CN101181294A - 一种用于治疗骨性关节炎的药物组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于治疗骨性关节炎的药物组合物,本发明组合物由盐酸氨基葡萄糖5-10重量份、硫酸软骨素钠5-10重量份、透明质酸钠1-4重量份组成,加于制药上可接受的药用辅料,采用常规的制剂技术可制成所需的口服剂型。本发明药物组合物具有预防和治疗骨关节炎的作用,可用于制备具有预防和治疗骨关节炎作用的药物,也可用于具有预防骨关节炎作用的保健食品。
Description
技术领域
本发明涉及治疗骨性关节盐的药物组合物,具体涉及由盐酸氨基葡萄糖、硫酸软骨素、透明质酸钠组成的用于治疗骨性关节炎的组合物。
背景技术
骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种危害中老年人健康的慢性退行性骨关节病。临床上以膝骨关节炎最常见。随着世界老龄化人口的增加,OA发病率呈逐年上升的趋势,严重影响中老年人的生活质量,其临床表现为关节疼痛、肿胀和功能障碍,主要病理改变为关节软骨退变、软骨下骨病变以及滑膜的改变,最终导致软骨基质降解、软骨细胞死亡和关节结构完整性破坏。OA的病因是多方面的,包括增龄、磨损、肥胖以及生化、遗传等因素,这些因素抑制软骨基质蛋白多糖合成,促进蛋白多糖、透明质酸和胶原的降解。OA发病机制十分复杂,关节内HA减少和理化性质的改变可能是其中的一个重要环节,受累关节软骨表面粗糙和退化,无定形结构层消失,使其屏障作用不存在。在OA退化软骨中,软骨基质中的蛋白多糖降解增加,使软骨结构破坏,粘弹性降低,进而使软骨股下边缘骨质增生,滑膜炎性肿胀,同时,由于滑液中HA浓度和分子量降低,使润滑和抵抗机械力作用的功能产生障碍。
透明质酸(hyaluronic acid,HA),又名玻璃酸,是一种独特的线性大分子酸性粘多糖,由(1-β-4)D-葡萄糖醛酸(1-β-3)N-乙酰基-D-氨基葡萄糖的双糖单位重复连接组成。对不同组织来源的HA进行的结构测定表明,其结构均一致,没有种属差异,只存在相对分子量的不同,范围为105~107,双糖单位数为300~1100对。HA广泛存在于动物和人体结缔组织细胞间质中,在眼玻璃体、皮肤、脐带、软骨和关节滑液中含量较高。透明质酸已广泛用于骨科、眼科和皮肤烧伤科。HA在关节中以下列几种形式存在并发挥作用:①与蛋白质结合成HA的蛋白复合物游离于关节液中,形成高度的粘弹性,对关节软骨起着减震和润滑等机械保护作用;②充填于滑膜细胞基质和渗入软骨表层的HA对滑膜细胞和胶原纤维起着支持和稳定作用;③软骨基质内的蛋白多糖以聚合体的形式存在,被包绕在胶原纤维间基质内,维持胶质网状结构充盈且具有高度弹性,而HA赋予软骨特殊的多孔性和弹性,因此HA与蛋白多糖的相互作用在维持软骨组织的完整性上起重要作用。
氨基葡萄糖是软骨基质的重要组成物质。氨基葡萄糖是一种氨基单糖,来源于甲壳动物中的加壳素。随着年龄的增长,人体中的软骨合成减少降解增加,软骨会逐渐流失,造成人体骨密度的下降,从而引起多种老年性疾病,骨质疏松、骨关节炎等。科学研究表明,氨基葡萄糖广泛存在于人和动物的软骨、肌腱和韧带等组织中,是关节软骨生物合成和刺激合成聚氨基葡萄糖及透明质酸骨架的基本物质,可促进人体软骨的合成,增加关节韧带及弹性,改善关节活动。适量补充氨基葡萄糖,可减少软骨的流失。现代医学证实,骨关节炎等退行性关节疾病会影响膝、手、脊柱和股骨的功能,而氨基葡萄糖具有软骨保护和修复作用,且补充这类物质已在国外应用多年,几乎没有不良反应。
硫酸软骨素来源于动物组织,是一类硫酸糖胺聚糖,由糖醛酸和葡萄糖胺以糖苷键链接起来的重复二糖单位组成的多糖链的混合物,由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖组成的二糖单位多糖,其中由于硫酸基团位置不同,构成硫酸软骨素A、C、D、E、F、和N等多种异构体,由艾杜糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖硫酸酯组成的二糖单位的多糖称为硫酸软骨素B,又称为硫酸皮肤素。硫酸软骨素分子量在2,000~50,000道尔顿之间,目前上市的产品为硫酸软骨素钠或硫酸软骨素钙的注射液、口服制剂和滴眼液。硫酸软骨素主要通过以下两个机制发挥对骨性关节炎的治疗效果:(1)能够竞争性抑制降解酶的活性,减少软骨基质和关节滑液成分的破坏;(2)减少纤维蛋白血栓的形成,改善滑膜和软骨下骨的血液循环。生理情况下,血小板分泌硫酸软骨素和肝素来平衡血栓形成的倾向,随着年龄的增长,硫酸软骨素的产量减少,被具较少活性的硫酸角质素取代,从而容易形成血栓堵塞血管,加重股关节炎病情。
透明质酸、氨基葡萄糖、硫酸软骨素作为软骨基质的基本组成成分,目前都有用来治疗股关节病,尤其是透明质酸应用最为广泛,但透明质酸在治疗骨性关节炎时,只能起到临时减轻关节压力,此时若加大运动,反倒会加重病情。因此也有发明者想到将透明质酸其它药物合用用来治疗骨性关节炎。中国专利CN1714799A公开了将盐酸氨基葡萄糖和透明质酸钠组合用来治疗骨性关节炎,国际申请PCT/EP2002/012703公开了将透明质酸钠和硫酸软骨素组合来治疗骨关节炎中的软骨损伤症状,中国专利申请CN1817348A公开了将盐酸氨基葡萄糖和硫酸软骨素组合用来治疗关节损伤性疾病,发现将任何两种组合在一起使用,均较单一用透明质酸钠、硫酸软骨素或盐酸氨基葡萄糖来治疗骨性关节炎强。但还没有将三者结合在一起来治疗骨性关节炎的研究。
发明内容
本发明人在骨关节病致病机理的理论基础的指导下,将盐酸氨基葡萄糖、透明质酸钠、硫酸软骨素组合在一起用于治疗骨性关节炎,氨基葡萄糖为合成体内透明质酸、硫酸软骨素的基本单元;透明质酸可以缓解骨关节炎患者的关节压力;硫酸软骨素能抑制蛋白水解酶和溶酶体酶,三者组合在一起,即可在外源上补充软骨基质的基本成分,而由于盐酸氨基葡萄糖的加入,又可刺激机体自身合成内源性软骨基质,如透明质酸和硫酸软骨素,且还能抑制一些水解酶破坏软骨基质成分,三者合用,起到了令人鼓舞的效果,组合在一起后,可更好的起到预防和治疗骨性关节炎的效果。本发明在实验人员的努力下,通过大量的试验筛选,从中找出三者的合理组方配比。
本发明中,包括下述原料药:氨基葡萄糖或其可药用盐、硫酸软骨素或其可药用盐、透明质酸或其可药用盐,三者的重量组分为氨基葡萄糖或其可药用盐5~10重量份,硫酸软骨素或其可药用盐5~10重量份,透明质酸或其可药用盐1~4重量份。优选氨基葡萄糖或其可药用盐5重量份,硫酸软骨素3重量份,透明质酸或其可药用盐2重量份。
本发明中的氨基葡萄糖可以是N-乙酰氨基葡萄糖,其药用盐主要为盐酸氨基葡萄糖和硫酸氨基葡萄糖。
本发明中硫酸软骨素的可药用盐主要是其金属盐,优选硫酸软骨素钠和硫酸软骨素钙。
本发明中透明质酸的可药用盐为其金属盐,优选透明质酸钠。
本发明组方中,三种原料药优选盐酸氨基葡萄糖、硫酸软骨素钠和透明质酸钠,三者重量配比优选为盐酸氨基葡萄糖10份、硫酸软骨素钠6份、透明质酸钠2.5份。
本发明所用的剂型主要是口服制剂,优选片剂、胶囊剂。片剂可以是素片、糖衣片、肠衣片、泡腾片、咀嚼片、舌下含片。胶囊可以是硬胶囊剂、软胶囊剂。
本发明除主药外,还有制药可接受的辅料,这些辅料包括润滑剂、稀释剂、助流剂、填充剂、乳化剂、防腐剂、增溶剂等。
本发明胶囊剂工艺:
盐酸氨基葡萄糖 50g
硫酸软骨素钠 30g
透明质酸钠 12.5g
淀粉 312.5g
将上述主药和辅料淀粉混合均匀,装入1000个硬胶囊中,每个胶囊装0.4g,既得本发明硬胶囊剂。
将上述盐酸氨基葡萄糖换成硫酸氨基葡萄糖或N-乙酰氨基葡萄糖,硫酸软骨素钠换成硫酸软骨素、透明质酸钠换成透明质酸,即为本发明其它原料药胶囊剂处方工艺。
此胶囊剂即可作为药品使用,也可作为保健食品使用。
本发明药物组合物可以用于制备具有治疗和预防骨性关节炎疾病的药物,也可以用于制备具有预防骨性关节炎的保健食品。
具体实施例
以下实施例均从表1的配方中比较,固定盐酸氨基葡萄糖与透明质酸钠比例为4∶1。
表1本发明原料药重量配方
第一组 | 第二组 | 第三组 | 第四组 | 第五组 | 第六组 | 第七组 | |
盐酸氨基葡萄糖 | 0份 | 5份 | 10份 | 0份 | 10份 | 10份 | 10份 |
硫酸软骨素钠 | 0份 | 3份 | 0份 | 6份 | 8份 | 6份 | 5份 |
透明质酸钠 | 0份 | 0份 | 2.5份 | 2.5份 | 2.5份 | 2.5份 | 2.5份 |
实施例1本发明对硝普纳所致软骨细胞调亡的影响
试剂及药品:II型胶原酶、胰蛋白酶、二甲基亚砜、四氮唑蓝(MTT)、甲苯胺染色剂、DMEM培养基、胎牛血清、硝普纳(SNP)
动物:2~3日龄清洁级新西兰兔用于细胞培养
体外兔软骨细胞的制备、培养和鉴定:取初生新西兰兔,处死后酒精消毒,无菌条件下在超净工作台切取幼兔四肢,分离肩、肘、膝关节周围肌肉、关节囊等组织,切取未骨化的软骨组织,放入培养皿,加少许10%FBS DMEM培养液,用眼科剪剪碎成1mm×1mm,室温下离心(1500r/min)5min。除上清后将软骨组织移入烧瓶,加入消化液(0.1%II型胶原酶,0.25%胰酶),37℃连续消化3h,消化后将细胞悬液用200目不锈钢筛网过滤,离心(1600/min)5min。弃上清液,分别接种于培养瓶和6孔培养板中,置于37℃、5%CO2培养箱培养,用于实验的为第2~3代的传代细胞。用甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞的存在。
硝普纳诱导兔软骨细胞凋亡实验:将10mg硝普纳加入1ml培养液中,配成贮存液,使用前再加培养液配制成所需的终浓度。
药液配制:将上述第2~7组组合物10mg各自加入到1ml培养液中,分别用培养液稀释成100ug/ml,在培养体系中分别加入2mmol/L SNP,24小时后将培养的软骨细胞接种于96孔培养板,细胞数为1.0×103/孔。设7组,每组五个复孔,第一组加“培养液+50μg/ml的SNP”,第二至7组加“各自组合物50μg/ml+50μg/ml的SNP”,孵育48小时后,收集细胞,流式细胞仪检测。结果见表2
表2本发明组合物对硝普纳诱导的软骨细胞凋亡的影响
与阴性对照组(培养液+SNP组)相比:*P<0.01
从上表结果可知,六组实验用药组均对硝普纳所诱导的兔软骨细胞凋亡有一定的抑制作用,与阴性对照组相比,均具有显著意义(P<0.01),但盐酸氨基葡萄糖、硫酸软骨素钠、透明质酸钠三种原料药合用时要比其它任何以两种形式组合的原料药效果强,且以盐酸氨基葡萄糖-硫酸软骨素钠-透明质酸钠10∶6∶2.5时,对硝普纳所诱导的兔软骨细胞凋亡抑制作用最为明显。
实施例2本发明组合物对大鼠白陶土诱导关节炎实验
动物:体重130~150g的雌性大鼠70只,随机分成7组,分别为对照组,第二至第七原料药配比实验组。对照组灌胃生理盐水,实验组给予剂量为0.2g/kg BW
实验方法:灌胃给予受试物,1小时后,常规消毒右后肢踝趾关节并注射入10%灭菌白陶土生理盐水悬浮液0.2ml,注射后1、3、5天,以容积测量法测定左右后肢足跖的体积(ml)。每天给予受试物,5天后,按1ml/kg BW的量注射1%伊文思兰注入尾静脉,于注射后2h,乙醚麻醉后处死动物,剪下右足跖,称重,然后浸入3ml盐酸中,与37℃消化18h。消化后,向消化液中加入12%氯苄烷铵4ml,混合并搅动30min,再向每份样品中加入7ml氯仿,并用力振荡,取氯仿层液体在620nm波长下比色,测定光密度。足跖伊文思兰以μg/mg足跖表示;右跖肿胀度(%)=[右后肢足跖体积(ml)-左后肢足跖体积(ml)]/右后肢足跖体积(ml)×100%。结果见表3
表3本发明组合物对大鼠白陶土诱导关节炎大鼠各时相足跖肿胀度
与对照组相比,*P<0.05,**P<0.01
由表3可知,注射白陶土后第5天,与对照组同时相足跖肿胀度比较,差别有统计学意义(P<0.05),其中盐酸氨基葡萄糖-硫酸软骨素钠-透明质酸钠为10∶6∶2.5时,统计学意义更明显(P<0.01),在注射后第三天时,盐酸氨基葡萄糖-硫酸软骨素钠-透明质酸钠三种原料药组合,与对照组同时相足跖肿胀度比较,有统计学意义,而两种原料药组合在一起时,肿胀度要较三中原料药高,统计学意义不明显(P>0.05),三种原料药组合在一起与任何两种原料药的组合相比,各时相的大鼠足跖肿胀度均要相对小,说明三种原料药联合在一起使用治疗关节炎,能起到更好的治疗作用。
Claims (8)
1.一种用于治疗骨性关节炎的药物组合物,其特征在于由下列重量比的原料药组成:氨基葡萄糖或其可药用盐5~10重量份,硫酸软骨素或其可药用盐5~10重量份,透明质酸或其可药用盐1~4重量份。
2.如权利要求1所述的药物组合物,其特征在于氨基葡萄糖或其可药用盐10重量份,硫酸软骨素6重量份,透明质酸或其可药用盐2.5重量份。
3.如权利要求1所述的药物组合物,其中所述的氨基葡萄糖可药用盐主要是指盐酸氨基葡萄糖或硫酸氨基葡萄糖。
4.如权利要求1所述的药物组合物,其中所述的硫酸软骨素可药用盐主要是指硫酸软骨素钠和硫酸软骨素钙。
5.如权利要求1所述的药物组合物,其中所述的透明质酸可药用盐是指透明质酸的钠盐。
6.由含有治疗有效量的权利要求1所述的药物组合物制成的口服制剂。
7.如权利要求1或2所述的药物组合物在制备具有治疗骨性关节炎药物中的应用。
8.如权利要求1或2所述的药物组合物在制备具有预防和调节骨性关节病保健食品中的应用。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20080521 |