CN101210015A

CN101210015A - 一种乙肝治疗药物恩替卡韦的制备方法

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Publication number: CN101210015A
Application number: CNA2006101305657A
Authority: CN
Inventors: 赵健; 李欣; 朱建强; 楼金芳; 周学福; 蔡新; 董亚博; 叶小平; 张明华; 徐卓; 魏文涛; 刘卫
Original assignee: Tianjin Taipu Pharmaceutical Science & Technology Development Co Ltd; Hangzhou Shengyou Medicine Technology Development Co Ltd
Priority date: 2006-12-26
Filing date: 2006-12-26
Publication date: 2008-07-02
Anticipated expiration: 2026-12-26
Also published as: CN101210015B

Abstract

本发明公开了一种乙肝治疗药物恩替卡韦的新型制备方法，它是通过将Z－1经过环氧化、侧链保护、化合物缩合、氨基保护、DMP氧化、亚甲基化、化合物中的氨基保护、进一步脱去氨基保护、羟基保护等九步反应制得恩替卡韦。本发明的制备方法与现有文献报道的制备方法相比，具有收率高，产品纯度好，后处理操作简单，环境友好，适合工业化生产等特点。

Description

一种乙肝治疗药物恩替卡韦的制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及抗病毒药恩替卡韦的制备方法，更确切地说是[1S-(1α，3α，4β)]-2-氨基-1，9-二氢-9-[4-羟基-3-(羟甲基)-2-亚甲环戊基]-6H-嘌呤-6-酮的制备方法。本发明进一步还公开了用于制备恩替卡韦的各种中间体及其制备方法。

背景技术

乙型肝炎是世界上高发病率和高死亡率的疾病之一，由乙肝病毒(HBV)感染引起。据估计，全世界有3.5亿乙肝病毒携带者，每年约有100-200万人死于乙肝。而且，临床80％以上的原发性肝癌是由HBV引起的，在致癌物排名中仅次于烟草，居第二位。在中国，慢性乙型肝炎病毒的携带率高达9.7％。肝癌已经成为中国的第二大癌症，每年有约50万人死于由乙型肝炎引起的原发性肝细胞肝癌(HCC)，以及晚期肝硬化。

恩替卡韦Entecavir(BMS-200475)是一种能有效抑制乙型肝炎病毒复制的脱氧鸟核苷类似物，由Bristol-Myers Squibb公司研究，具有较强的抗HBV作用，也可抑制拉米夫定引起的YMDD变异病毒株感染。其化学名为[1S-(1α，3α，4β)]-2-氨基-1，9-二氢-9-[4-羟基-3-(羟甲基)-2-亚甲环戊基]-6H-嘌呤-6-酮。恩替卡韦主要用于治疗成人伴有病毒复制活跃和血清转氨酶持续增高，或肝组织学为活动性病变的慢性乙肝感染。

关于恩替卡韦的制备方法的文献报道主要有，美国专利(US 5,206,244)公开了恩替卡韦的制备和治疗乙型肝炎的用途。改进后的合成恩替卡韦方法公开于文件WO98/09964和WO04/052310中。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种新型恩替卡韦的制备方法。

本发明的另一个目的是公开了用于制备恩替卡韦的各种中间体及其制备方法。

本发明提供的恩替卡韦(式Z-9)的制备方法，包括下列步骤：

(a)将式V-1与环戊二烯钠及(-)-二异松蒎基甲硼烷进行反应后制成Z-1；

(b)将Z-1进行环氧化形成化合物Z-2；

(c)采用侧链保护基将Z-2的羟基加以保护形成Z-3；

(d)将Z-3与嘌呤类化合物30缩合形成Z-4；

(e)对Z-4中的氨基加以保护得到Z-5；

(f)Z-5经DMP氧化制备得到Z-6；

(g)向亚甲基化试剂中加入Z-6制得Z-7；

(h)去除Z-7化合物中的氨基保护基制得Z-8；

(I)Z-8化合物进一步脱去羟基保护基得到恩替卡韦(式Z-9)化合物。

本发明所述的R为苯环邻位或对位取代的C₁～C₄烷基；优选R为苯环对位取代的甲基。

本发明所述的前体DMP化学名称是1，1，1-三乙氧酰基-1，1-二羟基-1，2-苯碘酰-3(1H)-酮(DMP，Dess-Martin periodinane)；所述的亚甲基化试剂为锌-四氯化钛-二溴甲烷络合物，其制备方法详见参考实施例。

本发明所述的V-1通常采用如下的方法制备：

在无水、隔绝空气的条件下，将R取代的苄醇加入到有机溶剂中，低温条件下，加入多聚甲醛，通入HCL气体，控制反应温度低于0-5℃，搅拌至溶液澄清，过滤，减压浓缩至干，得到V-1。

优选Z-1化合物的制备包括：将环戊二烯钠在无水、N₂氛围下，在-50～-20℃、N₂氛围下，于1-3小时内加入到搅拌着的R取代的苄基氯甲基醚的四氢呋喃溶液中，加毕，然后冷却至-70～-50℃，加入(-)-二异松蒎基甲硼烷，将反应在-60～-20℃下搅拌1-3小时，然后升温至0-5℃搅拌16-20小时。经后处理后的粗品在硅胶柱上进行柱层析，制得Z-1化合物。

本发明所述的Z-8化合物的制备中，Z-8化合物采用3N盐酸进行酸水解。过滤，减压浓缩得到剩余物。将其在硅胶柱上进行柱层析，用三氯甲烷∶乙醇＝10-20∶1的展开剂进行梯度洗脱。得到纯的产品。

本发明所述的Z-9化合物的制备中，Z-9化合物冷却至-78～-60℃，缓慢滴入0.1-2M的三氯化硼的二氯甲烷溶液，反应在-78～-60℃搅拌2-8小时，经后处理后，得微黄色不含结晶水的固体粉末。采用去离子水重结晶得到含一个结晶水的Z-9化合物。

本发明制备的恩替卡韦可以包括：无水形式的恩替卡韦粗品，经去离子水精制析出的含一个结晶水的白色结晶体以及烘干过程中形成的含不同比例结晶水的恩替卡韦。

本发明所述的恩替卡韦制备方法与现有技术相比所具有的积极效果在于：

本发明的制备方法与现有文献报道的制备方法相比，具有收率高，产品纯度好，后处理操作简单，环境友好，适合工业化生产等特点。

为了能更加清楚的表述本发明的恩替卡韦的制备方法，现将本发明的合成工艺路线表述如下：

具体实施方式：

下面结合实施例对本发明做进一步的说明，实施例仅为解释性的，决不意味着它以任何方式限制本发明的范围，发明的化合物经高效液相色谱(HPLC)，薄层色谱(TLC)，熔点(m.p.)进行检测，随后还可以采用核磁共振(′HNMR/¹³CNMR)确证其结构。

实施例1

(1S-反式)-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]-3-环戊烯-1-醇的制备(Z-1)

在无水、N₂保护下，将150ml无水四氢呋喃加入反应瓶中，搅拌下分批加入60％氢化钠(17.36g，0.434mol)，降温至-10℃，用1小时将环戊二烯(28.68g，0.434mol)加入。加毕，在0℃将混合物导入加料漏斗中，并在-50℃、N₂氛围下，于1-3小时内加入到搅拌着的对甲基苄基氯甲基醚(74.0g，0.434mol)的四氢呋喃(150ml)溶液中。加毕，于-50℃下搅拌1-3小时。然后冷却至-70℃，加入四氢呋喃(390ml)后，接着加入(-)-二异松蒎基甲硼烷(124g，0.434mol)，将反应在-60℃下搅拌1小时，然后升温至5℃搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩至原体积的一半，加入乙醚(390ml)，冷却至0℃，滴加3N的NaOH溶液(145ml，0.434mol)，保持内温低于0℃。然后小心滴加30％的过氧化氢(145ml)，滴加过程中保持内温低于12℃。加毕，于0-10℃之间搅拌1小时。分层，水层用乙醚(300ml)洗，合并所有有机层，用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到剩余物。将其在硅胶柱上进行柱层析，用石油醚∶乙醚＝2∶1的展开剂进行洗脱。得到28.0g纯的产品。

实施例2

[1S-(1α，2α，3β，5α)]-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]-6-氧杂二环[3.1.0]己-3-醇的制备(Z-2)

在无水、氮气氛围下，将(1S-反式)-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]-3-环戊烯-1-醇(22.0g，0.1mol)、乙酰丙酮氧钒(280mg)和无水二氯甲烷50ml，加入反应瓶中，然后保持室温下，于1.5小时内将70％叔丁基过氧化氢(25.2ml，0.18mol)加入反应瓶中。反应室温搅拌16小时，反应混合物降温至0℃，滴加110ml饱和Na₂SO₃溶液，滴加过程保持温度在20℃以下。滴加完毕，室温搅拌2小时。分层，水相用二氯甲烷萃取两次(50ml×2)，合并有机相，水洗，饱和氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干得到剩余物。将其在硅胶柱上进行柱层析，用石油醚∶乙醚＝2∶1的展开剂进行洗脱。得到20.0g纯的产品。

实施例3

[1S-(1α，2α，3β，5α)]-3-(苯甲氧基)-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]-6-氧杂二环[3.1.0]己烷的制备(Z-3)

在室温及氮气氛围下，将160ml无水四氢呋喃加入反应瓶中，搅拌下分批加入60％氢化钠(3.32g，82.7mmol)，然后向反应瓶中滴加[1S-(1α，2α，3β，5α)]-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]-6-氧杂二环[3.1.0]己-3-醇(17.6g，75mmol)的四氢呋喃(80ml)溶液。加毕，室温搅拌2小时，加入苄基溴(9.83ml，82.7mmol)和四丁基碘化铵(266mg)，反应室温下搅拌3小时。加入乙醇(20ml)，10分钟后，减压蒸除溶剂，剩余物加150ml水和150ml乙醚，分出有机相。水相用乙醚萃取(150ml×2)，合并有机相，水洗，饱和氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩得到剩余物。将其在硅胶柱上进行柱层析，用石油醚∶乙醚＝2∶1的展开剂进行洗脱。得到18.8g纯的产品。

实施例4

[1S-(1α，2β，3α，5β)]-5-[2-氨基-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤-9-基]-3-(苯甲氧基)-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]环戊醇的制备(Z-4)

在无水、氮气氛围下，将[1S-(1α，2α，3β，5α)]-3-(苯甲氧基)-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]-6-氧杂二环[3.1.0]己烷(38.9g，120mmol)、2-氨基-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤(57.8g，240mmol)和无水DMF(480ml)加入反应瓶中，搅拌升温至60℃，将氢化锂(480mg，60mmol)加入反应瓶中，反应温度升至125℃，并维持该温度搅拌10小时，然后室温搅拌6小时。加入冰乙酸(3.42ml，60mmol)，反应10分钟，将反应混合物减压浓缩得到剩余物。将其在硅胶柱上进行柱层析，用二氯甲烷∶甲醇＝50∶1的展开剂进行洗脱。得到66.0g纯的产品。

实施例5

[1S-(1α，2β，3α，5β)]-5-[2-[[(4-甲氧基苯基)二苯甲基]氨基]-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤-9-基]-3-(苯甲氧基)-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]环戊醇的制备(Z-5)

在无水、氮气氛围下，将[1S-(1α，2β，3α，5β)]-5-[2-氨基-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤-9-基]-3-(苯甲氧基)-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]环戊醇(56.5g，100mmol)和无水二氯甲烷(750ml)加入反应瓶中，然后再加入对甲氧苯基氯二苯基甲烷(34.1g，110mmol)，三乙胺(23.8ml，170mmol)和4-二甲基氨基吡啶(400mg)。反应室温搅拌5-10小时。将反应混合物用5％碳酸氢钠水溶液(300ml)洗，然后用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩至干得到剩余物。将其在硅胶柱上进行柱层析，用二氯甲烷∶甲醇＝50∶1的展开剂进行洗脱。得到40g纯的产品。

实施例6

[2R-(2α，3β，5α)]-5-[2-[[(4-甲氧基苯基)二苯甲基]氨基]-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤-9-基]-3-(苯甲氧基)-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]-1-环戊酮的制备(Z-6)

在无水及氮气保护下，将DMP(20g，48mmol)、二氯甲烷(500ml)和叔丁醇(4.84ml，52.8mmol)加入反应瓶中，室温搅拌反应10分钟，然后加入[1S-(1α，2β，3α，5β)]-5-[2-[[(4-甲氧基苯基)二苯甲基]氨基]-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤-9-基]-3-(苯甲氧基)-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]环戊醇(33.5g，40mmol)的二氯甲烷(350ml)溶液，室温下搅拌30分钟。反应完毕，向反应液中加入乙酸乙酯(3500ml)和混合溶液(10％亚硫酸钠溶液∶饱和碳酸氢钠溶液∶饱和氯化钠溶液1.5∶1∶1)1000ml，搅拌1小时，分层，用乙酸乙酯(400×2ml)萃取水层，合并有机相，用无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩至干，得浅黄色粉末33g。

实施例7

[1S-(1α，3α，4β)]-N-[(4-甲氧基苯基)二苯甲基]-6-(苯甲氧基)-9-[2-亚甲基-4-(苯甲氧基)-3-[(对甲基苯甲氧基)甲基]环戊基]-9H-嘌呤-2-胺的制备(Z-7)

在无水及氮气氛围下，将[2R-(2α，3β，5α)]-5-[2-[[(4-甲氧基苯基)二苯甲基]氨基]-6-(苯甲氧基)-9H-嘌呤-9-基]-3-(苯甲氧基)-2-[(对甲基苯甲氧基)甲基]-1-环戊酮(25.1g，30mmol)和无水二氯甲烷(550ml)加入反应瓶中，然后加入锌-四氯化钛-二溴甲烷络合物的四氢呋喃溶液(550ml)。反应室温搅拌3小时，将反应液缓慢倾入饱和碳酸氢钠溶液(3000ml)和二氯甲烷(3000ml)的混合溶液中，搅拌0.5小时。过滤，滤液分层，水层用二氯甲烷萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到20.5g浅黄色粗的所需产品。

实施例8

[1S-(1α，3α，4β)]-2-氨基-1，9-二氢-9-[2-亚甲基-4-(苯甲氧基)-3-[(对甲基苯甲氧基)甲基]环戊基]-6H-嘌呤-6-酮的制备(Z-8)

将[1S-(1α，3α，4β)]-N-[(4-甲氧基苯基)二苯甲基]-6-(苯甲氧基)-9-[2-亚甲基-4-(苯甲氧基)-3-[(对甲基苯甲氧基)甲基]环戊基]-9H-嘌呤-2-胺的粗品(20g)，四氢呋喃(200ml)，甲醇(200ml)和3N盐酸(100ml)加入反应瓶中，反应升温至50-60℃搅拌2-5小时，然后冷却至室温。用1N氢氧化钠调节PH至7.3，用乙酸乙酯(1000ml×3)萃取混合物。合并有机相，用无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩得到剩余物。将其在硅胶柱上进行柱层析，用三氯甲烷∶乙醇＝20∶1至10∶1的展开剂进行梯度洗脱。得到3.50g纯的产品。

实施例9

[1S-(1α，3α，4β)]-2-氨基-1，9-二氢-9-[4-羟基-3-(羟甲基)-2-亚甲基环戊基]-6H-嘌呤-6-酮的制备(Z-9)

在无水及氮气氛围下，将[1S-(1α，3α，4β)]-2-氨基-1，9-二氢-9-[2-亚甲基-4-(苯甲氧基)-3-[(对甲基苯甲氧基)甲基]环戊基]-6H-嘌呤-6-酮(3.26g，7.0mmol)和无水二氯甲烷(120ml)加入反应瓶中，冷却至-78℃，缓慢滴入1M的三氯化硼的二氯甲烷溶液(70ml，70mmol)。加毕，反应在-78℃搅拌2小时。然后缓慢滴入甲醇(600ml)，自然升至室温，减压浓缩至近干，再加入甲醇，继续减压浓缩至近干，重复三次，将剩余物溶于甲醇(50ml)和水(50ml)中，用1N氢氧化钠调节PH至6.8，减压浓缩至有大量固体析出，自然冷却后，冰水浴冷却2小时，过滤，用冷却的去离子水洗，得微黄色固体粉末1.40g。

精制：将1.40g粗品产物加入到200ml去离子水中，回流溶解，热过滤。滤液自然冷却至室温，再用冰水浴冷却2小时，有白色结晶析出。过滤，用冷却的去离子水洗，抽干，真空干燥得类白色晶体粉末1.10g。液相检测纯度：99.7％，熔点：248-252℃。

元素分析：C₁₂H₁₅N₅O₃.H₂O

计算值：C，48.76；H，5.76；N，23.70

测定值：C，48.48；H，5.81；N，23.15

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ10.59(s，1H)，7.66(s，1H)，6.39(s，2H)，5.38(s，1H)，5.12(s，1H)，4.80(d，2H)，4.60(s，1H)，4.25(s，1H)，3.57(s，2H)，2.55(s，1H)，2.15(d，2H)ppm.

¹³C NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ157.0，153.6，151.6，151.4，136.1，116.4，109.4，70.7，63.1，55.3，54.2，39.4ppm.

MS：mw＝277，(M-H)^-＝276

[α]_D＝+24～28°(c＝1，DMF∶甲醇＝50∶50)

参考实施例

1二异松蒎基甲硼烷的制备

在无水、N₂氛围下，将甲硼烷二甲硫醚络合物100ml(1.00mol)和1000ml无水四氢呋喃加入反应瓶中，搅拌下将(1R)-(+)-α-蒎烯(158.8ml，1mol)加入反应瓶。加毕，停止搅拌，瓶子密封，于0-5℃放置16小时。然后再加入(1R)-(+)-α-蒎烯(158.8ml，1mol)，0-5℃搅拌8小时。倾出瓶中的液体，用无水乙醚洗，残余液体抽干。真空干燥，得到210g(-)-二异松蒎基甲硼烷。

2.R取代苄基氯甲基醚的制备

在无水、N₂氛围下，将R取代苄醇(1mol)和200ml二氯甲烷加入反应瓶中，搅拌至全溶。冷却至0℃，加入多聚甲醛(33g，1.1mol)，通入HCL气体，控制反应温度低于0℃，搅拌至溶液澄清，停止通气。加入正己烷1000ml，然后转入分液漏斗，分出有机层，加无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩至干，得到约138gR取代苄基氯甲基醚。

3.DMP的制备

将邻碘苯甲酸(24.8g，0.1mol)和稀硫酸加入到反应瓶中，升温至50℃，分批少量加入溴酸钾，剧烈搅拌反应，在70℃反应2个小时，冰水浴冷却，过滤，滤饼依次用水、乙醇和乙醚洗涤，真空干燥，得粉红色产物25g。

将上述产物25g、对甲苯磺酸(123mg)、醋酐(110ml)加入干燥的反应瓶中，升温至85℃搅拌2小时。反应毕，冰水浴冷却1小时，过滤，用乙醚洗滤饼，真空抽干，得白色粉末20g。

4.锌-四氯化钛-二溴甲烷络合物的制备

在无水、N₂氛围下，将锌粉(28.76g，0.44mol)、二溴甲烷(10.1ml，0.143mol)和无水四氢呋喃(300ml)投入反应瓶中，降温至-40℃，然后将四氯化钛(11.5ml，0.105mol)缓慢滴加到反应瓶中。然后自然升温至5℃搅拌4天。