TWI313607B - - Google Patents

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1313607 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係有關一種具有促進記憶獲得（學習）的能力 之中藥組合物，其係包含原方與新調整方之中藥組合物，“ 其主要成分為天麻與鉤藤。 ， 【先前技術】 隨著醫療技術之日新月異，目前台灣人民之平均壽命 男性為75.6〇歲、女性為78.80歲；據行政院衛生署之人口統 · 計’老年人口約占總人口數之百分之七強，可見台灣社會已 正式邁入高齡化的社會，然而伴隨著長壽而來的是某些好 發於兩齡族群之疾病，例如：癡呆症（dementia)。根據統 計’ 65歲以上之罹患癡呆症之比率約為百分之五，而8〇歲 以上之罹患率則超過百分之二十，造成癡呆症之病因甚 多 最重要者為阿耳滋海默氏症(Alzheimer's disease) ’約 佔癡呆症患者之百分之五十。老年癡呆症的發病原因及其Φ 狀均很複雜’ _般認為與年齡、性別、疾病（腦中 風）及遺傳因素皆有關係。根據許多文獻及臨床報導指出， 有命也壓的人造成老年癡呆症的發病率要高於正常人，分、 析其原因有可能是因血壓的先期增高誘發小血管的病變及· 白質的抽壞而增加發病的危險（中國療養醫$ 7:35_36， 1998)此外根據瑞典的一項調查中指丨，賴左右的人血 5 1313607 壓越高’ 20年後其記憶力、理解能力和思維能力就越差。 按該研究計算，治療1〇〇〇名高血壓5年，可防止19例的老年 癡呆症。負責此項調查工作的Kilander醫師指出：「此項結 論為預防癡呆症開闢了一條新路徑，同時也說明高血壓要 在癡呆症症狀出現之前及早治療。（Hypertension. 31:780-786 ’ 1998 )」現在正在進行 SCOPE (Study on congnition and prognosis in elderly hypertension)臨床包括 4000名老年人，可能會對降壓與老年痴呆的關係提供更明 確的訊息（J. hypertens. 17:307-308，1999)。 癡呆症的臨床症狀之一為智能喪失，例如：記憶力喪 失，初期短期記憶喪失，失語及失用症，失去方向感及空 間感’喪失思考能力及判斷能力等，嚴重者甚至無法自行 處理日常生活，因此近代之醫藥學家致力於智能增進劑 (cognition enhancer )之開發，在開發智能增進劑時，首先必 須要了解學習記憶的過程。目前比較公認的過程是由記憶 的獲得（acquisition )、記憶的鞏固（consolidation )和記 憶的再現（retrieval )所組成，並與神經傳遞因子 (neurotransmitter)有關。在對記憶獲得（學習）的能力做 評估時’主要是經由訓練前給藥來進行。而在此過程中， 膽鹼系統（cholinergic system )扮演一個十分重要的角色， Ί313607 而scopolamine (SCOP)是膽鹼受體阻斷劑，會降低膽鹼活 性進而影響記憶，所以SCOP也常被併用來當作降低記憶獲 得（學習）的藥物（不良的學習，會降低記憶的形成能力）。 在對記憶鞏固的能力做評估時，主要是經由訓練後立即給 藥來進行。而在此過程中，經由各種的訓練後，腦蛋白質 的合成是一個很重要的步驟。Cycloheximide (CXM)是蛋 白質合成抑制劑，所以CXM也常被併用來當作降低記憶鞏鲁 固的藥物。在對記憶再現的能力做評估時，主要是經由測 定前給藥來進行。而在此過程中，多巴胺系統（d〇paminergic system)扮演一個十分重要的角色，多巴胺活性的降低有助 於記憶的再現。Apomorphine (APO)為多巴胺受體的促進 劑’可以增加多巴胺的活性而降低記憶再現的作用，所以 APO也常被併用來當作降低記憶再現的藥物。 在現今開發之智能增進劑中，已運用於臨床者有鲁 Aricept、Exelon、Hextol、Tacrine 等，但在整體症狀的改 善上僅發揮不到50%之效果；且有胃腸不適及中樞之碩痛、 嗜睡等之副作用，嚴重者尚可導致精神分裂。因此，研發· 毒性低、安全性高的智能增進劑以供臨床應用，仍為現八 醫藥學家當務之急。 1313607 【發明内容】 一、發明概述 有鑑於習知智能增進劑之缺失及根據現代治療癡呆症 之降血壓理論，本發明係提供一種以天麻與鉤藤為主要成 分之原方中藥組合物，其特徵係具有促進記憶獲得（學習） 之能力。前述之原方中藥組合物之成分比例較佳係為：天 麻4重量％〜12重量％ ;鉤藤5重量％〜15重量％ ;生石決 明8重量％〜24重量％ ;山梔4重量％〜12重量％ ;黃答4 重量％〜12重量％ ;川牛膝5重量％〜15重量％ ;杜仲4 重量％〜12重量％ ;益母草4重量％〜12重量％ ;桑寄生4 重量％〜12重量％ ;夜交藤4重量％〜12重量％ ;及茯苓4 重量％〜12重量％。 本發明更進一步提供一種具有促進記憶獲得（學習） 能力之新調整方之中藥組合物，其成分比例較佳係為：天麻 10重量％〜30重量％ ;鉤藤10重量％〜30重量％ ;杜仲14 重量％〜42重量％ ;及桑寄生14重量％〜42重量％。前述 之新調整方中藥組合物，其經過萃取分離後之萃取物，其 有效成分在乙酸乙酯層和正丁醇層。 前述之原方與新調整方之中藥組合物，其至少可作為 藥物、食品、食療品、稀釋劑或載體等用途。前述之原方 1313607 與新調整方之中藥組合物，其存在型式至少包括：錠劑、 衣錠劑、糖漿劑、補藥、或飲用混合物等型式。 前述之中藥組合物，其經過分離萃取後之萃取物至少 可作為藥物、食品、食療品、稀釋劑或載體等用途。前述 之中藥組合物經過分離萃取後之萃取物，其存在型式至少 包括：錠劑、衣錠劑、糖漿劑、補藥、或飲用混合物等型 式。 二、發明之詳細說明 本發明提供了一種具有促進記憶獲得（學習）的能力 之中藥組合物，其係以天麻和鉤藤為主要成份，並且當重 新調整配方（減方）後，發現仍具有促進記憶獲得（學習） 的作用。 天麻（e/α加）為常用的平肝息風藥，其性甘 平，專入肝經，為平肝潛陽、息風止痛之專藥，其藥性平 和、善治一切風證，尤為眩暈之要藥。常用治肝陽上亢、 頭痛眩暈、肝風内動、抽搐痙攣，破傷風抽搐，以及各種 眩暈、偏正頭痛。現代藥理研究指出天麻有鎮靜、抗驚厥 和抗炎鎮痛作用。對血流有降低外周血管阻力、增加血流 量，還具有減慢心率，增加輸出量，提高财缺氧能力，對 1313607 實驗性心肌缺血還有保護作用。臨床上天麻用於治療癲 痛，腦外傷綜合證，止痛，治療神經衰弱、血管性頭痛和 抑鬱性神經症。 鉤藤（r/z少)亦為常用平肝息風藥， 其性甘涼疏泄、有清熱息風，平降肝陽，清泄肝火的良好 作用，為肝經實熱證之要藥，其息風止疼功效尤好。常用 於肝熱動風、惊痛抽搐、肝陽上亢、頭痛眩暈、肝火上升、 頭痛頭脹及目赤腫痛。現代藥理研究指出對心血管系統有 降壓及抑制血小板聚集和抗血栓形成，有鎮靜和抗驚厥、 平喘作用。臨床上常用於治療高血壓和偏頭痛。 天麻鉤藤飲品為選錄自「雜病證治新義」的方劑，由 天麻、鉤藤、生石決明、桑寄生、杜仲、川牛膝、山梔、 黃芩、益母草、朱茯神、夜交藤等11味藥組成，為治療肝陽 偏亢，肝風上擾，頭痛眩暈，失眠抽搐，半身不遂等症。《雜 病証治新義》闡述：本方以天麻、鉤藤、生石決明之平肝 祛風降逆為主，辅以清降之山梔、黃芩，活血之牛膝，滋 肝腎之桑寄生、杜仲等，滋腎以平肝之逆，并輔夜交藤、 茯苓，以安神安眠，緩解其失眠，故用於肝厥頭痛。眩暈 之良劑。現代藥理的研究指出天麻鉤藤飲品能夠增加血液 流速並降低血管阻力（中藥藥理與臨床.15:38-39，1999)， 1313607 臨床上除主要用於治療高血壓病、高血壓腦病外，還有應 用於治療急性腦梗塞（廣西中醫藥.22:178，1999)、糖尿病 高血壓（中醫藥學報.26:26 ,1998)、癲癇（天津中 » 醫.12:25-26，1995)及高血壓心臟病（瀘州醫學院學 曹 報.18:189-190，1995)等。 本發明之中藥組合物係包含其原方及新調整方，原方係 為傳統用於治療高血壓之中藥方劑，本發明係發現此方劑籲 另外具有促進記憶獲得（學習）之功效，有發展成治療癡 呆症藥物的潛力。另外根據中醫理論與現代藥理，以天麻 與鉤藤為主要組成藥物（即中藥“君臣佐使’’中的君藥），重 新調整方劑組成後，仍具有促進記憶獲得（學習）的作用。 原方中藥組合物之成分比例較佳係為：天麻4重量％〜12 重量％ ;鉤藤5重量％〜15重量％ ;生石決明8重量％〜24 重量％ ;山梔4重量％〜12重量％ ;黃芩4重量％~ 12重量⑩ %;川牛膝5重量％〜15重量％;杜仲4重量％〜12重量％; 益母草4重量％〜12重量％ ;桑寄生4重量％〜12重量％ ; 夜交藤4重量％〜12重量％ ;及茯苓4重量％〜12重量％ ;、 最佳比例為 3 : 4 : 6 : 3 : 4 : 3 : 3 : 3 : 3 : 3 ° 新調整方（即減方後）之中藥組合物其成分比例較佳 係為：天麻10重量30重量％ ;鉤藤10重量％〜30重量％ ; 11 1313607 杜仲14重量°/◦〜42重量％ ;及桑寄生14重量％〜42重量°/〇 ; 其最佳之成分比例係為天麻：鉤藤：杜仲：桑寄生之比例 為3 : 3 : 4 : 4。 以下係藉由數個實施例來闡述本發明之中藥組合物具 促進記憶獲得（學習）能力之功效，然本發明之範圍並不 侷限於下述較佳實施例，而應以申請專利範圍所界定之範 圍為基準。因此任何熟知此項技藝者，在不脫離本發明之 申請專利範圍與精神下，當可做適度潤飾與修改。 【實施方式】 實施例一：原方中藥組合物之促進學習之功效 實驗原理：齧齒動物為夜行性動物，它具有趨向暗處及 喜愛鑽洞的天性，若將老鼠置於一以閘門隔開的明、暗兩 室之密閉空間中之明室時，由於天性使然會趨使它很快會 鑽入暗室。當老鼠進入暗室後，隨即將閘門關上，並立刻 給予懲罰性的電擊，老鼠當即會學到進入暗室即受到電擊 懲戒之經驗；在一段時間之後再度將它置回此一密閉空間 之明室裡，若老鼠滯留在明室之時間比上次的時間長，則 表示該老鼠已經有學習記憶到若進入暗室即會身處危境之 經驗。 12 1313607 實驗方法：本實驗是使用自動式「被動迴避（passive avoidance)反應測定裝置」（Coulbourn Instruments, USA)， 此實驗箱之中間有一自動開關之閘門將它隔為大小相同兩 室（18x17x28 cm)，在其中一室上方備有一具20W之燈泡 (明室），另室即為暗室，中以門閘控制。其實驗步驟如下： (1) .篩選：實驗前先將老鼠放入明室，凡老鼠於90秒内 即進入暗室者為符合進行本實驗之合格老鼠。 (2) .訓練期：將老鼠放入明室前60分鐘口服給予原方中 藥組合物（2.5、1.0、0.5 g/kg ;每公斤體重餵食2.5克、1.0 克、0.5克的藥物）（實驗組）或生理食鹽水（控制組）—待 老鼠進入暗室—門閘隨即關上—電擊2秒（0.2mA)—等待 5秒才將老鼠抓出。每個劑量組均使用10隻ICR小鼠，並 以交叉設計法進行測試。 (3) .測試期：老鼠經訓練後24小時放入明室。紀錄老鼠 在明室滯留的時間，終止時間為120秒。 實驗結果：訓練前給藥跟記憶的獲得有關。與給予生理 食鹽水之小鼠相比較，在訓練前給予1.0 g/kg與2.5g/kg之 原方中藥組合物之小鼠，明顯延長其在明室滯留的時間， 顯示服用原方中藥組合物的小鼠具有促進記憶獲得（學習） 之作用，如圖一所示之結果。 13 1313607 宜二：原立中―藥組_金趣趟^之探討 實驗原理和實驗方法與實施例一相同，不同在於訓練 期前之投藥處理。原方帽組合物(2 5、1G、G 5g/kg)(實 驗組）或生理食鹽水（控制組）連續7天口服給予，於第8 * 天訓練前60分鐘口服給予原方中藥組合物或生理食鹽水；. 並於第8天訓練前30分鐘皮下注射Sc〇p〇lamine HBr (0.5mg/kg，膽驗文體阻斷劑）待老鼠進入暗室—門閘隨 即關上—電擊2秒（0.2mA)—等待5秒才將老鼠抓出。每種 劑篁均於1 〇隻ICR小鼠身上進行實驗，並以交叉設計法進行 測試。 實驗結果：Scopolamine HBr(0.5 mg/kg)可以阻礙誘發 記憶之獲得，而本實驗證實長期（8日）給予i_〇 g/kg與 2.5g/kg之原方中藥組合物之小鼠具有拮抗Sc〇p〇lamine所 引起記憶獲得阻礙之能力，如圖二所示，顯示原方中藥組丨 合物之作用機制可能與記憶機制中的膽鹼系統的機制有 關。 f施例三：新調整方中藥組合物毒探討 實驗目的：本項研究之目的為探討新調整方中藥組合物· 萃取物之急性口服之毒性，包括半致死劑量（LD5g)、誘發* 膽鹼徵狀之半毒性劑量（TD^)及誘發運動協調性障礙之 14 1313607 半失能（incapability)劑量（ID5G)等檢測，以求得其無顯著膽 鹼徵狀（即無副作用）之劑量範圍，俾便進行認知功效之評 估。本實驗採用此初步觀察試驗，藉以確定其致死與神經 行為毒性之傾向，除一般行為之觀察外，並利用翻轉紗網 試驗（即運動協調測試），以檢定新調整方中藥組合物之初’ 步神經毒性。 實驗方法：本試驗採行對數劑量均等升降法 0 (Up-and-Down method) ( Dixon, 1980 i Dixon and Massey, 1983 )進行急性毒性之測試。以劑量為10及7.08 g/kg 之新調整方中藥組合物來探討其萃取物之急性口服之毒 性，包括半致死劑量（LD5G )之測定。小白鼠口服新調整 方中藥組合物後，即放置於觀察盒内（20 X 20 X 30 cm)， 初時連續觀察5分鐘，並於服藥後之15、30、60、120、180 分鐘及24小時之際，檢視其可能產生之行為徵狀，並進行❿ 運動協調比測試。 實驗結果：一次給予10隻ICR小鼠10g/kg的新調整方 中藥組合物後，觀察其死亡率及毒性，結果並無流淚、垂 涎、嘔狀、閉眼、呼吸率增加、纖維顫動等膽鹼徵狀，且 翻轉正常，即無失能狀態。24小時後口服新調整方中藥組 合物之實驗小鼠均存活，並沒有發生死亡的情形，顯示新 15 1313607 α周整方中藥組合物的毒性很小。 整方中藥合物就動物活動量之 實驗原理：動物在廣域空間的各項活動（如行走、立起、 梳理等）為動物内在好奇心與恐懼感所產生之外在行為表. 現，並深受動物本身之警覺性、知性與感性等影響。活動. 打為之量測為篩檢藥物是否具有行為效應（包括神經毒性） 的個敏感指標’其中以水平活動(horizontal activity)及垂 直活動（vertical activity)之行為指標，最常用於藥物對動物 一般行為效應或神經毒性之第一階段篩檢試驗。 實驗方法：本實驗係使用四台「動物運動量測定裝置」 (TRU Scan photobeam sensor-E63-22,Coulboum Instruments )，自動量測動物之活動行為。每台偵測箱之大 小為25·5χ25.5χ40 cm，周邊有16x16道的紅外線感應器， 水平及垂直的紅外線感應器距離偵測箱地板分別為3.0 cm籲 及6.5 cm。每次實驗後用50%酒精清洗偵測箱。先將小鼠 個別放入各自之偵測箱内適應環境3〇分鐘，藉以降低初始 之探索活動效應，並獲得穩定的基線活動量；之後將小鼠· 取出，隨即口服給予不同劑量新調整方中藥組合物萃取物 (0.5、1.0、2.5g/kg)(實驗組）或生理食鹽水（控制組）， 給藥後立刻放入偵測箱測試，記錄小氣在彳貞剛箱内所呈現 16 1313607 之水平及垂直活動量，每10分鐘記錄一次，共計2小時。 其目的在觀察新調整方中藥組合物萃取物對於小鼠活動量 的影響，包括劑量反應與時程效應之關係。 實驗結果：新調整方中藥組合物萃取物對水平及垂直活 動呈現相同的反應型態，其總體效應顯示，兩造活動並無 劑量反應降低的依存關係，如圖三所示。即口服< 2.5 g/kg 劑量的新調整方中藥組合物萃取物，對小鼠一般行為效應 或神經毒性之第一階段篩檢試驗並無影響（無興奮或抑制 的作用）。 實施例五：新調整方中藥組合物促進學習之功效 將新調整方中藥組合物（2.5、1.0、0.5 g/kg)或生理食鹽 水，依照實施例一的實驗方法，於訓練前60分鐘口服給予， 並紀錄小鼠在明室之滯留時間。每個劑量組均使用10隻小 鼠，並以交叉設計法進行測試。由圖四之實驗結果得知， 給予l.Og/kg與2.5g/kg新調整方中藥組合物的小鼠，在測 試期有顯著性地延長小鼠在明室滯留的時間，所以對於服 用新調整方中藥組合物與服用原方中藥組合物之小鼠（圖 一）一樣具有促進記憶獲得（學習）之作用。 17 1313607 實施例六：新調#方中藥組合物萃_^^離之方法 將本發明之新調整方中藥組合物作萃取分離，如圖五所 示之流程圖。首先，將新調整方之中藥組合物經水煮後之 產物（TG0)，並經過篩、離心及過濾等程序，之後，以乙 酸乙脂、正丁醇及70%乙醇依序進行雙液相萃取，及將該 萃取物分取為4種分取液（TGI、TG2、TG3及TG4)。 實施例七 之功效 逝調整方中藥組合物萃％分離德之仞^斑 新調整方中藥組合物中藥組合物經由實施例六的萃取八 離後(TG0、TGI、TG2、TG3、TG4)，溶解於 1% 羧曱基= 維素（CMC，carboxymethylcellulose )中，其劑量為 〇 $ * ， 依照貝施例一的實驗方法’於訓練前60分鐘口服給予、 5 3^ 紀錄小鼠在明室之滯留時間。每個劑量組均使用8隹 又』、氣， 並以交叉設計法進行測試。 結果顯示，給予新調整方中藥組合物中藥組合物之水煮 後之產物（TG0 ; i.og/kg)仍確實具有促進記憶之能力；在 經過萃取分離後其正丁醇層（TG3)及乙酸乙酯層（TG4) 也確實具有促進記憶獲得（學習）之能力，如圖六所示， 此結果係顯示，新調整方中藥組合物其促進記憶獲得 、學 18 1313607 習）能力的有效成分存在於正丁醇層（TG3)及乙酸乙酯層 (TG4)。 【圖式簡單說明】 圖一係顯示原方中藥組合物增進學習之功效。 圖二係顯示原方中藥組合物機制之探討。 圖三係顯示新調整方中藥組合物對動物活動量之影 響。 圖四係顯示新調整方中藥組合物增進學習之功效。 圖五係顯示新調整方中藥組合物萃取分離之方法。 圖六係顯示新調整方中藥組合物萃取分離後之增進學 習之功效。 【主要元件符號說明】 無 19

Claims (1)

1313607 十、申请專利範圍： L —種具有促進記憶獲得（學f)之能力之中藥組合物， ^中藥組合物包括：天麻4重量％〜12重量％;鉤藤5重量 ❶。15重罝％;生石決明8重量％〜重量％;山梔4重量 j〜12，量％;黃答4重量％〜12重量％;川牛膝巧量％ =重1%，杜仲4重量％〜12重量％;益母草4重量％〜I] 重桑寄生4重量％〜12重量夜交藤4重量％〜12 罝％ ;及茯苓4重量％〜12重量％。 1如I請專利範㈣1項所述之中藥、组合物，其可作為華 艮品、食療品、稀釋劑或载體。 包：中二專利範圍第1項所述之中藥組合物，其存在型式 、衣_'糖漿劑、補藥、或飲用混合物。 種具有促進記憶獲得(學f)能力之 促進記賴得（”）能力，其包括下列成分··、 天麻10重量％〜3〇重量〇/〇 ; 鉤藤10重量％〜3〇 杜仲14重量％〜们重量I及 桑寄生14重量％〜42重量％。 其可作為藥 物如：請專利範圍第4項所述之中藥組合物 艮…食療品、稀釋劑或载體。 20 1313607 6. 如申請專利範圍第4項所述之中藥組合物，其存在型式 包括：鍵:劑、衣錠劑、糖漿劑、補藥、或飲用混合物。 7. 如申請專利範圍第4項所述之中藥組合物，其經過萃取 分離後之萃取物，其有效成分在乙酸乙酯層和正丁醇層。· 8. 如申請專利範圍第7項所述之中藥組合物，其中前述萃’ 取物可作為藥物、食品、食療品、稀釋劑或載體。 9. 如申請專利範圍第7項所述之中藥組合物，其中前述萃 0 取物存在型式包括：錠劑、衣錠劑、糖漿劑、補藥、或飲 用混合物。

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