CN101045076B - 柿叶乙酸乙酯提取物用于预防和/或治疗糖脂代谢相关疾病 - Google Patents

Abstract

本发明涉及柿叶乙酸乙酯提取物在医药领域的新用途，用于制备预防和/或治疗糖脂代谢相关疾病的药物和/或保健品，其中所述糖脂代谢相关疾病包括高血糖、糖尿病和代谢综合征。经药理研究、动物体内试验和临床研究，表明柿叶乙酸乙酯提取物具有显著的降压、降脂、降糖作用，治疗糖尿病、高血脂、高血压病的代谢综合征临床疗效确切，并且没有观察到明显副作用。

Description

柿叶乙酸乙酯提取物用于预防和/或治疗糖脂代谢相关疾病

技术领域

本发明涉及柿叶乙酸乙酯提取物在医药领域的用途，具体而言，涉及柿叶乙酸乙酯提取物用于制备预防和/或治疗糖脂代谢相关疾病的药物和/或保健品的用途，其中所述糖脂代谢相关疾病包括高血糖、糖尿病和代谢综合征，尤其是老年痴呆病。

背景技术

目前，由柿叶的乙酸乙酯提取物为活性成分制成的中成药“脑心清片”主要用于治疗脑动脉硬化症、短暂脑缺血发作、脑血栓形成、脑血栓形成后遗症、冠心病、心绞痛等症，其临床应用已有多年，但未见有用于预防和/或治疗糖脂代谢类疾病如高血糖、糖尿病及代谢综合征的报道。

糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一种非常古老而常见的内分泌疾病，中医称之为“消渴”，即消瘦烦渴之意。现代医学发现它是一组由遗传和环境因素相互作用，导致胰岛素分泌的绝对和相对不足以及细胞对胰岛素敏感性下降而引起糖、脂肪、蛋白质、水、电解质等一系列代谢紊乱的临床综合征，其以高血糖为主要标志，尿中有大量糖排出，并出现多饮、多尿、多食、消瘦、头晕、乏力等症状。它进一步发展则引起全身各种严重的急、慢性并发症，威胁身体健康，是中老年致残的主要疾病。

糖尿病发病机制比较复杂，与多种酶和受体有着密切关联。近年来研究的主要作用靶点有：与胰岛素分泌相关的钙通道和ATP敏感性钾通道、与胰岛素增敏相关的过氧化物酶增殖体激活受体(PPAR)、胰岛素信号通路中的关键酶及细胞因子(如STAT5)、葡萄糖代谢中的关键酶等。近年的研究还认为：糖尿病发生与体内自由基的产生有密切的关系。自由基攻击细胞膜结构，造成神经细胞膜和亚细胞膜破坏、微血管损伤、线粒体功能衰竭和蛋白降解加速等，从而使细胞功能丧失、导致胰岛素分泌的绝对和相对不足，最终引起糖代谢障碍，引发糖尿病。

目前，用于临床治疗糖尿病的药物存在多种缺陷，因此通过不断发现和研究糖尿病的相关药物靶点，并以此进行新药开发是探索糖尿病治疗的主要方向。

糖尿病通常分为1型糖尿病和2型糖尿病两种。

1)胰岛素绝对缺乏：即缺少打开组织细胞大门的“金钥匙”，葡萄糖无法利用，血糖升高，引起糖尿病，属1型糖尿病。必须用胰岛素终身治疗。

2)胰岛素相对缺乏：部分患者胰岛素水平并不降低，但其胰岛素的作用却大打折扣，即胰岛素工作效率降低，“金钥匙”虽有，但作用不大，也会引起糖尿病，属2型糖尿病。这类糖尿病可先用口服药物治疗，改善胰岛素的工作效率，但约有50％的2型糖尿病患者渐渐会出现口服药物治疗效果不好，最终只好接受胰岛素治疗。

代谢综合征(metabolic syndrome，MS)是指一系列与胰岛素抵抗(insulinresistance，IR)相关的作为动脉粥样硬化与心血管病的危险因素的代谢以及生理紊乱，又称为X综合征或IR综合征″，以高血糖、高血压、高甘油三酯(TG)血症和低高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)血症为特点；此外，代谢综合征还包括组织胰岛素抵抗、高尿酸血症及微量白蛋白尿，代谢综合征还涉及持续低度炎症反应及血液凝溶异常等.

代谢综合征是高血压、血糖异常、血脂紊乱和肥胖症等多种疾病在人体内集结的一种状态，它主要包括：肥胖症尤其是内脏型肥胖、糖尿病或糖调节受损、以高TG血症及低HDL-C血症为特点的血脂紊乱以及高血压，其中以超重、肥胖、高血压、血糖调节异常和血脂异常四项更为突出，被称为“死亡四重奏”。

2004年中华医学会糖尿病分会确定了诊断代谢综合征标准，具备下列四个组成成份中的3个或全部者可诊断为代谢综合征。

1)腰围增大、超重、肥胖：体重指数BMI≥25.0kg/m²；

2)高血糖：空腹血浆糖≥6.1mmol/L及(或)糖负荷后血浆糖≥7.8mmol/L；

3)高血压：收缩压/舒张压≥140/90mmHg及(或)已确认为高血压者；

4)血脂紊乱：空腹血甘油三酯≥1.7mmol/L及(或)空腹HDL-C＜0.9mmol/L(男性)、＜1.0mmol/L(女性)。

预防和/或治疗代谢综合征的主要目的是预防临床心血管病和2型糖尿病的发病。

发明内容

本发明的目的是提供柿叶乙酸乙酯提取物的新用途，用于制备预防和/或治疗糖脂代谢相关疾病的药物和/或保健品。

根据本发明的用途的柿叶乙酸乙酯提取物具体而言例如市售的以柿叶乙酸乙酯提取物为活性成分的“脑心清片”。

根据本发明的用途的糖脂代谢相关疾病包括高血糖、糖尿病和代谢综合征，尤其是老年痴呆病。本发明通过药效实验和临床试验证实：“脑心清片”可用于制备预防和/或治疗高血糖、糖尿病及代谢综合征的药物，尤其是用于制备预防和/或治疗老年痴呆的药物。

根据本发明的用途的柿叶乙酸乙酯提取物可用于促进胰岛素分泌，增加血清胰岛素的含量。

首先，柿叶乙酸乙酯提取物激活细胞Ca²⁺离子通道并增加细胞内Ca²⁺浓度，细胞内Ca²⁺浓度的上升就可以使含有胰岛素的分泌囊泡从内质网向细胞膜转移并将胰岛素释放到胞外。

其次，柿叶乙酸乙酯提取物通过保护、修复胰岛B细胞而增加血清胰岛素的含量。在本发明的一个实施方案中，光镜下观察模型组大鼠胰岛素内分泌细胞明显肿胀，胞浆减少，细胞排列稀疏，紊乱不均，见大小不等的空泡变性，核大小不等；而脑心清片大剂量组小鼠的胰岛内分泌细胞形态结构基本接近正常，肿胀减少，空泡变性减少，分泌细胞较模型组增加，从而增加了血清胰岛素浓度。

第三，柿叶乙酸乙酯提取物通过抗氧化、清除自由基、防止胰岛B细胞的凋亡，而促进胰岛素分泌。柿叶乙酸乙酯提取物对H₂O₂所致的神经细胞氧化应激损伤均有显著的抑制作用，能抑制脂质过氧化和清除羟基自由基.参与清除活性氧自由基并保护超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等清除自由基的酶类，减少脂质过氧化物生成，提高谷胱甘肽(GSH)含量及SOD活性.在本发明的另一实施方案中，柿叶乙酸乙酯提取物增加小鼠bcl-2基因的表达，降低Bax基因的表达，Fas蛋白阳性表达率与模型组相比显著降低(P＜0101)，从而减少凋亡的发生，刺激正常胰岛B细胞分泌胰岛素，促进胰岛B细胞再生.

第四，柿叶乙酸乙酯提取物具有拮抗炎症因子的作用。一些炎症因子对于胰岛素抵抗的发生起着重要的作用，肿瘤坏死因子(TNF-α)增加游离脂肪酸(FFA)的输出，导致胰岛素抵抗。柿叶乙酸乙酯提取物能抑制细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和TNF-α激活的细胞粘附，拮抗这两种细胞因子诱导B细胞的凋亡作用。

根据本发明的用途的柿叶乙酸乙酯提取物用于改善药物诱发的胰岛素抗性。在本发明的又一实施方案中，脑心清可改善氢化可的松诱发的小鼠胰岛素抗性。

根据本发明的用途的柿叶乙酸乙酯提取物用作α-葡萄糖苷酶抑制剂。柿叶乙酸乙酯提取物抑制小肠的α-葡萄糖苷酶，包括蔗糖酶、麦芽糖酶；延缓碳水化合物的吸收作用，延迟双糖、低聚糖、多糖的葡萄糖吸收，降低餐后血糖升高。

根据本发明的用途的柿叶乙酸乙酯提取物用于促进外周组织和靶器官对糖的利用。在本发明的又一实施方案中，脑心清可以显著地降低肾上腺素高血糖小鼠模型的血糖含量。

根据本发明的用途的柿叶乙酸乙酯提取物用于纠正脂质代谢紊乱。在本发明的又一实施方案中，脑心清片有助于改善糖尿病大鼠模型或病人的脂质代谢紊乱，降低血清胆固醇、甘油三酯的含量。

根据本发明的用途，其中预防和/或治疗糖脂代谢相关疾病的药物和/或保健品可以制成为片剂、胶囊、散剂、丸剂、粉末、颗粒、晶体、溶液、浸出物、悬剂、汤、糖浆、酏剂、茶、油等的形式。

本发明的优点在于进一步拓展了柿叶乙酸乙酯提取物的应用范围，为预防和/或治疗糖脂代谢相关疾病提供了一种新产品。1)本发明经现代中药药理研究证实，柿叶乙酸乙酯提取物具有降压、降脂、降糖、改善胰岛素抵抗的作用；2)动物体内试验表明，柿叶乙酸乙酯提取物对实验性高脂血症有明显降低作用，并能降低胆固醇的作用，改善脂质代谢，同时具有降低血糖、扩张冠状动脉及显著的利尿降压作用、并与胰岛素的降糖效应有相同作用；3)临床研究结果表明，柿叶乙酸乙酯提取物具有显著的降压、降脂、降糖作用，治疗糖尿病、高血脂、高血压病的代谢综合征临床疗效确切，并且没有观察到明显副作用。

附图说明

图1描述了根据本发明第四实施方案的NXQ对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。

具体实施方式

为了更好地理解本发明的实质，下面用以柿叶乙酸乙酯提取物为活性成分的“脑心清”片在动物体内试验和人体临床试验的结果进一步说明本发明，但是本发明的保护范围并不限于此。

实施例1：脑心清对糖尿病模型小鼠的血糖、血脂的影响

药品与试剂：脑心清(柿叶乙酸乙酯提取物，NXQ)；柿叶水提取物(WEDkL，自制，每克提取物相当于柿叶12.5g)；血糖试剂盒(北京北化康泰试剂有限公司)；总胆固醇，甘油三酯，高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒；链脲佐菌素(STZ)，美国Sigma公司产品；消渴安胶囊，通化白山药业股份有限公司产品.

采用Advantage电子感应血糖仪及配套纸条(瑞士Roche公司产品)测定血糖。

实验对象是由南方医科大学省实验动物中心提供的清洁级昆明种雄性小鼠，体重为22-25g。

a)对链脲佐菌素(STZ)型糖尿病模型小鼠的血糖和血脂的影响

将80只小鼠编号称重后随机分为8组，每组10只，取其中1组作为正常对照组。其余各组小鼠禁食16小时后，腹腔注射新鲜配制的1％链脲佐菌素溶液150mg/kg，72小时后，眼内眦取血，采用Advantage电子感应血糖仪及配套纸条(瑞士Roche公司产品)测定血糖，血糖值大于16.7mmol/L者确定为糖尿病模型鼠。将糖尿病模型鼠按血糖值编号后随机分为7组，NXQ 3个治疗组(10、20、40mg/kg)、WEDkL2个治疗组(40、80mg/kg)、消渴安胶囊治疗组(500mg/kg)、模型对照组。各组分别灌胃给药1次/天，连续给药30天，在末次给药前12小时起动物禁食、给药后2小时摘眼取血，分离血清、测定血糖与血脂。

b)对肾上腺素引起的高血糖小鼠的血糖的影响

将60只小鼠编号称重后随机分为6组，每组10只，取其中1组作为正常对照组、肾上腺素组、NXQ大小剂量(20、40mg/kg)组、WEDkL 80mg/kg组、消渴安胶囊治疗组(500mg/kg)。各组分别灌胃给药1次/天，正常对照组和肾上腺素组给予等体积生理盐水，连续给药7天，在末次给药2h后，对照组ip等体积生理盐水，其余各组ip肾上腺素(240μg/kg)溶液，分别在ip肾上腺素后0.5h、1h摘眼取血，分离血清、测定血糖。

c)对葡萄糖引起的高血糖小鼠的血糖的影响

将60只小鼠编号称重后随机分为6组，每组10只，取其中1组作为正常对照组、葡萄糖组、NXQ大小剂量(20、40mg/kg)组、WEDkL 80mg/kg组、消渴安胶囊治疗组(500mg/kg)。各组分别灌胃给药1次/天，正常对照组和葡萄糖组给予等体积生理盐水，连续给药7天，在末次给药2h后，对照组腹腔注射(ip)等体积生理盐水，其余各组ip葡萄糖(2g/kg)溶液，分别在ip葡萄糖后0.5、1、2h摘眼取血，分离血清、测定血糖。

实验数据用均值±标准差(x±s)表示，用SSP10.0软件进行方差分析和均数间多重比较。

结果表明，脑心清可明显降低链脲佐菌素所致糖尿病小鼠血糖(表1)，明显降低糖尿病模型小鼠血清中总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇，明显升高高密度脂蛋白，有调节血酯的作用(表2)；另外，脑心清可明显降低肾上腺素引起的高血糖小鼠的血糖(表3)，明显降低葡萄糖引起的高血糖小鼠的血糖(表4)。

表1  脑心清对链脲佐菌素(STZ)型糖尿病模型小鼠的血糖的影响(n＝10，x±s)

注：同正常组相比，^＊P＜0.05，^＊＊P＜0.01；同模型组相比，^△P＜0.05，^△△P＜0.01；同治疗前相比^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01。(下表相同)

表2  脑心清对链脲佐菌素(STZ)型糖尿病模型小鼠的血脂的影响

表3  脑心清对肾上腺素引起的高血糖小鼠的血糖的影响(n＝10，x±s)

表4  脑心清对葡萄糖引起的高血糖小鼠的血糖的影响(n＝10，x±s)

实施例2：脑心清对氢化可的松诱发小鼠胰岛素抗性的影响

将40只小鼠编号称重后随机分为4组，每组10只，取其中一组皮下注射生理盐水作为正常对照组、一组皮下注射氢化可的松(36mg/kg)、另两组皮下注射氢化可的松(36mg/kg)再分别灌胃脑心清大小剂量(20、40mg/kg)。各组分别灌胃给药1次/天，正常对照组和氢化可的松组给予等体积生理盐水，连续给药10天，在末次给药2h后，对照组ip等体积生理盐水，其余各组ip胰岛素(0.5g/kg)，分别在ip葡萄糖后0.5、2h摘眼取血，分离血清、全自动生化分析仪测定血糖。

结果如表5、表6所示。

表5  脑心清对氢化可的松诱发小鼠胰岛素抗性的影响(n＝10，x±s)

表6  脑心清对氢化可的松诱发小鼠胰岛素抗性的影响(n＝10，x±s)

实施例3：脑心清对链脲佐菌素型糖尿病模型大鼠的作用

药品与试剂：链脲佐菌素(STZ)，美国Sigma公司产品；枸橼酸钠，汕头市光华化学厂产品，批号20000116。

实验对象是雌性Wistar普通级大鼠36只，体重220～250g。(第一军医大学实验动物中心提供，合格证号：粤检证字第2004B023号)

所有大鼠适应性喂养一周后，禁食12h，取7只大鼠为正常对照组(简称对照组)，其他大鼠一次性腹腔注射50mg/kg STZ(STZ临用前用0.1mol/L、pH4.5的枸橼酸钠缓冲液配制，10min内用完)，对照组则注射等量枸橼酸钠溶液。72h后血糖FBG大于16.7mmol/L者为高血糖糖尿病模型大鼠。糖尿病大鼠随机分为糖尿病模型组、脑心清大小剂量组。大剂组按人与大鼠等效剂量比每日40mg/5ml/kg给药，小剂组每日20mg/5ml/kg，模型组和正常组每日给5ml/kg蒸馏水，上午灌胃一次，治疗15天。各组造模前、造模后、治疗后断尾取血测血糖(FBG)、血清胰岛素(Ins)，最后取大鼠胰脏作标本进行HE染色和免疫组化染色。

采用Advantage电子感应血糖仪及配套纸条(瑞士Roche公司产品)测定血糖。血糖用葡萄糖氧化酶法，血清胰岛素用放免法。

实验数据以均值±标准差(x±s)表示，用方差分析方法进行显著性检验。

对血糖的影响结果见表7，模型组和正常组比较，FBG显著升高(P＜0.01)，大小剂量治疗后和模型组比较FBG显著下降(P＜0.01)，说明脑心清有显著降血糖作用。

表7  脑心清对STZ模型各组大鼠血糖变化表(mmol/L)

对血清胰岛素的影响结果见表8，模型组和正常组比较，Ins显著降低(P＜0.01)，大小剂量治疗后血清Ins水平比模型组显著升高(P＜0.05)，表明脑心清对Ins分泌有一定的促进作用。

表8  脑心清对STZ模型各组大鼠血清胰岛素变化表(mU/L)

HE染色组织学观察发现：正常组胰岛为圆形、椭圆形细胞团，境界清楚，胰岛数及岛内细胞数较多，胞质丰富；STZ模型组胰岛数及岛内细胞数减少，细胞形态不规则，核大小不等、形态不一，部分核固缩，少数细胞呈空泡状；大剂组胰岛数及岛内细胞数明显增多，细胞分布均匀，核大小基本相等，无核固缩；小剂组胰岛数及岛内细胞数增多，形态较为规则，少部分核固缩。这说明脑心清对STZ模型损伤的胰岛细胞组织有显著的保护作用，并能促进胰岛素的分泌。

实施例4：脑心清对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

对小肠黏膜酶(蔗糖酶、麦芽糖酶)活性的影响：用大白鼠小肠粘膜调制成蔗糖酶、麦芽糖酶，取基质(50mM蔗糖、50mM麦芽糖)液400μL，加入小肠黏膜酶液50μL，和50μL不同浓度(1-1000mg/ml)的脑心清受试物，对照组加入等体积生理盐水，37℃反应30min。反应终止后用0.75ml 2mol/LTris液终止反应。之后，取50μl反应液，利用葡萄糖发色试剂盒(Wako)以葡萄糖氧化酶法测定生成的葡萄糖含量(酶用量为350±1.5μg)，麦芽糖酶用葡萄糖氧化酶法测定(酶用量为35.0±0.05μg)。n＝9，比活性为150±5nmol/min/μg蛋白质，分别测定蔗糖酶和麦芽糖酶活性，求出脑心清对蔗糖酶和麦芽糖酶活性的IC₅₀(μg/ml)。

淀粉酶活性的测定则采用渡边等的方法[Watanabe J，Kawabata J，Kurihara H，et al.Isolation and identification of alpha-glucosidase inhibitors from Tochu-cha(Eucommia ulmoides)[J].Biosci Biotechnol Biochem，1997，61(1)：177-178]进行。即，取10μl测试液与240μl酶液(0.053U)，在37℃预热5min后，加750μl 10mmol/L4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷溶液为底物，置37℃继续反应15min。用0.5ml Tris溶液终止反应，测400nm处吸光值并计算IC₅₀值。

结果如图1和表9所示，可见，脑心清明显降低淀粉酶、大鼠小肠黏膜蔗糖酶和麦芽糖酶活性，且呈剂量依赖性关系。因此，脑心清可抑制淀粉酶、小肠黏膜酶(蔗糖酶、麦芽糖酶)的活性，不仅阻碍糖的肠道吸收，而且抑制其分解产物葡萄糖的肠道吸收。

表9  NXQ对α-葡萄糖苷酶活性的IC₅₀(μg/ml)

实施例5：预防和/或治疗高血糖\糖尿病的临床验证

脑心清片(柿叶乙酸乙酯提取物片)治疗糖尿病、代谢综合征60例分析

试验参照郑筱萸主编，中药新药临床研究指导原则(试行)，中国医药科技出版社，2002年第1版，233-237：中药新药治疗糖尿病的临床研究指导原则进行。

1.临床资料

60例患者均系根据1993年诊断标准确诊的非胰岛素依赖型住院患者，其中，门诊40例，住院20例；随机分为两组，治疗组30例中，男16例，女14例；年龄39～65岁，平均年龄(51.3±8.6)岁。糖尿病病程3～15年，平均病程(6.8±2.9)年；合并高血脂症者19例，冠心病者10例、高血压者18例；对照组30例中，男15例，女15例；年龄38～65岁；平均年龄(51.5±6.8)岁；糖尿病病程2.5～16年，平均病程(6.9±3.1)年；合并高血脂症者20例，冠心病者9例、高血压者17例。两组在性别、年龄、病程、并发症方面经统计学处理，无显著差异(P＞0.05)，具有可比性。

2.诊断标准

西医诊断标准(根据1999年WHO专家咨询报告)：空腹血糖(FPG)≥7.0mmol/L及餐后2小时血糖(2HPG)≥7.0mmol/L，随机血糖≥11.1mmol/L。

高压血参照1999年世界卫生组织/国际高血压联盟关于高血压的分类分期方法制定[1999年世界卫生组织/国际高血压联盟关于高血压治疗指南.高血压杂志，1999，7(2)：9]。

中医诊断标准参照中华人民共和国卫生部中医新药治疗消渴病(糖尿病)的临床研究指导原则(1993)：凡具有或咽干口燥、倦怠乏力、多食易饥、口渴喜饮、气短懒言、五心烦热、心悸失眠、胸胁疼痛、尿赤便秘、舌质红或黯红、淡紫或有瘀点瘀斑，脉沉细或弦涩，中医辨证为气阴两虚、血瘀脉络证者。

3.治疗方法

治疗组服用柿叶乙酸乙酯提取物片剂(简称脑心清片)，每次2片，每天3次，2个月为1疗程，其间停用其它降糖药物和降血压、降血脂药。

对照组采取消渴安胶囊(0.4g/粒，通化白山药业股份有限公司生产)治疗，每次3粒，每天3次，2个月为1疗程，治疗2型糖尿病。

两组患者均进行糖尿病教育、饮食控制、适量运动。全部病例观察2个月。

4.观察指标

治疗前后测血压、空腹血糖(FBG)及餐后2小时血糖(2HFBG)(葡萄糖氧化酶法)、糖基化血红蛋白(HbALc)和血脂：总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白及血流变指标(全血粘度，高切(200/s)；全血粘度，低切(3/s)；血浆粘度；纤维蛋白原)、肝肾功能、尿常规、治疗期间2、4、6周同时检测血压。

5.临床疗效

参照中华人民共和国卫生部中医新药治疗消渴病(糖尿病)的临床研究指导原则(1993)疗效标准进行评定。显效：症状消失，实验室检查多次正常；有效：主要症状及有关实验室检查有改善；无效：症状及有关实验室检查无变化。

病人治疗前后血糖、血脂、血液流变学变化情况如表10和11所示。

表10  两组治疗前后血糖、血脂、HbALc比较

注：与本组治疗前比较，^＊P＜0.01，^★P＜0.05；与对照组治疗的比较，^▲P＜0.01

表11  治疗组与对照组治疗前后血液流变学变化

注：与本组治疗前比较，^＊P＜0.01，与对照组治疗后比较，^★P＜0.01，^▲P＜0.05

由表10可见，两组患者治疗后空腹及餐后2小时血糖、糖基化血红蛋白均有明显下降；总胆固醇、甘油三酯在治疗组治疗后有明显下降，与对照组比较有显著差异(P＜0.01)，对照组治疗后也有相似效果，说明脑心清治疗2型糖尿病在改善血糖、血脂、尿蛋白方面有显著疗效。

由表11可见，脑心清治疗2型糖尿病在改善糖尿病病人血液流变学指标方面有显著疗效。

表12示出脑心清片对糖尿病伴高血压的疗效统计，可见，脑心清片对糖尿病代谢综合征病人的高血压有降血压的疗效。

表12  脑心清片对糖尿病伴高血压的疗效统计

注：与消渴丸组比较，^＊P＜0.01，^＊＊P＜0.05

表13示出脑心清片对糖尿病、代谢综合征的疗效统计，可见，脑心清片对糖尿病高血脂病人有降血糖、降血脂、降血压、改善血液流变学的疗效。

表13  脑心清片对糖尿病、代谢综合征的疗效统计

因此，脑心清对糖尿病的总有效率为90.0％，显效60.0％，比目前常用药的87％的总有效率略高，并且没有观察到明显副作用。

实施例6：脑心清片治疗高血压病胰岛素抵抗的临床研究

1.临床资料

全部病例60例，其中住院病人45例，门诊病人15例，均符合1999年WHO/ISH高血压病诊断标准，随机分为脑心清片治疗组和卡托普利对照组″脑心清片组30例，男18例，女12例；年龄32～70岁，平均年龄(56.41±2.56)岁；高血压1级12例，2级16例，3级2例；卡托普利组30例，男16例，女4例；年龄31～70岁，平均年龄(55.26±3.14)岁，高血压1级11例，2级18例，3级1例。两组以上临床资料经统计学处理无显著差异(P＞0.05)，具有可比性。同时设立血压、血糖、血脂正常的正常对照组30例，均来自健康体检者，在年龄、性别上，与脑心清片组和卡托普利比较，无显著性差异(P＞0.05)，具有可比性。

2.诊断标准

西医诊断标准参照1999年世界卫生组织/国际高血压联盟关于高血压的分类分期方法制定[1999年世界卫生组织/国际高血压联盟关于高血压治疗指南.高血压杂志，1999，7(2)：9]。

中医辨证标准按照《新药中药临床研究指导原则》[中华人民共和国卫生部.中药新药临床研究指导原则，第一辑.1993：24]制定。

3.病例纳入标准

符合高血压病诊断标准，伴胰岛素抵抗，中医辨证属于阴虚阳亢证患者，年龄在30～70岁，能耐受和进行本试验者。

4.病例排除标准

除外病卒中肢体功能障碍，严重心功能衰竭、肾功能衰竭等，严重心、脑、肾损害，合并糖尿病、继发性高血压等，体重指数＞24，肥胖，不能耐受或进行本试验者。

5.治疗方法

脑心清片治疗组给予脑心清片口服，每片0.3g，每次5片，每日3次；卡托普利对照组给予卡托普利片口服，每片12.5mg，每次2片，每日3次；两组均以4周为1疗程，共1个疗程。

6.观察指标

取治疗前3次非同日血压平均值作为给药前血压，观察结束前一周3次非同日血压平均值作为治疗后血压，采用袖带式汞柱血压计测量坐位右上臂血压。所有观察对象在给药前后分别空腹12h后静脉取血测定空腹血糖(FPG)、空腹血浆胰岛素(FINS)、胰岛素敏感性指数(ISI)。

7.疗效评定标准

参照《新药中药临床研究指导原则》制定。显效：舒张压下降≥1.3Kpa(10mmHg)，并降到正常范围；舒张压虽未降至正常，但已下降＞2.7Kpa(20mmHg)。有效：舒张压下降未达到1.3Kpa(10mmHg)，但已降至正常范围；舒张压较治疗前下降1.3～2.34Kpa(10～19mmHg)，但未达到正常范围；收缩压较治疗前下降4.0Kpa(30mmHg)。无效：未达到以上标准。

8.统计学处理

计量资料用x±s表示，分别进行Ridit分析、方差分析、t检验、x²检验等，某些指标进行适当数据转换，进行统计分析。

结果如表14和15所示。

表14  脑心清片对糖尿病伴高血压的治疗效果统计(n＝30)

注：与卡托普利组比较，^＊P＜0.01，^＊＊P＜0.05

表15  两组治疗前后血糖、血脂、HbALc比较

注：与正常组比较，^＊P＜0.01；与本组治疗前比较，

与卡托普利组比较，^＊＊P＜0.01

由表14可知，脑心清片组降压总有效率为80.00％，卡托普利组为86.67％，两组比较差异无显著性(P＞0.05)，但脑心清片组显效率为36.67％，低于卡托普利组(66.67％)，两组比较差异有显著性(P＜0.01)。

由表15可知，治疗前后两组患者空腹血糖与正常对照组比较无显著性差异(P＞0.05)；空腹胰岛素显著高于正常对照组(P＜0.01)，胰岛素敏感指数(FINS)显著低于正常对照组(均P＜0.01)，提示存在胰岛素抵抗.治疗后两组患者空腹胰岛素较治疗前均显著下降(P＜0.01)，胰岛素敏感指数明显升高(P＜0.01)，与正常对照组比较无显著性差异.

Claims (6)

1.脑心清片中的柿叶乙酸乙酯提取物的用途，用于制备预防和/或治疗糖脂代谢相关疾病的药物和/或保健品，其中糖脂代谢相关疾病为高血糖、糖尿病及代谢综合征。

2.根据权利要求1的用途，其中脑心清片中的柿叶乙酸乙酯提取物用于制备促进胰岛素分泌、增加血清胰岛素含量的药物和/或保健品。

3.根据权利要求1的用途，其中脑心清片中的柿叶乙酸乙酯提取物用于制备改善药物诱发的胰岛素抗性的药物和/或保健品。

4.根据权利要求1的用途，其中脑心清片中的柿叶乙酸乙酯提取物用作α-葡萄糖苷酶抑制剂。

5.根据权利要求1的用途，其中脑心清片中的柿叶乙酸乙酯提取物用于制备促进外周组织和靶器官对糖的利用的药物和/或保健品。

6.根据权利要求1的用途，其中脑心清片中的柿叶乙酸乙酯提取物用于制备纠正脂质代谢紊乱的药物和/或保健品。