CN100570357C - 生脉颗粒剂的检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种生脉颗粒剂的质量控制方法，所述质量控制方法主要包括性状、检查、鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中性状应符合颗粒剂项下的有关规定；鉴别是对五味子的薄层鉴别；检查应符合《中国药典》2005年版一部附录IC颗粒剂项下有关的各项规定；含量测定为对制剂中五味子的含量测定；与现有技术相比，本发明质量控制方法精密度高，稳定性好，重现性好，回收率高，测量结果准确，提高了生脉颗粒剂的质量控制标准，可有效控制生脉颗粒剂的质量，从而确保了该制剂的临床疗效。

Description

生脉颗粒剂的检测方法

技术领域：

本发明涉及一种生脉颗粒剂(党参方)的检测方法，属于对药品进行质量控制的技术领域。

背景技术：

生脉颗粒是一种经典中成药，具有益气复脉，养阴生津，改善心功能，加强心肌收缩力，改善心肌供血，调整心肌代谢，改善微循环，调节血压，抗心率失常等功能；临床上主要用于各种类型的休克和心脏类疾病，其疗效确切。但经我们研究发现，生脉颗粒剂存在质量控制标准简单，产品质量不易控制的缺点，在产品生产过程中，用该质量控制方法不能有效控制生脉颗粒的质量，从而将影响该制剂的临床疗效。

发明内容：

本发明的目的在于：提供一种生脉颗粒剂的检测方法，本发明针对现有质量控制标准简单，产品质量不易控制的缺点，根据本方中各味药材的含量、特性及其制备工艺，研究制定了具体可行的鉴别和含量测定方法，以有效地控制生脉颗粒剂的质量，从而确保该制剂的临床疗效。

本发明所述的生脉颗粒剂是这样构成的：它由党参300g、麦冬200g、五味子100g和适当辅料制备而成。

生脉颗粒剂的制备方法为：党参、麦冬、五味子加15倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过。滤液浓缩至相对密度为1.06(60℃)，加乙醇使含醇量达50％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.30(60～65℃)的浸膏。加蔗糖粉适量，制成颗粒，干燥，整粒，制成1000g，分装，即得。

本发明所述检测方法主要包括性状、检查、鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中性状应符合颗粒剂项下的有关规定；鉴别是对五味子的薄层鉴别；检查应符合《中国药典》2005年版一部附录IC颗粒剂项下有关的各项规定；含量测定为对制剂中五味子的含量测定。

五味子的鉴别方法是以五味子醇甲对照品为对照，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1为展开剂的薄层鉴别方法。

具体的鉴别方法为：

取本制剂5g，研细，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸至近干，加硅藻土2g，拌匀，水浴蒸干，转移至锥形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

本制剂中五味子的含量测定方法是以五味子醇甲对照品为对照，以甲醇∶水＝65∶35为流动相的高效液相色谱法。

具体的含量测定方法为：

照《中国药典》2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇∶水＝65∶35为流动相；检测波长为250nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取经五氧化二磷减压干燥过夜的五味子醇甲对照品适量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取过三号筛的本制剂粉末5g，精密称定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，在功率250W、频率20KHZ条件下超声处理1小时，取出，放冷后，用甲醇补足损失的重量，摇匀，过滤，精密吸取滤液25ml，转移至圆底烧瓶中，回收甲醇至适量，再用甲醇定量转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本颗粒剂每袋含五味子以五味子醇甲C₂₄H₃₂O₇计，不得少于0.6mg。

本发明所述质量控制方法包括：

性状：药物为淡棕黄色的颗粒；气香，味甜；

鉴别：取本制剂5g，研细，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸至近干，加硅藻土2g，拌匀，水浴蒸干，转移至锥形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

检查：应符合《中国药典》2005年版一部附录IC颗粒剂项下有关的各项规定；

含量测定：照《中国药典》2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇∶水＝65∶35为流动相；检测波长为250nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取经五氧化二磷减压干燥过夜的五味子醇甲对照品适量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取过三号筛的本制剂粉末5g，精密称定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，在功率250W、频率20KHZ条件下超声处理1小时，取出，放冷后，用甲醇补足损失的重量，摇匀，过滤，精密吸取滤液25ml，转移至圆底烧瓶中，回收甲醇至适量，再用甲醇定量转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本颗粒剂每袋含五味子以五味子醇甲C₂₄H₃₂O₇计，不得少于0.6mg。

本申请人进行了一系列的试验研究，以确定最佳的质量控制方法，具体如下：

一、鉴别

试剂、试药：甲醇、硅藻土、正己烷、乙酸乙酯、甲酸均为分析纯；硅胶GF₂₅₄荧光薄层板由青岛海洋化工厂分厂提供，批号：20050227；五味子醇甲(C₂₄H₃₂O₇)对照品，由中国药品生物制品检定所提供(供含量测定用)；生脉颗粒(党参方)三个批号供试品(20050401，20050402，20050403)及生脉颗粒(党参方)空白样品均由贵州同济堂制药有限公司提供。

薄层鉴别是参照各味药在《中国药典》记载的药品标准中薄层鉴别方法进行。利用对照药材或对照品和本品在相同的溶剂系统条件下展开，在薄层板上有相同斑点的，而通过作阴性试验无干扰，说明本方法具专属性。

本发明是对方中五味子的特征鉴别。五味子为方中使药，根据处方中所含药味的化学性质及剂型特点，研究制定了五味子的薄层色谱鉴别，以五味子醇甲为对照品鉴别处方中原药材五味子。

取本制剂5g，研细，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液加硅藻土2g，拌匀，水浴蒸干，转移至锥形瓶中，转移至锥形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照《中国药典》2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，分别以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(3∶5∶1)、30℃～60℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(254nm)下检视。结果以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(3∶5∶1)为展开剂效果最好，经反复试验，阴性对照无干扰，故列入本发明内容。

二、检查

按《中国药典》2000年版一部附录I C颗粒剂项下的规定，对本制剂三批样品的水分，装量差异，粒度，溶化性及微生物限度进行检查，结果符合《中国药典》规定的标准。(以上项目测定数据及重金属、砷盐检查略)。

检查指标、方法及结果如下：

(1)水分检查：

照《中国药典》(2000年版一部附录I X H)水分测定法第一法测定，不得超过5.0％。

(2)装量差异：

照《中国药典》2000年版一部附录I D颗粒剂项下规定的方法检测。

本制剂包装为10克/袋，装量差异限度为±5％。

(3)粒度：

取单剂量分装的颗粒剂5袋(瓶)或多剂量分装颗粒剂1包(瓶)，称定重量，置药筛内过筛。过筛时，将筛保持水平状态，左右往返轻轻筛动3分钟。不能通过一号筛和能通过五号筛的颗粒和粉末总和，不得过15％。

(4)溶化性：

取供试品10g，加热水20倍，搅拌5分钟，立刻观察。可溶性颗粒剂应全部溶化，允许有轻微浑浊。颗粒剂不得有焦屑等异物。

(5)砷盐：

具体方法如下：取本制剂1g，加氢氧化钙0.5g，混匀，加水少量搅匀，干燥后，先用小火烧灼使炭化，再用500～600℃炽灼至完全炭化，加盐酸4ml，加水15ml，按《中国药典》2000年版一部附录IX F检查，结果均低于2ppm，故未列入本发明内容。

(6)微生物限度：

按《中国药典》2000年版一部附录XIII C的检查方法及颗粒剂(不含原药材粉)微生物限度标准进行检查。

表1  生脉颗粒(党参方)检查项目研究结果

由表中结果可知，生脉颗粒(党参方)样品的检查项目都符合《中国药典》2000年版一部及生脉颗粒(党参方)质量标准的规定。

三、含量测定：

按照《中国药典》2000年版一部附录VI D制定。

(一)含量测定化学成份的确定

本方主药党参、麦冬两味药有效成分多为皂苷，多糖等亲水性成份。五味子药材主具收敛固涩，益气生精，补肾宁心的功效。主要含总木脂素，其含量达18.1-19.2％。如五味子素(schisandrin)、五味子醇(Schisadrol)、去氧五味子素(Deoxyschisandrin)、γ-五味子素(γ-Schisandrin)、伪-γ五味子素(Pseudo-γ-Schisandrin)、五味子丙素(WuweizisuC)、五味子酯甲(SchisantherinA)及五味子酯乙、丙、丁、戊(SchsantherinB、C、D、E)等。1979年I等报导从五味子果实中分离到5种新的二苯并环辛二烯类木脂素：戈米辛A、B、C、F、G(GomisinA、B、C、F、G)等新的木脂素成分。还含挥发油2％，油中主要为α-、β-花柏烯(α、β-Chamigrene)。此外，本方五味子药材尚含苹果酸(Malic acid)11％，枸橼酸(Citric acid)8％，酒石酸(Tartaric acid)0.8％，原儿茶酸，维生素C(VitamineC)0.035％-0.085％。五味子醇甲是本制剂的有效成分之一，且含量较高，亦具有一定专属性，故选用其做含量测定的指标性成分。本申请人在《中国药典》五味子含量测定方法等参考文献资料基础上，进行实验研究，建立了样品前处理简单、稳定、专属性强及灵敏度高、结果可靠的高效液相色谱法。

(二)提取分离方法的考察

我们比较了甲醇作为提取溶剂在不同提取时间(0.5h、1.0h、1.5h)的提取效果。具体方法如下：

取本制剂粉末(过筛)约5g，共3份，精密称定，置量瓶中，精密加甲醇50ml。称定重量。分别超声处理(功率250W，频率20KHZ)0.5小时、1.0小时和1.5小时。取出，放冷后，用溶剂补足损失的重量，摇匀，过滤，精密吸取滤液25ml。转移至圆底烧瓶中，回收溶剂至适量，再用甲醇定量转移至10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得。测试结果见表1。

表2不同超声提取时间所得五味子醇甲含量

经综合比较，提取条件确定用50ml甲醇超声(功率250W，频率20KHz)提取1.0h，较为适宜。

(三)含量测定方法的考察

1、仪器、试剂、试药  Agilent1100高效液相色谱仪(在线脱气机、二元泵、二极管阵列检测器、自动进样器、智能恒温柱温箱、Agilent化学工作站)；CX-250型超声波清洗器(功率250W，频率20KHZ，北京市医疗设备二厂)；FC-104天平(上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂)；十万级天平(日本进口)；甲醇为色谱纯和分析纯；纯净水。五味子醇甲(C₂₄H₃₂O₇)对照品，由中国药品生物制品检定所提供(110749-200309供含量测定用)；生脉颗粒(党参方)三个批号供试品(20050401，20050402，20050403)由贵州同济堂制药有限公司提供。

2、检测波长的确定  五味子醇甲于190nm～400nm波长下扫描，最大吸收波长为250nm。在250nm波长处五味子醇甲吸收峰灵敏度较高，其它色谱峰干扰较小，五味子醇甲色谱峰的分离最为理想，故选用250nm±1nm作为检测波长。

3、系统适用性试验  选择了三种色谱柱：(1)Hypersil ODS(5um，4.0×250mm，Agilent)色谱柱，(2)Hypersil ODS2(5um，5×200mm，大连依利特)色谱柱，(3)Diamonsil^TM(钻石)HPLC C18(5um，4.6×250mm，迪马公司)色谱柱；及四个流动相：(1)甲醇-水(65∶35)(2)甲醇-0.1％磷酸溶液(65∶35)(3)乙腈-水(65∶35)(4)乙腈-0.1％磷酸溶液(60∶40)进行系统适用性试验。试验结果表明在以下色谱条件下：用Hypersil ODS2(5um，5×200mm，大连依利特)色谱柱，甲醇-水(65∶35)为流动相，流速1.0ml/min，柱温40℃，检测波长250nm，供试品中五味子甲素得到较好分离，理论板数达到4000，分离度2.5以上。故理论板数以五味子甲素峰计算拟定为不低于2000；分离度不低于1.5。

4.空白试验  根据本制剂处方和工艺，制备缺五味子药材的空白试验样品，按质量标准的提取条件制备供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图。测定结果表明空白试验对五味子醇甲色谱分析无干扰。

5.线性关系的考察  称取五味子醇甲对照品适量，用甲醇溶解制成每1ml中含0.121mg的对照品储备液，再分别吸取0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml的对照品储备液至10ml容量瓶中，加甲醇溶液稀释至刻度，分别制成每1ml含五味子醇甲0.00605mg、0.01210mg、0.02420mg、0.03630mg、0.04840mg、0.06050mg的对照品溶液，吸取对照品溶液10μl依次进样，记录色谱图。以五味子醇甲的进样量(μg)为纵坐标，峰面积(mAu·s)为横坐标进行线性回归，得一基本过原点的直线Y＝0.000484282X-0.00109(r＝0.99993)。

回归方程拟合为过原点的方程：Y＝0.000483062X

将一样品峰面积带入以上两方程中，经计算比较，所得误差在2％以下。五味子甲素进样量的线性范围为0.0605μg～0.605μg，线性关系良好，可以用外标一点法计算其含量。(见表3)

表3标准曲线(n＝5)

6、稳定性试验  取生脉颗粒(党参方)粉末(过三号筛)约5g，精密称定，按含量测定项下的方法制备供试液，精密吸取10μl，进样5次，时间间隔为0、2、4、6、8小时，记录色谱图，供试品中五味子醇甲峰面积平均值为587.712902mAu·S，RSD＝0.816％，结果表明本试验方法稳定，测定时间可在8小时内。(见表4)

表4稳定性试验测定结果n＝5

7.仪器精密度试验  精密吸取对照品溶液10μl，连续进样6次，记录色谱图，供试品中五味子醇甲峰面积平均值为632.369955mAu·S，RSD＝0.538％，结果表明精密度良好。(见表5)

表5仪器精密度试验测定结果n＝5

8、重复性试验  取生脉颗粒(党参方)粉末(过三号筛)约5g，精密称定，共6份，每份样品按含量测定项下的方法制备供试液，吸取10μl注入色谱仪，记录色谱图，供试品中五味子醇甲含量平均值为0.112564mg/g，RSD＝0.507％，结果说明重复性良好。(见表6)

表6重复性试验测定结果n＝5

9、加样回收率试验  取生脉颗粒(党参方)粉末(过三号筛)约2.5g，精密称定，共取5份，于每份中加入对照品溶液(C＝0.262mg/ml)1ml，按本发明含量测定项制备供试液，进样，记录色谱图，计算五味子醇甲回收率，平均回收率为99.737％，RSD＝0.479％，表明回收良好。(见表7)

表7 加样回收试验测定结果(样品五味子醇甲含量：0.112564mg/g) n＝5

RSD＝0.479％

根据以上试验结果，本制剂含量测定方法的条件确定为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(65∶35)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按五味子甲素峰计算应不低于2000。

供试品溶液制备方法确定为：取本制剂粉末(过三号筛)约5g，精密称定，置量瓶中，精密加甲醇50ml。称定重量。超声处理(功率250W，频率20KHZ)30分钟。取出，放冷后，用甲醇补足损失的重量，过滤，精密吸取该提取液25ml。转移至圆底烧瓶中，回收甲醇至适量，再用甲醇定量转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得。

(四)含量测定计算方法：

(1)供试品溶液浓度计算：

$C_X=C_R\frac{A_X}{A_R}$

式中：C_R：为对照品溶液浓度(mg.ml^-1)。

A_X：为供试品溶液峰面积值(mAu*s)。

A_R：为对照品溶液的峰面积值(mAu*s)。

(2)制剂含量计算：

式中：C_X：供试品溶液浓度(mg.ml^-1)

V：为样品的称样量(g)。

V：为样品的体积(ml)。

(五)含量测定限度的确定：

根据10批样品测定结果(见表8)，本制剂每袋含五味子醇甲平均值为1.0208mg。依据此结果制定本颗粒剂含五味子以五味子醇甲C₂₄H₃₂O₇计，每袋不得少于0.6mg。

表8 10批生脉颗粒(党参方)中五味子醇甲的含量

与现有技术相比，本发明质量控制方法精密度高，稳定性好，重现性好，回收率高，测量结果准确，提高了生脉颗粒剂的质量控制标准，可有效控制生脉颗粒剂的质量，从而确保了该制剂的临床疗效。

具体实施方式：

本发明的实施例1：

性状：药物为淡棕黄色的颗粒；气香，味甜；

鉴别：取本制剂5g，研细，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸至近干，加硅藻土2g，拌匀，水浴蒸干，转移至锥形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

检查：应符合《中国药典》2005年版一部附录IC颗粒剂项下有关的各项规定；

含量测定：照《中国药典》2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇∶水＝65∶35为流动相；检测波长为250nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取经五氧化二磷减压干燥过夜的五味子醇甲对照品适量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取过三号筛的本制剂粉末5g，精密称定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，在功率250W、频率20KHZ条件下超声处理1小时，取出，放冷后，用甲醇补足损失的重量，摇匀，过滤，精密吸取滤液25ml，转移至圆底烧瓶中，回收甲醇至适量，再用甲醇定量转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本颗粒剂每袋含五味子以五味子醇甲C₂₄H₃₂O₇计，不得少于0.6mg。

本发明的实施例2：

性状：药物为淡棕黄色的颗粒；气香，味甜；

鉴别：取本制剂5g，研细，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸至近干，加硅藻土2g，拌匀，水浴蒸干，转移至锥形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

检查：应符合《中国药典》2005年版一部附录I C颗粒剂项下有关的各项规定。

本发明的实施例3：

性状：药物为淡棕黄色的颗粒；气香，味甜；

检查：应符合《中国药典》2005年版一部附录I C颗粒剂项下有关的各项规定；

含量测定：照《中国药典》2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇∶水＝65∶35为流动相；检测波长为250nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取经五氧化二磷减压干燥过夜的五味子醇甲对照品适量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取过三号筛的本制剂粉末5g，精密称定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，在功率250W、频率20KHZ条件下超声处理1小时，取出，放冷后，用甲醇补足损失的重量，摇匀，过滤，精密吸取滤液25ml，转移至圆底烧瓶中，回收甲醇至适量，再用甲醇定量转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本颗粒剂每袋含五味子以五味子醇甲C₂₄H₃₂O₇计，不得少于0.6mg。

本发明的实施例4：

性状：药物为淡棕黄色的颗粒；气香，味甜；

鉴别：取本制剂5g，研细，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸至近干，加硅藻土2g，拌匀，水浴蒸干，转移至锥形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

含量测定：照《中国药典》2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇∶水＝65∶35为流动相；检测波长为250nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取经五氧化二磷减压干燥过夜的五味子醇甲对照品适量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取过三号筛的本制剂粉末5g，精密称定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，在功率250W、频率20KHZ条件下超声处理1小时，取出，放冷后，用甲醇补足损失的重量，摇匀，过滤，精密吸取滤液25ml，转移至圆底烧瓶中，回收甲醇至适量，再用甲醇定量转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本颗粒剂每袋含五味子以五味子醇甲C₂₄H₃₂O₇计，不得少于0.6mg。

Claims (2)

1.一种生脉颗粒剂的检测方法，所述生脉颗粒剂由党参300g、麦冬200g、五味子100g和适当辅料制备而成，该检测方法含性状、检查、鉴别和含量测定项目；其特征在于：性状应符合颗粒剂项下的有关规定；检查应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒剂项下有关的各项规定；鉴别是对五味子的薄层鉴别，具体的鉴别方法为：

取本制剂5g，研细，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸至近干，加硅藻土2g，拌匀，水浴蒸干，转移至锥形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

含量测定为对制剂中五味子的含量测定，五味子的含量测定方法为：

照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇∶水＝65∶35为流动相；检测波长为250nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取经五氧化二磷减压干燥过夜的五味子醇甲对照品适量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取过三号筛的本制剂粉末5g，精密称定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，在功率250W、频率20KHZ条件下超声处理1小时，取出，放冷后，用甲醇补足损失的重量，摇匀，过滤，精密吸取滤液25ml，转移至圆底烧瓶中，回收甲醇至适量，再用甲醇定量转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本颗粒剂每袋含五味子以五味子醇甲C₂₄H₃₂O₇计，不得少于0.6mg。

2.按照权利要求1所述生脉颗粒剂的检测方法，其特征在于：所述检测方法包括：

性状：药物为淡棕黄色的颗粒；气香，味甜；

鉴别：取本制剂5g，研细，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸至近干，加硅藻土2g，拌匀，水浴蒸干，转移至锥形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录I C颗粒剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇∶水＝65∶35为流动相；检测波长为250nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取经五氧化二磷减压干燥过夜的五味子醇甲对照品适量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取过三号筛的本制剂粉末5g，精密称定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，在功率250W、频率20KHZ条件下超声处理1小时，取出，放冷后，用甲醇补足损失的重量，摇匀，过滤，精密吸取滤液25ml，转移至圆底烧瓶中，回收甲醇至适量，再用甲醇定量转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本颗粒剂每袋含五味子以五味子醇甲C₂₄H₃₂O₇计，不得少于0.6mg。