CN101228867A - 人体冷冻保护复活液 - Google Patents
人体冷冻保护复活液 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101228867A CN101228867A CNA2008100004897A CN200810000489A CN101228867A CN 101228867 A CN101228867 A CN 101228867A CN A2008100004897 A CNA2008100004897 A CN A2008100004897A CN 200810000489 A CN200810000489 A CN 200810000489A CN 101228867 A CN101228867 A CN 101228867A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- percent
- human body
- cryoprotectant
- freezing
- acetate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
本发明涉及一种人体冷冻保护复活液，它是由含有下述原料的有效组份，重量百分比为：二甲基亚枫19％～23％、乙酰胺15％～20％、丙三醇15％～19％、丙二醇10％～14％、乙酸8％～10％、乙酸正丙酯6％～9％、氨基酸4％～6％。本发明能大幅减少细胞在冷冻和复温过程中的损坏。
Description
技术领域
本发明属于一种人体冷冻保护复活液。
背景技术
对细胞来说，到目前为止已取得成功实例的低温保存方法大致可分为两类，一是“冻结化”的方法，另一则是“玻璃化”方法。成功的低温保存绝大多数都是应用“冻结化”的方法，而“玻璃化”的方法是从20世纪80年代开始的，目前已经取得重要进展。在生物细胞中，水占很大的份额，同时绝大多数细胞只有在水溶液中才能生存。因此，当温度降低到水溶液的冰点以下时，就会出现晶状的冰。在常温下，细胞及其溶液处于渗透平衡的状态。当温度降到冰点以下时，首先是细胞外溶液部分“冻结”出冰；细胞外溶液的浓度升高，破坏了细胞外溶液的平衡，水分由细胞内通过细胞膜向外渗透，细胞收缩，细胞内浓度提高，使细胞脱水，蛋白质变性即产生溶液效应。另一方面来不及渗出的水份在细胞内形成大的冰晶而导致细胞死亡，复温时，随着温度的升高，冻结的冰不断融化，水分由细胞外向细胞内渗透，使收缩的细胞膨胀。为使细胞在降温、复温、渗透过程中不被损伤而死亡，要求在降温和复温的程序加入抗冻剂，能使细胞在冷冻和解冻后能动性得到改善，但目前使用的冷冻剂仍可造成细胞的60％的损坏。
发明内容
本发明的目的是提供一种人体冷冻保护复活液，能大幅减少细胞在冷冻和复温过程中的损坏。
本发明含有下述原料的有效组份，重量百分比为：二甲基亚枫19％～23％、乙酰胺15％～20％、丙三醇15％～19％、丙二醇10％～14％、乙酸8％～10％、乙酸正丙脂6％～9％、氨基酸4％～6％。
本发明最佳方案含有：二甲基精亚枫22％、乙酰胺18％、丙三醇17％、丙二醇12％、乙酸9％、乙酸正丙脂8％、氨基酸5％。
本发明的优点是能大幅减少细胞在冷冻和复温过程中的损坏。试验表明：采用传统的冷冻剂用细管法冷冻人体精液在5℃和37℃时，解冻的能动性为45％～55％，正常精子减少52％～65％，72％的冷冻人体精子为不可逆的细胞损坏。而采用本发明的冷冻剂用细管法冷冻人体精液在5℃和37℃时，解冻的能动性为75％～85％，正常精子仅减少15％～20％，仅有约20％左右的冷冻人体精子为不可逆的细胞损坏。
采用传统的冷冻剂冷冻人体卵巢组织进行-196℃液氮中深度低温冷冻后行组识学和电镜检查，能恢复形成正常的原始卵泡比例不足80％，而采用本发明的冷冻剂冷冻人体卵巢组织进行-196℃液氮中深度低温冷冻后行组识学和电镜检查，能恢复形成正常的原始卵泡比例达95％。本发明还具有原料易得，配制成本低，能大幅减少细胞在冷冻和复温过程中损坏的优点。
具体实施方案
配方一：二甲基亚枫22％、乙酰胺18％、丙三醇17％、丙二醇12％、乙酸9％、乙酸正丙脂8％、氨基酸5％，余量为PBS液和常规溶剂，将粉氨基酸溶于PBS液中，再加入二甲基亚枫混均，再加入其它余料，混均，用一个当量的盐酸或氢氧化钠调PH值到8.0，得混合液，加入灭菌蒸馏水，得本发明保护复活液，使混合液在保护复活液中的浓度在1.5～2.0mol/L，装瓶，蒸汽消毒灭菌。
所述的PBS液制备方法如下：氯化钠8g、氯化钾0.2g、磷酸氢二钠1.56g、磷酸二氢钾0.2g，倒入盛有蒸馏水的烧杯中，搅拌充分溶解，把溶液倒入容量瓶中定容至1000ml。为传统方法，故不再累述。
所述的常规溶剂为灭菌蒸馏水、乙醇、盐酸、氢氧化钠。
所述的氨基酸为赖氨酸、精氨酸、组氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、色氨酸中的一种或数种混合。
配方二：二甲基亚枫19％、乙酰胺16％、丙三醇19％、丙二醇14％、乙酸8％、乙酸正丙脂6％、谷氨酸3％、天门冬氨酸3％，余量为常规溶剂，将谷氨酸和天门冬氨酸溶于灭菌蒸馏水中，再加入二甲基亚枫混均，再加入其它余料，混均，用一个当量的盐酸或氢氧化钠调PH值到8.0，得混合液，加入灭菌蒸馏水，得本发明保护复活液，使混合液在保护复活液中的浓度在1.5～2.0mol/L，装瓶，蒸汽消毒灭菌。
总之，本发明具有良好的效果，且还具有成本低，生产程序简单，稳定性好。可推广使用。
Claims (2)
1.一种人体冷冻保护复活液，其特征在于：含有下述原料的有效组份，重量百分比为：
二甲基亚枫19％～23％、乙酰胺15％～20％、丙三醇15％～19％、丙二醇10％～14％、乙酸8％～10％、乙酸正丙脂6％～9％、氨基酸4％～6％。
2.根据权利要求1所述的人体冷冻保护复活液，其特征在于，含有：二甲基精亚枫22％、乙酰胺18％、丙三醇17％、丙二醇12％、乙酸9％、乙酸正丙脂8％、氨基酸5％。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008100004897A CN101228867B (zh) | 2008-01-15 | 2008-01-15 | 人体精液及卵巢组织冷冻保护液 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008100004897A CN101228867B (zh) | 2008-01-15 | 2008-01-15 | 人体精液及卵巢组织冷冻保护液 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101228867A true CN101228867A (zh) | 2008-07-30 |
| CN101228867B CN101228867B (zh) | 2011-10-05 |
Family
ID=39895945
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2008100004897A Expired - Fee Related CN101228867B (zh) | 2008-01-15 | 2008-01-15 | 人体精液及卵巢组织冷冻保护液 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101228867B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103651332A (zh) * | 2013-12-13 | 2014-03-26 | 广东省计划生育科学技术研究所 | 一种二十二碳六烯酸-甘氨酸-甘油复合型人精液冷冻保护剂及其制备方法 |
| CN111296412A (zh) * | 2020-04-17 | 2020-06-19 | 赛尔瑞成(北京)生命科学技术有限公司 | 一种无血清低dmso细胞冻存液及其应用 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110226593A (zh) * | 2019-07-30 | 2019-09-13 | 葛亮 | 一种生物组织冷冻保护液 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN2640244Y (zh) * | 2003-09-22 | 2004-09-15 | 郑葵飞 | 人体玻璃化冷冻复活器 |
| CN100563665C (zh) * | 2006-09-11 | 2009-12-02 | 华中农业大学 | 一种奶牛性控精子冷冻保存精液稀释液 |
-
2008
- 2008-01-15 CN CN2008100004897A patent/CN101228867B/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103651332A (zh) * | 2013-12-13 | 2014-03-26 | 广东省计划生育科学技术研究所 | 一种二十二碳六烯酸-甘氨酸-甘油复合型人精液冷冻保护剂及其制备方法 |
| CN111296412A (zh) * | 2020-04-17 | 2020-06-19 | 赛尔瑞成(北京)生命科学技术有限公司 | 一种无血清低dmso细胞冻存液及其应用 |
| CN111296412B (zh) * | 2020-04-17 | 2022-10-04 | 赛尔瑞成(北京)生命科学技术有限公司 | 一种无血清低dmso细胞冻存液及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101228867B (zh) | 2011-10-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Boutron et al. | Stability of the amorphous state in the system water—1, 2-Propanediol | |
| Boutron et al. | Stability of the amorphous state in the system water-glycerol-ethylene glycol | |
| CN102268241A (zh) | 一种相变温度12—29℃的降温相变材料及其制备方法 | |
| EP1274302B1 (en) | Cyclohexanediol cryoprotectant compounds | |
| CN101228867B (zh) | 人体精液及卵巢组织冷冻保护液 | |
| US11528925B2 (en) | Antifreeze solution for food preservation | |
| CN101253856A (zh) | 一种玻璃化冻存液 | |
| US20020042131A1 (en) | Cryopreservation method using cryoprotective composition of propanediol and a vehicle solution | |
| CN104222068A (zh) | 一种皮肤模型低温保存的固体培养基及其保存方法 | |
| CN104585165A (zh) | 人体器官冷冻保护液 | |
| CN106818708B (zh) | 棕点石斑鱼精子超低温冷冻保护剂及其保存方法 | |
| CN102241964A (zh) | 用于食品浸渍冷冻的四元载冷剂 | |
| Liu et al. | Impacts of trehalose and l-proline on the thermodynamic nonequilibrium phase change and thermal properties of normal saline | |
| Hu et al. | Green Natural Deep Eutectic Agents (GNDEAs) for Biocryopreservation: Syntheses, Properties and Advanced Applications | |
| Weng et al. | Two applications of the thermogram of the alcohol/water binary system with compositions of cryobiological interests | |
| CN104927789B (zh) | 一种用于动态冰浆蓄冰储能的载冷剂 | |
| CN105230608A (zh) | 一种组织工程皮肤的保存方法及组织工程皮肤 | |
| Fahy | Vitrification of multicellular systems and whole organs | |
| Steponkus | Fundamental aspects of cryoinjury as related to cryopreservation of plant cells and organs | |
| Ishizaki et al. | Low toxic zwitterions as emerging cryoprotectants | |
| CN113661977A (zh) | 一种DMSO-Free细胞冻存液的设计和制备方法 | |
| CN114617839B (zh) | 治疗冻结性冷损伤的凝胶搽剂及其制备方法 | |
| JP2001502664A (ja) | 細胞、組織、器官及び生物体の貯蔵保存用ガラス化溶液 | |
| Fishbein et al. | External-internal ice and functional-structural damage in mouse liver mitochondria as a function, of cooling rate | |
| Boutron | Glass-forming tendency, stability of the amorphous state, and cryoprotection of red blood cells |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20111005 Termination date: 20130115 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |