CN101129400B - 玉竹多糖在制备治疗冠心病药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及玉竹多糖的医药用途，玉竹多糖可有效地预防和治疗冠心病，特别是抗急性心肌缺血，能明显减轻心肌梗死的程度，缩小心肌梗死范围及梗死面积，减少心肌酶的释放。玉竹多糖可以与药学上可接受的各种辅料制备成临床上可以接受的药物制剂进行实际应用。
Description
技术领域
本发明属于中药新药研发领域，具体涉及玉竹有效部位在制备治疗冠心病药物中的应用。
背景技术
冠心病是中老年人常见的一种心血管疾病。1979年世界卫生组织对冠心病的定义是：由于冠状动脉功能性改变或器质性病变引起的冠脉血流和心肌需求之间不平衡而导致的心肌损害。本病的基本病变是供应心肌营养物质的血管——冠状动脉发生了粥样硬化，故其全称为冠状动脉粥样硬化性心脏病，简称为冠心病。冠心病由于其发病率高，死亡率高，严重危害着人类的身体健康，从而被称作是“人类的第一杀手”。冠心病的发病随年龄的增长而增高，程度也随年龄的增长而加重。有资料表明，自40岁开始，每增加10岁，冠心病的患病率增加1倍。男性50岁，女性60岁以后，冠状动脉硬化发展比较迅速，同样心肌梗塞的危险也随着年龄的增长而增长。
迄今，用于治疗冠心病、心绞痛的药物，可谓品种繁多，不断更新。但是，归结起来大致可分为三大类：即硝酸、亚硝酸脂类；冠状动脉扩张剂；中草药制剂。目前中药制剂以其副作用低，治疗效果好越来越受到人们的关注。
中药玉竹是百合科(Liliaceae)黄精属植物玉竹[Palygonatumodoratum(Mill.)Druce]的地下根茎，味甘微苦，性平微温。《中药大辞典》指出，玉竹主治“烦渴，虚劳发热，消渴善饥，小便频数。”主要用于治疗糖尿病。近代药理学研究认为，玉竹有强心、扩张血管、降血压、降血糖、降血脂和增强免疫功能等作用。中国专利CN1557842A公开了玉竹多糖用于降血糖、降血脂方面的医疗用途。也有关于玉竹抗心肌缺血，治疗冠心病的报道，如玉竹水煎剂有治疗冠心病的作用，并推测主要为苷类成分在起作用。(张言志.玉竹的药理作用.青岛医学院学报.1959，2(3)：11～14)。但目前还未见有关于玉竹多糖治疗冠心病作用的文献报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供中药玉竹有效部位，即玉竹多糖的新的医疗用途，具体为玉竹多糖在制备治疗冠心病药物中的应用。
本发明所述的玉竹多糖可以通过本领域内已经公开的制备方法制备，多糖含量为55％以上，其中含有D-果糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、玉竹果聚糖等玉竹粘多糖成分。具体玉竹多糖的制备方法可以采用专利文献报道的方法(申请号：200410022863.5；公开号：CN1557842A；发明名称：玉竹多糖提取方法、药物制剂制备方法及其用途)。本发明故在此不作详细说明。
本发明所述的玉竹多糖可以采用药学上常规的方法与药学上可接受的各种辅料制备成临床上可以接受的药物制剂，用于冠心病的预防与治疗。该含有玉竹多糖的药物制剂可以以口服制剂，或注射制剂，或吸入剂，或局部皮肤制剂的形式给药。
本发明通过试验证明了玉竹多糖对治疗冠心病有很好的作用效果，特别是具有抗急性心肌缺血的作用，能明显减轻心肌梗死的程度，缩小心肌梗死范围及梗死面积，减少心肌酶的释放。
具体实施方式
用以下实施例对本发明作具体说明，但本发明并不限于下列实施例包含的内容。
实施例1 玉竹多糖对冠脉结扎致大鼠实验性心肌梗死的治疗作用
Wistar大鼠96只，体重260～280g，雌雄兼用。随机分为6组，每组16只，分别为：假手术组、模型组、阳性药组(盐酸地尔硫卓3mg/kg)、玉竹多糖小剂量(40mg/kg)、中剂量(80mg/kg)、大剂量(160mg/kg)。腹腔注射乌拉坦(1000mg/kg)麻醉，分离十二指肠，各组分别记录标准II导联心电图(ECG)1min。胸部常规消毒，左锁骨中线第四肋间开胸，暴露心脏，距左冠状动脉前降支根部约2mm处结扎，送回心脏，关闭胸腔。记录冠脉结扎后II导联心电图，以T波高耸伴有ST段抬高为结扎成功的标志。结扎冠脉15min后记录ECG，作为给药前值，然后经十二指肠给药一次，剂量如前所述。结扎后5h，腹主动脉取血，留血清，以备测心肌四酶等指标。然后处死大鼠，将心脏横切成5片置于0.1％的N-BT(用pH7.4～7.8的0.2mol/L Tris液配制)溶液中，37℃水浴3～5min，洗去多余的染料可见梗死区不着色，非梗死区被N-BT(硝基四氮唑蓝)染为紫蓝色，将心脏切片并照相，用图形分析软件比较心肌梗死面积。实验结果见表1，表2，表3。
表1玉竹多糖对冠脉结扎大鼠心电图T波变化绝对值的影响
(x±s，单位：mV，n＝9)
注：与假手术组比较，▲P<0.05或▲▲P<0.01；与模型组比较，*P<0.05或**P<0.01
由上表可见，冠脉结扎后，与假手术组比较，模型组在15min、30min、1h、2h各点均显著升高T波变化绝对值，经统计学处理差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)；与模型组比较，地尔硫卓组在30min、1h各点均显著降低T波变化绝对值，经统计学处理差异具有显著性(P<0.01)。与模型组比较，玉竹多糖中剂量组在30min、1h各点均显著降低T波变化绝对值，经统计学处理差异具有显著性(P<0.05)；与模型组比较，玉竹多糖大剂量组在30min、1h各点均显著降低T波变化绝对值，经统计学处理差异具有显著性(P<0.01)。
表2玉竹多糖对冠脉结扎大鼠心肌酶的影响(x±s，n＝9)
注：与假手术组比较，▲P<0.05或▲▲▲P<0.001；与模型组比较，*P<0.05或**P<0.01或***P<0.001
AST：谷丙转氨酶 CK-MB：肌酸磷酸激酶(CK)的同工酶
CK：肌酸磷酸激酶 LDH：乳酸脱氢酶
血清心肌四酶可以反映心肌细胞的受损程度，其中CK-MB是肌酸磷酸激酶(CK)的同工酶，只存在心肌细胞，当心肌细胞受损伤时，CK-MB漏出，使其在血清中的活性增高，血清CK-MB活性越高，反映心肌损伤越重。由上表可见，冠脉结扎后，与假手术组比较，模型组能显著升高AST、CK-MB、CK、LDH值，差异具有显著性(P<0.05或P<0.001)；与模型组比较，阳性药及玉竹多糖小、中、大各剂量组均能显著降低AST、CK-MB、CK、LDH，差异具有显著性(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。
表3玉竹多糖对冠脉结扎大鼠心肌梗死面积占全心面积的比例的影响(n＝9)
注：与模型组比较，*P<0.05或**P<0.01
由上表可见，冠脉结扎后，与模型组比较，阳性药组能显著降低梗死面积，梗死区实测值和所占全心面积百分率差异具有显著性(P<0.05)。与模型组比较，玉竹多糖小剂量组对梗死区实测值和所占全心面积百分率均无明显影响。与模型组比较，玉竹多糖中剂量组能显著降低梗死面积，所占全心面积百分率差异具有显著性(P<0.05)。与模型组比较，玉竹多糖大剂量组能显著降低梗死面积，梗死区实测值和所占全心面积百分率差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)。
综上所述：实验结果表明，玉竹多糖对冠脉结扎所致大鼠心肌梗死面积的影响与对血浆AST、CK、LDH、心电图T波变化绝对值的影响结果一致，能明显缩小心肌梗死面积，减少心肌酶AST、CK、LDH的释放，降低心电图T波变化绝对值，对大鼠实验性心肌梗死具有较好的治疗作用。
实施例2玉竹多糖对冠脉结扎致实验性心肌梗死犬的治疗作用
健康成年杂种犬36只，体重12-17kg，雌雄兼用。随机分为6组，每组6只，分别为：假手术组(只穿线不结扎)，模型组，盐酸地尔硫卓组(5mg/kg)，玉竹多糖小剂量组(10mg/kg)，中剂量组(20mg/kg)和大剂量组(40mg/kg)(玉竹多糖各剂量组的剂量由《玉竹多糖对冠脉结扎致大鼠实验性心肌梗死的影响》实验中，大鼠有效剂量按体表面积折算后的等效剂量)。
经3％戊巴比妥钠30mg/kg静脉麻醉。背位固定，颈部皮肤切开，气管插管，连接电动呼吸机。分离左侧颈总动脉，测定血压。分离股静脉，插管以备补液及静脉取血用。于剑突下切开，分离十二指肠，以备给药用。犬右侧卧位，于左侧第四肋间开胸，暴露心脏，做心包术。分离冠脉前降支，于中、下1/3处穿线以备结扎。固定多点式心外膜电极标测ECG，标测点16个。术毕，稳定15min后记录ECG作为结扎前值，同时自股静脉取血，以备检测结扎前的各项血清学指标。结扎冠状动脉后30min，记录ECG作为结扎后给药前值，并经十二指肠给药，假手术组和模型组给予等容量氯化钠注射液。记录给药后5、10、20、30、45、60、90、120、150、180、210、240、300、360min的心外膜ECG。并在实验结束后取血，分离血清以备测血清酶学及其他生化指标；给药后360min处死动物迅速取出心脏。将左心室均匀横切成5片，将5片心肌标本置于0.5％的N-BT(用pH7.4-7.7的0.2mol/L Tris液配制)溶液中，37℃水浴10min，洗去多余的染料后可见梗死区不着色，非梗死区被N-BT染为紫蓝色，用图形分析软件比较心肌梗死面积。
1、对犬心肌梗死程度(∑—ST)的影响(ECG)
与假手术组比较，模型组在结扎后30min及给药后各时间点∑—ST明显升高(p<0.01或p<0.001)；与模型组比较，地尔硫卓组在给药后5～360min可明显降低∑—ST升高的毫伏数(p<0.05或p<0.01或p<0.001)；玉竹多糖各剂量组均不同程度的降低∑—ST升高的毫伏数，玉竹多糖10mg/kg组在45～360min差异具有显著性(p<0.05或p<0.01或p<0.001)；玉竹多糖20mg/kg组在30～180min差异具有显著性(p<0.05或p<0.01)；玉竹多糖40mg/kg组；在20～240min差异具有显著性(p<0.05或p<0.01或p<0.001)。结果见表4。
2、对犬心肌梗死范围(N—ST)的影响(ECG)
与模型组比较，地尔硫卓组能明显降低N—ST的点数，在5～360min差异具有显著性(p<0.05或p<0.01或p<0.001)。玉竹多糖各剂量组可明显降低N—ST的点数，玉竹多糖10mg/kg组分别在60～150min和210～360min，玉竹多糖20mg/kg组在10min、30min和90～360min，玉竹多糖40mg/kg组分别在5～45min，90～360min差异均具有显著性(p<0.05或p<0.01或p<0.001)。结果见表5。
3、对犬心肌梗死范围的影响(N-BT染色)
与模型组比较，地尔硫卓组、玉竹多糖各剂量组均明显缩小心肌梗死的面积，降低心肌梗死的重量，差异具有显著性(p<0.05或p<0.001)。结果见表6。
4、对犬血清心肌酶(CK、AST、LDH、CK-MB)的影响
与假手术组比较，给药后模型组的CK、CK-MB、AST明显升高，差异具有显著性(p<0.05或p<0.01或p<0.001)，LDH有升高趋势，但差异没有统计学意义；与模型组比较，给药后盐酸地尔硫卓组的CK、CK-MB明显降低(p<0.05)，AST有降低趋势但没有统计学意义，LDH无明显变化；给药后玉竹多糖各剂量组的CK明显降低，差异具有显著性(p<0.05或p<0.01)，20mg/kg、40mg/kg剂量组的CK-MB降低(p<0.05)，10mg/kg剂量组的CK-MB无明显变化，玉竹多糖小、中剂量组的AST、LDH无明显变化；大剂量组药后360min可以降低AST含量。结果见表7、8、9。
5、对犬血清超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)的影响
与假手术组比较，模型组SOD活力明显降低(p<0.001)；与模型组比较，盐酸地尔硫卓组、玉竹多糖各剂量组能明显提高SOD的活力，差异具有显著性(p<0.05或p<0.01或p<0.001)。与假手术组比较，模型组MDA的含量无明显变化；与模型组比较，盐酸地尔硫卓组及玉竹多糖各剂量组能明显降低MDA的含量，差异具有显著性(p<0.05或p<0.01)。结果见表10、11。
表6玉竹多糖对冠脉结扎犬心肌梗死面积占左心室面积的比例的影响(n＝6)
注：与模型组比较**p<0.01
表7、玉竹多糖对实验性心肌梗死犬肌酸激酶同工酶(CK-MB)的影响
(x±s，n＝6)单位：U/L
注：▲▲▲p<0.001与假手术组比较，*p<0.05**p<0.01与模型组比较
表8、玉竹多糖对实验性心肌梗死犬肌酸激酶(CK)的影响
(x±s，n＝6)单位：U/L
注：与假手术组比较▲▲p<0.01▲▲▲p<0.001，与模型组比较*p<0.05**p<0.01
表9、玉竹多糖对实验性心肌梗死犬乳酸脱氢酶(LDH)的影响
(x±s，n＝6)单位：U/L
表10、玉竹多糖对实验性心肌梗死犬超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响
(x±s，n＝6)单位：U/ml
注：▲▲▲p<0.001与假手术组比较，*p<0.05**p<0.01***p<0.01与模型组比较
表11、玉竹多糖对实验性心肌梗犬丙二醛(MDA)含量的影响
(x±s，n＝6)单位：nmol/ml
注：▲p<0.05与假手术组比较，*p<0.05**p<0.01与模型组比较
Claims (2)
1.玉竹多糖在制备治疗冠心病药物中的应用，其特征在于制备治疗心肌梗死、急性心肌缺血药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于缩小心肌梗死面积，减少心肌酶ASK、CK、LDH的释放。
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