CN101182319A

CN101182319A - 一种从茶多酚中提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法

Info

Publication number: CN101182319A
Application number: CNA2007101152567A
Authority: CN
Inventors: 万升标; 江涛; 孙东魁; 秦旭龙; 张晓瑜
Original assignee: Ocean University of China
Current assignee: Ocean University of China
Priority date: 2007-12-05
Filing date: 2007-12-05
Publication date: 2008-05-21

Abstract

一种从茶多酚中提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法，其特征在于用乙酰化试剂使茶多酚中的多酚物质羟基乙酰化，然后用硅胶柱色谱分离得到全乙酰化的表没食子儿茶素没食子酸酯，再使全乙酰化的表没食子儿茶素没食子酸酯在酸性条件下和质子性溶剂中水解得到表没食子儿茶素没食子酸酯，经干燥得到不含溶剂的表没食子儿茶素没食子酸酯。本发明优点是原材料消耗小，收率高，并可以大规模生产表没食子儿茶素没食子酸酯单体。

Description

一种从茶多酚中提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法

技术领域

本发明涉及一种从茶多酚中分离提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法。

背景技术

茶多酚是从茶叶中提取的多酚类活性物质，其中单体化合物有儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、没食子儿茶素(GC)、儿茶素没食子酸酯(CG)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)，表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)，此外还有少量咖啡因和儿茶素聚合物。其中主要成分为表没食子儿茶素没食子酸酯，市售茶多酚中一般含表没食子儿茶素没食子酸酯30-70％。

近年研究表明，茶多酚具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、抗病毒、降血脂、防辐射等多种重要的生物活性，而其中的表没食子儿茶素没食子酸酯的活性最强。基于茶多酚的良好生物活性，其在医药、食品和化妆品中的应用越来越受到人们的重视。尤其是开发其药用价值成为了热点。如临床上已有治疗心血管的茶多酚复方药物“心脑康”，国外开发了将其用于口腔消炎的牙膏和漱口水。2006年10月31日FDA批准加拿大的Epitome制药公司的产品Veregen(成份为95％茶多酚)上市，该产品已作为植物药在皮肤科方面应用于治疗生殖器疣。尽管如此，茶多酚的药用价值还没有被充分开发利用，关键因素是由传统提取工艺获得的茶多酚为混合物并混有少量咖啡因(如CN1562995A，CN1351012，CN1421426A)，因而限制了对其进行药理研究和药物开发。2007年Chan Tak Hang(WO2007041891)发明通过乙酰化从茶叶中提取单体儿茶素的方法，但从茶叶中直接提取存在原材料消耗大，收率低和工艺复杂的缺点。

发明内容

本发明的目的是提供一种从茶多酚中分离提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法，它能克服现有技术的上述缺点。

一种从茶多酚中提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法，其特征在于用乙酰化试剂使茶多酚中的多酚物质羟基乙酰化，然后用硅胶柱色谱分离得到全乙酰化的表没食子儿茶素没食子酸酯，再使全乙酰化的表没食子儿茶素没食子酸酯在酸性条件下和质子性溶剂中水解得到表没食子儿茶素没食子酸酯，经干燥得到不含溶剂的表没食子儿茶素没食子酸酯。

本发明优点是原材料消耗小，收率高，并可以大规模生产表没食子儿茶素没食子酸酯单体。

具体实施方式

本方法以市售的茶多酚为原料，总酚含量为80-98％(重量百分数，下同)，其中表没食子儿茶素没食子酸酯的含量为20-50％。本方法用吡啶、三乙胺或二异丙基乙基胺作溶剂和缚酸剂，用乙酰化试剂如乙酰氯或乙酸酐使茶多酚中多酚物质的羟基全部被乙酰化成酯，反应温度为0℃-30℃。乙酰化产物用硅胶柱色谱分离得到全乙酰化表没食子儿茶素没食子酸酯，其化学名为5，7-二乙酰氧基-2-(3，4，5-三乙酰基苯基)-3，4-二氢-苯并吡喃-3-醇，3，4，5-三乙酰基苯甲酸酯。所述的硅胶为100-300目粒径，所用洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚，两者的体积比为1∶0.5-3，最合适体积比为1∶2。使全乙酰化的表没食子儿茶素没食子酸酯在酸性条件下和质子性溶剂中水解得到表没食子儿茶素没食子酸酯，所用的酸为HCl、H₂SO₄或乙酸，以及能生成这些酸的氯化亚砜、草酰氯、乙酸酐、乙酰氯、乙酰溴。水解所用质子性溶剂为乙酸、水、乙酸、乙醇、甲醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇等含一个到六个碳原子的醇。最后采用真空干燥或冷冻干燥得到不含溶剂的表没食子儿茶素没食子酸酯。

以下结合实施例对本发明作进一步说明。

(1)5，7-二乙酰氧基-2-(3，4，5-三乙酰基苯基)-3，4-二氢-苯并吡喃-3-醇，3，4，5-三乙酰基苯甲酸酯的制备

称取乙酸酐380ml、吡啶350ml，在1000ml的茄形瓶中将乙酸酐和吡啶在冰浴条件下混合搅拌，向冰浴中加入食盐使其温度降至0℃，然后缓缓倒入市售茶多酚样品200g，茶多酚总酚含量为95％，其中表没食子儿茶素没食子酸酯含量为40％。冰浴温度下反应30min后，移至室温，室温下反应72h。经薄层色谱检测反应完全后，搅拌下将反应液倒入约1000ml冰水中，抽滤，水洗。用250ml乙酸乙酯溶解，然后每次用1M300ml稀盐酸洗，共洗3次，再用300ml蒸馏水洗，共洗3次。分离出的有机相用无水Na₂SO₄干燥，旋转蒸发除去溶剂，得到咖啡色粘状固体。用硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚和乙酸乙酯，两者的体积比为1∶2。干燥得浅黄色5，7-二乙酰氧基-2-(3，4，5-三乙酰基苯基)-3，4-二氢-苯并吡喃-3-醇，3，4，5-三乙酰基苯甲酸酯117克，以表没食子儿茶素没食子酸酯计产率为88.7％。熔点：110-111℃；比旋光度[α]_D＝-44.62(c＝1.0，CHCl₃)；产品分子式为C₃₈H₃₄O₁₉，高分辨质谱计算分子离子加氢值为795.1772，实测值为795.1790；核磁共振氢谱¹H NMR(CDCl₃，600MHz)化学位移值为7.5-7.20(m，40H)，6.67(s，2H)，6.44(d，J＝2.4Hz，1H)，6.38(d，J＝2.4Hz，1H)，5.72-5.70(m，1H)，5.22-4.90(m，13H)，4.82-4.69(ABq，J＝11.2Hz，4H)，3.16(dd，J＝17.6，4.4Hz，1H)，3.10(dd，J＝17.6，2.4Hz，1H)；核磁共振碳谱¹³C NMR(CDCl₃，600MHz)化学位移值为165.1，159.1，158.3，155.9，153.1，152.6，142.9，138.6，138.0，137.7，137.1，137.0，136.9，136.7，133.5，128.9(2)，128.8，128.6(2)，128.5，128.4，128.3(2)，128.2(2)，128.1(2)，128.0，127.5，125.2，109.3，106.9，101.2，94.8，94.2，78.2，75.4，75.3，71.4，71.3，70.4，70.2，68.5，26.5。

(2)表没食子儿茶素没食子酸酯制备

向500ml乙酸中通入10克氯化氢气体，加入上述所得5，7-二乙酰氧基-2-(3，4，5-三乙酰基苯基)-3，4-二氢-苯并吡喃-3-醇，3，4，5-三乙酰基苯甲酸酯100g，该固体慢慢溶解。在室温下搅拌反应4小时，反应液颜色最终为浅黄色，经薄层色谱检测反应完全。旋转蒸发除去反应液中的乙酸，经真空干燥得浅黄色表没食子儿茶素没食子酸酯56.5g，收率为98％。熔点：191-193℃；比旋光度[α]_D＝-180.7(c＝1.0，CD₃OD)；产品分子式为C₂₂H₁₈O₁₁，高分辨质谱计算分子离子加氢值为459.0927，实测值为459.0901；核磁共振氢谱¹H NMR(CDCl₃，600MHz)化学位移值为6.94(s，2H)，6.49(s，2H)，5.94(m，2H)，5.51(m，1H)，4.96(s，1H)，2.97(dd，J＝17.58，4.74Hz，1H)，2.83(dd，J＝17.58，2.58Hz，1H)；核磁共振碳谱¹³C NMR(CDCl₃，600MHz)化学位移值为167.6，157.9，157.8，157.2，146.7(2)，146.3(2)，139.8，133.8，130.8，121.5，110.3(2)，107.9(2)，99.4，96.5，95.9，78.6，69.9，26.8。

Claims

1.一种从茶多酚中提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法，其特征在于用乙酰化试剂使茶多酚中的多酚物质羟基乙酰化，然后用硅胶柱色谱分离得到全乙酰化表没食子儿茶素没食子酸酯，使全乙酰化表没食子儿茶素没食子酸酯在酸性条件下和质子性溶剂中水解得到表没食子儿茶素没食子酸酯，经干燥得到不含溶剂的表没食子儿茶素没食子酸酯。

2.根据权利要求1所述的从茶多酚中提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法，其特征在于所述的乙酰化试剂为乙酸酐或乙酰氯。

3.根据权利要求1所述的从茶多酚中提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法，其特征在于所述的全乙酰化表没食子儿茶素没食子酸酯的化学名称为5，7-二乙酰氧基-2-(3，4，5-三乙酰基苯基)-3，4-二氢-苯并吡喃-3-醇，3，4，5-三乙酰基苯甲酸酯。

4.根据权利要求1所述的从茶多酚中提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法，其特征在于所述的硅胶柱色谱分离所用的洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚，乙酸乙酯和石油醚体积比为1∶0.5-3。

5.根据权利要求1所述的从茶多酚中提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法，其特征在于所述的酸性条件下水解所用的酸为硫酸、盐酸、乙酸以及可以产生乙酸的乙酸酐、乙酰氯、乙酰溴中的一种。

6.，根据权利要求1所述的从茶多酚中提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法，其特征在于所述的质子性溶剂为乙酸、水、乙酸、甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、乙二醇或环己醇。

7.根据权利要求1所述的从茶多酚中提取表没食子儿茶素没食子酸酯的方法，其特征在于所述的干燥为真空干燥或冷冻干燥。