TWI404542B - 用於治療抽動症及具有感覺運動門控不良之精神疾病的海州常山屬組合物 - Google Patents

Description

用於治療抽動症及具有感覺運動門控不良之精神疾病的海州常山屬組合物

本發明係關於海州常山屬(Clerodendrum sp .)於治療抽動症或具有感覺運動門控缺失之精神疾病的用途。

抽動為不自主、突然、快速、重複、無節奏、刻板的動作或聲音的產生(Lancet Neurol . 2005；4 ：149-159)。病人通常會意識到在抽動之前有幾乎無法抗拒的衝動。這些衝動的感覺因為侵擾兒童的意識知覺(conscious awareness)成為注意力分散和窘迫的根源，而可能反映出感覺運動門控上的缺失(J .Child Neurοl . 2006；21 ：642-629)。運動性抽動的範圍從牽涉單一肌肉群的短促、無意義運動片段(即，單純型抽動)至持續較長時間且呈現一種無目的或有目標引導的行動之更具協調性的一系列動作(即，複雜型抽動)。患有一年以上的連續或間斷性動作或聲音抽動(但非兩者)的病人可被診斷為慢性抽動症(Semin Pediatr .Neurol . 2006；13 ：231-242)。妥瑞式症則是一種在21歲之前持續表現至少一年的多重運動和至少一種聲音抽動之原發性疾病，許多證據支持妥瑞式症在多巴胺神經系統有異常現象，這些證據包括精神分裂症藥物有效的治療反應以及來自死後和核子影像研究之型態學數據(Pediatric Neurology ：原則和實務 ，第四版；賓州費城：Mosby-Elesevier；2006：887-903；以及Brain Dev . 2003；25 ：S70-S84)。臨床上，多巴胺D2受體阻斷劑以及多巴胺耗竭劑被認為是最有效的抗抽動治療劑(Expert Opin .Emerg .Drugs 2005；10 ：365-380)。然而，這些治療在有效性以及副作用方面，例如，體重增加、錐體外徑症候群和焦慮症惡化，並未臻完美(J .Child Neurol . 2006；21 ：690-700)。除了典型精神分裂症藥物之外，數種藥物也被用治療抽動，包括非典型精神分裂症藥物、α2-拮抗劑、中樞神經系統興奮劑、選擇性血清素再吸收抑制劑、鴉片、苯并二氮雜(benzodiazepines)和尼古丁。反之，多巴胺致效劑有時亦可改善抽動或妥瑞式症。

海州常山屬(Clerodendrum sp. )係一種屬於馬鞭草科(Verbenaceae )的灌木，其廣泛分佈於南亞和東南亞、澳洲和太平洋群島。已有報導提出使用例如白花苦林盤(Clerodendrum inerme )的植物之根和葉萃取物作為民俗藥物，用於治療各種的疾病，例如，咳嗽、腺病性感染、熱病、淋巴結腫大症、性交感染及皮膚病和腳氣病，以及亦可作為一種驅蟲劑(Phytoche-mistry 2001；58：333-336)。然而，尚無科學文獻或報告指出此地區性草藥可用於減緩神經或精神疾病的症狀，例如，感覺運動門控缺失或抽動發作。

本發明的基礎是根據海州常山屬具有抗抽動的活性以及可有效治療感覺運動門控缺失的非可預期之發現。

因此，本發明係關於一種用於治療抽動症或具有感覺運動門控缺失之精神疾病的組合物，其包含來自海州常山屬之產物。

下文中將詳細描述本發明的各種具體實施例。本發明的其他特徵將藉由下列有關各種具體實施例的詳細說明以及申請專利範圍而清楚呈現。

相信在本發明所屬技術領域中具通常知識者在不需進一步說明之情況下可根據此處的描述利用本發明至其最廣範圍。因此，下列描述應被當作例證之目的而非以任何方式作為本發明之範圍的限制。

除非另有說明，否則此處使用之全部技術和科學名詞與本發明所屬技術領域之技藝人士通常所瞭解的意義相同。

此處所使用的冠詞「一」係指該冠詞的一或一個以上(即，至少一個)的文法受詞。

此處描述的是海州常山屬於治療抽動症或具有感覺運動門控缺失之精神疾病的用途。如下文實例所示，在一案例報告中，我們發現一位以多重抗抽動療法治療無效的慢性動作抽動症13歲女孩，她於服用白花苦林盤的葉片汁液後，抽動症狀呈現顯著的改善；並且在後續兩年以上的追蹤觀察中未發現副作用。另一方面，在注射甲基安非他命誘發過動症狀的動物模式中，發現顯示白花苦林盤的乙醇萃取物可降低甲基安非他命誘發的過動症狀，但不影響小鼠的正常運動功能，與肌肉抓力，且可逆轉甲基安非他命誘發的驚嚇反應之前脈衝抑制(PPI)不良。

因此，本發明提供一種用於治療抽動症或具有感覺運動門控缺失之精神疾病的組合物，其包含來自海州常山屬之產物。

本文所述「海州常山屬(Clerodendrum sp .)」係指海州常山屬的任何植物，其係屬於馬鞭草科的灌木(Verbenaceae )，廣泛分佈於南亞和東南亞、澳洲和太平洋群島。海州常山屬至少包括臭牡丹(Clerodendrum bungei )、重瓣臭茉莉(Clerodendrum philipinum )、海州常山(Clerodendron trichotomum )、星爍山茉莉(Clerodendrum guadriloculare )、Clerodendrum capitatum 、長管大青(Clerodendrum indicum L .)、Clerodendron phlomidis 和白花苦林盤(Clerodendrum inerme )。特定而言，用於此處的植物為長管大青、Clerodendron phlomidis 、及/或白花苦林盤，更特定而言係指白花苦林盤。

本文所述「來自海州常山屬的產物」係指來自植物本身，其各部位，例如，葉、花、根、籽、梗和子實體之產物，或其任何加工型，例如，汁液、粉末、顆粒、萃取物、切片、濃縮液和沈澱物。

在一具體實施例中，本發明的組合物包含來自海州常山屬的汁液。明確而言，該汁液係來自該植物的葉片。

此處所述的海州常山屬產物可藉由一般在此技藝中已知的任何標準方法或技術製備而成。典型地，將海州常山屬或其部位清洗且風乾、切割或剁碎，然後與適當的溶劑混合或浸泡於其中，該溶劑包括但不侷限於水、甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、異丁醇及其類似物。可於後續進行額外的濃縮步驟，例如，蒸發，或純化步驟，例如，過濾、離心和色層分析。

在一實例中，將海州常山屬的葉片剁碎然後與水混合(例如，藉由攪拌機)，藉由過濾移除固體殘留物，然後收集所獲得的汁液。

在本發明的另一實例中，藉由溶劑(例如，乙醇)萃取海州常山屬的葉片。具體而言，將該植物的葉片清洗和風乾後，進行切割或研磨，然後與乙醇混合或浸泡於其中達一段時間，例如，2至10天，更具體而言，5至8天。可依需要重複浸泡或混合步驟。接著收集乙醇部分並混合在一起。如有必要，所獲得的乙醇可進一步予以濃縮或純化。

此處「治療」乙詞係指為了治癒、癒合、減輕、舒緩、改變、矯正、改善、改進或影響該疾病、該疾病之症狀、該疾病引起的殘疾或罹患該疾病之傾向的目的，而將包含一或多種活性劑之組合物施用或投與至患有該疾病、該疾病之症狀或有罹患該疾病之傾向的個體。

根據本發明，包含海州常山屬產物之組合物可用於治療患有抽動症的個體。如前所述，抽動症為不自主、突然、快速、重複、無節奏、刻板的動作或聲音的產生，其範圍從牽涉單一肌肉群的短促、無意義運動片段(即，單純型抽動)至持續較長時間且呈現一種無目的或有目標引導的行動之更具協調性的一系列動作(即，複雜型抽動)。

此外，根據本發明的組合物亦可用於治療患有感覺運動門控缺失的精神疾病，其臨床上的特徵為喪失自動抑制或「門控」認知、感覺或運動域之無關訊息的正常能力。感覺運動門控缺失曾報導於患有神經或精神科疾病的病患，例如，精神分裂症(Psychophysiology 15 ：339-343)、妥瑞式症(TS；2001,Biol .Psychiatry 50 ：578-585)、強迫症(OCD；2005,Biol. Psychiatry 57 ：1153-1158)、注意力缺乏過動症(ADHD；Psycho physiology(Berl) 165 ：118-127)、成人自閉症(Biol. Psychiatry 2007,61 ：482-486)或雙相障礙(Acta Psychiatr Scand . 2008；117 ：313-318)。侵入式感覺訊息在精神分裂症的認知過程，以及妥瑞式症(TS)的運動功能(Am. J. Psychiatry 1993；150 ：98-102；J. Clin. Psychiatry 2000；61 ：150-156)特別具破壞性(Br. J. Med. Psychol. 1961；34 ：103-116)。前脈衝抑制不良已被建立且成為在動物和人類中反映感覺運動功能之缺失的測量模式(Psychopharmaco.(Berl) 199：331-388)。

為有利於輸送，本發明的組合物可被進一步配製成含有適當醫藥上可接受載劑的醫藥上組合物。此處「醫藥上可接受」係指該載劑可與本發明組合物內所含的有效成分相容，其較佳為能穩定該活性成分並且對被治療的個體無害。該載劑可作為活性成分的稀釋劑、載劑、賦形劑或基質。一些適當賦形劑的實例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖、甘露糖、澱粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、褐藻酸鹽、黃蓍樹膠、明膠、矽酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、纖維素、滅菌水、糖漿和甲基纖維素。該組合物可另外包括潤滑劑，例如，滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油；濕潤劑；乳化和懸浮劑；保存劑，例如，羥基苯甲酸甲酯和丙酯；甜味劑；以及調味劑。本發明的組合物藉由此技藝已知的程序可經配製而能在投與至病人後提供活性成分之快速、持續或延遲釋放的效果。

根據本發明該組合物的形式可為錠劑、藥丸、粉末、糖錠、藥包、藥片、酏劑、懸浮液、乳劑、溶劑、糖漿、軟和硬明膠膠囊、栓劑、滅菌注射液和包裝粉末。

本發明的組合物可經由任何生理上可接受途徑，例如，口服、腸道外(例如，肌肉、靜脈、皮下、腹腔內)、經皮、直腸、吸入等方式予以輸送。在一具體實施例中，本發明的組合物係經口服投與。

本發明組合物的劑量可視各種因素而變動，例如，投藥途徑、接受該藥劑之個體的體重和品種，以及投藥目的。技藝人士可根據此處的揭示及此技藝已建立的方法依經驗決定每一個別案例的劑量。

現參考以下具體實施例更明確地描述本發明，其目的係用以說明而非作為限制。

實施例1：白花苦林盤萃取物之製備

在台灣河岸的紅樹林沼澤收集白花苦林盤。收集其葉片然後風乾。研磨乾燥葉片(3.0 kg)，然後以95%乙醇(10 L)重複萃取三次，每次萃取係將葉片浸泡於乙醇內約一週。在減壓下蒸發收取的乙醇層，產生乙醇萃取物(246克)，用於進行後續動物試驗。

實施例2：苦林盤萃取物對小鼠之運動功能的功效

2.1　動物

使用雄性ICR小鼠(25-35 g)進行行為研究。小鼠係繁殖、居住和飼養於國立台灣大學醫學院實驗動物中心，其具有溫度和濕度控制及12：12日夜循環。所有的動物實驗均根據國立台灣大學醫學院實驗動物中心動物實驗管理小組所建立的準則進行。

2.2　運動功能

將甲基安非他命(2 mg/kg)注入小鼠以誘發小鼠過動症狀，作為行為實驗之典型模式。在注射甲基安非他命之後，小鼠經由腹腔注射投與載劑(0.1 ml二甲亞碸)或10至300 mg/kg劑量的白花苦林盤萃取物。於15分鐘之後，分別對經處理的小鼠進行活動力和抓力試驗。

從光感行為活動量測試系統(photobeam activity system)之行為觀察箱(locomotor cage)中的紅外線光束破壞情形監控小鼠的活動力(San Diego儀器公司，加州San Diego市)。以抓力測試系統(Grip Strength System；San Diego儀器公司，加州San Diego市)，依小鼠前爪的抓力，測量其抓力強度。

如圖1所示，白花苦林盤葉乙醇萃取物(10-300 mg/kg，腹腔注射)劑量依存性地降低甲基安非他命在6-9週齡ICR小鼠所誘發的過度運動(圖1A)；然而，抓力試驗顯示其並未影響小鼠的正常運動功能(圖1B)。

2.3　驚嚇反應的前脈衝抑制(PPI)

PPI係一種於刺激之前在短期間內施予相同來源但較弱之刺激時抑制可能為聲音、吹氣或光線刺激之驚嚇反應的神經生理學現象。此係為一種保護活生物體避免驚嚇剌激的快速神經調適系統。PPI被認為是一種活生物體內的加工保護(processing protection)，作為注意力之前意識調節者的感覺運動門控，以降低對訊息加工有害的驚嚇反應。已知患有各種神經精神疾病的病患有此類感覺運動門控受損的情形，包含精神分裂症、強迫症(OCD)、注意力缺乏過動症(ADHD)或妥瑞式症(TS)等各種運動性抽動症。可於人類(藉由肌電描記法測量眨眼反應)或動物(測量驚嚇反應)體內藉由運動反應測量PPI。

以接受甲基安非他命(2 mg/kg)腹腔注射之小鼠作為PPI不良之模型。利用SR-LAB驚嚇反應系統測量PPI(San Diego儀器公司，加州San Diego市)。將經處理小鼠分別置入70 dB背景噪音的封閉刺激室內，並且靜置10分鐘。然後開始進行16分鐘的期間，其間共包括56次試驗。每一次試驗開始是50 ms的空白期，接著為20 ms的71或77dB的前脈衝聲音刺激。於100 ms的延遲之後，施予40 ms的120 dB的聲音驚嚇刺激，接著是290 ms的記錄時間。試驗的全部時間為500 ms。進行下列入種類型的試驗：前脈衝(71或77dB)加上驚嚇(10次試驗，每次有前脈衝刺激)、單獨前脈衝(71或77dB)(4次試驗，每次有前脈衝刺激)、單獨驚嚇(10次試驗)，及無刺激(4次試驗)。在無刺激試驗中，測得基線測量值。在單獨驚嚇試驗中，測基礎聽覺驚嚇反應，以及在前脈衝加上驚嚇試驗中，測得正常驚嚇反應因前脈衝刺激而被抑制的量，並以基礎驚嚇反應的百分比表示。在單獨前脈衝試驗中，測得對弱噪音的正常反應。

圖2A顯示結果。在對照組小鼠中，71dB前脈衝刺激可抑制其回應115 dB聽覺刺激的驚嚇反應(空白柱圖)，抑制幅度(即，PPI)為55.6±3.5%。然而，以甲基安非他命處理的動物(無苦林盤乙醇萃取物的第一灰色柱圖)，其PPI降低至42.4±4.1%。前脈衝刺激增加至77dB時，可增加PPI(斜線柱圖)，而甲基安非他命亦降低其針對77dB前脈衝之反應的PPI(無苦林盤乙醇萃取物的第一黑色柱圖)。有趣的是，白花苦林盤乙醇萃取物可有效逆轉回應71和77dB前脈衝刺激之甲基安非他命所誘發的PPI不良(第二和第三灰/黑色柱圖)。

此外，投與二氮平(diazepam，一種已知抗癲癇藥)至小鼠以測定該藥物是否影響甲基安非他命誘發的PPI不良。如圖2B所示，二氮平無法逆轉甲基安非他命所誘發的PPI不良。

實施例3：案例報告中的白花苦林盤萃取物之功效-

一位13歲女孩患有頑固型抽動症，四肢節奏性3-Hz抖動已達四個月而住進國立台灣大學附設醫院。她的抽動無法受到抑制並且在意識清醒之下可維持數小時。她亦抱怨感到頭暈、頭痛和噁心。未發現有先兆或觸發因子。之前她曾赴另一家醫學中心門診就醫，曾服用高劑量氟哌啶醇(haloperidol)並加上二氮平，但仍無效。她在該醫院進行的腦電圖攝影及腦部電腦斷層掃描結果為陰性。追蹤過去病史，此病人曾經是健康的，直到2歲時遭受頭部外傷導致右前額骨骨折，但無顱內出血。她開始產生局部性癲癇並接受正規抗癲癇藥物之治療。在7歲之後，當她發生持續性癲癇時，換成以拉莫提金(lamotrigine)和氯硝西泮(clonazepam)進行治療。在此事件之後，該病人開始患有偶發性複雜型運動性抽動，且服用氟哌啶醇和阿普唑侖(alprazolam)。

入院時，她的意識清醒。她的臉部僵硬且動作遲緩，且四肢持續抖動，但在睡睡眠中會平息下來。她每天服用的藥物為氟哌啶醇(5mg每天兩次)、阿普唑侖(0.5mg每天兩次)、帕金寧(biperiden)(1.5mg每天兩次)和拉莫提金(25mg每天兩次)。在身體和神經系統檢查時，她的體溫為36.5℃、血壓為99/58毫米汞柱、心跳速率為每分鐘88次以及呼吸速率為每分鐘20次。她的意識清醒並且具有完整的判斷力、方向感、記憶力、抽象思考和計算能力。她的腦神經、深部肌腱反射、肌力和感官功能亦是完整的。指鼻試驗(FNF)試驗顯示患有劇烈顫抖和輕微辨距不良。神經傳導速度、體感覺誘發電位和重複腦電圖攝影顯示正常的結果。血清銅、血清攜銅蛋白、電解質及24小時尿銅濃度亦在正常的範圍內。腦部核磁共振影像為陰性。診斷為具有慢性動作抽動症，併發氟哌啶醇造成錐體外症候群。我們停用氟哌啶醇並將藥物調整為拉莫提金(25 mg每天兩次)、氯硝西泮(2 mg每天兩次)和阿普唑侖(0.5 mg每天兩次)，之後她的臉部僵硬、動作遲緩和震顫消失。她後來出院並在後續到台大兒科門診進行追蹤。然而，她的不自主運動，包括軀幹波狀抖動或重複緊握雙拳和張開手，在一週後復發。她的動作強烈，在意識清醒之情況下在座位上抖動，持續數小時之久。我們曾小心地調整利培酮(risperidone)劑量，連同氟哌啶醇(5 mg每天兩次)給藥，但仍無效。她開始產生慢性心理障礙並且與經常嘲笑她的男同學產生相處上的問題。嘗試使用數種藥物包括奧氮平(olanzapine)、可樂定(clonidine)、培高利特(pergolide)、舒必利(sulpiride)和帕金寧(biperiden)，但均無效，並且體重顯著增加(從45至70kg)。IQ測驗為68，被歸類為輕度智能障礙，她同時服用數種抗抽動藥物，包括高劑量的抗精神分裂症藥物和抗癲癇藥物。然而，她的症狀仍有很多變化，四肢或軀幹或腹壁強烈抖動，每天經歷一段時好時壞的過程，她因此無法上學。她在全部藥物暫停一天之後進行腦脊髓液的兒茶酚胺(catecholamine)代謝物檢查。結果顯示具有低濃度的同香草酸(81.46 nM；正常：211-540 nM)和低濃度的5-羥基羥吲哚乙酸(38.62 nM；正常：95-173 nM)，其分別為多巴胺和血清素的代謝物。同香草酸/5-羥基羥吲哚乙酸的比例則為正常(2.11；正常：1.8-4.0)。

其後，該病人在14歲8個月時開始服用白花苦林盤磨碎葉的萃取物，其係藉由攪拌機混合葉片與水並且在過濾之後收集汁液所製備。在服用從50片大葉片或100片小葉片混合100 ml水(500 mg/ml)所製成的一次劑量萃取物之後一小時，她的抽動大幅消退。由於其苦味而加入蜂蜜。起初，她每週服用兩次萃取物，可使她不產生症狀，因此逐漸使抽動症狀復發間隔時間延長至每2-6個月服用一次。在14歲10個月時停止服用全部藥物，除了拉莫提金(50 mg每天兩次)和氯硝西泮(0.5 mg每天兩次)之外，該藥用以控制其癲癇復發與所伴隨的幻覺。她在16歲9個月時進行一系列全血細胞計數、肝和腎功能、血液氣體和電解質檢查，結果皆在正常範圍內。臨床上未發現副作用。原已安排IQ的追蹤測驗，但病人於檢查當天未到。她在高中的普通班過著正常的學校生活並且在服用該萃取物之後已過了3年以上的健康生活。

熟習該項技術者將瞭解上述具體實施例可被改變而仍不偏離其廣義的發明概念。因此，應瞭解本發明非僅侷限於所揭示的特定具體實施例，而應涵蓋所附申請專利範圍所定義的發明之精神及範圍內的變化。

從上述的說明，熟習該項技術者可輕易地確認本發明的主要特徵，以及在不偏離本發明的精神和範圍之下可作出各種的改變和修飾，以適應各種的用途和狀況。因此，其他具體實施例亦屬於申請專利範圍之範圍內。

上述的發明內容以及詳細說明將於配合附圖閱讀時而被更佳地瞭解。為達說明本發明之目的，圖式係顯示較佳的具體實施例。然而，應瞭解本發明並非僅侷限於該所示的較佳具體實施例。在該圖示中：

圖1顯示白花苦林盤乙醇萃取物對小鼠運動功能的功效。在進行包括活動力(A)和抓力試驗(B)的各種測定之前15分鐘，經由腹腔注射該乙醇萃取物。於注射2 mg/kg甲基安非他命2小時之後測量其總活動力。

圖2顯示白花苦林盤乙醇萃取物(A)和二氮平(B)於小鼠中逆轉甲基安非他命所誘發的驚嚇反應之前脈衝抑制(PPI)不良的功效。相較於無前脈衝刺激之驚嚇反應，當施以71 dB或77 dB前脈衝聽覺刺激時，藉由小鼠回應115 dB聽覺刺激之驚嚇反應的抑制作用而測量PPI。*p <0.05、**p <0.01、***p <0.001相較於對照組(無甲基安非他命)；^# p <0.05相較於含甲基安非他命之載劑組。

Claims (10)

1. 一種來自白花苦林盤(Clerodendrum inerme )之產物用於製備供治療抽動症之組合物之用途。
2. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該產物係由來自白花苦林盤的汁液所製成。
3. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該產物係由來自白花苦林盤之葉片汁液所製成。
4. 一種來自白花苦林盤之產物用於製備供治療具有感覺運動門控缺失之精神疾病之組合物之用途。
5. 如申請專利範圍第4項之用途，其中該產物係由來自白花苦林盤的汁液所製成。
6. 如申請專利範圍第4項之用途，其中該產物係由來自白花苦林盤之葉片汁液所製成。
7. 如申請專利範圍第4項之用途，其中該產物係來自溶劑萃取白花苦林盤的葉片之萃取物。
8. 如申請專利範圍第7項之用途，其中該溶劑係乙醇。
9. 如申請專利範圍第4項之用途，其中該精神疾病係精神分裂症、強迫症(OCD)、注意力缺乏過動症(ADHD)、妥瑞式症(TS)、自閉症，或雙相障礙(bipolar disorder)。
10. 如申請專利範圍第1至9項中任一項之用途，其中該組合物係經口服投與。