CN101020704A

CN101020704A - 一类具有镇静活性的豆腐果苷衍生物新药及其制备方法

Info

Publication number: CN101020704A
Application number: CN 200710048613
Authority: CN
Inventors: 尹述凡; 祝钱莉; 李颖; 唐强; 郭彩红; 周美荣
Original assignee: Sichuan University
Current assignee: Sichuan University
Priority date: 2007-03-14
Filing date: 2007-03-14
Publication date: 2007-08-22

Abstract

本发明公开了具有改善中枢神经系统功能的豆腐果苷类衍生物，及其制备方法。该类化合物具有良好的镇静、安眠、抗惊厥作用。目前已以药品名“神衰果素片”被收入2000年版《中国药典》。该类豆腐果苷类衍生物新药具有如下化学式(I)、(II)、(III)。本发明所提供的豆腐果苷类衍生物是以具有镇静、安眠、抗惊厥活性的植物活性单体豆腐果苷为母体化合物，根据药物构效分子学的原理进行结构修饰，设计并制备的对改善中枢神经系统功能具有高活性的化合物。

Description

一类具有镇静活性的豆腐果苷衍生物新药及其制备方法

技术领域

本发明是对具有镇静、安眠活性的植物活性单体豆腐果苷进行结构修饰，得到一系列疗效更好的豆腐果苷的衍生物。

技术背景

豆腐果苷A即4-甲酰苯基-β-D-吡喃阿洛糖苷(4-fornylphenl-β-D-Allosupranoside)是陈维新等在Liebigs.Ann.Chem.，1981，(10)中首次报道从我国云南山龙眼科植物萝卜树(Helicia NilagiricaBeed，异名Helicia Erratica Hook)的果实中提取出的有效成分，其结构如(A)所示：

目前，将豆腐果苷A做为制剂的报道较多，且以申请专利。在公开号为CN1535690中，报道了豆腐果苷软胶囊及其制备方法；公开号为CN1535691中提供一种豆腐果苷粉针剂及其制备方法；公开号为CN1586494中公开了一种适用于缓解神经官能症的头痛、头昏及睡眠障碍，辅助治疗原发性头痛的豆腐果苷口腔崩解片；公开号为CN1596903中提供一种豆腐果苷软胶囊；公开号为CN1640410中公开了一种豆腐果苷胶囊；公开号为CN1478482中提供了一种采用缓、控释技术制得豆腐果素的缓、控释制剂；公开号为CN1454600中提供了一种神衰果素速释片剂及其制备方法。

已有很多关于豆腐果苷A药理作用的报道。如陈肇熙等“豆腐果甙镇痛作用的初步探讨”(《第一军医大学学报》，1985，5[3])；沙静姝等“新药评价：豆腐果甙(昆明神衰果素)”(《药学通报》，1987，22[1])；钟裕国等“”(《四川医学院学报》，1984，15[1])刘苹等“豆腐果苷对大鼠仔代的早期神经行为毒性”(《中成药》，2002，24[4])；汤甫琴等“神衰果素片治疗神经衰弱症候群的临床观察”(《中国中西医结合杂志》，1998，18[3])；李健等“豆腐果甙的神经行为致畸效应”(《卫生毒理学杂志》，2001，15[2])；韩喻美等“中药对兴奋性神经递质谷氨酸的影响”(《江西医学院学报》，1996，36[1])。

发明内容

本发明的目的之一是以豆腐果苷为先导化合物，对其结构修饰从而合成新衍生物。

本发明的目的之二是合成一系列新的具有更好药理活性的镇静安眠、抗惊厥类药物。

本发明的目的之三是提供以这些化合物作为有效的药用活性成分而用于镇静安眠药物，使医生和/或病员在对疾病的防治时能增加对可供使用药物的选择。

本发明以豆腐果苷为先导化合物，对其结构修饰合成的化合物，其结构式如式(I)、(II)、(III)所示：

其中，式(I)中n＝2，3，4......，式(II)中R¹可以分别是乙基、丙基、正丙基、异丙基、丁基等脂肪链化合物，还可以是苯基、对甲苯基、邻甲苯基等芳香基；式(III)中R²可以是氨基(水合肼)、羟基(羟胺)、脂肪氨基(氨基脲等)、芳香氨基如2，4-二硝基苯肼，苯肼等，此外，还可以是脂肪链如甲胺、正丙胺等，芳基如苯胺、邻甲苯胺对甲苯胺等。

在以式(A)结构的豆腐果苷为原料合成本发明上述化合物(I)、(II)、(III)时，可采用下面的方法制备。

其中，在制备化合物(I)、(II)中，催化剂NaOH的量要控制合适，否则副反应增多或者根本得不到目标产物；具有活泼α-氢的羰基化合物的物质的量、反应时间和反应温度要控制适中，否则副反应增多导致收率降低。在制备化合物(III)中，腙类化合物收率较高，且物质较稳定，而西佛碱类化合物较不稳定，故在分离过程中硅胶柱层析采取短柱的方式。

由上述内容可以理解，采用上述的合成方式制备本发明所说的化合物(I)、(II)、(III)，路线十分简单，成本较低，产物的收率较高，能适合于工业化和扩大生产的需要。

动物实验的结果表明，本发明上述的化合物(I)、(II)、(III)可以具有加强豆腐果苷的镇静安眠活性作用，增强药效。

按照《新药临床前研究指导原则》要求，选定了光电管法测定小鼠给药前后自发活动次数实验作为镇静活性筛选指标，对本发明上述的若干化合物(I)、(II)、(III)和式(A)所示母体化合物豆腐果苷进行了对比实验。药理实验方法根据《中药药理研究方法学》《中药新药研制开发技术与方法》以及《新药临床前研究指导原则》的标准制定。

光电管法测定小鼠给药前后自发活动次数实验：取健康昆明种小鼠96只，按性别、体重随机分为16组，每组6只，雌雄各半。给药前将各组小鼠分别放置于自发活动记录装置的盒内，使其适应环境5min，然后开始记录时间，观察并记录5min数码管上显示的数字，作为给药前小鼠自发活动次数的对照值。全部小鼠测定完成后，分组给药。给药后测定各组小鼠5min的自发活动次数，所得数据进行统计处理，并比较组间的显著差异。将化合物2a～2f，3a～3h和DF(豆腐果苷)用0.5％CMC(羧甲基纤维素钠)液配制成1％、0.5％浓度的混悬液，以0.5％CMC液和0.05％安定溶液作为对照组，采用光电管法来测定化合物对小鼠自发活动作用的影响，实验结果见表一。

表一化合物对小鼠自发活动的影响

与阴性组比^*P＜0.05 ^**P＜0.01 ^***P＜0.001

上述对比实验结果显示，本发明的豆腐果苷类化合物与其母体化合物(A)比较，在镇静安眠活性方面有更好的效果。

按照上述内容，在不脱离本发明上述基本技术思想的前提下，根据本领域的普通技术知识和惯用手段，对其内容还可以有多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的实施内容再进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

实例1

Z-4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯乙烯基乙酮(2a)的合成

1.00g(3.52mmol)1溶解在25ml10％NaOH甲醇溶液中，再加入0.30g(4.20mmol)的丁酮，室温下搅拌反应。TLC监测反应。用稀盐酸水溶液调pH＝7左右，浓缩，加入水溶解，乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，蒸出乙酸乙酯，残余物经硅胶分离纯化CHCl₃∶CH₃OH＝4∶1(V/V)得2a。黄色针晶，产率61％，m.p.61～62℃；¹H NMR(400MHz，CD₃COCD₃)δ：1.03(t，3H，CH₃)，2.70(m，2H，CH₂CH₃)，3.60～4.20(m，6H)，5.30(d，J＝8Hz，1H，1-H)，6.78(d，J＝16，1H，CH＝CH)，7.10(d，2H，PhH)，7.60(d，J＝16.4，1H，CH＝CHCO)，7.62(d，2H，PhH)；3.60～4.40(4H，br，4-OH)；IR(KBr)v：3380，3070，2990，2870，1698，1692，1662，1602，1508，1460，1244，1183，1034，962，830；MS[ESI(-)]m/z(％)：361.2([M+Na]⁺，100)；HRMS(ESI)calcd for C₁₇H₂₂O₇(M+Na)361.1258，found 361.1250

2b～2d，2f的合成同2a。

实例2

Z-4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯乙烯基异丙酮(2b)浅黄色晶体，产率65％，m.p.56～57℃；¹H NMR(400MHz，CD₃COCD₃)δ：1.10(s，6H，2CH₃)，2.94～3.00(m，1H，CH(CH₃)₂)，3.60～4.20(m，6H)，5.30(m，1H)，6.88(d，J＝16Hz，CH＝CH，1H)，7.08～7.14(m，(2H，PhH)，7.54(d，J＝16.4Hz，1H，CH＝CHCO)，7.64～7.78(m，2H，PhH)，3.60～4.40(4H，br，4-OH)；IR(KBr)v：3426，3070，2968，2870，1694，1690，1667，1600，1580，1510，1460，1370，1242，1178，1078，965，828；MS[ESI(-)]m/z(％)：375.1([M+Na]⁺，100)；HRMS(ESI) calcd forC₁₈H₂₄O₇(M+Na)375.1414，found 375.1415

实例3

Z-4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯乙烯基异丁酮(2c) 浅黄色固体，产率75％，m.p.50～52℃；¹HNMR(400MHz，CD₃COCD₃)δ：1.01(s，6H，2 CH₃)，2.12～2.20(m，1H，CH)，2.58(d，2H，J＝6.8CH₂)，3.60～4.20(m，6H)，5.30(d，J＝8，1H，1-H)，6.78(d，J＝16，1H，CH＝CH)，7.10(d，2H，PhH)，7.60(d，J＝16.4，1H，CH＝CHCO)，7.62(d，2H，PhH)；3.60～4.40(4H，br，4-OH)；IR(KBr)v：3420，3070，2932，2870，1718，1664，1600，1580，1510，1460，1384，1242，1176，1038，963，830；MS[ESI(-)]m/z(％)：389.1([M+Na]⁺，100)；HRMS(ESI)calcd for C₁₉H₂₆O₇(M+Na)389.1571，found 389.1562

实例4

Z-4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯乙烯基苯酮(2d)黄色固体，产率68％，m.p.79～81℃；¹H NMR(400MHz，CD₃COCD₃)δ：3.62～4.21(m，6H)，5.32(d，J＝8Hz，1H，1-H)，7.04(d，J＝8.8Hz，2H，PhH)，7.55(dd，J＝8.8Hz，16Hz，2H)，7.63(d，J＝16Hz，1H)，7.80(dd，J＝8Hz，4H)，8.14(d，J＝8Hz，2H)，3.60～4.40(4H，br，4-OH)；IR(KBr)v：3386，3090，2922，2872，1718，1692，1655，1588，1509，1422，1218，1175，1037，967，832；MS[ESI(-)]m/z(％)：794.8([2M+Na]⁺，100)；HRMS(ESI)calcd for C₂₁H₂₂O₇(M+Na)409.1258，found 409.1258

实例5

4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯乙烯基环戊酮(2e)的合成 1.00g(3.52mmol)1溶解在25ml2％NaOH甲醇溶液中，再加入0.35g(4.20mmol)的环戊酮，冰浴下搅拌反应。TLC监测反应。用稀盐酸水溶液调pH＝7左右，浓缩，加入水溶解，乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，蒸出乙酸乙酯，残余物经硅胶分离纯化CHCl₃∶CH₃OH＝4∶1(V/V)得2e。黄色粉末，产率53％，m.p.152～154℃；¹H NMR(400MHz，CD₃COCD₃)δ：1.96～2.00(m，2H，CH₂)，2.30(t，2H，C＝CCH₂)，2.92(m，2H，COCH₂)，3.58～4.20(m，6H)，5.20(d，J＝7.6Hz，1H，1-H)，7.14(d，2H，PhH)，7.22(m，1H，CH＝C)，7.56(d，2H，PhH)，3.60～4.40(4H，br，4-OH)；IR(KBr)v：3330，3072，2968，2870，1734，1700，1654，1602，1580，1508，1420，1249，1176，1032，824；MS[ESI(-)]m/z(％)：373.2([2M+Na]⁺，100)；HRMS(ESI)calcd for C₁₈H₂₂O₇(M+Na)373.1258，found 373.1262

实例6

4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯乙烯基环己酮(2f) 深黄色粉末，产率67％，m.p.97～98℃；¹HNMR (400MHz，CD₃COCD₃)δ：1.74～1.80(m，2H，CH＝CCH₂CH₂)，1.86～1.96(m，2H，COCH₂CH₂)，2.80～2.88(m，2H，CH＝CCH₂)，2.44(t，2H，COCH₂)，3.58～4.22(m，6H)，5.20(d，J＝7.6Hz，1H，1-H)，7.10(d，2H，PhH)，7.36(s，1H，CH＝C)，7.44(d，2H，PhH)，3.60～4.40(4H，br，4-OH)；IR(KBr)v：3339，3060，2934，2870，1690，1670，1602，1508，1420，1241，1181，1038，835；MS[ESI(-)]m/z(％)：387.1([2M+Na]⁺，100)；HRMS(ESI)calcd forC₁₉H₂₄O₇(M+Na)387.1414，found 387.1419

实例7

4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯甲醛肟(3a)的合成0.25g(3.60mmol)盐酸羟胺溶解在5ml水中，逐渐加入0.30g(3.60mmol)NaHCO₃，再加入溶解1.00g(3.52mmol)1的30ml无水乙醇，冰浴下反应2h，旋干，用无水乙醇和少量水混合溶液重结晶两次得3a。白色针晶，产率88％，m.p.193～194℃；¹H NMR(400MHz，CD₃COCD₃)δ：3.60～4.20(m，6H)，5.30(m，1H，1-H)，7.10(d，2H，PhH)，7.55(d，2H，PhH)，8.08(s，1H，CH＝C)；IR(KBr)v：3378，2927，2864，1640，1606，1514，1240，1177，1082，964，833；MS[ESI(-)]m/z(％)：298.1([M-H]^-，100)；HRMS(ESI)calcd for C₁₃H₁₇NO₇(M+Na)322.0897，found 322.0893

实例8

4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯甲醛腙(3b)的合成1.00g(3.52mmol)1，1ml80％水合肼，30ml无水乙醇在冰浴下反应1h有大量沉淀生成，过滤得固体，再用乙醇-水混合液重结晶得3b。白色针晶，产率87％，m.p.144～146℃；¹H NMR(400MHz，CD₃COCD₃)δ：3.62～4.22(m，6H)，4.36～4.40(m，2H，NH₂)，5.30(d，J＝8Hz，1H，1-H)，7.12(d，2H，PhH)，7.76(d，2H，PhH)，8.25(s，1H，CH＝C)，3.60～4.98(4H，br，4-OH)；IR(KBr)v：3338，3286，2924，2871，1664，1606，1508，1238，1177，1038，829；MS[ESI(-)]m/z(％)：595.0([2M-H]^-，100)；HRMS(ESI)calcd for C₁₃H₁₈N₂O₆(M+Na)321.1057，found 321.1056

实例9

4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯甲醛苯甲酰腙(3c)的合成 0.48g(3.52mmol)苯甲酰肼，1.00g(3.52mmol)1，40ml无水乙醇，催化量冰醋酸回流搅拌反应4h，有大量沉淀生成，过滤，用乙醇和少量水重结晶得3c。白色晶体；产率92％，m.p.154～156℃；MS(m/z)(2M+Na)⁺：827.0；¹H NMR(400MHz，CD₃COCD₃)δ：3.60～4.21(m，6H)，5.30(d，J＝7.6Hz，1H，1-H)，7.10～7.95(m，9H，PhH)，8.45(s，1H，CH＝N)，10.90(s，1H，NH)，3.60～4.40(4H，br，4-OH)：IR(KBr)v：3380，3054，2922，2872，1672，1662，1606，1578，1508，1240，1174，1078，836；MS[ESI(-)]m/z(％)：827.0([2M+Na]⁺，100)；HRMS(ESI)calcd forC₂₀H₂₂N₂O₇(M+Na)425.1319，found 425.1327

实例10

4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯甲醛缩氨脲(3d)的合成 0.39g(3.52mmol)盐酸氨基脲溶于5ml水中，用无水NaAc₂溶液调pH＝5～6，再加入溶解1.00g(3.52mmol)1的40ml无水乙醇，加入几滴冰醋酸，回流搅拌反应5h，有大量沉淀生成，冷却过滤，用乙醇-水混合液重结晶得3d。白色晶体，产率91％，m.p.210～212℃；¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：3.40～3.94(m，6H)，5.30(d，J＝7.8Hz，1H，1-H)，6.40(s，2H，NH₂)，7.00(d，2H，PhH)，7.65(d，2H，PhH)，7.80(s，1H，CH＝N)，10.09(s，1H，NH)，4.40～5.12(4H，br，4OH)；IR(KBr)v：3382，3244，2917，2870，1734，1678，1610，1578，1540，1508，1458，1302，1243，1178，1083，831；MS[ESI(-)]m/z(％)：681.0([2M-H]^-，100)；HRMS(ESI)calcd for C₁₄H₁₉N₃0₇(M+Na)364.1115，found 364.1122

实例11

4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯甲醛-2-4-二硝基苯腙(3e)的合成 0.70g(3.52mmol)2，4-二硝基苯肼，1.00g(3.52mmol)1，40ml无水乙醇，几滴冰醋酸，回流搅拌反应6h有大量红色沉淀生成，冷却过滤，再用DMF-H₂O混合溶剂重结晶得3e。红色粉末，产率92％，m.p.222～225℃；¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：3.40～(m，6H)，5.20(d，J＝8Hz，1H，1-H)，7.10(d，2H，PhH)，7.80(d，2H，PhH)，8.01(d，1H，NHPhH)，8.23(d，1H，NHPhH)，8.60(s，1H，CH＝N)，8.80(d，1H，NHPhH)，10.90(s，1H，NH)，4.40～5.12(4H，br，4OH)；IR(KBr)v：3288，3117，2918，2870，1734，1680，1616，1582，1537，1506，1420，1334，1306，1243，1172，1080，835；MS[ESI(-)]m/z(％)：463.15([M-H]^-，100)；HRMS(ESI)calcd for C₁₉H₂₀N₄O₁₀(M+Na)487.1072，found 487.1056

实例12

4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯甲醛缩苯胺(3f)的合成1.00g1(3.52mmol)，1ml苯胺，40ml无水乙醇，加热回流搅拌反应。TLC跟踪反应，反应不完全，无变化时停止反应。反应液旋干，甲醇溶解，硅胶短柱(CH₂Cl₂洗脱)苯胺，再用CH₂Cl₂∶CH₃OH＝8∶1得产品3f。白色粉末，产率82％，m.p.80～82℃；¹H NMR(400MHz，CD₃COCD₃)δ：3.60～4.20(m，6H)，5.38(d，J＝8Hz，1H，1-H)，7.20(d，2H，PhH)，7.20(d，5H，NPhH)，7.92(d，2H，PhH)，8.40(s，1H，CH＝N)；IR(KBr)v：3330，2916，2876，1684，1644，1600，1588，1512，1424，1304，1248，1174，1086，840；MS[ESI(-)]m/z(％)：360.1；([M+H]⁺，100)；HRMS(ESI)calcd forC₁₉H₂₁NO₆(M+Na)382.1867，found 382.1861

3g，3h的合成同3f。

实例13

4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯甲醛缩邻甲苯胺(3g) 白色粉末，产率79％，m.p.79～81℃；¹HNMR(400MHz，CD₃COCD₃)δ：2.30(s，3H，CH₃)，3.60～4.20(m，6H)，5.38(d，J＝8Hz，1H，1-H)，7.01(d，2H，PhH)，7.22(d，4H，NPhH)，7.98(d，2H，PhH)，8.40(s，1H，CH＝N)；IR(KBr)v：3335，2913，2875，1680，1641，1603，1584，1507，1424，1305，1248，1177，1086，838；MS[ESI(-)]m/z(％)：374.1([M+H]⁺，100)；HRMS(ESI) calcd for C₂₀H₂₃NO₆(M+Na)396.1418，found 396.1421

实例14

4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯甲醛缩对甲苯胺(3h) 白色粉末，产率53％，m.p.80～82℃；¹HNMR(400MHz，CD₃COCD₃)δ：2.32(s，3H，CH₃)，3.60～4.20(m，6H)，5.38(d，J＝8Hz，1H，1-H)，7.03(d，2H，PhH)，7.20(d，4H，NPhH)，7.97(d，2H，PhH)，8.40(s，1H，CH＝N)；IR(KBr)v：3333，2918，2870，1682，1646，1602，1586，1508，1424，1306，1248，1175，1086，839；MS[ESI(-)]m/z(％)：374.1([M+H]⁺，100)；HRMS(ESI)ca1cd for C₂₀H₂₃NO₆(M+Na)396.1418，found 396.1423

Claims

1一类具有镇静活性的豆腐果苷衍生物，其结构如式(I)、(II)、(III)所示：

其中，式(I)中n＝2，3，4……；式(II)中R¹可以是脂肪链化合物，还可以是芳香基；式(III)中R²可以是胺基类，脂肪链类和芳基类化合物。

2根据权利要求1所述的具有镇静活性的豆腐果苷衍生物，其特征是所说的R¹的脂肪链可以为C₁-C₅的烷基。

3根据权利要求1所述的具有镇静活性的豆腐果苷衍生物，其特征是所说的R¹的芳香基可以为苯基、对甲苯基、邻甲苯基等。

4根据权利要求1所述的具有镇静活性的豆腐果苷衍生物，其特征是所说的R²的胺基类可以为氨基(水合肼)、羟基(羟胺)、脂肪氨基(氨基脲等)、芳香氨基如2，4-二硝基苯肼，苯肼等。

5根据权利要求1所述的具有镇静活性的豆腐果苷衍生物，其特征是所说的R²的脂肪链可以是甲基、正丙基等。

6根据权利要求1所述的具有镇静活性的豆腐果苷衍生物，其特征是所说的R²的芳基可以是苯基、邻甲苯基、对甲苯基等。

7以化学式(I)、(II)、(III)为代表的化合物的合成方法，其特征是通过豆腐果苷与活泼氢的羰基化合物发生Shimdt-Claisen缩合或与胺类、肼类试剂缩合所得的豆腐果苷类衍生物。

8本发明化合物可以做成片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂以及注射剂或其它临床可以接受的适宜剂型。