CN101260121A

CN101260121A - 杂芳环缩氨基硫脲与过渡金属的络合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用

Info

Publication number: CN101260121A
Application number: CNA2007100378693A
Authority: CN
Inventors: 齐铭; 王晓川; 谢立华; 崔家荣
Original assignee: Challenge Medical Sci & Tech (shanghai) Co Ltd
Current assignee: Challenge Medical Sci & Tech (shanghai) Co Ltd
Priority date: 2007-03-07
Filing date: 2007-03-07
Publication date: 2008-09-10

Abstract

本发明提供了杂芳环缩氨基硫脲类化合物与过渡金属的络合物，公开了它们在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明的化合物经体外多种肿瘤细胞株的试验，显示了其对肿瘤有很好的抑制效果，本发明的化合物可以制成片剂、胶囊剂或注射剂等多种剂型的药物组合物。

Description

杂芳环缩氨基硫脲与过渡金属的络合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用

技术领域

本发明涉及药物化学技术领域，具体涉及杂芳环缩氨基硫脲与过渡金属的络合物和它们在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

本发明人曾在此前的中国专利申请(王晓川，齐铭，“杂芳环缩氨基硫脲类化合物及其衍生物和它们在制备抗肿瘤药物中的应用”，中国专利申请，受理号200510027600.8；王晓川，齐铭，“杂芳环缩氨基硫脲类化合物及其衍生物”，中国专利申请，受理号200510030414.X；谢立华，王小龙，高澍，齐铭，“杂芳环缩氨基硫脲类抗肿瘤药物的合成方法”，中国专利，受理号200510028480.3)中，公开了新的缩氨基硫脲类化合物I及其衍生物与它们的合成方法(见式一)，并且报道了它们对体外癌株以及对动物体内实验所显示出的良好的抗肿瘤活性和构效关系。

式一杂环芳基缩氨基硫脲类化合物I和IA(代号S00115)的结构

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于进一步研究杂环芳基缩氨基硫脲类化合物的衍生物及其用途。

本发明提供了通式II的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物。

其中，A为2位含氮杂环基，具体为2-吡啶基、2-嘧啶基、2-吡嗪基、3-哒嗪基、2-喹啉基或3-异喹啉基；其中优选项为2-吡啶基或2-嘧啶基；

B为苯基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噁唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、5-异噁唑、3-异噻唑基、4-异噻唑基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、1，2，4-噻二唑-3-基、1，2，4-噻二唑-5-基、1，3，4-噻二唑-2-基或5-异噻唑基；其中优选为2-噻吩基、3-噻吩基、2-呋喃基、2-噁唑基、2-噻唑基、1，3，4-噻二唑-2-基或5-异噻唑基；更优选为2-噻吩基；

M为过渡金属离子；其中优选的过渡金属离子为二价或三价铁[铁(II)或铁(III)]、二价铜[铜(II)]、二价镍[镍(II)]、二价钴[钴(II)]或二价锌[锌(II)]。

本发明又提供了通式III的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物：

其中，A为2位含氮杂环基，具体为2-吡啶基、2-嘧啶基、2-吡嗪基、3-哒嗪基、2-喹啉基或3-异喹啉基；其中优选为2-吡啶基或2-嘧啶基；

M为过渡金属离子；其中优选的过渡金属离子为三价铁。

X^-为配位负离子，具体为氯离子，溴离子，醋酸根离子，硫酸根离子，高氯酸根离子，柠檬酸根离子或乳酸根离子；其中优选为氯离子或醋酸根离子。

本发明还提供了通式IV的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物：

M为过渡金属离子；其中优选的过渡金属离子为二价铁、二价铜、二价镍或二价钴；

X^-为配位负离子，可选项为氯离子、溴离子、醋酸根离子、硫酸根离子、高氯酸根离子、柠檬酸根离子、乳酸根离子、其中优选为氯离子或醋酸根离子。

本发明特别优选的缩氨基硫脲类化合物为：

二{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}亚铁络合物[Fe(S00115)₂，S02108]；

一氯二{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}铁(III)络合物[Fe(S00115)₂Cl，S02109]；

二{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}锌(II)络合物[Zn(S00115)₂，S02184]；

二{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}铜(II)络合物[Cu(S00115)₂，S02186]；

一氯一{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}铜(II)络合物[Cu(S00115)Cl，S02242]；

二{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-]-硫脲}钴(II)络合物[Co(S00115)₂，S02243]；

一氯一{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}镍(II)络合物[Ni(S00115)Cl，S02246]。

本发明的另一目的是提供了一种药物组合物，它由通式II，III，和IV中的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物与可药用载体或赋形剂组成。

本发明的又一个目的是提供了通式II，III，和IV中的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明所述肿瘤包括但不限于：乳腺癌、脑胶质瘤、黑色素瘤、结直肠癌、肺癌、胰腺癌、表皮癌、肝癌，卵巢癌，胃癌，食管癌，前列腺癌，子宫颈癌，鼻咽癌，S180肉瘤或白血病。

本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物可以从缩氨基硫脲类化合物和过渡金属离子盐等为原料，通过本领域的普通合成技术制得(如实施例1-7)。用于本发明的缩氨基硫脲类化合物(如S00115)的合成已在前一专利申请中公布(谢立华，王小龙，高澍，齐铭，“杂芳环缩氨基硫脲类抗肿瘤药物的合成方法”，中国专利，受理号200510028480.3)。过渡金属络合物的制备方法对本领域的普通技术人员来说是公知的。

用于合成本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物的化学原料绝大部分可以通过商业途径获得。其中不能通过购买得到的酮类化合物可以通过经典文献的方法制备获得(R.Larock，Comprehensive Organic Transformations，VCH Publishers，1989)。本领域的普通技术人员可依据所述说明和方法顺利地合成。

本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物的结构是通过薄层层析，高效液相色质连用仪，和单晶X-衍射光谱确定的。络合物S02108和S02109的X-光单晶衍射结构分别列于图1，2；它们的晶体和结构修正数据列于表一，二中。

表一.Fe(S00115)₂的晶体数据和结构修正数据.

表二.Fe(S00115)Cl的晶体数据和结构修正数据.

本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物的抗肿瘤活性已通过体外试验(in vitro assay)得以验证；这些结果可以帮助我们确定适宜的剂量范围和给药途径。本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物在人体的用量可以根据其给药途径、患者的年龄和体重、肿瘤的类型及严重程度的不同而有所不同，对成人来讲，其日剂量可以是0.05～50mg/kg，可一次或多次给药。

本发明优选的缩氨基硫脲-过渡金属络合物包括但不限于列举于表三中的具有代表性的化合物。

表三.具有代表性的缩氨基硫脲-过渡金属络合物

编号	化合物名称	分子式(MF)	产品颜色	溶点(℃)
编号	化合物名称	分子式(MF)	产品颜色	溶点(℃)	S02108	Fe(S00115)₂	C₂₆H₂₆FeN₈S₄	褐色	Decompose at 200℃
S02109	Fe(S00115)₂Cl	C₂₆H₂₆ClFeN₈S₄	黑绿色	Decompose at 200℃	S02108	Fe(S00115)₂	C₂₆H₂₆FeN₈S₄	褐色	Decompose at 200℃
S02109	Fe(S00115)₂Cl	C₂₆H₂₆ClFeN₈S₄	黑绿色	Decompose at 200℃	S02184	Zn(S00115)₂	C₂₆H₂₆N₈S₄Zn	黄色	Decompose at 200℃
S02186	Cu(S00115)₂	C₂₆H₂₆CuN₈S₄	棕褐色	Decompose at 200℃	S02184	Zn(S00115)₂	C₂₆H₂₆N₈S₄Zn	黄色	Decompose at 200℃
S02186	Cu(S00115)₂	C₂₆H₂₆CuN₈S₄	棕褐色	Decompose at 200℃	S02242	Cu(S00115)Cl	C₁₃H₁₃ClCuN₄S₂	棕褐色	Decompose at 247℃
S02243	Co(S00115)₂	C₂₆H₂₆CoN₈S₄	棕红色	Decompose at 210℃	S02242	Cu(S00115)Cl	C₁₃H₁₃ClCuN₄S₂	棕褐色	Decompose at 247℃
S02243	Co(S00115)₂	C₂₆H₂₆CoN₈S₄	棕红色	Decompose at 210℃	S02246	Ni(S00115)Cl	C₁₃H₁₃ClN₄NiS₂	棕红色	Decompose at 261℃

本发明人检测了一系列缩氨基硫脲-过渡金属络合物，发现了它们对多种癌细胞具有明显的抑制作用(见实施例8和表四)。之后，本发明人又用其中的几个化合物对S180实验小鼠的抑制作用进行了检测，发现它们具有明显的抑制肿瘤细胞活性(见实施例9和表五)。

迄今为止，本发明人所获得的从S02108到S02246这一系列化合物对体外癌株以及对动物体内实验均显示了良好的抗肿瘤活性。同时实验结果表明：本发明化合物的分子结构与其抑癌活性之间具有非常紧密的联系。根据这种紧密的构效关系，与本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物类似的其它络合物及其衍生物都可能具有良好的抗肿瘤活性。

本发明所述的缩氨基硫脲类化合物的盐是指其在药学上可接受的盐，包括各种无机或有机酸盐如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、延胡索酸盐、扁桃酸盐和草酸盐；各种无机或有机碱盐如钠盐，钙盐和N-甲基-葡萄糖胺盐。

本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物也可以溶剂合物(包括水合物)的形式存在。例如：在重结晶时这些化合物可与一个或者若干个单位的水或者其他溶剂分子形成结晶。所述化合物的溶剂合物(包括水合物)均在本发明的保护范围之内。

本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物可通过肠道或者非肠道途径给药。肠道给药制剂包括但不限于胶囊、片剂、乳剂、水悬浮剂、胶体液、溶液、微胶囊、丸剂、锭剂、颗粒剂、粉剂。常用于片剂的可药用载体包括乳糖和玉米淀粉。通常还会加入硬脂酸镁等润滑剂。常用于胶囊剂的可药用载体包括乳糖和干玉米淀粉。当制成口服水悬浮剂和/或乳剂时，缩氨基硫脲-过渡金属络合物可悬浮或溶解于油相里并与乳化剂或悬浮剂相结合。如果需要，也可以加入一些甜味剂和/或香味剂和/或增色剂。非肠道给药途径包括但不限于皮下、皮内、动脉、静脉、肌肉、关节、滑液、胸骨、鞘内、病灶内、颅内注射或滴注。其它给药途径可包括局部、直肠、经鼻、经颊、阴道、舌下、粘膜、气管或尿道。此外，本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物还可以通过气雾吸入或植入蓄积或针刺等方式给药。

本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物可被制成无菌注射剂，如无菌水相或油相悬浮液。该悬浮液可按本领域的常规方法，使用适宜的分散剂或湿润剂(如Tween 80)及悬浮剂等制得。它还可以是在肠道外给药的无毒稀释剂或溶剂中的水溶液或悬浮液，如在1，3-丁二醇中的溶液。相关的可用载体或溶剂包括甘露醇、水、林格氏液、等渗氯化钠等。另外，无菌的固定油(bland fixed oil)常被作为溶剂或悬浮剂的媒介，因而包括合成甘油单酯或甘油二酯在内的多种柔和的固定油均适用。脂肪酸，如十八烯酸及其甘油酯衍生物(如橄榄油或蓖麻油，特别是其聚氧乙烯基衍生物)等可用于制备所述注射剂。所述油溶液或悬浮液还可包含一种长链的乙醇稀释剂或分散剂或羧甲基纤维素或类似的其他分散剂，此类物质常用于制备可药用乳剂和/或悬浮剂。其它一些制剂常用的表面活性剂如Tweens或Spans和/或其他类似的乳化剂或生物利用度促进剂等也同样可用于制备本制剂。

本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物可制成栓剂通过直肠给药，方法是将其与适宜的非刺激性赋形剂混合，后者在室温下为固体而在直肠温度下为液体，因而该栓剂可溶解于直肠中并释放出活性成份。此类赋形剂包括但不限于：可可油、蜂蜡和聚乙烯。本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物还可制成灌肠剂等用于直肠局部给药。本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物亦可经鼻喷雾或者吸入给药，即按本领域的常规方法，使用苯甲基乙醇或其他防腐剂、吸收促进剂、碳氟化合物和/或其他增溶剂或分散剂制得盐溶液。本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物还可通过植入给药。采用植入给药方式可达到在给药对象体内持续，定时释放上述物质的效果。另外，植入给药还能在局部组织和器官定位给药。定时释放技术亦可用于本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物的给药中，如基于聚合体技术的定时释药胶囊、缓释技术和制剂包裹技术(如聚合体和脂质体)等。贴剂同样包括在本发明的保护范围之内。其包括基质层(如聚合体、布、纱和绷带)和本发明的药物组合物。

“可药用载体”不会影响本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物、其可药用盐或溶剂合物的药学活性，同时其有效用量，即能够起到药物载体作用时的用量对人体是无毒的。“可药用载体”包括但不限于：离子交换材料、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、自乳化药物传递系统(SEDDS)如d-α-维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯、吐温(Tweens)或其他类似聚合介质等药物制剂用的表面活化剂、血清蛋白如人血清白蛋白、缓冲物质如磷酸盐、氨基乙酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸部分甘油酯混合物、水、盐、电解质如硫酸盐精蛋白、磷酸氢二纳、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅胶、硅酸镁等。聚乙烯吡咯酮、纤维素物质、聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠、聚丙稀酸酯、乙烯-聚氧乙烯-嵌段聚合物和羊毛酯、环糊精如α-、β-及γ-环糊精或其经化学修饰的衍生物如2-和3-羟丙基-β-环糊精等羟烷基环糊精或其他可溶性衍生物等均可用于促进本发明的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物的药物传递。

附图说明

图1络合物S02108的X-光单晶衍射结构(含水分子)

图2络合物S02109的X-光单晶衍射结构(含乙醇分子)

具体实施方式：

以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。但本发明并不仅限于此。

实施例1N，N-二甲基N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲(代码S00115)和亚铁离子的络合物Fe(S00115)₂(S02108)的合成

室温下将氯化亚铁(0.18毫摩尔)加入到S00115(0.35毫摩尔)的二氯甲烷(2毫升)溶液中，混合物搅拌过夜。将反应混合物过滤，滤液减压浓缩至干即得产品S02108；产率96％；经高效液相色质联用仪检测表明纯度高于95％，质荷比APCI(+)为635.1[M⁺+1]。产品的其它物理参数列于表三中。

实施例2N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲(S00115)和三价铁离子的络合物Fe(S00115)₂Cl(S02109)的合成

如实施例1，从S00115和FeCl₃·6H₂O(摩尔比1∶1)制备可得产物S02109，产率几乎定量。经高效液相色质联用仪检测表明纯度高于95％，质荷比APCI(+)为635.2[M⁺-Cl+1]。

实施例3N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲(S00115)和锌离子的络合物Zn(S00115)₂(S02184)的合成

如实施例1，S00115和ZnCl₂反应可得产物S02184，产率76％。经高效液相色质联用仪检测表明纯度高于95％，质荷比APCI(+)为645.1[M⁺+1]。

实施例4N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲(S00115)和铜离子的络合物Cu(S00115)₂(S02186)的合成

如实施例1，S00115和CuCl₂·2H₂O反应可得产物S02186，产率几乎定量。经高效液相色质联用仪检测表明纯度高于90％，质荷比APCI(+)为642.1[M⁺]。

实施例5N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲(S00115)和铜离子的络合物Cu(S00115)Cl(S02242)的合成

室温下将氯化铜(CuCl₂·2H₂O，60毫克，0.35毫摩尔)水溶液(0.5毫升)加入到S00115(0.35毫摩尔)的乙腈(5毫升)溶液中，混合物搅拌30分钟。将反应混合物过滤，滤饼分别用水，乙腈和丙酮洗涤后经真空干燥即得产品S02242；产率92％。经高效液相色质联用仪检测表明纯度高于95％，质荷比APCI(+)为392.6和394.6[M⁺-Cl+CH₃CN]；质荷比EI(+)为387和389[M⁺]。

实施例6N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲(S00115)和钴离子的络合物Co(S00115)₂(S02243)的合成

如实施例1，S00115和CoCl₂·6H₂O反应可得产物S02243，产率93％。经高效液相色质联用仪检测表明纯度高于95％，质荷比APCI(+)为639.0[M⁺+1]。

实施例7N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲(S00115)和镍离子的络合物Ni(S00115)Cl(S02246)的合成

室温下将氯化镍(NiCl₂·6H₂O，3.5毫摩尔)水溶液(2毫升)加入到S00115(3.5毫摩尔)的二氯甲烷(20毫升)溶液中，混合物搅拌30分钟。将反应混合物用二氯甲烷(20毫升)稀释，再用水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥后真空下浓缩至干即得产品S02246；产率几乎定量。经高效液相色质联用仪检测表明纯度高于95％，质荷比APCI(+)为387.9和389.9[M⁺-Cl+CH₃CN]。

实施例8：络合物的体外抗肿瘤作用研究(MTT法)

1、实验目的：MTT法实验测定络合物对多种动物及人体肿瘤细胞株的细胞毒作用。MTT分析法以代谢还原3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenyl tetrazolium bromide(MTT)为基础。活细胞的线粒体中存在与NADP相关的脱氢酶，可将黄色的MTT还原为不溶性的蓝紫色的甲月黄(Formazan)，死细胞此酶消失，MTT不被还原。用DMSO溶解Formazan后可用酶标仪在540nm波长处检测光密度，参考波长690nm。

2、仪器设备

CO2细胞培养箱，(THERMO)

SW-CJ-1F型垂直单人双面超净工作台，苏州净化设备厂

倒置生物显微镜(NIKON，EdiPSE TS 100)

雷勃酶标仪MK3(THERMO)

DK-8B型电热恒温水槽

高速低温离心机(Combi-514R)

3、实验材料及配制

(1)细胞株：人肺癌细胞A549；人表皮鳞癌细胞A431(EGFR高表达)；人乳腺癌细胞MCF-7，人乳腺管癌细胞MDA-MB-435S，人乳腺管癌细胞MDA-MB-468(EGFR高表达)；培养基：RPMI 1640，L15，DMEM细胞培养基(GIBCO)：含10％胎牛血清(GIBCO)；1×105U.L-1青霉素，1×105 g.L-1链霉素；L-谷氨酰氨；丙酮酸钠(进口分装，华美)；无菌过滤，4℃保存。

(2)0.25％胰蛋白酶溶液(Trypsin)：购自Invitrogen公司，-20℃保存。

(3)磷酸缓冲液(PBS)：NaCl8g，KCl0.2g，Na2HPO41.15g，KH2PO40.2g，溶于1L双蒸水，121℃高压消毒20min，4℃保存。

(4)MTT(AMRESCO)溶液：用PBS配成5mg/ml溶液。

4、实验方法

配制化合物：将化合物和对照品先用DMSO(AMRESCO)配制成2mM的母液；3倍稀释后在96孔板中，使用终浓度(稀释200倍)：10，3.33，1.11uM等共6个浓度点。

收集处于对数生长期的肿瘤细胞，计数接种4～6*10^4cell/ml

100μl/孔接种于96孔微量培养板内(细胞数量约4000～6000个)

培养过夜细胞贴壁后加入含1μl化合物的培养基100ul/孔，立即混匀。对每个细胞株，每个浓度均为三个复孔(DMSO终浓度为0.5％)。各六个浓度，另设无细胞调零孔、DMSO对照孔，不加DMSO对照孔。

在37℃、5％CO2条件下培养48小时后，加MTT(Sigma)液5mg/ml用生理盐水配制20μl/孔；继续培养4小时后，取出后吸弃培养上清，后加入100ul的DMSO溶解生成物，振动5分钟。

用酶标仪测OD540和OD690值。绝对OD值＝OD540-OD690

按下列公式计算被测物对癌细胞生长的抑制率，半数抑制浓度IC50值采用Logit法计算。

数据处理：

细胞生存率抑制率＝100-(给药组OD值/对照组OD值)×100％

5、实验结果

表四、络合物对人癌细胞株的抑制作用(IC50uM)

络合物编号	络合物分子简式	A549	A431	MCF-7	MDA-NB-435S
络合物编号	络合物分子简式	A549	A431	MCF-7	MDA-NB-435S	S02108	Fe(003)₂	2.86	-	-	-
S02109	Fe(003)₂Cl	1.14^注一	0.98^注三	4.08^注三	＞10	S02108	Fe(003)₂	2.86	-	-	-
S02109	Fe(003)₂Cl	1.14^注一	0.98^注三	4.08^注三	＞10	S02184	Zn(003)₂	＞10	0.98	4.03	＞10
S02186	Cu(003)₂	0.06^注二	0.22^注三	0.14	0.11^注三	S02184	Zn(003)₂	＞10	0.98	4.03	＞10
S02186	Cu(003)₂	0.06^注二	0.22^注三	0.14	0.11^注三	S02242	Cu(003)Cl	0.04^注三	0.17^注三	-	0.08^注三
S02243	Co(003)₂	0.70^注三	1.57^注三	-	1.88^注三	S02242	Cu(003)Cl	0.04^注三	0.17^注三	-	0.08^注三
S02243	Co(003)₂	0.70^注三	1.57^注三	-	1.88^注三	S02246	Ni(003)Cl	0.36^注	1.90^注三	-	1.46^注三

注一：五次实验平均值；注二：三次实验平均值；注三：二次实验平均值。

实施例9：体内抗肿瘤作用实验研究-S00115二种络合物对小鼠移植性肿瘤的抑瘤作用

1材料

1.1动物

(1)昆明小鼠，雌性，体重18-20g，由斯莱克实验动物有限责任公司提供，合格证：SCXK(沪)2003-0003。

1.2瘤株

(1)小鼠S180肉瘤，由上海医工院药理室传代培养

1.3药品

(1)缩氨基硫脲-过渡金属络合物Zn(S00115)₂和Fe(S00115)₂Cl，吐温助溶后，再用CMCNa配制为所需浓度。

(2)0.9％生理盐水，哈尔滨三精艾富西药业有限公司，规格：500ml，批号：40924c

(3)注射用环磷酰胺(CTX)，上海华联制药有限公司，批号：020806。

2实验方法

2.1造模方法

(1)小鼠S180肉瘤造模方法

取生长旺盛期的S180肉瘤小鼠(实体型)，颈椎脱臼致死后，在无菌条件下解剖取其瘤块，用生理盐水冲洗干净，放入组织匀浆器内，按与生理盐水比例1∶5匀浆，制成细胞混悬液，无菌条件下接种于昆明小鼠右腋皮下，每只0.2ml，然后随机分组。

2.2实验过程

取昆明小鼠，按上述方法造模后，随机分为4组每组6只，分别为络合物Zn(S00115)₂和Fe(S00115)₂Cl口服中剂量组(8mg/kg)、CTX对照组(30mg/kg)、模型对照组(以等容积的生理盐水代替)。连续口服给药7d，末次给药后次日处死动物，解剖取瘤，称重，计算抑瘤率，并进行统计学(t检验)处理。抑瘤率计算方法见以下公式：

2.3实验结果

缩氨基硫脲-过渡金属络合物Zn(S00115)₂和Fe(S00115)₂Cl口服灌胃对小鼠S180肉瘤具有较好的抑制作用；结果见表五。

表五Zn(S00115)₂和Fe(S00115)₂Cl口服灌胃对小鼠S180肉瘤的抑制

Claims

1. 一种通式II的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物：

B为苯基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噁唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、5-异噁唑、3-异噻唑基、4-异噻唑基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、1，2，4-噻二唑-3-基、1，2，4-噻二唑-5-基、1，3，4-噻二唑-2-基或5-异噻唑基；其中优选为2-噻吩基、3-噻吩基、2-呋喃基、2-噁唑基、2-噻唑基、1，3，4-噻二唑-2-基或5-异噻唑基；优选为2-噻吩基；

M为过渡金属离子；其中优选的过渡金属离子为二价或三价铁、二价铜、二价镍、二价钴或二价锌。

2. 一种通式III的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物：

M为过渡金属离子，其中优选为三价铁；

X^-为配位负离子，具体为氯离子、溴离子、醋酸根离子、硫酸根离子、高氯酸根离子、柠檬酸根离子或乳酸根离子；其中优选为氯离子或醋酸根离子。

3. 一种通式IV的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物：

M为过渡金属离子；其中优选为二价铁、二价铜、二价镍或二价钴；

X^-为配位负离子，具体为氯离子、溴离子、醋酸根离子、硫酸根离子、高氯酸根离子，、柠檬酸根离子、乳酸根离子；其中优选为氯离子或醋酸根离子。

4. 根据权利要求1-3任一项所述的缩氨基硫脲-过渡金属络合物，其特征在于该络合物为：

二{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}亚铁络合物；

一氯二{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}铁(III)络合物；

二{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}锌(II)络合物；

二{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}铜(II)络合物；

一氯一{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}铜(II)络合物；

二{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}钴(II)络合物；或

一氯一{N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮杂烯基]-硫脲}镍(II)络合物。

5. 一种药物组合物，其特征在于它是由通式II的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物为活性成分与药用载体组成的。

6. 一种药物组合物，其特征在于它是由通式III的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物为活性成分与药用载体组成的。

7. 一种药物组合物，其特征在于它是由通式IV的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物为活性成分与药用载体组成的。

8. 根据权利要求4、5或6所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物为口服胶囊、片剂、乳剂、水悬浮剂、胶体液、溶液、微胶囊、丸剂、锭剂、颗粒剂或粉剂；或注射剂、滴注剂、气雾吸入、栓剂、植入剂、贴剂、或缓释制剂。

9. 一种权利要求1、2、3、或4所述的通式II、III或IV的缩氨基硫脲-过渡金属络合物及其盐或溶剂合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

10. 根据权利要求9所述的缩氨基硫脲类化合物及其盐或溶剂合物在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于其中所述肿瘤为乳腺癌、脑胶质瘤、黑色素瘤、结直肠癌、肺癌、胰腺癌、表皮癌、肝癌，卵巢癌，胃癌，食管癌，前列腺癌，子宫颈癌，鼻咽癌，S180肉瘤或白血病。