
2.00 月桂醇聚醚-3
54.00 水dem.
QS 柠檬酸
B 3.00 PEG-150二硬脂酸酯
生产：称出A相的化合物的重量并将其混合。调节pH至6-7。加入B相并加热到最大值40℃。
润肤露
％ 成分(INCI)
A 2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
3.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
1.0 聚二甲基硅氧烷
4.0 鲸蜡硬脂醇
3.0 硬脂酸甘油酯SE
5.0 矿物油
4.0 希蒙得木(霍霍巴)子油
3.0 矿物油、羊毛脂醇
B 5.0 丙二醇
SA 化合物
1.0 泛醇
0.5 硅酸铝镁
QS 防腐剂
65.5 水dem.
C QS 香料
D QS 柠檬酸
％ 成分(INCI)
A 2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
3.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
1.0 聚二甲基硅氧烷
4.0 鲸蜡硬脂醇
3.0 硬脂酸甘油酯SE
5.0 矿物油
4.0 希蒙得木(霍霍巴)子油
3.0 矿物油、羊毛脂醇
B 5.0 丙二醇
SA 化合物
1.0 泛醇
0.5 硅酸铝镁
QS 防腐剂
61.5 水dem.
C QS 香料
D QS 柠檬酸
生产：分别将A相和B相加热至约40℃。将B相加入A相并通过搅拌均化。将C相加入混合的A相和B相并再次均化。用D相调节pH至6-7。通过搅拌均化，并冷却至室温。
润肤露
％ 成分(INCI)
A 6.0 PEG-7氢化蓖麻油
10.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 十四酸异丙酯
7.0 矿物油
0.5 牛油果油(Butyrospermum Parkii)
0.5 硬脂酸铝
0.5 硬脂酸镁
0.2 红没药醇
0.7 季铵盐-18-锂蒙脱石
B 5.0 二丙甘醇
0.7 硫酸镁
QS 防腐剂
62.9 水dem.
C QS. 香料
SA 化合物
％ 成分(INCI)
A 6.0 PEG-7氢化蓖麻油
10.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 十四酸异丙酯
7.0 矿物油
0.5 牛油果油(Butyrospermum Parkii)
0.5 硬脂酸铝
0.5 硬脂酸镁
0.2 红没药醇
0.7 季铵盐-18-锂蒙脱石
B 5.0 二丙甘醇
0.7 硫酸镁
QS 防腐剂
58.9 水dem.
C QS 香料
SA 化合物
生产：分别将A相和B相加热至约80℃。将B相加入A相并通过搅拌均化。冷却到40℃并加入C相。再次均化，并冷却至室温。
日常护肤O/W(DAILY SKIN CARE O/W)
％ 成分(INCI)
A 1.7 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
0.7 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
2.0 PEG-14聚二甲基硅氧烷
3.6 鲸蜡硬脂醇
6.0 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 己二酸二丁酯
B 5.0 甘油
0.2 EDTA二钠
1，0 泛醇
QS 防腐剂
67.8 水dem.
C 4.0 辛酸/癸酸甘油三酯、丙烯酸钠共聚物
D 0.2 磷酸抗坏血酸酯钠
1.0 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇
1.0 辛酸/癸酸甘油三酯、抗坏血酸钠、生育酚、视黄醇
SA 化合物
E QS 氢氧化钠
％ 成分(INCI)
A 1.7 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
0.7 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
2.0 PEG-14聚二甲基硅氧烷
3.6 鲸蜡硬脂醇
6.0 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 己二酸二丁酯
B 5.0 甘油
0.2 EDTA二钠
1.0 泛醇
QS 防腐剂
63.8 水dem.
C 4.0 辛酸/癸酸甘油三酯、丙烯酸钠共聚物
D 0.2 磷酸抗坏血酸酯钠
1.0 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇
1.0 辛酸/癸酸甘油三酯、抗坏血酸钠、生育酚、视黄醇
SA 化合物
E QS 氢氧化钠
生产：分别加热A相和B相至约80℃。将B相加入A相并通过搅拌均化。将C相加入混合的A相和B相并再次均化。冷却到约40℃并加入D相。用E相调节pH至约6.5。通过搅拌均化，并冷却至室温。
日用皮肤防护霜O/W(PROTECTIVE DAY SKIN CREME O/W)
％ 成分(INCI)
A 1.7 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
0.7 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
2.0 PEG-14聚二甲基硅氧烷
3.6 鲸蜡硬脂醇
6.0 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 己二酸二丁酯
B 5.0 甘油
0.2 EDTA二钠
1.0 泛醇
QS 防腐剂
68.6 水dem.
C 4.0 辛酸/癸酸甘油三酯、丙烯酸钠共聚物
D 1.0 磷酸抗坏血酸酯钠
1.0 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇
SA 化合物
E QS 氢氧化钠
％ 成分(INCI)
A 1.7 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
0.7 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
2.0 PEG-14聚二甲基硅氧烷
3.6 鲸蜡硬脂醇
6.0 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 己二酸二丁酯
B 5.0 甘油
0.2 EDTA二钠
1.0 泛醇
QS 防腐剂
64.6 水dem.
C 4.0 辛酸/癸酸甘油三酯、丙烯酸钠共聚物
D 1.0 磷酸抗坏血酸酯钠
1.0 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇
化合物
E QS 氢氧化钠
生产：：分别加热A相和B相至约80℃。将B相加入A相并通过搅拌均化。将C相加入混合的A相和B相并再次均化。冷却到约40℃并加入D相。用E相调节pH至约6.5。通过搅拌均化，并冷却至室温。
洁面奶O/W(FACIAL CLEANSER O/W)
％ 成分(INCI)
A 10.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
10.0 辛酸/癸酸甘油三酯
1.5 环戊硅氧烷、环己硅氧烷
2.0 PEG-40氢化蓖麻油
B 3.5 辛酸/癸酸甘油三酯、丙烯酸钠共聚物
C 1.0 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇
QS 防腐剂
QS 香料
D 3.0 聚季铵盐-44
0.5 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
0.5 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 泛醇、丙二醇
4.0 丙二醇
0.1 EDTA二钠
SA 化合物
60.7 水dem.
％ 成分(INCI)
A 10.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
10.0 辛酸/癸酸甘油三酯
1.5 环戊硅氧烷、环己硅氧烷
2.0 PEG-40氢化蓖麻油
B 3.5 辛酸/癸酸甘油三酯、丙烯酸钠共聚物
C 1.0 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇
QS 防腐剂
QS 香料
D 3.0 聚季铵盐-44
0.5 椰油基三甲基硫酸甲酯铵
0.5 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
2.0 泛醇、丙二醇
4.0 丙二醇
0.1 EDTA二钠
SA 化合物
56.7 水dem.
生产：溶解A相，将B相加入A相，并通过搅拌均化。将C相加入混合的A相和B相并再次均化。将D相加入混合的A、B和C相并再次均化。溶解D相，加入A、B和C相并再次均化。搅拌15分钟。
日常护理身体喷剂(DAILY CARE BODY SPRAY)
％ 成分(INCI)
A 3.0 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
1.0 聚季铵盐-44
3.0 丙二醇
2.0 泛醇、丙二醇
1.0 环戊硅氧烷、环己硅氧烷
10.0 辛基十二醇(Octyldodecanol)
0.5 PVP
10.0 辛酸/癸酸甘油三酯
3.0 C12-15烷基苯甲酸酯
3.0 甘油
1.0 生育酚乙酸酯
0.3 红没药醇
SA 化合物
59.2 醇
％ 成分(INCI)
A 3.0 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
1.0 聚季铵盐-44
3.0 丙二醇
2.0 泛醇、丙二醇
1.0 环戊硅氧烷、环己硅氧烷
10.0 辛基十二醇
0.5 PVP
10.0 辛酸/癸酸甘油三酯
3.0 C12-15烷基苯甲酸酯
3.0 甘油
1.0 生育酚乙酸酯
0.3 红没药醇
SA 化合物
55.2 醇
生产：称量A相的所有成分，并通过搅拌将其完全溶解。
护肤胶(SKIN CARE GEL)
％ 成分(INCI)
A 3.6 PEG-40氢化蓖麻油
15.0 醇
0.1 红没药醇
0.5 生育酚乙酸酯
QS 香料
B 3.0 泛醇
0.6 卡波姆
SA 化合物
75.4 Aqua dem，
C 0.8 三乙醇胺
％ 成分(INCI)
A 3.6 PEG-40氢化蓖麻油
15.0 醇
0.1 红没药醇
0.5 生育酚乙酸酯
QS 香料
B 3.0 泛醇
0.6 卡波姆
SA 化合物
71.4 Aqua dem，
C 0.8 三乙醇胺
生产：溶解A相。溶胀B相，并用C相中和。将A相加到B相和C相，并通过搅拌均化。
须后洗液(AFTER SHAVE LOTIONS)
％ 成分(INCI)
A 10.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 生育酚乙酸酯
1.0 红没药醇
0.1 香料
0.3 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物
B 15.0 醇
1.0 泛醇
3.0 甘油
SA 化合物
1.0 三乙醇胺
63.5 水dem.
％ 成分(INCI)
A 10.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 生育酚乙酸酯
1.0 红没药醇
0.1 香料
0.3 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物
B 15.0 醇
1.0 泛醇
3.0 甘油
SA 化合物
0.1 三乙醇胺
59.5 水dem.
生产：溶解A相。溶解B相并加到A相。通过搅拌均化。晒后露(AFTER SUN LOTIONS)
％ 成分(INCI)
A 0.4 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物
15.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
0.2 红没药醇
1.0 生育酚乙酸酯
QS. 香料
B 1.0 泛醇
15.0 醇
3.0 甘油
SA 化合物
63.2 Aqua dem，
C 0.2 三乙醇胺
％ 成分(INCI)
A 0.4 丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聚物
15.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
0.2 红没药醇
1.0 生育酚乙酸酯
QS 香料
B 1.0 泛醇
15.0 醇
3.0 甘油
SA 化合物
59.2 Aqua dem，
C 0.2 三乙醇胺
生产：溶解A相。溶解B相并加到A相。通过搅拌均化。通过添加C相，中和A相和B相，并再次均化。
防晒露(SUNSCREEN LOTIONS)
％ 成分(INCI)
A 4.5 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
3.0 氰双苯丙烯酸辛酯
2.5 二-C12-13烷基苹果酸酯
0.5 生育酚乙酸酯
4.0 聚甘油-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯
B 3.5 异壬酸鲸蜡硬脂醇酯(Cetearyl Isononanoate)
1.0 VP/二十碳烯共聚物
5.0 异十六烷
2.5 二-C12-13烷基苹果酸酯
3.0 二氧化钛、三甲氧基辛酰硅烷
C 5.0 甘油
1.0 鲸蜡硬脂醇酯硫酸钠(Sodium Cetearyl Sulfate)
0.5 黄原胶
59.7 水dem.
D SA 化合物
1.0 苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯
0.3 红没药醇
％ 成分(INCI)
A 4.5 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
3.0 氰双苯丙烯酸辛酯
2.5 二-C12-13烷基苹果酸酯
0.5 生育酚乙酸酯
4.0 聚甘油-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯
B 3.5 异壬酸鲸蜡硬脂醇酯
1.0 VP/二十碳烯共聚物
5.0 异十六烷
2.5 二-C12-13烷基苹果酸酯
3.0 二氧化钛、三甲氧基辛酰硅烷
C 5.0 甘油
1.0 鲸蜡硬脂醇酯硫酸钠
0.5 黄原胶
55.7 水dem.
D SA 化合物
1.0 苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯
0.3 红没药醇
生产：将A相和B相分别加热至约80℃。将B相加入A相，并通过搅拌均化。将C相加热到80℃，将其加入到混合的A相和B相，并再次均化。冷却到约40℃并加入D相。再次均化。
防晒露O/W
％ 成分(INCI)
A 2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
3.0 三山嵛精
2.0 鲸蜡硬脂醇
2.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 甲氧基肉桂酸乙基己酯
1.0 乙基己基三嗪酮
1.0 VP/二十碳烯共聚物
7.0 十四酸异丙酯
B 5.0 氧化锌、三甲氧基辛酰硅烷
C 0.2 黄原胶
0.5 羟乙基丙烯酸酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、角鲨烷、聚山梨醇酯60
0.2 EDTA二钠
5.0 丙二醇
0.5 泛醇
60.9 水dem.
D SA 化合物
0.5 苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丙酯
1.0 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇
％ 成分(INCI)
A 2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
3.0 三山嵛精
2.0 鲸蜡硬脂醇
2.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 甲氧基肉桂酸乙基己酯
1.0 乙基己基三嗪酮
1.0 VP/二十碳烯共聚物
7.0 十四酸异丙酯
B 5.0 氧化锌、三甲氧基辛酰硅烷
C 0.2 黄原胶
0.5 羟乙基丙烯酸酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、角鲨烷、
聚山梨醇酯60
0.2 EDTA二钠
5.0 丙二醇
0.5 泛醇
56.9 水dem.
D SA 化合物
0.5 苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丙酯
1.0 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇
生产：将A相和B相分别加热至约80℃。将B相加入A相，并通过搅拌均化。将C相加热到80℃，将其加入到混合的A相和B相，并再次均化。冷却到约40℃并加入D相。再次均化。
防晒露O/W
％ 成分(INCI)
A 3.5 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
1.5 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
7.5 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
2.0 环戊硅氧烷、环己硅氧烷
0.5 蜂蜡
3.0 鲸蜡硬脂醇
10.0 辛酸/癸酸甘油三酯
B 5.0 二化钛、硅石、聚甲基硅酮、氧化铝
C 3.0 甘油
0.2 EDTA二钠
0.3 黄原胶
1.0 癸基葡萄糖苷
2.0 泛醇、丙二醇
56.3 水dem.
D SA 化合物
1.0 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇
QS 香料(Parfüm
l)
QS 防腐剂
％ 成分(INCI)
A 3.5 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
1.5 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
7.5 甲氧基肉桂酸乙基己酯
2.0 二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯
2.0 环戊硅氧烷、环己硅氧烷
0.5 蜂蜡
3.0 鲸蜡硬脂醇
10.0 辛酸/癸酸甘油三酯
B 5.0 二氧化钛、硅石、聚甲基硅酮、氧化铝
C 3.0 甘油
0.2 EDTA二钠
0.3 黄原胶
1.0 癸基葡萄糖苷
2.0 泛醇、丙二醇
52.3 水dem.
D SA 化合物
1.0 生育酚乙酸酯
0.2 红没药醇
QS 香料
QS 防腐剂
生产：将A相和B相分别加热至约80℃。将B相加入A相，并通过搅拌均化。将C相加热到80℃，将其加入到混合的A相和B相，并再次均化。冷却到约40℃并加入D相。再次均化。
足膏(foot balm)
％ 成分(INCI)
A 2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
5.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
4.0 鲸蜡醇
4.0 硬脂酸甘油酯
5.0 矿物油
0.2 薄荷醇
0.5 樟脑
B 69.3 水dem.
QS 防腐剂
C 1.0 红没药醇
1.0 生育酚乙酸酯
D SA 化合物
5.0 金缕梅提取物
％ 成分(INCI)
A 2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
5.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
4.0 鲸蜡醇
4.0 硬脂酸甘油酯
5.0 矿物油
0.2 薄荷醇
0.5 樟脑
B 65.3 水dem.
QS 防腐剂
C 1.0 红没药醇
1.0 生育酚乙酸酯
D SA 化合物
5.0 金缕梅提取物
生产：将A相和B相分别加热至约80℃。将B相加入A相，并通过搅拌均化。冷却到约40℃并加入C和D相。通过搅拌均化，并冷却至室温。
W/O
％ 成分(INCI)
A 6.0 PEG-7氢化蓖麻油
8.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 十四酸异丙酯
15.0 矿物油
0.3 硬脂酸镁
0.3 硬脂酸铝
2.0 PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物
B 5.0 甘油
0.7 硫酸镁
55.6 水dem.
C 1.0 化合物
0.5 生育酚乙酸酯
0.6 红没药醇
％ 成分(INCI)
A 6.0 PEG-7氢化蓖麻油
8.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
5.0 十四酸异丙酯
15.0 矿物油
0.3 硬脂酸镁
0.3 硬脂酸铝
2.0 PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物
B 5.0 甘油
0.7 硫酸镁
51.6 水dem.
C 5.0 化合物
0.5 生育酚乙酸酯
生产：将A相和B相分别加热至约85℃。将B相加入A相，并通过搅拌均化。冷却到约40℃并加入C相。通过搅拌均化，并冷却至室温。
液体化妆类O/W(LIQUID MAKE-UP-TYPE O/W)
％ 成分(INCI)
A 2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
6.0 硬脂酸甘油酯
1.0 鲸蜡醇
8.0 矿物油
7.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
0.2 聚二甲基硅氧烷
B 3.0 丙二醇
1.0 泛醇
QS 防腐剂
61.9 水dem.
C 0.1 红没药醇
SA 化合物
QS 香料
D 5.7 C.I.77 891、二氧化钛
1.1 氧化铁
％ 成分(INCI)
A 2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-6、十八烷醇
2.0 鲸蜡硬脂醇聚醚-25
6.0 硬脂酸甘油酯
1.0 鲸蜡醇
8.0 矿物油
7.0 鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯
0.2 聚二甲基硅氧烷
B 3.0 丙二醇
1.0 泛醇
QS 防腐剂
57.9 水dem.
C 0.1 红没药醇
SA 化合物
QS 香料
D 5.7 C.I.77 891、二氧化钛
1.1 氧化铁
生产：将A相和B相分别加热至约80℃。将B相加入A相，并通过搅拌均化。
冷却到40℃并加入C和D相。通过搅拌均化，并冷却至室温。
粉底(FOUNDATION)
| 成分 | INCI Name | ％ |
| 水相 | ||
| Dow Corning 9011弹性体掺合物Dow Corning 245 FluidSilcare 31 M50 SV对羟基苯甲酸丙酯AS 5811AS 5131AS 5146AS 5126AS 50230 | 环戊硅氧烷、PEG-12聚二甲基硅氧烷共聚物环戊硅氧烷辛酰三甲基硅酮(Caprylyl Trimethicone)二氧化钛、三乙氧基辛酰硅烷氧化铁、三乙氧基辛酰硅烷氧化铁、三乙氧基辛酰硅烷氧化铁、三乙氧基辛酰硅烷滑石、三乙氧基辛酰硅烷 | 15.005.006.350.057.500.700.050.353.50 |
| 油相 | ||
| 去离子水1.80丁二醇对羟基苯甲酸甲酯苯甲酸化合物 | 53.306.000.200.20SA | |
将颜料(AS 5811、5131、5146、5126和50230；Color Techniques)和对羟基苯甲酸丙酯分散于Silcare 31 M50 SV(Clariant)，搅拌直至润湿。然后，在紧密的设定(tight setting)下，使该混合物通过三辊滚轧机(three roll mill)上，直到粒径＜10μm。然后，将DC 9011 Elastomer Blend(弹性体掺合物)(Dow Corning)和DC 245Fluid在抛光容器(finishing vessel)内混合，搅拌直至均匀。在均化器缓慢搅拌下，加入细磨颜料(color grind)。将水称量入单独的容器中，并在螺旋桨式搅拌下缓慢加入化合物，搅拌直到溶解。将对羟基苯甲酸甲酯和苯甲酸加入丁二醇。稍微对该混合物加温，并搅拌直到溶解。使混合物冷却到30℃并加入到含化合物的容液中。在快速搅拌下，将水相缓慢加入到油相中。当添加完成时，均化该制剂五分钟。该制剂可用作美容粉底，施用于皮肤。
睫毛膏配方(MASCARA FORMULATION)
对照制剂和含2％的睫毛膏的成分如下：
商品名 INCI名称 ％
对照 2％化合物
1 2
相号# 水相
1 去离子水 42.96 42.96
2 丁二醇 5.00 5.00
2 对羟基苯甲酸甲酯 0.30 0.30
3 33-5198(黑色)氧化铁(Sun) 10.00 10.00
4 Natrosol 250 MR 羟乙基纤维素(Aqualon) 0.20 0.20
5 10％KOH 氢氧化钾 0.01 0.01
6 Arlacel 165硬脂酸甘油酯、PEG-100硬脂酸酯(Uniqema) 3.00 3.00
7 10％柠檬酸 0.27 0.27
相号# 蜡相
8 Arlacel 165 1.00 1.00
8 Cerasynt SD硬脂酸甘油酯(ISP) 3.50 3.50
8 蜂蜡、White SP 424蜂蜡(S&P) 7.50 7.50
8 Carnauba #1 Copernica Cerifera(巴西棕榈)蜡(S&P) 4.80 4.80
8 对羟基苯甲酸丙酯 0.10 0.10
9 去离子水 20.00 -
9 10％化合物/水 - 20.00
10 去离子水 1.00 1.00
10 Glydant DMDM乙内酰脲(Lonza) 0.36 0.36
100.00 100.00
为生产睫毛膏制剂，混合蜡相8，并在螺旋桨式搅拌下加热到85-90℃。通过将化合物加入水中，同时进行螺旋桨式混合，制备10％的化合物溶液。相1的水被加入配衡的不锈钢烧杯(过量加入约50g，以弥补损失)。相2的对羟基苯甲酸甲酯被加入到丁二醇，并在蒸汽浴顶部温热下搅拌，直至溶解，然后，在缓慢均相混合机搅拌下加入水中。然后，相4的氧化铁黑被加入，同时保持搅拌。然后，喷洒入Natrosol，同时维持搅拌。加入10％KOH，并开始加热到85℃，其中烧杯尽可能紧密覆盖。当Natrosol溶解后，逐滴加入10％的柠檬酸，保持温度和搅拌。然后，缓慢加入Arlacel 165，并混合至少5分钟，以确保溶解。在85-90℃下，将蜡相缓慢加入水相中，同时均相混合。保持该温度和搅拌10分钟。将该批从蒸汽浴移开，允许冷却，同时通过偶尔的手动刮擦烧杯壁进行均质混合。在55℃下，该批次被称重，以检查水的损失。继续混合，并且如果需要的话，水被加回。在45℃下，加入相9和10。使用冷水，继续冷却到30℃。此时，连续的手动刮擦烧杯壁是必需的。
在该制备中，少量的KOH(在相5中)被用来增加pH，以分散Natrosol，Natrosol用乙二醛涂覆，以阻止润湿，并防止聚集。在相7中，柠檬酸被缓慢加入，以调节pH至～5.5，即在氧化铁的等电点之下。在相7和8中，Arlacel 165在水相和油相之间分开，因为在两相中都具有表面活性剂的情况下，乳化作用更易于进行。在相9中，在对照批次中，去离子水被加入，代替化合物。化合物溶液被制备，同时乳液被加工，如此，它是绝对新鲜的。该制剂提供了适于用作睫毛膏的配方。
实施例2
皮肤增亮研究
在本实施例中，描述了实施用于评价BBI-AV的皮肤增白能力的实验。十三位年龄18-65、具有III或IV型Fitzpatrick皮肤的对象参与本22天的研究。Fitzpatrick皮肤分类基于无阳光暴露的冬季之后对首次30至45分钟阳光暴露的皮肤未防护反应。皮肤类型的种类如下：
I 总是容易灼伤：从未晒黑(tan)
II 总是容易灼伤：轻微晒黑
III 中度灼伤；逐渐晒黑
IV 轻微灼伤；总是完全晒黑
V 极少灼伤；过度晒黑
VI 从未灼伤；深度着色
在每一个对象的下背标记出五个颜色均匀的测试位置。临床分级者(grader)使用0-10标度(0＝非常轻微的晒黑，10＝极深的晒黑)评价在每个位置的晒黑程度。用一个浓度的分子A、两个浓度的分子B、载体对照缓冲液预处理每一对象连续11天，并设立未处理位置。使用闭合贴剂，对下背施用剂量大约150uL的测试材料(0.1％和0.9％的BBI-AV)和载体对照。闭合贴剂由Webril(非织造棉)垫组成，该垫保持在皮肤上，具有多孔、低过敏性条带(例如，SCANPORE
或MICROPORE)。一条BLENDERM
条带的宽度与在条带外面覆盖的棉垫相等，以提供闭合贴剂。贴剂保持在适当的位置，直到临床医生在第二天将它们除去。重复该贴剂步骤11天。
在第12天，临床医生除去前一天施用的贴剂并轻轻擦该位置，以除去残留的测试物质。使用0-11标度(0＝无晒黑，11＝极深晒黑)，临床分级者评价每个位置的晒黑程度。结果被提供于下表中。如所示，在含有BBI-AV的情况下观察到比载体对照具有更大的晒黑级别变化。
| 测试材料 | 第1天平均晒黑级别 | 第11天平均晒黑级别 | 平均晒黑级别的变化 |
| 载体对照 | 4.92 | 4.82 | -0.1 |
| 0.9％BBI-AV | 4.96 | 4.69 | -0.27 |
实施例3
皮肤色素沉着的减少
在本实施例中，描述了实施用于检测BBI-AV降低由UVA暴露诱导的皮肤色素沉着的能力的实验。用13位具有基于Fitzpatrick皮肤分类的III型和IV型皮肤的个体进行本研究。
在第一天，在每一个体的下背上测定每一对象的永久色素变黑最小剂量(minimal persistent pigment darkening dose、MPPD)，在与接受测试材料应用的区域具有相同颜色的区域中进行。对象接受五至八次UVA暴露，其中每次暴露代表比上一次暴露增加约25％。对象在MPPD暴露结束3-4小时后返回门诊。使用下面的标度，对测试位置进行色素变黑评分：
- 无明显的色素变黑
？可疑的反应；不清楚
+ 在基本上整个照射区域内轻微变黑
++在整个照射区域内明确变黑
用产生分值“+”的最低剂量UVA处理的位置表示对象的MPPD。
在第二天，在下背标记出均匀颜色的位置。临床分级者使用0-10标度(0＝非常轻微的晒黑，10＝极深的晒黑)评价在每个位置的晒黑程度。然后，在闭合条件下施用测试材料(0.1％和0.9％的BBI-AV)和载体对照。在每一贴剂上施用150ul体积的剂量。在这些实验中使用的闭合贴剂与实施例2中描述的相同。如实施例2所述，贴剂保持在适当的位置直到第二天临床医生除去它们。重复该贴剂步骤11天。在第12-14天，临床医生除去前一天施用的贴剂并轻轻擦该位置，以除去残留的测试物质。使用0-10标度(0＝无晒黑，10＝极深晒黑)，临床分级者评价每个位置的晒黑程度。在分级结束后，每一位置暴露于1.0MPPD的UVA，如同对于第1天所描述的。在暴露结束之后施用新的贴剂。在第15天，除去贴剂，并且采用0-10标度(0＝无晒黑，10＝极深晒黑)评价每个位置的变黑程度。结果提供如下。
| 处理 | 第12天平均变黑级别 | 第13天平均变黑级别 | 第14天平均变黑级别 | 第15天平均变黑级别 |
| 缓冲液 | 4.82 | 5.29 | 5.59 | 5.98 |
| 0.1％BBI-AV | 4.76 | 5.08 | 5.13 | 5.5 |
| 0.9％BBI-AV | 4.69 | 4.92 | 5.04 | 5.5 |
结果表明，在BBI-AV暴露位置的情况下，UVA诱导的色素沉着降低。当在变黑级别增加被列于下表中时，这得到进一步的证实。在该表中，变黑级别结果被显示为：第13、14和15天的级别减去第12天得到的结果。
| 处理 | 在第13天的变化 | 在第14天的变化 | 在第15天的变化 |
| 缓冲液 | 0.41 | 0.77 | 1.16 |
| 0.1％BBI-AV | 0.32 | 0.37 | 0.74 |
| 0.9％BBI-AV | 0.23 | 0.35 | 0.81 |
实施例4
毛发生长抑制
在该实施例中，描述了测定本发明的组合物抑制毛发生长的能力的实验。具体而言，进行这些实验，以评价本发明的组合物在通过刮剃或使用脱毛膏或上蜡(waxing)进行脱毛作用之后降低毛发生长的能力。
脸毛实验
在这些实验中，测试了一组(例如，5个)具有Fitzpatrick皮肤分类II型的男(雄)性对象。在开始实验之前，要求对象不进行局部脸部处理。在第1天，肉眼评价脸毛生长，并照相。在该评价和照相之后，以期望的浓度(一种或多种)应用待测试的组合物(一种或多种)以及载体对照。从第2天开始，个体在刮完之后立即施用组合物(一种或多种)。在试验期间，不进行其它预刮或后刮处理。在大多数情况下，试验继续进行30至45天的时间期间。在试验期间，每隔三天对脸毛生长进行肉眼评价和照相。利用计算机成像分析，测量毛发的数量以及毛干长度和宽度。在优选的实施方式中，由于应用测试化合物(一种或多种)，毛发数量、毛发厚度和/或毛发长度降低。
腿毛试验
在这些实验中，测试了一组(例如，5个)具有Fitzpatrick皮肤分类II型的男(雄)性对象。在开始实验之前，要求对象不进行局部腿部处理。在第1天，在每一个体的两腿区域上做标记，以及肉眼评价腿毛生长，并照相。在该评价和照相之后，以期望的浓度(一种或多种)应用待测试的组合物(一种或多种)。在该评价和照相之后，以期望的浓度(一种或多种)应用待测试的组合物(一种或多种)(即，含有期望浓度的BBI-AV的测试化合物)以及载体对照。在一些方法中，为每一个体提供两个管，一个含有BBI-AV，而另一个含有载体对照。这些管被标上“左”和“右”。在试验的每一天，对象对各个腿施用两个管中的组合物。在施用7天后，肉眼评价个体并进行照相。然后，刮剃两条腿，或暴露于脱毛剂，并且测试个体继续如前施用组合物。然后，每两天在腿部肉眼评价腿毛生长，并对适宜的区域照相。在10天后，再次刮腿，而测试对象继续如前施用组合物。在一些方法中，该试验进行3个循环，以及肉眼评价腿毛生长并进行照相。然后，继续该试验另外的8天。在优选的实施方式中，由于在标记的区域(一个或多个)施用测试化合物(一种或多种)，毛发数量、毛发厚度和/或毛发长度降低。
从第2天开始，个体在刮完之后立即施用组合物(一种或多种)。在试验期间，不进行其它预刮或后刮处理。在大多数情况下，试验持续进行30至45天的时间期间。在试验期间，每隔三天对脸毛生长进行肉眼评价和照相。利用计算机成像分析，测量毛发的数量以及毛干长度和宽度。在优选的实施方式中，由于应用测试化合物(一种或多种)，毛发数量、毛发厚度和/或毛发长度降低。
实施例5
噬菌体展示肽文库的淘选
在本实施例中，描述了实施用于淘选噬菌体展示文库的试验。根据制造商的说明，针对hVEGF165(R&D systems)淘选商业获得的噬菌体肽库PhD C7C(NEB)，进行3轮。该步骤得到图1中概述的序列图。根据制造商的说明，使用噬菌体ELISA，鉴定单个克隆(见，图2)。
实施例6
VEGF结合肽的BIAcoreTM结合分析
在本实施例中，描述了实施用于评价肽对VEGF的亲和性的试验。使用BIAcoreTM-3000表面等离子共振系统(Biacore)，测量肽对VEGF的亲和性。根据供应商的指示(Biocore)，用50mMNaOH、0.1％HCl、0.1％SDS和0.08％H3PO4调节CM5传感芯片，并使用N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化，以共价偶联VEGF。人VEGF165(Biosource)在20mM pH4.8的乙酸钠中被稀释到5μg/ml，并以2μl/min的流速被注射，以达到约1000至6000个响应单元(RU)的偶联蛋白。类似地，TNF-α(人TNF-α、Biosource，Int.，Camarillo，CA)被偶联到CM5传感芯片上，在参考条带上达到约850至3500RU。1M乙醇胺溶液作为封闭剂注射。在一些实验中，另外的EDC和NHS溶液被注射，以改善基线稳定性，而1M乙醇胺溶液作为封闭剂注射。用EDC和NHS激活参考条带，并用乙醇胺封闭。
使用标准的FMOC化学术，合成肽，通过反相HPLC纯化到纯度＞95％(SynPep)，并以10mg/mL储存在DMSO中。对于动力学测量，在HBS-EP缓冲液、0.01M HEPES pH7.4、0.15M NaCl、3mM EDTA、0.005％表面活性剂P20(Biacore)中的两倍连续稀释的肽，在25℃下以20μL/min的流速注射。为了消除背景，两倍连续稀释的DMSO样品和缓冲液也被注射。使用BIAevaluation3.1软件，计算动力学参数。这些试验的结果提供在表3中。
实施例7
肽-BLA支架的构建
在本实施例中，描述了用于构建抗-VEGF-BBI构建物的方法。质粒pCM01(5.1kb)编码15个氨基酸的肽序列CK37281，其融合到阴沟肠杆菌(Enterobactercloaceae)β-内酰胺酶(BLA)的N端，并具有pIII信号序列和C端6XHis标签(见，图4)。该质粒还携带有氯霉素抗性基因(CAT)，作为选择性标记，并且通过lac启动子(Plac)驱动表达。使用Bbs1载体构建质粒pCM01，从pCB04构建pME30。用DraIII和Spe I(NEB)消化pCB04，得到2.8kb和2.1kb片段。为制备插入物，寡聚体对NtermStf2-F和NtermStf2-R(5μM)以总体积50μl在水中混合，在加热模块(block)中将混合物在95℃加热5分钟，并允许该模块冷却到室温。
寡聚体：用于填充载体插入物(stuffer vector insert)的NtermStf2-F和NtermStf2-R：
NtermStf2-F
5’[Phos]
CTAGTGTCTTCGATCAAGTCGACAACAGCCTGTCTGCAGATCCTGAAGACTGGCGGAGGTGGTCGCGAATACGATTACCCCGCTGATGAAAGCACAGA 3’(SEQID NO：26)
NtermStf2-R
5’[Phos]
GTGCTTTCATCAGCGGGGTAATCGTATTCGCGACCACCTCCGCCAGTCTTCAGGATCTGCAGACAGGCTGTTGTCGACTTGATCGAAGACA3’(SEQ ID NO：27)
在16℃下，使用10μl DNA混合物和10μl Takara连接酶I溶液，以1∶1∶5的摩尔比，分别将2.8kb片段、2.1kb片段和填充插入物(100bp)过夜连接。使用Zymo Research DNA纯化试剂盒纯化连接物，并于2×8μl的水中洗脱。然后，5μl连接混合物被转化入50μl Top10电穿孔感受态细胞(Invitrogen)，加入250μl SOC，并在37℃下生长该细胞1小时。以1/10稀释转化混合物，并且铺板于LA+5ppmCMP和LA+5ppm CMP+0.1ppm CTX板上，随后在37℃下过夜孵育。从CMP板挑出12个克隆，生长在LB+5ppm CMP中，分离DNA并用BbsI酶消化(在填充质粒的2个位点)。pCB04(WT)也被消化，作为对照。一个克隆具有正确的序列，并命名为pME22。
使用下面的BBsl插入物的引物，从pME22构建VEGF肽-BLA表达质粒pCM01(见，图5)；对于肽插入物，使用寡聚物VegF-F、VegF-5R、VegF-3RP。
VegF-F
5’ACTAGTCGTTCCTTTCTATTCTCACTCTGCTTGTACCCTGTGGCCGACCTTCTGGTGCGGTGGAGGTTCGACGCCAGTGTCAGAAAAACAGCTG3’(SEQ ID NO：28)
VegF-5R
5’AGCAGAGTGAGAATAGAAAGGAACGAC 3’(SEQ ID NO：29)
VegF-3RP
5’[Phos]CCGCCAGCTGTTTTTCTGACACTGG 3’(SEQ ID NO：30)
在存在5ppm CMP和0.1ppm氨噻肟头孢霉素抗生素下，在1升摇瓶中，于25℃在大肠杆菌(TOP10；Invitrogen)中，表达BLA-肽融合蛋白pCM01和pCB04(WT)以及偏倚文库(biased library)pCM04 40小时。通过以3,000×g离心10min，从200ml细胞培养液收集细胞团。然后，在缓慢混合下，用25ml B-PER试剂(Pierce)处理该细胞团40分钟。通过以20,000×g离心20min，分离提取液。使用头孢硝噻吩测定所有液体级分的BLA活性，并且假设与WT酶具有相同的比活，计算每一级分中融合蛋白的浓度。通过IMAC色谱，纯化融合蛋白。富集咪唑洗脱的BLA活性级分，并且发现纯度好于95％，如SDS-PAGE所核实(见，图6)。
实施例8
筛选肽-BLA支架文库
在本实施例中，描述了筛选肽-BLA支架文库的试验。在轻微摇动下，在4℃，用0.5μg(100μL的5μg/mL)hVEGF165(Preprotech)包被COSTAR板(96孔)过夜，随后用Superblock封闭缓冲液(Pierce)在室温下封闭若干小时。His-标签纯化的pCM01和pCM04样品被连续稀释到BLA测定缓冲液中，并且100μl的部分被转移到VEGF包被孔中。一小时之后，板用PBS洗涤六次，加入0.05％TWEEN
-20和200μL含有0.1mg/ml头孢硝噻吩(Oxoid)的头孢硝噻吩测定缓冲液，以在Abs490/min下测量残留的结合β-内酰胺酶活性。对照孔含有pCB04β-内酰胺酶，作为对照(见，图7)。
实施例9
通过aVEGF肽抑制HUVE细胞增殖
在本实施例中，描述了实施用于测定aVEGF肽对HUVE细胞的影响的实验。根据制造商的指示，HUVE细胞(人脐带静脉细胞；Cambrex)传代1-5次，并维持。用0.03至20ng/ml VEGF刺激HUVE细胞生长，其中在10ng/ml VEGF165下，具有最高增殖。该浓度也被用在随后的试验中。将0.5nM至25μM的一序列aVEGF肽(和抗-VEGF单克隆抗体对照(R&D Systems))与10ng/mL VEGF混合，然后加到植入96孔板的HUVE细胞，一式三份。通过3H-胸腺嘧啶核苷掺入法测量细胞增殖(见，图8)。下至0.4μM抗-VEGF，都观察到显著抑制。
实施例10
通过VEGF肽偶联物抑制血管管形成
在本实施例中，描述了实施用于评价血管管形成的实验。该体外血管生成测定作为试剂盒从Chemicon获得，并根据制造商的指示使用。
该测定提供了血管生成的简单模型，其中可以监测由外源信号所致的管形成的诱导或抑制。在将细胞加入到“ECMatrix”(即这样的溶液，其原位聚合并提供制备的基底蛋白固体凝胶，以便内皮细胞排列并形成中空管状结构)之前，低传代HUVE细胞的内皮细胞悬液与不同浓度的抑制剂在10ng/mL VEGF存在下混合。管形成是多步骤的过程，涉及细胞黏附、迁移、分化和生长。在倒置光学显微镜下，在20×-100×放大倍数下，测量所得到的管形成。在高于1μM肽的浓度下，观察到管形成的显著抑制。
实施例11
噬菌体展示的VEGF-偏倚肽文库的构建
在本实施例中，描述了实施用于构建噬菌体展示文库的实验。使用本领域已知的C7C基因III噬菌体展示系统(见，Noren and Noren[2001])，构建用于淘选VEGF的亲和成熟文库。如本领域所知，合成寡核苷酸并将其磷酸化。用于构建文库的寡核苷酸采用NNK(其中N＝G、A、T、C，而K＝G或T)密码子。NNK克隆方案排除了两个终止密码子的潜能，并仍编码所有的二十个氨基酸。随机肽文库展示了9个随机氨基酸，其中在位置2和9固定有半胱氨酸(XC(X)7CGGGS；SEQ ID NO：31；X代表任何氨基酸)。使用与用于随机文库相同的方法，建立七个CK37282偏倚肽文库。
实施例12
VEGF Bowman Birk抑制剂(BBIVEGF)的构建
在本实施例中，描述了抗VEGF BBI(BBI-AV)构建物的构建。根据本领域已知的标准技术，使用NdeI/Xhol克隆位点，将具有适于将小肽编码序列引入胰蛋白酶环(SacI-EcoRI)和/或胰凝乳蛋白酶环(EcoRI-Sal1)的限制性位点的编码Bowman Birk抑制剂的合成基因(参见图9)克隆入pET-22b(Novagem)中。得到的载体pET BBI被用作模板，以将序列CK37281、CK37282作为双链寡核苷酸盒(Operon)插入BBI环。将构建物转化入BL-21(DE3)大肠杆菌中，并在含有50μg/mL氨苄青霉素的培养基中铺板。使用本领域中已知的方法(Qiagen)，分离来自各个克隆的质粒DNA，并通过DNA测序确认正确的插入物。另外的目标肽包括PS-AV1(1KSAIC-KYYLYWW-CF1V；SEQ ID NO：16)和S-AV2(1KSAIC-TLWKSYW-CF1V；SEQ ID NO：17)。
在14-L发酵罐中表达融合蛋白和野生型BBI。收集细胞团，并使用修改的FoldIt筛选步骤(Hampton)从内含体分离蛋白质(见，图10)。
实施例13
BBI-VEGF的BIAcoreTM结合分析
在本实施例中，描述了实施用于测定如实施例9中所述产生的构建物的结合亲和性的试验。使用BIAcoreTM-3000表面等离子共振系统(Biacore)，测量BBI-VEGF对VEGF的亲和性。根据供应商的指示(Biocore)，用50mM NaOH调节CM5传感芯片，并使用N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化，以共价偶联VEGF。VEGF(人VEGF165，Biosource)在20mM pH4.8的乙酸钠中被稀释到5μg/ml，并以2μl/min的流速被注射，以达到约1000至6000个响应单元(RU)的偶联蛋白。类似地，胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶被偶联到CM5传感芯片上，以在剩余条带上达到约850至3500RU。1M乙醇胺溶液作为封闭剂注射。再折叠的BBI-VEGF对VEGF的选择性结合亲和性被示于图11中。
实施例14
体外细胞增殖测定，以测试hVEGF抑制肽的活性
在本实施例中，描述了实施用于测定抗-VEGF肽的抗增殖活性的实验。使用人脐带静脉内皮细胞(HUVEC)如下测定VEGF抑制肽的抗增殖活性。早期传代(六代以下)的HUVEC以每孔5000个细胞种入96孔板中，并在200μl不含生长因子并补充0.5％FBS的EBM培养基(Cambrex)中于37℃、5％CO2下饥饿18小时。用180μl包含EBM培养基--含5％胎牛血清和1％DMSO--的生长培养基更换该培养基。然后，与各种肽浓度(所有孔的最终DMSO浓度为1％)预温育1小时的20μl VEGF被加入所述孔中，得到10ng/ml的VEGF终浓度。人VEGF抗体(R&D Systems)被用作阳性对照。在生长培养基中仅含浓度为0.31至20ng/ml的VEGF的细胞被用于建立标准生长曲线。该细胞被进一步孵育48小时，并使用MTS测定方法(CellTiter 96 Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay Kit；Promega)，测量细胞增殖。然后，40μl MTS四氮唑溶液被加入每一孔中，在3和4小时温育之后，在490nM下对该板进行读数。结果表明，VEGF抑制肽CK37281和CK37283具有微摩尔范围的IC50。
实施例15
在人皮肤上抗-VEGF肽的
重复刺激贴剂测试(Repeat Insult Patch Testing，RIPT)
在本实施例中，描述了实施用于测定抗-VEGF肽的贴剂测试结果的实验。剂量为0.5％(w/v)的aVEGF肽CK37281样品被配制入含去离子水/丁二醇的基础配方中。根据Clinical Research Laboratories、Inc.(Piscataway、NJ)设计的步骤，在重复刺激贴剂测试中，将大约0.2mL的该配方应用到200位人志愿者。结果表明，在这些志愿者的皮肤上不存在皮肤刺激或过敏。
在描述了本发明的优选的实施方式后，对于本领域普通技术人员而言显而易见的是，可以对所公开的实施方式做出各种修改，并且这些修改意欲在本发明的范围之内。
实施例16
BCE103-BBI融合蛋白在枯草芽孢杆菌中的产生
在本实施例中，描述了实施用于在枯草芽孢杆菌中产生BCE103-BBI融合蛋白的实验。在这些实验中使用的、编码具有C端六组氨酸标签的前BBI(pro-BBI)蛋白的合成基因(Operon Technologies)的DNA序列为：
AACCTGCGTCTGTCTAAGCTTGGCCTGCTTATGAAATCAGACCATCAGCACAGCAATGACGATGAGAGCTCTAAACCCTGTTGCGATCAATGCGCATGTA CGAAATCAAATCCTCCACAGTGTCGGTGTTCCGATATGCGTCTGAATAGCTGTCATAGTGCATGCAAAAGCTGTATCTGCGCCCTGAGTTATCCAGC
由上面的合成基因编码的具有C端六组氨酸标签的前BBI的蛋白序列为：
NLRLSKLGLLMKSDHQHSNDDESSKPCCDQCACTKSNPPQCRCSDMRLNSCHSACKSCICALSYPAQCFCVDITDFCYEPCKPSEDDKENHHHHHH(SEQ ID NO：45)
编码BBI的主要成熟形式的合成基因的DNA序列的部分为：
GACGATGAGAGCTCTAAACCCTGTTGCGATCAATGCGCATGTACGAAATCAAATCCTCCACAGTGTCGGTGTTCCGATATGCGTCTGAATAGCTGTCATAGTGCATGCAAAAGCTGTATCTGCGCCCTGAGTTATCCAGCTCAATGTTTTTGCGTCGACATCACGGACTTCTGCTATGAGCCATGTAAACCAAGCGAGGACGATAAAGAGAAC(SEQ ID NO：46)
由上面的合成基因编码的BBI的主要成熟形式的蛋白序列为：
DDESSKPCCDQCACTKSNPPQCRCSDMRLNSCHSACKSCICALSYPAQCFCVDITDFCYEPCKPSEDDKEN(SEQ ID NO：47)
用于扩增BBI基因以在pJ103载体中融合到BCE103纤维素酶表达盒的PCR引物为：
BBI融合_FW：5’CAGCACGGATCCAGACGATGAGAGCTCTAAACCC 3’(SEQID NO：48)
BBIHindIII_RV：5′CTGCAGAAGCTTAAAAATAAAAAAACGGATTTCCTTCAGGAAATCCGTCCTCTGTTAACTTTTAGTTCTCTTTATCGTCCTCGC3′(SEQ IDNO：49)
BBIHIS-HindIII_RV：5’
CTGCAGAAGCTTAAAAATAAAAAAACGGATTTCCTTCAGGAAATCCGTCCTCTGTTAACTTTTAATGGTGATGGTGATGATGGTTCTC3’(SEQ ID NO：50)
图14提供了被克隆入pJM103整合载体中的aprE-BCE103-BBI-HisTag表达盒(EcoRI-HindIII)的序列。图15提供了pJM103BBIHis表达载体的示意性质粒图谱。
融合到枯草芽孢杆菌aprE启动子和信号序列的碱性纤维素酶(BCE103)基因(见，van Soligen，美国专利6,063,611，由此引入作为参考)，从pUCAPR103(Shawet al.、J.Mol.Biol.、320：303-309[2002])作为EcoRI-BamHI片段(即，仅携带BCE103催化域和第一纤维素结合域连接子的编码序列的片段)克隆入pJM103(Perego，“Integrational vectors for genetic manipulation in Bacillus subtilis”In，Bacillus subtilis and Other Gram-positive Bacteria：Biochemistry，Physiology，and Molecular Genetics，Sonenshein，Hoch，and Losick(eds)，American Society for Microbiology，WashingtonD.C.，pp.615-624[1993])。通过Operon Technologies(参见上面的DNA序列)，合成具有C端六组氨酸标签(His-Tag)的、编码大豆Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)(Swiss-ProtAccession#P01055；See，Odani and Ikenaka，J.Biochem.，71：839-848[1972])的基因。使用引物(所有引物通过MWG Biotech，Oligos Etc.或OperonTechnologies合成)，通过PCR扩增BBI基因，其在具有BCE103基因的正确阅读框中产生了5’BamHI位点，3’端在具有用于克隆入pJM103载体的3’HindIII位点的BBI基因的末端之后引入了强的转录终止子(LAT，来自地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)α-淀粉酶基因)。
使用合成的BBI基因作为模板，分别用引物BBIfusion_FW(SEQ ID NO：48)和BBIHISHindIII_RV(SEQ ID NO：50)或者BBIfusion_FW(SEQ ID NO：48)和BBI-HindIII_RV(SEQ ID NO：49)，产生含有或不含有C端His-Tag的PCR片段。除非另外指出，根据供应商的说明，使用High Fidelity Platinum Taq聚合酶(Invitrogen)，PCR反应通常在热循环仪上进行30个循环(退火温度55℃)。PCR片段以BamHI-HindIII片段克隆入携带aprE-BCE103表达盒的pJM103中。通过DNA测序，确认正确的基因序列。
因此，如图14所示，BBI基因(含有或不含有His-Tag)的成熟编码区的N端在阅读框内被融合到由BCE103纤维素酶基因编码的第一CBD(纤维素结合域)连接子序列的C端编码区。如此，在最终的表达载体pJM103BBI或pJM103BBIhis中，BCE103的两个CBD(Shaw et al.，supra)被BBI置换(见，图15)。aprE启动子调控BCE103-BBI基因融合体的表达(见，Ferrari et al.，J.Bact.，170：289-295[1988]；以及Henner et al.，J.Bact.，170：296-300[1988])。
用表达质粒pJM103BBI或pJM103BBIhis转化感受态枯草杆菌细胞BG3934comK。在木糖诱导型启动子(Hahn et al.、Mol.Microbiol.、21：763-775[1996])的调控下，通过诱导comK基因，使该细菌成为感受态。在含有5μg/ml氯霉素的Luria Broth琼酯(LA)板上选择转化子。为通过基因扩增增加表达，克隆被划线，并且在含有25μg/ml氯霉素的LA板上生长若干次，直到在抗生素下的生长速率类似于不存在氯霉素时的生长速率。通过在TSB培养基(来自OXOID的TryptoneSoya Broth，30g/L)或MBD培养基--基于MOPS的已知成分的培养基，在37℃下在摇瓶中生长，产生BCE103-BBI融合蛋白。MBD培养基基本上如所述加以制备(Neidhardt et al.、J.Bacteriol.，119：736-747[1974])，除了NH4Cl2、FeSO4和CaCl2在基础培养基中被省去，使用3mM K2HPO4，并且用60mM脲、75g/L葡萄糖和1％大豆蛋白胨(soytone)补充该基础培养基。此外，以1升中含有400mgFeSO4·7H2O、100mg MnSO4·H2O、100mg ZnSO4·7H2O、50mg CuCl2·2H2O、100mgCoCl2·6H2O、100mg NaMoO4·2H2O、100mg Na2B4O7·10H2O、10ml 1M CaCl2和10ml 0.5M柠檬酸钠的100×储液补充微养分(micronutrient)。
通过使用标准蛋白染料(例如，GelCode Blue Stain Reagent；Pierce)，作为以～44kDa在SDS-PAGE凝胶(在MES缓冲液中的10％NuPAGE，如生产商Invitrogen所述运行)上跑胶的主要蛋白条带，可以容易地在来自无细胞上清液(在TSB培养基中生长24h之后，或在MBD培养基中生长48h之后)的样品中显示BCE103-BBI融合蛋白。使用生产商提供的方案(BM Chromogenic Western BlottingKit；RocheApplied Science，使用抗-HisTag抗体或抗-BCE103纤维素酶多克隆抗体，用于检测)，通过SDS-PAGE凝胶的免疫印迹，确认BCE103-BBI融合蛋白的身份。
为测定BCE103活性，在LA纤维素酶指示板(含用0.2％Congo Red或用0.5％偶氮-CM-纤维素、Megazyme染色的1％羧甲基纤维素)上定性评价纤维素酶降解；或使用本领域已知的方法(参见，例如van Tilbeurgh et al.，Meth.Enzymol.，160：45-59[1988])，使用合成底物4-硝基苯基β-D-纤维二糖苷(Sigma)，在培养肉汤上，通过在测定缓冲液(100mM Tris pH8.6、0.005％Tween-80)中的直接测定，定量评价纤维素酶降解。
在测定缓冲液中进行胰蛋白酶抑制试验，以确定BBI活性。具体而言，通过制备十一次1∶1连续稀释(100μL BBI+100μL测定缓冲液)的2μg/mL标准BBI溶液，产生标准曲线。使用疏水相互作用柱(POROS HP2，Phenyl柱，AppliedBiosystems)，在20mM pH6.0的MES中，从1mg/ml胰蛋白酶-胰凝乳蛋白酶抑制剂(Sigma Cat.#T-9777)溶液，纯化BBI标准物。该柱用20mM MES pH6.0平衡，用5mg抑制剂上样，用平衡缓冲液洗涤，然后，用水洗脱BBI。如果需要，在抑制测定中稀释将被检测的未知BBI样品，以便两个或更多个数据点将落入标准曲线内(通常1∶10、1∶100、1∶200、1∶1000、1∶2000样品稀释物被检测，然后，如果必要，精细调节稀释)。每一稀释的BBI标准物或样品20μL被加入到80μL的50ng/m牛胰腺胰蛋白酶(Worthington)(通过将储备物1mg/mL胰蛋白酶溶液稀释入测定缓冲液中而制备)。为了方便起见，标准物和样品在96孔微量滴定板上排列。反应液被混合并在25℃下温育15分钟。在温育之后，100μL0.5mg/ml胰蛋白酶底物(从100mg/ml DMSO溶液稀释在测定缓冲液中)，Suc-AAPR-pNA(琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Arg-对硝基苯胺，Bachem)被加入，混合，并监测OD(A405)15分钟，其中使用Spectra Max 250(Molecular Devices)每12秒记录1个时间点。数据点被用于确定每一反应的Vmax。通过将Vmax对BBI浓度绘图，得到标准曲线，并拟合成四参数曲线。使用生产商(Molecular Devices)提供的软件，进行所有的数据拟合。通过标准曲线计算未知样品的BBI浓度。可选地，使用相同的方案但通过测定牛胰凝乳蛋白酶(Worthington)抑制作用(使用浓度与胰蛋白酶相同的胰凝乳蛋白酶，并通过加入100μL的0.4mg/ml胰蛋白酶底物，琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Arg-对硝基苯胺，Bachem测量胰凝乳蛋白酶活性)，测量BBI活性。
通过摇瓶运行(500ml MBD培养基，在2.8L Fernbach 6挡板瓶(baffled flask)中，37℃、225rpm、在生长60小时后收集)的滴度典型在0.4-0.9mg/ml BCE活性和40-150μg/ml BBI胰蛋白酶抑制活性的范围内。然而，预期通过优化细菌菌株、培养基和生长调节(通风、温度、收获时间等等)，滴度可能被进一步改善。
除了融合到野生型BBI的BCE103之外，使用上面概述的方法，可以产生融合到BBI变体的融合蛋白以及在BCE103和BBI之间具有各种连接子的融合蛋白，如在下面的实施例中所描述。此外，当BBI融合到第二个CBD连接子(BCE-cbdD-BBI；例如，参见实施例19)，使得可能使用第一个CBD来帮助纯化过程时，融合蛋白也可以被产生。
实施例17
取代入BBI活性部位环成为BCE103-BBI融合蛋白的肽的生产
在本实施例中，描述了实施用于产生取代入BBI活性部位环成为BCE103-BBI融合蛋白的肽的试验。引物以及用在这些试验的各个步骤中的其它序列被提供如下。图16提供了从BCE103融合位点(BamHI位点)到该基因末端的12BBIck81序列。含有CK37281序列(ACYNLYGWTC(SEQ ID NO：43)的肽被插入胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶抑制环中。
用于使用QuikChange
定点突变(Stratagene)在BBI基因中引入EcoRI位点的引物为：
BowBeco-F
5’-GATATGCGTCTGAATTCCTGTCATAGTGCAT(SEQ ID NO：51)
BowBeco-R
5’-ATGCACTATGACAGGAATTCAGACGCATATC(SEQ ID NO：52)
退火并克隆入BBI基因(SacI-EcoRI)以用VegF结合肽CK37281取代胰蛋白酶抑制环的DNA寡核苷酸的序列为：
1BBck81+
5’-CTAAACCCTGTTGCGATCAATGCGCATGTTATAATTTGTATGGGTGGACTTGTCGCTGCAGCGATATGCGTCTG(SEQ ID NO：53)
1BBck81-
5’-AATTCAGACGCATATCGCTGCAGCGACAAGTCCACCCATACAAATTATAACATGCGCATTGATCGCAACAGGGTTTAGAGCT(SEQ ID NO：54)
退火并克隆入BBI基因(EcoRI-SalI)以用VegF结合肽CK37281取代胰凝乳蛋白酶抑制环的DNA寡核苷酸的序列为：
2BBck81+
5’-AATTCCTGTCATAGTGCCTGCAAAAGCTGCGCATGTTATAACCTGTACGGGTGGACCTGTTTTTGCG(SEQ ID NO：55)
2BBck81-
5’-TCGACGCAAAAACAGGTCCACCCGTACAGGTTATAACATGCGCAGCTTTTGCAGGCACTATGACAGG(SEQ ID NO：56)
下面提供了寡核苷酸对的DNA序列，该寡核苷酸对用于制备盒以将肽引入合成BBI基因的胰蛋白酶(SacI和EcoRI限制性位点)或胰凝乳蛋白酶(EcoRI和SalI限制性位点)反应位点环。然后，这些肽编码序列作为SacI-SalI片段被移入p2JM103BBI表达载体中。
Comstatin(第一环)
CTAAACCCTGTTGCGATCAATGCGCATGTGTTGTTCAGGACTGGGGTCACCACCGTTGTCGCTGCAGCGATATGCGTCTG(SEQ ID NO：57)
和
AATTCAGACGCATATCGCTGCAGCGACAACGGTGGTGACCCCAGTCCTGAACAACACATGCGCATTGATCGCAACAGGGTTTAGAGCT(SEQ ID NO：58)
Comstatin(第二环)
CAAAAGCTGTATCTGCGTTGTTCAGGACTGGGGTCACCACCGTTGTTTTTGCG(SEQ ID NO：59)
和
TCGACGCAAAAACAACGGTGGTGACCCCAGTCCTGAACAACGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：60)
C2c(第一环)
CTAAACCCTGTTGCGATCAATGCAGCTGTGGTCGTAAAATCCCGATCCAGTGTCGCTGCAGCGATATGCGTCTG(SEQ ID NO：61)
和
AATTCAGACGCATATCGCTGCAGCGACACTGGATCGGGATTTTACGACCACAGCTGCATTGATCGCAACAGGGTTTAGAGCT(SEQ ID NO：62)
C3c(第一环)
CTAAACCCTGTTGCGATCAATGCGGTTGTGCTCGTTCTAACCTGGACGAATGTCGCTGCAGCGATATGCGTCTG(SEQ ID NO：63)
和
AATTCAGACGCATATCGCTGCAGCGACATTCGTCCAGGTTAGAACGAGCACAACCGCATTGATCGCAACAGGGTTTAGAGCT(SEQ ID NO：64)
C4c(第一环)
CTAAACCCTGTTGCGATCAATGCGGTTGTCAGCGTGCTCTGCCGATCCTGTGTCGCTGCAGCGATATGCGTCTG(SEQ ID NO：65)
和
AATTCAGACGCATATCGCTGCAGCGACACAGGATCGGCAGAGCACGCTGACAACCGCATTGATCGCAACAGGGTTTAGAGCT(SEQ ID NO：66)
C5c(第一环)
CTAAACCCTGTTGCGATCAATGCCAGTGTGGTCGTCTGCACATGAAAACCTGTCGCTGCAGCGATATGCGTCTG(SEQ ID NO：67)
和
AATTCAGACGCATATCGCTGCAGCGACAGGTTTTCATGTGCAGACGACCACACTGGCATTGATCGCAACAGGGTTTAGAGCT(SEQ ID NO：68)
Xa1(第二环)
AATTCCTGTCATAGTGCCTGCAAAAGCTGTATCTGCGCCCGTAGTTTGCCAGCTCAATGTTTTTGCG(SEQ ID NO：69)
和
TCGACGCAAAAACATTGAGCTGGCAAACTACGGGCGCAGATACAGCTTTTGCAGGCACTATGACAGG(SEQ ID NO：70)
hSCC1(第一环)
CTAAACCCTGTTGCGATCAATGCAACTGTACGTACTCAACCCCTCCACAGTGTCGCTGCAGCGATATGCGTCTG(SEQ ID NO：71)
和
AATTCAGACGCATATCGCTGCAGCGACACTGTGGAGGGGTTGAGTACGTACAGTTGCATTGATCGCAACAGGGTTTAGAGCT(SEQ ID NO：72)
下面提供了寡核苷酸引物对的DNA序列，该引物对用于利用QuikChange
II XL定点突变试剂盒(Stratagene)将肽序列引入胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶反应位点环。反应如制造商所概述进行，并描述在本实施例中。进行二十个循环，其中于68℃延伸6分钟，95℃下变性50s，以及在55℃下退火50s。在循环后，在68℃下进行最终的延伸20分钟。
1A(第二环)
CTGTATCTGCAAACGCTCAAAATCTCGTGGCTGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：73)
和
CGCAAAAACAGCCACGAGATTTTGAGCGTTTGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：74)
2B(第二环)
CTGTATCTGCTGGTATAATCAAATGACAACATGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：75)
和
CGCAAAAACATGTTGTCATTTGATTATACCAGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：76)
4A(第二环)
CTGTATCTGCCATCAACTTGGCCCGAATTCATGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：77)
和
CGCAAAAACATGAATTCGGGCCAAGTTGATGGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：78)
5A(第二环)
CTGTATCTGCCATCCGTGGGCACCGTATTCTTGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：79)
和
CGCAAAAACAAGAATACGGTGCCCACGGATGGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：80)
6-1A(第二环)
CTGTATCTGCAATCTTCATTATCTTCAACAGTGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：81)
和
CGCAAAAACACTGTTGAAGATAATGAAGATTGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：82)
7A(第二环)
CTGTATCTGCACACCGTCTCTTTATCGCCCGTGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：83)
和
CGCAAAAACACGGGCGATAAAGAGACGGTGTGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：84)
8B(第二环)
CTGTATCTGCCTTACAGATCAATCTAAACCGTGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：85)
和
CGCAAAAACACGGTTTAGATTGATCTGTAAGGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：86)
9A(第二环)
CTGTATCTGCGTTACAACATCAATGGGCATGTGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：87)
和
CGCAAAAACACATGCCCATTGATGTTGTAACGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：88)
10B(第二环)
CTGTATCTGCCGCGCATCACCGTTATGATTGGTGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：89)
和
CGCAAAAACACCAATCATACGGTGATGCGCGGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：90)
11-1A(第二环)
CTGTATCTGCTCAACACAAAAAATTCCGCAATGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：91)
和
CGCAAAAACATTGCGGAATTTTTTGTGTTGAGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ IDNO：92)
12B(第二环)
CTGTATCTGCACACAATTTCGCTCTGCAACATGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：93)
和
CGCAAAAACATGTTGCAGAGCGAAATTGTGTGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：94)
13A(第二环)
CTGTATCTGCCCGGATCATGTTCCGCATCTTTGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：95)
和
CGCAAAAACAAAGATGCGGAACATGATCCGGGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：96)
15-1A(第二环)
CTGTATCTGCTCAGGCTTTCCGCTTTCTACATGTTTTTGCGTCGACATCAC(SEQ ID NO：97)
和
CGCAAAAACATGTAGAAAGCGGAAAGCCTGAGCAGATACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：98)
1A6(第一环)
TCAATGCGCATGTGAAGAGATCTGGACTATGCTTTGCCGGTGTTCCGATATGCGTC(SEQ ID NO：99)
和
CGGAACACCGGCAAAGCATAGTCCAGATCTCTTCACATGCGCATTGATCGCAACAGG(SEQ ID NO：100)
1A6(第二环)
CAAAAGCTGTGCTTGTGAAGAGATCTGGACTATGCTTTGCTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：101)
和
ACGCAAAAGCAAAGCATAGTCCAGATCTCTTCACAAGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：102)
1C2(第一环)
TCAATGCGCATGTTGGGCCCTTACTGTCAAAACATGCCGGTGTTCCGATATGCGTC(SEQ ID NO：103)
和
CGGAACACCGGCATGTTTTGACAGTAAGGGCCCAACATGCGCATTGATCGCAACAGG(SEQ ID NO：104)
1C2(第二环)
CAAAAGCTGTGCTTGTTGGGCCCTTACTGTCAAAACATGCTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：105)
和
ACGCAAAAGCATGTTTTGACAGTAAGGGCCCAACAAGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：106)
2E2(第一环)
TCAATGCGCATGTCTTACAGTACTGTGGACTACATGCCGGTGTTCCGATATGCGTC(SEQ ID NO：107)
和
CGGAACACCGGCATGTAGTCCACAGTACTGTAAGACATGCGCATTGATCGCAACAGG(SEQ ID NO：108)
2E2(第二环)
CAAAAGCTGTGCTTGTCTTACAGTACTGTGGACTACATGCTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：109)
和
ACGCAAAAGCATGTAGTCCACAGTACTGTAAGACAAGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：110)
2E5(第一环)
TCAATGCGCATGTACTCTTTGGAACAGATCTCCTTGCCGGTGTTCCGATATGCGTC(SEQ IDNO：111)
和
CGGAACACCGGCAAGGAGATCTGTTCCAAAGAGTACATGCGCATTGATCGCAACAGG(SEQ ID NO：112)
2E5(第二环)
CAAAAGCTGTGCTTGTACTCTTTGGAATCGATCTCCTTGCTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：113)
和
ACGCAAAAGCAAGGAGATCGATTCCAAAGAGTACAAGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：114)
FGFns(第一环)
TCAATGCGCATGTACAAACATCGATTCTACTCCTTGCCGGTGTTCCGATATGCGTC(SEQ IDNO：115)
和
CGGAACACCGGCAAGGAGTAGAATCGATGTTTGTACATGCGCATTGATCGCAACAGG(SEQ ID NO：116)
FGFns(第二环)
CAAAAGCTGTGCTTGCACAAACATCGATTCTACTCCTTGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：117)
和
ACGCAAAAACAAGGAGTAGAATCGATGTTTGTGCAAGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：118)
FGFkr(第一环)
TCAATGCGCATGTACAAAAATCGATCGTACTCCTTGCCGGTGTTCCGATATGCGTC(SEQ IDNO：119)
和
CGGAACACCGGCAAGGAGTACGATCGATTTTTGTACATGCGCATTGATCGCAACAGG(SEQ ID NO：120)
FGFkr(第二环)
CAAAAGCTGTGCTTGCACAAAAATCGATCGTACTCCTTGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：121)
和
ACGCAAAAACAAGGAGTACGATCGATTTTTGTGCAAGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：122)
FGFh1(第一环)
TCAATGCGCATGTCACCTGCAGACAACTGAAACATGCCGGTGTTCCGATATGCGTC(SEQ ID NO：123)
和
CGGAACACCGGCATGTTTCAGTTGTCTGCAGGTGACATGCGCATTGATCGCAACAGG(SEQ ID NO：124)
FGFh1(第二环)
CAAAAGCTGTGCTTGCCACCTGCAGACAACTGAAACATGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：125)
和
ACGCAAAAACATGTTTCAGTTGTCTGCAGGTGGCAAGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：126)
FGFgy(第一环)
TCAATGCGCATGTGGCTACTTCATCCCATCGATTTGCCGGTGTTCCGATATGCGTC(SEQ ID NO：127)
和
CGGAACACCGGCAAATCGATGGGATGAAGTAGCCACATGCGCATTGATCGCAACAGG(SEQ ID NO：128)
FGFgy(第二环)
CAAAAGCTGTGCTTGCGGCTACTTCATCCCATCGATTTGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：129)
和
ACGCAAAAACAAATCGATGGGATGAAGTAGCCGCAAGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：130)
MM005(第一环)
TCAATGCGCATGTTTACGTATCCTTGCTAACAAATGCCGGTGTTCCGATATGCGTC(SEQ ID NO：131)
和
CGGAACACCGGCATTTGTTAGCAAGGATACGTAAACATGCGCATTGATCGCAACAGG(SEQ ID NO：132)
MM005(第二环)
CAAAAGCTGTGCTTGCTTACGTATCCTTGCTAACAAATGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：133)
和
ACGCAAAAACATTTGTTAGCAAGGATACGTAAGCAAGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：134)
MM007(第一环)
GCGATCAATGCGCCTGCAGAACTCAACCATATCCTTTATGTCGGTGTTCCGATATGCGTC(SEQ ID NO：135)
和
GGAACACCGACATAAAGGATATGGTTGAGTTCTGCAGGCGCATTGATCGCAACAGGGTTT(SEQ ID NO：136)
MM007(第二环)
CAAAAGCTGTGCCTGCAGAACACAACCTTACCCACTTTGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：137)
和
ACGCAAAAACAAAGTGGGTAAGGTTGTGTTCTGCAGGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：138)
MM009(第二环)
CAAAAGCTGTGCCTGCCTGTTAACACCTACTCTTAACTGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：139)
和
ACGCAAAAACAGTTAAGAGTAGGTGTTAACAGGCAGGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：140)
MM010(第一环)
TCAATGCGCATGCGCTCTTCCAACTCATTCTAACTGTCGGTGTTCCGATATGCGTCT(SEQ ID NO：141)
和
CGGAACACCGACAGTTAGAATGAGTTGGAAGAGCGCATGCGCATTGATCGCAACAGG(SEQ ID NO：142)
MM010(第二环)
CAAAAGCTGTGCCTGCGCGCTTCCTACACACTCTAACTGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：143)
和
ACGCAAAAACAGTTAGAGTGTGTAGGAAGCGCGCAGGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：144)
MM017(第二环)
CAAAAGCTGTGCCTGCCCTTTAGGCCTTTGCCCACCTTGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：145)
和
ACGCAAAAACAAGGTGGGCAAAGGCCTAAAGGGCAGGCACAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：146)
FGFps1(第二环)
AAGCTGTATCTGCTGGAACATCGATTCTACACCTTGTTTTTGC GTCGACATCACGG(SEQ ID NO：147)
和
ACGCAAAAACAAGGTGTAGAATCGATGTTCCAGCAGATACAGCTTTTGCATGCACT(SEQ ID NO：148)
FGFps2(第一环)
GCGATCAATGCATCTGTACTTGGATTGACAGTACTCCTTGTCGGTGTTCCGATATGCGTC(SEQ ID NO：149)
和
GGAACACCGACAAGGAGTACTGTCAATCCAAGTACAGATGCATTGATCGCAACAGGGTTT(SEQ ID NO：150)
FGFps2(第二环)
AAGCTGTATCTGCACATGGATCGATAGTACTCCTTGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：151)
和
ACGCAAAAACAAGGTGTAGAATCGATCCATGTGCAGATACAGCTTTTGCATGCACT(SEQ ID NO：152)
FGFpsB(第二环)
AAGCTGTATCTGTACATGGATCGATTGGACACCTTGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：153)
和
ACGCAAAAACAAGGTGTCCAATCGATCCATGTACAGATACAGCTTTTGCATGCACT(SEQ ID NO：154)
1A8(第二环)
CAAAAGCTGCGCATGTGTTACTACAGATTGGATCGAATGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：155)
和
ACGCAAAAACATTCGATCCAATCTGTAGTAACACATGCGCAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：156)
1A12(第二环)
CAAAAGCTGTGCCTGCCCAACACTTTGGACTCATATGTGTTTTTGCGTCGACATCACGGAC(SEQ ID NO：157)
和
ACGCAAAAACACATATGAGTCCAAAGTGTTGGGCAGGCACAGCTTTTGCATGCACTATGAC(SEQ ID NO：158)
1E11(第二环)
CAAAAGCTGCGCATGTTACTACTCTCAATTCCACCAATGTTTTTGCGTCGACATCACGG(SEQ ID NO：159)
和
ACGCAAAAACATTGGTGGAATTGAGAGTAGTAACATGCGCAGCTTTTGCATGCACTATG(SEQ ID NO：160)
TGFps1(第二环)
CAAAAGCTGTCTTTGTCCGGAAAACGATAACGTTTCTCCTTGTAATTGCGTCGACATCACGGACTTCTG(SEQ ID NO：161)
和
TGTCGACGCAATTACAAGGAGAAACGTTATCGTTTTCCGGACAAAGACAGCTTTTGCATGCACTATGAC(SEQ ID NO：162)
[0563a]下面提供了寡核苷酸对的DNA序列，该寡核苷酸对用于制备盒，以将肽序列引入p2JM103-lnk2-BBI表达载体的胰凝乳蛋白酶反应位点环。该盒被连接入所述载体中的SphI和SalI限制性位点。
MM021(第二环)
CAAAAGCTGTGCTTGTAAACACAACGTACGTCTTTTATGTTTTTGCG(SEQ IDNO：163)
和
TCGACGCAAAAACATAAAAGACGTACGTTGTGTTTACAAGCACAGCTTTTGCATG(SEQ ID NO：164)
VegT(第二环)
CAAATCTTGCGCGTGCACACTTTGGAAATCTTACTGGTGTTTTTGCG(SEQ IDNO：165)
和
TCGACGCAAAAACACCAGTAAGATTTCCAAAGTGTGCACGCGCAAGATTTGCATG(SEQ ID NO：166)
VegK(第二环)
CAAATCTTGCGCATGTAAATATTACCTTTACTGGTGGTGTTTTTGCG(SEQ IDNO：167)
和
TCGACGCAAAAACACCACCAGTAAAGGTAATATTTACATGCGCAAGATTTGCATG(SEQ ID NO：168)
VegKD(第二环)
CAAATCTTGCATCTGTAAATATGATCTTTACTGGTGGTGTTTTTGCG(SEQ IDNO：169)
和
TCGACGCAAAAACACCACCAGTAAAGATCATATTTACAGATGCAAGATTTGCATG(SEQ ID NO：170)
VegDK(第二环)
CAAATCTTGCATCTGTGATTATAAACTTTACTGGTGGTGTTTTTGCG(SEQ IDNO：171)
和
TCGACGCAAAAACACCACCAGTAAAGTTTATAATCACAGATGCAAGATTTGCATG(SEQ ID NO：172)
由半胱氨酸限制肽制成的文库是选择结合目标底物的肽的常见试剂(例如，商业可得的PhD-C7C Phage Display Peptide Library Kit；NEB)。BBI具有两个半胱氨酸限制活性位点环，其在结构上类似于在用于选择肽结合剂的各种方法中展示的肽环。因此，一旦半胱氨酸限制结合肽已被选择，则BBI适于用作在结合反应中呈递肽的支架。
通过使用DNA寡核苷酸盒，用肽序列(ACYNLYGWTC)(SEQ ID NO：43)置换胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶或两者的反应位点环，VegF结合肽CK37281(参见，例如于2004年11月8日提交的共同未决美国专利申请系列第10/984,270号，并入本文作为参考)被嫁接入BBI中。为了帮助该构建，通过QuikChange
定点突变，使用制造商(Stratagene)描述的方法，采用引物BowBeco-F和BowBeco-R，如上所示(0.5pmol的每一引物被用在QuikChange
反应中；在97℃初始变性3分钟的步骤之后，进行18个PCR循环：68℃12分钟，95℃下30秒，以及55℃1分钟，随后在68℃下进行最终的延伸反应15分钟)，EcoRI位点被引入胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性位点环之间的BBI基因(通过Operon Technologies定制合成，参见实施例16)的编码区。
为置换胰蛋白酶抑制肽环，两个DNA寡核苷酸(1BBCK81+和1BBCk81-)被退火并连接入SacI和EcoRI限制性位点。同样，为置换胰凝乳蛋白酶抑制肽环，EcoRI和SalI位点被用于插入通过退火寡核苷酸(2BBck81+和2BBck81-)制备的DNA盒。通过在胰蛋白酶环首先被肽(ACYNLYGWTC)(SEQ ID NO：43)置换之后在胰凝乳蛋白酶环中插入所述肽(使用寡核苷酸(2BBck81+和2BBck81-))，所述肽被嫁接入两个环中。在胰蛋白酶环(1BBIck81)中具有嫁接肽的BBI作为SacI-SphI片段被移入pJM103BBI表达载体中。在胰凝乳蛋白酶环(2BBIck81)或两个环(12BBIck81)中具有嫁接肽的BBI作为SacI-SalI片段被移入pJM103BBI中。通过DNA测序确认正确的序列(12BBIck81基因的序列示于图16中)。得到的载体pJM103-1BBIck81、pJM103-2BBIck81或pJM103-12BBIck81被用于转化枯草芽孢杆菌BG3934comK，而BCE融合蛋白的产生如上面的实施例16进行测定。
以～44 kDa跑胶的融合蛋白通过SDS-PAGE被检测为在无细胞发酵液中存在的主要蛋白。尽管在一些情况下，存在BBI部分的显著降解(可达50％)(特别是在MBD培养基中生长＞48h之后)，如在相应于BCE103催化核心、以～34kDa跑胶的显著蛋白条带的存在下所观察到的。在这些情况下，BCE103纤维素酶的滴度类似于融合到野生型BBI下(实施例16)所测定的滴度，但BBI的活性(用2BBIck81抑制胰蛋白酶或用1BBIck81抑制胰凝乳蛋白酶)通常小约两倍。
为减少生长期间BBI变体的蛋白水解降解(即，相比于融合蛋白，降低在SDS-PAGE凝胶上存在的BCE103纤维素酶核心的量)，具有九个蛋白酶基因缺失的枯草芽孢杆菌菌株BG6006(degUHy32、oppA、ΔspollE3501、ΔaprE、ΔnprE、Δepr、ΔispA、Δbpr、Δvpr ΔwprA、Δmpr-ybjF、ΔnprB、amyE：：xylRPxylAcomK-ermC)被用作表达宿主，并且生长温度(35℃)和通气(200rpm)降低。在这些变化下，在SDS-PAGE凝胶上观察到主要的融合蛋白条带(～44kDa)，其中在预期为BCE催化核心蛋白质的分子量处(～34kDa)存在不显著的条带。
除了上述的肽，当被取代入融合到BCE103纤维素酶的C端的BBI的胰蛋白酶和/或胰凝乳蛋白酶活性位点环中时，产生了许多其它半胱氨酸限制肽。具体的例子包括：
(1)设计或选择为补体拮抗剂的肽，被引入第一或第二反应位点环的compstatin(见，Sahu et al.，J.Immunol.，157：884-891，[1996])，C2c(第一环)，C3c(第一环)，C4c(第一环)和C5c(第一环)；或在B因子结合反应中选择的肽，1B、2B、4A、5A、6-1A、7A、8B、9A、10B、11-1A、12B、13A和15-1A(所有都在第二环中)；
(2)设计用于分别结合蛋白酶因子Xa或角质层胰凝乳蛋白酶Xa1(第二环)或hSCC1(第一环)的肽；
(3)在FGF5结合反应中选择的肽，1A6(第一或第二环)、1C2(第一或第二环)、2E2(第一或第二环)、2E5(第一、第二或两个环)、FGFns(第一或第二环)、FGFkr(第一或第二环)、FGFhl(第一或第二环)、FGFgy(第一或第二环)、MM005(第一或第二环)、MM007(第一、第二或两个环)、MM009(第二环)、MM010(第一、第二或两个环)、MM017(第二环)、FGFps1(第二环)、FGFps2(第一、第二或两个环)、和FGFpsB(第二环)；和
(4)在TGFβ-1结合反应中选择的肽，1A8(第二环)、1A12(第二环)、1E11(第二环)、TGFps1(第二环)、和MM021(第二环)；
(5)在VEGF结合反应中选择的肽，VegK(第二环)、VegT(第二环)、VegKD(第二环)和VegDK(第二环)。
上面提供了用于将这些肽引入胰蛋白酶(第一环)或胰凝乳蛋白酶(第二环)反应位点环的寡核苷酸，以及用于将这些肽嫁接入BBI的方法。在所有情况下，融合蛋白被产生，如通过SDS-PAGE凝胶所测定。然而，在一些取代肽的情况下，通过降低蛋白水解降解，完整融合蛋白的量被增加，如上对于嫁接(ACYNLYGWTC)(SEQ ID NO：43)肽所述。
实施例18
通过硫醇还原/氧化剂激活BBI
在生长后，BBI的活性(通过胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶的抑制)通常比从在无细胞上清液中测量的BCE103纤维素酶的活性所预期的活性低5-20倍(在融合蛋白中两个分子应该以1∶1的摩尔比存在)。通过加入bME，通常在接种约14小时后以1-4mM的浓度加入到MBD生长培养基中，可以常规获得在BCE103-BBI融合蛋白中BBI活性的增加(通过胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶的抑制进行测量)。在融合蛋白中，BBI的胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶抑制活性也低于当结合肽(例如，VegF结合CK37281)分别取代胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶反应位点环时所期望的值。和野生型BBI的情况一样，通过用bME处理，可以增加抑制活性。意想不到地，在这些试验中，在生长期间，其它硫醇还原剂(例如，半胱氨酸、还原型谷胱甘肽、DL-二硫苏糖醇和三[2-羧乙基]膦)对BBI的激活具有小的或可忽略的效应。同样，向生长培养基(例如，异亮氨酸、大豆油、Tween-80)加入抗氧化剂(例如，抗坏血酸或DL-α-生育酚乙酸酯)或其它佐剂、或于30℃生长，不显著提高BCE103：BBI活性比。
具体而言，为确定生长期间的BBI激活，在37℃下，在250ml摇瓶中，在40ml MBD培养基中培养用p2JM103-E3-2BBIck81(见，下面的实施例19)转化的枯草杆菌BG6006的培养物13小时。然后，在图17中的图上所示的硫醇还原剂被加入，并且在生长62h之后收集细胞上清。试剂2-巯基乙醇(BME)、半胱氨酸(Cys)、还原型谷胱甘肽(Glut)和DL-二硫苏糖醇(DTT)被加入到生长培养基中，达到图17中提供的图上所示的最终浓度。浓度5mM的β ME可以产生更好的BCE103∶BBI活性比，但通常导致BCE103和BBI的滴度总体下降(见，图17)，原因至少部分在于通过加入的试剂导致细菌生长下降。使用在实施例16中描述的测定，确定BCE103和BBI的滴度。
在通过Q-Sepharose离子交换层析进行融合蛋白(例如，BCE-lnk2-2BBIck81；见，下面的实施例19)的部分纯化之后，也实现BBI活化。
从获自摇瓶或发酵罐各批次的无细胞发酵液纯化融合蛋白。过滤发酵液，在水中稀释5至10倍，并调节pH至pH7.5-8.0。稀释的样品被上样到用Q-Sepharose树脂(GE Healthcare)填充的柱上。用50mM Tris pH7.5洗涤该柱，然后在含有300mMNaCl的相同缓冲液中再次洗涤。在含有700mMNaCl的相同缓冲液中洗脱融合蛋白。
为了激活BBI，在测定缓冲液(Assay Buffer)中以十倍稀释富集的融合蛋白级分，然后在室温下，在搅拌盘或振荡平台上，在持续混合下，用2mM βME和0.2mM氧化型谷胱甘肽(GSSG)处理约24h。BBI通常可以被活化到基于测量的BCE103纤维素酶浓度所期望的胰蛋白酶抑制活性的约70-100％。尽管上面概述的活化方法通常得到最好的结果，但是，在一些情况下，为了最大化给定样品的活化，在96孔板中进行筛选，以确定最优条件。最初，所筛选的典型条件为测定缓冲液(例如，2-50倍稀释系列)中的稀释、βME浓度(例如，在0.5-5mM之间的系列)和氧化型谷胱甘肽浓度(例如0mM，然后是1/20至1/2的一系列βME浓度)。
图18示出了融合蛋白BCE-lnk2-2BBIck81的活化。在该具体例子中，通过Q-Sepharose纯化的融合蛋白以1∶10稀释在含有0.005％TWEEN
-80的Dulbecco’s PBS(Mediatech)中。β巯基乙醇被加入，达到3mM的最终浓度，并在室温下在振荡器中温育过夜。在室温下，样品在磁力搅拌盘上剧烈搅拌下进一步温育约60h。通过纤维素酶测定和胰蛋白酶抑制测定，分别测定BCE103和2BBIck81的滴度(在βME处理之前和之后)。
在一些实施方式中，例如激活来自大体积发酵的无细胞发酵液中的BBI或其变体的实施方式中，降低激活反应中的稀释度和βME浓度是期望的。这可以通过使用更高浓度的缓冲液(500mM Tris pH8.6)或改成两性离子缓冲液例如CHES(还有，CAPS、Tricine、TAPS和其它合适的两性离子缓冲液)进行。例如，无细胞发酵液(或通过离子交换层析纯化的融合蛋白级分)以1∶1稀释在含有0.005％TWEEN
-80的375mM CHES pH8.6中，然后用1mM β ME和10mM Na2SO3激活，并在室温下搅拌温育约24h。通过该方法，BBI或其变体，作为BCE103纤维素酶融合蛋白，被常规激活，达到70-100％的期望值(基于BCE103纤维素酶活性)。
在一些其它实施方式中，在存在细胞的全发酵肉汤中激活BBI或其变体是期望的。例如，在一些实施方式中，全发酵肉汤以1∶1稀释在含有0.05％TWEEN
-80的250mM甘氨酸pH9.0中，然后，用2mM βME和10mM Na2SO3(或单独用10mM Na2S2O4)激活，并在室温下搅拌温育约24h。通过该方法，BBI或其变体，作为BCE103纤维素酶融合蛋白，被常规激活，达到30-100％的期望值(基于BCE103纤维素酶活性)。
实施例19
通过切割BCE103-BBI融合蛋白释放游离的BBI/变体
本实施例描述了被开发用于通过切割BCE103-BBI融合蛋白释放游离的BBI或其变体的试验。
下面提供了DNA寡核苷酸对的序列，其被退火并连接入pJM103-BBI的BamHI和SacI位点，以在培养生长期间在BCE103催化域和BBI之间产生潜在切割位点：
BCEsubBBI(枯草杆菌蛋白酶型敏感肽序列)
GATCCAGGTGGAGCTGCTTTAGTTGACGATGAGAGCT(SEQ ID NO：173)
和
CTCATCGTCAACTAAAGCAGCTCCACCTG(SEQ ID NO：174)
BCEcbdLBBI(第一CBD的一部分)
GATCCAGGTGAACCTGACCCAACTCCTCCATCTGATCCTGGAGAATACCCAGCTTGGGACGATGAGAGCT(SEQ ID NO：175)
和
CTCATCGTCCCAAGCTGGGTATTCTCCAGGATCAGATGGAGGAGTTGGGTCAGGTTCACCTG(SEQ ID NO：176)
BCEproBBI(BBI的完整前肽)
GATCCGGCGAACCTGCGTCTGTCTAAGCTTGGCCTGCTTATGAAATCAGACCATCAGCACAGCAATGACGATGAGAGCT(SEQ ID NO：177)
和
CTCATCGTCATTGCTGTGCTGATGGTCTGATTTCATAAGCAGGCCAAGCTTAGACAGACGCAGGTTCGCCG(SEQ ID NO：178)
BCEshortproBBI(BBI前肽的C端部分)
GATCCAAAATCAGACCATCAGCACAGCAATGACGATGAGAGCT(SEQ ID NO：179)
和
CTCATCGTCATTGCTGTGCTGATGGTCTGATTTTG(SEQ ID NO：180)
下面提供了DNA寡核苷酸对的序列，该寡核苷酸对被退火并连接入p2JM103-BBI的BamHI和SacI位点中，以将BBI融合到BCE103纤维素酶的第二CBD连接子。
BCEcbdDBBI
GATCCAGGAGAACCGGACCCAACGCCCCCAAGTGATCCAGGAGAGTATCCAGCATGGGATTCAAATCAAATTTACACAAATGAAATTGTGTATCATAACGGTCAGTTATGGCAAGCGAAATGGTGGACACAAAATCAAGAGCCAGGTGACCCATACGGTCCGTGGGAACCACTCAAATCTGACCCAGATTCAGACGATGAGAGCT(SEQ ID NO：181)
和
CTCATCGTCTGAATCTGGGTCAGATTTGAGTGGTTCCCACGGACCGTATGGGTCACCTGGCTCTTGATTTTGTGTCCACCATTTCGCTTGCCATAACTGACCGTTATGATACACAATTTCATTTGTGTAAATTTGATTTGAATCCCATGCTGGATACTCTCCTGGATCACTTGGGGGCGTTGGGTCCGGTTCTCCTG(SEQ ID NO：182)
下面提供了在天冬氨酸和脯氨酸残基之间易受酸切割的肽序列。连接子1-WGDPHY(SEQ ID NO：183)(Lidell et al.、J.Biol.Chem.278：13944-51[2003])
连接子2-DNNDPI(SEQ ID NO：184)(Segalas et al.、FEBS Lett.、371：171-175[1995])
连接子3-VVADPN(SEQ ID NO：185)(Kemperman et al、Appl.Env.Microbiol.、69：1589-1597[2003])
下面提供了寡核苷酸引物，其用于通过QuikChange
定点突变将BssHII位点引入pJM103BBI。
BCEbss-F
5’-TGGCGTTCAGCAACATGAGCGCGCAGGCTGATGATTA(SEQ ID NO：186)
BCEbss-R
5’-TAATCATCAGCCTGCGCGCTCATGTTGCTGAACGCCA(SEQ ID NO：187)
下面提供了DNA寡核苷酸的序列，该DNA寡核苷酸被退火成盒(SalI-HindIII)，以在BBI的终止密码子后引入HindIII和XhoI位点，以在LAT后引入PacI位点，以及除去原始的HindIII位点。
BCEterm+
5’-GACATCACGGACTTCTGCTATGAGCCATGTAAACCAAGCGAGGACGATAAAGAGAACTAAAAGCTTAACTCGAGGTTAACAGAGGACGGATTTCCTGAAGGAAATCCGTTTTTTTATTTTTAATTAAG(SEQ ID NO：188)
BCEterm-
5’-AGCTCTTAATTAAAAATAAAAAAACGGATTTCCTTCAGGAAATCCGTCCTCTGTTAACCTCGAGTTAAGCTTTTAGTTCTCTTTATCGTCCTCGCTTGGTTTACATGGCTCATAGCAGAAGTCCGTGATG(SEQ ID NO：189)
下面提供了PCR引物，其用于产生上面提供的酸不稳定连接子(即，连接子1、连接子2和连接子3)，所述连接子插入在BCE103催化域和BBI之间。
BCE103coreBssHII_FW
5’-CAGCAACATGAGCGCGCAGGCTG(SEQ ID NO：190)
连接子WGDPHY_RV
5’-ATCGTCTGGATCCGGATAGTGGGGGTCTCCCCAAGATGCTGATTCTCTTATTTTTTCCC(SEQ ID NO：191)
连接子DNNDPI_RV
5’-ATCGTCTGGATCCGGTATGGGATCATTGTTGTCAGATGCTGATTCTCTTATTTTTTCCC(SEQ ID NO：192)
连接子VVADPN_RV
5’-ATCGTCTGGATCCGGGTTGGGATCTGCAACTACAGATGCTGATTCTCTTATTTTTTCCC(SEQ ID NO：193)
PCR引物，其用于产生插入第一CBD连接子中的上面所提供的酸不稳定连接子(即，连接子1、连接子2和连接子3)。
BCE103corePstI_FW
GCATAAGGATGAGTCATCTGCAGCG(SEQ ID NO：194)
LplusWGDPHY_RV
5’-ATCGTCTGGATCCGGATAGTGGGGGTCTCCCCACGGTTCTCCTGGATCAGATGGCGG(SEQ ID NO：195)
LplusDNNDPI_RV
5’-ATCGTCTGGATCCGGTATGGGATCATTGTTGTCCGGTTCTCCTGGATCAGATGGCGG(SEQ ID NO：196)
LplusVVADPN_RV
5’-ATCGTCTGGATCCGGGTTGGGATCTGCAACTACCGGTTCTCCTGGATCAGATGGCGG(SEQ ID NO：197)
下面提供了BCE103催化域和BBI之间插入的酸不稳定连接子的蛋白序列。酸不稳定连接子以粗体示出，而来自第一CBD域的序列加下划线。
连接子1
BCE-WGDPHY-PDP-BBI(SEQ ID NO：198)
连接子2
BCE-DNNDPI-PDP-BBI(SEQ ID NO：199)
连接子3
BCE-VVADPN-PDP-BBI(SEQ ID NO：200)
LinkerPlus 1
BCE-IPPSDPTPPSDPGEP-WGDPHY-PDP-BBI(SEQ ID NO：201)
LinkerPlus 2
BCE-IPPSDPTPPSDPGEP-DNNDPI-PDP-BBI(SEQ ID NO：202)
LinkerPlus 3
BCE-IPPSDPTPPSDPGEP-VVADPN-PDP-BBI(SEQ ID NO：203)
下面提供了DNA寡核苷酸对的序列，其被退火并连接入pJM103-BBI的BamHI和SacI位点中，以在纯化过程期间在BCE103催化域和BBI之间产生潜在切割位点。
BCEentBBI(肠肽酶切割位点)
GATCCAGGTGGAGACGACGATGACAAAGACGATGAGAGCT(SEQ ID NO：204)
和
CTCATCGTCTTTGTCATCGTCGTCTCCACCTG(SEQ ID NO：205)
BCEgenen1BBI(Genenase I切割位点)
GATCCAGGTGCTGCTCATTACGACGATGAGAGCT(SEQ ID NO：206)
和
CTCATCGTCGTAATGAGCAGCACCTG(SEQ ID NO：207)
下面提供了DNA寡核苷酸对的序列，其被退火并连接入pJM103-lnk2-1BBIck81的BamHI和SacI位点中，以在纯化过程期间在BCE103催化域和BBI之间产生潜在切割位点。
BCEfurinBBI(弗林蛋白酶/Blisterase切割位点)
GATCCACGTGCTAAAAGAGACGATGAGAGCT(SEQ ID NO：208)
和
CTCATCGTCTCTTTTAGCACGTG(SEQ ID NO：209)
BCEgenen2BBI(Genenase I切割位点)
GATCCAGGCGCTGCACACTACAACGACGATGAGAGCT(SEQ ID NO：210)
和
CTCATCGTCGTTGTAGTGTGCAGCGCCTG(SEQ ID NO：211)
BCEfleBBI(Mpr切割位点)
GATCCATTCCTTGAAGACGATGAGAGCT(SEQ ID NO：212)
和
CTCATCGTCTTCAAGGAATG(SEQ ID NO：213)
下面提供了寡核苷酸引物对的序列，其用于通过QuikChange定点突变(Stratagene)将E和E3连接子引入连接子2。
BCE-Elnk-BBI(Mpr切割位点)
CCCATACCGGAGCCAGACGATGAGAGCTC(SEQ ID NO：214)
和
CATCGTCTGGCTCCGGTATGGGATCATTGTTG(SEQ ID NO：215)
在BCE103催化域和BBI之间的E3连接子的蛋白序列为DNNDPIPEPDDESFNMPIPEP(SEQ ID NO：216)。在该序列中，E连接子加下划线，而通过在大肠杆菌中错误重组产生的序列以粗体示出。Mpr(或V8蛋白酶)所致的切割可以在E3连接子中存在的三个谷氨酸的任何一个之后发生。因此，结构是BCE-(SEQ ID NO：216)-BBI。
下面提供了DNA寡核苷酸对的序列，其被退火并连接入p2JM103-lnk2-2BBIck81的BamHI和SacI位点中，以在纯化过程期间在BCE103催化域和BBI之间产生潜在的Genenase I切割位点。
BCEgenen3BBI
GATCCAGGCGCTGCACACTACAAATCAGACCATCAGCACAGCAATGACGATGAGAGCT(SEQ ID NO：217)
和
CTCATCGTCATTGCTGTGCTGATGGTCTGATTTGTAGTGTGCAGCGCCTG(SEQ ID NO：218)
BCEgenen4BBI
GATCCAGGCGCTGCACACTACGTAGAATTTCAAGACGATGAGAGCT(SEQ IDNO：219)
和
CTCATCGTCTTGAAATTCTACGTAGTGTGCAGCGCCTG(SEQ ID NO：220)
插入BCE103催化域和BBI之间的Genenase I敏感切割位点(也是酸和Mpr敏感的)的蛋白序列为DNNDPIPDPGAAHYVEFQ(SEQ ID NO：221)。Genenase I位点(Gen4连接子)为粗体(切割发生在酪氨酸和缬氨酸之间)(NEB)，而连接子2加下划线。通过Mpr的切割也可以发生在紧跟Gen4连接子中的缬氨酸的谷氨酸之后。此处所使用的序列是BCE-SEQ ID NO：221)-BBI。
下面示出了BCE103-lnk2-2BBIck81融合蛋白中的切割位点。BCE103催化域的C端七个氨基酸(加下划线)、连接子2序列(粗体)和2BBIck81序列被示出。酸/热不稳定Asp-Pro键用实心箭头示出，而在谷氨酸之后的Mpr敏感键用线箭头示出。
为了分离游离BBI或其变体，BBI部分需要从BCE103-BBI融合蛋白切掉。在一些实施方式中，这在生长期间通过由枯草芽孢杆菌内在产生的蛋白酶完成。在一些可选的实施方式中，该切割发生在生长之后纯化过程期间(例如通过酸/热或蛋白水解切割)。设计在生长期间潜在易受切割的连接子(见上，sub、cbdL、pro、shortpro和cbdD)并以BamHI-SacI盒克隆入pJM103BBI或p2JM103BBI表达载体。如实施例16所述，在SDS-PAGE凝胶上分析融合蛋白对BCE103催化域的产生。
对于除了前体连接子(pro linker)之外的所有这些连接子，几乎观察不到融合蛋白切割，所述前体连接子几乎被完全切割，以至于在凝胶上观察到极少的完整融合蛋白，尽管存在相应于BCE103催化核心的大条带。不幸地，在生长期间该切割产生在无细胞上清中测量的、可忽略的BBI活性，并且在SDS-PAGE凝胶上没有BBI条带可以被鉴别出。尽管本发明不意图受限于任何特定的机理或理论，但是有可能的是，无活性形式的BBI对于蛋白水解降解特别敏感。因此，在活化之后的纯化过程期间的切割通常是优选的。
在一些实施方式中，在天冬氨酸和脯氨酸残基之间的键在酸性pH下，通过热处理进行切割，如本领域已知的(参见，例如Landon，Meth.Enzymol.，47：145-149[1977])。BCE103纤维素酶中的第一CBD连接子具有三个Asp-Pro二肽序列(见，图14)，其具有通过酸/热处理被切割的潜力。然而，发现在这些位点上通过酸/热处理进行切割是低效率的。对于酸/热特别不稳定的蛋白序列已经在文献中描述，三个这样的序列为WGDPHY(SEQ ID NO：183)、DNNDPI(SEQ ID NO：184)和VVADPN(SEQ ID NO：185)(即，连接子1、2和3)。
在这些酸不稳定连接子被引入BCE103-BBI表达载体pJM103BBI之前，通过QuikChange
XL(Stratagene)突变(使用制造商的方法；并且被描述在上面的实施例17中，除了使用8分钟延伸和1分钟变性步骤)，采用寡核苷酸引物BCEbss-F和BCEbss-R(上面提供)，BssHII位点被引入aprE信号序列编码区。然后，通过将寡核苷酸盒(BCEterm+和BCEterm-；上面提供)插入SalI和初始的HindIII位点，HindIII和XhoI位点被插入在LAT终止子之前(在BBI终止密码子之后)，而PacI位点被加在终止子之后(LAT终止子后的初始HindIII位点被除去)。该新载体被称为“p2JM103BBI”。
使用正向引物BCE103coreBssHII_FW与每一个反向引物，连接子WGDPHY_RV(SEQ ID NO：191)、连接子DNNDPI_RV(SEQ ID NO：192)或连接子DNNDPI_RV(SEQ ID NO：192)以及p2JM103BBI作为模板，通过PCR产生酸不稳定连接子片段(见，例如，实施例16的PCR步骤)。用BamHI和PstI消化970bp的PCR片段，编码该酸不稳定连接子片段的154bp片段在电泳后从琼脂糖凝胶分离，并连接入用BamHI和PstI消化的p2JM103载体，该载体也已经从凝胶纯化。通过DNA测序，验证最终表达载体p2JM1031nk1-BBI、p2JM1031nk2-BBI和p2JM1031nk3-BBI中的连接子序列。
用所述质粒转化感受态枯草芽孢杆菌菌株BG3934comK或BG6006，在5μg/ml氯霉素LA板上选择克隆，并扩大到25μg/ml氯霉素，如实施例16所述。
类似地，酸不稳定连接子被插入第一CBD连接子中。具体而言，使用正向引物BCE103corePstI_FW(SEQ ID NO：194)，与反向引物LplusWGDPHY_RV(SEQ ID NO：195)、LplusDNNDPI_RV(SEQ ID NO：196)或LplusVVADPN_RV(SEQD NO：197)，以p2JM103BBI作为模板，产生PCR片段。用BamHI和PstI消化约150bp的PCR片段，纯化并连接到用BamHI和PstI消化的p2JM103BBI载体。通过DNA测序，验证正确的序列，而质粒p2JM103pllnk1-BBI、p2JM103pllnk2-BBI和p2JM103pllnk3-BBI被用于转化枯草芽孢杆菌菌株，如上所述。
在MBD培养基中生长之后，通过离子交换层析纯化融合蛋白，基本上如上面所述(见，实施例17)。通过在10％蚁酸中于55℃处理16h，切割融合蛋白。BCE103催化结构域在酸处理期间沉淀，并通过离心除去。上清中的游离BBI在SpeedVac上干燥过夜。在上样到SDS-PAGE凝胶之前，样品被悬浮在50mM Tris pH8中。通过分析蛋白质染色的SDS-PAGE凝胶，观察到在BCE103催化域和BBI之间插入连接子2的融合蛋白中，酸切割有效得多(BCE-DNNDPI-PDP-BBI；SEQID NO：199)。发现于75℃下，该连接子在20mM甘氨酸pH2中在几个小时内被切割。
在可选的实施方式中，在纯化过程期间，通过用蛋白酶处理，切割融合蛋白。连接子被设计为含有谷氨酸特异性蛋白酶(例如，Mpr或V8蛋白酶)、弗林蛋白酶/Blisterase、genenase I和肠肽酶(肠激酶)的切割位点。使用BamHI和SacI位点，这些连接子作为寡核苷酸盒(见上，用于所述序列)被引入表达载体的BCE103催化核心和BBI之间(参见，图14)。在原始表达载体(pJM103BBI)的编码区中，在第一CBD域以及在BBI中的第三个残基处存在谷氨酸残基(见，图14)，其被预期将易于被谷氨酸特异性蛋白酶例如枯草杆菌Mpr(BsMpr)或V8蛋白酶切割。然而，发现BsMpr和V8蛋白酶在这些位点上都不非常有效地切割BCE-BBI融合蛋白。因此，设计易于被这些蛋白酶切割的其它连接子是必要的。
测试上述六个酸不稳定连接子被BsMpr切割的情况。在室温下，通过用16μg BsMpr处理16h，切割这些融合蛋白。在切割后，通过加入10％蚁酸，沉淀BCE催化域，并通过离心除去。上清中的游离BBI在SpeedVac上干燥过夜。在上样到SDS-PAGE之前，样品被悬浮在50mM Tris pH8中。类似于酸切割，比起任何其它连接子，BCE-DNNDPI-PDP-BBI(连接子2；SEQ ID NO：199)融合蛋白被BsMpr更加有效地切割。因此，通过酸/热处理或用谷氨酸特异性蛋白酶例如BsMpr蛋白水解消化，发现BBI及其变体都有效地从BCE-DNNDPI-PDP-BBI(SEQ IDNO：199)融合蛋白释放。测试了若干个设计用于通过Mpr切割的其它连接子(例如，E、E3连接子和fle，如上提供)，但它们中没有一个相对于连接子2具有任何优势(在用设计来构建E连接子的QuikChange
定点突变反应物转化之后，通过在大肠杆菌中错误重组，产生E3连接子)。如上所示，在连接子2中存在两个酸/热不稳定切割位点，以及三个对Mpr切割敏感的位点。
设计用于通过弗林蛋白酶或Blisterase(EEB)(BCEfurinBBI)、或肠肽酶(肠激酶，NEB)(BCEentBBI)进行切割的连接子被测试，但这些序列中没有一个能够被合适的蛋白酶有效切割。还设计了四个连接子(BCEgenen1BBI、BCEgenen2BBI、BCEgenen3BBI和BCEgenen4BBI)，并测试通过genenase I(NEB)的切割。仅在具有Gen4连接子(BCEgenen4BBI)的情况下，观察到融合蛋白的有效切割。还发现BsMpr有效地切割Gen4连接子。
在激活纯化的BCE-lnk2-2BBIck81融合蛋白之后，通过BsMpr的切割并不完全，如SDS-PAGE凝胶所判断。然而，发现：通过使用分离自地衣芽孢杆菌的Mpr蛋白酶(BlMpr)，在激活具有连接子2(或Gen4连接子)的BCE-BBI融合蛋白之后可以进行完全切割。尽管本发明不意图受限于任何特定的机理，在成熟BBI中第三个氨基酸之后的切割似乎对BlMpr更敏感，而在BBI的C端的第六个氨基酸之后的切割对BsMpr切割更敏感。
在一些实施方式中，在切割后，通过如上所述的选择性酸沉淀(pH3或更低)BCE103催化域、离子交换层析(见，实施例20)、或通过在无水胰蛋白酶-琼脂糖(Sigma)柱上选择性结合BBI，BBI被从BCE103催化域纯化出，所述柱在50mMTris pH8.0中上样，用含150mM NaCl的50mM Tris pH8.0洗涤，然后用含有300mM NaCl的50mM甘氨酸pH2.2洗脱结合的BBI。
实施例20
BBIck81结合VegF
在本实施例中，描述了实施用于评价BBIck81结合到VegF的试验。如实施例17所述，在枯草芽孢杆菌中产生BCE103-lnk2-2BBIck81融合蛋白。纯化融合蛋白，并通过用βME和氧化型谷胱甘肽处理，增加BBI胰蛋白酶抑制活性，如实施例18所述。通过BsMpr蛋白酶切割融合蛋白(见，实施例19)，并使用Q-Sepharose柱，通过离子交换层析，从BCE103催化域纯化游离的2BBIck81。
简而言之，在切割之后，将切割样品的pH调节至5.5，然后，样品被上样到柱上(用25mM MES pH5.5平衡)。使用25mM乙酸钠pH5.0，通过该柱，洗涤游离2BBIck81，而BCE103催化核心保持结合到树脂上。通过超滤，浓缩2BBIck81级份，并使用基于电致化学发光(ECL)的结合测定(BioVeris)进行分析。如制造商(BioVeris)所描述，用电致化学发光染料和生物素分别标记抗VegF抗体(Santa Cruz)和VegF(PeproTech)。所有材料都在补充有0.1％TWEEN-80的Dulbecco’s PBS(Mediatech)中。在结合测定中检测初始稀释系列的抗VegF抗体(125、250和500ng/ml)和VegF(100、150、200和250ng/ml)，以测定每一个将得到显著ECL信号的浓度。
对于检测2BBIck81结合，在室温下，摇动温育50μL 500ng/ml ECL标记的抗VegF抗体、50μL 250ng/ml生物素化VegF和100μL 2BBIck81(12.5、15、31.25、62.5、125、250或500ng/ml的系列) 2小时。然后，加入50μL 0.2mg/ml链霉抗生物素蛋白包被珠，并且在室温下温育该反应30分钟。如制造商(BioVeris)所述，使用BioVeris M8/384Analyzer，测量ECL信号。如图19所示，ECL信号随着浓度增加的2BBIck81取代更多的标记抗VegF抗体而降低，所述标记抗VegF抗体结合VegF，所述VegF附着于磁珠上。
因此，当嫁接到BBI的胰凝乳蛋白酶抑制环(2BBIck81)时，CK37281肽与抗VegF抗体在微摩尔浓度下竞争结合VegF。事实上，2BBIck81比合成的CK37281肽本身更好地竞争VegF结合(见，图19)。在BioVeris测定中，插入胰蛋白酶抑制环1BBIck81的CK37281肽也与抗VegF抗体竞争。因此，BBI可用作支架的一部分，以呈递通过各种筛选方法选择的活性结合肽。
实施例21
可选的融合伴侣用于产生2BBIck81
在本实施例中，描述了实施用于评价可选的融合伙伴的试验。下面提供了用于从pET-40b(+)扩增dsbC基因(大肠杆菌)的寡核苷酸引物的DNA序列。这些引物在5’端产生BssHII位点，在3’端产生BamHI，用于克隆入p2JM103-Gen4-2BBIck81。
DsbCBBI-F
AACATGAGCGCGCAGGCTGATGACGCGGCAATTCAACAAACGTTAG(SEQ IDNO：223)
DsbCBBI-R
TCGTCTGGATCCGGTATGGGATCATTGTTGTCACCAGAACCACTAGTTGATCCTTTACCGCTGGTCATTTTTTGGTG(SEQ ID NO：224)
下面提供了寡核苷酸的DNA序列，这些寡核苷酸被一起退火，以制备表达盒(Alw44I-BamHI)，用于利用连接子2将门多萨假单胞菌(P.mendocina)角质酶基因融合到BBI。
CutinaseBBI+
TGCACTTCTCTGCTTTGGTCTGTTGAACGCAGAGGTCTTGACAACAATGATCCTATTCCG(SEQ ID NO：225)
CutinaseBBI-
GATCCGGAATAGGATCATTGTTGTCAAGACCTCTGCGTTCAACAGACCAAAGCAGAGAAG(SEQ ID NO：226)
因为BBI部分具有七个二硫键，可以预期使用BCE103纤维素酶催化域之外的融合蛋白将获得较高滴度的活性BBI。例如，在一些实施方式中，组分例如硫醇-二硫键氧还酶和/或蛋白质二硫键异构酶可用作融合蛋白，以帮助产生正确折叠的BBI部分。在该实施方式中，在大多数情况下，不需要另外的活化步骤。在另外的实施方式中，在枯草芽孢杆菌中高滴度产生的其它蛋白也可用作融合伴侣。例如，来自真菌特异腐质霉(Humicola insolens)的热稳定性蛋白质二硫键异构酶(hiPDI)已经被用作融合伴侣，以在短芽孢杆菌中产生免疫球蛋白G(2个二硫键)的轻链(见，Kajino et al.、 Appl.Env.Microbiol.、66：638-642[2000])。
为确定对于BBI的产生，hiPDI是否可能是比BCE103更好的融合伴侣，合成该hiPDI基因(DNA2.0)，并作为BssHII-SacI片段克隆入表达载体p2JM103-lnk2-2BBIck81(见，实施例19)。在设计该合成基因中，除了在限制性位点被引入或缺失的情况下，选择在高表达的枯草芽孢杆菌基因中高频出现的密码子。在最终的构建物中，成熟hiPDI基因的N端被融合到AprE信号序列，而C端被融合到含有肠肽酶切割位点的连接子(ajino et al.、Appl.Env.Microbiol.、66：638-642[2000])，其再被融合到2BBIck81(见，图20)。该表达载体p2JM-PDI-EK-2BBIck81被用于转化枯草芽孢杆菌BG6006，并且在MBD培养基中测定融合蛋白的产生(如实施例16所述)，其中在接种14小时后添加或不添加2mM βME。
如SDS-PAGE凝胶电泳所测定，PDI-2BBIck81融合蛋白的产生通常稍微低于在相同的条件下生长的BCE-2BBck81。从PDI-2BBIck81无细胞上清测量的BBI滴度(胰蛋白酶抑制)通常也小于BCE-2BBIck81融合蛋白。和融合到BCE103的情况一样，当融合到PDI时测量的BBI活性当在2mM βME中生长时更高，并且当在无βME培养基中生长时通过在生长之后将βME加到无细胞上清中，BBI活性被增加(如实施例18所描述)。因此，PDI的硫醇-二硫键氧还酶活性似乎不显著增加融合蛋白中活性2BBIck81的滴度，或消除激活BBI分子的需求。
为了增加融合蛋白的还原电位——其被考虑用于在生长期间增加BBI滴度，来自大肠杆菌的DsbC被用作2BBIck81的融合伴侣。如制造商(Stratagene)所述使用Herculase Enhanced DNA聚合酶，通过PCR，使用DsbCBBI-F和DsbCBBI-R作为引物(上面所示序列)以及pET-40b(+)(Novagen)作为模板，扩增dsbC基因。分离的PCR片段以BssHII-BamHI片段被克隆入载体p2JM103-Gen4-2BBIck81中(见，实施例19)。通过DNA测序，验证融合基因的正确序列。在这种情况下，DsbC-2BBIck81融合蛋白的滴度显著低于BCE-2BBIck81融合蛋白，如在SDS-PAGE凝胶上所判断，并且通过胰蛋白酶抑制作用所测量的活性2BBIck81的滴度也小得多。
在枯草芽孢杆菌中以高滴度产生的其它蛋白质可用作BBI产生的融合伴侣。一个这样的蛋白是来自门多萨假单胞菌的角质酶，其已经利用来自枯草杆菌的aprE启动子进行高滴度表达(见，例如，美国专利5,429,950，并入本文作为参考)。用Alw44I-BamHI连接子寡核苷酸盒(见，上面的序列)，将作为EcoRI-Alw44I片段(来自pAK-15)的aprE-角质酶基因融合物连接入已经用EcoRI和BamHI切割的p2JM103-lnk2-2BBIck81(见，实施例19)。该角质酶-连接子2-2BBIck81表达载体(见图21的EcoRI-BamHI aprE-角质酶-连接子2序列)被用于转化枯草杆菌BG6006细胞，并且如前对于其它融合蛋白所述，在MBD培养基中产生融合蛋白(见，实施例16)。在该情况下，角质酶-连接子2-2BBIck81融合蛋白不是SDS-PAGE上观察到的主要条带，并且测量的脂酶滴度(如使用美国专利5,429,950中提供的方法所测量)和BBI滴度比用BCE-2BBIck81融合蛋白发现的滴度小得多(约20倍)。同样，当将3mM βME加到生长培养基中时，角质酶融合蛋白中的BBI滴度并未显著提高。因此，通过BCE-2BBIck81融合蛋白的活化，始终获得最高滴度的活性2BBIck81。尽管如此，预期各种融合伴侣将可用于本发明中。
本领域的技术人员很容易认识到，本发明充分适合于实施所述目标并获得提到的结果和益处，以及本文中内在的那些结果和益处。本文所描述的分子复合物和方法、步骤、处理、分子、具体化合物是目前优选实施方式的代表，仅是举例性的，并无意限定本发明的范围。对于本领域的技术人员，很明显，对于这里公开的发明可进行不同的替代和改变，这些替代和改变并不背离本发明的范围和精神。
在说明书中提及的所有专利和出版物代表了本发明所属技术领域的普通技术人员的水平。所有的专利和出版物均以相同的程度在此并入作为参考，如同每一个别的出版物被特定地和个别地指出以并入本文作为参考。
本文中被详细描述的发明，可以在缺乏任一因素或多个因素、限定或多个限定的情况下被恰当地实践，这在本文未中具体公开。这里所使用的术语和表达只是用作描述性术语，并非限制性术语，并且当使用这些术语和表达时，无意排除所示出和描述的特征或其部分的任何等价物，但是，也认识到，在本发明的范围内进行不同的变化是可能的。因此，应当理解，虽然通过优选的实施方式和任选的特征，本发明已经被具体地公开，但是本领域的技术人员可以对本文公开的概念进行修饰和改变，而这些修饰和改变被认为在如本文所限定的发明范围内。
本文广泛地和一般性地描述了本发明。落入该一般公开内的每一更窄的种类和亚类组也构成本发明的一部分。这包括对本发明的一般描述，其条件或否定限定是：从该类中除去任何主题，无论所除去的材料是否在本文中具体陈述。
Claims (60)
1.个人护理组合物，其包括支架，其中所述支架包括蛋白酶抑制剂和至少一个选自SEQ ID NO：1-17的肽，其中所述蛋白酶抑制剂为源自豆科种子以及植物材料的Bowman-Birk抑制剂，其中所述至少一个肽通过取代所述蛋白酶抑制剂的至少一个蛋白酶抑制环而掺入所述蛋白酶抑制剂中。
2.权利要求1所述的个人护理组合物，其中所述支架占所述个人护理组合物的0.01重量百分比至1重量百分比。
3.权利要求1所述的组合物，其中所述个人护理组合物是皮肤护理组合物。
4.权利要求3所述的组合物，其中所述皮肤护理组合物是液体。
5.权利要求3所述的组合物，其中所述皮肤护理组合物选自皮肤乳剂、洗液、喷雾剂、乳液、胶状悬液、泡沫剂、气溶胶、凝胶、浆液和固体。
6.权利要求3所述的组合物，其中所述皮肤护理组合物包括局部施用的非处方组合物。
7.权利要求3所述的组合物，其中所述皮肤护理组合物包括抗真菌修护用品、抗痤疮修护用品、皮肤防护剂、防晒霜、防臭剂和止汗剂。
8.权利要求3所述的组合物，其中所述组合物：
i)能够使皮肤亮白；
ii)能够降低肤色中的红色；
iii)能够防止肤色暗化；
iv)能够防止皮肤颜色发生；和/或
v)是辐射防护剂。
9.权利要求3所述的组合物，其中所述组合物能够降低肤色中的红色。
10.权利要求3所述的组合物，其中所述组合物能够防止肤色暗化。
11.权利要求3所述的组合物，其中所述组合物能够防止皮肤颜色发生。
12.权利要求3所述的组合物，其中所述皮肤护理组合物是辐射防护剂。
13.权利要求12所述的组合物，其中所述辐射防护剂是防晒霜。
14.权利要求13所述的组合物，其中所述防晒霜选自非防水性防晒霜、极 防水性防晒霜和硅氧烷包水防晒霜。
15.权利要求1所述的组合物，其中所述个人护理组合物能够防止毛发生长。
16.权利要求1所述的组合物，其中所述个人护理组合物是毛发护理组合物。
17.权利要求16所述的毛发护理组合物，其中所述毛发护理组合物选自香波、护发素、头发定型组合物、染发剂。
18.权利要求16所述的毛发护理组合物，其中所述毛发护理组合物为持久卷发制剂、或摩丝。
19.权利要求16所述的毛发护理组合物，其中所述毛发护理组合物为乳膏、凝胶、喷雾剂、乳液、或胶状悬液。
20.权利要求16所述的毛发护理组合物，其中所述毛发护理组合物为液体、泡沫或固体。
21.权利要求16所述的毛发护理组合物，其中所述毛发护理组合物进一步包括辐射防护剂。
22.权利要求21所述的组合物，其中所述辐射防护剂是防晒霜。
23.权利要求22所述的组合物，其中所述防晒霜选自非防水性防晒霜、极防水性防晒霜和硅氧烷包水防晒霜。
24.根据权利要求1的个人护理组合物，其是美容组合物。
25.权利要求24所述的组合物，其中所述美容组合物是化妆品组合物。
26.权利要求25所述的组合物，其中所述化妆品组合物选自眼胶、眼影、唇膏、唇彩、唇油、睫毛膏、眼线膏、和粉底。
27.权利要求25所述的组合物，其中所述化妆品组合物为粉饼制剂。
28.权利要求26所述的组合物，其中所述唇膏是高熔点唇膏。
29.权利要求25所述的组合物，其中所述化妆品组合物包括至少一种颜料。
30.权利要求29所述的组合物，其中包含至少一种颜料的所述化妆品组合物是睫毛膏。
31.权利要求30所述的组合物，其中睫毛膏选自非防水性睫毛膏、防水性 睫毛膏、增容睫毛膏、加长睫毛膏、卷曲睫毛膏、水基睫毛膏。
32.权利要求29所述的组合物，其中包含至少一种颜料的所述化妆品组合物是睫毛或眉毛处理剂。
33.权利要求31所述的组合物，其中所述防水性睫毛膏是无水防水性睫毛膏。
34.权利要求25所述的组合物，其中所述化妆品组合物是粉饼制剂。
35.权利要求34所述的组合物，其中所述粉饼制剂选自散粉、腮红、眼影和古铜粉。
36.权利要求25所述的组合物，其中所述化妆品组合物是粉底。
37.权利要求36所述的组合物，其中所述粉底选自油包水粉底、硅氧烷包水粉底、水包油粉底、和粉霜粉底。
38.权利要求25所述的组合物，其中所述化妆品组合物是无水化妆杆。
39.权利要求1所述的个人护理组合物，其中所述Bowman-Birk抑制剂为SEQ ID NO：19描述的氨基酸序列。
40.权利要求1所述的个人护理组合物，其中所述Bowman-Birk抑制剂为SEQ ID NO：25的氨基酸序列。
41.权利要求1所述的个人护理组合物，其中SEQ ID NO：20和21描述的氨基酸序列中的至少一个为所述Bowman-Birk抑制剂的蛋白酶抑制环。
42.权利要求41所述的个人护理组合物，其中所述SEQ ID NO：20和21描述的氨基酸序列的至少一个被至少一个选自SEQ ID NO：1-17的氨基酸序列的肽取代。
43.权利要求1所述的个人护理组合物，其中所述支架为选自SEQ ID NO：22-24的氨基酸序列。
44.制备权利要求1所述的个人护理组合物的方法，包括将有效量的所述支架和至少一种生理学上可接受的载体或赋形剂组合。
45.权利要求1-43中任一项所定义的支架在制备用于调节对象肤色的个人护理组合物中的用途。
46.权利要求45所述的用途，其中所述调节对象肤色包括使所述对象的肤 色增白。
47.权利要求45所述的用途，其中所述调节对象肤色包括降低所述对象的肤色中的红色。
48.权利要求45所述的用途，其中所述Bowman-Birk抑制剂为SEQ ID NO：19中描述的氨基酸序列。
49.权利要求45所述的用途，其中所述Bowman-Birk抑制剂为SEQ ID NO：25所示氨基酸序列。
50.权利要求45所述的用途，其中SEQ ID NO：20和21中描述的氨基酸序列的至少一个为所述Bowman-Birk抑制剂的蛋白酶抑制环。
51.权利要求50所述的用途，其中所述SEQ ID NO：20和21描述的所述氨基酸序列的至少一个被至少一个选自SEQ ID NO：1-17的氨基酸序列的肽取代。
52.权利要求45所述的用途，其中所述支架由选自SEQ ID NO：22-24的氨基酸序列编码。
53.权利要求1-43中任一项所定义的支架在制备用于调节对象的毛发生长的个人护理组合物中的用途。
54.权利要求53所述的用途，其中所述调节对象的毛发生长包括抑制所述对象毛发的生长。
55.权利要求53所述的用途，其中所述调节对象的毛发生长包括抑制所述对象毛发的生长，其中待抑制的所述毛发选自面部毛发、腋毛、腿毛、体毛和手臂毛以及头发。
56.权利要求53所述的用途，其中所述Bowman-Birk抑制剂为SEQ ID NO：19描述的氨基酸序列。
57.权利要求53所述的用途，其中所述Bowman-Birk抑制剂为SEQ ID NO：25描述的氨基酸序列。
58.权利要求53所述的用途，其中SEQ ID NO：20和21描述的氨基酸序列的至少一个为所述BBI抑制剂的蛋白酶抑制环。
59.权利要求58所述的用途，其中所述SEQ ID NO：20和21描述的所述 氨基酸序列的至少一个被至少一个选自SEQ ID NO：1-17的氨基酸序列的肽取代。
60.权利要求53所述的用途，其中所述支架由选自SEQ ID NO：22-24的氨基酸序列编码。
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