CN101088498A

CN101088498A - 补骨脂酚类化合物的应用

Info

Publication number: CN101088498A
Application number: CNA2006100276430A
Authority: CN
Inventors: 郭礼和; 赵刚; 王雪松
Original assignee: HEHONG BIOTECHNOLOGY (SHANGHAI) CO Ltd
Current assignee: Shanghai United Stem Cell Technology Co., Ltd.
Priority date: 2006-06-13
Filing date: 2006-06-13
Publication date: 2007-12-19
Anticipated expiration: 2026-06-13
Also published as: WO2007147330A1; CN101088498B

Abstract

本发明公开了补骨脂酚类化合物在制备治疗精神性疾病和神经性疾病药物中的应用。本发明所提供的补骨脂酚类化合物，通过体外实验以及动物体内实验的研究证明，该类化合物能选择性抑制多巴胺转运蛋白、去甲肾上腺素转运蛋白和5－羟色胺转运蛋白，而对γ－氨基丁酸转运蛋白和L－谷氨酸转运蛋白活性均没有影响，并且该类化合物对细胞没有毒性；同样剂量下，补骨脂酚类化合物抗抑郁药效显著好于目前临床抗抑郁药物盐酸安非他酮。因此，该类化合物将为临床治疗精神性疾病和神经性疾病提供新的药物选择，具有良好的市场前景。

Description

补骨脂酚类化合物的应用

技术领域

本发明涉及补骨脂酚类化合物的新用途，具体涉及补骨脂酚类化合物在制备药物中的应用。

技术背景

精神性疾病和或神经性疾病已严重地影响着全球数百万人的健康。抑郁症是其中一种情绪低落、心情郁郁寡欢、悲观、消极，严重可伴有自杀倾向的精神类疾病，是当今危害人类身心健康最常见的精神疾病，其发病率占世界人口的11％左右。世界卫生组织不久前公布的年度报告显示：抑郁症目前已位居世界十大疾病之第四，预计到2020年，将排在心血管病之后癌症之前，成为危害人类健康缩短寿命的第二大病症。其它常见的精神性疾病和神经性疾病还包括：焦躁症(anxiety disorders)、情感困绕症(mooddisorders)、精神分裂症(schizophrenia)、人格障碍(personality disorders)，性心理障碍(psychosexual disorders)、药物滥用和依赖(drug abuse anddependence)等。这些疾病持续时间从几周到数十年不等，严重影响着各年龄段人们的生活。

随着神经生物学和分子生物学的发展，人们逐渐了解引起精神性疾病和神经性疾病的一些生化因子的作用。研究发现在精神性疾病和神经性疾病中，多巴胺(dopamine，DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)、5羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)这些重要的单胺类神经递质起到了关键的生理作用。

多巴胺是哺乳动物大脑中主要的单胺类神经递质，它控制着运动，认知，情感，正性强化，摄食，内分泌调节等许多功能。在我们的身体和心理健康方面，多巴胺发挥着关键的调节作用。多巴胺的主要失活机制在于突触前膜上的多巴胺转运蛋白(dopamine transporter，DAT)重新摄入多巴胺。DAT是位于突触前膜具有钠离子、氯离子依赖的十二跨膜区域结构蛋白，是终止多巴胺作用和维持胞外多巴胺浓度平衡的基础物质。因此，多巴胺转运蛋白主要功能为介导多巴胺再摄取，降低突触间隙多巴胺浓度，在时程上和强度上调节多巴胺神经信号传导，是调节和维持多巴胺神经功能稳态的最重要的因子(Giros et al.Nature 1996,379，696)。多巴胺转运蛋白已是一些治疗精神性神经性疾病药物(methylphenidate，pemoline，bupropion)的作用靶点。

去甲肾上腺素是哺乳动物大脑中重要的单胺类神经递质，同时也是一种生理激素。作为一种激素，它能增加生物体在紧张情况下血压升高、血管扩张、心跳加快等。作为神经递质，去甲肾上腺素主要调控觉醒、情感、梦等活动。它广泛存在于节后交感神经和中枢神经系统内。神经活动中，去甲肾上腺转运蛋白(NET)可以将释放到突触间隙的NE主动摄入前神经元，从而决定了肾上腺能神经元的功能，而且NET还是一大类神经药物的作用位点。

5-羟色胺广泛分布在动物和植物体内。在人体内，5-羟色胺的作用主要是传递神经信息。5-羟色胺可以直接影响人的心理功能和生理功能，比如人的喜怒哀乐、睡眠、食欲等。当5-羟色胺浓度过高时，人会产生过度兴奋现象；如果5-羟色胺浓度过低，又会产生一系列精神和心理上的病态，比如焦虑，惊恐，震颤麻痹、偏头痛、苯酮尿症、类风湿关节炎，最主要的是抑郁情绪，从而引发恐怖症、强迫症等。在体内，5-HT迅速从嗜铬细胞或5-羟色胺能神经中释放出来，但行使完职能的5-HT必须要靠一种叫做5-羟色胺转运体(SERT)的蛋白运输才能再回到嗜铬细胞或5-羟色胺能神经细胞中，终止神经冲动讯号。因此，SERT的对维系5-HT的浓度有重要调控作用，进而保证人体功能正常。

在近几十年来，通过对精神性神经性疾病发病机理和过程的认识，人们开发出了一些药物，它们通过调控多巴胺、去甲肾上腺素、5-羟色胺的功能活性，来达到治疗目地。精神性神经性疾病如抑郁症，它的主要病理改变表现在中枢神经系统，突出表现为单胺类神经递质的活性低下有关，特别是去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)，近年来，多巴胺(DA)的活性在抑郁发病中的作用也渐渐受到人们的关注(Pardon MC et al BrainRes，2003，971(1)：55-65；Jentsch J D et al Prog Brain Res，2000，126：433-453)。因此，抗抑郁的药物主要是通过干预脑内以上3种神经递质的活性，来达到治疗目的。目前临床抗抑郁药主要为第2代抗抑郁药(即新型抗抑郁药)，包括选择性5-羟色胺(5-HT)再摄取抑制剂(SSRI)，SSRI代表药为氟西汀(Fluxetine)、帕罗西汀(Paroxtine)、舍曲林(Sertraline)、西酞普兰(Citalopram)、氟伏沙明(Fluvoxamine)，它们具有共同的药理作用：抑制突触前膜的5-HT转运蛋白再摄取，进而提高突触间隙的5-HT浓度，达到抗抑郁作用。但是研究发现，现有的药物对许多精神性神经性疾病患者没有作用，例如临床调查表明30％多的抑郁症患者服用已有药物没有疗效。另外一些上市的神经性药物存在无法忍受的副作用，如SSRI药物对单胺类神经递质受体选择性作用导致治疗中产生副反应，主要不良反应是胃肠道功能紊乱，部分病人有失眠、焦虑、性功能障碍。

因此，为了更好地治疗精神性疾病和神经性疾病，开发毒副作用小、有效的新药是十分必要的。

补骨脂酚类化合物是从传统中药补骨脂中分离得到一类化合物，在体外能抑制金黄色葡萄球菌等生长，主要用于抑菌药物等。由于该物质来源于天然物质，毒性和副作用小，能否将其用于治疗精神性疾病和神经性疾病，将具有十分重要的临床价值。

发明内容

本发明需要解决的技术问题是公开补骨脂酚类化合物在制备治疗精神性疾病和或神经性疾病药物中的应用，以拓展补骨脂酚类化合物的应用范围，满足临床治疗精神性疾病和神经性疾病的需要。

本发明再一个需要解决的技术问题是公开补骨脂酚类化合物的药学上可接受的盐；

本发明另一个需要解决的技术问题是公开补骨脂酚类化合物的以酯、氨基甲酸酯或其他常规的前体药物的形式；

本发明另一个需要解决的技术问题是公开一种治疗精神性疾病和神经性疾病的方法。

本发明所说的补骨脂酚类化合物的结构通式为：

其中，R₁为氢、酰基或卤族。

R₂、R₃、R₄、R₅分别为氢或卤族。

R1优选C₁～C₈的酰基；

上述C₁～C₈的酰基是指具有1～8个碳原子的支链或支链羧酸的酰基，例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、叔丁酰基、戊酰基、新戊酰基、已酰基、庚酰基和辛酰基等。

上述的卤族是指氟、氯、溴或碘原子，优选氯原子。

本发明还涉及补骨脂酚类化合物的药学上可接受的盐，所说的药学上可接受的盐包括无机酸盐或有机酸盐，优选的为盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、乙酸盐、草酸盐、丁二酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐、碱金属盐或碱土金属盐；

本发明还涉及补骨脂酚类化合物的以酯、氨基甲酸酯或其他常规的“前体药物”的形式，当以这种形式给药时，在体内可转化成活性部分；

最优选的盐选自补骨脂酚类化合物的盐酸盐或补骨脂酚类化合物的乙酸盐；

优选的补骨脂酚类化合物为13-羟基补骨脂酚(在本文中也叫B310)

或其衍生物。

上述的13-羟基补骨脂酚衍生物是指以13-羟基补骨脂酚为先导化合物，对其进行进一步的结构修饰和改造，而得到对精神性疾病和神经性疾病具有疗效的化合物。本发明所涉及的精神性疾病和神经性疾病为焦躁症(anxiety disorders)、情感困绕症(mood disorders)、精神分裂症(schizophrenia)、人格障碍(personality disorders)，性心理障碍(psychosexualdisorders)、成瘾疾病(addiction)、抑郁症(depression)、Alzheimer′s病(Alzheimer′s disease)、精神分裂症(schizophrenia)、Parkinson′s病(Parkinson′s disease)、失眠症(sleeping disorders)、药物滥用和依赖(drugabuse and dependence)、呕吐(emesis)、肠易激综合征(irritable bowelsyndrome)、更年期综合症(menstrual dysphoria syndrome)、Wilson′s症(Wilson′s disease)、舞蹈症(Chorea)、脱髓鞘疾病(Demyelinatingdisorders)、狂躁症(mania)、强迫症(obsessive-compulsive disorder)、注意缺陷多动症(ADHD)、双相障碍(bipolar disorder)、慢性疼痛(chronicpain)、头痛性癫痫(migraine epilepsy)、多发性硬化症(multiple sclerosis)、脑卒(stroke)、肥胖(obesity)、发作性睡病(narcolepsy)或Tourette’s综合征(Tourette′s syndrome)、震颤麻痹、偏头痛。优选抑郁症。

所说的补骨脂酚类化合物可以采用文献公开的方法(Cecilia L et alPhytochemistry 1996，42(5)：1299)进行制备或采用市售产品；

补骨脂酚类化合物的药学上可接受的盐(Cecilia L et al Phytochemistry1996，42(5)：1299)进行制备或采用市售产品；

补骨脂酚类化合物的以酯、氨基甲酸酯或其他常规的“前体药物”的形式可以采用文献公开的方法进行制备；或采用市售产品，如Sigma公司的产品；

试验证明，本发明所说的补骨脂酚类化合物或其盐，以及补骨脂酚类化合物的以酯、氨基甲酸酯或其他常规的“前体药物”的形式是五羟色胺转运蛋白、多巴胺转运蛋白和去甲肾上腺素转运蛋白多重抑制剂；

本发明所提供的补骨脂酚类化合物能选择性抑制多巴胺转运蛋白、去甲肾上腺素转运蛋白和5-羟色胺转运蛋白，使突触间隙中内源的单胺类递质恢复至正常范围内，从而达到治疗精神性和或神经性疾病的效果。

试验同时证明，本发明的补骨脂酚类化合物或其盐，以及补骨脂酚类化合物的以酯、氨基甲酸酯或其他常规的“前体药物”的形式毒性较小；能有效地治疗精神性疾病和神经性疾病，尤其是在治疗抑郁症方面，药效优于现有临床抗抑郁药物如盐酸安非他酮。

可以将补骨脂酚类化合物或其盐，以及补骨脂酚类化合物的以酯、氨基甲酸酯或其他常规的“前体药物”的形式与医药学上可接受的载体以组合物的形式，施加于需要治疗的患者，补骨脂酚类化合物的剂量没有特别限制，可用任何合适的剂量，一般的剂量为0.1～300mg/公斤体重天，具体可根据患者的年龄、病情等进行变化。

所说的载体是指药学领域常规的药物载体，如稀释剂、赋形剂如水等，填充剂，如淀粉、蔗糖等，粘合剂，如纤维素衍生物明胶、聚乙烯吡咯烷酮等，润滑剂，如滑石粉等。

本发明的补骨脂酚类化合物或其盐，以及补骨脂酚类化合物的以酯、氨基甲酸酯或其他常规的“前体药物”的形式与上述载体构成的组合物，可以通过口服、鼻吸、静脉注射或皮下注射的形式施加于需要这种治疗的患者。

用于口服时，可以将其制备成为常规的片剂、粉剂或口服液；

用于注射时，可以将其采用本领域常规的方法，制备成为注射液；

本发明的补骨脂酚类化合物或其盐，以及补骨脂酚类化合物的以酯、氨基甲酸酯或其他常规的“前体药物”的形式的各种制剂，可以采用药学领域常规的方法进行制备：可用于配制本发明口服剂型的、具体的药学上可接受的载体和赋形剂例子，在美国专利No 3,903,297(1975年9月2日授予Robert)中有描述。用于制造本发明的有用剂型的技术和组合物，在下列文献中有描述：7种现代制剂(7 Modem Pharmaceutics)第9和10章(Banker & Rhodes编辑，1979)：Lieberman等人，药物剂型：片剂(Pharmaceutical Dosage Forms：Tablets)(1981)；和Ansel，药物剂型导论(Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms)2版(1976)。

制剂中，补骨脂酚类化合物或其盐，以及补骨脂酚类化合物的以酯、氨基甲酸酯或其他常规的“前体药物”的形式的重量含量为0.1～99.9％，优选的含量为0.5～90％。

本发明还包括一种治疗精神性疾病和神经性疾病的方法。所述方法包括：给予需要治疗的对象有效量的补骨脂酚类化合物或其盐的组合物。优选的，所述的补骨脂酚类化合物为13-羟基补骨脂酚或其衍生物。

根据不同的需要，本发明的补骨脂酚类化合物或其盐的组合物还可与其它疗精神性疾病和神经性疾病的药物联合应用。

本发明所提供的补骨脂酚类化合物，通过体外实验以及动物体内实验的研究证明，该类化合物能选择性抑制多巴胺转运蛋白、去甲肾上腺素转运蛋白和5-羟色胺转运蛋白，而对γ-氨基丁酸转运蛋白和L-谷氨酸转运蛋白活性均没有影响，并且该类化合物对细胞没有毒性；同样剂量下，补骨脂酚类化合物抗抑郁药效显著好于目前临床抗抑郁药物盐酸安非他酮。因此，该类化合物将为临床治疗精神性疾病和神经性疾病提供新的药物选择，具有良好的市场前景。

附图说明

图1 13-羟基补骨脂酚(B310)对多巴胺转运蛋白的摄取活力的抑制作用。

图2 13-羟基补骨脂酚(B310)对去甲肾上腺素转运蛋白的摄取活力的抑制作用。

图3 13-羟基补骨脂酚(B310)对5-羟色胺转运蛋白的摄取活力的抑制作用。

图4 13-羟基补骨脂酚(B310)对γ-氨基丁酸转运蛋白的摄取活力的作用。

图5 13-羟基补骨脂酚(B310)对谷氨酸转运蛋白的摄取活力的作用。

图6 13-羟基补骨脂酚(B310)对CHO细胞的毒性。

图7 13-羟基补骨脂酚(B310)对大鼠突触体多巴胺转运蛋白影响。

图8 13-羟基补骨脂酚(B310)对行为绝望模型动物的作用。

具体实施方式

实施例1体外筛选模型的建立

本发明涉及常规分子生物学的实验方法，在所属领域中已是广泛已知，并在诸如Molecular Cloning：a laboratory Manual第3版，Sambrook等人编辑，Cold Spring Harbor laboratory Press，Clod Spring Harbor，N.Y.，2001及Current Protocols in Molecular Biology，Ausubel等编辑等方法参考书有详细的介绍。以五羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺、γ-氨基丁酸四种神经转运蛋白(5-HTT、NET、DAT、GAT-1)为靶标的活性筛选细胞系的建立。通过将大鼠的5-HTT、NET、DAT、GAT-1全长编码序列(cDNA序列来源于PnbMed网站上GeneBank)克隆于pCDNA3载体(美国invitrogen公司)上，用电穿孔方法转染导入中华仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞，48小时后用含G418的1640培养基培养。10天后对照组细胞全部死亡，而实验组形成许多细胞克隆。挑取克隆培养一周后，待细胞铺满孔底，吸去培养基，同上用胰酶消化。每孔中的细胞分别接种于两块96孔平板的相应的孔中.待细胞长满孔底后，其中一块板用于同位素流量测定.将对应的另一块板中转运活性高的孔中的细胞逐级扩大培养，每一级都进行同位素流量测定后选取转运活力较高细胞株培养，最后选取转运活力最高的细胞克隆(分别命名为S6，NET，D8，GAT-1细胞)保种，建立永久表达五羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺、γ-氨基丁酸四种神经转运蛋白的CHO细胞系。

实施例2 13-羟基补骨脂酚选择专一性的测定

分别培养S6、NET、D8、GAT-1细胞于48孔板(Costar)至平板铺满(大约每孔6万细胞)。弃培液，用PBS洗涤一次，吸去PBS溶液，每孔加入90ul HBS(10mM Hepes，100mM NaCl，PH8.0)，25℃温育10分钟，每孔加入10ul HBS反应液。实验组及阳性对照药加入80ul HBS，10ul不同浓度的13-羟基补骨脂酚(B310)及阳性对照药安非他酮(BPR)，及10ul³H标记的底物(S6采用³H-5-HT；NET采用³H-NE；D8采用³H-DA)，100μM维生素C和100μM帕吉林。25℃温育20分钟，用冰浴的PBS溶液洗涤三遍，用裂解液裂解60分钟，吸取各孔的裂解液加入到1.2ml的闪烁液中，放入液闪计数仪(Beckman LS 5000TA)中检测DMP值，以此来衡量13-羟基补骨脂酚对五羟色胺转运蛋白、去甲肾上腺素转运蛋白、多巴胺转运蛋白的活性。对于GABA转运蛋白检测，方法类似于多巴胺转运蛋白，50nM³H-GABA(Amersham Pharmacia Biotech)取代了反应体系中的³H-DA或NE或5-HT和维生素C及帕吉林。对谷氨酸转运蛋白摄取活性的影响采用COS-7细胞为筛选模型，³H-Glutamic Acid和³H-Asparate Acid代替上述反应中的同位素，以1mM Glutamic Acid和Asparate Acid为阴性对照，其他方法不变。

结果见图1：13-羟基补骨脂酚(B310)在0.1μM-10μM浓度下，对多巴胺转运蛋白(DAT)也显示很强的抑制活力。在0.1uM浓度下可抑制21.9％，1μM浓度下可抑制62.5％，10μM浓度下可抑制88.7.1％。在1μM浓度下，B310对D8细胞多巴胺摄取活力的抑制效果与阳性对照药物安非他酮(BPR)相当(P＞0.05)，在0.1μM-10μM浓度范围内取7个浓度点，经半对数曲线相关性分析，计算B310对多巴胺摄取活性的IC50为8.3341±4.5702μM。

B310在0.1μM-10μM浓度下，对去甲肾上腺素转运蛋白的摄取活力有显著抑制作用(P＜0.05)。0.1μM浓度下可抑制3.1％，1μM浓度下可抑制56.1％，10μM浓度下可抑制89.1％。在1μM浓度下，B310对NET细胞摄取活力的抑制效果与阳性对照药物安非他酮(BPR)相当(P＞0.05)，见图2。

在0.1μM-10μM浓度范围内取7个浓度点，经同位素标记去甲肾上腺素摄取活力的检测，通过半对数曲线相关性分析，得出B310的IC50为0.9724±0.443μM。

B310对5-羟色胺转运蛋白的摄取活力有显著抑制作用，100μM浓度时可抑制70％，与阳性对照药物安非他酮(BPR)比较，对5-羟色胺转运蛋白的摄取活力的抑制作用更强(P＜0.05)，见图3。

在100μM以下的各个浓度点，B310对GAT-1细胞摄取γ-氨基丁酸转运蛋白以及COS-7摄取L-谷氨酸转运蛋白活性均没有影响(P＞0.05)。见图4，图5。

上述结果表明13-羟基补骨脂酚(B310)对多巴胺转运蛋白、去甲肾上腺素转运蛋白和5-羟色胺转运蛋白均有抑制活性，其中对5-羟色胺转运蛋白的摄取活力的抑制作用强于阳性对照药物安非他酮(BPR)，而对γ-氨基丁酸转运蛋白和谷氨酸转运蛋白活性均没有影响。因此，13-羟基补骨脂酚(B310)对单胺类神经递质转运蛋白的抑制作用具有选择性。

实施例3 13-羟基补骨脂酚细胞毒性实验

CHO细胞于1640培养基(含10％小牛血清)培养，待长满培养皿后，胰酶消化，接种于48孔细胞板中，继续培养待细胞数量达到10⁵左右，分别处理如下：换液后，对照组加10μl对照液(含1％DMSO的HBS)，药物不同剂量组分别加10μl不同浓度的13-羟基补骨脂酚，使其终浓度分别为1mM，0.1mM和0.01mM。继续培养24小时，在第20小时加MTT，使终浓度为0.Smg/ml。反应结束后，吸去培养液，加100％DMSO，37℃温育10分钟。转移至96孔板，在570nm波长下用酶标检测仪测每个孔OD值。

结果：在分别含有100μM、10μM和1μM 13-羟基补骨脂酚(B310)的1640培养液环境下，经24小时培养的CHO细胞的生长能力与对照组细胞无显著性差异，见图6。这表明100uM浓度以内的13-羟基补骨脂酚无细胞毒性作用。

实施例4 13-羟基补骨脂酚对大鼠突触体多巴胺转运蛋白影响

清洁级雌性SD大鼠2只，体重210-240g，10％水合氯醛麻醉。断头后，立即剥离脑组织，取双侧纹状体，用预冷的含0.32M蔗糖PBS缓冲液冲洗数次，称取重量。按10∶1(W∶V)加0.32M蔗糖PBS缓冲液，放入预冷的匀浆器中，手动匀浆15次，4℃下，1000G离心20分钟。取上清液，4℃下，15000G离心15分钟，倒掉上清液。将沉淀加入组织重量15倍体积的预冷KRH缓冲液(含NaCl 120mM，KCl 4.7mM，CaCl2 2.2mM，Hepes 25mM，MgSO4 1.2mM，KH2PO4 1.2mM，glucose10 mM.)，用枪头吹打混匀制成混悬液。取混悬液10μl，冷KRH缓冲液70μl，不同浓度(1mg/ml，100ug/ml，10ug/ml)的13-羟基补骨脂酚(B310)溶液10μl，1.136μM³H-Dopamine(含100μM维生素C和100μM帕吉林)10μl，混匀后，37℃孵育5分钟。加入预冷的Li-KRH缓冲液(KRH缓冲液NalL用LiCl替代)1ml，4℃下，15000G离心10分钟。倒掉上清液，用Li-KRH缓冲液1ml洗涤一次。加0.4N NaON溶液100μl裂解30分钟，加闪烁液，在液闪记数仪检测。同时以10uM GBR12935作为阳性药物对照，1％DMSO的KRH缓冲液作为空白对照。

结果：13-羟基补骨脂酚(B310)对大鼠突触体多巴胺转运蛋白有明显抑制活力，并具有浓度依赖特性，10μM 13-羟基补骨脂酚(B310)对大鼠突触体多巴胺转运蛋白的活性有显著的抑制作用(P＜0.05)；阳性对照药物GBR12935(10μM)对大鼠突触体多巴胺转运蛋白的活性的抑制作用更为显著(P＜0.01)，见图7。

实施例10 13-羟基补骨脂酚对行为绝望模型动物的作用效果

清洁级雄性Balb/c小鼠21只，体重20～24g，购于上海生命科学院实验动物中心。自由饮食饮水，饲养一周。将小鼠随机分为三组：对照组7只，含10％DMSO的生理盐水，与治疗组药物等体积腹腔注射；阳性对照组7只，盐酸安非他酮(溶解于10％DMSO的生理盐水中)10mg/Kg体重，腹腔注射；治疗组7只，13-羟基补骨脂酚(溶解于10％DMSO的生理盐水中)10mg/Kg体重，腹腔注射。检测方法：各组动物在药物或者对照溶液处理半小时后，将小鼠尾用胶布固定在一敞口容器上端的横杆中间，使其头部下垂，两个记录员同时每只动物6分钟不动时间(绝望时间)。挣扎和绝望判断方法：挣扎表现四肢身体不停纽动，绝望主要表现动物身体不动，两前肢蜷缩，偶尔后肢有轻微活动。将两个记录员记录数据平均作为每只动物的不动时间(张均田主编.现代药物学研究方法，北京医科大学和协和医科大学出版，1998，第一版)。

结果：在10mg/kg剂量下，13-羟基补骨脂酚(B310)组小鼠悬尾不动时间(绝望时间)均低于空白对照组(P＜0.01)；B310组动物不动时间显著低于盐酸安非他酮组动物(P＜0.05)。以上表明B310可显著改善小鼠绝望状态，与盐酸安非他酮比较，药效更好，提示13-羟基补骨脂酚具有很好的抗抑郁作用，见图8。

实施例11 13-羟基补骨脂酚注射液的制备

将5000mg 13-羟基补骨脂酚用，溶于1000mg水中制成水溶液，加热溶解。混合均匀，分装成10mg/2ml/支浓度的注射液装入药瓶中密封，消毒制成产品。

实施例12 13-羟基补骨脂酚片剂的制备

取100g 13-羟基补骨脂酚、560g微晶纤维素、380g无水乳糖、200g硬脂酸镁、30g氧化硅，取上述配方中除硬脂酸镁外所有成分混合25-30分钟，再筛入硬脂酸镁，继续混匀，然后冲压成片。

Claims

1.补骨脂酚类化合物在制备治疗治疗精神性疾病和或神经性疾病药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，精神性疾病和或神经性疾病选自焦躁症、情感困绕症、精神分裂症、人格障碍、性心理障碍、成瘾疾病、抑郁症、Alzheimer′s病、精神分裂症、Parkinson′s病、失眠症、药物滥用和依赖、呕吐、肠易激综合征、更年期综合症、Wilson′s症、舞蹈症、脱髓鞘疾病、狂躁症、强迫症、注意缺陷多动症、双相障碍、慢性疼痛、头痛性癫痫、多发性硬化症、脑卒、肥胖、发作性睡病、震颤麻痹、偏头痛或Tourette’s综合征。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，精神性疾病和或神经性疾病为抑郁症。

4.补骨脂酚类化合物的药学上可接受的盐在制备治疗治疗精神性疾病和或神经性疾病药物中的应用。

5.补骨脂酚类化合物的以酯、氨基甲酸酯或其他常规的前体药物的形式在制备治疗治疗精神性疾病和或神经性疾病药物中的应用。

6.根据权利要求1、4或5所述的应用，其特征在于，所说的补骨脂酚类化合物的结构通式为：

其中，R₁为氢、C₁～C₈的酰基或卤族元素；

R₂、R₃、R₄、R₅分别为氢或卤族元素。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，补骨脂酚类化合物为13-羟基补骨脂酚或其衍生物。

8.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所说的药学上可接受的盐包括无机酸盐或有机酸盐。

9.一种治疗治疗精神性疾病和或神经性疾病的方法，其特征在于，所述的方法包括：给予需要治疗的对象有效量的13-羟基补骨脂酚或其衍生物。