CN101012285A - 牡蛎多糖和制备方法及其在制备化妆品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种牡蛎多糖和制备方法及其在制备化妆品中的应用,牡蛎多糖,含有总重量80-90%的α-1,4;1,6-葡聚多糖和β-1,6-葡聚多糖,相对分子量为4000-6500Da。制备方法有如下步骤:取大连湾牡蛎或太平洋牡蛎,用0~10℃的水清洗牡蛎;用0.3~0.5MPa压力,70~80℃温度煮牡蛎20~45分钟,过滤、收集上清液;离心去沉淀,将上清液用浓度60~70%的乙酸调至pH5-6,酸解1~3h,用膜分离器截留分子量为30000Da以下的物质;用NaOH调解30000Da以上滤液的pH至6-8,离心去沉淀,取上清液在蒸馏水中透析除盐;通过Sephadex G-100分子筛层析柱,收集OD280nm吸收峰,透析除盐后冷冻干燥。将牡蛎多糖在制备化妆品中的应用,使化妆品具有显著的保湿作用。

Description

牡蛎多糖和制备方法及其在制备化妆品中的应用
技术领域:
本发明涉及一种首次从大连湾牡蛎(Crassostrea talienwhanensis Crosse)和太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)中分离提取的牡蛎多糖和制备方法及其在化妆品中的应用。
背景技术:
有关海洋生物资源的开发,已成为当前的一个热点。海洋多糖作为一类新的生理活性物质,在疾病诊断与防治、营养与保健、畜牧养殖、植物生长调节及抗病等方面的作用具有极大的潜力,功能性多糖的开发在国际上已经发展成为一个涉及医学、化学、工程等学科,应用于食品、医药、饲料、农业各领域的重要产业。大连湾牡蛎是我国特有的牡蛎品种,对其体内所含有的生物活性肽、特异性蛋白酶等有很多研究。谭雯文等报道了牡蛎蛋白的纯化及酶解条件的研究(现代食品科技,2006,22(2):79-82);中国专利ZL200410054048.7公开了牡蛎生物活性物质的制备方法及其产品;中国专利ZL02141716.4公开了牡蛎天然活性肽和制备方法及其在制备抗癌药物中的应用;中国专利申请号200510038299.0公开了一种牡蛎活性肽的制备方法。但目前尚缺乏对大连湾牡蛎和太平洋牡蛎多糖的分离及在化妆品中保湿作用的研究。
发明内容:
本发明的目的在于提供一种首次从大连湾牡蛎(Crassostrea talienwhanensisCrosse)和太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)中分离提取的牡蛎多糖和制备方法及其在制备化妆品中的应用。
本发明的技术方案如下:一种牡蛎多糖,含有总重量80-90%的α-1,4;1,6-葡聚多糖和β-1,6-葡聚多糖,相对分子量为4000-6500Da。
一种牡蛎多糖的制备方法,其特征在于有如下步骤:
a.取大连湾牡蛎或太平洋牡蛎,用0~10℃的水清洗牡蛎;
b.用0.3~0.5MPa压力,70~80℃温度煮牡蛎20~45分钟,过滤、收集上清液;
c.离心去沉淀,将上清液用浓度60~70%的乙酸调至pH5-6,酸解1~3h,用膜分离器截留分子量为30000Da以下的物质;
d.用NaOH调解30000Da以上滤液的pH至6-8,离心去沉淀,取上清液在蒸馏水中透析除盐;
e.通过Sephadex G-100分子筛层析柱,收集OD280nm吸收峰,透析除盐后冷冻干燥。
一种如权利要求1所述牡蛎多糖在制备化妆品中的应用。
所述的牡蛎多糖的在制备化妆品中的应用,其特征在于:所述化妆品基料中含有总重量2~90%的权利要求1所述牡蛎多糖。
所述的牡蛎多糖的在制备化妆品中的应用,其特征在于:所述化妆品基料中含有含有胶原蛋白、芦荟提取物、γ一聚谷氨酸中的至少一种。
本发明具有如下优点:
1.保湿作用。含牡蛎多糖的护肤品涂于皮肤后,可在皮肤表面形成一层薄膜,使皮肤产生良好的光滑感和湿润感,手感良好;对皮肤起到保护作用。
2.促进免疫功能。本发明在100微克/毫升浓度下,可明显增加小鼠脾淋巴细胞转化率到200.3%。
3.具有降低胆固醇和排除重金属的作用。
附图说明:
图1是本发明实施例时间飞行质谱图。
具体实施方式:
实施例1:
a.取大连湾牡蛎或太平洋牡蛎,用0~10℃的水清洗牡蛎;
b.用高压容器,用水在0.3MPa压力,70℃温度下煮牡蛎20分钟,水与牡蛎的重量比是1.5~3∶1,过滤、收集上清液;
c.离心去沉淀,将上清液用浓度60%的乙酸调至pH5,酸解1h,用膜分离器截留分子量为30000Da以下的物质;
d.用NaOH调解30000Da以上滤液的pH至6,离心去沉淀,取上清液在蒸馏水中透析除盐;
e.通过Sephadex G-100分子筛层析柱,收集OD280nm吸收峰,透析除盐后冷冻干燥,制得牡蛎多糖。
用酶解或酶解与核磁共振的方法检测牡蛎多糖,其中含有总重量80~90%的α-1,4;1,6-葡聚多糖和β-1,6-葡聚多糖,相对分子量为4000-6500Da,其余为蛋白质等杂质;如图1所示的时间飞行质谱显示其m/z主要为5996和6189,所得牡蛎多糖的相对湿度不大于10%,溶解度为1克多糖可溶于30毫升水中。
实施例2:
a.取大连湾牡蛎或太平洋牡蛎,用0~10℃的水清洗牡蛎;
b.用高压容器,用水在0.5MPa压力,80℃温度煮牡蛎30分钟,水与牡蛎的重量比是1.5~3∶1,过滤、收集上清液;
c.离心去沉淀,将上清液用浓度70%的乙酸调至pH6,酸解3h,用膜分离器截留分子量为30000Da以下的物质;
d.用NaOH调解30000Da以上滤液的pH至8,离心去沉淀,取上清液在蒸馏水中透析除盐;
e.通过Sephadex G-100分子筛层析柱,收集OD280nm吸收峰,透析除盐后冷冻干燥,制得牡蛎多糖。
用酶解或酶解与核磁共振的方法检测牡蛎多糖,其中含有总重量80~90%的α-1,4;1,6-葡聚多糖和β-1,6-葡聚多糖,相对分子量为4000-6500Da,其余为蛋白质等杂质;如图1所示的时间飞行质谱显示其m/z主要为5996和6189,所得牡蛎多糖的相对湿度不大于10%,溶解度为1克多糖可溶于30毫升水中。
实施例3:
a.取大连湾牡蛎或太平洋牡蛎,用0~10℃的水清洗牡蛎;
b.用高压容器,在0.4MPa压力,75℃温度煮牡蛎45分钟,水与牡蛎的重量比是1.5~3∶1,过滤、收集上清液;
c.离心去沉淀,将上清液用浓度70%的乙酸调至pH6,酸解2h,用膜分离器截留分子量为30000Da以下的物质;
d.用NaOH调解30000Da以上滤液的pH至7,离心去沉淀,取上清液在蒸馏水中透析除盐;
e.通过Sephadex G-100分子筛层析柱,收集OD280nm吸收峰,透析除盐后冷冻干燥,制得牡蛎多糖。
用酶解或酶解与核磁共振的方法检测牡蛎多糖,其中含有总重量80~90%的α-1,4;1,6-葡聚多糖和β-1,6-葡聚多糖,相对分子量为4000-6500Da,其余为蛋白质等杂质;如图1所示的时间飞行质谱显示其m/z主要为5996和6189,所得牡蛎多糖的相对湿度不大于10%,溶解度为1克多糖可溶于30毫升水中。
实施例4:
按实施例1、2、3制得的牡蛎多糖在制备化妆品中的应用,即将实施例1、2、3制得的牡蛎多糖应用在化妆品中,可以是粉剂,片剂和针剂等商品剂型,使用时与现有的化妆品混合即可。
实施例5:
在化妆品基料中掺入含有总重量2~90%按实施例1、2、3制得的牡蛎多糖制成保湿型化妆品,化妆品基料可以是现有的普通化妆品
实施例6:
其它同实施例5,只是在实施例5所述化妆品基料中含有胶原蛋白、芦荟提取物、γ一聚谷氨酸中的至少一种。
应用例1:
促进免疫功能:将实施例1、实施例2、实施例3的牡蛎多糖在100微克/毫升浓度下,可明显增加小鼠脾淋巴细胞转化率至200.3%。
应用例2:
保湿作用:实施例4、5、6所述的化妆品具有很强的润滑感和成膜性,涂于皮肤后,可在皮肤表面形成一层薄膜,使皮肤产生良好的光滑感和湿润感,对皮肤起到保护作用。
试验结果如下:
  时间              化妆品失水率
    对比例1     对比例2     对比例3
  6h     25%     25%     55%
  12h     45%     35%     75%
  18h     65%     55%     85%
  24h     70%     60%     90%
注:对比例1是以普通化妆品为化妆品基料,含有总重量10%甘油化妆品;
对比例2是以普通化妆品为化妆品基料,含有总重量10%牡蛎多糖化妆品;
对比例3是对比例1、2的化妆品基料,即普通化妆品。

Claims (5)

1.一种牡蛎多糖,其特征在于:含有总重量80-90%的α-1,4;1,6-葡聚多糖和β-1,6-葡聚多糖,相对分子量为4000-6500Da。
2.一种牡蛎多糖的制备方法,其特征在于有如下步骤:
a.取大连湾牡蛎或太平洋牡蛎,用0~10℃的水清洗牡蛎;
b.用0.3~0.5MPa压力,70~80℃温度煮牡蛎20~45分钟,过滤、收集上清液;
c.离心去沉淀,将上清液用浓度60~70%的乙酸调至pH5.-6,酸解1~3h,用膜分离器截留分子量为30000Da以下的物质;
d.用NaOH调解30000Da以上滤液的pH至6-8,离心去沉淀,取上清液在蒸馏水中透析除盐;
e.通过Sephadex G-100分子筛层析柱,收集OD280nm吸收峰,透析除盐后冷冻干燥。
3.一种如权利要求1所述牡蛎多糖在制备化妆品中的应用。
4.根据权利要求3所述的牡蛎多糖的在制备化妆品中的应用,其特征在于:所述化妆品基料中含有总重量2~90%的权利要求1所述牡蛎多糖。
5.根据权利要求4所述的牡蛎多糖的在制备化妆品中的应用,其特征在于:所述化妆品基料中含有含有胶原蛋白、芦荟提取物、γ一聚谷氨酸中的至少一种。
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