CN101044902A - 一种减肥、降胆固醇的保健品 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种保健品，具体的说是一种用于减肥、降胆固醇的保健品。本发明采用的技术方案为：在魔芋葡甘聚糖的羟基上共价接枝上一定数量的多聚精氨酸或赖氨酸；采用的技术路线为：先对市售的魔芋精粉进行提纯，得到高纯度的葡甘聚糖多聚物，然后在它的羟基上共价接上一定数量的多聚精氨酸或赖氨酸。本发明的优点是葡甘聚糖廉价易得，制备方法简单，可以应用于工业生产。同时由于葡甘聚糖没有恶臭气味，具有纤维素功能，能够促进胃肠的蠕动，因此可以克服目前应用的胆酸螯合剂易引起恶心、腹痛、消化不良等胃肠道反应的缺点，可以长期服用，起到减肥、降胆固醇的目的。

Description

一种减肥、降胆固醇的保健品

技术领域：

本发明涉及一种保健品，具体的说是一种用于减肥、降胆固醇的保健品。

背景技术：

心脑血管疾病是威胁全球人民健康与生命的头号杀手。在中国，每年大约有二百六十万人死于心脑血管疾病，每天大约有七千人死于心脑血管疾病，每十二秒就有一人死于心脑血管疾病。引发心脑血管疾病最重要的危险因素是高血压、高胆固醇、糖尿病、肥胖和吸烟。随着经济的发展，生活水平的提高，中国人群的生活方式和饮食结构都发生了巨大变化。人们的饮食从五六十年代以粮食和蔬菜为主转变成高脂肪、高蛋白、高热量的三高饮食。目前，随着汽车进入家庭、电视和电脑的普及，人们的运动量减少，超重人口逐年增加。据统计，全国超重人群已达二亿、肥胖人群达六千万。中年人和老年人心脑血管疾病增长率与肥胖人口的增长率呈正相关性，而且城乡差别不大。这些生活方式产生的危险因素将会造成心脑血管疾病发病率迅速增长。预计2010年中国中年人患心脏病的几率将会和美国人持平，中国人将会迎来脑中风发病高峰和心肌梗死发病率快速上升的浪潮。高胆固醇血症是推动这次浪潮的罪魁祸首。医学专家们呼吁，我们不仅要继续关注高血压症，更要重视高胆固醇血症对人类健康的危害。

人血液内的胆固醇主要以低密度脂蛋白(LDL)的形式存在，占胆固醇总含量的60％左右。低密度脂蛋白会在患高胆固醇血症病人的血管内壁上堆积，形成斑块。此种状况轻者引起高血压，重者造成血管堵塞，诱发血栓形成，进而引发脑中风和心肌梗塞。正常人体内的血液中胆固醇含量在220mg/100ml以下。当血液中胆固醇的含量持续高于290mg/100ml时，便是罹患高胆固醇血症的患者。

许多医学刊物和医学专家指出，摄取健康的饮食、养成良好的生活习惯和加强体育锻炼是高胆固醇血症的预防方法，也是药物治疗的基础。研究表明，单纯饮食控制和加强运动仅能使胆固醇降低7～9％。因为胆固醇只有少部分来自食物，大部分在肝脏合成，单纯控制饮食只能减少来自食物中的胆固醇。对于胆固醇轻度升高的患者，通过饮食调整和积极的运动可以使胆固醇控制在正常范围内，但大部分患者还需要服用降胆固醇药物，尤其是胆固醇升高明显或与遗传相关的患者。对于已有冠心病或糖尿病的高胆固醇血症患者，由于发生致命疾患的危险非常高，必须在改进生活方式的同时服用降胆固醇药物。

目前临床应用的降胆固醇药物主要有以下几类：胆固醇生物合成酶抑制剂、烟酸类、胆酸螯合剂和胆固醇吸收抑制剂等。

胆固醇生物合成酶抑制剂即HMG-COA还原酶抑制剂，主要是指斯他汀(statin)类化合物。HMG-COA还原酶是胆固醇生物合成中的限速酶。如果它被阻断，细胞就无法合成胆固醇。胆固醇合成受阻后，肝细胞表面的低密度脂蛋白受体数目将增加，使肝细胞从血液中吸收低密度脂蛋白的量也增加。其结果是导致低密度脂蛋白胆固醇清除率的增加，从而进一步降低血液中低密度脂蛋白胆固醇的水平。这类药物在降低总胆固醇水平的同时也降低甘油三酯的水平和升高高密度脂蛋白的水平。高密度脂蛋白对人的健康有利。他汀类药物具有选择性好，疗效高的特点，副作用较少，可明显降低由高胆固醇血症引起的动脉粥样硬化和冠心病的发病率和死亡率。

烟酸类主要指烟酸及其衍生物(乐脂平)，是较早应用的降胆固醇药物。烟酸是B族维生素，当用量超过维生素作用的常规剂量时，具有强大的血脂调节作用。烟酸能抑制脂肪组织中的脂解作用，降低血浆中游离脂肪酸的浓度。烟酸能在辅酶A的作用下与甘氨酸合成烟尿酸。从而阻碍肝脏利用辅酶A合成胆固醇，并能减少肝脏对极低密度脂蛋白及低密度脂蛋白的合成，故可有效地降低胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白，升高高密度脂蛋白。烟酸适用于高胆固醇或高甘油三酯血症者(II、III、IV及V型高脂蛋白血症)的治疗。但该类药物的速释制剂不良反应大，基本上不能单独使用，与食物同服可减少其对胃肠道的不良反应作用。

常用的胆酸螯合剂有消胆胺和降胆宁。胆酸螯合剂在肠道与胆酸结合，阻止胆酸肠道对胆酸的再吸收，使胆酸随粪便排出，从而阻断胆酸的肝肠的再循环。已知胆固醇是胆酸的前体物质。胆酸的再吸收作用被阻断后，迫使肝脏降解血液中胆固醇，使胆固醇水平降低，并使肝脏中低密度脂蛋白胆固醇受体活性增加。因此能够增加低密度脂蛋白胆固醇的转换，使血总胆固醇和低密度脂蛋白的水平下降。但是它们都有强烈的恶臭味，而且服用剂量大，易引起恶心、腹痛、消化不良等胃肠道反应，给长期用药带来诸多困难。

胆固醇吸收抑制剂主要指依泽替米贝(ezetimibe)，其作用方式不象其它类降脂药那样抑制内源性胆固醇的合成或吸收。它能阻断外源性胆固醇的吸收通道，即抑制肠道对饮食中胆固醇和胆汁中胆酸的吸收，不影响甘油三酯和脂溶性维生素的吸收。由于它具有与其它降脂药的互补作用机制，依泽替米贝与其它降脂药联用对于人体内不良脂质的代谢更为有益。

魔芋精粉中的葡甘聚糖是葡萄糖和甘露糖经β-1-4糖苷键链接形成的高分子多糖，其结构类似于纤维素。它若作为食物，在人肠道中不能被人体的消化酶消化降解转变成热量和脂肪。它有极强的吸水性，1克魔芋葡甘聚糖能够吸附将近300克水。人吃下去后，能够产生饱腹感，减少进食的欲望，因此具有减肥的作用；魔芋葡甘露糖具有类似于纤维素的功能，可以促进肠道的蠕动，治疗便秘。

已有的研究工作指出，共价连接有精氨酸或赖氨酸多肽的多聚物也是一种能吸附胆酸类化合物的多价螯合剂，能特异地吸附人肠道中胆酸及其衍生物。它具有消胆胺和降胆宁相同的降低血液中胆固醇的作用机制，但是完全没有消胆胺和降胆宁的副作用。因此，共价连接有精氨酸或赖氨酸多肽的多聚物是一种优良的预防高胆固醇血症和心血管疾病的保健品。

魔芋是在中国南方山区被广泛种植的高产易栽培农作物。魔芋精粉是从魔芋块根中制备出的高含葡甘聚糖多聚物的产品。将由精氨酸或赖氨酸组成的多肽通过魔芋葡甘聚糖上的羟基共价连接到魔芋葡甘聚糖多聚物分子上，形成的改性魔芋葡甘聚糖便是一种既具有减肥功能又可以降低人体内胆固醇的保健品。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种经济、有效的天然减肥、降胆固醇的保健品。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为：在魔芋葡甘聚糖的羟基上共价接枝上一定数量的多聚精氨酸或赖氨酸。

本发明的技术路线为：先对市售的魔芋精粉进行提纯，得到高纯度的葡甘聚糖多聚物，然后在它的羟基上共价接上一定数量的多聚精氨酸或赖氨酸。

葡甘聚糖的提纯方法如下：

称取一定量的市售魔芋精粉，用50％的乙醇溶液提取两次，然后用水洗涤3次，溶胀，过滤。向得到的滤液中加入无水工业酒精，使之生成絮状沉淀，过滤，用95％的乙醇洗涤，然后再用无水乙醇洗涤，风干，得到葡甘聚糖精粉。

按照本发明，将具有保护基团的精氨酸或赖氨酸依次连接成一定长度的精氨酸或赖氨酸多肽。然后将后者通过魔芋葡甘聚糖的羟基共价接枝到葡甘聚糖多糖链上，产生能够吸附胆酸类物质的减肥、降胆固醇保健品。其制备方法包括如下步骤：

(1)制备Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

称取一定量的葡甘聚糖，用DMF(二甲基甲酰胺)溶胀10～60分钟，使葡甘聚糖充分溶胀，加入DMAP(4-二甲基氨基吡啶)，DCC(N，N′-二环己基碳二亚胺)、HOBt(1-羟基苯并三唑)、Fmoc-Arg(Pbf)-OH(Fmoc-保护氨基酸)，10～50℃反应0.5～5小时。再加甲醇、CH₂Cl₂(二氯甲烷)、DMF各洗三遍，氮气吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

混合物中：

HOBt的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DCC的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DMAP为少量；

Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍。

(2)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(1)中的Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10～50℃反应5～70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入HOBt，DCC，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，10～50℃反应0.5～5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

混合物中：

所说的脱帽试剂为：PIP(六氢哌啶)/DMF＝1∶2～5，体积比；

HOBt的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DCC的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

(3)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(2)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10～50℃反应5～70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入HOBt，DCC，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，10～50℃反应0.5～5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

混合物中：

所说的脱帽试剂为：PIP/DMF＝1∶2～5，体积比；

HOBt的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DCC的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

(4)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(3)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10～50℃反应5～70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入HOBt，DCC，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，10～50℃反应0.5～5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)葡甘聚糖。

混合物中：

所说的脱帽试剂为：PIP/DMF＝1∶2～5，体积比；

HOBt的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DCC的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

(5)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)葡甘聚糖

在步骤(4)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10～50℃反应5～70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入HOBt，DCC，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，10～50℃反应0.5～5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)葡甘聚糖。

混合物中：

所说的脱帽试剂为：PIP/DMF＝1∶2～5，体积比；

HOBt的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DCC的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

(6)制备Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖

在步骤(5)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10～50用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干得到Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。往所得到的Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中加入脱Pbf基团试剂，10～50℃反应10～120分钟，用乙醇洗涤五遍，吹干，得到Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖。

混合物中：

所说的脱帽试剂为：PIP/DMF＝1∶2～5，体积比，下同；

所说的脱Pbf基团试剂为：TFA(三氟乙酸)/H₂O＝2～5∶1。

反应后所得到的保健品中的氨基酸的含量可以通过凯氏定氮法来测定。其测定具体方法为先称取一定量的保健品放入凯氏烧瓶中，加入浓硫酸及催化剂分解消化试样，使试样中的氮转化为硫酸铵；将消解好的试样转移入蒸馏器中，加浓氢氧化钠溶液，再用标准溶液直接滴定。通过测定得到的氮的含量可以计算出保健品中氨基酸的含量。

本发明的优点是葡甘聚糖廉价易得，制备方法简单，可以应用于工业生产。同时由于葡甘聚糖没有恶臭气味，具有纤维素功能，能够促进胃肠的蠕动，因此可以克服目前应用的胆酸螯合剂易引起恶心、腹痛、消化不良等胃肠道反应的缺点，可以长期服用，起到减肥、降胆固醇的目的。

本发明的具体实施方式：

实施例1

实施例和前述过程中所采用的原料列表如下：

No            原料及试剂品名                来源

1             魔芋葡甘聚糖          成都派特生物科技有限公司

2             Fmoc-Arg(Pbf)-OH      吉尔生化(上海)有限公司

3             Fmoc-Lys(Boc)-OH      吉尔生化(上海)有限公司

4             HOBt                  吉尔生化(上海)有限公司

5             DCC                   国药集团化学试剂有限公司

6             三氟乙酸(TFA)         国药集团化学试剂有限公司

7             MeOH                  国药集团化学试剂有限公司

8             二氯甲烷              国药集团化学试剂有限公司

9             二甲基甲酰胺(DMF)     国药集团化学试剂有限公司

10            乙醇                  国药集团化学试剂有限公司

11            六氢哌啶(PIP)         国药集团化学试剂有限公司

12            DMAP                  国药集团化学试剂有限公司

实施例中：

所说的脱帽试剂为：PIP∶DMF＝1∶3，体积比，下同；

所说的脱Pbf基团试剂为：TFA/H₂O＝2～5∶1。

合成多聚氨基酸葡甘聚糖：

(1)制备Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

称取10克葡甘聚糖，用60mlDMF溶胀40分钟，使葡甘聚糖充分溶胀，加入3mlDMAP，0.03g HOBt，0.04g DCC，0.13g Fmoc-Arg(Pbf)-OH，25℃反应2小时。再加甲醇、CH₂Cl₂、DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(2)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(1)中的Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，25℃反应60分钟，吹干，用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.03g HOBt，0.04g DCC，0.13gFmoc-Arg(Pbf)-OH，25℃反应2小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(3)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(2)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，25℃反应60分钟，吹干，用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.03g HOBt，0.04g DCC，0.13gFmoc-Arg(Pbf)-OH，25℃反应2小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(4)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)葡甘聚糖

在步骤(3)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，25℃反应60分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.03g HOBt，0.04g DCC，0.13g Fmoc-Arg(Pbf)-OH，25℃反应2小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(5)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(4)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，25℃反应60分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.03g HOBt，0.04g DCC，0.13g Fmoc-Arg(Pbf)-OH，25℃反应2小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(6)制备Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖

在步骤(5)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，25℃反应60分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干得到Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。往所得到的Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中加入脱Pbf基团试剂，25℃反应80分钟，用乙醇洗涤五遍，吹干，得到10.03g Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖。Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖中Arg-Arg-Arg-Arg-Arg的含量为0.03g。

实施例2

合成多聚氨基酸葡甘聚糖：

(1)制备Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

称取8克葡甘聚糖，用50mlDMF溶胀30分钟，使葡甘聚糖充分溶胀，加入2mlDMAP，0.02g HOBt，0.03g DCC，0.10g Fmoc-Arg(Pbf)-OH，50℃反应1.5小时，吹干。分别用甲醇、CH₂Cl₂、DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(2)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(1)中的Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，35℃反应40分钟，吹干，用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.02g HOBt，0.03g DCC，0.10g Fmoc-Arg(Pbf)-OH，50℃反应1.5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(3)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(2)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，35℃反应40分钟，吹干，用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.02g HOBt，0.03g DCC，0.10gFmoc-Arg(Pbf)-OH，50℃反应1.5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(4)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)葡甘聚糖

在步骤(3)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，35℃反应40分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.02g HOBt，0.03g DCC，0.10gFmoc-Arg(Pbf)-OH，50℃反应1.5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(5)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(4)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，35℃反应40分钟，吹干，用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.02g HOBt，0.03g DCC，0.10g Fmoc-Arg(Pbf)-OH，50℃反应1.5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(6)制备Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖

在步骤(5)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，35℃反应40分钟，吹干，用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干得到Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。往所得到的Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中加入脱Pbf基团试剂，35℃反应55分钟，用乙醇洗涤五遍，吹干，得到8.03g Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖。Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖中Arg-Arg-Arg-Arg-Arg的含量为0.03g。

实施例3

合成多聚氨基酸葡甘聚糖：

(1)制备Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

称取5克葡甘聚糖，用25mlDMF溶胀30分钟，使葡甘聚糖充分溶胀，加入1mlDMAP，0.02g HOBt，0.03g DCC，0.10g Fmoc-Arg(Pbf)-OH，10℃反应4小时，吹干。再加甲醇、CH₂Cl₂、DMF各洗三遍，氮气吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(2)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(1)中的Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10℃反应70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.03g HOBt，0.04g DCC，0.13g Fmoc-Arg(Pbf)-OH，25℃反应2小时，吹干，分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(3)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(2)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10℃反应70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.02g HOBt，0.03g DCC，0.10gFmoc-Arg(Pbf)-OH，10℃反应4小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。(4)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)葡甘聚糖

在步骤(3)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10℃反应70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.02g HOBt，0.03g DCC，0.10gFmoc-Arg(Pbf)-OH，10℃反应4小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(5)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(4)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10℃反应70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入0.02g HOBt，0.03g DCC，0.10g Fmoc-Arg(Pbf)-OH，10℃反应4小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

(6)制备Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖

在步骤(5)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10℃反应70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干得到Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。往所得到的Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中加入脱Pbf基团试剂，25℃反应80分钟，用乙醇洗涤五遍，吹干，得到5.02g Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖。Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖中Arg-Arg-Arg-Arg-Arg的含量为0.02g。

实施例4

本发明的保健品的效果检验按如下步骤进行：

将24只SD大鼠(体重(280±2)g)，随机分成4组，每组6只，雌雄各半。一组为空白对照组，从实验开始到结束始终喂以普通饲料。其余3组为实验组，即葡甘聚糖组、多聚氨基酸组和多聚氨基酸-葡甘聚糖组。实验组中的葡甘聚糖组饲料中添加有50％重量的魔芋葡甘聚糖；多聚氨基酸组除饲喂普通饲料外，每天灌胃多聚氨基酸2次，每次100mg/100g体重；多聚氨基酸-葡甘聚糖组除饲喂普通饲料外，每天灌胃多聚氨基酸-葡甘聚糖2次，每次100mg/100g体重。以上各组进行动物减肥、降胆固醇实验的时间为30天。在以上各组普通的饲料中均放有少量的炭黑，以观察大鼠食用保健品后的排便情况。结果表明：

(1)本发明的产品可使雌雄大鼠的体重明显减轻和使其血液中的胆固醇含量降低；

(2)本发明的产品使雌雄大鼠在灌胃本产品后的排便时间间隔缩短，排便量增加，因此本产品有助于提高食物在胃肠道的蠕动，具有通便的作用；

(3)本发明产品未发现不良作用。

结果以 x±s表示，组间差异经t检验和分析。

               表1 不同物质对大鼠体重及胆固醇含量的影响

组别          动物数  原始体重(g)   四周后体重      原始胆固醇含  四周后血液胆固醇

              (只)                  (g)             量            含量

                                                    (mmol/L)      (mmol/L)

空白对照      6       280.15±0.43  295.83±0.28    1.45±0.50    1.46±0.48

葡甘聚糖      6       281.35±0.38  268.25±0.35    1.46±0.38    1.40±0.29

多聚氨基酸    6       280.53±0.36  293.67±0.16    1.45±0.26    1.42±0.38

多聚氨基酸-   6       281.69±0.56  248.51±0.29    1.46±0.45    1.21±0.19

葡甘聚糖

Claims (6)

1.一种用于减肥、降胆固醇的保健品，其特征在于：在一种聚合物上面共价接枝上一定数量的多聚氨基酸。

2.根据权利要求1，所说的聚合物为魔芋葡甘聚糖。

3.根据权利要求1，所说的多聚氨基酸为多聚精氨酸或多聚赖氨酸。

4.根据权利要求1，在聚合物上共价接枝的多聚氨基酸的数量为1-5个。

5.根据权利要求1，该保健品的制备方法步骤为：

采用固相合成的方法在葡甘聚糖上依次连接具有保护基团的氨基酸，获得保护的一定数量的氨基酸葡甘聚糖，其间依次脱去Fmoc-保护基团，用HOBt及DCC为缩合剂进行接肽反应，得到保护的氨基酸葡甘聚糖后，脱除氨基酸上的保护基团，获得氨基酸葡甘聚糖。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，其具体制备方法如下：

(1)制备Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

称取一定量的葡甘聚糖，用DMF溶胀10～60分钟，使葡甘聚糖充分溶胀，加入DMAP，DCC、HOBt、Fmoc-Arg(Pbf)-OH，10～50℃反应0.5～5小时。再加甲醇、CH₂Cl₂、DMF各洗三遍，氮气吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

混合物中：

HOBt的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DCC的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DMAP为少量；

Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍。

(2)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(1)中的Fmoc-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10～50℃反应5～70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入HOBt，DCC，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，10～50℃反应0.5～5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

混合物中：

所说的脱帽试剂为：PIP/DMF＝1∶2～5，体积比；

HOBt的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DCC的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

(3)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(2)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10～50℃反应5～70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入HOBt，DCC，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，10～50℃反应0.5～5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。

混合物中：

所说的脱帽试剂为：PIP/DMF＝1∶2～5，体积比；

HOBt的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DCC的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

(4)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖

在步骤(3)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10～50℃反应5～70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入HOBt，DCC，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，10～50℃反应0.5～5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)葡甘聚糖。

混合物中：

所说的脱帽试剂为：PIP/DMF＝1∶2～5，体积比；

HOBt的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DCC的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

(5)制备Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)葡甘聚糖

在步骤(4)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10～50℃反应5～70分钟，吹干。用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干。加入HOBt，DCC，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，10～50℃反应0.5～5小时，吹干。分别用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)葡甘聚糖。

混合物中：

所说的脱帽试剂为：PIP/DMF＝1∶2～5，体积比；

HOBt的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

DCC的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

Fmoc-Arg(Pbf)-OH的摩尔数为葡甘聚糖的3～5倍；

(6)制备Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖

在步骤(5)中的Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)葡甘聚糖中，加入脱帽试剂，10～50用MeOH，CH₂Cl₂，DMF各洗三遍，吹干得到Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖。往所得到的Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-葡甘聚糖中加入脱Pbf基团试剂，10～50℃反应10～120分钟，用乙醇洗涤五遍，吹干，得到Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-葡甘聚糖。

混合物中：

所说的脱帽试剂为：PIP/DMF＝1∶2～5，体积比，下同；

所说的脱Pbf基团试剂为：TFA/H₂O＝2～5∶1。