CN101095708B - 柴胡总多糖在制备防治系统性红斑狼疮药物中的用途 - Google Patents
柴胡总多糖在制备防治系统性红斑狼疮药物中的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101095708B CN101095708B CN200710043451A CN200710043451A CN101095708B CN 101095708 B CN101095708 B CN 101095708B CN 200710043451 A CN200710043451 A CN 200710043451A CN 200710043451 A CN200710043451 A CN 200710043451A CN 101095708 B CN101095708 B CN 101095708B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sle
- group
- bupleurum
- polysaccharide
- radix bupleuri
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 241000202726 Bupleurum Species 0.000 title claims abstract description 35
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 title abstract description 3
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 title abstract 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 claims abstract description 70
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 29
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 28
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 28
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 6
- 241000213015 Bupleurum scorzonerifolium Species 0.000 claims description 5
- 239000012567 medical material Substances 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- -1 centrifugal Substances 0.000 claims description 4
- 241001132256 Bupleurum smithii Species 0.000 claims description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 3
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 3
- 239000000385 dialysis solution Substances 0.000 claims description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 3
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 claims description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 abstract description 42
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 abstract description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 abstract description 2
- 206010061481 Renal injury Diseases 0.000 abstract 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 abstract 1
- 208000037806 kidney injury Diseases 0.000 abstract 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 18
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 18
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 13
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 13
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 9
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 9
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 8
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 8
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 7
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 6
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 6
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 5
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 5
- 241000589875 Campylobacter jejuni Species 0.000 description 5
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 5
- 230000002583 anti-histone Effects 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 5
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 5
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 5
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 5
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 5
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 5
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 5
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 5
- LRJOMUJRLNCICJ-JZYPGELDSA-N Prednisolone acetate Chemical group C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(=O)COC(=O)C)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O LRJOMUJRLNCICJ-JZYPGELDSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 241000510654 Bupleurum chinense Species 0.000 description 3
- 208000005777 Lupus Nephritis Diseases 0.000 description 3
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 108010028780 Complement C3 Proteins 0.000 description 2
- 102000016918 Complement C3 Human genes 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 2
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 description 2
- 230000004308 accommodation Effects 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920006184 cellulose methylcellulose Polymers 0.000 description 2
- 238000006757 chemical reactions by type Methods 0.000 description 2
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 2
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 2
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 2
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 2
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 2
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 2
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010001580 Albuminuria Diseases 0.000 description 1
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 206010008531 Chills Diseases 0.000 description 1
- 108010028778 Complement C4 Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010015719 Exsanguination Diseases 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 206010050791 Leukocyturia Diseases 0.000 description 1
- 206010050551 Lupus-like syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000004317 Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108090000856 Lyases Proteins 0.000 description 1
- 208000019255 Menstrual disease Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010050819 Musculoskeletal chest pain Diseases 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010041660 Splenomegaly Diseases 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010046814 Uterine prolapse Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003171 anti-complementary effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- 230000004856 capillary permeability Effects 0.000 description 1
- 229940126678 chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 208000018631 connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 239000000745 gonadal hormone Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 229920005610 lignin Polymers 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000005427 lymphocyte apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003448 neutrophilic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008807 pathological lesion Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001197 polyacetylene Polymers 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 208000037816 tissue injury Diseases 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明属中药领域，具体涉及柴胡总多糖在制备防治系统性药物中的用途。本发明从中药柴胡中分离提取得到总多糖提取物，平均产物收率3.32％，多糖含量超过65％。所述总多糖经整体动物模型试验，结果显示，对系统性红斑狼疮样综合征小鼠的自身免疫反应亢进和肾损伤有明显的保护作用，证实对系统性红斑狼疮样综合征有防治作用。可制备防治系统性红斑狼疮药物和防治自身免疫性疾病等药物。
Description
技术领域
本发明属中药领域，涉及中药柴胡总多糖新的药用用途。具体涉及柴胡总多糖在制备防治系统性红斑狼疮药物中的用途。
背景技术：
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种病因不甚明确的炎性结缔组织病，主要发病在女性，也可累及儿童。一项多国多中心研究表明，目前系统性红斑狼疮的发病率为12.5/10万～39/10万。SLE通常被视为代表性的自身免疫病，是一种难治的、反复发作、致死率高的严重自身免疫病。SLE自身免疫异常的表型具有高度多样性，几乎涉及整个免疫系统，包括免疫耐受缺损、淋巴细胞凋亡障碍、T或B细胞功能调节障碍、NK细胞功能缺损、补体缺陷、自身抗原抗体形成的免疫复合物清除障碍、细胞因子分泌调节障碍等。除皮肤、粘膜外，常累及肾脏、心脏、肝脏、肺以及神经系统等内脏器官，常伴有发热、乏力、关节痛等全身症状，并在血液中存在多种抗自身抗体，是一种累及多系统、临床表现复杂、病程迁延反复的自身免疫性疾病。
补体系统在自身免疫性疾病的预防及疾病损伤中，起着所谓″双刃剑″的作用。一方面，补体系统功能的正常，可以有效地促进循环免疫复合物的运送及清除：另一方面，补体系统功能的缺陷，包括组分的缺失或功能的失常，又会参与对组织的损伤。SLE活动期患者体内B淋巴细胞活性增强，产生大量抗自身尤其是抗ds-DNA抗体，与自身抗原在体内形成大量免疫复合物，活化补体，消耗大量补体C3和C4成分，使C3，C4降低。而非活动期SLE患者B淋巴细胞活性基本正常，体内自身抗体水平也基本正常，补体消耗减少，使补体正常或轻度偏高。因此，血清中高Ig，低补体C3，C4是SLE活动性的重要指标。补体活化造成的III型变态反应的直接作用和对免疫细胞功能的影响可加重SLE的病理损害，影响SLE病程的发展和临床表现。
由于SLE患者体内产生大量的循环免疫复合物沉积于组织、器官等，尤其是肾脏，常可引起肾小球肾炎(即狼疮性肾炎)。一旦免疫复合物沉积于肾组织内即激活补体系统，引起一系列的免疫损伤反应(III型变态反应)：血管内凝血因子的激活，毛细血管通透性增加，中性粒细胞、单核细胞等炎症细胞的浸润，局部组织细胞的坏死，蛋白溶解或裂解酶的大量释放，以及一系列调节肾小球细胞增殖、基质增生的细胞因子的释放等等，从而产生肾脏的各种病理变化。系统性红斑狼疮(SLE)的肾脏病变称为狼疮性肾炎(Lupus Nephritis，LN)。LN是SLE的重要临床组成部分。SLE患者约35％～90％有肾脏累及的临床表现，如蛋白尿、红、白细胞尿，管型尿及肾小管和小球滤过功能的变化。肾脏病理检查发现：90％患者在光镜下可出现异常；采用免疫荧光或电镜等复杂技术，几乎所有SLE患者均有不同程度的肾脏累及。肾脏损害的严重程度与SLE的预后密切相关。多数SLE患者最终出现肾功能不全，严重影响着患者的生命(毕志刚，刘晓华.红斑狼疮现代诊疗.第1版[M].江苏：江苏科学技术出版社，2000.98-100)。SLE的治疗主要以对症的长期监控治疗为主，治疗药物主要为非甾体类抗炎药、免疫抑制剂、静脉注射免疫球蛋白、性激素等治疗药物。尽管糖皮质激素及免疫抑制剂能控制病情，但其长期应用产生的不良反应也是患者致死原因之一。
研究表明，高水平抗自身抗体和补体系统的过度激活所引发的免疫性组织损伤是SLE患者发病的重要机制，而且与SLE的发生与预后有显著联系。通过特异性抑制补体组成成分激活，降低抗ds-DNA抗体水平，有望提高治疗SLE的临床疗效，减少不良反应。临床急需高效低毒的药物来防治系统性红斑狼疮。
柴胡为常用中药，为伞形科柴胡属(Bupleurum)多种植物的根，具有疏散退热、舒肝、升阳的功效，主治感冒发热、寒热往来、疟疾、胸肋胀痛、月经不调及子宫脱垂等症。柴胡的化学成分相当复杂，迄今为止，已报道含有皂甙、挥发油、黄酮、甾醇、香豆素、糖类、木质素、有机酸、多炔及生物碱等。现代药理研究证明柴胡具有解热、镇痛、镇静、抗炎、免疫调节、抗菌、抗病毒及抗肿瘤等作用。
文献(张兴权，陈鸿珊.中国药理学与毒理学杂志，1989，3(1)：31.)报道柴胡(Bupleurum chinense DC)多糖能显著增加脾系数；提高巨噬细胞和天然杀伤细胞功能；能提高病毒特异抗体滴度；能明显增加淋巴细胞转化率和皮肤迟发超敏反应，显示免疫促进作用。从狭叶柴胡(Bupleurum scorzonerifolium Willd)中分离出的黄酮和皂苷显示良好的免疫抑制活性(Wen JC，Li WC，Jenn HL，et al.Phytochmistry，2003，64：1375.)。从其他柴胡(Bupleurum falcatum L)中分出的柴胡多糖II b能抑制补体系统经典途径激活所致的溶血反应，显示免疫抑制作用(Yamada H，Ra KS，Kiyohara H，et al.Carbohydr Res，1989，189：209.)。但未涉及对系统性红斑狼疮的作用。
综观国内外的研究，均未见报道柴胡总多糖的防治系统性红斑狼疮的药效及其药物。
发明内容
本发明的目的是提供中药柴胡总多糖新的药用用途，具体涉及柴胡总多糖在制备防治系统性红斑狼疮药物中的用途。
本发明从中药柴胡中分离提取得到总多糖提取物。所述总多糖提取物经体外实验证实有较强抗补体活性，整体动物模型试验证实其具有很强的防治系统性红斑狼疮作用。
本发明所述的中药柴胡包括柴胡(Bupleurum chinense DC)，狭叶柴胡(Bupleurum scorzonerifolium Willd)和小叶黑柴胡(Bupleurum smithii Wolff)。
本发明的目的通过下述方法实现：
1、制备柴胡总多糖：
柴胡药材以95％乙醇冷浸提取，滤过，药渣于室温下置通风处晾干，然后用热水提取3次，滤过，合并提取液，浓缩，离心，上清液以三氯醋酸去游离蛋白，离心，上清液用水透析3天，透析液浓缩至小体积后加乙醇至含醇量80％，离心，沉淀冷冻干燥即得总多糖提取物，收率达3％以上，多糖含量超过65％。
2、柴胡总多糖用于防治系统性红斑狼疮样综合征试验：
按常规方法，选用昆明种和BALB/c小鼠，以空肠弯曲菌灭活菌株免疫，建立系统性红斑狼疮综合征模型。柴胡总多糖灌胃给药。将试验小鼠在实验结束处理后，观察动物的血清中抗体水平及尿蛋白水平。取肾，石蜡固定，切片，显微镜下观察病理改变，取脾和胸腺测定器官指数。
结果证实，柴胡总多糖对小鼠狼疮样综合征引起的肾损伤有明显的保护作用。整体试验证实柴胡总多糖对小鼠系统性红斑狼疮有防治作用。
附图说明
图1是SLE模型小鼠(昆明种)尿蛋白水平。
图2是SLE模型小鼠(昆明种)抗ds-DNA抗体水平。
图3是空白对照组小鼠(昆明种)肾病理切片图。
图4是模型对照组小鼠(昆明种)肾病理切片图。
图5是SLE模型组小鼠(昆明种)肾病理切片图。
图6是柴胡多糖给药组小鼠(昆明种)肾病理切片图。
图7是阳性对照(泼尼松)组小鼠(昆明种)肾病理切片图。
图8是SLE模型小鼠(BALB/c)尿蛋白水平。
图9是SLE模型小鼠(BALB/c)抗ds-DNA抗体水平。
图10是SLE模型小鼠(BALB/c)抗组蛋白抗体水平。
图11是空白对照组小鼠(BALB/c)肾病理切片图。
图12是模型对照组小鼠(BALB/c)肾病理切片图。
图13是SLE模型组小鼠(BALB/c)肾病理切片图。
图14是柴胡多糖(30mg/kg)组小鼠(BALB/c)肾病理切片图。
图15是柴胡多糖(15mg/kg)组小鼠(BALB/c)肾病理切片图。
图16是阳性对照(泼尼松)组小鼠(BALB/c)肾病理切片图。
具体实施方式
实施例1
取柴胡药材100g，以95％乙醇冷浸提取，药渣于室温下置通风处晾干，然后用热水提取3次，滤过，合并提取液，浓缩，离心，上清液以S三氯醋酸去游离蛋白，离心，上清液用水透析3天，透析液浓缩至小体积加乙醇至含醇量80％，离心，沉淀冷冻干燥即得总多糖，产物收率达3％以上，多糖含量超过65％。
所述的柴胡药材可选自柴胡(Bupleurum chinense DC)，狭叶柴胡(Bupleurumscorzonerifolium Willd)或小叶黑柴胡(Bupleurum smithii Wolff)。
表1是柴胡总多糖收率及含量。
表1
实施例2
昆明种小鼠30只(16-20g)，随机分为5组(A、B、C、D、E组)。A组为正常对照组，B组为模型对照组，C组为SLE模型组，D组为柴胡多糖组，E组为醋酸泼尼松组。初次免疫，A组为正常对照组，尾根部皮下注射生理盐水，B组为模型对照组，尾根部皮下注射弗氏完全佐剂，其余各组以空肠弯曲菌配合弗氏完全佐剂尾根部皮下注射，免疫诱导SLE样综合征，每只小鼠注射量为50μl。初次免疫后第14天加强免疫1次：A组和B组皮下注射生理盐水，其余各组皮下注射空肠弯曲菌菌悬液，每只小鼠注射量为0.2ml。小鼠在免疫当天开始灌胃给药，每天一次至第32天。D组柴胡多糖给药剂量为30mg/kg，E组醋酸泼尼松组给药剂量为5mg/kg，B组和C组均给予配药用空白赋形剂(5％羧甲基纤维素钠，CMC)，A组不灌胃。
小鼠于免疫后d32，摘眼球放血处死，取血测定血清抗自身抗体水平，检测免疫功能。取肾，石蜡固定，切片，显微镜下观察病理改变。病理损伤评级，按损伤的严重程度分为轻、中、重度，分别给1、2、3分，无病理损伤给0分。
结果显示，与正常对照组和模型对照组相比，SLE模型鼠的尿蛋白明显升高，柴胡多糖对SLE样综合征小鼠尿蛋白有明显的降低作用(附图1)。
与正常对照组和模型对照组相比，SLE模型鼠的抗ds-DNA抗体水平明显升高，柴胡多糖对SLE样综合征小鼠抗ds-DNA抗体水平有明显的降低作用(附图2)。
肾病理检测显示，正常组小鼠肾脏正常，模型对照小鼠基本正常。模型组小鼠肾脏均有炎性细胞侵润、肾小球增大和肾小球囊腔缩小。柴胡多糖给药组仅有一只小鼠肾脏有肾小球部分增大，肾小球囊腔缩小，无炎性细胞侵润。阳性对照药强地松仅有一只小鼠的肾小球部分增大、囊腔缩小，伴炎性细胞侵润。
结果表明，柴胡总多糖在体内抑制ds-DNA抗体水平，降低尿蛋白水平，明显改善肾小球的增大，抑制炎性细胞侵润，有缓解SLE样小鼠肾损伤作用。
表2是昆明种小鼠肾病理损伤评级(X±SD)(n＝25)。
表2
其中，*与SLE模型组比较P＜0.05；**与SLE模型组比较P＜0.01。
实施例3
BALB/c小鼠48只(16-20g)，随机分为5组(A、B、C、D、E、F组)。A组为正常对照组(n＝8)，B组为模型对照组(n＝8)，C组为SLE模型组(n＝10)，D组为柴胡多糖30mg/kg组(n＝8)，E组为柴胡多糖15mg/kg组(n＝8)，F组为醋酸泼尼松组(n＝8)。初次免疫，A组为正常对照组，足跖部皮下注射生理盐水，B组为模型对照组，足跖部皮下注射弗氏完全佐剂，其余各组以空肠弯曲菌配合弗氏完全佐剂足跖部皮下注射，免疫诱导SLE样综合征，每只小鼠注射量为50μl。初次免疫后第14天加强免疫1次：A组和B组尾静脉注射生理盐水，其余各组注射空肠弯曲菌菌悬液，每只小鼠注射量为0.2ml。在免疫当天开始给小鼠灌胃给药，每天一次至第34天。D组柴胡多糖给药剂量为30mg/kg，E组柴胡多糖给药剂量为15mg/kg，F组醋酸泼尼松组给药剂量为5mg/kg，B组和C组均给予配药用空白赋形剂(5％羧甲基纤维素钠，CMC)，A组不灌胃。
免疫后第35天，取BALB/c小鼠血测定血清抗自身抗体水平。取小鼠胸腺、脾称重，求器官指数。器官指数＝脏器重(mg)/10g体重。取双侧肾，石蜡固定，切片，显微镜下观察病理改变。病理损伤评级，按损伤的严重程度分为轻、中、重度，分别给1、2、3分，无病理损伤给0分。
结果显示，与正常对照组和模型对照组相比，SLE模型鼠的尿蛋白明显升高，柴胡多糖30mg/kg对SLE样综合征小鼠的尿蛋白有明显的降低作用，柴胡多糖15mg/kg对SLE样综合征小鼠的尿蛋白也有一定的降低作用(附图8)。
与正常对照组和模型对照组相比，SLE模型鼠的抗ds-DNA抗体和抗组蛋白抗体水平明显升高，柴胡总多糖30mg/kg对SLE样综合征小鼠升高的抗ds-DNA抗体和抗组蛋白抗体水平有明显的降低作用；柴胡总多糖15mg/kg对SLE样综合征小鼠的高抗ds-DNA抗体水平有一定的降低作用，但是与模型组相比没有显著性差异，但柴胡总多糖15mg/kg对SLE样综合征小鼠的高抗组蛋白抗体水平有明显的降低作用(附图9，10)。
与正常小鼠和模型对照组相比，免疫使模型组小鼠的脾指数升高。与模型组相比，柴胡总多糖30mg/kg和阳性对照药泼尼松均显著性抑制小鼠免疫后脾指数升高，但泼尼松对脾指数有过度抑制作用，脾指数低于正常小鼠(p＜0.001)，柴胡总多糖15mg/kg对小鼠脾指数无影响。
与正常小鼠和模型对照组相比，免疫使模型组小鼠的胸腺指数升高。与模型组相比，阳性对照药泼尼松能显著性降低胸腺指数，柴胡总多糖30mg/kg和柴胡总多糖15mg/kg对胸腺指数无影响。
表3是BALB/c小鼠的脾指数和胸腺指数(X±SD)(n＝49)。
表3
其中，*与SLE模型组比较P＜0.05；**与SLE模型组比较P＜0.01，***与SLE模型组比较P＜0.001。
肾病理检测显示，正常组小鼠肾脏正常，模型对照小鼠基本正常。模型组小鼠肾脏肾小球肿胀、肾小球囊腔缩小、肾小球细胞数的增多；与模型组小鼠相比，正常组小鼠肾小管正常，模型对照小鼠肾小管基本正常，模型组小鼠肾小管肿胀。柴胡总多糖30mg/kg对SLE样模型小鼠的肾脏病变有明显的改善作用，柴胡总多糖15mg/kg对SLE样模型小鼠的肾脏病变有一定的改善作用(附图11，12，13，14，15)。
表4是BALB/c小鼠肾病理损伤评级(X±SD)(n＝49)。
表4
其中，*与SLE模型组比较P＜0.05；**与SLE模型组比较P＜0.01。
结果证实，柴胡总多糖在体内能抑制SLE样综合征小鼠的抗自身抗体水平的升高(抗ds-DNA抗体和抗组蛋白抗体)，改善小鼠的体液免疫应答亢进，抑制脾肿大；柴胡总多糖在体内能降低SLE样综合征小鼠的尿蛋白水平，明显改善肾小球和肾小管的病变，有缓解SLE样小鼠的肾损伤作用，可制备防治系统性红斑狼疮药物和防治自身免疫性疾病等药物。
Claims (3)
1.柴胡总多糖在制备防治系统性红斑狼疮药物中的用途。
2.按权利要求1的用途，其中所述的柴胡总多糖通过下述方法和步骤制备：
柴胡药材以95％乙醇冷浸提取，滤过，药渣于室温下置通风处晾干，然后用热水提取3次，滤过，合并提取液，浓缩，离心，上清液以三氯醋酸去游离蛋白，离心，上清液用水透析3天，透析液浓缩至小体积后加乙醇至含醇量80％，离心，沉淀冷冻干燥即得总多糖提取物，收率达3％以上，多糖含量为68.2-78.6％。
3.按权利要求2的用途，其中所述的柴胡药材选自柴胡Bupleurum chinenseDC，狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd或小叶黑柴胡Bupleurumsmithii Wolff。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200710043451A CN101095708B (zh) | 2007-07-05 | 2007-07-05 | 柴胡总多糖在制备防治系统性红斑狼疮药物中的用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200710043451A CN101095708B (zh) | 2007-07-05 | 2007-07-05 | 柴胡总多糖在制备防治系统性红斑狼疮药物中的用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101095708A CN101095708A (zh) | 2008-01-02 |
| CN101095708B true CN101095708B (zh) | 2010-05-19 |
Family
ID=39009928
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN200710043451A Expired - Fee Related CN101095708B (zh) | 2007-07-05 | 2007-07-05 | 柴胡总多糖在制备防治系统性红斑狼疮药物中的用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101095708B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104152397A (zh) * | 2013-05-13 | 2014-11-19 | 复旦大学 | 一种致敏动物的脾细胞模型及其在药物筛选中的用途 |
| CN112694543B (zh) * | 2021-01-25 | 2022-08-16 | 广东省中医院（广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院） | 一种多糖及其制法和在制备治疗乙肝的药物中的应用 |
-
2007
- 2007-07-05 CN CN200710043451A patent/CN101095708B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 张兴权,陈鸿珊.柴胡多糖的免疫药理作用,.中国药理学与毒理学杂志第3卷 第1期.1989,第3卷(第1期),第30-33页. |
| 张兴权,陈鸿珊.柴胡多糖的免疫药理作用,.中国药理学与毒理学杂志第3卷 第1期.1989,第3卷(第1期),第30-33页. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101095708A (zh) | 2008-01-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102319400B (zh) | 一种用于凉血止血、滋阴化瘀、养肝明目的中药组合物及其制备方法 | |
| CN101095716B (zh) | 杜仲总多糖在制备防治系统性红斑狼疮药物中的用途 | |
| CN101095708B (zh) | 柴胡总多糖在制备防治系统性红斑狼疮药物中的用途 | |
| CN105031468B (zh) | 具有治疗慢性肾脏病作用的益智仁提取物及其应用 | |
| CN103655544B (zh) | 棕矢车菊素在制备预防或治疗慢性肝损伤和肝纤维化的药物中的应用 | |
| CN114869928B (zh) | 用于治疗脑血管疾病的中药组合物及其用途 | |
| CN103316166B (zh) | 一种治疗痔疮的藏药及其制备方法 | |
| CN113244281B (zh) | 黄水枝醇提物在制备治疗或保护、调节肝纤维化疾病药物中的应用 | |
| CN102526229B (zh) | 一种用于调经养血、理气化瘀的中药组合物及其制备方法 | |
| CN104491459A (zh) | 一种治疗肿瘤的中药组合物 | |
| CN110742935B (zh) | 一种中药组合物在制备治疗慢性酒精性脂肪性肝炎的药物中的应用 | |
| CN102793731A (zh) | 九节茶提取物在降低流感病毒易感性上的应用 | |
| CN103006832B (zh) | 一种升血小板中药组合物及其制备方法 | |
| CN105497167A (zh) | 猫爪草在制备治疗和/或预防溃疡性结肠炎药物方面的新用途 | |
| CN101028311B (zh) | 中药卷柏的新用途 | |
| CN1183952C (zh) | 一种治疗子宫肌瘤病药物及其制备方法 | |
| CN101474214A (zh) | 贯众在制备防治系统性红斑狼疮药物中的用途 | |
| CN103028028B (zh) | 一种治疗原发性肝癌的中药 | |
| CN113616720B (zh) | 一种防治早期先兆流产的药物及制备方法 | |
| CN113876864B (zh) | 一种用于治疗不孕症的药物组合物及其制备方法和用途 | |
| CN101991678B (zh) | 茜草在制备预防和治疗肾脏疾病的药物方面的应用 | |
| CN1333044A (zh) | 消渴降糖宝 | |
| CN106727958A (zh) | 一种治疗酒精性肝炎的药物组合物及其制备方法 | |
| CN105878331A (zh) | 一种多糖组合物、制备方法及其用途 | |
| CN113599484A (zh) | 一种治疗疼痛的中药组合物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20100519 |