CN100509000C - 一种冠心丹参分散片及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种冠心丹参分散片及其制备方法。一种冠心丹参分散片由活性成分丹参、三七、降香油，添加辅料配制而，其中活性成分丹参采用水煮醇沉、乙醇回流提取得有效成分；三七采用乙醇回流提取有效成分；降香油采用β-环糊精包合处理；其中活性成分丹参提取物、三七提取物、降香包合物及其辅料的重量比为：丹参提取物25～30、三七提取物29～33、降香包合物6～7、辅料30～700。丹参用乙醇加热回流两次，得丹参回流液，其药渣加水煎煮两次，用乙醇冷藏处理两次，与丹参回流液合并，浓缩干燥，得丹参提取物；三七用乙醇加热回流两次，浓缩干燥，得三七提取物；降香油用无水乙醇稀释，加β-环糊精水溶液，搅拌后静置冷藏，干燥后得降香包合物；加入辅料，干法压制成片，即得冠心丹参分散片。

Description

一种冠心丹参分散片及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种药物制剂及其制备方法，更具体地说，涉及一种冠心丹参分散片及其制备方法。

背景技术

冠心丹参是由三七、丹参、降香油三种中药制成的纯中药制剂。中医认为，丹参属活血药，具有活血、散淤、通经、利痹、消肿、定痛的功效；现代药理研究，丹参中含有10多种化合物，其中丹参酮IIA磺酸钠能清除有细胞毒性的氧自由基和促溶作用，具有抗凝、抑制血小板聚集、抑制血栓形成和抗脂质过氧化作用；动物试验验证，丹参和降香合用有增强机体耐缺氧能力，增加冠脉流量和改善心肌供血的作用。三七具有降低纤维蛋白原的作用，纤维蛋白原是作为凝血I因子参与凝血过程，故纤维蛋白原的升高，会造成血液高凝状态。降低纤维蛋白原，可改善高凝状态，从而改善微循环。

目前冠心丹参的制剂有滴丸剂、胶囊剂和片剂，尚未有分散片的相关报道。冠心丹参的上述制剂均采用三七原粉、丹参流浸膏、降香油直接制得。丹参含有的有效成分较多，仅以流浸膏入药，提得的有效成分主要为脂溶性成分，药效不理想。

发明内容

本发明的目的在于克服现有冠心丹参制剂的不足，提供一种冠心丹参分散片及其制备方法，采用乙醇回流提取和水煮醇沉的综合提取方法，提取丹参、三七有效成分，确保水溶性有效成份和脂溶性有效均能提出，提高了冠心丹参的药效。降香油有较强的挥发性，在生产和贮藏期间易挥发而影响治疗效果，我们采用环糊精包裹技术，将降香油包合起来，阻止此挥发油的损耗。三七是名贵药材，将其有效成分提取后入药，可迅速在体内吸收，防止浪费。

本发明选用优良的崩解辅料、采用干压法制得，所得的片剂置于水中可快速崩解而成均匀混悬液，这种剂型具有服用方便、吸收快、生物利用度高和不良反应小等独特性能，已成为当代药剂学新技术之一。该剂型适用于剂量较大的药物，可利于老人或儿童吞服，能减少药物对胃肠道有刺激，吸收见效快，已显观出较大的用药优势。本发明选用分散片剂型，能充分发挥冠心丹参的药效，可嚼服，利于中老年患者的随身携带服用。

一种冠心丹参分散片及其制备方法是采取以下方案实现：

一种冠心丹参分散片，其特征在于：它由活性成分丹参、三七、降香油，添加辅料配制而，成能迅速分散的口服分散片；其中活性成分丹参采用水煮醇沉、乙醇回流提取得有效成分，以丹参提取物制备分散片；三七采用乙醇回流提取有效成分，以三七提取物制备分散片；降香油采用β-环糊精包合处理，以降香包合物制备分散片；其中活性成分丹参提取物、三七提取物、降香包合物及其辅料的重量配比为：丹参提取物25～30、三七提取物29～33、降香包合物6～7、辅料30～700。

其中辅料包括崩解剂、填充剂、调味剂、润滑剂、包衣材料。崩解剂选用交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基淀粉钠、预凝胶淀粉、十二烷基硫酸钠中的一种或混合物；填充剂选用微晶纤维素、淀粉、乳糖、山梨醇中的一种或混合物；调味剂选用阿斯巴甜、糖精钠、甜菊甙、甘草酸、香兰素中的一种或混合物；润滑剂选用硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶中的一种或混合物；包衣材料选用欧巴代。

由以下步骤制备：

取丹参用乙醇加热回流两次，每次回流时间1～3小时，加热温度为80～100℃，过滤，得丹参回流液，其药渣加水煎煮两次，每次时间1～3小时，用乙醇冷藏处理两次，冷藏温度为-10～4℃，每次冷藏时间12～24小时，与丹参回流液合并，过滤，滤液与丹参回流液合并，浓缩干燥，得丹参提取物；取三七用乙醇加热回流两次，每次回流时间1～3小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩干燥，得三七提取物；降香油用无水乙醇稀释，加β-环糊精水溶液，搅拌后静置冷藏，滤过，滤饼用少量石油醚洗涤，洗涤温度30～40℃，40～45℃干燥8～12小时，干燥后得降香包合物；加入辅料充分混匀，干法压制成片，包装即得冠心丹参分散片；其中丹参与乙醇重量配比为1∶8～12，乙醇的含醇量为70～95％；其中三七与乙醇重量配比为1∶4～7，乙醇的含醇量为70～90％；

其中活性成分丹参提取物、三七提取物、降香包合物及其辅料的重量配比为：其中丹参提取物25～30、三七提取物29～33、降香包合物6～7、辅料30～700。

崩解剂选用交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基淀粉钠、预凝胶淀粉、十二烷基硫酸钠中的一种或混合物，优选交联羧甲基纤维素钠和低取代羟丙基纤维素。

填充剂选用微晶纤维素、淀粉、乳糖、山梨醇中的一种或混合物，优选微晶纤维素。

调味剂选用阿斯巴甜、糖精钠、甜菊甙、甘草酸、香兰素中的一种或混合物，优选阿斯巴甜、香兰素。

润滑剂选用硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶中的一种或混合物，优选微粉硅胶。

冠心丹参分散片可包衣，包衣材料选用欧巴代。

冠心丹参分散片可采用直接压片法制得。

一种冠心丹参分散片在治疗气滞血瘀所致的胸闷，胸痹、心悸气短以及冠心病药物中的应用。

冠心丹参的现有制剂(滴丸剂、胶囊剂和片剂)均采用三七原粉、丹参流浸膏、降香油制得。丹参含有的有效成分较多，仅以流浸膏入药，提得的有效成分主要为脂溶性成分，药效不理想；我们采用乙醇回流提取和水煮醇沉的综合提取方法，确保水溶性有效成份和脂溶性有效均能提出，提高了冠心丹参的药效。降香油有较强的挥发性，在生产和贮藏期间易挥发而影响治疗效果，我们采用环糊精包裹技术，将降香油包合起来，阻止此挥发油的损耗。三七是名贵药材，将其有效成分提取后入药，可迅速在体内吸收，防止浪费。

本发明选用优良的崩解辅料、采用干压法制得，所得的片剂置于水中可快速崩解而成均匀混悬液，这种剂型具有服用方便、吸收快、生物利用度高和不良反应小等独特性能，已成为当代药剂学新技术之一。该剂型适用于剂量较大的药物，可利于老人或儿童吞服，能减少药物对胃肠道有刺激，吸收见效快，已显观出较大的用药优势。本发明选用分散片剂型，能充分发挥冠心丹参的药效，可嚼服，利于中老年患者的随身携带服用。

与冠心丹参普通剂比较，冠心丹参分散片有如下的明显特点：

1、药效高：丹参经综合提取，其脂溶性和水溶性有效成分均能充分利用；三七经回流提取，有效成分能迅速发挥作用；降香油包合处理，防止挥发流失。本发明的提取工艺比冠心丹参普通剂原提取工艺更具科学性，药效试验也验证了此点。本发明由于采用三七提取物制备分散片，提高了三七有效成分浓度，比三七原粉更容易被人体胃肠吸收，提高了生物利用度，药物疗效高。

2、服用方便、生物利用度高：分散片可嚼服，方便了吞咽困难(如老年人)患者，防止药物在体内形成局部浓度过高现象，减少了对胃肠道的刺激作用，提高了血药浓度和生物利用度。

3、提高了释放速度：本发明采用直接压制法，样品能迅速分解完全，加快了有效成分在体内的释放速度。

4、顺应性好：由于本品服用方便，口感好，患者服用本品的顺应性好。

具体实施方式

以下通过实施例，结合药效学试验结果，进一步说明本发明，下述实施例仅用于说明本发明而对本发明没有限制。

实施例1

取0.9kg丹参，加入10kg的95％乙醇加热回流两次，每次2小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加10kg水煎煮两次，每次2小时，加入乙醇至含醇量达60％，冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达80％，静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，喷雾浓缩干燥，得丹参提取物250g。取0.9kg三七粉碎成粗粉，加入5kg的70％乙醇加热回流两次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，喷雾浓缩干燥，得三七提取物290g。取75gβ-环糊精，加1000g水加热使溶解，取11g降香油用10g乙醇稀释，搅拌后静置冷藏24小时，滤过，滤饼用少量石油醚(40℃)洗涤，40℃干燥12小时，干燥后得降香包合物65g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入淀粉26g、低取代羟丙基纤维素250g、十二烷基硫酸钠10g、微粉硅胶10g、阿斯巴甜2g、香兰素2g，充分混匀，压制成2000片，用8％欧巴代液600g包衣，即得冠心丹参分散片。

实施例2

取1kg丹参，加入10kg的95％乙醇加热回流两次，每次1.5小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加8kg水煎煮两次，每次2.5小时，加入乙醇至含醇量达70％，冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达85％，静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，真空浓缩干燥，得丹参提取物275g。取1kg三七粉碎成粗粉，加入6kg的80％乙醇加热回流两次，每次1.5小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，真空浓缩干燥，得三七提取物312g。取80gβ-环糊精，加800g水加热使溶解，取11g降香油用15g乙醇稀释，搅拌后静置冷藏24小时，滤过，滤饼用少量石油醚(30℃)洗涤，45℃干燥8小时，干燥后得降香包合物67g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入乳糖10g、交联羧甲基纤维素钠150g、交联聚乙烯吡咯烷酮120g、十二烷基硫酸钠12g、微粉硅胶8g、糖精钠1g、香兰素1g，充分混匀，压制成2000片，即得冠心丹参分散片。

实施例3

取1.2kg丹参，加入12kg的95％乙醇加热回流两次，每次1.5小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加12kg水煎煮两次，每次1.5小时，加入乙醇至含醇量达70％，冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达80％，静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，喷雾浓缩干燥，得丹参提取物300g。取1.2kg三七粉碎成粗粉，加入5kg的80％乙醇加热回流两次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，喷雾浓缩干燥，得三七提取物330g。取75gβ-环糊精，加1000g水加热使溶解，取11g降香油用10g乙醇稀释，搅拌后静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，滤过，滤饼用少量石油醚(40℃)洗涤，40℃干燥12小时，干燥后得降香包合物60g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入微晶纤维素100g、山梨醇60g、低取代羟丙基纤维素200g、交联聚乙烯吡咯烷酮250g、十二烷基硫酸钠10g、硬脂酸镁15g、甜菊甙2.5g、香兰素2.5g，充分混匀，压制成3500片，用8％欧巴代液1000g包衣，即得冠心丹参分散片。

实施例4

取1kg丹参，加入11kg的95％乙醇加热回流两次，每次2小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加10kg水煎煮两次，每次2小时，加入乙醇至含醇量达65％，冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达85％，静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，真空浓缩干燥，得丹参提取物269g。取1kg三七粉碎成粗粉，加入7kg的70％乙醇加热回流两次，每次1.5小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，喷雾浓缩干燥，得三七提取物305g。取73gβ-环糊精，加900g水加热使溶解，取11g降香油用12g乙醇稀释，搅拌后静置冷藏24小时，滤过，滤饼用少量石油醚(40℃)洗涤，40℃干燥12小时，干燥后得降香包合物63g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入淀粉150g、羧甲基淀粉钠300g、预凝胶淀粉160g、十二烷基硫酸钠10g、滑石粉20g、甜菊甙2.5g、香兰素2.5g，充分混匀，压制成3500片，即得冠心丹参分散片。

实施例5

取1kg丹参，加入10kg的70％乙醇加热回流两次，每次2.5小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加10kg水煎煮两次，每次2小时，加入乙醇至含醇量达65％，冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达75％，静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，真空浓缩干燥，得丹参提取物266g。取1kg三七粉碎成粗粉，加入4.5kg的90％乙醇加热回流两次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，真空浓缩干燥，得三七提取物299g。取80gβ-环糊精，加950g水加热使溶解，取11g降香油用10g乙醇稀释，搅拌后静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，滤过，滤饼用少量石油醚(35℃)洗涤，35℃干燥18小时，干燥后得降香包合物66g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入山梨醇1500g、低取代羟丙基纤维素350g、交联聚乙烯吡咯烷酮150g、十二烷基硫酸钠15g、硬脂酸镁20g、阿斯巴甜2.5g、香兰素3g，充分混匀，压制成5000片，用8％欧巴代液1500g包衣，即得冠心丹参分散片。

实施例6

取1kg丹参，加入9kg的80％乙醇加热回流两次，每次1小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加9kg水煎煮两次，每次1.5小时，加入乙醇至含醇量达60％，冷藏20小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达80％，静置冷藏20小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，真空浓缩干燥，得丹参提取物270g。取1kg三七粉碎成粗粉，加入6kg的80％乙醇加热回流两次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，真空浓缩干燥，得三七提取物310g。取70gβ-环糊精，加800g水加热使溶解，取11g降香油用10g乙醇稀释，搅拌后静置冷藏20小时，滤过，滤饼用少量石油醚(30℃)洗涤，45℃干燥12小时，干燥后得降香包合物62g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入淀粉1500g、交联羧甲基纤维素钠250g、羧甲基淀粉钠200g、十二烷基硫酸钠20g、微粉硅胶30g、甘草酸1g、香兰素2g，充分混匀，压制成5000片，用8％欧巴代液1500g包衣，即得冠心丹参分散片。

实施例7

取1kg丹参，加入10kg的75％乙醇加热回流两次，每次2小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加10kg水煎煮两次，每次2小时，加入乙醇至含醇量达70％，冷藏12小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达85％，静置冷藏12小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，真空浓缩干燥，得丹参提取物277g。取1.1kg三七粉碎成粗粉，加入5kg的75％乙醇加热回流两次，每次2.5小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，真空浓缩干燥，得三七提取物330g。取80gβ-环糊精，加1000g水加热使溶解，取11g降香油用10g乙醇稀释，搅拌后静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，滤过，滤饼用少量石油醚(40℃)洗涤，40℃干燥12小时，干燥后得降香包合物67g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入微晶纤维素2000g、低取代羟丙基纤维素500g、交联聚乙烯吡咯烷酮450g、十二烷基硫酸钠10g、硬脂酸镁30g、糖精钠3g、香兰素3g，充分混匀，压制成7000片，即得冠心丹参分散片。

实施例8

取1kg丹参，加入8kg的90％乙醇加热回流两次，每次1小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加8kg水煎煮两次，每次2小时，加入乙醇至含醇量达75％，冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达85％，静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，喷雾浓缩干燥，得丹参提取物262g。取1kg三七粉碎成粗粉，加入4kg的90％乙醇加热回流两次，每次1小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，喷雾浓缩干燥，得三七提取物293g。取70gβ-环糊精，加800g水加热使溶解，取11g降香油用10g乙醇稀释，搅拌后静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，滤过，滤饼用少量石油醚(35℃)洗涤，40℃干燥12小时，干燥后得降香包合物62g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入山梨醇2000g、交联羧甲基纤维素钠400g、预凝胶淀粉530g、十二烷基硫酸钠20g、微粉硅胶35g、甜菊甙4g、香兰素3g，充分混匀，压制成7000片，即得冠心丹参分散片。

实施例9

取1kg丹参，加入10kg的75％乙醇加热回流两次，每次2小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加10kg水煎煮两次，每次1.5小时，加入乙醇至含醇量达60％，冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达80％，静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，真空浓缩干燥，得丹参提取物281g。取1kg三七粉碎成粗粉，加入5KG的85％乙醇加热回流两次，每次1.5小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，真空浓缩干燥，得三七提取物320g。取80gβ-环糊精，加1000g水加热使溶解，取11g降香油用15kg乙醇稀释，搅拌后静置冷藏24小时，滤过，滤饼用少量石油醚(35℃)洗涤，40℃干燥12小时，干燥后得降香包合物69g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入乳糖4000g、交联聚乙烯吡咯烷酮520g、羧甲基淀粉钠500g、十二烷基硫酸钠40g、滑石粉40g、甘草酸5g、香兰素5g，充分混匀，压制成10000片，即得冠心丹参分散片。

实施例10

取1kg丹参，加入12kg的70％乙醇加热回流两次，每次2.5小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加12kg水煎煮两次，每次2小时，加入乙醇至含醇量达65％，冷藏18小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达85％，静置冷藏18小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，真空浓缩干燥，得丹参提取物275g。取1kg三七粉碎成粗粉，加入6kg的75％乙醇加热回流两次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，真空浓缩干燥，得三七提取物325g。取75gβ-环糊精，加1000g水加热使溶解，取11g降香油用10g乙醇稀释，搅拌后静置冷藏24小时，滤过，滤饼用少量石油醚(35℃)洗涤，45℃干燥10小时，干燥后得降香包合物63g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入微晶纤维素4000g、低取代羟丙基纤维素530g、预凝胶淀粉500g、十二烷基硫酸钠40g、硬脂酸镁40g、糖精钠5g、香兰素5g，充分混匀，压制成10000片，即得冠心丹参分散片。

实施例11

取1.2kg丹参，加入9kg的75％乙醇加热回流两次，每次1.5小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加10kg水煎煮两次，每次1.5小时，加入乙醇至含醇量达60％，冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达80％，静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，真空浓缩干燥，得丹参提取物295g。取1.1kg三七粉碎成粗粉，加入5kg的70％乙醇加热回流两次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，真空浓缩干燥，得三七提取物328g。取80gβ-环糊精，加1000g水加热使溶解，取11g降香油用15g乙醇稀释，搅拌后静置冷藏24小时，滤过，滤饼用少量石油醚(35℃)洗涤，40℃干燥12小时，干燥后得降香包合物68g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入微晶纤维素5000g、交联羧甲基纤维素钠650g、交联聚乙烯吡咯烷酮650g、十二烷基硫酸钠50g、微粉硅胶50g、阿斯巴甜10g、香兰素10g，充分混匀，压制成12500片，用8％欧巴代液3000g包衣，即得冠心丹参分散片。

实施例12

取1.2kg丹参，加入11kg的80％乙醇加热回流两次，每次2小时，过滤，得丹参回流液；过滤后的药渣加12kg水煎煮两次，每次2小时，加入乙醇至含醇量达70％，冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加入乙醇使含醇量达85％，静置冷藏24小时，冷藏温度为-10～4℃，过滤，滤液与丹参回流液合并，喷雾浓缩干燥，得丹参提取物300g。取1.1kg三七粉碎成粗粉，加入6kg的80％乙醇加热回流两次，每次1.5小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，喷雾浓缩干燥，得三七提取物330g。取70gβ-环糊精，加900g水加热使溶解，取11g降香油用10g乙醇稀释，搅拌后静置冷藏24小时，滤过，滤饼用少量石油醚(35℃)洗涤，40℃干燥12小时，干燥后得降香包合物66g。将上述丹参提取物、三七提取物、降香包合物，加入淀粉5000g、低取代羟丙基纤维素1380g、预凝胶淀粉500g、十二烷基硫酸钠50g、滑石粉50g、甘草酸10g、香兰素10g，充分混匀，压制成12500片，用8％欧巴代液3000g包衣，即得冠心丹参分散片。

本发明的研制目的：优化丹参、三七、降香油所组成的冠心丹参中药复方制剂的制备方法，为临床提供新的冠心丹参药品，可活血化瘀，理气止痛，适用于：用于气滞血瘀所致的胸闷，胸痹、心悸气短；冠心病见上述证候者。药效试验表明，本发明冠心丹参分散片可有效改善缺血再灌心脏的缩舒功能，降低缺血再灌注后血中乳酸脱氢酶(KGDH)和肌酸激酶(CK)活性，能明显减轻心肌组织的损伤，说明冠心丹参分散片有抗缺血再灌注引起的心肌损伤作用。实验如下：

冠心丹参分散片药效学试验

地点：东南大学基础医学院

试验目的：通过观察麻醉大鼠开胸冠脉结扎再通模型，观察冠心丹参分散片一次灌胃对缺血复灌心脏的保护作用。

实验材料：

1、药品、与主要仪器：

受试药：冠心丹参分散片，自制。对照药：盐酸川芎嗪注射液，无锡市第七制药有限公司。

试剂：羧甲基纤维素钠300-800，国药集团化学试剂有限公司；乌拉坦，上海曹扬第二中学化工厂；盐酸川芎嗪注射液，无锡市第七制药有限公司；乳酸脱氢酶测试盒及肌酸激酶测试盒，南京建成生物工程研究所。

主要仪器：生物信号采集处理系统，南京美易科技有限公司；动物人工呼吸机，DH-1型，浙江医科大学医疗仪器实验厂；心电图机，XDH-3B型，上海医用电子仪器厂；PT-24型压力传感器，复旦大学传感研究所；ES-120电子天平，沈阳龙腾电子称量仪器有限公司；离心机，KGD4-2型，北京医用离心机厂；722光栅分光光度计，上海市三分析仪器厂；三用电热恒温水浴箱，S.HH.W21.420型，上海跃进医疗器械厂；透射电镜600型，日本日立公司；生物光学显微镜，日本Okgympus。

2、实验动物：健康成年SD大鼠，体重300-350g，雌雄各半，购自南京医科大学动物中心。

3、饲养环境：

SD大鼠用标准聚乙烯笼养，每笼同性别5只，不锈钢网状顶盖，自由摄取清洁水，用标准全价饲料饲养，室温：18-25℃，人工通风：10次/分钟以上，自然光照。

实验方法：

1、动物分组：

将SD大鼠分成伪手术组(空白对照组)，缺血再灌组(模型对照组)，川芎嗪预处理组(阳性药对照组，KGH，30.0mg·kg^-1，iv)，冠心丹参预处理组(冠心丹参86.55mg·kg^-1和173.1mg·kg^-1ig)。

2、动物模型制备及血流动力学测定：

按在体抗心肌缺血复灌损伤作用方法进行：大鼠在麻醉下切开颈部皮肤，气管内插管，管接人工呼吸机。分离左、右颈总动脉，左颈总动脉插入一含0.1％肝素生理盐水的PE管，另取一个充满0.1％肝素生理盐水的PE管经右颈总动脉插入左心室，根据显示器所示压力图形改变判断插管是否进入心室腔。两导管均连压力换能器分别将信号输入到生物信号采集处理系统，以监测大鼠血压和左心室血流动力学变化。将针式电极固定于大鼠四肢皮下以监测肢体II导联心电图变化。沿胸骨左缘剪开3、4、5肋骨，暴露心脏，剪开心包膜。以左冠状动脉为标志，用3/8圆3×10不锈钢圆针，在左冠状动脉下穿一4-0丝线。进针深度穿过心肌1mm左右，进出针间宽度在动脉周围1.5～2mm左右。稳定15分钟，待各指标稳定后记录药前心电图及血压等血流动力学各值。将一细小乳胶管垫于血管与结扎线之间，拉紧结扎线使细小乳胶管压迫左冠状动脉而致闭塞。以结扎后心脏局部发绀伴随T波高耸或ST段抬高，作为结扎成功的标准。结扎30min后，松开结扎线再灌注90min，以局部发绀逐渐变为红润、心电图ST段逐渐恢复为复灌成功的标志。在缺血期及复灌期每隔15分钟记录一次上述指标。

3、大鼠血清乳酸脱氢酶(KGDH)和肌酸激酶(CK)活性测定

最后一次血流动力学指标测定后即从颈总动脉取血约1mkg，2500转/分，离心15min，分离得到大鼠血清，用乳酸脱氢酶测试盒及肌酸激酶测试盒分别测定KGDH和CK活性。测定表如下：

KGDH测试：

 

	标准管	标准空白管	测定管	测定空白管
					2μmokg/mkg丙酮酸标准(mkg)	0.01
蒸馏水(mkg)	0.05	0.06		0.05
					样品(mkg)			0.01	0.01
基质缓冲液(mkg)	0.25	0.25	0.25	0.25
					辅酶I溶液(mkg)			0.05

混匀，37℃水浴15分钟

 

2，4-二硝基苯肼溶液(mkg)

0.25

0.25

0.25

0.25

混匀，37℃水浴15分钟

 

0.4mokg/KG氢氧化钠溶液(mkg)

2.5

2.5

2.5

2.5

混匀，室温放置3分钟，440nm，蒸馏水调零，1cm光径，测各管吸光度。

计算公式：KGDH活力(U/KG)＝(测定管OD值-测定空白管OD值)/(标准管OD值-标准空白管OD)×标准管浓度×1000mkg×测试前样品稀释倍数

CK测试：

 

	标准管	标准空白管	测定管	测定空白管
					4mg/mkgCK标准(μkg)	20
血清(μkg)			20
					试剂一(μkg)	80	80	80	80
试剂二(μkg)	20	20	20	20
					试剂三(μkg)	50	50	50	50
试剂四(μkg)	100	100	100	100
					试剂五(μkg)	50	50	50	50

混匀，37℃水浴20分钟

 

试剂六(μkg)	100	100	100	100
					4mg/mkgCK标准(μkg)		20
血清(μkg)				20

混匀，3500r/min×10min，取上清

 

上清(μkg)	300	300	300	300
					定磷剂(μkg)	2000	2000	2000	2000

混匀，45℃水浴15分钟，水调零，660nm处1cm光径比色测吸光度OD值。

计算方法：CK活力(U/mkg)＝(测定管OD值-测定空白管OD值)/(标准管OD值-标准空白管OD)×标准品活力(4×35U/mkg)

4、大鼠心肌光学和电镜组织学观察

缺血再灌结束后，伪手术组、缺血再灌对照组、冠心丹参分散片86.55mg·kg^-1组和173.1mg·kg^-1组各取2只大鼠心脏，用锐利刀片取左室结扎线下与心尖部中点左心室前壁小块心肌，体积为2×2×2mm³，用4％戊二醛处理，经脱水、包埋、超薄切片，染色后在透射电镜下观察。每组各取2鼠体积为4×4×4mm³的缺血区心肌组织用10％福尔马林固定，经脱水、石蜡包埋、制片(4μm)，HE染色后在光学显微镜下观察。根据病变轻重程度不同，依次标记为“-”、“+”、“++”、“+++”、“++++”，其中“-”为无明显改变，“++++”为严重的病理改变。

实验结果：

1、冠心丹参分散片对麻醉缺血再灌大鼠血流动力学影响：

大鼠心肌缺血期KGVEDP值高于伪手术组对应值，冠心丹参分散片和川芎嗪组给药组低于模型对照组。缺血再灌前给予冠心丹参分散片86.55-173.1mg·kg^-1(预处理)KGVDP’、±dp/dtmax等值均高于模型对照组各时间对应值，且有量效关系。除伪手术组外，在整个观察的130min内各组MBP、HR有下降趋势，但冠心丹参给药组与模型对照组间比较缺血末值低于对照组，而复灌末值高于对照组。缺血末左室收缩压(KGVSP)冠心丹参分散片组和川芎嗪组高于模型对照组。结果提示冠心丹参分散片86.5和173.1mg·kg^-1，ig有改善心肌缺血再灌注后大鼠心功能损伤作用和轻度降低血压作用，而对心率影响不明显。

2、大鼠冠心丹参分散片灌胃对复灌末血清乳酸脱氢酶(KGDH)和肌酸激酶(CK)的影响：

冠心丹参分散片86.5和173.1mg/kg组及川芎嗪组，再灌注末血清KGDH、CK活性低于模型对照组。

冠心丹参分散片对大鼠缺血再灌注后KGDH、CK活性的影响

3、大鼠心肌光学和电镜组织学观察：

(1)给药86.5mg/kg组：心肌细胞排列紧密，横纹清晰，核居中，间质未见血管扩张及炎细胞浸润，心外膜、心内膜无异常。

(2)给药173.1mg/kg组：心肌细胞排列紧密，横纹清晰，核居中，间质未见血管扩张及炎细胞浸润，心外膜、心内膜无异常。

(3)模型组：心肌细胞排列稀疏，横纹不清晰(++)，核居中，间质可见血管扩张(++)及炎细胞浸润(++)，心肌间质水肿(++)，可见灶性出血(+)，心外膜、心内膜无异常。

(4)川芎嗪组：心肌细胞排列紧密，横纹清晰，核居中，间质可见血管扩张，无炎细胞浸润，心外膜、心内膜无异常。

(5)伪手术组：心肌细胞排列紧密，横纹清晰，核居中，间质可见血管扩张，无炎细胞浸润，心外膜、心内膜无异常。

实验结论：

本实验采用现行经典的国际通用评价和筛选抗心肌缺血保护药的方法，证实：麻醉SD大鼠心肌缺血再灌注前灌胃给予冠心丹参分散片86.5mg·kg^-1、173.1mg·kg^-1预处理能有效地减轻缺血再灌注所导致的心脏功能、生化和形态损伤，且有一定量效关系。结论：大鼠冠心丹参分散片预处理有抗缺血再灌注引起的心肌损伤作用。

讨论：

(一)文献报道丹参的化学成分，分为脂溶性和水溶性两类。脂溶性成分有丹参酮I，丹参酮IIA，丹参酮IIB，隐丹参酮等。水溶性成分有原儿茶醛及酚类的丹参素。丹参主要药理作用如下：

1、对心血管系统的影响：(1)增加冠脉流量：丹参、丹参酮IIA磺酸钠及丹参素可增加冠脉血流量，促进侧枝循环，改善心肌微循环，而不增加心室作功及心肌耗氧量。(2)改善微循环：丹参素可显著增加毛细血管网数，加速血流，从而增加局部循环的血液灌流，并促进侧枝循环的建立，使微循环功能恢复。

2、对血液系统的作用：(1)丹参及其有效成分可影响多种凝血因子，改善血液流变性，对冠心病患者可降低血浆粘度、调节细胞电泳率及红细胞压积，改善微循环，对血瘀患者血液的“粘、聚、滞”倾向有较好的治疗作用。(2)抑制血小板的聚集：丹参及其成分丹参素和丹参酮IIA均能抑制由ADP诱导的血小板聚集。(3)抗血栓作用：丹参具有激活纤溶酶原的作用。(4)增加红细胞变形能力：丹参素等能明显提高红细胞变形能力。

3、保肝作用：丹参对急慢性肝损伤有明显防治作用，可抑制或减轻肝细胞变性坏死及炎症反应。

(二)三七的主要化学成分有皂甙、黄酮甙和氨基酸等。主要药理作用如下。

1、对心血管系统的作用：(1)抗冠心病作用：黄酮甙有扩张冠脉作用。而心肌耗氧量的降低，一般认为主要由于三七皂甙扩张外周血管，降低动脉血压，而使心脏负荷降低所致。(2)抗心律失常作用：三七中人参醇甙对乌头碱、Backg2和肾上腺素诱发的心律失常都有对抗作用。

2、对血小板聚集的影响：三七或其总皂甙能抑制血小板聚集，并使血液粘度降低。

(三)降香的主要药理作用如下

1、抗凝、抗血栓形成：降香制剂0.14g/mkg浓度，对大白鼠体外试验有抗血栓形成的作用，使血栓减轻。

2、其他作用：降香所含的黄酮有降胆固醇作用。酚性化合物具有强烈的肾上腺素合成酶的抑制作用。苯骈吡喃衍生物具有降血脂活性。

冠心丹参分散片的主要成分为丹参、三七干浸膏与降香油。本实验通过麻醉开胸冠脉结扎造成大鼠缺血复灌心肌损伤模型，评价大鼠冠心丹参分散片灌胃后对心肌的保护作用。本实验中大鼠冠心丹参片给药后血压和KGVEDP轻度降低可能与三七皂甙扩张外周血管，降低动脉血压，而使心脏负荷降低有关。本实验证实冠心丹参分散片大鼠灌胃预处理可减轻缺血复灌引起的心舒缩功能、生化和组织损伤与文献报道丹参和三七的抗缺血损伤结果一致。

Claims (3)

1、一种冠心丹参分散片的制备方法，其特征在于由以下步骤制备：

取丹参用乙醇加热回流两次，每次回流时间1～3小时，加热温度为80～100℃，过滤，得丹参回流液，其药渣加水煎煮两次，每次时间1～3小时，用乙醇冷藏处理两次，冷藏温度为-10～4℃，每次冷藏时间12～24小时，与丹参回流液合并，过滤，滤液浓缩干燥，得丹参提取物；取三七用乙醇加热回流两次，每次回流时间1～3小时，合并回流液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩干燥，得三七提取物；降香油用无水乙醇稀释，加β-环糊精水溶液，搅拌后静置冷藏，滤过，滤饼用少量石油醚洗涤，洗涤温度30～40℃，40～45℃干燥8～12小时，干燥后得降香包合物；加入辅料充分混匀，干法压制成片，包装即得冠心丹参分散片；其中丹参与乙醇重量配比为1∶8～12，乙醇的含醇量为70～95％；其中三七与乙醇重量配比为1：4～7，乙醇的含醇量为70～90％；

其中活性成分丹参提取物、三七提取物、降香包合物及其辅料的重量配比为：丹参提取物25～30、三七提取物29～33、降香包合物6～7、辅料30～700。

2、根据权利要求1所述的一种冠心丹参分散片的制备方法，其特征在于辅料包括崩解剂、填充剂、调味剂、润滑剂；崩解剂选用交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基淀粉钠、预凝胶淀粉、十二烷基硫酸钠中的一种或混合物；填充剂选用微晶纤维素、淀粉、乳糖、山梨醇中的一种或混合物；调味剂选用阿斯巴甜、糖精钠、甜菊甙、甘草酸、香兰素中的一种或混合物；润滑剂选用硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶中的一种或混合物。

3、根据权利要求1所述的一种冠心丹参分散片的制备方法，其特征在于冠心丹参分散片可包衣，包衣材料选用欧巴代。